EA021117B1

EA021117B1 - Способ получения водорастворимой фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов и фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, связанных с helicobacter pylori

Info

Publication number: EA021117B1
Application number: EA201001854A
Authority: EA
Inventors: Светлана Эммануиловна ГЕЛЬПЕРИНА; Ольга Олеговна МАКСИМЕНКО; Людмила Витальевна ВАНЧУГОВА; Елена Владимировна ШИПУЛО; Владимир Евстахиевич БАБИЙ; Алексей Владимирович ИГНАТЬЕВ
Original assignee: Ооо "Научно-Производственный Комплекс "Наносистема"
Priority date: 2010-12-27
Filing date: 2010-12-27
Publication date: 2015-04-30
Also published as: UA108527C2; ZA201305684B; EA201001854A1; WO2012089220A1; AP2013007013A0

Abstract

Изобретение относится к фармацевтике, точнее - к противотуберкулезным лекарственным средствам и способам их получения. В соответствии с настоящим изобретением предлагается способ получения водорастворимой фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов в виде порошка, включающий: а) растворение антибиотика из группы рифамицинов в органическом растворителе, выбранном из группы, состоящей из этанола, изопропанола и ацетона, б) добавление раствора, полученного на стадии а) по каплям к водному раствору альбумина, полученного растворением 1-10% м/о альбумина в стерилизованной деминерализованной воде, в) перемешивание полученной смеси, г) фильтрацию, д) добавление криопротектора, выбранного из группы, состоящей из маннита и трегалозы, е) замораживание, ж) высушивание (лиофильное или распылительное). Также предлагается фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента Helicobacter pylori, содержащая порошок антибиотика из группы рифамицинов, полученный способом по любому из пп.1, 2, образующий при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя пригодную для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивую суспензию, характеризующаяся тем, что указанный порошок и указанная суспензия, которая из него образуется при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя, характеризуются средним размером частиц от 100 до 800 нм, а при разбавлении в 100 раз - от 5 до 80 нм. Технический результат - устранение следовых количеств метиленхлорида, упрощение технологии получения лекарственной формы.

Description

Настоящее изобретение относится к области медицины, фармации, нанотехнологии и коллоидной химии, в частности, к способу получения водорастворимой лекарственной формы (фармацевтической композиции) антибиотика из группы рифамицинов, такого, как рифабутин, рифапентин, рифаксимин и их фармацевтически приемлемые производные, отличающемуся меньшей технологической сложностью, в сравнении с известными из уровня техники решениями, и не предполагающему использования высокотоксичных хлорорганических растворителей, а также к фармацевтической композиции, полученной указанным способом, и к способам лечения микобактериозов и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента ИеПсоЬасЮг ρνίοπ. включающим внутривенное введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по изобретению в виде суспензии в фармацевтически приемлемом разбавителе или носителе нуждающемуся в этом пациенту.

Уровень техники и задачи изобретения

В последние десятилетия проблема повышения эффективности лечения туберкулеза и других микобактериозов приобрела особую актуальность в связи с повышением уровня заболеваемости в России и во всем мире. В связи с распространением ВИЧ-инфекции выделилась группа больных с повышенным риском развития как туберкулеза, так и нетуберкулезных микобактериозов, характеризующихся тяжелым диссеминированным течением заболевания. Фатальный иммунодефицит у ВИЧ-инфицированных больных, а также вторичный иммунодефицит у больных туберкулезом на фоне полирезистентности возбудителя вызывают серьезные трудности в лечении туберкулеза.

Наиболее перспективным путем повышения эффективности лечения туберкулеза и других микобактериозов (например, проказы, которая также представляет собой очень актуальную проблему для развивающихся стран) оказалось создание принципиально новых противотуберкулезных препаратов путем скрининга новых природных молекул или химической модификации известных структур. Однако его действенность ограничена во времени вследствие непрерывности процесса возникновения и распространения резистентности к новым препаратам. Тем не менее, создание в конце 80-х гг. нового полусинтетического антибиотика широкого спектра действия из группы рифамицинов -рифабутина - стало важным достижением фармацевтической химии [1] (см. Ссылки в конце настоящего описания).

Рифамицины - группа полусинтетических антибиотиков, образуемых лучистыми грибками рода 81гер1отусе8, а также их полусинтетические производные. Один из первых антибиотиков данной группы, рифампицин (фиг. 1), представляющий собой полусинтетическое производное рифамицина 8У, обладает широким спектром антибактериального действия и хорошей всасываемостью; в отличие от других антибиотиков данной группы.

Рифампицин быстро всасывается при внутримышечном введении; максимум концентрации в плазме крови достигается через 30 мин, терапевтическая концентрация сохраняется в течение 6-8 ч. Поскольку рифампицин растворим в воде, известна его лекарственная форма в виде раствора для инъекций, получаемая путем растворения 0,15 г рифампицина в 2,5 мл стерильной воды для инъекций, энергичного встряхивания ампулы с порошком до полного растворения и разведения полученного раствора в 125 мл 5% раствора глюкозы; указанный раствор вводят пациенту внутривенно капельно, со скоростью 60-80 капель в минуту.

В то же время, при повторном применении данного антибиотика возможно очень быстрое развитие резистентности к нему микроорганизмов, в связи с чем были предложены новые антибиотики данной группы, в частности, рифабутин, по химической структуре представляющий собой 4-дезоксо-3,4-[2спиро [Ы-изобутил-4-пипераидил] 2,5-дигидро-1Н-имидазол] (фиг. 2). По спектру и механизму действия рифабутин схож с рифампицином (препарат подавляет синтез РНК путем образования комплекса с ДНКзависимой РНК-полимеразой), однако существенно превосходит его по фармакодинамическим и фармакокинетическим свойствам [1].

