EA020485B1 - N-ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии - Google Patents

N-ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии Download PDF

Info

Publication number
EA020485B1
EA020485B1 EA201270277A EA201270277A EA020485B1 EA 020485 B1 EA020485 B1 EA 020485B1 EA 201270277 A EA201270277 A EA 201270277A EA 201270277 A EA201270277 A EA 201270277A EA 020485 B1 EA020485 B1 EA 020485B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
sodium
deoxy
sulfonato
idopyranosyluronate
glucopyranosyl
Prior art date
Application number
EA201270277A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201270277A1 (ru
Inventor
Пьер Александр Дриге
Филипп Дюшоссуа
Пьер Фон
Корантен Эрбер
Жильбер Лассалль
Original Assignee
Санофи
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=42035764&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA020485(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Санофи filed Critical Санофи
Publication of EA201270277A1 publication Critical patent/EA201270277A1/ru
Publication of EA020485B1 publication Critical patent/EA020485B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/737—Sulfated polysaccharides, e.g. chondroitin sulfate, dermatan sulfate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/14—Vasoprotectives; Antihaemorrhoidals; Drugs for varicose therapy; Capillary stabilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H11/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by inorganic acids; Metal salts thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/02—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures
    • C07H15/04—Acyclic radicals, not substituted by cyclic structures attached to an oxygen atom of the saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/20—Carbocyclic rings
    • C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)

Abstract

N-Ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы FGF и соответствующие формуле (I), в которой Rпредставляет собой О-алкил, имеющий при необходимости в качестве заместителей один или несколько арилов или циклоалкилов; Rпредставляет собой OSOили гидроксигруппу; Rпредставляет собой алкил, циклоалкил или алкилциклоалкил; Rпредставляет собой дисахарид формулы (II); Rпредставляет собой дисахарид формулы (III); Rпредставляет собой дисахарид формулы (IV), в которой R, Rи Rпредставляют собой группы OSOили гидроксигруппы. Их получение и применение в терапии.