Лучшая, чем у рифампицина, растворимость рифабутина в липидах (включая липиды клеточных мембран) обусловливает лучшее его проникновение в ткани, больший объем распределения, меньшую разницу между максимальной (Стах) и минимальной (Стш) концентрациями в сыворотке крови, пролонгированное время полувыведения из организма [2].

В основе антибактериального действия рифабутина, как и других антибиотиков из группы рифамицинов, лежит подавление ДНК-зависимой РНК-полимеразы бактерий [1]; предполагается также, что препарат оказывает прямое ингибирующее действие на синтез ДНК бактериальной клетки, обусловливающее его активность в отношении резистентных к рифампицину микобактерий [2]. Рифабутин обладает широким спектром антибактериального действия, активен в отношении широкого круга грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Наиболее важным свойством рифабутина является его активность в отношении МусоЪас1егшт 1нЬегси1о818 и МусоЪас1егшт аушт-ш1гасе11и1аге сотр1ех. Значения минимальной подавляющей концентрации (МПК) рифабутина в отношении чувствительных к рифампицину штаммов МусоЪас1егшт ГиЪегси1о515 составляют 0,03-0,06 мкг/мл, то есть в пределах концентраций, которые поддерживаются в крови в течение 24 ч после однократного приема внутрь 300 мг препарата. Минимальная бактерицидная концентрация (МБК) в 2-4 раза превышает МПК для тех же штаммов микобактерий. Такой уровень концен- 1 021117 траций антибиотика в крови обнаруживается в течение 6-12 ч после приема вышеуказанной дозы [1], [3], [4].

Важным свойством рифабутина, определяющим возможность его применения при туберкулезе, обусловленном резистентными к рифампицину микобактериями, является отсутствие полной перекрестной устойчивости возбудителей к этим антибиотикам - более 35% штаммов микобактерий, резистентных к рифампицину, сохраняют чувствительность к рифабутину [5].

Рифабутин превышает по активности рифампицин в отношении клинических штаммов атипичных микобактерий (МусоЪайегшт аушт-ш1гасе11и1аге сотр1ех-МАС) [6]. Значения МПК₉₀ (минимальной концентрации, подавляющей рост 90% микобактерий) рифабутина для большинства штаммов этих видов колеблется в пределах 1,0-2,0 мкг/мл. Чувствительность к рифабутину атипичных микобактерий (МусоЬасЮгйип капяаяп, МусоЬасЮгшт ййийит, МусоЬасЮгшт догйопае, МусоЪайегшт йаеторййит) существенно ниже, чем у МАС (МПК₉₀ в зависимости от вида 2,5-8 мкг/мл).

МусоЪайегшт сйе1оиае и МусоЬасЮгшт яишае умеренно чувствительны или устойчивы [7].

Большинство штаммов МусоЪас1егшт 1ергае также проявляют высокую чувствительность к рифабутину. По степени активности ίη уйго и при экспериментальной лепре белых мышей рифабутин, как было установлено, существенно превосходит рифампицин. Установлено синергическое действие рифабутина в отношении МусоЪайегшт 1ергае при сочетанном его применении рифабутина с фторхинолонами (офлоксацин, ципрофлоксацин, левофлоксацин, моксифлоксацин и др.), причем это действие более выраженное, чем при сочетанном применении рифампицина с этой группой препаратов [8].

Одним из наиболее важных показаний к применению рифабутина на сегодняшний день является туберкулез у ВИЧ-инфицированных пациентов и у больных СПИДом (ВИЧ/СПИД-ассоциированный туберкулез) [9].

По действию на многие условно-патогенные виды грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов рифабутин аналогичен рифампицину. Рифабутин активен в отношении 81арйу1ососсия аигеия, коагулазонегативных 81арйу1ососсия ерШегтШ15, 81арйу1ососсия яаргорйуйсия, 81арйу1ососсия йаето1уБсия, 8йер1ососсия руодепея и 81герЮсоссия ушйапя (МПК < 0,005-0,01 мкг/мл) [10]. К рифабутину чувствительны 81гер1ососсия рпеитошае и анаэробные кокки; штаммы Ейегососсия ГаесаПя проявляют к рифабутину лишь умеренную чувствительность (МПК 25 мкг/мл) [11].

Рифабутин активен в отношении метициллинорезистентных штаммов золотистых (МК8А) и коагулазонегативных (МКСИ8) стафилококков; среди грамположительных бактерий к рифабутину высокочувствительны С’1оя1п4шт ярр., в том числе С1оя1п4шт ШГйсйе. Рифабутин проявляет высокую активность в отношении нейссерий (№1яяепа шешпдШФя, №1яяепа допоггйоеае), хотя клинические данные о возможности его применения при данных инфекциях практически отсутствуют [11].

Большой интерес представляют данные о высокой чувствительности к рифабутину НеПсоЬас1ег ру1оп [12], [13] - микроорганизма, играющего важную роль в этиопатогенезе язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки; значения МПК90 рифабутина для данного микроорганизма составляет 0,007 мкг/мл. По степени активности в отношении НеБсоЪайег ру1оп рифабутин существенно превосходит рифампицин. Такое свойство рифабутина, как стабильность в широком диапазоне значений рН, дает основание рассматривать его как активный компонент в составе комплексной терапии язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки.

В отношении штаммов НеПсоЬасЮг ру1оп. устойчивых к кларитромицину и тинидазолу, наиболее эффективной оказалась трехкомпонентная терапия, включающая прием ингибитора протонной помпы (пантопразола), амоксициллина и рифабутина [13].

Имеются данные о высокой активности рифабутина в отношении СЫашуШа ЧасПотаПя (МПК 0,008 мкг/мл). Для рифабутина характерно медленное формирование устойчивости хламидий, тогда как к рифампицину ίη уйго устойчивость формируется в присутствии субингибирующих концентраций в течение нескольких пассажей.