Description

Изобретение относится к Ν-ацилированным октасахаридам-агонистам системы ΡΟΡ/ΡΟΡΚ, к их получению и применению в терапии.
Ангиогенез представляет собой процесс образования новых капиллярных сосудов. При закупорке кровеносного сосуда ангиогенез, сочетающийся с артериогенезом (укрупнением капилляров), улучшает реваскуляризацию зоны закупорки. Ιη νίίτο и ίη νίνο показано, что многие факторы роста, такие как ΡίЬгоЫаЧ Ого\\!Ь РасЮг5 (ΡΟΡ, факторы роста фибробластов), стимулируют процесс неоваскуляризации.
ΡΟΡ представляют собой группу из 23 белков. ΡΟΡ2 (или базовый ΡΟΡ) представляет собой белок массой 18 кДа. ΡΟΡ2 на уровне эндотелиальных клеток индуцирует в культуре их пролиферацию, миграцию и продуцирование протеаз. Ιη νίνο ΡΟΡ2 благоприятствует явлениям неоваскуляризации. ΡΟΡ2 взаимодействует с эндотелиальными клетками посредством двух классов рецепторов: рецепторов с высоким сродством к активности тирозинкиназы (ΡΟΡΚ) и рецепторов с низким сродством типа гепарансульфатпротеогликана (И8РО).
Известно, что рецепторы, отвечающие за активность тирозинкиназы, находящиеся на поверхности клеток, ассоциируются в виде димера с комплексом, образованным двумя молекулами лиганда, и с молекулой гепарансульфата. Образование данного комплекса позволяет запустить каскад внутриклеточных сигналов, ведущих к активации пролиферации и клеточной миграции, представляющих собой два ключевых процесса, вовлеченных в ангиогенез.
Таким образом, ΡΟΡ2 и его рецепторы представляют собой очень подходящие мишени для терапии, направленной на активацию или ингибирование процессов ангиогенеза.
Синтетические олигосахариды также были объектом исследований взаимодействий с рецепторами ΡΟΡ (С. ТаЬеиг е! а1., Вюогд. & Меб. СЬет. , 1999, 7, 2003-2012; С. Νοΐί е! а1., СЬет. Еиг. I., 2006, 12, 8664-8686).
В настоящее время заявителями найдены новые синтетические олигосахаридные соединения, способные облегчать образование комплекса ΡΟΡ/ΡΟΡΚ, благоприятствовать, таким образом, выживанию эндотелиальных клеток ίη νίΐΓΟ и способствовать образованию новых сосудов ίη νίίτο и ίη νίνο.
Настоящее изобретение относится к новым октасахаридным соединениям, соответствующим формуле (I)
где зигзагообразная линия обозначает связь, расположенную под плоскостью или над плоскостью пиранозного цикла глюкозаминового звена;
Κι представляет собой О-алкил, в котором алкил содержит от 1 до 16 атомов углерода и при необходимости имеет один или несколько заместителей (например, 1 или 2), которые являются одинаковыми или различными и выбраны из арилов и циклоалкилов;
К2 представляет собой О8О3 - или гидроксигруппу,К3 представляет собой алкил, циклоалкил или алкилциклоалкил;
К4 представляет собой дисахарид формулы (II)
где К3 имеет значения, К5 представляет собой Кб представляет собой где К3 имеет значения, К7 представляет собой К8 представляет собой определенные ранее;
О8О3 - или гидроксигруппу; дисахарид формулы (III)
определенные ранее;
О8О3 - или гидроксигруппу; дисахарид формулы (IV):
- 1 020485 где К3 имеет значения, определенные ранее;
К9 представляет собой 0803 - или гидроксигруппу.
В рамках настоящего изобретения, если в тексте не упомянуто иное, принято, что алкил обозначает линейную или разветвленную алифатическую насыщенную группу. Если в тексте не указано иное, такой алкил содержит преимущественно от 1 до 6 атомов углерода. В качестве примеров можно упомянуть метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил и т.д.;
циклоалкил обозначает циклический алкильный радикал, содержащий от 3 до 6 атомов углерода, например, циклопентил или циклогексил;
алкилциклоалкил обозначает алкил, имеющий в качестве заместителя циклоалкил, причем упомянутые алкил и циклоалкил имеют значения, определенные ранее;
арил обозначает ароматический цикл, содержащий от 5 до 10 атомов углерода, например фенил. Такой арил при необходимости имеет один или несколько заместителей, таких как атомы галогенов, алкилы, алкоксигруппы, тиоалкилы, трифторметил и фенил.
Октасахариды по настоящему изобретению представляют собой синтетические олигосахариды, то есть соединения, полученные исключительно путем синтеза из промежуточных синтонов соответственно приведенному далее подробному описанию. В этом качестве они отличаются от олигосахаридов, полученных деполимеризацией или выделением из сложных смесей полисахаридов типа гепаринов или гепаринов с низкой молекулярной массой. В частности, соединения по настоящему изобретению обладают четко определенной структурой, образующейся при их химическом синтезе, и представляют собой чистые октасахариды, то есть свободные от других олигосахаридных соединений.
Настоящее изобретение относится в целом к соединениям формулы (I) в виде кислоты или в виде любой из их фармацевтически приемлемых солей. Функциональные группы -С00- и -§03- в виде кислоты представляют собой -СООН и -§03Н, соответственно.
Под фармацевтически приемлемой солью соединения по настоящему изобретению понимают соединение, в котором одна или несколько функциональных групп -С00- или/и -§03 - связаны ионной связью с фармацевтически приемлемым катионом. Предпочтительными по настоящему изобретению солями являются соли, в которых катион выбран из катионов щелочных металлов и предпочтительно представляет собой катион Να'.
Соединения формулы (I) по настоящему изобретению включают в себя также соединения, в которых один или несколько атомов водорода или углерода замещены их радиоактивными изотопами, например, тритием или углеродом 14С. Такие меченые соединения являются полезными при исследовании метаболизма или фармакокинетики в качестве лигандов в биохимических испытаниях.
В формуле (I) соединений по настоящему изобретению понимают, что дисахарид формулы (II) связан с дисахаридным звеном, соответствующим формуле (I), через атом кислорода, находящийся в положении 1 его глюкозаминового звена;
аналогичным образом дисахарид формулы (III) связан с дисахаридом формулы (II) через атом кислорода, находящийся в положении 1 его глюкозаминового звена;
аналогичным образом дисахарид формулы (IV) связан с дисахаридом формулы (III) через атом кислорода, находящийся в положении 1 его глюкозаминового звена.
Под термином глюкозаминовое звено понимают моносахаридное звено следующей формулы:
Представителем другого типа сахаридных звеньев, содержащихся в соединениях по настоящему изобретению, является уроновая кислота и более точно идуроновая кислота, соответствующая следующей формуле:
030,
Таким образом, соединения формулы (I) по настоящему изобретению, представляющие собой октасахариды, также могут быть представлены приведенной далее формулой (I'), в которой чередуются идуроновые и глюкозаминовые звенья, а К1, К2, К3, К5, К7 и К9 имеют определенные ранее значения:
Среди соединений формулы (Ί)/(Γ), являющихся объектами настоящего изобретения, можно упомянуть подгруппу соединений, в которых К1 представляет собой или О-алкил, в котором алкил содержит от 5 до 16 атомов углерода и преимущественно от 5 до 12
- 2 020485 атомов углерода (например, -О-пентил, -О-ундецил или 2-пропилпентил);
или О-алкил, в котором алкил содержит от 1 до 8 атомов углерода и преимущественно от 3 до 6 атомов углерода (например, -О-пропил или -О-пентил) и имеет 1 или 2 заместителя, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из арилов и циклоалкилов (например, фенилов и циклоалкилов, таких как циклогексил).
Среди соединений формулы (1)/(1'), являющихся объектами настоящего изобретения, можно упомянуть другую подгруппу соединений, в которых К3 представляет собой алкил, содержащий от 2 до 6 атомов углерода (например, пропил или пентил), или циклоалкил (например, циклопентил).
Среди соединений формулы (1)/(1'), являющихся объектами настоящего изобретения, можно упомянуть другую подгруппу соединений, в которых по меньшей мере один из радикалов К2, К5, К7 и К9 представляет собой гидроксигруппу.
Другую подгруппу соединений, являющихся объектами настоящего изобретения, образуют соединения, в которых по меньшей мере один из радикалов К2, К5, К7 и К9 представляет собой гидроксигруппу и по меньшей мере один из радикалов К2, К5, К7 и К9 представляет собой О8О3 -.
Другие подгруппы октасахаридов по настоящему изобретению могут иметь несколько характеристик, указанных ранее для каждой из определенных ранее подгрупп.
Предпочтительно можно упомянуть подгруппу соединений формулы (I), в которой
К1 представляет собой или О-алкил, в котором алкил содержит от 5 до 16 атомов углерода и преимущественно от 5 до 12 атомов углерода (например, -О-пентил, -О-ундецил или 2-пропилпентил);
или О-алкил, в котором алкил содержит от 1 до 8 атомов углерода и преимущественно от 3 до 6 атомов углерода (например, -О-пропил или -О-пентил) и имеет 1 или 2 заместителя, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из арилов и циклоалкилов (например, фенилов и циклоалкилов, таких как циклогексил);
К3 представляет собой алкил, содержащий от 2 до 6 атомов углерода (например, пропил или пентил), или циклоалкил (например, циклопентил);
по меньшей мере один из радикалов К2, К5, К7 и К9 представляет собой гидроксигруппу.
Среди соединений по настоящему изобретению можно предпочтительно упомянуть следующие октасахариды:
пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозид (№ 1);
пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил) амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозид (№ 2);
пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксогексил) амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (№ 3);
пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил) амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-аЭ-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-З-Э-глюкопиранозид (№ 4);
ундецил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонатоа-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-З-Э-глюкопиранозид (№ 5);
- 3 020485
5-фенилиентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-нагрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-( 1 ^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозил)-(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-П-глюкоииранозид (№ 6);
метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-[(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)]2-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозид (№ 7);
метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкоииранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозид (№ 8);
метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозид (№ 9);
метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-аП-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-а-Эглюкоииранозид (№ 10);
метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-аП-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозид (№ 11);
метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкоииранозид (№ 12);
метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкоииранозид (№ 13);
5-фенилиентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкоииранозид (№ 14);
2-ироиилиентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)- 4 020485 (1^4)-2-дезокси-2- (1-оксобутил) амино-в-И-глюкопиранозид (№ 15);
3-циклогексилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидо-а-Иглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-дезокси-2ацетамидо-в-И-глюкопиранозид (№ 16);
3-циклогексилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси2-(1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Иглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1-оксобутил)амино-а-И-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил) амино-в-И-глюкопиранозид (№ 17);
3,3-дифенилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Иглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1-оксобутил) амино-а-И-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-в-6-глюкопиранозид (№ 18);
5-фенилпентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(3метил-1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4) -(2-О-натрийсульфонатоα-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-2-дезокси-2-(3-метил-1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 19).
Принципиально в способе получения соединений по настоящему изобретению используют основные синтоны ди- или олигосахаридов, полученные соответственно приведенным ранее литературным источникам. В частности, можно сослаться на патенты или заявки ЕР 0300099, ЕР 0529715, ЕР 0621282 и ЕР 0649854, а также на публикацию С. Уап Воеске1 и М. РеЙои в Апдете. СЬет. 1п1. Εά. Епд1., 1993, 32, 1671-1690. Затем такие синтоны сочетают друг с другом таким образом, чтобы получить полностью защищенный эквивалент октасахарида по настоящему изобретению. Далее данный защищенный эквивалент превращают в соединение по настоящему изобретению. В упомянутых реакциях сочетания ди- или олигосахарид-донор, активированный по своему аномерному углероду, взаимодействует с ди- или олигосахаридом-акцептором, обладающим свободной гидроксигруппой.
Специфицированные схемы синтезов описаны в подробных примерах, приведенных далее.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу получения октасахаридов формулы (Ι)/(Ι'), отличающемуся тем, что на первой стадии синтезируют полностью защищенный эквивалент требуемого октасахарида (Ι); на второй стадии в положениях, в которые надлежит вводить сульфатные группы конечной молекулы, снимают защиту и затем осуществляют О-сульфатирование; на третьей стадии снимают защиту со всего соединения; на четвертой стадии вводят Ν-ацильные группы (введение групп К3-СО-).
Синтез полностью защищенного эквивалента требуемого октасахарида (Ι) осуществляют по реакциям, хорошо известным специалистам в данной области техники, используя способы синтеза олигосахаридов (см., например, С.1. Воопк, ТейаЬеДтоп (1996), 52, 1095-1121 и заявки \УО 98/03554 и \УО 99/36443), в которых олигосахарид-донор гликозидной связи сочетают с олигосахаридом-акцептором гликозидной связи для получения другого олигосахарида, представляющего собой совокупность двух реагентов. Данную последовательность повторяют до получения соединения формулы (Ι), при необходимости, в защищенном виде. Природу и профиль заряда требуемого конечного соединения определяет природа химических звеньев, использованных на различных стадиях синтеза, согласно правилам, хорошо известных специалистам в данной области техники. Можно сослаться, например, на С. Уап Воеске1 и М. РеОЮи, Апдете. СЬет. 1п1. Εά. Епд1. (1993), 32, 1671-1690 или также на Н. Раи1кеп, АДуапсек ш ке1есОуе сЬетюа1 куШЬекек о! сотр1ех оЬдокассЬапДек, Апдете. СЬет. 1п1. Εά. Епд1. (1982), 21, 155-173.
Соединения по настоящему изобретению, разумеется, могут быть получены с использованием различных стратегий, известных специалистам в области синтеза олигосахаридов. Способ, описанный ранее, представляет собой предпочтительный способ по настоящему изобретению. Тем не менее, соединения формулы (Ι)/(Ι') могут быть получены другими способами, хорошо известными в химии сахаров и описанными, например, в МопокассЬапДек, 1Ье1г сЬетОгу апД 1Ье1г го1ек ш па!ига1 ртоДиск, Р.М. СоШпк е1 К.1. Ретег, 1. \УПеу & §опк (1995) и С.1. Воопк в ТейаЬеДтоп (1996), 52, 1095-1121.
Защитные группы, используемые в способе получения соединений формулы (Ι)/(Ι'), представляют
- 5 020485 собой группы, которые позволяют, с одной стороны, защищать реакционноспособную функциональную группу, такую как гидрокси- или аминогруппа, в ходе синтеза, а с другой стороны, восстанавливать реакционноспособную функциональную группу в исходном виде в конце синтеза. Для осуществления способа по настоящему изобретению используют защитные группы, традиционно используемые в химии сахаров, такие как описанные, например, в РгоЮсОус Огоирк ίη Огдатс δνηΐΐιαίδ. Огееп с1 а1., 3'1 Εάίΐίοη (ίοΗη \УПеу & §оп8, 1пе., №\ν Уогк). Защитные группы выбирают, например, из таких групп, как ацетил, метил, пентенил, бензоил, левулинил, бензил, замещенный бензил, азиды, бензилкарбамат, третбутилдиметилсилил (ίΒΌΜδ) или трет-бутилдифенилсилил (ίΒΌΡδ).
Также могут быть использованы активирующие группы; речь идет о группах, традиционно используемых в химии сахаров, например, согласно О.Т Воопк, ТеЬаЪебгоп (1996), 52, 1095-1121. Такие активирующие группы выбирают, например, из имидатов или тиогликозидов.
Способ, описанный ранее, позволяет получать соединения по настоящему изобретению в виде солей и предпочтительно в виде солей натрия. Для получения соответствующих кислот соединения по настоящему изобретению в виде солей могут быть приведены в контакт с катионообменными смолами в кислой форме. Затем соединения по настоящему изобретению в виде кислот могут быть нейтрализованы основанием для получения требуемой соли. Для получения солей соединений формулы (1)/(11) можно использовать любое неорганическое или органическое основание, образующее с соединениями формулы (1)/(1') фармацевтически приемлемые соли.
Настоящее изобретение относится также к соединениям приведенной далее формулы (V), в которой А1к представляет собой алкил, К! имеет значения, определенные ранее в отношении соединений формулы (1)/(1'), а Рд, Рд' и Рд, являющиеся одинаковыми или отличающимися друг от друга, представляют собой защитные группы:
Такие соединения являются приемлемыми в качестве промежуточных соединений в синтезе соединений формулы (1)/(1').
Предпочтительно объектами настоящего изобретения являются соединения (V), в которых А1к представляет собой метил, а Рд, Рд' и Рд представляют собой бензил, ίΒΌΡδ и ацетил, соответственно. Более предпочтительно, настоящее изобретение относится к соединениям формулы (V), в которых выбран из таких групп, как -О-метил, -О-(СН2)5-фенил, -О-СН2-СН(С3Н7)2, -О-(СН2)3-С6Н11 и -О-(СН2)2СН(фенил)2.
Такие соединения соответствуют дисахаридам 58, 131, 132, 133 и 134, поясненным на приведенных далее схемах синтеза и являющимся приемлемыми для синтеза соединений №№ 10, 11 и 14-19 по настоящему изобретению соответственно приведенному далее подробному описанию.
Настоящее изобретение относится также к соединениям приведенной далее формулы (VI), в которой А1к представляет собой алкил, а Рд, Рд' и Рд, являющиеся одинаковыми или отличающимися друг от друга, представляют собой защитные группы:
Такие соединения являются приемлемыми в качестве промежуточных соединений в синтезе соединений формулы (1)/(1').
Настоящее изобретение предпочтительно относится к соединению (VI), в котором А1к представляет собой метил, а Рд, Рд' и Рд представляют собой бензил, левулинил и ацетил, соответственно. Данное соединение соответствует дисахариду 24, поясненному на приведенных далее схемах синтеза и являющемуся приемлемым для синтеза соединений №№ 1-4 по настоящему изобретению соответственно приведенному далее подробному описанию.
В приведенных далее примерах описано получение некоторых соединений по настоящему изобретению. Данные примеры не являются ограничительными и приведены только для пояснения настоящего изобретения. Исходные вещества и реагенты, способы получения которых не описаны конкретно, имеются в продаже или описаны в литературе, или могут быть получены способами, описанными в данном тексте или известными специалистам в данной области техники.
Приняты следующие сокращения:
|</.]и - оптическое вращение;
Ас - ацетил;
Βη - бензил;
ТСХ (ССМ) - тонкослойная хроматография;
- 6 020485
ΩΩΟ - 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон;
ИЭР (ΕδΙ) - ионизация электрораспылением; ч - час;
ЖХ-МС (ЬС-Μδ) (*) - жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией;
Ьеу - левулинил; мин - минуты;
Ме - метил;
РМВ - параметоксибензил;
КТ - фактор замедления (время удерживания, определенное при ТСХ по отношению к фронту продвижения растворителя);
ίΒΌΜδ - трет-бутилдиметилсилил; ίΒΌΡδ - трег-бутилдифенилсилил;
ТРА - трифторуксусная кислота;
ТК - время удерживания, определенное при ЖХ-МС*;
Ζ - бензилоксикарбонил.
* ЖХ-МС осуществляют на приборе ΖΟ4()()() марки \Уа1ег5. Используемая колонка представляет собой колонку 8ушейу С18, 3,5 мкм (2,1x50 мм). Элюент А представляет собой смесь Н2О + 0,005% ТФУ с рН=3,15. Элюент В представляет собой смесь ацетонитрил + 0,005% ТФУ. Градиент варьируют в интервале от 0 до 90% элюента В в течение 10 (или 30) мин и в течение 5 мин при 90% элюента В. Расход составляет 0,4 мл/мин.
Получение промежуточных соединений, используемых в синтезе
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-2амино-1,6-ангидро-3-О-бензил-2-дезокси-в-О-глюкопиранозы (№ 21).
К раствору соединения 20 (21,6 г, 31 ммоль) (С.А.А. Уап Воеске1 е1 со11., 1. СагЪойубг. СНет., 4 (1985), 293-321) в Ν/Ν-диметилформамиде (155 мл) прибавляют триэтиламин (Εΐ3Ν) (65 мл, 15 мол. экв.) и затем 1,3-пропандитиол (47 мл, 15 мол. экв.). После перемешивания в течение 17 ч магнитной мешалкой реакционную смесь разбавляют этилацетатом, промывают водой, сушат (над №28О4), фильтруют, концентрируют и затем очищают на силикагеле (ацетон-циклогексан) с получением соединения 21 (15,8 г, 76%).
ЖХ-МС: т/ζ 672,2 [(М+Н)+]. ТК=0,94 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1,6ангидро-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозы (№ 22).
К раствору соединения 21 (128,12 г, 190,7 ммоль) в дихлорметане (240 мл) прибавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (240 мл) и затем при 0°С бензилоксикарбонилхлорид (35,5 мл, 1,3 молярного эквивалента). После интенсивного перемешивания в течение 15 мин магнитной мешалкой при 0°С реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают водой до нейтральной реакции, сушат (над №28О4), фильтруют и концентрируют. Неочищенный продукт реакции используют на следующей стадии без очистки.
ЖХ-МС: т/ζ 806,2 [(М+Н)+]. ТК=1,55 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1,6ди-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а,в-О-глюкопиранозы (№ 23).
Остаток, полученный на предыдущей стадии, растворяют в уксусном ангидриде (1,05 л) и затем при 0°С в течение 15 мин прибавляют трифторуксусную кислоту (ТФУ) (105 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин при 0°С и далее в течение 18 ч при комнатной температуре, затем концентрируют, упаривают совместно с толуолом и очищают на силикагеле (циклогексан-ацетон) с получением соединения 23 (138,9 г, 80%, 2 стадии).
ЖХ-МС: т/ζ 930,3 [(М+№)+]. ТК=21,68/21,84 мин.
Получение трихлорацетимидата (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а,в-О-глюкопира- 7 020485 нозы (№ 24).
К раствору соединения 23 (25 г, 27,5 ммоль) в диэтиловом эфире (1,1 л) при 0°С прибавляют бензиламин (ΒηΝΗ2) (109 мл, 36 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и далее в течение 4,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют этилацетатом, затем нейтрализуют холодным 1н. раствором НС1 (0-4°С), промывают водой, сушат (над Ν;·ι2δϋ4). фильтруют, концентрируют и очищают на силикагеле (ацетон-циклогексан) с получением (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а,в-Э-глюкопиранозы (18,5 г, 78%).
ЖХ-МС: т/ζ 888,3 [(М+№)+]. Тк=19,95/20,60 мин.
К раствору полученного таким образом соединения (18,5 г, 21,4 ммоль) в дихлорметане (405 мл) в атмосфере аргона при 0°С прибавляют карбонат цезия (Ск2СО3) (11,1 г, 1,6 мол. экв.) и трихлорацетонитрил (СС13СП) (14,8 мл, 5,0 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют. Остаток очищают на силикагеле (ацетонциклогексан + 0,1% триэтиламина) с получением соединения 24 (17,2 г, 80%).
К(=0,47 (этилацетат-циклогексан, 7/3).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СЭС13) δ 5,17 ИоИЛ11, 6,28 С1с1а.
ЖХ-МС: т/ζ 866,3 [(М+№)+]. Ты=19,91 мин.
Получение 4-пентенил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-6-О-ацетил-3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 25).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1М, 0,2 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 24 (13,7 г, 13,56 ммоль) и аллилового спирта (6,8 мл, 5 мол. экв.) в дихлорметане (590 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (17,6 г). После перемешивания в течение 20 мин (по анализу ТСХ) прибавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. После фильтрования, промывки водой, высушивания (над Ш28О4), фильтрования и упаривания досуха смесь очищают на силикагеле с получением соединения 25 (10,7 г, 85%).
ЖХ-МС: т/ζ 934,5 [(М+Н)+]. Т.,=24,00 мин.
Получение 4-пентенил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-ацетил3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-β -Ό -глюкопиранозида (№ 26).
К раствору соединения 25 (10,6 г, 11,35 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (1,2 л), прибавляют гидразинацетат (5,2 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 2,5 ч магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 26 (6,98 г, 74%).
- 8 020485
ЖХ-МС: т/ζ 858,4 |(Μ>Ν;ι)'|. ТК=22,62 мин.
Получение 4-пентенил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-ацетил-3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 28).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1 М, 0,15 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 27 (9,0 г, 9,98 ммоль) (С. ТаЬеиг е! ^11, ΒίοОгд. Меб. СЬет. (1999) 7, 2003-2012) и акцептор глюкозила 26 (6,95 г, 8,32 ммоль) в дихлорметане (350 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (7,5 г). После выдерживания в течение 18 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%м водным раствором гидрокарбоната натрия и водой, высушивания (над №-ь8О4). фильтрования и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 28 (9,04 г, 69%).
Κί=0,38 (ацетон-толуол, 1/4).
Получение 4-пентенил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Оглюкопиранозида (№ 29).
К раствору соединения 28 (9,0 г, 5,7 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (570 мл), прибавляют гидразинацетат (2,6 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 29 (7,15 г, 85%).
Κί=0,29 (ацетон-толуол, 1/4).
Получение 4-пентенил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-ацетил-3 -О-бензил-2дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 30).
Раствор (трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1М, 0,15 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 27 (4,80 г, 5,32 ммоль) и акцептора глюкозила 29 (7,15 г, 4,84 ммоль) в дихлорметане (180 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (3,99 г). После выдерживания в течение 18 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После перемешивания магнитной мешалкой при комнатной температуре (в течение 30 мин), фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и затем водой, высушивания (над №-ь8О.-|) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 30 (5,23 г, 49%).
Κί=0,18 (ацетон-диизопропиловый эфир, 1/4).
Получение 4-пентенил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-Оацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Р-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-З-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-ацетил-3 -О-бензил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-в-И-глюкопиранозида (№ 31).
К раствору соединения 30 (5,21 г, 2,35 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (180 мл), прибавляют гидразинацетат (1,08 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч 10 мин магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 31 (4,78 г, 96%).
Κί=0,47 (ацетон-диизопропиловый эфир, 1/3).
- 9 020485
Получение (3,4-ди-О-бензил-2-О-(4-метокси)бензил-6-О-трет-бутилдиметилсилил-а-Ь-идоииранозил)-(1^4)-1,6-ангидро-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-в-П-глюкопиранозы (№ 33).
К раствору соединения 32 (32,3 г, 42,2 ммоль) (\УО 2006/021653) в Ν,Ν-диметилформамиде (210 мл) при 0°С в атмосфере аргона прибавляют бензилбромид (25 мл, 5 мол. экв.) и затем 55%-й ΝαΗ (3 г, 1,5 молярного эквивалента). После перемешивания в течение 20 мин магнитной мешалкой прибавляют метанол (30 мл) и реакционную смесь концентрируют в вакууме, неочищенный продукт реакции разбавляют этилацетатом, промывают водой и затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат (над №-ь8О4). фильтруют и концентрируют. Полученный остаток используют на следующей стадии без очистки.
ЖХ-МС: т/ζ 871,7 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=13,86 мин.
Получение (2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-6-О-трет-бутилдиметилсилил-а-Ь-идопиранозил)-(1^4)1,6-ангидро-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-в-О-глюкопиранозы (№ 34).
К раствору неочищенного соединения 33 (38,6 г) в дихлорметане (1,6 л) прибавляют воду (80 мл) и затем при 0°С прибавляют ЭЭР (14,2 г, 1,5 мол. экв.). После перемешивания в течение 4 ч 45 мин при 0°С смесь разбавляют дихлорметаном и прибавляют раствор гидрокарбоната натрия. Затем органическую фракцию промывают водой, сушат (над №-ь8О4). фильтруют и концентрируют. Полученное соединение используют на следующей стадии без очистки.
Полученный остаток растворяют в дихлорметане (350 мл) и затем прибавляют триэтиламин (13 мл), 4-диметиламинопиридин (2 г) и уксусный ангидрид (60 мл). После перемешивания в течение 10 мин магнитной мешалкой при 0°С и далее в течение 1 ч 45 мин при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, затем последовательно промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия и водой и далее органическую фракцию сушат (над №-ь8О4). фильтруют и концентрируют.
Полученный остаток очищают на диоксиде кремния (этилацетат-циклогексан) с получением соединения 34 (26,8 г, 83%, 3 стадии).
ЖХ-МС: т/ζ 798,3 [(М+№)+]. Тк=12,97 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-1,6-ангидро-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-3-П-глюкопиранозы (№ 35).
К раствору соединения 34 (26,3 г, 33,9 ммоль) в ацетоне (1,4 л) при 0°С прибавляют раствор СгО3 (10,5 г, 3,1 мол. экв.) в 3,5М водном растворе Н2§О4 (47 мл). После перемешивания в течение 4 ч механической мешалкой при 0°С реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают водой до нейтральной реакции и затем органическую фракцию сушат (над №-ь8О4). фильтруют и концентрируют. Полученное соединение используют на следующей стадии без очистки.
Полученный остаток растворяют в Ν,Ν-диметилформамиде (210 мл) и прибавляют гидрокарбонат калия (17 г, 5 мол. экв.) и метилиодид (21 мл, 10 мол. экв.). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч и затем концентрируют в вакууме. Остаток разбавляют этилацетатом, затем промывают водой, насыщенным водным раствором тиосульфата натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия и далее сушат (над №-ь8О4). фильтруют и концентрируют. Полученное соединение используют на следующей стадии без очистки.
ЖХ-МС: т/ζ 707,3 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=10,37 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1,6-ди-О-ацетил2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 36).
Неочищенный остаток, полученный на предыдущей стадии, растворяют в уксусном ангидриде (177 мл) и затем прибавляют трифторуксусную кислоту (ТФУ) (17,7 мл). Реакционную смесь перемешивают в
- 10 020485 течение 16 ч, затем концентрируют, упаривают совместно с толуолом и очищают на силикагеле (циклогексан-этилацетат) с получением соединения 36 (17,4 г, 65%, 3 стадии).
ЖХ-МС: т/ζ 809,3 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=10,81 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 37).
К раствору соединения 36 (7 г, 8,84 ммоль) в диэтиловом эфире (303 мл) при 0°С в атмосфере аргона прибавляют бензиламин (ΒηΝΗ2) (29,7 мл, 36 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч магнитной мешалкой при 0°С и затем в течение 6 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализуют холодным 1н. раствором НС1 (0-4°С), промывают водой, сушат (над Να2δΟ4). фильтруют, концентрируют и очищают на силикагеле (этилацетат-циклогексан) с получением соединения 37 (5,95 г, 90%).
ЖХ-МС: т/ζ 767,7 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=1,64 мин.
Получение трихлорацетимидата (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 38).
К раствору соединения 37 (5,94 г, 7,9 ммоль) в дихлорметане (150 мл) в атмосфере аргона прибавляют карбонат цезия (Сз2СО3) (4,1 г, 1,6 молярного эквивалента) и трихлорацетонитрил (СС13С№) (3,9 мл, 5,0 мол. экв.). После перемешивания в течение 45 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют. Остаток очищают на силикагеле (этилацетат-циклогексан + 0,1% триэтиламина) с получением соединения 38 (5,7 г, 81%).
ЖХ-МС: т/ζ 912,0 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=1,81 мин.