Показана высокая эффективность рифабутина в лечении токсокоплазмоза [14]; доза рифабутина 100-200 мг в течение 10 дней защищает 100% мышей при экспериментальном токсоплазмозе; указанная доза может быть снижена при использовании комбинации с сульфадиазином, пириметамином или клиндамицином [14]. Показано также, что рифабутин (в дозе 50 мг/кг) в комбинации с субтерапевтическими дозами пириметамина или клиндамицина предупреждал гибель 40 и 90% животных, соответственно [14].

Рифабутин активен и в отношении грамотрицательных бактерий, в частности, в отношении синегнойной палочки (Ряеийшопая аегидшояа), причем его активность в отношении данного возбудителя, как было показано, повышается при совместном применении с полимиксином В [15].

На микробную клетку рифабутин действует бактерицидно. Для МусоЬасЮгйип аущт и МусоЬасЮгшт 1п1гасе11и1аге, активно пролиферирующих внутри клетки, бактерицидный эффект препарата в большей степени коррелирует с клинической эффективностью, чем значения МПК. При изучении динамики гибели МусоЪайегшт аущт значения МБК (минимальной бактерицидной концентрации, вызывающей гибель > 99% бактериальных клеток) для рифабутина составляли 8 мкг/мл, тогда как МПК (минимальная подавляющая концентрация) составляла менее 0,03 мкг/мл [6]. В большей степени активность рифабути- 2 021117 на характеризует значение соотношения МБК/МПК, которое для МусоЬаОетшш аушш колеблется от 8 до 128. При определении МБК рифабутина ίη νίΐτο в динамической системе, моделирующей концентрации антибиотика в крови при приеме внутрь, путем подсчета числа КОЕ (колониеобразующих единиц) после экспозиции штамма МусоЬаОетшш ш1тасе11и1аге с 5 мкг/мл антибиотика показано снижение числа жизнеспособных особей, начиная с 6 дня контакта при полной гибели культуры к 8-му дню. Отношение МБК к МПК рифабутина в отношении референтного штамма МусоЬаОетшш СиЬегси1о818 составило 4, при значении МБК 0,125 мкг/мл [16].

Относительная активность ίη νίΟΌ рифабутина по сравнению с рифампицином колеблется в пределах от 2 до 20%. Уровни антибиотика в плазме для рифабутина, превосходящие МПК для чувствительных к рифампицину штаммов МусоЬаОетшш СиЬегси1о818, поддерживаются в течение 24 ч после приема внутрь 300 мг; концентрации, соответствующие МБК, обнаруживаются в течение 6-12 ч после однократного приема рифампицина в той же дозе [17].

Значения МБК и МПК рифабутина и, следовательно, отношения МБК/МПК для других видов бактерий (Ьедюпе11а 8рр., СЫапиДуа ЦасНошаШ. §СарЫ1ососси8 аитеик) отличались не более чем в 2 раза [1].

Рифабутин характеризуется продолжительным пост-антибиотическим эффектом, проявляющимся в подавлении микробного роста после короткого срока экспозиции культуры с антибиотиком и последующего его удаления из питательной среды, при этом продолжительность постантибиотического эффекта зависит от вида микроорганизма, концентрации препарата, продолжительности экспозиции и составляет от 21,5 до 47,5 ч [6].

Возможность усиления антимикробной активности рифабутина при его сочетании с другими антибактериальными препаратами наиболее детально изучена в отношении МусоЬаОетшш ауиппш1тасе11и1аге сошр1ех (МАС), что обусловлено трудностями лечения заболеваний, вызываемых этими возбудителями. Ιη νί\Ό рифабутин, применяемый в монотерапии при генерализованной МАС-инфекции, характеризовался умеренной активностью, проявляющейся лишь в снижении обсемененности легких и селезенки мышей, не защищая их от гибели. При профилактическом назначении эффективность рифабутина была сравнима с действием кларитромицина или азитромицина [1].

Рифабутин относится к числу немногих антибактериальных препаратов, высокоэффективных в лечении внутриклеточных инфекций, и в частности, микобактериозов. В основе такой высокой активности рифабутина лежит его быстрое проникновение в клетки, в частности, в макрофаги, происходящее без нарушения фагоцитарной функции [18].

В зависимости от используемых концентраций, рифабутин проявляет ингибирующую или бактерицидную активность против размножающихся в культуре мышиных макрофагов МусоЬасЮпиш ауиппш1тасе11и1аге сошр1ех и МусоЬаОетшш хепор1 [19],[20].

При экспозиции в течение 2-5 дней атипичных микобактерий, выделенных у больных СПИДом, с терапевтическими концентрациями рифабутина, достигаемыми в плазме крови после его приема в виде пероральной лекарственной формы, наблюдался бактериостатический эффект с выраженным снижением числа КОЕ (колониеобразующих единиц) [21].

При развившейся инфекции МусоЬаОетшш аушш-ш1тасе11и1аге сошр1ех у мышей действие рифабутина проявляется в выраженном снижении числа жизнеспособных микобактерий в легких и селезенке; по данному показателю действие рифабутина превосходит аналогичное действие рифампицина, рифапентина или азитромицина [1].

Несмотря на столь широкий спектр антибактериальной активности, клиническое применение рифабутина, как и других антибиотиков данной группы (за исключением рифампицина), ограничивается тем, что рифабутин, как это уже было отмечено выше, мало растворим в воде, из-за чего препаратов рифабутина, пригодных для парентерального (внутривенного и/или внутримышечного) введения нуждающемуся в этом пациенту, на сегодняшний день не существует.

В то же время, традиционно выпускаемые коммерчески доступные пероральные лекарственные формы рифабутина (как правило, на сегодняшний день рифабутин выпускается в форме желатиновых капсул), как и других антибиотиков данной группы (за исключением рифампицина), характеризуются низкой биодоступностью, в связи с чем эффективные терапевтические дозы антибиотика оказываются достаточно высокими, что обусловливает не только существенные побочные эффекты в отношении органов пищеварительной системы (диарея, изжога, несварение желудка, потеря аппетита и тошнота), но и такие побочные эффекты, как лихорадка, появление кожного зуда и кожных высыпаний, тромбоцитопения (по данным РИА); показано, что терапия с использованием традиционных пероральных форм рифабутина может также сопровождаться появлением гриппоподобных симптомов [22].

В связи с этим актуальной является задача разработки растворимой лекарственной формы рифабутина, пригодной для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту (при ее растворении в соответствующем фармацевтически приемлемом носителе), при этом малотоксичной и обладающей эффективностью, не меньшей, чем традиционные пероральные формы данного антибиотика.

Данная проблема актуальна и в отношении других полусинтетических антибиотиков данной группы - рифапентина (фиг. 3) [23] и рифаксимина (фиг. 4) [24], [25], что также связано с их низкой растворимостью в водной среде.

- 3 021117

В работе [26] описан способ получения пригодной для внутривенного введения экспериментальным животным лекарственной формы рифапентина, включающий в себя: растворение рифапентина в 0,1М ЫаНСОз, содержащей 10% Ν,Ν-диметилформамида и 0,001М аскорбиновой кислоты, с последующим доведением рН раствора до 8,5-8,6 путем добавления 1н. ΝαΟΗ; полученная таким образом лекарственная форма рифапентина была пригодна для внутривенного введения экспериментальным животным, в дозе 3 мг/кг массы тела и 10 мг/кг массы тела (см. [26], стр. 1067).

В то же время, существующие в литературе данные о возможной канцерогенности (способности вызывать развитие раковых новообразований) и тератогенности (способности вызывать развитие врожденных уродств плода) диметилформамида, используемого, в соответствии с работой [26], для растворения антибиотика, делают невозможным создание подобных растворимых форм антибиотиков рифамицинового ряда, пригодных для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту (человеку), с использованием указанной методики.

Патент США [27] описывает совместное введение двух наборов микросфер, включающее совместное введение терапевтически эффективного количества первого подходящего для лечения микобактериальной инфекции средства, содержащего антибиотик из группы рифамицинов, в т.ч., рифабутин или рифампицин, в первом наборе биосовместимых микросфер диаметром менее 10 мкм, и терапевтически эффективного количества второго подходящего для лечения микобактериальной инфекции средства, во втором наборе биосовместимых микросфер диаметром более 10 мкм, с целью обеспечить непрерывное системное выделение второго подходящего для лечения микобактериальной инфекции препарата, при этом введение первых микросфер осуществляется внутривенно, вторых микросфер - подкожно.

Поскольку диаметр микросфер, описанных в патенте [27], в отличие от наночастиц, сопоставим с диаметром мельчайших капилляров в организме человека (2-7 мкм), то при внутривенном введении нуждающемуся в этом пациенту таких систем доставки лекарств существует опасность эмболии мельчайших капилляров такими частицами.

Из патента [28], полученного ранее коллективом авторов ООО НПК Наносистема, известна фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных НсПсоЬасЮг рйогу, на основе полимерных частиц размером 100-800 нм (наночастиц), содержащих антибиотик рифабутин в терапевтически эффективном количестве и вспомогательные вещества, пригодная для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту, отличающаяся тем, что в качестве вспомогательных веществ содержит полимер/полимеры молочной кислоты (РЬА) и/или сополимер/сополимеры молочной и гликолевой кислот (РЬОА), при содержании гликолевой кислоты в сополимерах до 50 мол.% с дополнительной карбоксильной группой или без дополнительной карбоксильной группы на конце молекулы или сополимеры полимеров молочной кислоты или сополимеров молочной или гликолевой кислоты с полиэтиленгликолем; при этом молекулярная масса полимеров и сополимеров составляет от 2 до 200 кДа, причем композиция представляет собой лиофилизат, который при добавлении воды или физиологического раствора образует устойчивую суспензию с размером частиц 0,1-0,8 мкм.

Указанная композиция дополнительно содержит водорастворимый природный или синтетический полимерный стабилизатор с молекулярной массой не более 70 кДа и, в случае необходимости, пластификатор липидной природы и наполнители при определенном количественном соотношении компонентов.

Однако дальнейшие исследования наносомальной лекарственной формы рифабутина на основе полилактидов показали, что указанная данная лекарственная форма обладает высокой степенью токсичности, причем данная токсичность обусловлена не самим рифабутином, а именно высокой концентрацией биодеградируемого полимера (РЬОА или РЬА), содержащегося в наночастицах, полученных согласно [28], что ограничивает возможность дальнейшей разработки и клинического применения таких наночастиц.

Из уровня техники известен предлагаемый в качестве прототипа настоящего изобретения способ получения порошка (лиофилизата) наносомального рифабутина, солюбилизированного альбумином плазмы крови человека, раскрытый в также принадлежащем ООО НПК Наносистема патенте [29], отличающийся тем, что водную смесь рифабутина, альбумина и органического растворителя (предпочтительно, хлористого метилена) при температуре от 0 до +40°С диспергируют, подвергают гомогенизации высоким давлением с получением наноэмульсии, удаляют из полученной наноэмульсии органический растворитель, фильтруют, добавляют криопротектор, замораживают и лиофилизируют, причем указанную водную смесь рифабутина и альбумина получают путем растворения 2-5% (м/о) альбумина в деминерализованной воде, последующего добавления к указанному раствору альбумина 2-5% (о/о) органического растворителя и рифабутина в количестве от 0,2 до 20,0 мас.%.