Получение 4-пентенил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-Оацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 39).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1М, 0,1 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -15°С прибавляют к раствору имидата 38 (2,61 г, 2,92 ммоль) и акцептора глюкозила 31 (4,78 г, 2,25 ммоль) в дихлорметане (146 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (1,99 г). После перемешивания в течение 2 ч магнитной мешалкой при -15°С (по анализу ТСХ) дополнительно прибавляют имидат 38 с интервалами от 15 до 30 мин до максимального расходования акцептора 31. В конце реакции (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии до нейтральной реакции и после перемешивания магнитной мешалкой при комнатной температуре (в течение 15 мин), фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и затем водой, высушивания (над №ь8О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 39 (3,71 г, 58%).
И=0,21 (ацетон-толуол, 15/85).
- 11 020485
Получение 4-пентенил(метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-П-глюкопиранозида (№ 40).
К раствору соединения 39 (300 мг, 0,105 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (31 мл), при 0°С прибавляют 1М метанольный раствор метилата натрия (0,31 мл) в присутствии молекулярного сита 3А. После перемешивания при 0°С в течение 1 ч и далее при комнатной температуре в течение 15 ч смесь нейтрализуют смолой Ро\ус.\ 50\УХ4 в Н+-форме. После фильтрования и частичного концентрирования реакционную смесь очищают на колонке для эксклюзионной хроматографии ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента, затем после объединения фракций, содержащих требуемое вещество, и концентрирования в вакууме остаток очищают на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан/этилацетат/этанол с получением соединения 40 (185 мг, 69%).
Ρί=0,22 (СН2С12-АсОЕ1-ЕЮН, 9/1/0,3).
Получение 4-пентенил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-Обензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино6-О-триэтиламмонийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 41).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (513 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 40 (178 мг, 70,8 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (6,3 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 17 ч магнитной мешалкой при 55дС без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 0,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол^^-диметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 41 (241 мг, 87%).
И=0,33 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
- 12 020485
Получение 4-пентенил(3,4-ди-0-бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)(1 ^4)-(2-азидо-3 -0-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -0-бензил-20-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-0-бензил-2-дезокси-6-0-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-0-бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-Обензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-О-литийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 42).
К раствору соединения 41 (238 мг, 60 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (9,6 мл), при 0°С прибавляют молярный водный раствор Ы0Н. После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/^Шдиметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 42.
И=0,42 (Лс0Е1-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение пентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-0-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-0-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-0-натрийсульфонатоа-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-амино2-дезокси-6-0-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозида (№ 43).
К раствору ранее полученного соединения 42 в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (14 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (617 мг, 9,8 ммоль) и Рй/С, 10% (1,55 г). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерЕайех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 43 (123 мг, 61% (2 стадии)).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Ό20) δ 5,11 ΜοϋΆ^, 5,38 01ста, 5,19 ИоИЛ^, 5,38 01с'\ 5,19 МоИЛ™, 5,38 01сш, 5,21 ТйоиЛп, 4,70 01^.
Получение (Ζ/Е) ундец-4-енил(метил-2-О-ацетил-3,4-ди-0-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)- 13 020485 (1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 44).
К раствору соединения 39 (610 мг, 214 мкмоль) в дихлорметане (10,7 мл) прибавляют 1-октен (67 мкл, 2 мол. экв.) и катализатор Граббса первого поколения (С44Н74С12Р2Ки) (18 мг, 0,1 мол. экв.). После нагревания с обратным холодильником в течение 6 ч и последующего перемешивания в течение ночи при комнатной температуре смесь концентрируют в глубоком вакууме, после чего она может быть снова введена в реакцию в тех же самых условиях в случае неполного протекания реакции. Неочищенный продукт реакции очищают хроматографией на силикагеле (толуол-ацетон) с получением требуемого соединения 44 (131 мг, 20%).
К£=0,18 (толуол-ацетон, 85/15).
Получение (Ζ/Е) 5-фенил-4-пентенил(метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 45).
К раствору соединения 39 (100 мг, 35 мкмоль) в дихлорметане (1 мл) прибавляют стирол (16 мкл, 4 мол. экв.) и катализатор Граббса второго поколения (С46Н65С1^2РКи) (1,8 мг, 0,06 мол. экв.). После нагревания с обратным холодильником в течение 8 ч и последующего перемешивания в течение ночи при 35°С реактивы, в случае необходимости, прибавляют дополнительно. Затем смесь концентрируют в глубоком вакууме и очищают хроматографией на силикагеле (толуол-этилацетат) с получением требуемого соединения 45 (38 мг, 37%).
М=0,25 (толуол-АеОЕр 7/3).
Получение (Ζ/Е) ундец-4-енил(метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-П-глюкопиранозида (№ 46).
К раствору соединения 44 (152 мг, 0,052 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (15 мл), при 0°С прибавляют 1М метанольный раствор метилата натрия (154 мкл) в присутствии молекулярного сита 3А. После перемешивания при 0°С в течение 1 ч и далее при комнатной температуре в течение 15 ч смесь нейтрализуют смолой Ро\\е\ 50\УХ4 в Н+-форме. После фильтрования и частичного концентрирования реакционную смесь очищают на колонке для эксклюзионной хроматографии ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента, затем после объединения фракций, содержащих требуемое вещество, и концентрирования в вакууме остаток очищают на силикагеле, элюируя смесью толуол/ацетон/этилацетат/этанол с получением соединения 46 (83 мг, 61%).
М=0,25 (толуол-ацетон-ЕЮН, 7/3/0,1).
Получение (Ζ/Е) 5-фенил-4-пентенил(метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 47).
К раствору соединения 45 (229 мг, 0,078 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (23 мл), при 0°С прибавляют 1М метанольный раствор метилата натрия (232 мкл) в присутствии молекулярного сита 3А. После перемешивания при 0°С в течение 1 ч и далее при комнатной температуре в течение 15 ч смесь нейтрализуют смолой Ро\\е\ 50\УХ4 в Н+-форме. После фильтрования и частичного концентрирования реакционную смесь очищают на колонке для эксклюзионной хроматографии ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента, затем после объединения фракций, содержащих требуемое вещество, и концентрирования в вакууме остаток очищают на силикагеле, элюируя смесью дихлорметан/этилацетат/этанол с получением соединения 47 (141 мг, 69%).
М=0,15 (толуол-ацетон-ЕЮН, 7/3/0,1).
Получение (Ζ/Е) ундец-4-енил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О- 14 020485 глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил]амино-6-О-триэтиламмонийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 48).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (225 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 46 (81 мг, 31 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (2,8 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 16 ч магнитной мешалкой при 50°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол (0,2 мл) и после перемешивания в течение 35 мин при 0°С и затем в течение 2,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан/Ы,Шдиметилформамид, 1:1:0,1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 48 (122 мг, 99%).
М=0,36 (АсОЕ-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение (Ζ/Ε) 5 -фенил-4-пентенил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Оглюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил]амино-6-О-триэтиламмонийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 49).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (385 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 47 (138 мг, 53 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (4,7 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 16 часов магнитной мешалкой при 50°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол (0,35 мл) и после перемешивания в течение 30 мин при 0°С и затем в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан/Ν,Νдиметилформамид, 1:1:0,1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 49 (194 мг, 92%).
М=0,35 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение (Ζ/Ε) ундец-4-енил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-Обензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6О-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-дезокси2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-О-литийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 50).
К раствору соединения 48 (119 мг, 29 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (4,7 мл), при 0°С прибавляют молярный водный раствор ЫОН (1,18 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 19,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Н,Шдиметилформамид, 4:1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 50.
Ы=0,40 (АсОЕ-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение (Ζ/Е) 5-фенил-4-пентенил(3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-3 -О-бензил2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-О-литийсульфонато-в-О-глюкопиранозида (№ 51).
К раствору соединения 49 (190 мг, 47 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (7,4 мл), при 0°С прибавляют молярный водный раствор ЫОН (1,88 мл). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ы,Шдиметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 51.
Ы=0,44 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение ундецил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато- 15 020485 а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-амино2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозида (№ 52).
К раствору ранее полученного соединения 50 в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (6 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (260 мг, 4,1 ммоль) и Рб/С, 10% (672 мг). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 5 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерНабе.х® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 52 (34 мг, 49% (2 стадии)).
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса - 2337,81;
экспериментальная масса: 2337,27±0,06 а.е.м. |М-4№+4Н|.
Получение 5-фенилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)(1^4)-2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-[3-О-глюкопиранозида (№ 53).
К раствору ранее полученного соединения 51 в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (9,2 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (407 мг, 6,47 ммоль) и Рб/С, 10% (1,05 г). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 5 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерНабе.х® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 53 (79 мг, 72% (2 стадии)).
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 537,0713 [М4Н]4- (форма кислоты).
58
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)6-О-ацетил-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 55).
К раствору соединения 54 (23,5 г, 30 ммоль; СагЪоЬубга!е КекеагсЬ (1987), 167, 67-75) в дихлорметане (600 мл) при 0°С в инертной атмосфере прибавляют 4-диметиламинопиридин (733 мг, 6 ммоль), гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (11,5 г, 60 ммоль) и левулиновую кислоту (6,2 мл, 60 ммоль). После перемешивания в течение 16 ч при комнатной температуре смесь разбавляют дихлорметаном (1,5 л). Органическую фракцию последовательно промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия, водой, насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и еще раз водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и затем упаривают досуха. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат, 1/3) с получением соединения 55 (22,6 г).
КТ=0,37, силикагель, циклогексан/этилацетат, 1/3.
Получение метил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 56).
К раствору соединения 55 (20,2 г, 23 ммоль) в смеси тетрагидрофуран/метанол, 1/1 (140 мл), в инертной атмосфере прибавляют [1Ви28иС1(ОН)]2 (226 мг, 0,79 ммоль), полученный согласно А. Огба е1 а1., СНет. Еиг. 1. (2001) 7, 3321. Реакционную смесь перемешивают в течение 38 ч при 35°С. Полученный после концентрирования остаток (20,8 г) используют без очистки на следующей стадии.
КТ=0,23, силикагель, циклогексан/этилацетат, 1/3.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 57).
К раствору неочищенного соединения 56 (23 ммоль) в дихлорметане (190 мл) при 0°С в инертной атмосфере прибавляют триэтиламин (8 мл, 57,5 ммоль), 4-диметиламинопиридин (1,4 г, 11,5 ммоль) и трет-бутилдифенилсилилхлорид (12 мл, 46,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 16 ч
- 16 020485 при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном. Органическую фракцию последовательно промывают насыщенным раствором хлорида натрия и водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и затем упаривают. Остаток очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат, 2/1) с получением соединения 57 (24,4 г).
РГ=0.42. силикагель, циклогексан/этилацетат, 2/1.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 58).
К раствору соединения 57 (22,6 г, 20,0 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1/2 (2,5 л), прибавляют гидразинацетат (9,21 г, 100,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре. Полученный после концентрирования остаток очищают флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат, 2/1) с получением 17,6 г соединения 58.
КГ=0,40, силикагель, циклогексан/этилацетат, 2/1.
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СОС13) δ 5,19 ИоИЛ11, 4,63 01с1.
ЖХ-МС: т/ζ 978,5 [(М+Н)+]. ТК=12,29 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1-Оацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозы (№ 60).
К раствору соединения 59 (11 г, 13,7 ммоль) (С. ТаЬеиг, е! со11., СагЬоНубг. Кек., 281 (1996) 253-276) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1/1 (80 мл), прибавляют [1Би28иС1(ОН)]2 (0,55 г, 0,14 мол. экв.), полученный согласно А. ОгПа е! а1., СНет. Еиг. 1. (2001) 7, 3321. После перемешивания при 35°С в течение 5,5 ч, далее при комнатной температуре в течение 16 ч и затем снова при 35°С в течение 4 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и затем очищают хроматографией с получением соединения 60 (5,97 г, 57%).
ЖХ-МС: т/ζ 780,2 [(М+Ыа)+]. ТК=9,14 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Е-идопиранозилуронат)-(1^4) -1-Оацетил-2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозы (№ 61).
Соединение 60 (5,97 г, 7,88 ммоль) растворяют в дихлорметане (63 мл). При 0°С в атмосфере аргона последовательно прибавляют 4-диметиламинопиридин (0,481 г, 0,5 мол. экв.), триэтиламин (2,7 мл, 2,5 молярного эквивалента) и трет-бутилдифенилсилилхлорид (4 мл, 2 молярных эквивалента). После перемешивания в течение 4 ч магнитной мешалкой реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия и водой, сушат (над Ыа28О4), фильтруют и концентрируют. Полученный остаток очищают на диоксиде кремния (этилацетат-гептан) с получением соединения 61 (7 г, 90%).
ЖХ-МС: т/ζ 1018,3 [(М+Ыа)+]. ТК=12,33 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-2азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а,3-О-глюкопиранозы (№ 62).
К раствору соединения 61 (7 г, 7,03 ммоль) в диэтиловом эфире (70 мл) при 0°С прибавляют бензиламин (ΒηΝΗ2) (29 мл, 38 мол. экв.). После перемешивания в течение 15 минут при 0°С и далее в течение 6 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют этилацетатом, затем нейтрализуют холодным 1н. раствором НС1 (0-4°С), промывают водой, сушат (над №28О4), фильтруют, концентрируют и очищают на силикагеле (этилацетат-толуол) с получением соединения 62 (5,86 г, 87%).
ЖХ-МС: т/ζ 976,3 [(М+№)+]. ТК=27,6/27,8 мин.
Получение трихлорацетимидата (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 63).
К раствору соединения 62 (6,5 г, 6,81 ммоль) в дихлорметане (140 мл) в присутствии порошка молекулярного сита 4А (7 г) в атмосфере аргона прибавляют карбонат цезия (Ск2СО3) (3,5 г, 1,6 молярного эквивалента) и затем при 0°С прибавляют трихлорацетонитрил (СС13С№) (3,4 мл, 5,0 молярного эквивалента). После перемешивания в течение 15 мин при 0°С и далее в течение 5 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют. Остаток очищают на силикагеле (этилацетат- 17 020485 толуол, 1:4 + 0,1% триэтиламина) с получением соединения 63 (6,33 г, 85%). ЖХ-МС: т/ζ 1119,1 [(М+Ыа)+]. Тк=31,2 мин.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-О-третбутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 64).
Смесь акцептора глюкозила 58 (8,80 мг, 9,00 ммоль), имидата 63 (6,58 г, 6,00 ммоль) и порошка молекулярного сита 4А (4,50 г) в дихлорметане (210 мл) перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч при 25°С. Реакционную смесь охлаждают до -20°С и прибавляют 1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (900 мкл). Через 1 ч 20 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением гидрокарбоната натрия в твердом состоянии. Полученный после фильтрования через СсШе® и концентрирования остаток хроматографируют на колонке 8ерЬайех® ЬН20 (190x3,2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с получением 8,26 г соединения 64.
Ρί=0,30, силикагель, циклогексан/этилацетат, 2/1.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 65).
Соединение 64 (8,26 г, 4,31 ммоль) превращают в соединение 65 (6,41 г) аналогично методике, описанной для синтеза соединения 58.
Р1=0,34, силикагель, циклогексан/этилацетат, 2/1.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил2- дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)3- О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 66).
Смесь акцептора глюкозила 65 (7,42 г, 4,09 ммоль), имидата 63 (6,73 г, 6,1 ммоль) и порошка молекулярного сита 4А (4,60 г) в дихлорметане (215 мл) перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч при
- 18 020485
25°С. Реакционную смесь охлаждают до -20°С и прибавляют 1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (920 мкл). Через 1 ч 30 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением гидрокарбоната натрия в твердом состоянии. После фильтрования через Се1йе® реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (800 мл). Органическую фракцию последовательно промывают 2%-м раствором гидрокарбоната натрия и водой, затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и далее упаривают досуха. Полученный остаток очищают хроматографией на колонке 8ерЬабех® ΕΗ20 (190x3,2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующим хроматографированием на колонке с силикагелем (толуол/этилацетат, 6/1) с получением 6,13 г соединения 66.
Κΐ=0,46, силикагель, толуол/этилацетат, 4/1.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-аО-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил2-бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 67).
Соединение 66 (7,14 г, 2,59 ммоль) превращают в соединение 67 (6,07 г) аналогично методике, описанной для получения соединения 58.
Κΐ=0,37, силикагель, циклогексан/этилацетат, 2/1.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозы (№ 68).
К раствору соединения 36 (5,05 г, 6,3 ммоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1/1 (76 мл), прибавляют [1Ви28пС1(ОН)]2 (0,25 г, 0,14 молярного эквивалента), полученный согласно А. ОтИа е1 а1., СЬет. Еиг. 1. (2001) 7, 3321. После перемешивания при комнатной температуре в течение 72 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и затем очищают хроматографией с получением соединения 68 (2,89 г, 64%).
ЖХ-МС: т/ζ 772,4 [(М+№)+]. Тк=10,23 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)-(1^4)-1-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозы (№ 69).
Соединение 68 (2,89 г, 3,86 ммоль) растворяют в дихлорметане (31 мл). При 0°С в атмосфере аргона последовательно прибавляют триэтиламин (1,3 мл, 2,5 мол. экв.), 4-диметиламинопиридин (0,235 г, 0,5 молярного эквивалента) и трет-бутилдифенилсилилхлорид (2 мл, 2 молярных эквивалента). После перемешивания в течение 3 ч магнитной мешалкой реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия и водой, сушат (над Ыа28О4), фильтруют и концентрируют. Полученный остаток очищают на диоксиде кремния (этилацетат-циклогексан) с получением соединения 69 (3,4 г, 90%).
ЖХ-МС: т/ζ 1010,6 [(Μ+№)+] . Тк=13,10 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 70).
К раствору соединения 69 (3,44 г, 3,48 ммоль) в диэтиловом эфире (35 мл) при 0°С прибавляют бензиламин (ΒηΝΗ2) (14,5 мл, 38 мол. экв.). После перемешивания в течение 8 ч при комнатной температуре реакционную смесь выдерживают при -18°С в течение 16 ч и затем в течение 2,5 ч снова при комнатной температуре. Далее смесь разбавляют этилацетатом, нейтрализуют холодным 1н. раствором ИС1 (0-4°С), промывают водой, сушат (над Ыа28О4), фильтруют, концентрируют и очищают на силикагеле (этилацетат-циклогексан, 15/85) с получением соединения 70 (3,83 г, 91%).
ЖХ-МС: т/ζ 963,6 [(Μ+ΝΗ4)+]. Тк=12,37, 12,47 мин.
Получение трихлорацетимидата (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)(1^4)-2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а,в-О-глюкопиранозы (№ 71).
К раствору соединения 70 (2,99 г, 3,16 ммоль) в дихлорметане (60 мл) в присутствии порошка молекулярного сита 4А (3 г) при 0°С в атмосфере аргона прибавляют карбонат цезия (С§2СО3) (1,6 г, 1,6 молярного эквивалента) и трихлорацетонитрил (СС13СЫ) (1,6 мл, 5,0 мол. экв.). После перемешивания в течение 20 мин при 0°С и далее в течение 7 ч при комнатной температуре, выдерживания при -18°С в течение 16 ч, затем после перемешивания магнитной мешалкой в течение 8 ч при комнатной температу- 19 020485 ре, выдерживания при -18°С в течение 16 ч и заключительного перемешивания магнитной мешалкой в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и далее концентрируют. Остаток очищают на силикагеле (этилацетат-циклогексан, 15:85 + 0,1% триэтиламина) с получением соединения 71 (2,69 г, 78%).
ЖХ-МС: т/ζ 1113,4 [(М+№)+]. Тк=14,58 мин.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-[(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-аП-глюкопиранозил)-(1^4)]2-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 72).
Смесь акцептора глюкозила 67 (3,50 г, 1,32 ммоль), имидата 71 (2,16 г, 1,98 ммоль) и порошка молекулярного сита 4А (1,48 г) в дихлорметане (69 мл) перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают до -20°С и прибавляют 1М раствор третбутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (297 мкл). Через 2 ч 30 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением гидрокарбоната натрия в твердом состоянии. После фильтрования через Сс1Пс® реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (400 мл). Органическую фракцию последовательно промывают 2%-м раствором гидрокарбоната натрия и водой, затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и далее упаривают досуха. Полученный остаток очищают хроматографией на колонке 8ерЪабех® ЬН20 (190x3,2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующим хроматографированием на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат, 4/1) с получением 3,04 г соединения 72.
М=0,30, силикагель, циклогексан/этилацетат, 3/1.
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-[(метил-3-О-бензил-а-Е-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)]2-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 73).
К раствору соединения 72 (2,23 г, 0,623 ммоль) в смеси дихлорметан/метанол, 2/3 (187 мл), содер- 20 020485 жащей молекулярное сито 3А (78 мг), в атмосфере аргона при 0°С прибавляют 1М раствор метилата натрия в метаноле (99,7 мкл). После выдерживания в течение 24 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализуют смолой Эо\уе\ АС 50 \УХ4 в Н+-форме. Полученный после фильтрования и концентрирования остаток хроматографируют на колонке 8ерйабе\® ЬН20 (120x3 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующей флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат, 1/0^-66/34) с получением 1,80 г соединения 73.
Κί=0,38, силикагель, циклогексан/этилацетат, 3/1.
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-[(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)]2-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 74).
К раствору соединения 73 (44,0 мг, 0,013 ммоль) в метаноле (1,7 мл) прибавляют фторид аммония (38,0 мг, 1,03 ммоль). После перемешивания в течение 140 часов при комнатной температуре реакционную смесь вносят в колонку §ерйабе\® ЬН20 (95x2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующей флэшхроматографией на колонке с силикагелем (толуол/ацетон, 3/2) с получением соединения 74 (24,2 мг).
Κί=0,46, силикагель, толуол/ацетон, 3/2.
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)[(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)]2-(1^4)-(метил-3-О-бензил2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозида (№ 75).
Соединение 74 (24,2 мг, 9,96 мкмоль) сушат совместной отгонкой с ΝΝ-диметилформамидом (3x1,0 мл) и затем растворяют в Ν,Ν-диметилформамиде (1,0 мл). К данному раствору прибавляют комплекс триэтиламин-триоксид серы (72,2 мг, 0,4 ммоль). Смесь перемешивают в течение 16 ч при 55°С без доступа света и затем избыток реактива нейтрализуют метанолом (16,2 мкл). Реакционную смесь вносят в колонку §ерйабе\® ЬН20 (120x3 см) и элюируют смесью дихлорметан/этанол, 1/1, с получением соединения 75 (29,0 мг).
Κί=0,26, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 28/16/3,8/9.
Получение метил(3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-[(1^4)-(3-О-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)]2-(1^-4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозида (№ 76).
К раствору соединения 75 (78,5 мг, 30,1 мкмоль) в смеси тетрагидрофуран/метанол, 1/1 (3,2 мл), при 0°С прибавляют 0,7 М раствор гидроксида лития в воде (440 мкл). После выдерживания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре раствор вносят в колонку §ерйабе\® ЬН20 (3x120 см) и элюируют смесью дихлорметан/этанол/вода, 50/50/1, с получением соединения 76 (60,3 мг).
[а]о=13,1° (с=1,0; МеОН).
Получение метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-[(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил) ]2-(1^4)-(2О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 77).
К раствору соединения 76 (19,3 мг, 6,16 мкмоль) в смеси трет-бутанол/вода 1/1 (1,2 мл) последовательно прибавляют формиат аммония (50,8 мг) и палладий/С, 10% (125 мг). После выдерживания в течение 4 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют (фильтр МтШроге® Ь8^Р, 5 мкм), затем вносят в колонку с гелем §ерйабе\® С-25 йпе (95x2 см) и элюируют 0,2М водным раствором №С1. Фракции, содержащие требуемое соединение, объединяют, вносят в колонку §ерйабе\® С-25 йпе (95x2 см), элюируют водой и получают 11,2 мг соединения 77.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2285,47; экспериментальная масса: 2197,20±0,34 а.е.м. (идуроновые кислоты, наблюдаемые в СООН-форме)
- 21 020485
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензила-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 78).
Смесь акцептора глюкозила 65 (1,82 г, 1,00 ммоль), имидата 27 (1,35 г, 1,50 ммоль) и порошка молекулярного сита 4А (1,12 г) в дихлорметане (52 мл) перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч при 25°С. Реакционную смесь охлаждают до -20°С и затем прибавляют 1М раствор третбутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (224 мкл). Через 50 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением гидрокарбоната натрия в твердом состоянии. После фильтрования через СеШе® реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (500 мл). Органическую фракцию последовательно промывают 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и водой, затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и далее упаривают досуха. Полученный остаток хроматографируют на колонке 8ерйабех® ЬН20 (190x3,2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующей флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (толуол/ацетон, 1/0^3/1) с получением 1,57 г соединения 78.
Κί=0,47, силикагель, толуол/ацетон, 3/1.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6 -О-трет-бутилдифенилсилил-2 -дезокси-α-Ό -глюкопиранозида (№ 79).
Соединение 78 (1,56 г, 0,61 ммоль) превращают в соединение 79 (1,44 г) аналогично методике, описанной для получения соединения 58.
КТ=0,52, силикагель, толуол/этилацетат, 1/1.
- 22 020485
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-Оацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-третбутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 80).
Смесь акцептора глюкозила 79 (1,0 г, 0,41 ммоль), имидата 38 (543 мг, 0,61 ммоль) и порошка молекулярного сита 4А (455 мг) в дихлорметане (21 мл) перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждают до -20°С и прибавляют 1М раствор третбутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (91,0 мкл). Через 1 ч 10 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением гидрокарбоната натрия в твердом состоянии. После фильтрования через Се1Пе® реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (250 мл). Органическую фракцию последовательно промывают 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и водой, затем сушат над сульфатом натрия, фильтруют и далее упаривают досуха. Полученный остаток очищают хроматографией на колонке 8ерЬабех® ЬН20 (190x3,2 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующей флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (толуол/этилацетат, 1/0^0/1) с получением соединения 80 (822,4 мг).
Κί=0,44, силикагель, толуол/этилацетат, 3/1.
Получение метил(метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О- 23 020485 бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-0-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 81).
Соединение 80 (820 мг, 0,257 ммоль) омыляют по методике, использованной для синтеза соединения 73, с получением октасахарида 81 (593,8 мг) после флэш-хроматографии на колонке с силикагелем (толуол/ацетон, 1/0^0/1).
И=0,57, силикагель, толуол/ацетон, 2/1.
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-0-бензил-2-бензилоксикарбониламино-6-0-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 82).
Соединение 81 (130 мг, 44,3 мкмоль) превращают в соединение 82 (164,1 мг) аналогично методике, описанной для получения соединения 75.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 4024,90; экспериментальная масса: 4024.
Получение метил (метил-2-О-аммонийсульфонато-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2О-аммонийсульфонато-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-а-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3-О-бензил-аЬ-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оаммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозида (№ 83).
К раствору соединения 82 (91,8 мг, 22,8 мкмоль) в метаноле (3,0 мл) прибавляют фторид аммония (67,6 мг, 1,82 ммоль). После перемешивания в течение 48 ч при 55°С реакционную смесь вносят в колонку ЗерЬайех® ЬН20 (120x3 см, дихлорметан/этанол, 1/1) с последующей флэш-хроматографией на колонке с силикагелем (метанол/вода, 95/5) с получением соединения 83 (62,7 мг).
Κί=0,32, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 17/9/2,2/5.
Получение метил(3,4-ди-0-бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-0-бензил-2-дезокси-6-0-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -0-бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-0-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-0-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-Эглюкопиранозида (№ 84).
К раствору соединения 83 (86 мг, 24,2 мкмоль) в смеси тетрагидрофуран/метанол, 1/1 (3,9 мл), при 0°С прибавляют 1М раствор гидроксида лития в воде (780 мкл). После выдерживания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре раствор вносят в колонку ЗерЬайех® ЬН20 (95x2 см) и элюируют смесью метанол/вода, 95/5, с получением соединения 84 (65,3 мг).
Κί=0,27, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 17/9/2,2/5.