В указанном прототипе раскрыта также фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных НсПсоЬас1сг ру1оп. представляющая собой порошок (лиофилизат) рифабутина, солюбилизированного альбумином, полученный указанным способом и характеризующийся средним размером частиц от 4 до 10 нм, а при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя или носителя - пригодный для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивый раствор, характеризующийся средним размером частиц от 4 до 10 нм; также в указанном прототипе раскрыт способ лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных НсПсоЬас1сг ру1оп, включающий внутривенное

- 4 021117 введение терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по указанному изобретению нуждающемуся в этом пациенту.

Несмотря на присущие данной растворимой (внутривенной) форме рифабутина достоинства (сравнительная простота получения данной формы и высокая эффективность в лечении острой микобактериальной инфекции), в синтезе данной лекарственной формы используются высокотоксичные хлорорганические растворители, такие как хлористый метилен (см. [29], пункты 2, 3, 6 формулы и примеры 1-2).

Кроме того, получение указанной растворимой формы согласно [29] сопряжено с необходимостью включения в технологический процесс этапа гомогенизации, что также усложняет технологию синтеза данной растворимой лекарственной формы и увеличивает её себестоимость.

Сущность изобретения

В связи с указанными выше недостатками известных форм рифамицинов, пригодных для парентерального (внутривенного) введения нуждающемуся в этом пациенту, в рамках настоящего изобретения предлагается новый, более простой способ получения водорастворимой лекарственной формы (фармацевтической композиции) антибиотика из группы рифамицинов (включая рифабутин, рифапентин и рифаксимин, а также их фармацевтически приемлемые производные), солюбилизированного альбумином, в виде порошка-лиофилизата.

Таким образом, предлагается способ получения водорастворимой фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов в виде порошка, включающий:

а) растворение антибиотика из группы рифамицинов в органическом растворителе, выбранном из группы, состоящей из этанола, изопропанола и ацетона,

б) добавление раствора, полученного на стадии а) по каплям к водному раствору альбумина, полученного растворением 1-10% м/о альбумина в стерилизованной деминерализованной воде,

в) перемешивание полученной смеси,

г) фильтрацию,

д) добавление криопротектора, выбранного из группы, состоящей из маннита и трегалозы,

е) замораживание,

ж) высушивание (лиофильное или распылительное).

Антибиотик из группы рифамицинов может быть выбран из группы, включающей рифабутин, рифапентин и рифаксимин.

В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предлагается фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента НеПсоЬас1ег ρνίοπ. содержащая порошок антибиотика из группы рифамицинов, полученный способом по любому из пп.1-2, образующий при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя пригодную для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивую суспензию, характеризующаяся тем, что указанный порошок и указанная суспензия, которая из него образуется при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя, характеризуются средним размером частиц от 100 до 800 нм, а при разбавлении в 100 раз - от 5 до 80 нм.

В соответствии с одним из предпочтительных вариантов воплощения композиции антибиотик выбран из группы рифамицинов, включающей рифабутин, рифапентин и рифаксимин.

В соответствии с еще одним предпочтительным вариантом воплощения композиции фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель представляет собой 0,9% раствор ЫаС1.

В соответствии с другим предпочтительным вариантом воплощения композиции указанный фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель дополнительно содержит аскорбиновую кислоту.

Применение способа по изобретению для получения растворимых форм антибиотиков из группы рифамицинов (большинство из которых, как указывалось выше, практически нерастворимы в воде и, следовательно, не могут быть непосредственно растворены в водосодержащем фармацевтически приемлемом разбавителе или носителе), в сравнении с прототипом [29], обеспечивает упрощение и удешевление технологии получения лекарственной формы (за счет отказа обязательной, согласно прототипу, стадии гомогенизации), а также отсутствие в готовой лекарственной форме остаточных количеств высокотоксичного хлористого метилена (указанные остаточные количества могут содержаться в лекарственной форме рифабутина, полученной согласно [29]), а в сравнении с традиционными (пероральными) лекарственными формами рифабутина и других антибиотиков группы рифамицинов - обеспечивает более высокую эффективность лечения микобактериозов и заболеваний, обусловленных персистированием в организме НеПсоЬас1ег ру1отк

Представленные ниже примеры предназначены для иллюстрации заявляемого изобретения, а не для ограничения объема притязаний.

Пример 1.

136 мг рифабутина (КЬ) растворяют в 1,7 мл этанола и добавляют к 100 мл 3% водного раствора человеческого сывороточного альбумина (Н8А), приготовленного из сухого лиофилизованного препарата человеческого сывороточного альбумина (производства 8ега Саге ЫГс 8с1спес5) или из 20%-ного раствора человеческого альбумина для внутривенных инфузий (производства Вах1ет), затем перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300- 5 021117

500 об/мин; фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (трегалоза, 1 мас.% в расчете на объем фильтрата), замораживают (при температуре -60-70°С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат характеризуется средним размером 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Макет ΖοΙΜ/ογ Ναηο Ζδ). Характеристики полученной в соответствии с примером 1 водорастворимой лекарственной формы рифабутина представлены в табл. 1.

Пример 2.

мг рифабутина (ЕЬ) растворяют в 1,7 мл этанола и добавляют к 200 мл 3% водного раствора человеческого сывороточного альбумина (ΗδΑ), приготовленного из сухого лиофилизованного препарата человеческого сывороточного альбумина (производства δе^а Саге Ы1е δс^еηсе8) или из 20%-ного раствора человеческого альбумина для внутривенных инфузий (производства Ва.\1ег). затем перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300500 об/мин.; фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (трегалоза, 5 мас.% в расчете на объем фильтрата), замораживают (при температуре -60-70°С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат характеризуется средним размером 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Макет Ζеίа8^ζе^ Ναηο Ζδ). Характеристики полученной в соответствии с примером 2 водорастворимой лекарственной формы рифабутина представлены в табл. 1.

Пример 3.