Получение метил (2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 85).
Соединение 84 (95,0 мг, 32,3 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 77, с получением соединения 85 (47,3 мг).
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2081,38; экспериментальная масса: 1993,15±0,11 а.е.м. (идуроновые кислоты, наблюдаемые в СООН-форме).
- 24 020485
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-Эглюкопиранозида (№ 86).
К раствору соединения 81 (50 мг, 0,017 ммоль) в метаноле (2,2 мл) прибавляют фторид аммония (25 мг, 0,68 ммоль). После перемешивания в течение 7 часов при комнатной температуре и затем в течение 16 ч при 20°С реакционную смесь разбавляют дихлорметаном. Органическую фракцию промывают водой, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и затем упаривают досуха. Остаток очищают флэшхроматографией на колонке с силикагелем (толуол/метанол, 100/0^82/18) с получением 27,7 мг соединения 86.
Κί=0,16, силикагель, толуол/метанол, 85/15.
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 87).
Соединение 86 (94 мг, 34,8 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 75, с получением соединения 87 (131,9 мг).
Κί=0,37, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 17/9/2,2/5.
Получение метил (метил-2-О-аммонийсульфонато-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2О-аммонийсульфонато-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-а-Эглюкопиранозида (№ 88).
Соединение 87 (130 мг, 32,8 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 74, с получением соединения 88 (102,0 мг).
Κί=0,33, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 17/9/2,2/5.
Получение метил(3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О- 25 020485 литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-бензилоксикарбониламино-2-дезокси-6-Олитийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 89).
Соединение 88 (100 мг, 26,8 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 76 с получением неочищенного соединения 89, используемого в таком виде на следующей стадии.
Κί=0,25, силикагель, этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода, 17/9/2,2/5.
Получение метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 90).
Неочищенное соединение 89 (75 мг, 24,8 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 77, с получением соединения 90 (48,2 мг).
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2183,42; экспериментальная масса: 2095,07±0,24 а.е.м. (идуроновые кислоты, наблюдаемые в СООН-форме).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензила-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил]амино-а-Э-глюкопиранозида (№ 91).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1М, 0,15 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 27 (3,26 г, 3,62 ммоль) и акцептора глюкозила 58
- 26 020485 (3,22 г, 3,29 ммоль) в дихлорметане (115 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (2,5 г). После выдерживания в течение 1 ч 40 мин при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-и водным раствором гидрокарбоната натрия и водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над №28О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле (толуол-ацетон) с получением соединения 91 (4,66 г, 83%).
КГ=0,49 (толуол-ацетон, 7/3).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-а-Э-глюкопиранозида (№ 92).
К раствору соединения 91 (4,66 г, 2,71 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (542 мл), прибавляют гидразинацетат (1,2 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 2 ч магнитной мешалкой дополнительно прибавляют такое же количество реактива и через 2 ч смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле (толуол-ацетон) с получением соединения 92 (3,83 г, 87%).
КГ=0,42 (толуол-ацетон, 3/1).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензила-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идолиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 93).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1М, 0,15 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 27 (3,2 г, 3,55 ммоль) и акцептора глюкозила 92 (3,83 г, 2,36 ммоль) в дихлорметане (106 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (1,8 г). После выдерживания в течение 2,5 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и водным раствором хлорида натрия, высушивания (над №-ь8О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле (этилацетат/толуол) с получением соединения 93 (3,36 г, 61%).
КГ=0,47 (толуол-этилацетат, 1/1).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 94).
К раствору соединения 93 (3,36 г, 1,42 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (280 мл), прибавляют гидразинацетат (0,645 г, 4,93 молярного эквивалента). После перемешивания в течение 2,5 ч магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 94 (3,01 г, 96%).
КГ=0,43 (толуол-ацетон, 4/1).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Оглюкопиранозида (№ 95).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1 мл) в атмосфере аргона при 20°С прибавляют к раствору имидата 71 (0,29 г, 0,3 ммоль) и акцептора глюкозила 94 (3,01 г, 1,33 ммоль) в дихлорметане (60 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (0,93 г). После перемешивания в течение 10 мин магнитной мешалкой при -20°С (по анализу ТСХ) дополнительно прибавляют имидат 71 с интервалом от 10 мин до 2,5 ч до общего количества 3,19 г. После выдерживания в течение 20 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии до нейтральной реакции и после фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и водным раствором хлорида натрия, высушивания (над №-ь8О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 95 (2,58 г, 61%).
КГ=0,45 (толуол-ацетон, 4/1).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бен- 27 020485 зилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 96).
К раствору соединения 95 (1,18 г, 0,37 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (111 мл), прибавляют 1М метанольный раствор метилата натрия (1,1 мл) в присутствии молекулярного сита 3А (463 мг). После перемешивания в течение 20 ч при комнатной температуре смесь нейтрализуют смолой Ро\уе.х 50\νΧ4 в Н+-форме. После фильтрования и концентрирования остаток очищают на силикагеле смесью толуол/ацетон с получением соединения 96 (773 мг, 77%).
Ρί=0,51 (толуол-ацетон, 4/1).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 97).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (761 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 96 (324 мг, 120 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (11 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 17 ч магнитной мешалкой при 55°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 0,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют метанолом и далее очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме и, в случае необходимости, снова вводят в реакцию в тех же самых условиях. Полученное соединение 97 используют непосредственно на следующей стадии.
Κί=0,5 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение метил (метил-2-О-аммонийсульфонато-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Оглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Э-глюкопиранозида (№ 98).
К раствору ранее полученного соединения 97 в метаноле (16 мл) прибавляют фторид аммония (361 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при 55°С в течение 48 ч реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ш,Ш-диметилформамид/вода, 75/20/5, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением соединения 98 (410 мг, 95%, 2 стадии).
Κί=0,28 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
- 28 020485
Получение метил(3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-Обензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Оглюкопиранозида (№ 99).
К раствору соединения 98 (202 мг, 57 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (9 мл), при 0°С по каплям прибавляют 1н. водный раствор ЫОН (1,8 мл, 7,9 эквивалента на функциональную группу сложного метилового эфира). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ν,Νдиметилформамид/вода, 75/20/5, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 99, которое используют непосредственно на следующей стадии.
К!=0,41 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение метил(2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-амино-2-дезоксиа-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозида (№ 100).
К раствору ранее полученного соединения 99 в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (13 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (529 мг, 8,4 ммоль) и РД/С, 10% (1,24 г). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 15 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерЬаДех® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 100 (78 мг, 66%, 2 стадии).
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 1992,8; экспериментальная масса |М-№-Н|: 1971,03±0,10 а.е.м. (идуроновые кислоты, наблюдаемые в СООН-форме).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Э- 29 020485 глюкопиранозида (№ 101).
К раствору соединения 96 (570 мг, 194 мкмоль) в метаноле (66 мл) прибавляют фторид аммония (575 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при комнатной температуре в течение 14 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон) с получением соединения 101 (282 мг, 54%).
КТ=0,37 (толуол-ацетон, 7/3).
Получение метил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-Отриэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 102).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (376 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 101 (160 мг, 59 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (5,3 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 17 часов магнитной мешалкой при 55°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 0,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют метанолом и далее очищают на колонке ЬН-20, используя смесь этанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме. Полученное соединение используют непосредственно на следующей стадии.
КТ=0,52 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение метил (метил-2-О-аммонийсульфонато-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Оглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оаммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 103).
К раствору ранее полученного соединения 102 в метаноле (2,5 мл) прибавляют фторид аммония (42 мг, 60 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при комнатной температуре в течение 3 ч, далее при 45°С в течение 18 ч и затем при 55°С в течение 4 ч дополнительно прибавляют фторид аммония (14 мг, 20 мол. экв.) и реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч при 55°С и затем при комнатной температуре в течение 60 ч. Далее реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ы^-диметилформамид/вода, 75/20/5, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением соединения 103 (35 мг, 54%).
КТ=0,54 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение метил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-Олитийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 104).
К раствору соединения 103 (155 мг, 41,6 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран 1:1 (7 мл) при 0°С по каплям прибавляют 1н. водный раствор ЫОН (1,4 мл, 8,4 эквивалента на функциональную группу сложного метилового эфира). После перемешивания в течение 1 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/вода, 95/5, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 104 (114 мг, 90%).
КТ=0,25 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 11/7/1,6/4).
Получение метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 105).
К раствору соединения 104 (110 мг, 36 мкмоль) в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (8 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (298 мг, 4,72 ммоль) и Рб/С, 10% (715 мг). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 15 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, час- 30 020485 тично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерЬабех® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 105 (63 мг, 80%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Р2О) δ 5,08 ИоИА7111, 5,23* С1с711, 5,14 ИоИА71, 5,24* С1с\ 5,14 ИоИА17, 5,24* С1сш, 5,14 МоИА11, 4,73 С1с1 *: сигналы могут взаимозаменяться.
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-трет-бутилдифенилсилил-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Оглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 106).
Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата (1М, 0,2 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -15°С прибавляют к раствору имидата 63 (0,59 г, 0,54 ммоль) и акцептора глюкозила 92 (0,58 г, 0,36 ммоль) в дихлорметане (25 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (0,4 г). После выдерживания в течение 45 мин при -15°С (по анализу ТСХ) дополнительно прибавляют имидат 63 (0,39 г, 0,35 ммоль) и трет-бутилдиметилсилилтрифлат в дихлорметане (1М, 1,1 мл). После выдерживания в течение 1 ч 10 мин при -15°С прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии до нейтральной реакции. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия, высушивания (над Ыа28О4) и упаривания досуха остаток очищают на колонке ЬН-20, используя смесь этанол/дихлорметан, 1/1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме и остаток очищают на силикагеле (этилацетат/толуол) с получением соединения 106 (0,69 г, 75%).
И=0,16 (толуол-ацетон, 9/1).
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-6-О-трет-бутилдифенилсилил-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 107).
К раствору соединения 106 (1,41 г, 0,552 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (110 мл), прибавляют гидразинацетат (0,254 г, 2,76 молярного эквивалента). После перемешивания в течение 2 ч 40 мин магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 107 (1,15 г, 85%).
Κί=0,16 (толуол-ацетон, 9/1).
- 31 020485
Получение метил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-Оацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-трет-бутилдифенилсилил-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2 О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4) -3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Оглюкопиранозида (№ 108).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1,1 мл) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 38 (0,67 г, 0,75 ммоль) и акцептора глюкозила 107 (1,23 г, 0,49 ммоль) в дихлорметане (32 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (0,55 г). После выдерживания в течение 1,5 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии до нейтральной реакции и после фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия, высушивания (над №28О4) и упаривания досуха остаток очищают на колонке ЬН-20, используя смесь этанол/дихлорметан, 1/1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме и остаток очищают на силикагеле с получением соединения 108 (0,93 г, 59%).
М=0,24 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 109).
К раствору соединения 108 (1,17 г, 0,36 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (109 мл), прибавляют 1 М метанольный раствор метилата натрия (1,6 мл) в присутствии молекулярного сита 3А (458 мг). После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре смесь нейтрализуют смолой Эо\уех 50\νΧ4 в Н+-форме. После фильтрования и концентрирования остаток очищают на силикагеле смесью циклогексан/этилацетат с получением соединения 109 (680 мг, 69%).
М=0,34 (толуол-ацетон, 7/3).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-О-трет-бутилдифенилсилил-а-Э-глюкопиранозида (№ 110).
- 32 020485
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (267 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 109 (144 мг, 49 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (4,4 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 16 ч магнитной мешалкой при 55°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 0,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют метанолом и далее очищают на колонке ΕΗ-20, используя смесь метанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме. Полученное соединение используют непосредственно на следующей стадии.
И=0,42 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение метил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо3-О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-Оаммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-а-Э-глюкопиранозида (№ 111).
К раствору ранее полученного соединения 110 в метаноле (5 мл) прибавляют фторид аммония (133 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при 55°С в течение 48 ч реакционную смесь очищают на колонке ΕΗ-20, используя смесь метанол/вода, 95/5, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме. В случае необходимости неочищенный продукт реакции снова вводят в реакцию и обрабатывают в тех же самых условиях с получением соединения 111 (117 мг, 85%, 2 стадии).
Κί=0,31 (ΑсΟЕΐ-пиридин-ΑсΟΗ-Η2Ο, 57/29/7,2/16).
Получение метил(3,4-ди-О-бензил-2-Э-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-а-Э-глюкопиранозида (№ 112).
К раствору соединения 111 (80 мг, 22,3 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (3,6 мл), при 0°С по каплям прибавляют 1н. водный раствор иОИ (0,7 мл, 7,8 эквивалента на функциональную группу сложного метилового эфира). После перемешивания в течение 2 ч 45 мин при 0°С и затем в течение 17,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ΕΗ-20, используя смесь метанол/^Ы-диметилформамид/вода, 75/20/5, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 112 (64 мг, 98%).
Κΐ=0,25 (АсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 56/32/7,6/18).
Получение метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезокси-а-Оглюкопиранозида (№ 113).
К раствору соединения 112 (64 мг, 21,7 мкмоль) в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (4,3 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (178 мг, 2,8 ммоль) и Ρά/С, 10% (0,42 г). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 30 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки §ерЬаάеx® С-25 и элюируют 0,2 М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 113 (29,5 мг, 65%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,18 ΙάουΑνΐ11, 5,43 С1ста, 5,24 ΙάουΑνι, 5,45 С1с\ 5,25 ΙάουΑιν, 5,43 С1сш, 5,26 ΙάουΑ11, 5,01 С1с1
- 33 020485
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2дезокси-а-6-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-Эглюкопиранозида (№ 114).
К раствору соединения 109 (135 мг, 46 мкмоль) в метаноле (16 мл) прибавляют фторид аммония (136 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при комнатной температуре в течение 9 ч и далее при -25°С в течение 15 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон) с получением соединения 114 (57 мг, 46%).
Κί=0,30 (толуол-метанол, 85/15).
Получение метил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 115).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (317 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 114 (135 мг, 50 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (4,5 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 16 ч магнитной мешалкой при 55°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 0,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют метанолом и далее очищают на колонке ЬН-20, используя смесь этанол/дихлорметан, 1:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме. Таким образом, получают соединение 115 (168 мг, 86%). Κί=0,29 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 56/32/7,6/18).
Получение метил (метил-2-О-аммонийсульфонато-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2О-аммонийсульфонато-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-аммонийсульфонато-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О- 34 020485 аммонийсульфонато-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-6-О-аммонийсульфонато-3 -О-бензил2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-а-О-глюкопиранозида (№ 116).
К раствору соединения 115 (168 мг, 43 мкмоль) в метаноле (5,6 мл) прибавляют фторид аммония (128 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при 55°С в течение 48 ч реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/вода, 95/5, в качестве элюента. В случае необходимости остаток может быть снова введен в реакцию в тех же самых условиях при контроле хода реакции (по анализу ТСХ) и очищен аналогичным образом. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением соединения 116 (109 мг, 81%).
К£=0,21 (АсОЕ-пиридин-АсОН-Н2О, 56/32/7,6/18).
Получение метил(3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-Обензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-6-Олитийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 117).
К раствору соединения 116 (89 мг, 28,5 мкмоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (3,8 мл), при 0°С по каплям прибавляют 1н. водный раствор ЫОН (0,7 мл). После перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 19 ч при комнатной температуре реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ш,Ш-диметилформамид/вода 75/20/5 в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме и, в случае необходимости, реакцию осуществляют снова и затем производят обработку аналогичным образом с получением требуемого соединения 117 (70 мг, 81%).
КГ=0,12 (АеОЕЬпиридин-АсОН-Н2О, 56/32/7,6/18).
Получение метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозида (№ 118).
К раствору соединения 117 (35 мг, 11,6 мкмоль) в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (2,3 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (95 мг, 1,51 ммоль) и РЪ/С, 10% (229 мг). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч 30 мин при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки §ерЪапе\® О-25 и элюируют 0, 2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 118 (11,1 мг, 45%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,17 ИоИАта1, 5,42 О1ета, 5,25 ИоИА^, 5,45 О1е\ 5,24 МоИА™, 5,44 01с111, 5,26 ИоИА11, 5,03 01с1.
- 35 020485
Получение 5-фенилпентил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4) -6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 119).
трет-Бутилдиметилсилилтрифлат (1,13 мл, 0,2 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 24 (24,9 г, 24,6 ммоль) и 5-фенилпентанола (8,3 мл, 2 молярных эквивалента) в дихлорметане (1,1 л) в присутствии молекулярного сита 4А (31 г). Через 10 минут (по анализу ТСХ) при 0°С прибавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия и перемешивают в течение 1 ч. Раствор фильтруют, промывают 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат (над №28О4) и упаривают досуха. После очистки на силикагеле получают соединение 119 (21,9 г, 88%).
ЖХ-МС: т/ζ 1034,3 [(М+№)+]. Тк=1,80 мин.
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 120).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата (2,78 мл, 0,2 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 24 (1,2 г, 1,19 ммоль) и 2пропилпентанола (1 мл, 5 мол. экв.) в дихлорметане (63 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (1,8 г). Через 10 мин (по анализу ТСХ) при 0°С прибавляют насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия. Раствор фильтруют, промывают водой, сушат (над №28О4) и упаривают досуха. После очистки на силикагеле получают соединение 120 (0,91 г, 76%).
ЖХ-МС: т/ζ 1000,3 [(М+№)+]. Тк=1,86 мин.
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-3-Э-глюкопиранозида (№ 121).
Соединение 24 (1,2 г, 1,19 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 120, с получением соединения 121 (1,09 г, 91%).
ЖХ-МС: т/ζ 1012,3 [(М+№)+]. Тк=1,88 мин.
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-3-Э-глюкопиранозида (№ 122).
Соединение 24 (1,2 г, 1,19 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 120, с получением соединения 122 (1,02 г, 82%).
И=0,34 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 5-фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4) -3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-3-О-глюкопиранозида (№ 123).
К раствору соединения 119 (21,9 г, 21,6 ммоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (260 мл), прибавляют [1Ви28пС1(ОН)]2 (0,926 г, 0,15 молярного эквивалента), полученный согласно А. ОгЪа с1 а1., СЬет. Еиг. ί. (2001) 7, 3321. После перемешивания при 35°С в течение 7,5 ч и затем при комнатной температуре в течение 17 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и далее используют непосредственно на следующей стадии.
ЖХ-МС: т/ζ 992,3 [(М+№)+]. Тк=1,74 мин.
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4) -3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-вГО-глюкопиранозида (№ 124).
К раствору соединения 120 (0,9 г, 0,93 ммоль) в смеси метанол/тетрагидрофуран, 1:1 (12 мл), прибавляют [1Ви28пС1(ОН)]2 (0,037 г, 0,14 молярного эквивалента), полученный согласно А. ОгЪа е1 а1., СЬет. Еиг. ί. (2001) 7, 3321. После перемешивания при комнатной температуре в течение 16 ч и затем при 35°С в течение 4 ч реакционную смесь концентрируют в вакууме и далее используют непосредственно на следующей стадии.
ЖХ-МС: т/ζ 959,2 [(М+№)+]. Тк=1,79 мин.
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 125).
Соединение 121 (1,09 г, 1,10 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 124, с получением соединения 125, которое используют непосредственно на следующей стадии.
ЖХ-МС: т/ζ 970,3 [(М+№)+]. Тк=10,75 мин.
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4) -3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-в-О-глюкопиранозида (№ 126).
Соединение 122 (0,844 г, 0,80 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 124. В случае неполного протекания реакции при необходимости может быть дополнительно прибавлено такое же количество реактива.
После обработки соединение 126 используют непосредственно на следующей стадии.
- 36 020485
Κί=0,41 (циклогексан-ацетон, 3/2).
Получение 5-фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-β-Όглюкопиранозида (№ 127).
Ранее полученное соединение 123 растворяют в дихлорметане (173 мл). При 0°С в атмосфере аргона последовательно прибавляют триэтиламин (7,6 мл, 2,5 мол. экв.), 4-диметиламинопиридин (1,3 г, 0,5 молярного эквивалента) и трет-бутилдифенилсилилхлорид (11,2 мл, 2 мол. экв.). После перемешивания в течение 5,5 ч магнитной мешалкой реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат (над №28О4), фильтруют и концентрируют. Полученный остаток частично очищают на диоксиде кремния (ацетон-толуол) и используют на следующей стадии.
ЖХ-МС: т/ζ 1231,2 [(М+№)+]. Тк=2,13 мин.
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Оглюкопиранозида (№ 128).
Ранее полученное соединение 124 растворяют в дихлорметане (7,4 мл). При 0°С в атмосфере аргона последовательно прибавляют 4-диметиламинопиридин (57 мг, 0,5 молярного эквивалента), триэтиламин (0,32 мл, 2,5 мол. экв.) и трет-бутилдифенилсилилхлорид (0,48 мл, 2,0 мол. экв.). После перемешивания в течение 18 ч магнитной мешалкой реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают 10%-м водным раствором гидросульфата калия, 2% водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат (над №28О4), фильтруют и концентрируют. Полученный остаток очищают на диоксиде кремния (ацетон-циклогексан) с получением соединения 128 (962 мг, 88% (2 стадии)).
И=0,46 (циклогексан-ацетон, 3/2).
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]аминоβ-Ό-глюкопиранозида (№ 129).
Полученное ранее соединение 125 обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 128, с получением соединения 129 (1,12 г, 86% (2 стадии)).
ЖХ-МС: т/ζ 1208,4 [(М+№)+]. Тк=13,01 мин.
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Оглюкопиранозида (№ 130).
Полученное ранее соединение 126 обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 128, с получением соединения 130 (0,97 г, 81% (2 стадии)).
ЖХ-МС: т/ζ 1278,3 [(М+№)+]. Тк=12,72 мин.
Получение 5 -фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 131).
К раствору ранее полученного соединения 127 в смеси толуол/этанол, 1:2 (1,01 л), прибавляют гидразинацетат (9,3 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч 10 мин магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 131 (16,7 г, 70% (3 стадии)).
ЖХ-МС: т/ζ 1133,3 [(М+№)+]. Т., 2,12 мин.
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СЭС13) δ 5 ,19 ИоИАп, 4,63 С1с'.
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 132).
К раствору соединения 128 (0,96 г, 0,82 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (164 мл), прибавляют гидразинацетат (0,38 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 132 (0,84 г, 96%).
И=0,42 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Масса: способ ИЭР, электроположительный режим: теоретическая масса = 1076,3326; экспериментальная масса: 1098,5109 |М+№|2
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СОС13) δ 5,15 ИоИАп, 4,61 С1с'.
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 133).
Соединение 129 (1,12 г, 0,94 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 132, с получением соединения 133 (1,03 г, 98%).
ЖХ-МС: т/ζ 1110,4 [(М+№)+]. Тк=13,05 мин.
- 37 020485
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СЭС13) δ 5,22 ИоИА11, 4,64 01с1.
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-3-Э-глюкопиранозида (№ 134).
Соединение 130 (0,96 г, 0,77 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 132, с получением соединения 134 (833 мг, 94%).
ЖХ-МС: т/ζ 1180,5 [(М+№)+]. Тк=12,22 мин.
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СЭС13) δ 5,21 ИоИА11, 4,54 01с1.
Получение 5-фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-Э-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 135).
трет-Бутилдиметилсилилтрифлат (0,51 мл, 0,15 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 63 (24,7 г, 22,5 ммоль) и акцептора глюкозила 131 (16,7 г, 15 ммоль) в дихлорметане (788 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (16,9 г). После выдерживания в течение 2 ч 45 мин при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над №28О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 135 (20,6 г, 67%).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, СЭС13) δ 5,35 ИоиА1У, 4,77 01с111, 5,30 ИоИА11, 4,61 01с1.
М=0,41 (толуол-ацетон, 9/1).
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 136).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1,1 мл, 0,15 моль на моль имидата) в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 63 (0,81 г, 0,73 ммоль) и акцептора глюкозила 132 (0,84 г, 0,78 ммоль) в дихлорметане (26 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (0,55 г). После выдерживания в течение 2 ч 30 мин при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над Ш28О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 136 (0,66 г, 47%).
М=0,23 (циклогексан-ацетон, 4/1).
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 137).
Донор глюкозила 63 (0,63 г, 0,57 ммоль) и акцептор глюкозила 133 (1,03 г, 0,95 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 136, с получением соединения 137 (716 мг, 62%).
Κί=0,20 (циклогексан-ацетон, 3/1).
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 138).
Донор глюкозила 63 (0,63 г, 0,57 ммоль) и акцептор глюкозила 134 (0,83 г, 0,72 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 136, с получением соединения 138.
Κί=0,34 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 5 -фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 139).
К раствору соединения 135 (20,6 г, 10,0 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (500 мл), прибавляют гидразинацетат (4,6 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч 20 мин магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 139 (16,8 г, 86%).
Κί=0,37 (толуол-ацетон, 9/1).
Получение 2-пропилпентил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-аце- 38 020485 тил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат )-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 140).
К раствору соединения 136 (20,6 г, 10,0 ммоль) в смеси толуол/этанол, 1:2 (500 мл), прибавляют гидразинацетат (4,6 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч 20 мин магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 140 (16,8 г, 86%).
К£=0,36 (толуол-метанол, 95/5).
Получение 3-циклогексилпропил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 141).
Соединение 137 (0,71 г, 0,35 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 140, с получением соединения 141 (0,65 г, 96%).
К£=0,37 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 3,3-дифенилпропил(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 142).
Соединение 138, полученное на предыдущей стадии, обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 140, с получением соединения 142 (0,518 г, 45% (2 стадии)).
К£=0,37 (толуол-ацетон, 9/1).
Получение 5-фенилпентил (метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-4-О-левулиноил-сх-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-Оацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил2- дезокси-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)3- О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 143).
трет-Бутилдиметилсилилтрифлат (0,42 мл, 0,15 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 27 (11,1 г, 12,3 ммоль) и акцептора глюкозила 139 (16,8 г, 8,6 ммоль) в дихлорметане (430 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (10,4 г). После перемешивания в течение 3 ч магнитной мешалкой при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и
- 39 020485 насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над Ыа28О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 143 (14,71 г, 64%).
И=0,31 (толуол-ацетон, 85/15).
Получение 5 -фенилпентил (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-Оацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-третбутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 144).
К раствору соединения 143 (13,51 г, 5,0 ммоль) в смеси толуол/этанол 1:2 (252 мл) прибавляют гидразинацетат (2,31 г, 5 мол. экв.). После перемешивания в течение 0,5 ч магнитной мешалкой смесь концентрируют в вакууме и затем очищают на силикагеле с получением соединения 144 (9,41 г, 72%).
И=0,18 (толуол-ацетон, 85/15).
Получение 5-фенилпентил(метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-аЬ-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Оглюкопиранозида (№ 145).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата (7,2 мл, 0,15 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 38 (4,29 г, 4,8 ммоль) и акцептора глюкозила 144 (10,33 г, 4,0 ммоль) в дихлорметане (170 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (3,7 г). После выдерживания в течение 19 ч 45 мин при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над Ыа28О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 145 (7,74 г, 58%).
И=0,4 (толуол-ацетон, 85/15).
Получение (метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-1,6-ангидро-2-азидо-3 О-бензил-2-дезокси-в-О-глюкопиранозы (№ 147).
К раствору соединения 146 (11,1 ммоль) (№О 2006/021653) в Ν,Ν-диметилформамиде (78 мл) при 0°С в атмосфере аргона прибавляют гидрокарбонат калия (5,56 г, 5 мол. экв.) и метилиодид (6,9 мл, 10 мол. экв.). После перемешивания в течение 17 ч магнитной мешалкой реактивы, в случае необходимости, могут быть прибавлены дополнительно. После завершения реакции (по анализу ТСХ) реакционную смесь концентрируют в вакууме, неочищенный продукт реакции разбавляют этилацетатом, промывают водой и насыщенным водным раствором тиосульфата натрия, сушат (над №28О4), фильтруют и концентрируют. Полученный остаток используют на следующей стадии без очистки.
ЖХ-МС: т/ζ 465,3 [(М+МН4)+]. Тк==0,8 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-1,6-ангидро-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-в-О-глюкопиранозы (№ 148).
1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата (0,95 мл, 0,15 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 38 (5,68 г, 6,35 ммоль) и акцептора глюкозила 147 (4,2 г, 7 ммоль) в дихлорметане (222 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (4,8 г). После выдерживания в течение 1,5 ч при -20°С (по анализу ТСХ) при необходимости добавляют катализатор для завершения реакции (по анализу ТСХ) и затем прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным
- 40 020485 водным раствором хлорида натрия, высушивания (над Ыа28О4), фильтрования и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 148 (3,15 г, 38%).
Ы=0,41 (циклогексан-этилацетат, 3/2).
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-1,6-ди-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-Э-глюкопиранозы (№ 149).
Остаток, полученный на предыдущей стадии, растворяют в уксусном ангидриде (13 мл) и затем при 0°С в течение 15 мин прибавляют трифторуксусную кислоту (ТФУ) (1,3 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 10 мин при 0°С и далее в течение 18 ч при комнатной температуре, затем концентрируют, упаривают совместно с толуолом и очищают на силикагеле (гептан-этилацетат) с получением соединения 149 (2,99 г, 88%).
ЖХ-МС: т/ζ 1456,0 [(М+№)+]. Тк=1,96 мин.
Получение (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(6-О-ацетил-2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-Э-глюкопиранозы (№ 150).
К раствору соединения 149 (2,99 г, 2,09 ммоль) в диэтиловом эфире (42 мл) при 0°С прибавляют бензиламин (ΒηΝΗ2) (8,2 мл, 36 мол. экв.). После перемешивания в течение 1,5 ч при 0°С и затем в течение 4,5 ч при комнатной температуре реакционную смесь нейтрализуют холодным 1н. раствором НС1 (04°С), промывают водой, сушат (над №-ь8О4). фильтруют, концентрируют и очищают на силикагеле (гептан-этилацетат) с получением соединения 150 (2,6 г, 90%).
Ы=0,21 (циклогексан-этилацетат, 3/2).
Получение трихлорацетимидата (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а,в-Оглюкопиранозы (№ 151).
К раствору соединения 150 (2,6 г, 1,9 ммоль) в дихлорметане (36 мл) в атмосфере аргона при 0°С прибавляют карбонат цезия (С§2СО3) (0,97 г, 1,6 молярного эквивалента) и трихлорацетонитрил (СС13СЩ (0,94 мл, 5,0 мол. экв.). После перемешивания в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют и затем концентрируют. Остаток очищают на силикагеле (этилацетат-циклогексан + 0,1% триэтиламина) с получением соединения 151 (2,25 г, 80%).
Ы=0,38 (циклогексан-этилацетат, 3/2).
Получение 2-пропилпентил(метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензила-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-третбутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4) -3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[ (бензилокси) карбонил ] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 152).
0,1М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата (0,46 мл, 0,15 моль на моль имидата) в дихлорметане в атмосфере аргона при -20°С прибавляют к раствору имидата 151 (0,56 г, 0,36 ммоль) и акцептора глюкозила 140 (0,59 г, 0,31 ммоль) в дихлорметане (11 мл) в присутствии молекулярного сита 4А (0,27 г). После выдерживания в течение 5 ч при -20°С (по анализу ТСХ) прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии. После фильтрования, промывки 2%-м водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем после высушивания (над №г8О4) и упаривания досуха остаток очищают на силикагеле с получением соединения 152 (0,82 г, 82%).
- 41 020485
Κί=0,32 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 3-циклогексилпролил(метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-Отрет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 153).
Донор глюкозила 151 (0,56 г, 0,36 ммоль) и акцептор глюкозила 141 (0,65 г, 0,34 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 152, с получением соединения 153 (808 мг, 73%).
Κί=0,36 (циклогексан-ацетон, 3/2).
Получение 3,3-дифенилпропил (метил-2-О-ацетил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -Обензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(6-О-ацетил-2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-2-О-ацетил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-Отрет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-2-О-ацетил-3-О-бензил-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 154).
Донор глюкозила 151 (0,51 г, 0,33 ммоль) и акцептор глюкозила 142 (0,52 г, 0,26 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 152, с получением соединения 154 (635 мг, 73%).
Κί=0,25 (циклогексан-ацетон, 7/3).
- 42 020485
Получение 5-фенилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 155).
К раствору соединения 145 (639 мг, 0,192 ммоль) в смеси метанол/дихлорметан, 3/2 (57 мл), в присутствии молекулярного сита 3А (230 мг) при 0°С прибавляют 1М метанольный раствор метилата натрия (0,427 мл). После перемешивания при 0°С в течение 3 ч и затем при комнатной температуре в течение 15 ч смесь нейтрализуют при 0°С смолой Эоие\ 50\УХ4 в Н+-форме. После фильтрования и концентрирования остаток очищают на силикагеле смесью толуол/этилацетат/этанол с получением соединения 155 (444 мг, 80%).
КГ=0,28 (толуол-этилацетат-этанол, 7/3/0,3).
Получение 2-пропилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2дезокси-2-[(бензилокси) карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 156).
Соединение 152 (420 мг, 0,128 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 155, с получением соединения 156 (178 мг, 46%).
К£=0,20 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-З-О-глюкопиранозида (№ 157).
Соединение 153 (402 мг, 0,122 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 155, с получением соединения 157 (276 мг, 75%).
К£=0,40 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 3,3-дифенилпропил (метил-3,4-ди-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)(метил-3 -О-бензил-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-З-О-глюкопиранозида (№ 158).
Соединение 154 (315 мг, 0,093 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 155, с получением соединения 158 (244 мг, 84%).
К£=0,13 (циклогексан-ацетон, 7/3).
Получение 5-фенилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-Обензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-6-О-третбутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-З-О-глюкопиранозида (№ 159).
Комплекс триэтиламин/триоксид серы (775 мг, 5 моль на гидроксигруппу) прибавляют к раствору соединения 155 (438 мг, 142 мкмоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (12,8 мл, 90 л/моль). После перемешивания в течение 17 часов магнитной мешалкой при 50°С без доступа света прибавляют при 0°С метанол и после перемешивания в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют метанолом и далее очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ν,Νдиметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 159 (571 мг, 96%).
К£=0,48 (АеОЕЬпиридин-АеОН-Н2О, 29/13/3,4/7).
Получение 2-пропилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Оглюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)- 43 020485 (1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-β -Э-глюкопиранозида (№ 160).
Соединение 156 (178 мг, 0,054 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 159, с получением соединения 160 (196 мг, 75%).
К=0,48 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3 -циклогексилпропил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Оглюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-(в-О-глюкопиранозида (№ 161).
Соединение 157 (345 мг, 0,113 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 159, с получением соединения 161 (332 мг, 70%).
КГ=0,48 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3,3-дифенилпропил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Оглюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)(1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-триэтиламмонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3 -О-бензил-2-О-триэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-Отриэтиламмонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-6-О-трет-бутилдифенилсилил2- дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 162).
Соединение 158 (300 мг, 0,096 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 159. В случае необходимости полученная смесь может быть очищена обращенно-фазовой хроматографией на колонке КР-18 при использовании смеси метанол-вода в качестве элюента с получением соединения 162 (211 мг, 52%).
КГ=0,47 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 29/13/3,4/7).
Получение 5-фенилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2[(бензилокси) карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 163).
К раствору соединения 159 (520 мг, 125 мкмоль) в метаноле (16 мл) прибавляют фторид аммония (370 мг, 80 мол. экв.). После перемешивания магнитной мешалкой при 55°С в течение 24 ч и затем при комнатной температуре в течение 16 ч реакционную смесь очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/^Шдиметилформамид, 9/1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме и остаток очищают на силикагеле, используя смесь этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода в качестве элюента. Фракции, содержащие требуемое вещество, частично концентрируют и остаток очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ν,Νдиметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением соединения 163 (295 мг, 74%).
КГ=0,45 (АсОЕ!-пиридин-АсОН-Н2О, 29/13/3,4/7).
Получение 2-пропилпентил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-Оаммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-Оглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)3- О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 164).
Соединение 160 (196 мг, 0,048 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 163. Продолжительность реакции при необходимости может быть сокращена в зависимости от результата анализа ТСХ. В то же время для получения соединения 164 (104 мг, 59%) может оказаться
- 44 020485 необходимой очистка обращенно-фазовой хроматографией.
Κί=0,32 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3-циклогексилпропил(метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 165).
Соединение 161 (230 мг, 0,055 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 164, с получением соединения 165 (115 мг, 56%).
М=0,57 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3,3-дифенилпропил (метил-3,4-ди-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3 -О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -Обензил-2-дезокси-6-О-аммонийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(метил-3-О-бензил-2-О-аммонийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат)-(1 ^4)-3-О-бензил-2дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-О-глюкопиранозида (№ 166).
Соединение 162 (43 мг, 10,2 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 163, с получением соединения 166.
Κί=0,32 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 29/13/3,4/7).
Получение 5-фенилпентил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-Олитийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил] амино-З-Э-глюкопиранозида (№ 167).
К раствору соединения 163 (289 мг, 91 мкмоль) в метаноле (3,59 мл) при 0°С прибавляют 30%-й водный раствор пероксида водорода (2,23 мл) и затем по каплям прибавляют 5н водный раствор ЫОН (1,46 мл). После перемешивания в течение 3 ч при 0°С, затем в течение 16 ч при комнатной температуре и далее в течение 27 ч при 45°С реакционную смесь нейтрализуют при 0°С прибавлением Зн раствора соляной кислоты и затем очищают на колонке ЬН-20, используя смесь метанол/Ы,Ы-диметилформамид, 9:1, в качестве элюента. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 167 (267 мг, 95%).
Κί=0,25 (ЛсОЕ1-пиридин-АсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 2-пропилпентил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(3-Обензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6О-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидр-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -Э-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил]амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 168).
Соединение 164 (104 мг, 0,029 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 167, с получением соединения 168.
М=0,28 (ЛсОЕ1-пиридин-ЛсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3-циклогексилпропил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Е-идопиранозилуронат лития)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)-(3-Обензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-6О-литийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-Олитийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-3 -О-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси) карбонил]амино-[3-О-глюкопиранозида (№ 169).
Соединение 165 (110 мг, 0,030 ммоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 167, с получением соединения 169 (76 мг, 83%).
М=0,20 (ЛсОЕ1-пиридин-ЛсОН-Н2О, 57/29/7,2/16).
Получение 3,3-дифенилпропил (3,4-ди-О-бензил-2-О-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1 ^4)-(2-азидо-3-О-бензил-2-дезокси-6-О-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1 ^4)-(3-О- 45 020485 бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-60-литийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -0-бензил-2-0-литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-( 1 ^4)-(2-азидо-3 -О-бензил-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(3 -О-бензил-2-0литийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат лития)-(1^4)-3-0-бензил-2-дезокси-2-[(бензилокси)карбонил]амино-в-Э-глюкопиранозида (№ 170).
Соединение 166 обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 167. В случае необходимости полученный остаток снова вводят в реакцию в тех же самых условиях с получением соединения 170 (27 мг, 87% (2 стадии)).
И=0,39 (Лс0Е1-пиридин-Лс0Н-Н20, 57/29/7,2/16).
Получение 5-фенилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4) -2-амино-2-дезоксиβ-Ό-глюкопиранозида (№ 171).
К раствору ранее полученного соединения 167 в смеси трет-бутанол/вода, 1:1 (16,1 мл), последовательно прибавляют формиат аммония (658 мг, 10,4 ммоль) и Рй/С, 10% (1,61 г). После интенсивного перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют, частично концентрируют в вакууме, затем раствор вносят в верх колонки ЗерЬайех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 171 (109 мг, 62%).
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 663,08 [М-3Н]3(форма кислоты).
Получение 2-пропилпентил (2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2амино-2-дезокси-6-0-натрийсульфонато-а-0-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-0-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)(1^4)-(2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезоксиβ-Ό-глюкопиранозида (№ 172).
Соединение 168 обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 171, с получением соединения 172 (47 мг, 74% (2 стадии)).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, Ό20) δ 5,29* ΜοϋΆ^, 5,50** 01ста, 5,29* ΜουΆν, 5,48** С1с'\ 5,29* МоИЛ™, 5,48** 01сш, 5,22* ΜουΑπ, 4,78** 01с!
* и **: сигналы могут взаимозаменяться.
Получение 3-циклогексилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^-4)(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезоксиβ-Ό-глюкопиранозида (№ 173).
Соединение 169 (88 мг, 29 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 171, с получением соединения 173 (63 мг, 99%).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, Ό20) δ 5,29* ΜουΑ^, 5,50** 01ста, 5,29* ΜουΑν, 5,48** С1с’\ 5,29* ΜουΑ™, 5,48** 01сш, 5,22* ΜουΑΠ, 4,78** 01^.
* и **: сигналы могут взаимозаменяться.
Получение 3,3-дифенилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2амино-2-дезокси-6-0-натрийсульфонато-а-0-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-0-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-амино-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-амино-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-0-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-амино-2-дезоксиβ-Ό-глюкопиранозида (№ 174).
Соединение 170 (14,4 мг, 5,6 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 171, с получением соединения 174 (5,5 мг, 44%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Ό20) δ 5,15 ΜουΑ^, 5,42 01ста, 5,23 ΜουΑ^, 5,40 С1с'\ 5,23 ΜουΑ™, 5,38 01сш, 5,19 ΜουΑπ, 4,39 01^.
Примеры соединений по настоящему изобретению
Приммер 1. Пентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь- 46 020485 идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (соединение № 1).
К раствору соединения 43 (39 мг, 16,6 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (2,1 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (223 мг, 2,66 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (126 мкл, 1,33 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки 8ерЬабех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 1 (30 мг, 73%).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, Э2О) δ 5,14 ΙάουΑνπΙ, 5,13 01ста, 5,16 ΙάουΑνι,
5,13 01с/ 5,15 Ιί1οΙ./\7 5,14 01с111, 5,17 ΑΙοΙ/Α , 4,51 01с1.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2509,72; экспериментальная масса: 2508,82±0,34 а.е.м.
Пример 2. Пентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (соединение № 2)
К раствору соединения 43 (26 мг, 11,1 мкмоль) в смеси Ν,Ν-диметилформамид/вода, 7:3 (2,9 мл), при 0°С по каплям прибавляют раствор диизопропилэтиламина (33 мкл, 17 мол. экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (100 мкл), а также раствор Ν-гидроксисукцинимидбутирата (27,4 мг, 13 молярных эквивалентов) в Ν,Ν-диметилформамиде (100 мкл). Перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч и затем прибавляют такое же количество реактива в тех же самых условиях в два приема. После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки 8ерйабех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 2 (26 мг, 89%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,14 ΙάουΑνπΙ, 5,12* 01ста, 5,14 ΙάουΑνι, 5,11* 01с/ 5,14 кЫ/Ас 5,10* 01сш, 5,15 ΜουΑπ, 4,50 01с!
*: сигналы могут взаимозаменяться.
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 588,1095 [М4Н]4- (форма кислоты).
Пример 3. Пентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1-оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксогексил) амино-6-О-натрийсульфонато-3-Эглюкопиранозид (соединение № 3)
N30,50
К раствору соединения 43 (10 мг, 4,27 мкмоль) в воде (0,3 мл) при 0°С по каплям прибавляют рас- 47 020485 твор диизопропилэтиламина (20 мкл, 26,8 мол. экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (200 мкл), а также раствор Ν-гидроксисукцинимидгексаноата (18,2 мг, 20 мол. экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (500 мкл). Перемешивают при 0°С в течение 15 мин и затем при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакционную смесь вносят в верх колонки §ерЬайе\® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 3 (4 мг, 34%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, О2О) δ 5,11 ΙάουΑνΐ11, 5,08 01ста, 5,14 ΙάουΑνΙ, 5,09 01с , 5,13 ΙάουΑιν, 5,10 01с111, 5,14 ИоиА11, 4,47 01с1.
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 627,6120 [М4Н]4- (форма кислоты).
Пример 4. Пентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино] -2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино] -2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)(1 ^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино] -2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-[(циклопентилкарбонил) амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (соединение № 4)
К раствору соединения 43 (9 мг, 3,84 мкмоль) в воде (0,3 мл) при 0°С по каплям прибавляют Ν,Νдиметилформамид (0,5 мл), раствор диизопропилэтиламина (7 мкл, 2,6 молярного эквивалента на свободную аминогруппу) в Ν,Ν-диметилформамиде (50 мкл), а также раствор Ν-гидроксисукцинимидциклопентанкарбоксилата (6,6 мг, 2 мол.экв. на свободную аминогруппу) в Ν,Ν-диметилформамиде (50 мкл). Перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч и затем прибавляют такое же количество реактива в тех же самых условиях в четыре приема. После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки §ерЬайе\® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 4 (5,6 мг, 55%). В случае неполного протекания реакции полученное вещество может быть снова введено в реакцию в тех же самых условиях. В случае необходимости оно может быть очищено ионообменной хроматографией при использовании полупрепаративной колонки Эюпех СагЬоРас® ΡΑ100 (9x250 мм) с градиентом от элюента А к элюенту В, причем элюент А представляет собой смесь вода/ацетонитрил (4/1) + 0,01% диметилсульфоксида, а элюент В представляет собой смесь 2н раствора хлорида натрия и ацетонитрила (4/1). Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя колонку §ерЬайе\® 0-25 и элюируя водой. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 4.
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, О2О) δ 5,06* ΙάουΑνπΙ, 5,05** 01ста, 5,08* ΙάουΑνι, 5,03** 01с'\ 5,06* ΙάουΑιν, 5,05** 01с111, 5,08* ΙάουΑπ, 4,44** 01с1.
* и **: сигналы могут взаимозаменяться.
[а]о=15,4° (с=0,25; Н2О).
Пример 5. Ундецил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (соединение № 5)
К раствору соединения 52 (32 мг, 13,2 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (2,3 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (174 мг, 2,08 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (100 мкл, 1,05 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 2,5 ч при
- 48 020485
0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки δерЬаάеx® С-25 и элюируют 0,2 М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 5 (31 мг, 91%).
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, Р2О) δ 5,14 ΙάουΑνπΙ, 5,13* С1ста, 5,14** ΙάουΑνι, 5,13* С1с'5,15** ΙάουΑΙν, 5,13* С1сш, 5,16 ΙάουΑπ, 4,50 С1с!
* и **: сигналы могут взаимозаменяться.
[а]п=18,6° (с=1; Η2Ο).
Пример 6. 5-Фенилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4) -2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (соединение № 6).
К раствору соединения 53 (36 мг, 14,8 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (2,7 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (199 мг, 2,38 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (112 мкл, 1,19 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 2,5 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки δерЬаάеx® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 6 (25,6 мг, 68%). В случае необходимости оно может быть очищено ионообменной хроматографией при использовании полупрепаративной колонки Рюпе.х Саг^Рас® ΡΑ100 (9x250 мм) с градиентом от элюента А к элюенту В, причем элюент А представляет собой смесь вода/ацетонитрил (4/1) + 0,01% диметилсульфоксида, а элюент В представляет собой смесь 2н. раствора хлорида натрия и ацетонитрила (4/1). Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя колонку §ерЬаάеx® С-25 и элюируя водой. Далее фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 6.
Химические сдвиги аномерных протонов (500 МГц, Э2О) δ 5,14 ΙάουΑνπΙ, 5,12 С1ста, 5,16 ΙάουΑνΙ, 5,12 С1с® 5,16 ΙάουΑΙν, 5,12 С1сш, 5,17 ΙάουΑπ, 4,48 С1А
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 579,0867 [М4Н]4- (форма кислоты).
Пример 7. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-[(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)]2-(1^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (соединение № 7)
К раствору соединения 77 (10,8 мг, 4,73 мкмоль) в насыщенном растворе гидрокарбоната натрия (472 мкл) при 0°С в инертной атмосфере последовательно прибавляют гидрокарбонат натрия в твердом состоянии (64 мг) и уксусный ангидрид (36 мкл). После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре реакционную смесь фильтруют (фильтр Μί11ίροκ® Ь8^Р, 5 мкм), затем вносят в колонку с гелем 8ер1иИе.х®® С-25 йпе и элюируют 0,2М водным раствором Ναί'Ί. Фракции, содержащие требуемое соединение, объединяют, вносят в колонку §еρЬаάеx® С-25 йпе (95x2 см), элюируют водой и получают 6,7 мг соединения 7.
ЯМР 'II (Р2О) δ аномерных протонов: 5,20; 5,18 (2Н); 5,17 (2Н); 5,16; 5,15; 4,78 м.д.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2453,62; экспериментальная масса: 2453,22±0,17 а.е.м.
Пример 8. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопирано- 49 020485 зилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамида-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозид (соединение № 8)
Соединение 85 (23,0 мг, 11,1 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 7, с получением соединения 8 (25,2 мг).
ЯМР 'Н (Р2О) δ аномерных протонов: 5,45; 5,42 (2Н); 5,22; 5,21; 5,20; 5,18; 5,03 м.д.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2249,53; экспериментальная масса: 2249,19±0,18 а.е.м.
Пример 9. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2дезокси-а-О-глюкопиранозид (соединение № 9)
Соединение 90 (52,1 мг, 23,9 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 7, с получением соединения 9 (50,7 мг).
ЯМР 'Н (Э2О) δ аномерных протонов: 5,18; 5,16 (2Н); 5,14; 5,15; 5,13; 5,09; 4,75 м.д.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2351,57; экспериментальная масса: 2350,88±0,10 а.е.м.
Пример 10. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-П-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2дезокси-а-О-глюкопиранозид (соединение № 10)
К раствору соединения 100 (76 мг, 37 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (3,7 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (497 мг, 5,92 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (283 мкл, 3,0 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки §ерЬабех® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 10 (61 мг, 73%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,13 1боиАУш, 5,13 С1сУ11, 5,15 1боИАУ1,
5,13 С1сУ, 5,16 1боИА1У, 5,10 С1сш, 5,16 1боИАп, 4,75 С1с1.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2249,53; экспериментальная масса: 2249,02±0,35 а.е.м.
Пример 11. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-П-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Оглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозид (соединение № 11)
- 50 020485
К раствору соединения 105 (56 мг, 26 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (2,6 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (349 мг, 4,16 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (194 мкл, 2,05 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки 8ерПаПех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 11 (45 мг, 74%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,13 ΙάουΑνπΙ, 5,12 01ста, 5,16 ΙάουΑνΙ, 5,12 01с'\ 5,15 ΙΠουΑιν, 5,13 01с111, 5,17 ΑΙοΙ,'ΑΙ, 4,72 01с1.
Масса: способ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2351,57; экспериментальная масса: 2351,13±0,06 а.е.м.
Пример 12. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонатоа-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезоксиа-Э-глюкопиранозид (соединение № 12)
К раствору соединения 113 (29,5 мг, 14 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (1,4 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (188 мг, 2,24 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (105 мкл, 1,12 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 15 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки 8ерЬаПех® 0-25 и элюируют 0, 2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 12 (29 мг, 92%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,12 ΙάουΑνπΙ, 5,06 01ста, 5,14 ΙάουΑνι, 5,11 01с'\ 5,13 ΙΠουΑΙν, 5,09 01сш, 5,14 ΑΙοΙ,'Α , 4,73 01с.
[α]ο=115,3° (с=0,3; Н2О).
Пример 13. Метил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонатоα-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4) -2-ацетамидо-2-дезокси6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (соединение № 13)
К раствору соединения 118 (27 мг, 12,6 мкмоль) в насыщенном водном растворе гидрокарбоната натрия (1,26 мл) прибавляют гидрокарбонат натрия (169 мг, 2,02 ммоль) и затем при 0°С по каплям прибавляют уксусный ангидрид (95 мкл, 1,01 ммоль). После интенсивного перемешивания в течение 3 ч при 0°С и затем в течение 16 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки §ерПаПех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 13 (26,5 мг, 89%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,12 ΙάουΑνπΙ, 5,05 01ста, 5,13 ΙάουΑνΙ, 5,10 01с'\ 5,13 ΙΠουΑΙν, 5,10 01сш, 5,14 ΑΙοΙ,'Α , 4,72 01^.
- 51 020485
Масса: сиособ ИЭР, электроотрицательный режим: теоретическая масса = 2351,57; эксиериментальная масса: 2350,96±0,20 а.е.м.
Приммер 14. 5-Фенилиентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонатоа-Э-глюкоииранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил) амино-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкоииранозид (соединение № 14)