100 мг рифапентина (Ер) растворяют в 2,5 мл изопропанола и добавляют к 100 мл 5% водного раствора человеческого сывороточного альбумина (ΗδΑ), приготовленного из сухого лиофилизованного препарата человеческого сывороточного альбумина (производства δе^а Саге Ы1е δс^еηсе8) или из 20%ного раствора человеческого альбумина для внутривенных инфузий (производства ВаХег), затем перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-500 об./мин; фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (маннит, 3 мас.% в расчете на объем фильтрата), замораживают (при температуре -60-70°С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат характеризуется средним размером 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Макет Ζеΐа8^ζе^ Ν;·ιηο Ζδ). Характеристики полученной в соответствии с примером 3 водорастворимой лекарственной формы рифапентина представлены в табл. 1.

Пример 4.

130 мг рифаксимина (Е\) растворяют в 2,0 мл ацетона и добавляют к 100 мл 4% водного раствора человеческого сывороточного альбумина (ΗδΑ), приготовленного из сухого лиофилизованного препарата человеческого сывороточного альбумина (производства δе^а Саге ЬИе δс^еηсе5) или из 20%-ного раствора человеческого альбумина для внутривенных инфузий (производства Вайет), затем перемешивают на магнитной мешалке до полного удаления органического растворителя, при скорости перемешивания 300-400 об/мин; фильтруют через стеклянный фильтр (пор 1), добавляют криопротектор (маннит, 5 мас.% в расчете на объем фильтрата), замораживают (при температуре -60-70°С) и лиофилизуют (или высушивают при помощи распылительной сушки). Полученный порошок-лиофилизат характеризуется средним размером 100-800 нм, а при разбавлении в 100 раз - 5-80 нм (определено методом динамического светорассеяния, с помощью анализатора Макет Ζеίа8^ζе^ Nаηο Ζδ). Характеристики полученной в соответствии с примером 4 водорастворимой лекарственной формы рифаксимина представлены в табл. 1.

- 6 021117

Таблица 1. Характеристики композиций (наночастиц) рифабутина, рифапентина и рифаксимина, полученных в соответствии с Примерами 1-4.

Ν/ N	ЛВ¹	Растворитель	Криопротектор	Средний диаметр наночастиц (Ζ-Ανβ О), нм	Индекс п оли ди сперсности (РО1>	Содержание ЛВ¹ в образце ι
мг/флакон	Выход, %
1	кь²	Этанол	Трегалоза, 1 мас.% в расчете на объем фильтрата	358,614,676 нм Разбавление в 100 раз: 17.20Ю.729 нм	0.204+0.028 Разбавление в 100 раз: 0.66410.028	13,1	80,3
2	кь²	Этанол	Трегалоза, 5 мас.% в расчете на объем	395,814,981 нм Разбавление в 100 раз: 34.28+17.76 нм	0.216Ю.007 Разбавление в 100 раз: 0.415+0.123	15,3	97,4
			фильтрата
3	Кр³	Изопроланол	Маннит, 3 мас.% в расчете на объем фильтрата	748.8129,81 нм Разбавление в 100 раз: •22.7214.770 нм	0.50010.076 Разбавление в 100 раз: ! 0-56710.131	13,0	77,8
4	Кх⁴	Ацетон	Маннит, 5 мас.% ι в расчете на объем фильтрата	601,4+43,92 нм Разбавление в 100 раз: 23.02+6.016 нм	0.45110.039 Разбавление в 100 раз: 0.576+0.077	14,2	87,0

^Лекарственное вещество ²Рифабутин ³Рифапентин ⁴Рифаксимин

Ссылки

1. Цыбанев А.А., Соколова Г.Б. Противотуберкулезный антибиотик пролонгированного действия рифабутин. Антимикробный спектр, особенности фармакодинамики и фармакокинетики. - Антибиотики и химиотерапия, 1999; 44(8), стр. 30-36. Доступно в сети Интернет (на

29.09.2010):ЬйП://па1иге.'№еЪ.ги/йЪ/т8д.Ь1т1?т1Й=1180884&шт=тйех.Ь1т1;

1Шр://па1иге.\уеЬ.ги/йЬ/ткд.1ит1?т1й=1180884&ип=п1йе\2.1ит1; 1Шр://па1иге.\уеЪ.ги/йЪ/т5д.1ит1?11ий=1

180884&шт=шйех3.Ыт1.

2. ипдНеп Ό., Ие11а Вгиппа С., δαηΠΙίρρο А. §1ий1е8 оп Не теейашкт οί асйоп οί кр1гор1рег1йу1йГатусш оп БМ427 гйатркт-гекйПп! М.!иЪегси1ок1к. - Игидк ипйег Ехрейтеп!а1 апй СИтса1 Кекеагсй 1984; 10: 681-689:37: 7685-7694.

3. Сгокке! кН. №\у арргоасЕек ш апйтусоЪас!ейа1 сБетоИегару. - Игидк Тойау 1988; 24:291-301;

4. Нейе1к Ь.В., Етй1ю1т-Ееу1 РД., 1кетап М. КйаЪийп: т1шта1 1пЫЪйогу сопсеп!гайоп Гог МусоЪас(егшт 1иЪегси1ок1К. - Т1е Атепсап Кеу1еу оГ Кекрйа!огу Ийеакек 1988; 137: 719-721.

5. Агте Υ.Α. АпйтусоЬас1епа1 асйуйу ш У1уо оГ ЬМ 427 (КйаЪийп). - Т1е Атепсап Кеу1еу оГ Кекрй га!огу Ийеакек 1988; 138:1254-1267.

6. Вгодйеп ΚΝ., Ри!!оп А. КгГаЪийп. А геу1еу оГ йк апйписгоЫа1 асйуйу, рИагтасоктейс ргорегйек апй Иегареийс еГйсасу. - Игидк 1994; 47: 6: 983-1009.