К раствору соединения 171 (126 мг, 56,9 мкмоль) в смеси Ν,Ν-диметилформамид/вода, 7:3 (12,6 мл), ири 0°С ио каилям ирибавляют раствор диизоироиилэтиламина (148 мкл, 14,9 молярного эквивалента) в Ν,Ν-диметилформамиде (100 мкл), а также раствор Ν-гидроксисукцинимидбутирата (116 мг, 11 мол. экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (100 мкл). Перемешивают ири комнатной темиературе в течение 3 ч и затем ирибавляют такое же количество реактива в тех же самых условиях в три ириема. После иеремешивания в течение 23 ч ири комнатной темиературе реакционную смесь вносят в верх колонки §ерЬабех® 0-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, исиользуя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с иолучением требуемого соединения 14 (133 мг, 93%) .
Химические сдвиги аномерных иротонов (600 МГц, Э2О) δ 5,07 ΙάουΑνπΙ, 4,99 Ο1ον11. 5,09 ΙάουΑνΙ, 5,04 01с’\ 5,10 ΙάουΑιν, 5,01 01с111, 5,06 ИоиА11, 4,38 01с1.
[α]η=50,5° (с=1; Н2О).
Пример 15. 2-Проиилиентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонатоа-Э-глюкоииранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил) амино-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2- (1-оксобутил) амино-З-Э-глюкоииранозид (соединение № 15)
Соединение 172 (47 мг, 22 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, оиисанной для синтеза соединения 14, с иолучением соединения 15 (46 мг, 85%).
Химические сдвиги аномерных иротонов (600 МГц, Э2О) δ 5,33 ΙάουΑνπΙ, 5,30 01ста, 5,35 ΙάουΑνι,
5,24 01с\ 5,36 ΙάουΑΙν, 5,27 01сш, 5,32 ΙάουΑπ, 4,63 01с!
|α| 60° (с=1; Н2О).
Пример 16. 3-Циклогексилироиил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1 ^-4)(2-дезокси-2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-аЬ-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкоииранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидоа-Э-глюкоииранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-дезокси-2-ацетамидо-3-О-глюкоииранозид (соединение № 16)
Соединение 172 (10 мг, 4,56 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, оиисанной для синтеза соединения 13, с иолучением соединения 16 (8,8 мг, 82%).
Химические сдвиги аномерных иротонов (600 МГц, Э2О) δ 5,15 ΙάουΑνπΙ, 5,08 01ста, 5,17 ΙάουΑνΙ,
5,13 01с\ 5,17 ΙάουΑΙν, 5,11 01сш, 5,16 ΙάουΑπ, 4,50 01с/ [α]η=+40,9° (с=0,88; Н2О).
Пример 17. 3-Циклогексилироиил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идоииранозилуронат натрия)-(1 ^-4)- 52 020485 (2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил) амино-а-И-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2- (1-оксобутил) амино-[3-И-глюкопиранозид (соединение № 17)
Соединение 173 (10 мг, 4,56 мкмоль) обрабатывают аналогично методике, описанной для синтеза соединения 14, с получением соединения 17 (7,7 мг, 69%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, И2О) δ 5,23 1ДоИАУ111, 5,20 С1сУ11, 5,25 ИоИАУ1, 5,15 С1сУ, 5,26 ИоИА1У, 5,17 С1сш, 5,22 ИоИАп, 4,57 С1с1.
[α]η=+53,8° (с=0,77; Н2О).
Пример 18. 3,3-Дифенилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонатоа-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2- (1-оксобутил) амино-в-И-глюкопиранозид (соединение № 18)
К раствору соединения 174 (5,5 мг, 2,4 мкмоль) в смеси Ν,Ν-диметилформамид/вода, 2:1 (4,8 мл), при 0°С по каплям прибавляют раствор диизопропилэтиламина (63 мкл, 15 мол. экв.) в Ν,Νдиметилформамиде (43 мкл), а также раствор Ν-гидроксисукцинимидбутирата (49 мг, 11 мол. экв.) в Ν,Ν-диметилформамиде (43 мкл). Перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч и затем прибавляют такое же количество реактива в тех же самых условиях в три приема. После перемешивания в течение 24 ч при комнатной температуре реакционную смесь вносят в верх колонки ЗерЬаДех® С-25 и элюируют 0,2М раствором хлорида натрия. Фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя ту же самую колонку и элюируя водой. Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением требуемого соединения 18 (6 мг, 98%).
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, И2О) δ 5,22 1ДоИАУ111, 5,19 С1сУ11, 5,23 ИоИАУ1,
5,13 С1сУ, 5,23 ИоИА1У, 5,17 С1сш, 5,20 ИоИАп, 4,48 С1с1.
[а]п=+242 (с=0,48, Н2О).
Пример 19. 5-Фенилпентил (2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2- (3 -метил-1 -оксобутил)амино-6-Онатрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-а-И-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(3-метил-1-оксобутил)амино-в-И-глюкопиранозид (соединение № 19)
Раствор соединения 171 (84 мг, 37,8 мкмоль) в смеси Ν,Ν-диметилформамид/вода, 7:3 (8,4 мл), обрабатывают 1-[(3-метилбутаноил)окси]пирролидин-2,5-дионом аналогично методике синтеза соединения 14 с получением требуемого соединения 19 (41,8 мг, 43%). В случае необходимости оно может быть очищено ионообменной хроматографией при использовании полупрепаративной колонки Июпех СагЬоРас® РА100 (9x250 мм) с градиентом от элюента А к элюенту В, причем элюент А представляет собой смесь вода/ацетонитрил (4/1) + 0,01% диметилсульфоксида, а элюент В представляет собой смесь 2н раствора хлорида натрия и ацетонитрила (4/1). Затем фракции, содержащие требуемое вещество, концентрируют и освобождают от соли, используя колонку ЗерЬаДех® С-25 и элюируя водой. Далее фракции,
- 53 020485 содержащие требуемое вещество, концентрируют в глубоком вакууме с получением чистого требуемого соединения 19.
Химические сдвиги аномерных протонов (600 МГц, Э2О) δ 5,23 ΙάουΑνπΙ, 5,19 01ста, 5,24 ΙάουΑνΙ,
5,13 01с\ 5,25 ΙάουΑιν, 5,17 01с111, 5,22 ΙάουΑπ, 4,55 01с1.
Способ ИЭР, электроотрицательный режим: детектирован многозарядный ион т/ζ 581,3517 [М4Н]4- (форма кислоты).
Соединения по настоящему изобретению были объектами фармакологических испытаний, позволивших определить их агонистическое действие в отношении рецепторов Р0Р и их активность в отношении ангиогенеза, а также в отношении постишемической реваскуляризации.
Модель ангиогенеза ΐη νϊίΐ'ο: специфическая активность в отношении ГСГ2
Модель ангиогенеза ίη νίίτο соответствует перегруппировке клеток венозного эндотелия человека на биологической матрице. Матрицу реализуют, внося в каждую из лунок 96-луночного планшета (Весΐοη ΩχΚίηΒοη 353872) 60 мкл реактива Ма1пде1®, разбавленного в соотношении 1/3 (ΟγουΊΙι ГасЮг гейисей Ма1пде1® (реактив Ма1пде1®, восстанавливающий фактор роста): ВесЮп ΩήΚίηΒοη 356230) в коллагене (коллаген хвоста крысы, тип I: ВесЮп ΩχΚίηΒοη 354249). Биологическая матрица затвердевает в течение 1 ч при 37°С.
Клетки венозного эндотелия человека (ΗυνΕΟ позиция по каталогу: С-12200-Ρ^οтοсе11) засевали на биологической матрице из расчета 7800 клетка на лунку в 120 мкл среды ЕВМ® ΕηάοίΜίπ1 Вава1 Меύίιιιη (эндотелиальная основная питательная среда), Бт^а С3121) + 2% 8νΡ (эмбриональная телячья сыворотка - Οοηζτι) + 10 мкг/мл ЬЕ0Р (ЕрЮегта1 ΟγουΤΙι РасЮг Нишаше КесοтЬ^ηаηίе (рекомбинантный эпидермальный фактор роста человека) - Οοηζτι). Клетки стимулировали посредством Р0Р2 (К&Э 8ув1ешв/234 - Р8Е - 050) в концентрации 10 нг/мл или соединениями по настоящему изобретению в течение 18 ч при 37°С в атмосфере с 5% СО2. Через 24 ч клетки наблюдали под микроскопом (объектив с 4кратным увеличением) и осуществляли анализ длин псевдотубул посредством программы визуализации (ΒIОСОМ-1οд^с^е1 νϊ<ϊο1ηθ 2000).
В данном испытании на ангиогенез ίη νίίτο соединения по настоящему изобретению показали специфическую активность в интервале от 10-6 М до 10-12 М. Например, соединения №№ 1 и 2 являются активными при 10-11 М.
Модель имплантата на целлюлозе у мышей
Данная модель представляет собой адаптацию модели, описанной Лпйгайе еί а1. (М^с^ονавси1а^ Кевеатсй, 1997, 54, 253-61), с целью испытания фармакологических соединений, способных активировать появление ангиогенеза.
Животных (близкородственных белых мышей ΒΑΕΒ/с ί) анестезировали введением внутрибрюшинно смеси ксилазин (Κοιηριιη®, 10 мг/кг)/кетамин (1ша1депе® 1000, 100 мг/кг). Спину животного брили и дезинфицировали средством ^χοπκύίικ®. На спине мыши создавали воздушный мешок инъекцией подкожно 5 мл стерильного воздуха. В верхней части спины животного выполняли разрез приблизительно 2 см длиной для введения имплантата из стерильной целлюлозы (диск диаметром 1 см, толщиной 2 мм, Се11врοη®, позиция по каталогу 0501), пропитанного 50 мкл стерильного раствора, содержащего испытуемое соединение. Затем разрез зашивали и дезинфицировали средством ^χοιικύπη;®.
В последующие после внедрения имплантата дни мышам вводили в имплантат испытуемое соединение инъекцией чрескожно (50 мкл/имплантат/день) после ингаляционной анестезии (5%-й изофлюран (Αе^^аηе®, Вах1ег)).
Через семь дней после внедрения губки мышей умерщвляли введением внутрибрюшинно летальной дозы пентобарбитала натрия (ΕΈνΑ вайе ашша1е). Затем для изъятия кожи и губки кожу разрезали на расстоянии приблизительно 1 см вокруг губки, избегая шва. Далее губку разрезали на несколько кусков и помещали в пробирки К^увет®, содержащие 1 мл лизирующего буферного раствора (Се11 Эеа1й Эе1есίίοη ΕΕΙ8Α, Клсйе). Пробирки перемешивали последовательно 4 раза в течение 20 с при режиме 4 на измельчителе клеток (Рав1Ргер® РР 120). Затем пробирки центрифугировали в течение 10 мин при 2000 д и 20°С и надосадочные жидкости замораживали при -20°С перед последующим количественным определением гемоглобина. В день анализа после размораживания пробирки снова центрифугировали и определяли концентрацию гемоглобина с реактивом Драбкина (81дша, объем на объем) на спектрофотометре при 405 нм по сравнению с эталонной серией бычьего гемоглобина (81дша).
Концентрацию гемоглобина в каждом образце выражали в мг/мл соответственно полиномиальной регрессии, полученной исходя из эталонной серии. Результаты выражали как среднее значение (± СКО) для каждой группы. Различия между группами проверяли методом ЛNОVΑ с последующей проверкой по критерию Даннетта относительно квадратного корня значений.
В данном испытании ίη νίνο соединения по настоящему изобретению показали специфическую активность в интервале от 5 до 45 нг/сайт. Например, соединения №№ 1 и 2 являются активными при 45 нг/сайт, а соединение № 7 активно при 15 нг/сайт.
При сравнении с соединением, которое является аналогичным соединению № 7 по настоящему изобретению, но в котором все группы -ΝΗ-ацил замещены группами -NΗ-8Оз-, соединение № 7 по настоя- 54 020485 щему изобретению в данном испытании показало активность на 21% больше по сравнению с упомянутым полностью сульфатированным аналогом, что доказывает важность Ν-ацильных групп в соединениях по настоящему изобретению.
Фармакокинетика
Фармакокинетический профиль соединений по настоящему изобретению оценивали по введению подкожно мышам ОР1 или С57/ВЬ6 с дозой 30 мг/кг. Системную экспозицию соединений оценивали по разовому введению животному, предварительно анестезированному пентобарбиталом. Кровь отбирали на уровне полой вены и затем помещали в пластмассовые пробирки, содержавшие гепарин лития. После центрифугирования (2000 д в течение 10 мин при 8°С) концентрацию соединений в плазме количественно определяли способом ЖХ/МС-МС.
В общем случае, испытуемые соединения обладают лучшим фармакокинетическим профилем (в частности, более высокие АИС и плазматическую концентрацию, более длительное время полувыведения) по сравнению с полностью сульфатированными аналогичными соединениями (при замене групп Ν-ацил группами -МН-§О3 -). В качестве примера фармакокинетические параметры соединений №№ 1, 6 и 7 по настоящему изобретению представлены в приведенной далее таблице по сравнению с полностью сульфатированным аналогом № 175 следующей формулы:
АИС (0-1ш): площадь под кривой (Агеа Ипйег 1ке Сигуе) между моментами времени 0 (начальное время введения соединения) и ί1α8ί (время последнего измерения).
Т1/2 (ч) : время полувыведения.
Плазм. концентрация, ΐ=4 ч: плазматическая концентрация через 4 ч.
Данные результаты показывают важность Ν-ацильных групп в соединениях по настоящему изобретению, что делает их особенно приемлемыми для применения в качестве лекарственных средств.
Из ранее изложенного следует, что соединения по настоящему изобретению обладают агонистической активностью в отношении рецепторов РСР и активностью в отношении ангиогенеза, а также в отношении постишемической реваскуляризации. Таким образом, соединения по настоящему изобретению могут быть использованы для получения лекарственных средств, в частности лекарственных средств, приемлемых для лечения болезней, требующих активации рецепторов РСР, или лекарственных средств, приемлемых при патологиях, требующих активации ангиогенеза и постишемической реваскуляризации.
Таким образом, согласно другому из аспектов настоящее изобретение относится к лекарственным средствам, содержащим соединение формулы (1)/(1') или фармацевтически приемлемую соль данного соединения.
Такие лекарственные средства находят применение в терапии, в частности при лечении ишемии (ишемии сердца, артериальной ишемии нижних конечностей), при лечении заболеваний, связанных со стенозом или обструкцией артерий, или артериитов, при лечении стенокардии, облитерирующего тромбангиита, атеросклероза, для подавления рестеноза после ангиопластики или эндартерэктомии, для заживления ран, при регенерации мышц, для выживания миобластов, при лечении периферической нейропатии, послеоперационных повреждений нервов, нейрогенной недостаточности, такой как болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, прионная болезнь и дегенерация нейронов у алкоголиков, при лечении деменции, для улучшения выживания биоинженерных трансплантатов поджелудочной железы у больных диабетом, для улучшения реваскуляризации крупных имплантатов и выживания трансплантатов, при лечении дегенерации сетчатки, пигментного ретинита, остеоартрита, преэклампсии или повреждений сосудов и острого респираторного дистресс-синдрома, при восстановлении хрящей, при восстановлении и защите костей, при восстановлении и защите волосяных фолликулов и для защиты и регулирования роста капилляров.
Ишемия представляет собой уменьшение артериальной циркуляции в органе, вызывающее понижение концентрации кислорода в поврежденных тканях. В механизмах постишемической реваскуляризации играют роль два главных механизма: ангиогенез и артериогенез. Ангиогенез представляет собой процесс образования новых капиллярных сосудов на основе ранее существовавших сосудов. Артериогенез спо- 55 020485 собствует развитию (увеличению размеров и крупности) сосудов, расположенных вокруг зоны, пораженной ишемией или лишенной сосудов.
Среди факторов роста, вовлеченных в процессы реваскуляризации, наиболее широко описана группа РСР, в частности РСР-2 (Рок!, М.к, ЬаЬат, К., §е11ке, Р.№. & 81топк, М. ТЬегареийс апдюдепект ίη сагбю1оду икшд рго!ет Гогтц1айопк. Сагб1оуакс. Кек. 49, 522-31, 2001). Таким образом, РСР2 и его рецепторы представляют собой очень подходящие мишени для терапии, направленной на индуцирование процессов ангиогенеза и артериогенеза (КЬигапа, К. & §1топк, М. ЬЫдШк Ггот апдюдепект 1г1а1з икшд ПЬгоЬ1ак1 дгоМЬ ГасЮг Гог абуапсеб аг1ег1о5с1его11с б1кеаке. Тгепбк Сагбюуакс. Меб. 13, 116-22, 2003).
Одно из применений соединений по настоящему изобретению представляет собой постишемическое лечение после окклюзии сосудов в области сердца или периферических артерий. Касательно лечения ишемии сердца одно из наиболее многообещающих клинических испытаний представляло собой клиническое испытание, при котором РСР-2 был заключен в альгинатные микросферы в присутствии гепарина (ЬаЬат, К.1. е! а1. Ьоса1 рейуакси1аг беЬуегу оГ Ьак1с ПЬгоЫак! дгоМЬ Гас1ог т раИеШк цпбегдошд согопагу Ьуракк кигдегу: геки1!к оГ а рЬаке I гапбоиЫеб, боиЬ1е-Ь1шб, р1асеЬо-соп!го11еб йга1. С1гси1абоп 100, 1865-71, 1999). Данные микросферы имплантировали рядом с ишемическим очагом на уровне миокарда. Через 90 дней у всех больных, прошедших лечение с применением РСР2, отсутствовали какие-либо симптомы ишемии сердца. По сравнению с этим в контрольной группе у 3 из 7 больных через 90 дней сохранились стойкие симптомы, а 2 больным были сделаны хирургические операции на сосудах. Интересно, что полезный эффект терапии сохранился спустя 3 года наблюдений. Данные наблюдения дают основания полагать, что соединения, имитирующие РСР2, могут обеспечивать действенную терапию при лечении последствий ишемии сердца.
При лечении стеноза коронарных артерий были осуществлены три клинических испытания по инъекции РСР2 в коронарную артерию (ЬаЬат, К.1. е! а1. 1п!гасогопагу Ьакю йЬгоЫак! дго\\1Ь Гас1ог (РСР-2) т райеп!к \νί11ι кеуеге йсЬепие Ьеай б1кеаке: геки1!к оГ а рЬаке I ореп-1аЬе1 боке екса1айоп кЮбу. 1. Ат. Со11. Сагбю1. 36, 2132-9, 2000; Ытопк, М. е! а1. РЬагтасо1од1са1 1геа1теп1 оГ согопагу айегу б1кеаке \νί11ι гесотЫпап! ЙЬгоЫак! дгоМЬ Гас1ог-2: боиЬ1е-Ь1шб, гапбоиЫеб, сойгойеб сйтса1 Ьпа1. С1гси1айоп 105, 788-93, 2002; Ипдег, Е.Р. е! а1. ЕПссй оГ а ктд1е шйасогопагу щесйоп оГ Ьакю ЙЬгоЫак! дго\\1Ь Гас!ог т к!аЬ1е апд1па рес!опк. Ат. 1. Сагбю1. 85, 1414-9, 2000). Результаты трех испытаний показали, что интракоронарные инфузии РСР2 хорошо переносятся и значительно улучшают состояние больных. Таким образом, соединения, описанные в настоящем изобретении, могут находить применение при лечении заболеваний, связанных со стенозом коронарных артерий, и, в частности, при лечении стенокардии.
Болезни дистальных артерий и, в частности, артерииты нижних конечностей возникают вследствие хронической обструкции артериол, снабжающих кровью крайние точки. Такие патологии касаются, главным образом, нижних конечностей. В клиническом испытании I фазы больные с патологиями периферических артерий, вызывающими хромоту, получали инъекции РСР2 ГО^агоик, Ό.Ρ. е! а1., Ваыс ПЬгоЬ1ак! дго\\1Ь Гас!ог ш райеп!к χνίΐΐι ш!егт1!!еп! с1аибюайоп: геки1!к оГ а рЬаке I Ьпа1. 1. Ат. Со11. Сагбю1. 36, 1239-44, 2000). В данном случае РСР2 хорошо переносился такими больными, при этом клинические данные указывают на благоприятное действие РСР2, в частности, в отношении улучшения ходьбы. Упомянутые клинические данные указывают на то, что соединения по настоящему изобретению представляют собой действенное терапевтическое средство для лечения болезней, связанных с обструкцией дистальных артерий.
Болезнь Бюргера или облитерирующий тромбангиит поражает дистальные сосудистые структуры и характеризуется дистальным артериитом ног с болями и изъязвлениями. В данном случае индукция ангиогенеза и васкулогенез могут представлять собой терапию при такой патологии. Соединения по настоящему изобретению обеспечивают действенную терапию при облитерирующем тромбангиите.
Периферическая нейропатия представляет собой аксональное или демиелинизирующее поражение двигательного и/или чувствительного периферического нерва, которое вызывает потерю чувствительности дистальных членов. Одно из наиболее серьезных вторичных осложнений диабета представляет собой хроническое развитие периферической нейропатии. В данном случае было показано, что РСР2 индуцировал регенерацию аксонов, что может обеспечивать действенную терапию при лечении повреждений периферических нервов и, таким образом, при периферической нейропатии (Ваыс ПЬгоЫак! дго\\1Ь Гас!ог 1коГогтк ргото!е ахопа1 е1опдайоп апб ЬгапсЫпд оГ аби1! кепкогу пеигопк ш уйго. КЬтаксЬе^кк! Ь., №пб1 №., Реиг1е 1., КауакеЫ Р., Кокйоп Н. №игокс1епсе. 2004; 126(2):347-53). Благодаря агонистической активности в отношении рецепторов РСР соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение при периферической нейропатии больных, необязательно болеющих диабетом.
Четко установлено, что РСР2 представляет собой активатор нервных клеток в ходе развития. Недавно полученные результаты дают основания полагать, что РСР2 может быть также основным фактором для стимуляции регенерации нейронов у взрослых (8ар1еЬа Р.8., Ре1йег М. , КепбаЬ1 К.С., Маптпд №.С., Όί Ро1о А. , р1ЬгоЬ1ак! дгоМЬ Гас!ог-2 депе бейуегу кйтц1а!ек ахоп дгоМЬ Ьу аби1! гейпа1 дапдйоп се11к айег аси!е орйс пегуе т_)шу. Мо1. Се11. №игоксй 2003, Ш; 24 (3):656-72). Благодаря своей агонистической активности в отношении рецепторов РСР, соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенную терапию при устранении послеоперационных повреждений нервов, устранении ней- 56 020485 рогенной недостаточности, такой как болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, прионная болезнь, дегенерация нейронов у алкоголиков или в случае деменции.
Пролиферация и миграция клеток гладких мышц сосудов способствуют гипертрофии интимы артерий и играет, таким образом, определяющую роль в атеросклерозе и рестенозе после ангиопластики и эндартерэктомии. Было показано, что ангиогенный фактор УЕ0Р значительно уменьшал утолщение интимы, ускоряя реэндотелиализацию (Уап Ве11е, Е., МаШагй, Ь. , Тю, Р.О. & 1кпег, РМ. Ассе1егаГей епйоГЬеЬаЖаГюп Ьу 1оса1 йеПуегу оГ гесотЫпапГ Ьитап уакси1аг епйоГЬеЬа1 дготеФ ГасЮг гейисек 1п-81еШ шйта1 Гогтайоп. ВюсЬет. ВюрЬук. Кек. Соттип. 235, 311-6, 1997). Таким образом, соединения по настоящему изобретению, обладающие проангиогенной активностью, могут быть приемлемыми для лечения атеросклероза и подавления рестеноза после ангиопластики или эндартерэктомии.
Сосудистая сеть имеет существенное значение для развития и сохранения тканей. Способствуя доставке питательных веществ, кислорода и клеток, кровеносные сосуды помогают поддерживать функциональную и структурную целостность тканей. В данном случае ангиогенез и васкулогенез позволяют сохранять и осуществлять перфузию тканей после ишемии. Ангиогенные факторы роста, такие как УЕ0Р и Р0Р2, благоприятствуют, таким образом, реваскуляризации при регенерации тканей. Соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение при регенерации мышц.
Процессы мышечной регенерации дистрофически измененных или нормальных мышц зависят от доставки цитокинов и ангиогенных факторов роста на локальном уровне (ИЬЫ, 0., Э'Акккю, §., Риссц М., Сег1еГй, М. & Эе1 Кокко, М. Сго\\1Ь ГасЮг-йерепйеШ ргоЬГегайоп апй шуакюп оГ тикс1е каГеШГе се11к гесцйге 1Ье сеП-аккоааЮй ПЬппоЬЬс 8укГет. Вю1. СЬет. 383, 127-36, 2002). Было сделано предположение, что система Р0Р представляет собой систему, являющуюся критической для регенерации мышц, выживания и пролиферации миобластов (№иЬаик, Р. е1 а1. Кейисей тоЬйЬу оГ йЬгоЫак! цгосгФ ГасЮг (Р0Р)йейтепГ туоЬ1акГк т1дЫ сопГЬЬиГе 1о йукйорЫс сЬапдек ίη 1Ье тикси1а1иге оГ Р0Р2/Р0Р6/тйх Ьгр1е-тиГапГ тке. Мо1. Се11. Вю1. 23, 6037-48, 2003). Р0Р2, а также соединения по настоящему изобретению, могут быть использованы для содействия регенерации сердца. Так, например, они могут улучшать перфузию миокарда после ишемии (Непйе1, К.С. е1 а1. ЕГГес1 оГ шГгасогопагу гесотЬшапГ Ьитап уакси1аг епйоГЬеЬа1 βΐΌ\γ11ι ГасЮг оп туосагй1а1 регГикюп: еуМепсе Гог а йоке-йерепйепГ еГГес1. С1гси1аЬоп, 101, 118-21, 2000), а также выживание и распространение трансплантированных миобластов, в частности, при мышечной дистрофии Дюшенна.
Ангиогенез представляет собой феномен, имеющий существенное значение в ходе заживления ран кожи. Новообразованные сосуды доставляют кислород и питательные вещества, необходимые для восстановления тканей. В случае больных диабетом заживление представляет собой медленный и затрудненный процесс, при котором имеет место недостаточность ангиогенеза. Факторы Р0Р относятся к факторам роста, в наибольшей степени вовлеченным в процессы ангиогенеза в ходе заживления. Некоторые факторы Р0Р в значительной степени сверхэкспрессируются в клетках кожи после ранения кожи. Благодаря своей агонистической активности в отношении рецепторов Р0Р соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенную терапию при заживлении в случае больных, болеющих диабетом и не болеющих.
Трансплантация биоинженерных эквивалентов поджелудочной железы представляет собой многообещающую технологию для лечения некоторых типов диабета. На крысах, больных диабетом, было показано, что васкуляризация биоинженерных эквивалентов поджелудочной железы была более значительной в случае, когда поджелудочная железа была насыщена микросферами, содержавшими Р0Р2 (§акигац Тотопоп; §аГаке, Акта, 8итц ЗЬокЫго, 1поие, КжиГото, ШдаГа, ШГкикц ТаЬаГа, УакиЫко. ТЬе Е£йс1епГ Р^еνакси1а^^ζаί^оη Гпйисей Ьу ИЬгоЫакГ 0гоМЬ РасГог 2 АНЬ а Со11адеп-СоаГей Ое\асе Гтргоуек Фе Се11 8игу1уа1 оГ а Вюагййай Рапсгеак. Рапсгеак. 28 (3) :е70-е79, Арй1 2004). Таким образом, такая реваскуляризация улучшает выживание имплантированных биоинженерных эквивалентов поджелудочной железы и, следовательно, выживание трансплантатов. Благодаря своей агонистической активности в отношении рецепторов Р0Р соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенную терапию для улучшения выживания биоинженерных трансплантатов поджелудочной железы у больных диабетом и, в более общем случае, для улучшения реваскуляризации крупных имплантатов и, следовательно, для выживания трансплантатов.
Пигментный ретинит представляет собой патологию, вызывающую прогрессирующую дегенерацию сетчатки, характеризующуюся дегенерацией фоторецепторов и облитерацией сосудов сетчатки. ЬаЬйепгапГа еГ а1. (Ап апй-апдюдетс кГаГе ш писе апй Ьитапк νίί! гейпа1 рЬоГогесерГог се11 йедепегайоп. Ргос. Асай. §сг И8А, 98, 10368-73, 2001) предположили, что ангиогенные факторы роста регулируют невральную координацию и васкуляризацию, связанную с сетчаткой, функционируя одновременно в качестве факторов выживания фоторецепторов и в качестве регуляторов эндотелиальных клеток. В данном случае инъекция Р0Р2 в стекловидное тело замедляет дегенерацию фоторецепторов, воздействуя на выживание и ангиогенез в сетчатке (РакЮгоуюЬ Е.0., 8ГетЬег§, К.Н., Уакитига, Ό., МайЬек, М.Т. & ЬаУай, М.М. Вакю ПЬгоЫак! дгоМЬ ГасЮг апй 1оса1 1И)игу ргоГесГ рЬоГогесерГогк Ггот ЬдЫ йатаде ш ГЬе гаГ. ί. №игокск 12, 3554-67, 1992). Данные наблюдения показывают перспективность соединений по настоящему изобретению для терапии при дегенерации сетчатки и, в частности, в случае пигментного ретини- 57 020485 та.
Касательно остеоартрита осуществлено множество исследований по восстановлению разрушенных суставных хрящей. В данном случае имеются сообщения, что Р0Р2 стимулировал пролиферацию и дифференцировку хондроцитов ίη νίίτο (КаЮ Υ., 0οκροώ·ιΐΌ\νΚζ Ό. Зи1Га!еб р^ο!еοд1усаη куйкеык Ьу ^ηΠικηΙ сиНигек οΓ гаЬЬк ток!а1 скοηб^οсу!еκ §τονη ίη !ке ргекепсе οΓ йЬгоЫак! βΓονίΗ ГасЮг. ί. Се11. Βίο1. 1985 РеЬ; 100(2):477-85). Кроме того, Сиеνаκ е! а1. показали, что Р0Р2 индуцирует восстановление хрящей ίη νίνο (Сиеνаκ Р., Виг^к ί., Ваггб Α. Вакгс ГЬгоЫак! βΓονίΗ ГасЮг (Р0Р) р^οтο!еκ сагШаде гераи ίη νίνο. Вюскет. Вюркук. Кек. Ссттия 1988, Ос!. 31; 156(2) :611-8). ТакаГир е! а1. также показали, что имплантаты Р0Р2 значительным образом улучшают состояние височно-нижнечелюстных хрящей кроликов, больных остеоартритом (ТакаГир Н., δυιζιΛί Т., ОкиЬο Υ., Риртига К., Векк1ю К. Реде^та!^ οΓ агйси1аг сагй1аде беГес!к ίη !ке !етрο^οтаηб^Ьи1а^ _)οίη! οΓ гаЬЬкк Ьу ГЬгоЫак! дго\\1к ГасЮг-2: а р^1οί к!ибу. Ιη!. ί. Ога1. МахбкГас. Зигд. 2007, Ос!; 36 (10) :934-7). Данные наблюдения показывают перспективность соединений по настоящему изобретению для терапии при лечении остеоартрита и восстановлении хрящей.
В случае восстановления костей одна из существенных потребностей состоит в нахождении агентов, стимулирующих образование костной ткани. В отношении главных факторов роста установлено, что системное введение Р0Р2 облегчает восстановление костей ^ссекта!^ οΓ Ггас!иге кеа1тд ίη ηοι·!!!.!!!'^! рпта!ек Ьу ПЬгоЫак! дго\\1к ГасЮг-2. Кауадиск Η., Шкапина К., ТаЬа!а Υ., каба Υ., Αοуата Ι., Αι^-ιί ί., Шкатига Т., Шуата Υ., Татига М. ί. С1т. Εηάοαίηο1. Ме!аЬ. 2001, РеЬ; 86(2), 875-880). Локальное введение Р0Р2 в желатиновую матрицу ускоряет восстановление костей у приматов, что ведет к предположению о клинической пользе Р0Р2 при лечении переломов. Благодаря агонистическим свойствам в отношении рецепторов Р0Р соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение при восстановлении костей.
Преэклампсия представляет собой патологию плаценты, связанную с дефектами васкуляризации (Зкегег, Э.М. & ΑЬи1айа, О. Αηд^οдеηеκ^κ бигтд ^тр1аη!аί^οη, аиб р1асейа1 аиб еаг1у ешЬ^Ыс беνе1οртеη!. Р1асеШа, 22, 1-13, 2001). Такие дефекты васкуляризации могут быть обусловлены недостаточностью ангиогенеза и могут вызывать повреждения на уровне плаценты, которые могут приводить к смерти плода. Соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение для смягчения недостаточности ангиогенеза в плаценте при преэклампсии.
Помимо индуцирующего действия в отношении ангиогенеза факторы роста, такие как АР0Р или Р0Р2, защищают эндотелиальные клетки от внутренних и внешних индукторов апоптоза. Внутренний путь сигнализации активируют митохондрии в ответ на стресс, такой как депривация или повреждения ДНК, тогда как внешний путь сигнализации индуцируется связыванием проапоптотических факторов, таких как ТИР-а или Рак. В настоящее время выяснено, что АР0Р и Р0Р2 представляют собой два фактора выживания эндотелиальных клеток (ΚοΚ οΓ КаГ ίη Vаκси1а^ ΡΐΌ^Ιίοη Ггот О1к!тс! Αрοр!οί^с Зйтик: Α. ΑΠνί, ΙΌ. Ηοο6, К. РгаикГО, Ό.0. 8!ираск, Ό.Α. Скегекк: Заешсе, 4, би1у, 2003: νο1. 301. ηο. 5629, рр. 9496). Острый респираторный дистресс-синдром (ΑΚΌ8) характеризуется сердечно-сосудистыми и нейропсихиатрическими проблемами. В плане сердечно-сосудистых проблем у больных имеют место значительные повреждения сосудов и, в частности, повышенная индукция апоптоза эндотелиальных клеток. Натаскег & а1. недавно показали, что жидкости бронхоальвеолярных лаважей больных, страдающих ΑΚΌ8, проявили проапоптотическую активность в отношении эндотелиальных клеток микрососудов легкого (Титο^ Г1есгок1к ГасЮг-а1рка атб аηд^οκίаί^η аге теб1аЮгк οΓ еηбο!ке1^а1 суГОЮхюку ίη Ь^οηскοа1νеο1аг 1агадек οΓ райекк \νίΐ1ι аси!е гекриаГОгу бнРекк куШюте. Αт. ί. Кекрй. Сгк. Саге Меб. 2002, Зер. 1,166(5) :651-6: Натаскег 1., Ьисак К. , ^ηβη Н.К., Викскке δ., ΟιιικιηΙ Υ. , №ег1бе1 Α., 0гаи 0.Е., Зи!ег Р.М., Штои В.). Благодаря своей активности в отношении выживания эндотелиальных клеток соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение для улучшения сосудистой системы больных, имеющих повреждения сосудов, и, в частности, больных, страдающих ΑΚΌ3.
Эндогенная сверхэкспрессия Р0Р7 (или К0Р) и Р0Р18, возможно, представляет собой важный механизм благоприятствования пролиферации, миграции и защите волосяных фолликулов в случаях патологий или при противоопухолевом лечении (^трюке^Ке Α^^^ οΓ Р0Р атб Р0РК Ехргеккюг! ίη Зкт: Р0Р18 к Шдку Ехргеккеб ίη Наи ΕοΗΚ^ атб СараЬ1е οΓ Ыбисшд Αηадеη Ггот Те1οдеη З!аде Наи ΕοΗΚΕ^ МЯкиШ Касуагю, Α161<ο Кοт^-Ки^атοск^. Макакго Лкаба, Макакк δαζιΛί, ίιιη1<ο Ок1, к каг1д атб Кги [татига). Благодаря своей агонистической активности в отношении рецепторов Р0Р соединения по настоящему изобретению могут обеспечивать действенное лечение для восстановления и защиты волосяных фолликулов и для защиты и регулирования роста капилляров.
Настоящее изобретение в одном из других своих аспектов относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве активного вещества соединение по настоящему изобретению. Такие фармацевтические композиции содержат эффективную дозу по меньшей мере одного соединения по настоящему изобретению или одной фармацевтически приемлемой соли упомянутого соединения, а также по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент. Эксципиенты выбирают из традиционных эксципиентов, известных специалистам в данной области техники, в соответствии с требуемыми фармацевтической формой и способом введения.
В фармацевтических композициях по настоящему изобретению, предназначенных для введения пе- 58 020485 рорально, сублингвально, подкожно, внутримышечно, внутривенно, наружно, местно, интратрахеально, интраназально, чрескожно или ректально, ранее упомянутое активное вещество формулы (Ι)/(Ι') или его соль может вводиться в лекарственной форме стандартной дозы в смеси с традиционными фармацевтическими эксципиентами животным и людям для профилактики или лечения ранее упомянутых нарушений или заболеваний.
Соответствующие лекарственные формы стандартной дозы включают в себя формы для перорального приема, такие как таблетки, капсулы с мягкой или твердой желатиновой оболочкой, порошки, гранулы и растворы или суспензии для приема внутрь, формы для введения сублингвально, трансбуккально, интратрахеально, интраокулярно, интраназально, путем ингаляции, формы для введения наружно, чрескожно, подкожно, внутримышечно или внутривенно, формы для введения ректально и имплантаты. Для наружного применения соединения по настоящему изобретению можно использовать в кремах, гелях, помадах или лосьонах.
Формы для инъекций более предпочтительно представляют собой формы, содержащие традиционным образом активное соединение, растворенное в воде для инъекций в присутствии хлорида натрия. Единичная доза активного соединения должна быть адаптирована для получения требуемого терапевтического эффекта; она может находиться, например, в интервале от 0,1 до 100 мг активного вещества.
Настоящее изобретение в одном из других своих аспектов относится также к способу лечения ранее упомянутых патологий, включающему введение больному эффективной дозы соединения по настоящему изобретению или одной из его фармацевтически приемлемых солей.
1. Октасахаридные соединения формулы (Ι)

Claims (21)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ где зигзагообразная линия обозначает связь, расположенную под плоскостью или над плоскостью пиранозного цикла глюкозаминового звена;
    Κι представляет собой О-алкил, в котором алкил содержит от 1 до 16 атомов углерода и при необходимости имеет один или несколько заместителей, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из С5-С10-арилов и С3-С6-циклоалкилов;
    К2 представляет собой О8О3 - или гидроксигруппу;
    К3 представляет собой С1-С6-алкил, С3-С6-циклоалкил или С1-С6-алкил(С3-С6-циклоалкил);
    К4 представляет собой дисахарид формулы (ΙΙ)
    050, где К3 имеет определенные ранее значения;
    К5 представляет собой О8О3 - или гидроксигруппу; К6 представляет собой дисахарид формулы (ΙΙΙ) где К3 имеет определенные ранее значения;
    К7 представляет собой О8О3 - или гидроксигруппу; К8 представляет собой дисахарид формулы (Ιν)
    О8О3 (IV) где К3 имеет определенные ранее значения;
    К9 представляет собой О8О3 - или гидроксигруппу;
    в виде кислоты или в виде любой из их фармацевтически приемлемых солей.
  2. 2. Соединения по п.1, в которых Κι представляет собой или О-алкил, в котором алкил содержит от 5 до 16 атомов углерода;
    или О-алкил, в котором алкил содержит от 1 до 8 атомов углерода и имеет 1 или 2 заместителя, яв- 59 020485 ляющихся одинаковыми или различающимися и выбранных из С5-С10-арилов и С3-С6-циклоалкилов.
  3. 3. Соединения по п. 1 или 2, в которых Κι представляет собой О-алкил, в котором алкил содержит от 5 до 12 атомов углерода.
  4. 4. Соединения по любому из пп.1-3, в которых Κ представляет собой О-алкил, в котором алкил содержит от 3 до 6 атомов углерода и имеет 1 или 2 заместителя, которые являются одинаковыми или различными и выбраны из фенила и С3-С6-циклоалкилов.
  5. 5. Соединения по любому из пп.1-4, в которых К3 представляет собой алкил, содержащий от 2 до 6 атомов углерода, или С3-С6-циклоалкил.
  6. 6. Соединения по любому из пп.1-5, в которых по меньшей мере один из радикалов Κ2, Κ5, Κ7 и Κ9 представляет собой гидроксигруппу.
  7. 7. Соединения по любому из пп.1-6, в которых по меньшей мере один из радикалов Κ2, Κ5, Κ7 и Κ9 представляет собой гидроксигруппу и по меньшей мере один из радикалов Κ2, Κ5, Κ7 и Κ9 представляет собой О8О3 -.
  8. 8. Соединения по любому из пп.1-7, отличающиеся тем, что они соответствуют формуле (I'), в которой Кь Κ2, Κ3, Κ5, Κ7 и Κ9 имеют значения, определенные в любом из пп.1-7:
  9. 9. Соединения по любому из пп.1-8, выбранные из следующих соединений:
    пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозид (№ 1);
    пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил) амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозид (№ 2);
    пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксогексил) амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1-оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксогексил)амино-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (№ 3);
    пентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил) амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-[(циклопентилкарбонил)амино]-2-дезокси6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (№ 4);
    ундецил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-Э-глюкопиранозид (№ 5);
    5-фенилпентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)- 60 020485 (1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-в-О-глюкопиранозид (№ 6);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-[(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)]2-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (№ 7);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-Онатрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (№ 8);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (№ 9);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-аП-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-аΌ-глюкопиранозид (№ 10);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-аП-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (№ 11);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-аΌ-глюкопиранозид (№ 12);
    метил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1 ^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-ацетамидо-2-дезокси-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-ацетамидо-2-дезокси-6-Онатрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозид (№ 13);
    5-фенилпентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 14);
    2- пропилпентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(1оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 15);
    3- циклогексилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидо-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-ацетамидо-а-О- 61 020485 глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-2-дезокси-2ацетамидо-в-Э-глюкопиранозид (№ 16);
    3-циклогексилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси2-(1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 17);
    3,3-дифенилпропил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2(1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ьидопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-( 1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Эглюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2(1-оксобутил)амино-а-Э-глюкопиранозил)-(1^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 18) и
    5-фенилпентил(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-(2-дезокси-2-(3метил-1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-О-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонатоа-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2-дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-6-О-натрийсульфонато-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-( 1 ^4)-(2дезокси-2-(3 -метил-1 -оксобутил)амино-а-Э-глюкопиранозил)-( 1 ^4)-(2-О-натрийсульфонато-а-Ь-идопиранозилуронат натрия)-(1^4)-2-дезокси-2-(3-метил-1-оксобутил)амино-в-О-глюкопиранозид (№ 19).
  10. 10. Лекарственное средство, обладающее агонистическим действием в отношении рецепторов Р0Р, отличающееся тем, что оно включает соединение по любому из пп.1-9 или фармацевтически приемлемую соль данного соединения.
  11. 11. Фармацевтическая композиция, обладающая агонистическим действием в отношении рецепторов Р0Р, отличающаяся тем, что она включает соединение по любому из пп.1-9 или фармацевтически приемлемую соль данного соединения, а также по меньшей мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
  12. 12. Применение соединения по любому из пп.1-9 для лечения патологий, требующих активации рецепторов Р0Р.
  13. 13. Применение по п.12 для лечения патологий, требующих активации ангиогенеза и постишемической реваскуляризации.
  14. 14. Применение по п.12 или 13 для лечения ишемии, при лечении заболеваний, связанных со стенозом или обструкцией артерий, или артериитов, при лечении стенокардии, облитерирующего тромбангиита, атеросклероза, для подавления рестеноза после ангиопластики или эндартерэктомии, для заживления ран, при регенерации мышц, для выживания миобластов, при лечении периферической нейропатии, послеоперационных повреждений нервов, нейрогенной недостаточности, при лечении деменции, для улучшения выживания биоинженерных трансплантатов поджелудочной железы у больных диабетом, для улучшения реваскуляризации крупных имплантатов и выживания трансплантатов, при лечении дегенерации сетчатки, пигментного ретинита, остеоартрита, преэклампсии или повреждений сосудов и острого респираторного дистресс-синдрома, при восстановлении хрящей, при восстановлении и защите костей, при восстановлении и защите волосяных фолликулов и для защиты и регулирования роста капилляров.
  15. 15. Применение по п.14 для лечения ишемии, где ишемия выбрана из ишемии сердца и артериальной ишемии нижних конечностей.
  16. 16. Применение по п.14 для лечения нейрогенной недостаточности, выбранной из болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, прионной болезни и дегенерации нейронов у алкоголиков.
  17. 17. Соединение формулы (ν), в которой А1к представляет собой С1-С6-алкил, Κ! имеет значения, определенные в любом из пп.1-4, Рд, Рд' и Рд, являющиеся одинаковыми или отличающимися друг от друга, представляют собой защитные группы:
  18. 18. Соединение по п.17, в котором Рд, Рд' и Рд представляют собой бензил, 1ВЭР8 (третбутилдифенилсилил) и ацетил соответственно, А1к представляет собой метил, а Κ! имеет значения, определенные по любому из пп.1-4.
  19. 19. Соединение по п.17 или 18, в котором Рд, Рд' и Рд представляют собой бензил, 1ВЭР8 и ацетил соответственно, А1к представляет собой метил, а Κι выбран из таких групп, как -О-метил, -О-(СН2)5фенил, -О-СН2-СН(СэН7)2, -ОЧСНЪ-СвНц и -О-(СЩ)2-СН(фенил)2.
  20. 20. Соединение формулы (νΙ), в котором А1к представляет собой С1-С6-алкил, а Рд, Рд' и Рд, являющиеся одинаковыми или отличающимися друг от друга, представляют собой защитные группы:
    - 62 020485
  21. 21. Соединение по п.20, в котором А1к представляет собой метил, а Рд, Рд' и Рд представляют собой бензил, левулинил и ацетил соответственно.
EA201270277A 2009-08-14 2010-08-12 N-ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии EA020485B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0903968A FR2949114B1 (fr) 2009-08-14 2009-08-14 OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
PCT/FR2010/051703 WO2011018588A2 (fr) 2009-08-14 2010-08-12 OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PRÉPARATION ET LEUR APPLICATION EN THÉRAPEUTIQUE