7. Υа^кο И.М., №-жкок Р.8., Най1еу ν.Κ. ТРегареийс ипрПсайопк оГ иййЫйоп уегкик кййпд оГ МусоЪас!егшт аущт сотр1ех Ъу апйписгоЫа1 адеп!к. -АпйпнсгоЫа1 Адеп!к апй СкетоИегару 1987; 31:117-120.

8. О1юр1е А.М., 1Ъапек М.А. 1п уйго асйуйу оГ (Игее пеу Пиогоди1по1опек апй купегду уйЬ апкатусшк адатк! МусоЪас!егшт 1ергае. - Т1е 1оигпа1 оГ Ап0пнсгоЫа1 СЬетоИегару 1993; 32:445-449.

9. Сеп!егк Гог Ийеаке Соп1го1 апй Ргеуепйоп (2000) ирйа!ей дшйейпек Гог Не ике оГ пГаЪийп ог пГатрш Гог Не 1геа1теп( апй ргеуепйоп оГ !иЪегси1ок1к атопд Н1У-ийес1ей райеп!к (актд рго!еаке шЫЪйогк ог поппис1еок1йе геуегке 1гапкспр1аке иййЬйогк. - ММVК МогЪ Мойа1 Vк1у Кер 49(9), 1859. АуайаЪ1е опйпе: \у\у\у.сйс.доу/псНк1р/1Ь/ (а! 29.09.2010).

10. Кипт С.М. АпПпнсгоЫа1 асйуйу оГ гйаЪийп. - СИтса1 шГесйоик ййеакек : ап оГПс1а1 риЪйсайоп оГ Не ййесйонк Ийеакек 8оае1у оГ Атепса 1996; 22: §ирр1 1:3-14.

11. Кап Ν., Ва1йуш 1., Рппсе Η.Ν. е! а1. А сотрагайуе к!ийу оГ ггГаЪийп апй оНег апйЫойск адатк! а кресйит оГ поптусоЪас!епа1 пйсгоогдашкт. - 9!1 Меейпд оГ !1е Атепсап 8ос1е1у оГ МтгоЪюНду 1994; АЪк!г А-37, υδΆ.

12. Кокк1 К., 1аЪек И., Эе11а Вгипа С. 1п уйго асйуйу ш гйаЪийп, ро!епйа1 апйЫойс ш Не Легару оГ НейсоЪас!ег ру1оп. - 6!1 ййегпайопй Сопдгекк оГ 1пГесйоик Ийеакек. Ргадие 1994; АЪк!г 48.

13. Сапйиса Р., О)е!й V., Ро1а Р., СакЪатт С., СакЪатт А. КйаЪийп-Ъакей НейсоЪас!ег ру1оп егаНсайоп 'гекдие (Негару¹. - АйтеШагу РНагтасо1оду & ТНегареийск 2000; 14:311-316.

14. Агап)о Р.С., δ1ίΗΓ Т., КетНдНп Ρδ. КйаЪийп й асйуе т тигте тойе1 !охор1актокй. - АпйпйсгоЪ1а1 Адеп!к апй СйетοΗе^аρу, 1994; 38: 570-575.

15. Vаа^а М. Сотрагайуе асйуйу оГ г1ГаЪийп апй йГатркш адатк! дгатпедайуе Ъас!епа На! Иауе йатадей ог йеГес!ей ои!ег тетЪгапек. - Т1е 1оигпа1 оГ АпйткгоЫа1 Сйетο!йе^аρу, 1993; 31: 799-801.

- 7 021117

16. Небе!з Ь.В., ЬтйНо1т-Ьеуу Р.Т. Йогу М.А. Вас!епаба1 αοίίνίΐν ίη νίίΓο оГ гЪаЬийп адатз! М.аушт апб М.1иЬегси1оз1з. - Тке Атепсап Ре\ае\у оГ ВезрбаЮгу Э|зеазез 1990; 141: 626-630.

17. ТгиПо1-Регио1 С., ΟίΐΌίΓ А.М., Маюкик Ь., Огоззе!к А з!ибу оГ !ке ппптиб тЫЬкогу сопсейгабоп оГ г1ГаЬи11 η (апзатусш ЬМ 427) Гог МусоЬас!епит 1иЬегси1оз1з, МусоЬас!епит хепор1 апб МусоЬас!епит а\аит-т1гасе11и1аге. - Ре\'ие без Ма1аб1ез ВезркаЮпез 1988; 5:401-406.

18. Уап Иег А\уега Т., Ма!зито!о Т., Низзоп М. кигаркадосуОс репебабоп оГ апбЬюбсз. - 1оита1 оГ Апбт1сгоЫа1 СНетоШегару, 1988, 22:185-192.

19. РазЮщ Ν., Ро!аг М.С., Эа\аб Н.Ь. АсОоп оГ апб1иЬегси1оз1з апб (А1ас1ат бгидз адатз! ех!га- апб шбасе11и1аг1у дго\утд МусоЬас!епит аν^ит-^ηΐ^асе11и1а^е. - Апп 1пз! Раз!еиг (МюгоЬю1од1е), 1988; 139:225232.

20. Раз!од| Ν., В1от-Ро1аг М.С., Эа\аб Н.Ь. Эгид асбоп адатз! шбасе11и1аг дго\\1к оГ МусоЬас!епит хепорк - Сигг М1сгоЬю1, 1989,19: 83-89.

21. Рап!опш Ь., Ни С.Ц., кп 8.Н. е! а1. Асι^ν^ιу оГ ап!тисгоЫа1 адеп!з адатз! МусоЬас!епит а\аит ш1гасе11и1аге сотр1ех (УРС) збатз 1зо1а!еб т 1!а1у Ггош АЮ8 рабейз. - 2епба1Ь1ай Вас!епок 1992; 276:512520.

22. Ма!!ееШ А. е! а1. (2005) То1егаЬШ!у оГ !\У1се-\уеек1у гбаЬйт-1зо1па/1б сотЬтаОопз \'егзиз бабу 1зота/1б Гог 1а!еп! !иЬегси1оз1з ш НГУбйейеб зик)ес!з: а рПо! з!ибу. - 1п! ί ТиЬегс Ьипд Э1з 3, 1043-1046.

23. И8 4002752 А Р1рега/ту1шнпо гхГатусхпз, патентообладатель - ОРИРРО ЬЕРЕТГГ 8РА [ГТ], авторы изобретения - СРГССНГО РЕNАТО [ГТ], АРГОЬГ УГТТОРГО [ГТ], опубл. 11.01.1977.

24. ГТ 1154655 В '^ОИУЕАиХ ЭЕН1УЕ8 ИЕ ЬТМГВАгО-РГРАМУСГЖ, ЬЕИР РРОСЕЭЕ ИЕ РРΕРАРΛТГОN ЕТ ЬЕИР АРРЕ1САТЮ\' ΕΝ ТНЕРАРЕИТГОИЕ, патентообладатель - АЬРА РАРМАСЕИТГСГ 8РА [ГТ], авторы изобретения -МАРСНГ ЕО1Э1О [ГТ], МОЭТЕССНГ ЬЛиРЕТТА [ГТ], опубл. 21.01.1987.

25. ЕР 0161534 А2 №\у ргосезз Гог !ке зуп!кез1з оГ ру^^бο-^ш^баζο-^^Гашус^ηз, патентообладатель АЬРА РАРМАСЕИТГСГ 8.Р.А. [ГТ], авторы изобретения -САКАТА УШСЕЖО [ГТ]; ТАМАО^Ж ΟΜΝРР.АХСС) [ГТ]; РЕАМ 81РУАХО [ГТ], опубл. 21.11.1985.

26. Аззапбп А., Рай1 В., Сбзйпа Т. РкагтасоктеОсз оГ ^^Пареη!^ηе. а пе\у 1опд 1азбпд гРатуст, ш !ке га!, !ке тоизе апб !ке гаЬЬб. - Тке 1оита1 оГ Лη!^Ь^ο!^сз. 8ер!.1984, рр.1066-1075.

27. И8 6264991 В1 Сотрозкюпз апб те!кобз Гог йеаОпд тбасе11и1аг тРсбого, патентообладатель 8ОИТНЕРИ РЕ8ЕАРСН Ш8ТГТИТЕ [И8], авторы изобретения - ВАРРОА А1РРГАМ1 А [И8]; ВАРРОА Е8ТНЕР Ь [И8]; ΟΕΡΝΡΡΡΡ ИЕВРА С [И8]; АШСНЕ8ТЕР ОАРУ А [И8]; 8ТАА8 1АУ К [И8], опубликован 24.07.2001.

28. ЕА 012121 В1 Фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных НексоЬайег ру1ог1, на основе полимерных наночастиц, способ ее получения и способы лечения, патентообладатель ООО НПК Наносистема [РИ], авторы изобретения Гельперина Светлана Эммануиловна [РИ], Максименко Ольга Олеговна [РИ], Шипуло Елена Владимировна [РИ], Ванчугова Людмила Витальевна [РИ], опубликовано 28.08.2009 (бюллетень ЕАПВ 4'2009).

29. ЕА 013569 В1 Фармацевтическая композиция рифабутина для лечения туберкулеза и заболеваний, опосредованных кексоЬайег ру1огк способ ее получения и способ лечения, патентообладатель ООО НПК Наносистема [РИ], авторы изобретения Гельперина Светлана Эммануиловна [РИ], Максименко Ольга Олеговна [РИ], Шипуло Елена Владимировна [РИ], Ванчугова Людмила Витальевна [РИ], Бабий Владимир Евстахиевич [РИ], Игнатьев Алексей Владимирович [РИ], опубликовано 30.06.2010 (бюллетень ЕАПВ 3'2010).

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ получения водорастворимой фармацевтической композиции антибиотика из группы рифамицинов в виде порошка, включающий:

а) растворение антибиотика из группы рифамицинов в органическом растворителе, выбранном из группы, состоящей из этанола, изопропанола и ацетона,

б) добавление раствора, полученного на стадии а), по каплям к водному раствору альбумина, полученного растворением 1-10% м/о альбумина в стерилизованной деминерализованной воде,

в) перемешивание полученной смеси,

г) фильтрацию,

д) добавление криопротектора, выбранного из группы, состоящей из маннита и трегалозы,

е) замораживание,

ж) высушивание (лиофильное или распылительное).
2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что антибиотик из группы рифамицинов выбран из группы, включающей рифабутин, рифапентин и рифаксимин.
3. Фармацевтическая композиция для лечения туберкулеза и заболеваний, обусловленных персистированием в организме пациента НеПсоЬас!ег ру1оп, содержащая порошок антибиотика из группы рифамицинов, полученный способом по любому из пп.1-2, образующий при добавлении фармацевтически

- 8 021117 приемлемого разбавителя и/или носителя пригодную для внутривенного введения нуждающемуся в этом пациенту устойчивую суспензию, характеризующаяся тем, что указанный порошок и указанная суспензия, которая из него образуется при добавлении фармацевтически приемлемого разбавителя и/или носителя, характеризуются средним размером частиц от 100 до 800 нм, а при разбавлении в 100 раз - от 5 до 80 нм.
4. Фармацевтическая композиция по п.3, характеризующаяся тем, что антибиотик из группы рифамицинов выбран из группы, включающей рифабутин, рифапентин и рифаксимин.
5. Фармацевтическая композиция по п.3, характеризующаяся тем, что фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель представляет собой 0,9% раствор ЫаС1.
6. Фармацевтическая композиция по п.3, характеризующаяся тем, что указанный фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель дополнительно содержит аскорбиновую кислоту.