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201270277A1 EA201270277A1 (ru) 2012-09-28
EA020485B1 true EA020485B1 (ru) 2014-11-28

Family

ID=42035764

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201270277A EA020485B1 (ru) 2009-08-14 2010-08-12 N-ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии

Country Status (27)

Country Link
US (1) US9012413B2 (ru)
EP (1) EP2464667A2 (ru)
JP (1) JP5671536B2 (ru)
KR (1) KR101718567B1 (ru)
CN (1) CN102574931B (ru)
AR (1) AR078094A1 (ru)
AU (1) AU2010283614B2 (ru)
BR (1) BR112012007883A2 (ru)
CA (1) CA2771056C (ru)
CL (1) CL2012000393A1 (ru)
CO (1) CO6612193A2 (ru)
DO (1) DOP2012000037A (ru)
EA (1) EA020485B1 (ru)
EC (1) ECSP12011671A (ru)
FR (1) FR2949114B1 (ru)
IL (1) IL218068A (ru)
MA (1) MA33573B1 (ru)
MX (1) MX2012001947A (ru)
NI (1) NI201200026A (ru)
NZ (1) NZ598174A (ru)
PE (1) PE20120915A1 (ru)
SG (2) SG178405A1 (ru)
TN (1) TN2012000052A1 (ru)
TW (1) TWI572615B (ru)
UY (1) UY32843A (ru)
WO (1) WO2011018588A2 (ru)
ZA (1) ZA201201028B (ru)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2949114B1 (fr) 2009-08-14 2011-08-26 Sanofi Aventis OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
FR2949115B1 (fr) * 2009-08-14 2012-11-02 Sanofi Aventis OLIGOSACCHARIDES N-SULFATES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE
FR2970969B1 (fr) * 2011-01-27 2013-10-18 Sanofi Aventis Oligosaccharides 3-o-alkyles activateurs des recepteurs des fgfs, leur preparation et leur application en therapeutique
EP2683746A4 (en) * 2011-03-10 2014-09-03 Callaghan Innovation Res Ltd OLIGOSACCHARIDE COMPOUNDS
CN104370980B (zh) * 2014-10-17 2017-12-01 九芝堂股份有限公司 一种抑制内源性因子x酶活性的寡糖类化合物及其药物组合物

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1992018546A1 (en) * 1991-04-17 1992-10-29 Glycomed, Inc. Sulfated polysaccharides as inhibitors of smooth muscle cell proliferation
FR2800074A1 (fr) * 1999-10-22 2001-04-27 Aventis Pharma Sa Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
US20040068108A1 (en) * 1996-06-14 2004-04-08 Philippe Duchaussoy Synthetic polysaccharides, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US481816A (en) * 1892-08-30 Coin-controlled mechanism
EP0300099A1 (en) * 1987-07-20 1989-01-25 Akzo N.V. New pentasaccharides
EP0333243A3 (en) * 1988-03-10 1989-09-27 Akzo N.V. Sulphated k5 antigen and sulphated k5 antigen fragments
IL102758A (en) 1991-08-23 1997-03-18 Akzo Nv Glycosaminoglycanoid derivatives, their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
FR2704226B1 (fr) 1993-04-22 1995-07-21 Sanofi Elf 3-desoxy oligosaccharides, leurs procedes de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
ES2147216T3 (es) 1993-09-01 2000-09-01 Akzo Nobel Nv Bisconjugados que comprenden dos sacaridos y un grupo de union.
FR2751334B1 (fr) 1996-07-19 1998-10-16 Sanofi Sa Polysaccharides synthetiques, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
FR2773804B1 (fr) 1998-01-19 2000-02-18 Sanofi Sa Polysaccharides de synthese, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques le contenant
US6617316B1 (en) 1999-10-22 2003-09-09 Aventis Pharma Oligosaccharides, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US7582737B2 (en) 2004-07-20 2009-09-01 Academia Sinica Orthogonally protected disaccharide building blocks for synthesis of heparin oligosaccharides
FR2873377B1 (fr) 2004-07-23 2006-10-13 Sanofi Synthelabo Derives d'azasucre, inhibiteurs d'heparanases, leur procede de preparation, les compositions en contenant et leur utilisation
EP2019843A2 (en) * 2006-05-25 2009-02-04 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Low molecular weight heparin composition and uses thereof
FR2949114B1 (fr) 2009-08-14 2011-08-26 Sanofi Aventis OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1992018546A1 (en) * 1991-04-17 1992-10-29 Glycomed, Inc. Sulfated polysaccharides as inhibitors of smooth muscle cell proliferation
US20040068108A1 (en) * 1996-06-14 2004-04-08 Philippe Duchaussoy Synthetic polysaccharides, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2800074A1 (fr) * 1999-10-22 2001-04-27 Aventis Pharma Sa Nouveaux oligosaccharides, leur preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
C. TABEUR ET AL.: "01 i gosacchari des corresponding to the regular sequence of heparin: chemical synthesis and interaction with FGF-2" , BIOOGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY, vol. 7, 1999, pages 2003-2012, XP002575370, cited in the application abstract *
CODEE J. D. C. ET AL.: "The synthesis of wel 1-def i ned heparin and heparan sulfate fragments" DRUG DISCOVERY TODAY: TECHNOLOGI ES, ELSEVI ER, vol. 1, no. 3, 1 December 2004 (2004-12-01), pages 317-326, XP004767969 , ISSN: 1740-6749 figure I *
KOVENSKY J. ET AL.: "Binding of Heparan Sulfate to Fibrobl ast Growth Factor-2 Total Synthesis of a Putative Pentasaccharide Binding Site", TETRAHEDRON ASYMMETRY, PERGAMON PRESS LTD, OXFORD, GB, vol. 7, no. 11, 8 November 1996 (1996-11-08), pages 3119-3128, XP004068971, ISSN: 0957-4166, DOI: DOI: 10. 1016/0957-4166(96)00412-0*scheme 2-compound 11* *

Also Published As

Publication number Publication date
SG10201404221RA (en) 2014-09-26
NI201200026A (es) 2012-05-24
TW201109020A (en) 2011-03-16
BR112012007883A2 (pt) 2016-03-15
CA2771056C (fr) 2017-11-14
IL218068A0 (en) 2012-04-30
ECSP12011671A (es) 2012-03-30
UY32843A (es) 2011-03-31
DOP2012000037A (es) 2012-04-15
CL2012000393A1 (es) 2012-09-07
KR101718567B1 (ko) 2017-03-21
JP5671536B2 (ja) 2015-02-18
MA33573B1 (fr) 2012-09-01
FR2949114A1 (fr) 2011-02-18
JP2013501839A (ja) 2013-01-17
CO6612193A2 (es) 2013-02-01
ZA201201028B (en) 2013-07-31
FR2949114B1 (fr) 2011-08-26
TWI572615B (zh) 2017-03-01
SG178405A1 (en) 2012-03-29
CN102574931A (zh) 2012-07-11
AR078094A1 (es) 2011-10-12
AU2010283614B2 (en) 2016-03-31
US9012413B2 (en) 2015-04-21
EP2464667A2 (fr) 2012-06-20
AU2010283614A1 (en) 2012-03-08
NZ598174A (en) 2014-01-31
CA2771056A1 (fr) 2011-02-17
EA201270277A1 (ru) 2012-09-28
KR20120106716A (ko) 2012-09-26
IL218068A (en) 2015-07-30
US20120214754A1 (en) 2012-08-23
WO2011018588A3 (fr) 2011-07-07
WO2011018588A2 (fr) 2011-02-17
MX2012001947A (es) 2012-09-12
TN2012000052A1 (fr) 2013-09-19
CN102574931B (zh) 2014-07-02
PE20120915A1 (es) 2012-08-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2510925B2 (ja) ガラクトサミン−ウロン酸基本（モチ―フ）を含むオリゴ糖類及びそれらの生物学的用途
HU228478B1 (en) Erythropoietin conjugates with polyethylenglycol
EA020485B1 (ru) N-ацилированные октасахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии
CA2577258C (fr) Hexadecasaccharides biotinyles, leur preparation et leur utilisation comme anticoagulants et antithrombotique de l&#39;heparine
KR20010034189A (ko) 합성 폴리사카라이드, 그의 제조 방법 및 그를 함유한제약 조성물
RU2559629C2 (ru) N-сульфатированные олигосахариды, активирующие рецепторы fgf, их получение и применение в терапии
KR20030001394A (ko) 올리고사카라이드-함유 약학 조성물 및 이의 제조방법
JPH02223525A (ja) 血管新生阻害剤
US20140094429A1 (en) Fgf receptor-activating 3-o-alkyl oligosaccharides, preparation thereof and therapeutic use thereof
ES2560467T3 (es) Pentasacáridos sintéticos que tienen vida media corta y alta actividad
Dhamale New methods for the chemical synthesis of glycosaminoglycans

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU