WO2011018588A2 - OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PRÉPARATION ET LEUR APPLICATION EN THÉRAPEUTIQUE - Google Patents

OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PRÉPARATION ET LEUR APPLICATION EN THÉRAPEUTIQUE Download PDF

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Corentin Herbert
Gilbert Lassalle
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Definitions

  • the present invention relates to N-acylated agonist octasaccharides of the FGFs / FGFRs system, to their preparation and to their therapeutic application.
  • Angiogenesis is a process of generating new capillaries. When obstruction of a blood vessel, angiogenesis, associated with arteriogenesis (dilation of capillaries), improves revascularization of the obstructed area. It has been shown in vitro and in vivo that several growth factors, such as Fibroblast Growth Factors (FGFs), stimulate the process of neovascularization.
  • FGFs Fibroblast Growth Factors
  • FGF2 (or basic FGF) is an 18 kDa protein. FGF2 induces at the endothelial cells in culture their proliferation, their migration and the production of proteases. In vivo, FGF2 promotes neovascularization phenomena. FGF2 interacts with endothelial cells via two classes of receptors, high affinity receptors with tyrosine kinase activity (FGFRs) and low affinity heparan sulfate proteoglycan (HSPG) receptors.
  • FGFRs tyrosine kinase activity
  • HSPG heparan sulfate proteoglycan
  • tyrosine kinase cell surface receptors associate as a dimer with a complex of two ligand molecules and a heparan sulfate molecule. The formation of this complex triggers a cascade of intracellular signals leading to the activation of proliferation and cell migration, two key processes involved in angiogenesis.
  • FGF2 and its receptors represent highly relevant targets for therapies aimed at activating or inhibiting angiogenesis processes.
  • Synthetic oligosaccharides have also been the subject of interaction studies with FGF receptors (C. Tabeur et al., Bioorg et al., Chem., 1999, 7, 2003-2012, C. Noti et al. J. Chem., 2006, 12, 8664-8686).
  • novel synthetic oligosaccharide compounds capable of facilitating the formation of the FGF / FGFRs complex and thus promoting the survival of endothelial cells in vitro and increasing the formation of neovessels in vitro and in vivo.
  • the present invention relates to novel octasaccharide compounds corresponding to formula (I):
  • the wavy line denotes a bond situated either below or above the plane of the pyranosic ring of the glucosamine unit
  • R 1 represents an O-alkyl group, in which said alkyl group comprises from 1 to 16 carbon atoms and is optionally substituted by one or more (for example 1 or 2) groups, identical or different, chosen from aryl and cycloalkyl groups; ,
  • R 2 represents either a 3 " OSO group or a hydroxyl group
  • R 3 represents an alkyl, cycloalkyl or alkyl-cycloalkyl group
  • R 4 represents a disaccharide of formula (II):
  • R 3 is as defined above
  • R 5 represents either a 3 " OSO group or a hydroxyl group
  • R 3 is as defined above
  • R 7 represents either a 3 " OSO group or a hydroxyl group
  • R 3 represents a disaccharide of formula (IV):
  • R 3 is as defined above
  • R 9 represents either a 3 " OSO group or a hydroxyl group.
  • alkyl group a saturated linear or branched aliphatic group. Unless otherwise indicated in the text, such an alkyl group advantageously comprises between 1 and 6 carbon atoms.
  • alkyl group advantageously comprises between 1 and 6 carbon atoms.
  • cycloalkyl group a cyclic alkyl group comprising from 3 to 6 carbon atoms, for example a cyclopentyl or cyclohexyl group;
  • alkyl-cycloalkyl group an alkyl group itself substituted with a cycloalkyl group, said alkyl and cycloalkyl groups being as defined above;
  • aryl group a cyclic aromatic group comprising between 5 and 10 carbon atoms, such as a phenyl group. Such an aryl group is optionally substituted with one or more groups such as halogen atoms and alkyl, alkoxy, thioalkyl, trifluoromethyl and phenyl groups.
  • the octasaccharides according to the invention are synthetic oligosaccharides, that is to say they are compounds obtained by total synthesis from intermediate synthons, as will be described in detail in the following. In this respect, they differ from oligosaccharides obtained by depolymerization or isolation from complex mixtures of polysaccharides, of heparin or heparin type of low molecular weight.
  • the compounds according to the invention have a well-defined structure resulting from their chemical synthesis and are in the form of pure octasaccharides, that is to say free of other oligosaccharide species.
  • the invention encompasses compounds of formula (I) in acid form or in the form of any of their pharmaceutically acceptable salts.
  • the -COO " and -SO 3 " functions are respectively in the form of -COOH and -SO 3 H.
  • pharmaceutically acceptable salt means compounds of the invention, a compound in which one or more of the functions - COO " or / and -SO 3 " are ionically bonded to a pharmaceutically acceptable cation.
  • the preferred salts according to the invention are those whose cation is chosen from alkali metal cations, in particular the Na + cation.
  • the compounds of formula (I) according to the invention also include those in which one or more hydrogen or carbon atoms have been replaced by their radioactive isotope, for example tritium or C 14 carbon.
  • radioactive isotope for example tritium or C 14 carbon.
  • the disaccharide of formula (II) is bonded to the disaccharide unit represented in formula (I) by the oxygen atom located in position 1 of its glucosamine unit,
  • glucosamine unit is understood to mean the monosaccharide unit of the following formula:
  • the other type of saccharide unit present in the compounds according to the invention is a uronic acid, more specifically an iduronic acid, corresponding to the following formula:
  • a uronic acid more specifically an iduronic acid
  • the compounds of formula (I) according to the invention which are octasaccharides, can also be represented according to the formula (I ') as follows, in which the iduronic units and the glucosamine units follow one another and in which Ri, R 2, R3, Rs, R 7 and R 9 are as defined previously:
  • alkyl group comprises from 5 to 16 carbon atoms, advantageously from 5 to 12 carbon atoms (for example a -O-pentyl, -O-undecyl or 2-propyl-pentyl group; )
  • alkyl group contains from 1 to 8 carbon atoms, advantageously from 3 to 6 carbon atoms (for example a -O-propyl or -O-pentyl group), and is substituted by 1 or 2 groups, identical or different, chosen from aryl and cycloalkyl groups (for example phenyl and cycloalkyl groups, such as cyclohexyl).
  • R 3 represents either an alkyl group comprising from 2 to 6 carbon atoms (for example a propyl or pentyl group), a cycloalkyl group (for example a cyclopentyl group).
  • alkyl group comprises from 5 to 16 carbon atoms, advantageously from 5 to 12 carbon atoms (for example a -O-pentyl, -O-undecyl or 2-propyl-pentyl group) ,
  • alkyl group contains from 1 to 8 carbon atoms, advantageously from 3 to 6 carbon atoms (for example a -O-propyl or -O-pentyl group), and is substituted with 1 or 2 groups, identical or different, chosen from aryl and cycloalkyl groups (for example phenyl and cycloalkyl groups, such as cyclohexyl),
  • R 3 represents either an alkyl group comprising from 2 to 6 carbon atoms (for example a propyl or pentyl group), or a cycloalkyl group (for example a cyclopentyl group), and
  • At least one of the groups R 2 , R 5 , R 7 and R 9 represents a hydroxyl group.
  • the compounds of the invention there may be mentioned the following octasaccharides:
  • the process for preparing the compounds according to the invention uses di- or oligosaccharide base synthons prepared as previously reported in the literature. Reference is made in particular to patents or patent applications EP 0 300 099, EP 0 529 715, EP 0 621 282 and EP 0 649 854, as well as the publication of C. Van Boeckel and M. Petitou published in Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1993, 32, 1671-1690. These synthons are then coupled to each other so as to provide a fully protected equivalent of an octasaccharide according to the invention. This protected equivalent is then converted into a compound according to the invention. In the coupling reactions mentioned above, a "donor" di- or oligosaccharide, activated on its anomeric carbon, reacts with a "acceptor” di- or oligosaccharide having a free hydroxyl.
  • the present invention therefore relates to a process for the preparation of the octasaccharides of formula (I) / (I '), characterized in that:
  • the N-acyl groups are introduced (introduction of the R 3 -CO- groups).
  • the synthesis of the completely protected equivalent of the desired octasaccharide (I) is carried out according to reactions well known to those skilled in the art, using the methods for the synthesis of oligosaccharides (for example GJ, Boons, Tetrahedron (1996), 52, 1095-1121 and patent applications WO 98/03554 and WO 99/36443), wherein a glycosidic link donor oligosaccharide is coupled with a glycosidic link acceptor oligosaccharide to lead to another oligosaccharide whose size is equal to the sum of the sizes of the two reactive species. This sequence is repeated until the compound of formula (I) is obtained, optionally in protected form.
  • oligosaccharides for example GJ, Boons, Tetrahedron (1996), 52, 1095-1121 and patent applications WO 98/03554 and WO 99/36443
  • the nature and the charge profile of the desired final compound determine the nature of the chemical entities used in the various steps of the synthesis, according to the rules well known to those skilled in the art.
  • the compounds of the invention can naturally be prepared using various strategies known to those skilled in the art of oligosaccharide synthesis. The process described above is the preferred method of the invention.
  • the compounds of formula (I) / (I ') can be prepared by other well known methods of the chemistry of sugars, described for example in “Monosaccharides, Their chemistry and their roles in natural products", PM Collins and RJ. Ferrier, J. Wiley & Sons (1995) and by GJ. Boons in Tetrahedron (1996), 52, 1095-1 121.
  • the protective groups used in the process for the preparation of the compounds of formula (I) / (I ') are those which make it possible, on the one hand, to protect a reactive function such as a hydroxyl or an amine during a synthesis and, d on the other hand, to regenerate the intact reactive function at the end of synthesis.
  • the protective groups commonly used in the chemistry of sugars as described for example in "Protective Groups in Organic Synthesis", Green et al., 3 rd Edition (John Wiley & Sons, Inc., New York).
  • the protecting groups are chosen, for example, from acetyl, methyl, pentenyl, benzoyl, levulinyl, benzyl, substituted benzyl, azides, benzyl carbamate, tert-butyldimethylsilyl (tBDMS) or tert-butyldiphenylsilyl (tBDPS) groups.
  • Activator groups may also be used; these are those conventionally used in sugar chemistry, for example according to GJ. Boons, Tetrahedron (1996), 52, 1095-121. These activating groups are chosen for example from imidates or thioglycosides.
  • the process described above makes it possible to obtain the compounds of the invention in the form of salts, advantageously in the form of the sodium salt.
  • the compounds of the invention in the form of salts can be contacted with a cation exchange resin in acid form.
  • the compounds of the invention in the form of acids can then be neutralized with a base to obtain the desired salt.
  • any mineral or organic base giving, with the compounds of formula (I) / (I') pharmaceutically acceptable salts may be used.
  • the subject of the invention is also the compounds of formula (V) below, in which Alk represents an alkyl group, Ri is as defined previously in with the compounds of formula (I) / (I '), bet Pg, Pg' and Pg ", which are identical to or different from one another, represent protective groups:
  • Such compounds are useful as synthesis intermediates for the compounds of formula (I) / (I ').
  • the subject of the invention is the compounds (V) in which Alk represents a methyl group and Pg, Pg 'and Pg "respectively represent benzyl, tBDPS and acetyl groups, More particularly from these compounds of formula (V), the invention is directed to those wherein R 1 is selected from the following groups: -O-methyl, -O- (CH 2 ) 5 -phenyl, -O-CH 2 -CH (C 3 H 7 ) 2, -O- (CH 2 ) SC 6 H 11 and -O- (CH 2 ) 2 -CH (phenyl) 2 .
  • Such compounds correspond to the disaccharides 58, 131, 132, 133 and 134 illustrated in the following synthetic schemes, which are useful for the synthesis of compounds 10, 11 and 14 to 19 according to the invention, such as will be detailed in the following.
  • the subject of the invention is also the compounds of formula (VI) below, in which Alk represents an alkyl group and Pg, Pg 'and Pg ", which are identical or different from one another, represent protective groups:
  • Such compounds are useful as synthesis intermediates for the compounds of formula (I) / (I).
  • the subject of the invention is the compound (VI) in which Alk represents a methyl group and Pg, Pg 'and Pg "respectively represent benzyl, levulinyl and acetyl groups,
  • Such a compound corresponds to the disaccharide 24 illustrated in the diagrams Synthesis which follows, which is useful for the synthesis of compounds 1 to 4 according to the invention, as will be detailed in the following.
  • Rf Retardation factor (retention time measured on the TLC compared to the front of the migration solvent)
  • reaction mixture is diluted with ethyl acetate, washed with water, dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated, then purified on silica gel (acetone-cyclohexane) to lead to 21 (15.8 g, 76%).
  • reaction mixture After 10 min of magnetic stirring at 0 ° C., then 1 h 45 at room temperature, the reaction mixture is diluted with dichloromethane, then successively washed with a 10% aqueous solution of potassium hydrogen sulphate, with water, and then with organic phase is dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated.
  • the resulting residue is dissolved in ⁇ - / -dimethylformamide (210 mL), and potassium hydrogen carbonate (17 g, 5 molar equivalents) as well as methyl iodide (21 mL, 10 molar equivalents). are added together.
  • the reaction mixture is stirred at ambient temperature for 16 hours and then concentrated in vacuo.
  • the residue is diluted with ethyl acetate and then washed with water, with a saturated aqueous solution of sodium thiosulfate, with a saturated aqueous sodium chloride solution, then dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated.
  • the compound obtained is engaged in the next step without purification.
  • a solution of tert-butyldimethylsilyl triflate in dichloromethane (1 M, 0.1 mole per mole of imidate) is added, under argon, at -15 ° C, to a solution of imidate 38 (2.61 g 2.92 mmol) and glycosyl acceptor 31 (4.78 g, 2.25 mmol) in dichloromethane (146 ml) in the presence of 4 ⁇ molecular sieve (1.99 g).
  • imidate 38 is again added at intervals of between 15 and 30 min, until the maximum consumption of the acceptor 31 is reached.
  • reaction mixture After filtration and partial concentration, the reaction mixture is purified on LH-20 exclusion column using a 1: 1 methanol / dichloromethane mixture as eluent, then after collecting the fractions containing the product and concentration in vacuo, the residue is purified on silica gel with dichloromethane / ethyl acetate / ethanol to provide compound 40 (185 mg, 69%).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (513 mg, 5 moles per hydroxyl function) is added to a solution in ⁇ /, ⁇ -dimethylformamide (6.3 ml, 90 L / mol) of compound 40 (178 mg, 70.8 ⁇ mol). .
  • methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C. and 0.5 h at room temperature, the reaction medium is purified. using an LH-20 column using a 9: 1 methanol / ⁇ /, ⁇ / -dimethylformamide mixture as eluent.
  • the product-containing fractions are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 41 (241 mg, 87%).
  • reaction mixture After filtration and partial concentration, the reaction mixture is purified on LH-20 exclusion column using a 1: 1 methanol / dichloromethane mixture as eluent, then after collecting the fractions containing the product and concentration in vacuo, the residue is purified on silica gel with toluene / acetone / ethyl acetate / ethanol to provide 46 (83 mg, 61%).
  • reaction mixture After filtration and partial concentration, the reaction mixture is purified on LH-20 exclusion column using a 1: 1 methanol / dichloromethane mixture as eluent, then after collecting the fractions containing the product and concentration in vacuo, the residue is purified on silica gel with dichloromethane / ethyl acetate / ethanol to provide compound 47 (141 mg, 69%).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (225 mg, 5 moles per hydroxyl function) was added to a solution in ⁇ -dimethylformamide (2.8 ml, 90 L / mol) of compound 46 (81 mg, 31 ⁇ mol). . After 16 hours of magnetic stirring at 50 ° C. in the absence of light, methanol (0.2 ml) is added at 0 ° C. and after stirring for 35 minutes at room temperature.
  • reaction mixture is purified using an LH-20 column using a 1: 1: 0.1 methanol / dichloromethane / ⁇ /, ⁇ / - dimethylformamide as the eluent. Fractions containing the product are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 48 (122 mg, 99%).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (385 mg, 5 moles per hydroxyl function) was added to a solution in ⁇ -dimethylformamide (4.7 ml, 90 L / mol) of compound 47 (138 mg, 53 ⁇ mol). .
  • methanol (0.35 ml) is added at 0 ° C. and after stirring for 30 minutes at 0 ° C. and then for 1 hour at room temperature, The reaction medium is purified using an LH-20 column using a mixture of 1: 1: 0.1 methanol / dichloromethane / N, N-dimethylformamide as eluent. Fractions containing the product are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 49 (194 mg, 92%).
  • Rf 0.37, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 1/3
  • Rf 0.23, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 1/3
  • Rf 0.42, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 2/1
  • Rf 0.40, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 2/1.
  • Rf 0.30, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 2/1
  • Rf 0.34, silica gel, cyclohexane / ethyl acetate 2/1
  • reaction mixture After stirring for 8 hours at room temperature, the reaction mixture is placed at -18 ° C. for 16 h and then again for 2.5 h at room temperature. The medium is then diluted with ethyl acetate and then neutralized with 1N HCl in cold (0-4 ° C.), washed with water, dried (Na 2 SO 4 ), filtered and concentrated. and purified on silica gel (ethyl acetate - cyclohexane 15/85) to yield 70 (3.83 g, 91%).
  • Rf 0.26, silica gel, ethyl acetate / pyridine / acetic acid / water 28/16 / 3.8 / 9.
  • a mixture of the glycosyl acceptor 65 (1.82 g, 1.00 mmol), imidate 27 (1.35 g, 1.50 mmol), and 4 ⁇ molecular sieve powder (1, 12 g) in dichloromethane (52 ml) is stirred under argon for 1 hour at 25 ° C.
  • the reaction mixture is cooled to -20 ° C. and then a 1M solution of tert-butyldimethylsilyl triflate in dichloromethane (224 ⁇ l) is added. After 50 minutes, the reaction medium is neutralized by addition of sodium hydrogencarbonate solid. After filtration through Celite ®, the reaction mixture is diluted with dichloromethane (500 ml_).
  • Compound 80 (820 mg, 0.257 mmol) is saponified according to the method used for the preparation of compound 73 to give octasaccharide 81 (593.8 mg) after flash chromatography on silica gel column (toluene / acetone 1/0 ⁇ 0/1).
  • reaction mixture is deposited on a Sephadex ® LH20 (120 x 3 cm, dichloromethane / ethanol 1/1) followed by flash chromatography on silica gel column (methanol / water 95/5) to give compound 83 (62.7 mg).
  • Rf 0.27, silica gel, ethyl acetate / pyridine / acetic acid / water 17/9 / 2.2 / 5.
  • Rf 0.37, silica gel, ethyl acetate / pyridine / acetic acid / water 17/9 / 2.2 / 5.
  • Rf 0.25, silica gel, ethyl acetate / pyridine / acetic acid / water 17/9 / 2.2 / 5.
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (761 mg, 5 moles per hydroxyl function) is added to a solution in ⁇ -dimethylformamide (11 ml, 90 L / mol) of compound 96 (324 mg, 120 ⁇ mol). ). After 17 hours of magnetic stirring at 55 ° C. in the dark, methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C.
  • the reaction medium is diluted with methanol and then purified using an LH-20 column using a 1: 1 methanol / dichloromethane mixture as eluent.
  • the fractions containing the product are then concentrated under high vacuum and, if necessary, reactivated under the same conditions.
  • the compound obtained 97 is then directly engaged in the next step.
  • Rf 0.5 (AcOEt-pyridine-AcOH-H 2 O 1 1/7 / 1.6 / 4).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (376 mg, 5 moles per hydroxyl function) is added to a solution in ⁇ -dimethylformamide (5.3 ml, 90 L / mol) of compound 101 (160 mg, 59 ⁇ mol). .
  • methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C. and then 0.5 h at room temperature, the reaction medium is diluted. by methanol and then purified using an LH-20 column using a 1: 1 ethanol / dichloromethane mixture as eluent. The fractions containing the product are then concentrated under high vacuum. The compound obtained is then directly engaged in the next step.
  • Rf 0.24 (cyclohexane - acetone 7/3).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (267 mg, 5 moles hydroxyl function) to a solution in ⁇ /, ⁇ -dimethylformamide (4.4 ml, 90 L / mol) of compound 109 (144 mg, 49 ⁇ mol).
  • methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C. and 0.5 h at room temperature, the reaction medium is diluted. with methanol and then purified using an LH-20 column using a 1: 1 methanol / dichloromethane mixture as eluent. The fractions containing the product are then concentrated under high vacuum. The compound obtained is then directly engaged in the next step.
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (317 mg, 5 moles per hydroxyl function) is added to a solution in ⁇ /, ⁇ -dimethylformamide (4.5 ml, 90 L / mol) of compound 114 (135 mg, 50 ⁇ mol). .
  • methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C. and 0.5 h at room temperature, the reaction medium is diluted. by methanol and then purified using an LH-20 column using a 1: 1 ethanol / dichloromethane mixture as eluent. The fractions containing the product are then concentrated under high vacuum. Compound 115 (168 mg, 86%) is then obtained.
  • Compound 122 (0.844 g, 0.80 mmol) is treated according to a protocol similar to that described for the synthesis of 124. In case of non completion of the reaction, the same amount of reagent may optionally be added. After treatment, the compound 126 is directly engaged in the next step.
  • Rf 0.41 (cyclohexane-acetone 3/2).
  • the compound 123 obtained above is dissolved in dichloromethane (173 ml). At 0 ° C. and under argon, triethylamine (7.6 ml, 2.5 molar equivalents), 4-dimethylaminopyridine (1.3 g, 0.5 molar equivalents) and tert-butyldiphenylsilyl chloride (1.2 ml.sup.3) are added successively. 2 molar equivalents). After 5.5 h of magnetic stirring, the reaction medium is diluted with dichloromethane, washed with an aqueous solution of potassium hydrogen sulfate at 10%, with a saturated aqueous solution of sodium chloride, dried
  • Rf 0.46 (cyclohexane-acetone 3/2).
  • Rf 0.42 (cyclohexane-acetone 7/3).
  • glycosyl donor 63 (0.63 g, 0.57 mmol) and the glycosyl acceptor 133 (1.03 g, 0.95 mmol) are treated according to a protocol similar to that described for the synthesis of 136 to provide the compound 137 (716 mg, 62 mg). %).
  • Rf 0.20 (cyclohexane-acetone 3/1).
  • glycosyl donor 63 (0.63 g, 0.57 mmol) and the glycosyl acceptor 134 (0.83 g, 0.72 mmol) are treated according to a protocol similar to that described for the synthesis of 136 to provide compound 138.
  • Rf 0.34 (cyclohexane-acetone 7/3).
  • Rf 0.21 (cyclohexane-ethyl acetate 3/2).
  • Rf 0.38 (cyclohexane-ethyl acetate 3/2).
  • Rf 0.32 (cyclohexane-acetone 7/3).
  • glycosyl donor 151 (0.56 g, 0.36 mmol) and the glycosyl acceptor
  • Rf 0.36 (cyclohexane-acetone 3/2).
  • glycosyl donor 151 (0.51 g, 0.33 mmol) and the glycosyl acceptor
  • Rf 0.25 (cyclohexane-acetone 7/3).
  • R (CH 2 J 3 Ph 2 Preparation of 5-phenylpentyl (methyl 3,4-di-O-benzyl- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-azido-3-O-benzyl-2-deoxy- ⁇ -D) -glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (methyl 3-O-benzyl- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-azido-3-O-benzyl-2-deoxy- ⁇ -D- glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (methyl 3-O-benzyl- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-azido-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphenylsilyl) -2-deoxy- ⁇ -D-glucopy
  • Rf 0.20 (cyclohexane-acetone 7/3).
  • Triethylamine / sulfur trioxide complex (775 mg, 5 moles per hydroxyl function) is added to a solution in ⁇ /, ⁇ -dimethylformamide (12.8 ml, 90 L / mol) of compound 155 (438 mg, 142 ⁇ mol). .
  • methanol is added at 0 ° C. and after 0.5 h of stirring at 0 ° C. and then at ambient temperature for 1 h, the reaction medium is diluted. by methanol and then purified using an LH-20 column using a 9: 1 methanol / N, N-dimethylformamide mixture as eluent.
  • the product-containing fractions are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 159 (571 mg, 96%).
  • Compound 156 (178 mg, 0.054 mmol) is treated according to a protocol similar to that described for the synthesis of 159 to provide 160 (196 mg, 75%).
  • the product-containing fractions are then partially concentrated and then the residue is purified using an LH-20 column using a 9: 1 methanol / N-dimethylformamide mixture as eluent.
  • the product-containing fractions are then concentrated under high vacuum to afford 163 (295 mg, 74%).
  • Compound 168 is treated according to a protocol similar to that described for the synthesis of 171 to provide compound 172 (47 mg, 74% (2 steps)).
  • EXAMPLE 1 Sodium pentyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate H1 ⁇ 4H2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl)
  • Pentyl (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O-sodium sulfonato- ⁇ - D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate sodium) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O-sodium sulfonato - ⁇ -D-glucopyranosyl) -
  • N-dimethylformamide / water 2.9 ml
  • diisopropylethylamine 33 ⁇ l, 17 equivalents
  • molar in solution in N, N-dimethylformamide (100 ⁇ l), as well as N-hydroxysuccinimide butyrate (27.4 mg,
  • reaction medium is deposited on top of a Sephadex ® G-25 eluted with 0.2M sodium chloride was concentrated fractions containing product and desalified using the same column eluted by water. The product-containing fractions are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 2 (26 mg, 89%).
  • EXAMPLE 3 Pentyl (sodium 2-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxohexyl) amino-6-O-sodium sulfonato- ⁇ - D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate sodium) -
  • reaction medium is then deposited on top of a Sephadex ® G-25 eluted with 0.2M sodium chloride was concentrated fractions containing product and desalified using the same column eluted with water. The product-containing fractions are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 3 (4 mg, 34%).
  • EXAMPLE 4 Pentyl (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2 - [(cyclopentylcarbonyl) amino] -2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D - glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate sodium) -
  • the reaction medium is deposited on top of a Sephadex ® G-25 eluted with 0.2M sodium chloride was concentrated fractions containing product and desalted using the same column eluted by water. The fractions containing the product are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 4 (5.6 mg, 55%). In case of incomplete reaction, the product obtained can be re-engaged under the same conditions.
  • EXAMPLE 6 sodium 5-phenylpentyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D) -glucopyranosyl) -
  • EXAMPLE 7 sodium methyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) r (1 ⁇ 4) - (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D- glucopyranosyl) 1?
  • EXAMPLE 8 Sodium Methyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate H1 ⁇ 4H2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (2) Sodium ⁇ -Sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4H 2 -acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (2-O) sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-s
  • EXAMPLE 10 Sodium Methyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate H1 ⁇ 4H2-acetamido-2-deoxy- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate of sodium) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L) - sodium idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4H2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H2-O-
  • EXAMPLE 1 1 Sodium methyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (Sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) Sodium (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1) ⁇
  • EXAMPLE 12 Sodium methyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl)
  • EXAMPLE 13 Sodium methyl-2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate H1 ⁇ 4H2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl (1 ⁇ 4) - (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) Sodium (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-acetamido-2-deoxy-6-O-sodium sulfonate- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (sodium
  • EXAMPLE 14 sodium 5-phenylpentyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O-sodium sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6- O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2-)
  • reaction medium is deposited on top of a Sephadex ® G-25 eluted with 0.2M sodium chloride was concentrated fractions containing product and desalted using the same column eluted by water. Fractions containing the product are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 14 (133 mg, 93%).
  • EXAMPLE 15 sodium 2-propyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O-sodium sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) -
  • EXAMPLE 16 3-Cyclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate sodium) -d ⁇ 4) - (2-deoxy-2-acetamido-6-O-sodium sulfonate- ⁇ -D- sodium glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4H2-deoxy-2-acetamido-6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl-d ⁇ 4) Sodium (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) -d ⁇ 4) - (2-deoxy-2-acetamido- ⁇ -D-glucopyranosyl) -d ⁇
  • EXAMPLE 17 3-Cyclohexyl-propyl (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O-sodium sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosylH1 ⁇ 4) - (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6- O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (sodium 2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1)
  • EXAMPLE 18 Sodium 3,3-diphenylpropyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino-6-O) -sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4H 2 -O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate sodium) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (1-oxobutyl) amino) Sodium 6-O-sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2-) (1-
  • N-dimethylformamide / water 4.8 mL
  • diisopropylethylamine 63 ⁇ L, 15 molar equivalents
  • N-dimethylformamide (43 ⁇ l) in solution in N, N-dimethylformamide (43 ⁇ l), as well as N-hydroxysuccinimide butyrate (49 mg, 11 molar equivalents) in solution in ⁇ /, ⁇ -dimethylformamide (43 ⁇ l).
  • Stirring is maintained at room temperature for 3 hours, then the same amount of reagent is added under the same conditions three times.
  • reaction medium is deposited on top of a Sephadex ® G-25 eluted with 0.2M sodium chloride was concentrated fractions containing product and desalted using the same column eluted by water. Fractions containing the product are then concentrated under high vacuum to yield the desired compound 18 (6 mg, 98%).
  • EXAMPLE 19 sodium 5-phenylpentyl (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) - (1 ⁇ 4) - (2-deoxy-2- (3-methyl-1-oxobutyl) amino-6 Sodium ⁇ -sodium sulfonato- ⁇ -D-glucopyranosyl) - (1 ⁇ 4) - (2-O-sodium sulfonato- ⁇ -L-idopyranosyluronate) -
  • the in vitro angiogenesis model corresponds to a rearrangement of human venous endothelial cells on a biological matrix.
  • the matrix is formed by dispensing into each well of a 96 well plate (Becton Dickinson 353872), 60 .mu.l of Matrigel ® diluted 1/3 (Growth Factor Reduced Matrigel ®: Becton Dickinson 356230) in collagen (Rat Tail collagen, type I: Becton Dickinson 354249).
  • the biological matrix cures after 1 hour at 37 ° C.
  • Human venous endothelial cells (HUVEC ref: C-12200 - Promocell) seeded on the biological matrix at 7800 cells / well in 120 ⁇ l of EBM ® medium (Endothelial Basal Medium, Lonza C3121) + 2% FCS (fetal calf serum - Lonza) + hEGF (Recombinant Human Epidermal Growth Factor - Lonza) 10 ⁇ g / ml.
  • the cells are stimulated with FGF2 (R & D Systems / 234-FSE-50) 10 ng / ml or with the products of the invention for 18 hours at 37 ° C in the presence of 5% CO 2 . After 24 hours, the cells are observed under a microscope (objective X4) and the analysis of the length of the pseudo-tubules is performed using an image software (BIOCOM-software Visiolab 2000).
  • the compounds of the invention have a specific activity of between 10 -6 M and 10 -12 M.
  • Compounds Nos. 1 and 2 are active at 10-11 M.
  • This model is an adaptation of the model described by Andrade et al.
  • Animals (white mice BALB / c inbred J) are anesthetized with Xylazine mixture (Rompun ®, 10 mg / kg) / Ketamine (Imalgene ® 1000, 100 mg / kg) intraperitoneally. The back of the animal is shaved and disinfected with Hexomedine ® . A pocket of air is created subcutaneously on the back of the mouse by injecting 5 ml of sterile air. An incision of about 2 cm, on the upper back of the animal is performed to introduce a sterile cellulose implant (disc 1 cm in diameter, 2 mm thick, Cellspon ® ref 0501) impregnated with 50 ⁇ l of sterile solution containing the product to be tested. The incision is then sutured and cleaned with Hexomedine ® .
  • mice can receive in the implant the product by an injection through the skin (50 ⁇ l / implant / day) under gas anesthesia (Isoflurane 5% (Aerrane ® , Baxter)) .
  • gas anesthesia Isoflurane 5% (Aerrane ® , Baxter)
  • mice Seven days after laying the sponge, the mice are sacrificed by a lethal dose of Pentobarbital Sodium (CEVA Animal Health) administered intraperitoneally. The skin is then cut, about 1 cm around the sponge avoiding the scar to clear the skin and the sponge. The sponge is then cut into several pieces and placed in a Ribolyser ® tube containing 1 ml of lysis buffer (CeII Death Detection ELISA, Roche). The tubes are shaken 4 consecutive times, for 20 seconds, force 4, with the cell grinder (FastPrep ® FP 120). The tubes are then centrifuged for 10 minutes at 2000 g at 20 ° C. and the supernatants are frozen at -20 ° C. while waiting for the determination of hemoglobin.
  • CeII Death Detection ELISA Roche
  • the tubes are again centrifuged after thawing and the hemoglobin concentration is measured with Drabkin's reagent (Sigma, volume to volume) by spectrophotometer reading at 405 nm against a standard range of bovine hemoglobin (Sigma ).
  • the concentration of hemoglobin in each sample is expressed in mg / ml according to the polynomial regression performed from the range. The results are expressed in mean value ( ⁇ sem) for each group. Differences between the groups are tested with ANOVA followed by a Dunnett test on the square root of the values.
  • the compounds of the invention have demonstrated a specific activity of between 5 and 45 ng / site.
  • Compounds No. 1 and 2 are active at 45 ng / site
  • Compound No. 7 is active at 15 ng / site.
  • compound No. 7 By way of comparison with a compound analogous to compound No. 7 according to the invention, but in which all the -NH-acyl groups are replaced by -NH-SO 3 - groups, compound No. 7 according to In this test, the present invention has an activity that is 21% higher than that of the fully sulfated analogue, which shows the importance of the N-acyl groups in the compounds according to the invention.
  • pharmacokinetics The pharmacokinetic profile of the compounds according to the invention is evaluated after subcutaneous administration, in OF1 or C57 / BL6 mice, at a concentration of 30 mg / kg. The systemic exposure of the compounds is evaluated after single administration in the animal previously anesthetized with pentobarbital. The blood is removed from the vena cava and transferred to plastic tubes containing lithium heparin. After centrifugation (2000 g for 10 minutes at 8 ° C), the concentration of the compounds in the plasma is quantified by LC / MS-MS.
  • the tested compounds show an improved pharmacokinetic profile (in particular AUC and higher plasma concentration, longer half-life times) compared to completely sulphated analogous compounds (replacement of N-acyl groups by groups).
  • NH-SO 3 - the pharmacokinetic parameters of compounds 1, 6 and 7 according to the invention are described in the following table, in comparison with a fully sulfated analog No. 175 of the following formula:
  • AUC Area Under the Curve between 0
  • the invention therefore relates to medicaments which comprise a compound of formula (I) / (I ') according to the invention, or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • ischemia cardiac ischemia, arterial ischemia of the lower limbs
  • diseases associated with a narrowing or obstruction of the arteries or arteritis the treatment of angina pectoris.
  • treatment of thromboangiitis obliterans treatment of atherosclerosis, treatment of inhibition of restenosis after angioplasty or endoarterectomy, treatment of scarring, treatment for muscle regeneration, treatment for survival of myoblasts , treatment of peripheral neuropathy, treatment of postoperative nerve damage, treatment of nerve disorders such as Parkinson's disease, Alzheimer's disease, prion disease and neuronal degeneration in alcoholics, treatment of dementia, the treatment for improving the survival of the pancrofan bioartificial sheaves in the diabetic patient, the treatment of the improvement of graft revascularization and graft survival, the treatment of retinal degeneration, the treatment of retinitis pigmentosa, the treatment of osteoarthritis, the treatment of the pre - eclampsia or treatment of vascular lesions and acute respiratory distress syndrome, treatment for cartilage repair, treatment for bone repair and protection, treatment for repair and protection of hair follicles and for the protection and the regulation of capillary growth.
  • Ischemia is a decrease in the arterial circulation in an organ resulting in a decrease in the oxygen concentration in the injured tissues.
  • angiogenesis is the process of generating new capillaries from pre-existing vessels.
  • Arteriogenesis contributes to the development (increase in size and caliber) of collateral vessels around the ischemic or avascular zone.
  • FGF2 and in particular FGF-2 have been most widely described (Post, MJ, Laham, R., Sellke, FW & Simons, M. Therapeutic angiogenesis in cardiology using protein formulations, Cardiovasc Res 49, 522-31, 2001).
  • FGF2 and its receptors represent highly relevant targets for therapies aimed at inducing the processes of angiogenesis and arteriogenesis (Khurana, R. & Simons, M. Insights from angiogenesis trials using fibroblast growth factor for advanced arteriosclerotic disease. Trends Cardiovasc Med 13, 1 16-22, 2003).
  • One of the applications of the compounds of the invention is post-ischemic treatment after occlusion at the cardiac or peripheral arteries.
  • cardiac ischemia one of the most promising clinical trials is a clinical trial in which FGF-2 was sequestered in microspheres of alginate in the presence of heparin (Laham, RJ et al. Local perivascular delivery of basic fibroblast growth factor in undergoing coronary bypass surgery patients: results of a phase I randomized, double-blind, placebo-controlled trial, Circulation 100, 1865-71, 1999).
  • These micro-spheres were implanted near the ischemic focus at the level of the myocardium. After 90 days, all FGF2-treated patients had no ischemic heart symptoms.
  • FGF2-mimicking compounds may be a therapy of choice for treating the consequences of cardiac ischemia.
  • the compounds described in the invention may find an application in the treatment of diseases associated with a narrowing of the coronary arteries and in particular in the treatment of angina pectoris.
  • Buerger's disease or thromboangiitis obliterans affects distal vascular structures and is characterized by distal arteritis of the legs with pain and ulceration.
  • induction of angiogenesis and vasculogenesis would be a therapy for this pathology.
  • the compounds of the present invention represent a therapy of choice for thromboangiitis obliterans.
  • Peripheral neuropathy is an axonal or demyelinating lesion of the motor and / or sensory peripheral nerve that causes desensitization of the distal limbs.
  • One of the major secondary complications of diabetes is the chronic development of peripheral neuropathy.
  • FGF2 induces axonal regeneration which could be a therapy of choice in the treatment of peripheral nerve injury and thus in neuropathy.
  • Peripheral fibroblast growth factor isoforms promote axonal elongation and branching of adult sensory neurons in vitro, Klimaschewski L, Nindl W, Feurle J, Kavakebi P, Kostron H. Neuroscience, 2004, 126 (2): 347-53). Because of the FGF receptor agonist activity, the compounds of said invention would be a treatment of choice in peripheral neuropathy in healthy or diabetic patients.
  • FGF2 is an activator of nerve cells during development. Recent results suggest that FGF2 would also be a pivotal factor in promoting neuronal regeneration in adults (Sapieha PS, Peltier M, Rendahl KG, WC Manning, Di Polo A., Fibroblast growth factor-2 gene delivery stimulates axon growth by adult retinal ganglion cells after acute optic nerve injury Mol CeII Neurosci 2003 Nov; 24 (3): 656-72.
  • the compounds of said invention would be a therapy of choice in the repair of postoperative nervous damage, in the repair of nerve deficits such as Parkinson's disease, Alzheimer's disease, prion disease , neuronal degeneration in the alcoholic or in cases of dementia.
  • vascular smooth muscle cells contribute to intimal hypertrophy of the arteries and thus play a prominent role in atherosclerosis and restenosis after angioplasty and endoarterectomy.
  • An angiogenic factor, VEGF has been shown to significantly reduce intimal thickening by accelerating re-endothelialization (Van Belle, E., Maillard, L., Tio, FO & Isner, JM Accelerated endothelialization by local delivery of recombinant human vascular endothelial growth factor reduces in-stent intimal formation Biochem Biophys Res Commun 235, 31 1-6, 1997).
  • the compounds of the present invention possessing pro-angiogenic activity may be useful in the treatment of atherosclerosis and in the inhibition of restenosis after angioplasty or endoarterectomy.
  • the vascular network is essential for tissue development and preservation. By promoting the delivery of nutrients, oxygen and cells, blood vessels help maintain the functional and structural integrity of tissues.
  • angiogenesis and vasculogenesis help to preserve and infuse tissue after ischemia.
  • Angiogenic growth factors such as VEGF and FGF2 thus promote revascularization for tissue regeneration.
  • the compounds presented in the invention could represent a treatment of choice in the treatment for the regeneration of muscles.
  • the processes of muscle regeneration on dystrophic or normal muscles depend on the supply of cytokines and angiogenic growth factors at the local level (Fibbi, G., D'Alessio, S., Pucci, M., Cerletti, M. & Dei Rosso, M. Growth factor-dependent proliferation and invasion of muscle satellite cells require the cell-associated fibrinolytic system, Biol Chem 383, 127-36, 2002). It has been proposed that the FGF system is a critical system for muscle regeneration, survival and proliferation of myoblasts (Neuhaus, P.
  • FGF fibroblast growth factor
  • Angiogenesis is an essential phenomenon during cutaneous healing.
  • the newly formed vessels provide the oxygen and nutrients needed for tissue repair.
  • scarring is a slow and difficult process with angiogenesis defects.
  • FGFS are among the growth factors most involved in angiogenesis processes during the healing phase.
  • Some FGFs are highly over-regulated in dermal cells after a skin injury. By their FGF receptor agonist activities, the compounds of said invention would be a therapy of choice for the treatment of wound healing in healthy or diabetic patients.
  • the compounds of said invention represent a therapy of choice in improving the survival of the bioartificial pancreas graft in the diabetic patient and more generally in the improvement of graft revascularization. and therefore in the survival of grafts.
  • Retinitis pigmentosa is a pathology involving progressive degeneration of the retina characterized by degeneration of photoreceptors and obliteration of the retinal vessels.
  • Lahdenranta et al. (An anti-angiogenic state in mice and humans with retinal photoreceptor cell degeneration, Proc Natl Acad Sci USA 98, 10368-73, 2001) have proposed that angiogenic growth factors regulate neural coordination and associated retinal vascularization by functioning. simultaneously as photoreceptor survival factors and as regulator of endothelial cells.
  • Pre-eclampsia is a pathology of the placenta associated with a lack of vascularization (Sherer, D. M. & Abulafia, O. Angiogenesis during implantation, and placental and early embryonic development, Placenta 22, 1-13, 2001). These defects of vascularization would be due to a defect of angiogenesis and would cause disturbances in the placenta which could lead to the death of the fetus.
  • the compounds of the invention could be a treatment of choice to overcome a lack of angiogenesis in pre-eclamptic placentas.
  • VEGF vascular endothelial growth factor
  • FGF2 growth factors
  • the intrinsic signaling pathway is activated by mitochondria in response to stress such as DNA deprivation or damage
  • the extrinsic signaling pathway is induced by proapoptotic factor binding such as TNF- ⁇ or Fas.
  • VEGF and FGF2 are two cell survival factors Endothelial (RoIe of Raf in Vascular Protection from Distinct Apoptotic Stimuli: A Alavi, JD Hood, R.
  • Acute Respiratory Distress Syndrome is characterized by cardiovascular and neuropsychiatric problems.
  • cardiovascular problems patients have significant vascular lesions and in particular an induction of apoptosis of endothelial cells high. Recently, Harnacher & al.
  • bronchoalveolar lavage fluids from ARDS patients exhibited proapoptotic activity against microvascular lung endothelial cells (Tumor necrosis factor-alpha and angiostatin are mediators of endothelial cytotoxicity in bronchoalveolar washes of patients with acute respiratory distress syndrome Am J Respir Crit Care Med 2002 Sep 1; 166 (5): 651-6: Harnacher J, Lucas R, Lijnen HR, Buschke S, Dunant Y, Wendel A, Grau GE, Suter PM, Ricou B. ).
  • the products of the invention could present a treatment of choice in the vascular improvement of patients with vascular lesions and in particular patients with ARDS.
  • FGF7 or KGF
  • FGF18 Is Highly Expressed in Hair Follicles and Capable of Inducing Anagen from Telogen Hair Follicles Stage: Mitsuko Kawano, Akiko Komi-Kuramochi, Masahiro Asada, Masashi Suzuki, Junko Oki, Ju Jiang and Toru Imamura).
  • the compounds of said invention could present a treatment of choice for the repair and protection of hair follicles and in the protection and regulation of hair growth.
  • the present invention relates to pharmaceutical compositions comprising, as active principle, a compound according to the invention.
  • These pharmaceutical compositions contain an effective dose of at least one compound according to the invention, or a pharmaceutically acceptable salt of said compound, as well as at least one pharmaceutically acceptable excipient.
  • Said excipients are chosen according to the pharmaceutical form and the mode desired administration, among the usual excipients which are known to those skilled in the art.
  • compositions of the present invention for oral, sublingual, subcutaneous, intramuscular, intravenous, topical, local, intratracheal, intranasal, transdermal or rectal administration the active ingredient of formula (I) ) above or its salt may be administered in unit dosage form, in admixture with conventional pharmaceutical excipients, to animals and humans for the prevention or treatment of the above disorders or diseases.
  • Suitable unit dosage forms include oral forms such as tablets, soft or hard capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions, sublingual, oral, intratracheal, intraocular, intranasal forms of administration by inhalation, topical, transdermal, subcutaneous, intramuscular or intravenous administration forms, rectal administration forms and implants.
  • oral forms such as tablets, soft or hard capsules, powders, granules and oral solutions or suspensions
  • sublingual, oral, intratracheal intraocular, intranasal forms of administration by inhalation
  • topical, transdermal, subcutaneous, intramuscular or intravenous administration forms rectal administration forms and implants.
  • the compounds according to the invention can be used in creams, gels, ointments or lotions.
  • Injectable administration forms are particularly advantageous, comprising conventionally the active compound dissolved in water for injection, in the presence of sodium chloride.
  • the unit dose of active compound must be adapted to the desired therapeutic effect; it may be for example between 0.1 and 100 mg of active ingredient.
  • the present invention also relates to a method of treatment of the pathologies indicated above which comprises the administration to a patient of an effective dose of a compound according to the invention or a pharmaceutically acceptable salt thereof acceptable.

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Abstract

Octasaccharides N-acyles activateurs des récepteurs des FGFs, répondant à la formule (I) : dans laquelle; R1 représente un groupe O-alkyle éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes aryles ou cycloalkyles, R2 représente un groupe OSO3 - ou hydroxyle, R3 représente un groupe alkyle, cycloalkyle ou alkyl-cycloalkyle, et R4 représente un disaccharide de formule (II), R6 représente un disaccharide de formule (III) et R8 représente un disaccharide de formule (IV), où R5, R7 et R9 représentent des groupes OSO3 ou hydroxyles : Leur préparation et leur application en thérapeutique.

Description

OCTASACCHARIDES N-ACYLES ACTIVATEURS DES RECEPTEURS DES FGFs, LEUR PRÉPARATION ET LEUR APPLICATION EN THÉRAPEUTIQUE
La présente invention se rapporte à des octasaccharides N-acylés agonistes du système FGFs/FGFRs, à leur préparation et à leur application en thérapeutique.
L'angiogenèse est un processus de génération de nouveaux vaisseaux capillaires. Lors de l'obstruction d'un vaisseau sanguin, l'angiogenèse, associée à l'artériogenèse (dilatation des capillaires), améliore la revascularisation de la zone obstruée. Il a été montré in vitro et in vivo que plusieurs facteurs de croissance, tels que les Fibroblast Growth Factors (FGFs), stimulent le processus de néovascularisation.
Les FGFs sont une famille de 23 membres. Le FGF2 (ou FGF basique) est une protéine de 18 kDa. Le FGF2 induit au niveau des cellules endotheliales en culture leur prolifération, leur migration et la production de protéases. In vivo, le FGF2 favorise les phénomènes de néovascularisation. Le FGF2 interagit avec les cellules endotheliales par l'intermédiaire de deux classes de récepteurs, les récepteurs de haute affinité à activité tyrosine kinase (FGFRs) et les récepteurs de basse affinité de type héparane sulfate protéoglycane (HSPG).
Il est connu que les récepteurs de la surface cellulaire à activité tyrosine kinase s'associent sous forme de dimère à un complexe formé de deux molécules de ligand et à une molécule d'héparane sulfate. La formation de ce complexe permet de déclencher une cascade de signaux intracellulaires aboutissant à l'activation de la prolifération et de la migration cellulaire, deux processus clé impliqués dans l'angiogenèse.
Ainsi, le FGF2 et ses récepteurs représentent des cibles très pertinentes pour les thérapies visant à activer ou à inhiber les processus d'angiogenèse.
Des oligosaccharides de synthèse ont également fait l'objet d'études d'interactions avec les récepteurs des FGFs (C. Tabeur et al., Bioorg. & Med. Chem., 1999, 7, 2003-2012 ; C. Noti et al., Chem. Eur. J., 2006, 12, 8664-8686). Nous avons maintenant trouvé de nouveaux composés oligosaccharidiques de synthèse capables de faciliter la formation du complexe FGF/FGFRs et de favoriser ainsi la survie des cellules endotheliales in vitro et d'augmenter la formation de néovaisseaux in vitro et in vivo.
La présente invention a pour objet de nouveaux composés octasaccharidiques répondant à la formule (I) :
Figure imgf000004_0001
dans laquelle :
- le trait ondulé désigne une liaison située soit au-dessous, soit au-dessus du plan du cycle pyranosique de l'unité glucosamine,
- Ri représente un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 1 à 16 atomes de carbone et est éventuellement substitué par un ou plusieurs (par exemple 1 ou 2) groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes aryles et cycloalkyles,
- R2 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle,
- R3 représente un groupe alkyle, cycloalkyle ou alkyl-cycloalkyle, et
- R4 représente un disaccharide de formule (II) :
Figure imgf000004_0002
dans laquelle :
- R3 est tel que défini ci-dessus,
- R5 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle, et
- Rβ représente un disaccharide de formule (III) :
Figure imgf000005_0001
dans laquelle :
- R3 est tel que défini ci-dessus,
- R7 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle, et
- R3 représente un disaccharide de formule (IV) :
Figure imgf000005_0002
dans laquelle :
- R3 est tel que défini ci-dessus,
- R9 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle.
Dans le cadre de la présente invention, et sauf mention différente dans le texte, on entend par :
- groupe alkyle : un groupe aliphatique saturé linéaire ou ramifié. Sauf indication différente dans le texte, un tel groupe alkyle comprend avantageusement entre 1 et 6 atomes de carbone. A titre d'exemples, on peut citer les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, te/f-butyle, pentyle, etc ;
- groupe cycloalkyle : un groupe alkyle cyclique comprenant de 3 à 6 atomes de carbone, par exemple un groupe cyclopentyle ou cyclohexyle ;
- groupe alkyle-cycloalkyle : un groupe alkyle lui-même substitué par un groupe cycloalkyle, lesdits groupes alkyle et cycloalkyle étant tels que définis ci- dessus ; et
- groupe aryle : un groupe aromatique cyclique comprenant entre 5 et 10 atomes de carbone, tel qu'un groupe phényle. Un tel groupe aryle est éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes tels que les atomes d'halogène et les groupes alkyles, alcoxy, thioalkyles, trifluorométhyle et phényle. Les octasaccharides selon l'invention sont des oligosaccharides de synthèse, c'est-à-dire qu'il s'agit de composés obtenus par synthèse totale à partir de synthons intermédiaires, comme cela sera décrit en détail dans ce qui suit. A ce titre ils diffèrent d'oligosaccharides obtenus par dépolymérisation ou isolement à partir de mélanges complexes de polysaccharides, de type héparines ou héparines de bas poids moléculaires. Notamment, les composés selon l'invention présentent une structure bien déterminée résultant de leur synthèse chimique et se présentent sous forme d'octasaccharides purs, c'est-à-dire exempts d'autres espèces oligosaccharidiques. L'invention englobe les composés de formule (I) sous forme acide ou sous la forme de l'un quelconque de leurs sels pharmaceutiquement acceptables. Dans la forme acide, les fonctions -COO" et -SO3 " sont respectivement sous forme -COOH et -SO3H. On entend par sel pharmaceutiquement acceptable des composés de l'invention, un composé dans lequel une ou plusieurs des fonctions -COO" ou/et -SO3 " sont liées de façon ionique à un cation pharmaceutiquement acceptable. Les sels préférés selon l'invention sont ceux dont le cation est choisi parmi les cations des métaux alcalins, notamment le cation Na+.
Les composés de la formule (I) selon l'invention comprennent également ceux dans lesquels un ou plusieurs atomes d'hydrogène ou de carbone ont été remplacés par leur isotope radioactif, par exemple le tritium ou le carbone C14. De tels composés marqués sont utiles dans les travaux de recherche, de métabolisme ou de pharmacocinétique, en tant que ligands dans les essais biochimiques.
Dans la formule (I) des composés selon la présente invention, il est entendu que :
- le disaccharide de formule (II) est lié à l'unité disaccharidique représentée dans la formule (I) par l'atome d'oxygène situé en position 1 de son unité glucosamine,
- de même, le disaccharide de formule (III) est lié au disaccharide de formule
(II) par l'atome d'oxygène situé en position 1 de son unité glucosamine,
- de même, le disaccharide de formule (IV) est lié au disaccharide de formule
(III) par l'atome d'oxygène situé en position 1 de son unité glucosamine. On entend par « unité glucosamine » l'unité monosaccharidique de formule suivante :
Figure imgf000007_0001
L'autre type d'unité saccharidique présente dans les composés selon l'invention est un acide uronique, plus précisément un acide iduronique, répondant à la formule suivante :
Figure imgf000007_0002
Ainsi, les composés de formule (I) selon l'invention, qui sont des octasaccharides, peuvent également être représentés selon la formule (I') comme suit, dans laquelle se succèdent les unités iduroniques et les unités glucosamines et dans laquelle Ri, R2, R3, Rs, R7 et R9 sont tels que définis précédemment :
Figure imgf000007_0003
(I1)
Parmi les composé de formule (l)/(l') objets de l'invention, on peut citer un sous- groupe de composés dans lequel Ri représente :
- soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 5 à 16 atomes de carbone, avantageusement de 5 à 12 atomes de carbone (par exemple un groupe -O-pentyle, -O-undécyle ou 2-propyl-pentyle),
- soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 1 à 8 atomes de carbone, avantageusement de 3 à 6 atomes de carbone (par exemple un groupe -O-propyle ou -O-pentyle), et est substitué par 1 ou 2 groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes aryles et cycloalkyles (par exemple les groupes phényles et cycloalkyles, tel que le cyclohexyle). Parmi les composé de formule (l)/(l') objets de l'invention, on peut citer un autre sous-groupe de composés, dans lequel R3 représente soit un groupe alkyle comprenant de 2 à 6 atomes de carbone (par exemple un groupe propyle ou pentyle), soit un groupe cycloalkyle (par exemple un groupe cyclopentyle).
Parmi les composé de formule (l)/(l') objets de l'invention, on peut citer un autre sous-groupe de composés, dans lequel au moins l'un des groupes R2, Rs, R7 et R9 représente un groupe hydroxyle. Un autre sous-groupe de composés objets de l'invention est tel que au moins l'un des groupes R2, R5, R7 et R9 représente un groupe hydroxyle et au moins l'un des groupes R2, R5, R7 et R9 représente un groupe OSO3 ".
D'autres sous-groupes d'octasaccharides selon l'invention peuvent présenter plusieurs des caractéristiques énoncées ci-dessus pour chacun des sous-groupes définis précédemment.
On peut en particulier citer le sous-groupe de composés de formule (I) dans lequel :
- Ri représente :
. soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 5 à 16 atomes de carbone, avantageusement de 5 à 12 atomes de carbone (par exemple un groupe -O-pentyle, -O-undécyle ou 2-propyl-pentyle),
. soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 1 à 8 atomes de carbone, avantageusement de 3 à 6 atomes de carbone (par exemple un groupe -O-propyle ou -O-pentyle), et est substitué par 1 ou 2 groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes aryles et cycloalkyles (par exemple les groupes phényles et cycloalkyles, tel que le cyclohexyle),
- R3 représente soit un groupe alkyle comprenant de 2 à 6 atomes de carbone (par exemple un groupe propyle ou pentyle), soit un groupe cycloalkyle (par exemple un groupe cyclopentyle), et
- au moins l'un des groupes R2, R5, R7 et R9 représente un groupe hydroxyle. Parmi les composés de l'invention, on peut notamment citer les octasaccharides suivants :
- Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 1) ;
- Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1- oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 2) ;
- Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1- oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1-oxohexyl)amino- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 3) ; - Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-
[(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 4) ;
- Undecyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 5) ; - 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 6) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-[(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)]2-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α- D-glucopyranoside (n° 7) ; - Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido- 2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 8) ; - Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido- 2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 9) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α- D-glucopyranoside (n° 10) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 11) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α- D-glucopyranoside (n° 12) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 13) ;
- 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α- D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-désoxy-2-(1-oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 14) ; - 2-propyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α- D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-désoxy-2-(1-oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 15) ;
- 3-cyclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-acétamido-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- acétamido-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α- L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-acétamido-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2- acétamido-β-D-glucopyranoside (n° 16) ;
- 3-cyclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (n° 17) ;
- 3,3-diphényl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (n° 18) ; et
- 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(3-méthyl-1- oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 19). Dans son principe, le procédé de préparation des composés selon l'invention utilise des synthons de base di- ou oligosaccharidiques préparés comme précédemment rapporté dans la littérature. On se référera notamment aux brevets ou demandes de brevet EP 0 300 099, EP 0 529 715, EP 0 621 282 et EP 0 649 854, ainsi qu'à la publication de C. Van Boeckel et M. Petitou parue dans Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1993, 32, 1671-1690. Ces synthons sont ensuite couplés les uns aux autres de façon à fournir un équivalent entièrement protégé d'un octasaccharide selon l'invention. Cet équivalent protégé est ensuite transformé en un composé selon l'invention. Dans les réactions de couplage évoquées ci-dessus, un di- ou oligosaccharide "donneur", activé sur son carbone anomère, réagit avec un di- ou oligosaccharide "accepteur", possédant un hydroxyle libre.
Les schémas spécifiques des synthèses seront décrits dans les exemples détaillés qui suivent.
La présente invention concerne donc un procédé pour la préparation des octasaccharides de formule (l)/(l'), caractérisé en ce que :
- dans une première phase, un équivalent complètement protégé de l'octasaccharide (I) désiré est synthétisé,
- dans une seconde phase, les positions devant comporter des groupements sulfates sur la molécule finale sont déprotégées, puis O-sulfatées,
- dans une troisième phase, on déprotège l'ensemble du composé, et
- dans une quatrième phase, les groupements N-acylés sont introduits (introduction des groupements R3-CO-).
La synthèse de l'équivalent complètement protégé de l'octasaccharide (I) désiré est réalisée selon des réactions bien connues de l'Homme de l'art, en utilisant les méthodes pour la synthèse d'oligosaccharides (par exemple GJ. Boons, Tetrahedron (1996), 52, 1095-1 121 et demandes de brevets WO 98/03554 et WO 99/36443), dans lesquelles un oligosaccharide donneur de liaison glycosidique est couplé avec un oligosaccharide accepteur de liaison glycosidique pour conduire à un autre oligosaccharide dont la taille est égale à la somme des tailles des deux espèces réactives. Cette séquence est répétée jusqu'à l'obtention du composé de formule (I), éventuellement sous forme protégée. La nature et le profil de la charge du composé final désiré déterminent la nature des entités chimiques utilisées dans les différentes étapes de la synthèse, selon les règles bien connues de l'Homme de l'art. On pourra se référer par exemple à C. Van Boeckel et M. Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (1993), 32, 1671-1690 ou encore à H. Paulsen, « Advances in sélective chemical synthèses of complex oligosaccharides », Angew. Chem. Int. Ed. Engl. (1982), 21, 155-173. Les composés de l'invention peuvent naturellement être préparés en utilisant différentes stratégies connues par l'Homme de l'art de la synthèse des oligosaccharides. Le procédé décrit ci-dessus est le procédé préféré de l'invention. Toutefois, les composés de formule (l)/(l') peuvent être préparés par d'autres méthodes bien connues de la chimie des sucres, décrites par exemple dans « Monosaccharides, Their chemistry and their rôles in natural products », P. M. Collins et RJ. Ferrier, J. Wiley & Sons (1995) et par GJ. Boons dans Tetrahedron (1996), 52, 1095-1 121.
Les groupes protecteurs utilisés dans le procédé de préparation des composés de formule (l)/(l') sont ceux qui permettent, d'une part, de protéger une fonction réactive telle qu'un hydroxy ou une aminé pendant une synthèse et, d'autre part, de régénérer la fonction réactive intacte en fin de synthèse. On utilise, pour la mise en œuvre du procédé selon l'invention, les groupes protecteurs couramment utilisés dans la chimie des sucres, tels que décrits par exemple dans « Protective Groups in Organic Synthesis », Green et al., 3rd Edition (John Wiley & Sons, Inc., New York). Les groupes protecteurs sont choisis par exemple parmi les groupes acétyle, méthyle, pentènyle, benzoyle, lévulinyle, benzyle, benzyle substitué, azides, carbamate de benzyle, tert- butyldiméthylsilyle (tBDMS) ou te/f-butyldiphénylsilyle (tBDPS).
Des groupes activateurs peuvent également être utilisés ; il s'agit de ceux classiquement utilisés en chimie des sucres, par exemple selon GJ. Boons, Tetrahedron (1996), 52, 1095-1 121. Ces groupes activateurs sont choisis par exemple parmi les imidates ou les thioglycosides.
Le procédé décrit ci-dessus permet d'obtenir les composés de l'invention sous forme de sels, avantageusement sous forme de sel de sodium. Pour obtenir les acides correspondants, les composés de l'invention sous forme de sels peuvent mis en contact avec une résine échangeuse de cations sous forme acide. Les composés de l'invention sous forme d'acides peuvent être ensuite neutralisés par une base pour obtenir le sel souhaité. Pour la préparation des sels des composés de formule (l)/(l'), on peut utiliser toute base minérale ou organique donnant, avec les composés de formule (l)/(l'), des sels pharmaceutiquement acceptables.
L'invention a également pour objet les composés de formule (V) ci-dessous, dans laquelle AIk représente un groupe alkyle, Ri est tel que défini précédemment en rapport avec les composés de formule (l)/(l'),bet Pg, Pg' et Pg", identiques ou différents les uns des autres, représentent des groupes protecteurs :
Figure imgf000016_0001
De tels composés sont utiles en tant qu'intermédiaires de synthèse des composés de formule (l)/(l').
En particulier, l'invention a pour objet les composés (V) dans lesquels AIk représente un groupe méthyle et Pg, Pg' et Pg" représentent respectivement des groupes benzyle, tBDPS et acétyle. Plus particulièrement parmi ces composés de formule (V), l'invention vise ceux dans lesquels Ri est choisi parmi les groupes suivants : -O-méthyle, -O-(CH2)5-phényle, -O-CH2-CH(C3H7)2, -0-(CH2)S-C6H11 et -O- (CH2)2-CH(phényle)2.
De tels composés correspondent aux disaccharides 58, 131 , 132, 133 et 134 illustrés dans les schémas de synthèse ci-après, qui sont utiles pour la synthèse des composés n° 10, 1 1 et 14 à 19 selon l'invention, comme cela sera détaillé dans ce qui suit.
L'invention a également pour objet les composés de formule (Vl) ci-dessous, dans laquelle AIk représente un groupe alkyle et Pg, Pg' et Pg", identiques ou différents les uns des autres, représentent des groupes protecteurs :
Figure imgf000016_0002
De tels composés sont utiles en tant qu'intermédiaires de synthèse des composés de formule (!)/(!'). En particulier, l'invention a pour objet le composé (Vl) dans lequel AIk représente un groupe méthyle et Pg, Pg' et Pg" représentent respectivement des groupes benzyle, lévulinyle et acétyle. Un tel composé correspond au disaccharide 24 illustré dans les schémas de synthèse ci-après, qui est utile pour la synthèse des composés n° 1 à 4 selon l'invention, comme cela sera détaillé dans ce qui suit.
Les exemples qui suivent décrivent la préparation de certains composés conformes à l'invention. Ces exemples ne sont pas limitatifs et ne font qu'illustrer la présente invention. Les composés de départ et les réactifs, quand leur mode de préparation n'est pas expressément décrit, sont disponibles dans le commerce ou décrits dans la littérature, ou bien peuvent être préparés selon des méthodes qui y sont décrites ou qui sont connues de l'Homme du métier.
Les abréviations suivantes sont utilisées :
[α]D : pouvoir rotatoire
Ac : acétyle
Bn : benzyle
CCM : Chromatographie sur Couche Mince
DDQ : 2,3-dichloro-5,6-dicyano-1 ,4-benzoquinone
ESI : Electron Spray Ionisation
h : heure
LC-MS (*) : chromatographie liquide, couplée à la spectrométrie de masse
Lev : lévulinyle
min : minutes
Me : méthyle
PMB : para-méthoxybenzyle
Rf : Retardation factor (temps de rétention mesuré sur la CCM par rapport au front du solvant de migration)
tBDMS : te/f-butyldiméthylsilyle
tBDPS : te/f-butyldiphénylsilyle
TFA : acide trifluoroacétique
TR : temps de rétention mesuré par LC-MS*
Z : benzyloxy-carbonyle * Les LC-MS sont effectuées sur un appareil ZQ4000 de marque Waters. La colonne utilisée est une Symetry C18 3.5μm (2.1x50 mm). L'éluant A est constitué d'H2O + TFA 0.005% pH 3.15. L'éluant B est constitué d'acétonitrile + TFA 0.005%. Le gradient varie de 0 à 90% d'éluant B en 10 (ou 30) min + 5 min à 90% d'éluant B. Le débit est de 0.4 mL/min.
Préparation des intermédiaires de synthèse :
Figure imgf000018_0001
20 21 22
Figure imgf000018_0002
24 23
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4)-2-amino-1 ,6-anhvdro-3-O-benzyl-2-désoxy-β-D- glucopyranose (n° 21)
A une solution du composé 20 (21.6 g, 31 mmol) (C.A.A. Van Boeckel et coll., J Carbohydr. Chem., 4 (1985) 293-321 ) dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (155 mL), est additionnée de la triéthylamine (Et3N) (65 mL, 15 équivalents molaire), puis du 1 ,3- propanedithiol (47 mL, 15 équivalents molaire). Après 17h d'agitation magnétique, le mélange réactionnel est dilué par de l'acétate d'éthyle, lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, puis purifié sur gel de silice (acétone - cyclohexane) pour conduire à 21 (15.8 g, 76%).
LC-MS m/z 672.2 [(M + H)+]. TR = 0.94 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-1 ,6-anhydro-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranose (n° 22)
A une solution du composé 21 (128.12 g, 190.7 mmol) dans du dichlorométhane (240 mL), est additionnée une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (240 mL) puis, à 00C, du chlorure de benzyle oxycarbonyle (35.5 mL, 1.3 équivalent molaire). Après 15 min d'agitation magnétique vigoureuse à 00C, le mélange réactionnel est dilué par du dichlorométhane, lavé à l'eau jusqu'à neutralité, séché (Na2SO4), filtré et concentré. Le produit brut est engagé dans l'étape suivante sans purification.
LC-MS m/z 806.2 [(M + H)+]. TR = 1.55 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-1 ,6-di-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyl1amino-α,β-D-glucopyranose (n° 23)
Le résidu obtenu à l'étape précédente est dissous dans de l'anhydride acétique (1.05 L), puis est additionné, à 00C et en 15 min, de l'acide trifluoroacétique (TFA) (105 mL). Le mélange réactionnel est agité pendant 10 min à 00C, 18 h à température ambiante, puis est concentré, coévaporé au toluène, et purifié sur gel de silice
(cyclohexane - acétone), pour donner le composé 23 (138.9 g, 80%, 2 étapes).
LC-MS m/z 930.3 [(M + Na)+]. TR = 21.68/21.84 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyl1amino-α,β-D-glucopyranose trichloroacétimidate (n° 24)
A une solution du composé 23 (25 g, 27.5 mmol) dans de l'éther diéthylique (1.1 L), est additionnée, à 00C, de la benzylamine (BnNH2) (109 mL, 36 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation à 00C, puis 4.5h à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué par de l'acétate d'éthyle, puis neutralisé avec de l'HCI 1 N à froid (0-4°C), lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, et purifié sur gel de silice (acétone - cyclohexane) pour conduire au (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyl]amino-α,β-D-glucopyranose (18.5 g, 78%).
LC-MS m/z 888.3 [(M + Na)+]. TR = 19.95/20.60 min
A une solution du composé ainsi obtenu (18.5 g, 21.4 mmol) dans le dichlorométhane (405 mL) est additionné sous argon et à 00C, du carbonate de césium (Cs2CO3) (1 1.1 g, 1.6 équivalent molaire), du trichloroacétonitrile (CCI3CN) (14.8 mL, 5.0 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré, puis concentré. Le résidu est purifié sur gel de silice (acétone - cyclohexane + 0.1 % de triéthylamine) pour donner 24 (17.2 g, 80%).
Rf = 0.47 (acétate d'éthyle - cyclohexane 7/3).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.17 IdoUA", 6.28 Glc'α
LC-MS m/z 866.3 [(M + Na)+]. TR1 = 19.91 min
Figure imgf000020_0001
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-qlucopyranoside (n° 25)
Une solution de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,2 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à -20° C, à une solution de l'imidate 24 (13.7 g, 13.56 mmol) et de l'alcool allylique (6.8 ml_, 5 équivalents molaires) dans du dichlorométhane (590 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (17.6 g). Après 20 minutes d'agitation (CCM), on ajoute une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium. Après filtration, lavage à l'eau, séchage (Na2SO4), filtration, et on évaporation à sec, le mélange est purifié sur gel de silice pour conduire au composé 25 (10.7 g, 85%).
LC-MS m/z 934.5 [(M + H)+]. TR = 24.00 min
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 26)
A une solution du composé 25 (10.6 g, 1 1.35 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (1.2 L) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (5.2 g, 5 équivalents molaire). Après 2.5h d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 26 (6.98 g, 74%).
LC-MS m/z 858.4 [(M + Na)+]. TR = 22.62 min
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- 6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonvHamino-β-D-glucopyranoside (n° 28)
Une solution de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,15 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 27 (9.0 g, 9.98 mmol) (C. Tabeur et coll., BioOrg. Med. Chem. (1999) 7, 2003- 2012) et d'accepteur de glycosyle 26 (6.95 g, 8.32 mmol) dans du dichlorométhane (350 mL) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (7.5 g). Après 18h à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, à l'eau, séchage (Na2SO4), filtration et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 28 (9.04 g, 69%).
Rf = 0.38 (acétone - toluène 1/4).
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- 6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonvHamino-β-D-glucopyranoside (n° 29)
A une solution du composé 28 (9.0 g, 5.7 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (570 mL) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (2.6 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 29 (7.15 g, 85%).
Rf = 0.29 (acétone - toluène 1/4). Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 30)
Une solution de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,15 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 27 (4.80 g, 5.32 mmol) et d'accepteur de glycosyle 29 (7.15 g, 4.84 mmol) dans du dichlorométhane (180 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (3.99 g). Après 18h à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après agitation magnétique à température ambiante (30 min), filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, puis à l'eau, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 30 (5.23 g, 49%).
Rf = 0.18 (acétone - éther diisopropylique 1/4).
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 31)
A une solution du composé 30 (5.21 g, 2.35 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (180 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (1.08 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h10 d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 31 (4.78 g, 96%).
Rf = 0.47 (acétone - éther diisopropylique 1/3).
Figure imgf000023_0001
37 36 35
Figure imgf000023_0002
Préparation du (3,4-di-O-benzyl-2-O-(4-méthoxy)benzyl-6-O-te/f- butyldiméthylsilyl-α-L-idopyranosyl)-(1→4)-1 ,6-anhvdro-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-β- D-glucopyranose (n° 33)
A une solution du composé 32 (32.3 g, 42.2 mmol) (WO2006/021653) dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (210 ml_) est ajouté, à O0C et sous argon, du bromure de benzyle (25 ml_, 5 équivalents molaire) puis du NaH à 55% (3 g, 1.5 équivalent molaire). Après 20 min d'agitation magnétique, du méthanol est additionné (30 ml_), le milieu réactionnel est concentré sous vide, le brut réactionnel est dilué à l'acétate d'éthyle, lavé à l'eau puis par une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, séché (Na2SO4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est engagé dans l'étape suivante sans purification.
LC-MS m/z 871.7 [(M + NH4)+]. TR = 13.86 min
Préparation du (2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiméthylsilyl-α-L- idopyranosyl)-(1→4)-1 ,6-anhvdro-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranose (n° 34)
A une solution de 33 brut (38.6 g) dans du dichlorométhane (1.6 L) sont ajoutés de l'eau (80 mL) puis, à 00C, du DDQ (14.2 g, 1.5 équivalent molaire). Après 4h45 d'agitation à 00C, le milieu est dilué par du dichlorométhane et une solution d'hydrogénocarbonate de sodium est additionnée. La phase organique est ensuite lavée à l'eau, séchée (Na2SO4), filtrée et concentrée. Le composé obtenu est engagé dans l'étape suivante sans purification. Le résidu obtenu est dissous dans du dichlorométhane (350 ml_), puis de la triéthylamine (13 ml_), de la 4-diméthylaminopyridine (2 g), et de l'anhydride acétique (60 ml_) sont additionnés. Après 10 min d'agitation magnétique à 00C, puis 1 h45 à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué par du dichlorométhane, puis successivement lavé par une solution aqueuse à 10% d'hydrogénosulfate de potassium, d'eau, puis la phase organique est séchée (Na2SO4), filtrée et concentrée.
Le résidu obtenu est purifié sur silice (acétate d'éthyle - cyclohexane) pour fournir 34 (26.8 g, 83%, 3 étapes).
LC-MS m/z 798.3 [(M + Na)+]. TR = 12.97 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-1 ,6-anhvdro-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranose (n° 35)
A une solution de 34 (26.3 g, 33.9 mmol) dans l'acétone (1.4 L) est additionnée, à 00C, une solution de CrO3 (10.5 g, 3.1 équivalents molaire) dans du H2SO4 3.5M aqueux (47 mL). Après 4h d'agitation mécanique à 0°C, le milieu réactionnel est dilué avec du dichlorométhane, lavé à l'eau jusqu'à neutralité, puis la phase organique est séchée (Na2SO4), filtrée et concentrée. Le composé obtenu est engagé dans l'étape suivante sans purification.
Le résidu obtenu est dissous dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (210 mL), et de l'hydrogénocarbonate de potassium (17 g, 5 équivalents molaire) ainsi que de l'iodure de méthyle (21 mL, 10 équivalents molaire) sont additionnés. Le mélange réactionnel est agité à température ambiante pendant 16h, puis concentré sous vide. Le résidu est dilué par de l'acétate d'éthyle puis lavé à l'eau, avec une solution aqueuse saturée de thiosulfate de sodium, avec une solution aqueuse saturée en chlorure de sodium, puis séchée (Na2SO4), filtrée et concentrée. Le composé obtenu est engagé dans l'étape suivante sans purification.
LC-MS m/z 707.3 [(M + NH4)+]. TR = 10.37 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-1 ,6-di-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose (n° 36)
Le résidu brut obtenu à l'étape précédente est dissous dans de l'anhydride acétique (177 mL), puis est additionné de l'acide trifluoroacétique (TFA) (17.7 mL). Le mélange réactionnel est agité pendant 16h, puis est concentré, co-évaporé au toluène, et purifié sur gel de silice (cyclohexane - acétate d'éthyle), pour donner le composé 36 (17.4 g, 65%, 3 étapes).
LC-MS m/z 809.3 [(M + NH4)+]. TR = 10.81 min Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose (n° 37)
A une solution du composé 36 (7 g, 8.84 mmol) dans de l'éther diéthylique (303 ml_), est additionnée, à 00C et sous argon, de la benzylamine (BnNH2) (29.7 ml_, 36 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation magnétique à 00C puis 6h à température ambiante, le mélange réactionnel est neutralisé avec de l'HCI 1 N à froid (0-40C), lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, et purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - cyclohexane) pour conduire à 37 (5.95 g, 90%).
LC-MS m/z 767.7 [(M + NH4)+]. TR = 1.64 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose
trichloroacétimidate (n° 38)
A une solution du composé 37 (5.94 g, 7.9 mmol) dans le dichlorométhane (150 ml_) sont additionnés, sous argon, du carbonate de césium (Cs2CO3) (4.1 g, 1.6 équivalent molaire), puis du trichloroacétonitrile (CCI3CN) (3.9 ml_, 5.0 équivalents molaire). Après 45 min d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré, puis concentré. Le résidu est purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - cyclohexane + 0.1 % de triéthylamine) pour donner 38 (5.7 g, 81%).
LC-MS m/z 912.0 [(M + NH4)+]. TR = 1.81 min
Figure imgf000025_0001
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 39)
Une solution de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,1 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à -15°C, à une solution de l'imidate 38 (2.61 g, 2.92 mmol) et d'accepteur de glycosyle 31 (4.78 g, 2.25 mmol) dans du dichlorométhane (146 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (1.99 g). Après 2h d'agitation magnétique à -15°C (CCM), de l'imidate 38 est à nouveau ajouté à intervalles de temps compris entre 15 et 30 min, jusqu'à consommation maximale de l'accepteur 31. En fin de réaction (CCM), de l'hydrogénocarbonate de sodium solide est additionné jusqu'à neutralisation, et après agitation magnétique à température ambiante (15 min), filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, puis à l'eau, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 39 (3.71 g, 58%).
Rf = 0.21 (acétone - toluène 15/85).
Figure imgf000027_0001
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0-benzyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(1→^4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 40)
A une solution de 39 (300 mg, 0.105 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (31 ml_) est ajoutée, à O0C, une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (0.31 ml_), en présence de tamis moléculaire 3 Â. Après agitation à 00C pendant 1 h et à température ambiante pendant 15 h, le mélange est neutralisé par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration partielle, le mélange réactionnel est purifié sur colonne d'exclusion LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 méthanol/dichlorométhane comme éluant, puis après rassemblement des fractions contenant le produit et concentration sous vide, le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange dichlorométhane/acétate d'éthyle/éthanol pour fournir le composé 40 (185 mg, 69%).
Rf = 0.22 (CH2CI2-AcOEt-EtOH 9/1/0.3).
Préparation du 4-pentènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4Hméthyl
3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O- benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-triéthylammonium sulfonato-β-D- glucopyranoside (n° 41 )
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (513 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (6.3 ml_, 90 L/mol) du composé 40 (178 mg, 70.8 μmol). Après 17 heures d'agitation magnétique à 55° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis 0.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 41 (241 mg, 87%).
Rf = 0.33 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du 4-pentènyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-lithium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 42)
A une solution du composé 41 (238 mg, 60 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (9.6 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution aqueuse molaire de LiOH. Après 1 h d'agitation à 00C puis 16 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 42.
Rf = 0.42 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4). Préparation du pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium )-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-
6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 43)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (14 mL) du composé 42 précédemment obtenu sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (617 mg, 9.8 mmol) puis du Pd/C 10% (1.55 g). Après 4h d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 43 (123 mg, 61 % (2 étapes)).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.1 1 ldoUAvl", 5.38 Glcv", 5.19 ldoUAvl, 5.38 Glcv, 5.19 ldoUAlv, 5.38 GIc'", 5.21 IdoUA", 4.70 GIc'
sel
Figure imgf000030_0001
Préparation du (Z/E) undéc-4-ènyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 44)
A une solution du composé 39 (610 mg, 214 μmol) dans du dichlorométhane (10.7 ml_) sont additionnés du 1-octène (67 μl_, 2 équivalents molaires), du catalyseur de Grubbs première génération (C44H74CI2P2RU) (18 mg, 0.1 équivalent molaire). Après chauffage à reflux pendant 6h puis agitation la nuit à température ambiante, le mélange est concentré sous vide poussé et peut-être engagé dans les mêmes conditions en cas de réaction incomplète. Le brut réactionnel est purifié par chromatographie sur gel de silice (toluène-acétone) pour conduire au produit souhaité
44 (131 mg, 20%).
Rf = 0.18 (toluène-acétone 85/15).
Préparation du (Z/E) 5-phényl-4-pentènyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 45)
A une solution du composé 39 (100 mg, 35 μmol) dans du dichlorométhane (1 ml_) sont additionnés du styrène (16 μl_, 4 équivalents molaires) et du catalyseur de Grubbs seconde génération (046H6SCI2N2PRu) (1.8 mg, 0.06 équivalent molaire). Après chauffage à reflux pendant 8h puis agitation la nuit à 35°C, les réactifs sont éventuellement rajoutés si nécessaire. Le mélange est ensuite concentré sous vide poussé puis purifié par chromatographie sur gel de silice (toluène-acétate d'éthyle) pour conduire au produit souhaité 45 (38 mg, 37%).
Rf = 0.25 (toluène-AcOEt 7/3).
Préparation du (Z/E) undéc-4-ènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonvHamino-β-D- glucopyranoside (n° 46)
A une solution de 44 (152 mg, 0.052 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (15 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (154 μl_), en présence de tamis moléculaire 3 Â. Après agitation à 00C pendant 1 h et à température ambiante pendant 15 h, le mélange est neutralisé par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration partielle, le mélange réactionnel est purifié sur colonne d'exclusion LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 méthanol/dichlorométhane comme éluant, puis après rassemblement des fractions contenant le produit et concentration sous vide, le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange toluène/acétone/acétate d'éthyle/éthanol pour fournir le composé 46 (83 mg, 61 %).
Rf = 0.25 (toluène-acétone-EtOH 7/3/0.1 ).
Préparation du (Z/E) 5-phényl-4-pentènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-
O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonvHamino-β-D- glucopyranoside (n° 47)
A une solution de 45 (229 mg, 0.078 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (23 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (232 μl_), en présence de tamis moléculaire 3 Â. Après agitation à 00C pendant 1 h et à température ambiante pendant 15 h, le mélange est neutralisé par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration partielle, le mélange réactionnel est purifié sur colonne d'exclusion LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 méthanol/dichlorométhane comme éluant, puis après rassemblement des fractions contenant le produit et concentration sous vide, le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange dichlorométhane/acétate d'éthyle/éthanol pour fournir le composé 47 (141 mg, 69%).
Rf = 0.15 (toluène-acétone-EtOH 7/3/0.1 ).
Préparation du (Z/E) undéc-4-ènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-
3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-
(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3- O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-triéthylammonium sulfonato-β-D- glucopyranoside (n° 48)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (225 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (2.8 ml_, 90 L/mol) du composé 46 (81 mg, 31 μmol). Après 16 heures d'agitation magnétique à 50° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol (0.2 ml_) et après 35 min d'agitation à
00C puis 2.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 :0.1 méthanol/dichlorométhane/Λ/,Λ/- diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 48 (122 mg, 99%).
Rf = 0.36 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du (Z/E) 5-phényl-4-pentènyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H2-azido- 3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3- O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-triéthylammonium sulfonato-β-D- glucopyranoside (n° 49)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (385 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (4.7 ml_, 90 L/mol) du composé 47 (138 mg, 53 μmol). Après 16 heures d'agitation magnétique à 50° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol (0.35 mL) et après 30 min d'agitation à 00C puis 1 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 :0.1 méthanol/dichlorométhane/Λ/,Λ/- diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 49 (194 mg, 92%).
Rf = 0.35 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du (Z/E) undéc-4-ènyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-
[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-lithium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 50)
A une solution du composé 48 (119 mg, 29 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (4.7 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution aqueuse molaire de LiOH (1.18 ml_). Après 1 h d'agitation à 00C puis 19.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 4:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 50.
Rf = 0.40 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du (Z/E) 5-phényl-4-pentènyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato- α-L-idopyranosvIuronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-lithium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 51)
A une solution du composé 49 (190 mg, 47 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (7.4 mL) est ajoutée, à 00C, une solution aqueuse molaire de LiOH (1.88 mL). Après 1 h d'agitation à 00C puis 16 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 51.
Rf = 0.44 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du undécyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-
(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-
6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→^4)-2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 52)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (6 mL) du composé 50 précédemment obtenu sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (260 mg, 4.1 mmol) puis du Pd/C 10% (672 mg). Après 4hO5 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 52 (34 mg, 49% (2 étapes)).
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2337.81 ; masse expérimentale : 2337.27 ± 0,06 u.m.a [M-4Na+4H]. Préparation du 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2- désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 53)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (9.2 ml_) du composé 51 précédemment obtenu sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (407 mg, 6.47 mmol) puis du Pd/C 10% (1.05 g). Après 4hO5 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 53 (79 mg, 72% (2 étapes)).
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 537.0713 [M-4H]4" (forme acide).
Figure imgf000035_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2- désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 55)
A une solution du composé 54 (23,5 g, 30 mmol ; Carbohydrate Research
(1987), 167, 67-75) dans le dichlorométhane (600 ml_) sont ajoutés, à 00C et sous atmosphère inerte, la 4-diméthylaminopyridine (733 mg, 6 mmol), l'hydrochlorure de 1-(3-dimétylaminopropyl)-3-éthylcarbodiimide (11 ,5 g, 60 mmol) et l'acide lévulinique (6,2 ml_ ; 60 mmol). Après 16 heures d'agitation à température ambiante, le mélange est dilué avec du dichlorométhane (1 ,5 L). La phase organique est lavée successivement avec une solution aqueuse d'hydrogénosulfate de potassium à 10%, avec de l'eau, avec une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium puis avec de l'eau, séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu est purifié par flash chromatographie sur une colonne de gel de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 1/3) pour donner le composé 55 (22,6 g).
Rf = 0,37, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 1/3
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 56)
A une solution du composé 55 (20,2 g, 23 mmol) dans un mélange tétrahydrofurane/méthanol 1/1 (140 mL) est ajouté, sous atmosphère inerte, du [tBu2SnCI(OH)]2 (226 mg, 0,79 mmol) préparé selon A. Orita et al., Chem. Eur. J. (2001 ) 7, 3321. Le milieu réactionnel est agité pendant 38 heures à 35°C. Après concentration, le résidu (20,8 g) est engagé sans purification dans l'étape suivante.
Rf = 0,23, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 1/3
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O- tertbutyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 57)
A une solution du composé brut 56 (23 mmol) dans le dichlorométhane (190 mL) sont ajoutés, à 00C et sous atmosphère inerte, la triéthylamine (8 mL, 57,5 mmol), la 4-diméthylaminopyridine (1 ,4 g, 1 1 ,5 mmol) et le chlorure de te/f-butyldiphénylsilyle (12 mL, 46,0 mmol). Le milieu réactionnel est agité pendant 16 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est dilué avec du dichlorométhane. La phase organique est lavée successivement avec une solution saturée de chlorure de sodium puis avec l'eau, séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée. Le résidu est purifié par flash chromatographie sur colonne de gel de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1 ) pour donner le composé 57 (24,4 g).
Rf = 0,42, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 58)
A une solution du composé 57 (22,6 g, 20,0 mmol) dans un mélange toluène/éthanol 1/2 (2,5 L) est ajouté l'acétate d'hydrazine (9,21 g, 100,0 mmol). Le milieu réactionnel est agité pendant 30 minutes à température ambiante. Après concentration, le résidu est purifié par flash chromatographie sur colonne de gel de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1 ) pour donner 17,6 g du composé 58.
Rf = 0,40, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1.
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.19 IdoUA", 4.63 GIc'
LC-MS m/z 978.5 [(M + H)+]. TR = 12.29 min
Figure imgf000037_0001
59 60 61
Figure imgf000037_0002
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-1 -O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranose (n° 60)
A une solution de 59 (1 1 g, 13.7 mmol) (C. Tabeur, et coll., Carbohydr. Res., 281 (1996) 253-276) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (80 m L) est additionné du [tBu2SnCI(OH)]2 (0.55 g, 0.14 équivalents molaires) préparé selon A. Orita et al., Chem. Eur. J. (2001 ) 7, 3321. Après agitation à 35°C pendant 5.5h, puis à température ambiante pendant 16h, puis à nouveau à 35°C pendant 4h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis purifié par chromatographie pour conduire au composé 60 (5.97 g, 57%).
LC-MS m/z 780.2 [(M + Na)+]. TR = 9.14 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-1 -O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl- 2-désoxy-α-D-glucopyranose (n° 61)
Le composé 60 (5.97 g, 7.88 mmol) est mis en solution dans du dichlorométhane (63 mL). A 00C et sous argon, sont additionnés successivement du 4- diméthylaminopyridine (0.481 g, 0.5 équivalent molaire), de la triéthylamine (2.7 mL,
2.5 équivalents molaire), et du chlorure de te/f-butyldiphénylsilyle (4 mL, 2 équivalents molaire). Après 4h d'agitation magnétique, le milieu réactionnel est dilué par du dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'hydrogénosulfate de potassium à 10%, à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est purifié sur silice
(acétate d'éthyle - heptane) pour fournir 61 (7 g, 90%).
LC-MS m/z 1018.3 [(M + Na)+]. TR = 12.33 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α,β-D-glucopyranose (n° 62)
A une solution du composé 61 (7 g, 7.03 mmol) dans de l'éther diéthylique (70 mL), est additionnée, à 00C, de la benzylamine (BnNH2) (29 mL, 38 équivalents molaire). Après 15 min d'agitation à 00C, puis 6h à température ambiante, le mélange réactionnel est dilué par de l'acétate d'éthyle, puis neutralisé avec de l'HCI 1 N à froid (0-4°C), lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, et purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - toluène) pour conduire à 62 (5.86 g, 87%).
LC-MS m/z 976.3 [(M + Na)+]. TR = 27.6/27.8 min Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α,β-D-glucopyranose trichloroacétimidate (n° 63)
A une solution du composé 62 (6.5 g, 6.81 mmol) dans le dichlorométhane (140 ml_) et en présence de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (7 g), est additionné sous argon, du carbonate de césium (Cs2CO3) (3.5 g, 1.6 équivalent molaire), puis à 00C, du trichloroacétonitrile (CCI3CN) (3.4 ml_, 5.0 équivalents molaire). Après 15 min d'agitation à 00C, puis 5h à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré, puis concentré. Le résidu est purifié sur gel de silice (1 :4 acétate d'éthyle - toluène + 0.1% de triéthylamine) pour donner 63 (6.33 g, 85%).
LC-MS m/z 1 119.1 [(M + Na)+]. TR = 31.2 min
OMe
Figure imgf000039_0001
Figure imgf000039_0002
65
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α- D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 64)
Un mélange de l'accepteur de glycosyle 58 (8,80 g, 9,00 mmol), de l'imidate 63 (6,58 g, 6,00 mmol) et de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (4,50 g) dans le dichlorométhane (210 mL) est agité sous atmosphère d'argon pendant 1 heure à 25°C. Le mélange réactionnel est refroidi à -200C et on ajoute une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans le dichlorométhane (900 μL). Après 1 heure 20, le milieu réactionnel est neutralisé par addition d'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration sur Celite® et concentration, le résidu obtenu est chromatographié sur colonne Sephadex® LH20 (190 x 3,2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) pour donner 8,26 g du composé 64.
Rf = 0,30, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 65)
Le composé 64 (8,26 g, 4,31 mmol) est transformé en composé 65 (6,41 g) selon le même mode opératoire que celui décrit pour la synthèse de 58.
Rf = 0,34, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1
Figure imgf000040_0001
67 Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-
D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 66)
Un mélange de l'accepteur de glycosyle 65 (7,42 g, 4,09 mmol), de l'imidate 63 (6,73 g, 6,1 mmol), et de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (4,60 g) dans le dichlorométhane (215 ml_) est agité sous atmosphère d'argon pendant 1 heure à 25°C. Le mélange réactionnel est refroidi à -200C et on ajoute une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans le dichlorométhane (920 μl_). Après 1 heure 30, le milieu réactionnel est neutralisé par addition d'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration sur Celite®, le milieu réactionnel est dilué avec du dichlorométhane (800 ml_). La phase organique est lavée successivement avec une solution d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, avec de l'eau puis séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne Sephadex® LH20 (190 x 3,2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une chromatographie sur colonne de gel de silice (toluène/acétate d'éthyle 6/1 ) pour donner 6,13 g du composé 66.
Rf = 0,46, gel de silice, toluène/acétate d'éthyle 4/1
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O- benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 67)
Le composé 66 (7,14 g, 2,59 mmol) est transformé en composé 67 (6,07 g) selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 58.
Rf = 0,37, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 2/1
Figure imgf000042_0001
71 70
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-1 -O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranose (n° 68)
A une solution de 36 (5.05 g, 6.3 mmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (76 ml_) est additionné du [tBu2SnCI(OH)]2 (0.25 g, 0.14 équivalent molaire) préparé selon A. Orita et ai, Chem. Eur. J. (2001 ) 7, 3321. Après agitation à température ambiante pendant 72h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis purifié par chromatographie pour conduire au composé 68 (2.89 g, 64%).
LC-MS m/z 772.4 [(M + Na)+]. TR = 10.23 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- M - >4)-1 -O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D- glucopyranose (n° 69)
Le composé 68 (2.89 g, 3.86 mmol) est mis en solution dans du dichlorométhane (31 mL). A O0C et sous argon, sont additionnés successivement de la triéthylamine (1.3 mL, 2.5 équivalents molaire), de la 4-diméthylaminopyridine (0.235 g, 0.5 équivalent molaire), et du chlorure de te/f-butyldiphénylsilyle (2 mL, 2 équivalents molaire). Après 3h d'agitation magnétique, le milieu réactionnel est dilué par du dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'hydrogénosulfate de potassium à 10%, à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est purifié sur silice (acétate d'éthyle - cyclohexane) pour fournir 69 (3.4 g, 90%).
LC-MS m/z 1010.6 [(M + Na)+]. TR = 13.10 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose (n° 70) A une solution du composé 69 (3.44 g, 3.48 mmol) dans de l'éther diéthylique (35 ml_), est additionnée, à O0C, de la benzylamine (BnNH2) (14.5 ml_, 38 équivalents molaire). Après 8h d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est placé à -18°C pendant 16h, puis à nouveau 2.5h à température ambiante. Le milieu est alors dilué par de l'acétate d'éthyle, puis neutralisé avec de l'HCI 1 N à froid (0-40C), lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, et purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - cyclohexane 15/85) pour conduire à 70 (3.83 g, 91 %).
LC-MS m/z 963.6 [(M + NH4)+]. TR = 12.37, 12.47 min Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(1→4)-2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose trichloroacétimidate (n° 71)
A une solution du composé 70 (2.99 g, 3.16 mmol) dans le dichlorométhane (60 mL) et en présence de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (3 g), sont additionnés, à 00C sous argon, du carbonate de césium (Cs2CO3) (1.6 g, 1.6 équivalent molaire), puis du trichloroacétonitrile (CCI3CN) (1.6 mL, 5.0 équivalents molaire). Après 20 min d'agitation à 00C, 7h à température ambiante, stockage à -18°C pendant 16h, puis agitation magnétique 8h à température ambiante, stockage à -18°C pendant 16h, et enfin agitation magnétique 1 h à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré, puis concentré. Le résidu est purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - cyclohexane 15:85 + 0.1 % de triéthylamine) pour donner 71 (2.69 g, 78%).
LC-MS m/z 1 113.4 [(M + Na)+]. TR = 14.58 min
Figure imgf000044_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α- D-glucopyranosyl)-(1→4H(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4ïl2-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 72)
Un mélange de l'accepteur de glycosyle 67 (3,50 g, 1 ,32 mmol), de l'imidate 71 (2,16 g, 1 ,98 mmol) et de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (1 ,48 g) dans le dichlorométhane (69 ml_) est agité sous atmosphère d'argon pendant 1 heure à température ambiante. Le mélange réactionnel est refroidi à - 20° C et on ajoute une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans le dichlorométhane (297 μl_). Après 2 heures 30, le milieu réactionnel est neutralisé par addition d'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration sur Celite®, le milieu réactionnel est dilué avec du dichlorométhane (400 ml_). La phase organique est lavée successivement avec une solution d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, avec de l'eau puis séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne Sephadex® LH20 (190 x 3,2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une chromatographie sur colonne de gel de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 4/1 ) pour donner 3,04 g du composé 72.
Rf = 0, 30, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 3/1
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- [(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosylH1→4)1?-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 73)
A une solution du composé 72 (2,23 g, 0,623 mmol) dans un mélange dichlorométhane/méthanol 2/3 (187 mL) contenant du tamis 3Â (78 mg) est ajoutée sous atmosphère d'argon et à 00C une solution 1 M de méthylate de sodium dans le méthanol (99,7 μL). Après 24 heures à température ambiante, le milieu réactionnel est neutralisé avec de la résine Dowex AG 50 WX4 H+. Après filtration et concentration, le résidu est chromatographié sur colonne Sephadex® LH20 (120 x 3 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une flash chromatographié sur colonne de gel de silice (cyclohexane/acétate d'éthyle 1/0→66/34) pour donner 1 ,80 g du composé 73.
Rf = 0,38, gel de silice, cyclohexane/acétate d'éthyle 3/1
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-[(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)]?-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 74)
A une solution du composé 73 (44,0 mg, 0,013 mmol) dans le méthanol (1 ,7 ml_) est ajouté le fluorure d'ammonium (38,0 mg, 1 ,03 mmol). Après 140 heures d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est déposé sur une colonne Sephadex® LH20 (95 x 2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une flash chromatographié sur colonne de gel de silice (toluène/acétone 3/2) pour donner le composé 74 (24,2 mg).
Rf = 0,46, gel de silice, toluène/acétone 3/2
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-r(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosviYl?-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D- glucopyranoside (n° 75)
Le composé 74 (24,2 mg, 9,96 μmol) est séché par co-distillation de N, N- diméthylformanide (3 x 1 ,0 ml_) puis est mis en solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformanide (1 ,0 ml_). A cette solution on ajoute le complexe triéthylamine- trioxyde de soufre (72,2 mg, 0,4 mmol). Le mélange est agité pendant 16 heures à 55°C à l'abri de la lumière puis l'excès de réactif est détruit avec du méthanol (16,2 μL). Le milieu réactionnel est déposé sur une colonne Sephadex® LH20 (120 x 3 cm) éluée par mélange dichlorométhane/éthanol 1/1 pour conduire au composé 75 (29,0 mg).
Rf = 0,26, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 28/16/3,8/9.
Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-[(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)1?-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2- désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 76)
A une solution du composé 75 (78,5 mg, 30,1 μmol) dans un mélange tétrahydrofurane/méthanol 1/1 (3,2 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution 0,7 M d'hydroxyde de lithium dans l'eau (440 μl_). Après 1 heure à 00C puis 16 heures à température ambiante, la solution est déposée sur une colonne Sephadex® LH20 (3 x 120 cm) éluée par mélange diclorométhane/éthanol/eau 50/50/1 pour donner le composé 76 (60,3 mg).
[α]D 13,1 ° (C 1 ,0 ; MeOH)
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylHd→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)1?-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranoside (n° 77)
A une solution du composé 76 (19,3 mg, 6,16 μmol) dans un mélange tert- butanol/eau 1/1 (1 ,2 ml_) sont ajoutés successivement le formiate d'ammonium (50,8 mg) et le Paladium/C 10% (125 mg). Après 4 heures à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré (filtre Millipore® LSWP 5 μm) puis déposé sur une colonne de gel Sephadex® G-25 fine(95 x 2 cm) éluée par une solution aqueuse de NaCI 0,2 M. Les fractions contenant le composé attendu sont réunies, et déposées sur une colonne de Sephadex® G-25 fine (95 x 2 cm) éluée par de l'eau et on obtient 1 1 ,2 mg du composé 77.
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2285,47 ; masse expérimentale : 2197,20 ± 0,34 u.m.a. (acides iduroniques observés sous forme COOH)
Figure imgf000048_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 78)
Un mélange de l'accepteur de glycosyle 65 (1 ,82 g, 1 ,00 mmol), de l'imidate 27 (1 ,35 g, 1 ,50 mmol), et de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (1 ,12 g) dans le dichlorométhane (52 ml_) est agité sous atmosphère d'argon pendant 1 heure à 25°C. Le mélange réactionnel est refroidi à -200C et on ajoute alors une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans le dichlorométhane (224 μl_). Après 50 minutes, le milieu réactionnel est neutralisé par addition d'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration sur Celite®, le milieu réactionnel est dilué avec du dichlorométhane (500 ml_). La phase organique est lavée successivement avec une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, avec de l'eau puis séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu est chromatographié sur colonne (Sephadex® LH20, 190 x 3,2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une chromatographié flash sur colonne de gel de silice (toluène-acétone 1/0→3/1 ) pour donner 1 ,57 g du composé 78.
Rf = 0,47, gel de silice, toluène/acétone 3/1 Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(1→4H6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphenylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronateH1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-fe/f- butyldiphenylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 79)
Le composé 78 (1 ,56 g, 0,61 mmol) est transformé en composé 79 (1 ,44 g) selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 58.
Rf = 0,52, gel de silice, toluène/acétate d'éthyle 1/1
Figure imgf000050_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 80)
Un mélange de l'accepteur de glycosyle 79 (1 ,0 g, 0,41 mmol), de l'imidate 38 (543 mg, 0,61 mmol) et de tamis moléculaire 4 Λ en poudre (455 mg) dans le dichlorométhane (21 ml_) est agité sous atmosphère d'argon pendant 1 heure à température ambiante. Le mélange réactionnel est refroidi à -200C et on ajoute une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans le dichlorométhane (91 ,0 μl_). Après 1 heure 10, le milieu réactionnel est neutralisé par addition d'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration sur Celite®, le milieu réactionnel est dilué avec du dichlorométhane (250 ml_). La phase organique est lavée successivement avec une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, avec de l'eau puis séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne Sephadex® LH20 (190 x 3,2 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une flash chromatographie sur colonne de gel de silice (toluène/acétate d'éthyle 1/0→0/1 ) pour donner le composé 80 (822,4 mg).
Rf = 0,44, gel de silice, toluène/acétate d'éthyle 3/1
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 81)
Le composé 80 (820 mg, 0,257 mmol) est saponifié selon la méthode utilisée pour la préparation du composé 73 pour donner l'octasaccharide 81 (593,8 mg) après flash chromatographie sur colonne de gel de silice (toluène/acétone 1/0→0/1 ).
Rf = 0,57, gel de silice, toluène/acétone 2/1
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O- fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranoside
(n° 82)
Le composé 81 (130 mg, 44,3 μmol) est transformé en composé 82 (164,1 mg) selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 75.
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 4024,90 ; masse expérimentale : 4024
Préparation du méthyl (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-(6-O-ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy- - α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl- -α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-( 6-0-ammonium sulfonato-α-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-d→4)- (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-3-O- benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 83)
A une solution du composé 82 (91 ,8 mg, 22,8 μmol) dans le méthanol (3,0 ml_) est ajouté le fluorure d'ammonium (67,6 mg, 1 ,82 mmol). Après 48 heures d'agitation à
55°C, le mélange réactionnel est déposé sur une colonne Sephadex® LH20 (120 x 3 cm, dichlorométhane/éthanol 1/1 ) suivie d'une flash chromatographie sur colonne de gel de silice (méthanol/eau 95/5) pour donner le composé 83 (62,7 mg).
Rf = 0,32, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 17/9/2,2/5. Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 84)
A une solution du composé 83 (86 mg, 24,2 μmol) dans un mélange tétrahydrofurane/méthanol 1/1 (3,9 ml_) est ajoutée, à 00C, une solution 1 M d'hydroxyde de lithium dans l'eau (780 μl_). Après 1 heure à 00C puis 16 heures à température ambiante, la solution est déposée sur une colonne de gel Sephadex® LH20 (95 x 2 cm) éluée par mélange méthanol/eau 95/5 pour donner le composé 84 (65,3 mg).
Rf = 0,27, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 17/9/2,2/5.
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy- α-D-glucopyranoside (n° 85)
Le composé 84 (95,0 mg, 32,3 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 77 pour donner le composé 85 (47,3 mg)
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2081 ,38 ; masse expérimentale : 1993,15 ± 0,1 1 u.m.a. (acides iduroniques observés sous forme COOH).
Figure imgf000054_0001
90
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-qlucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-qlucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 86)
A une solution du composé 81 (50 mg, 0,017 mmol) dans le méthanol (2,2 ml_) est ajouté le fluorure d'ammonium (25 mg, 0,68 mmol). Après 7 heures d'agitation à température ambiante puis 16 heures à 200C, le mélange réactionnel est dilué avec du dichlorométhane. La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium, filtrée puis évaporée à sec. Le résidu est purifié par flash chromatographie sur colonne de gel de silice (toluène/méthanol 100/0→82/18) pour donner 27,7 mg de composé 86.
Rf = 0,16, gel de silice, toluène/méthanol 85/15
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O- fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D- glucopyranoside (n° 87)
Le composé 86 (94 mg, 34,8 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 75 pour donner le composé 87 (131 ,9 mg).
Rf = 0,37, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 17/9/2,2/5.
Préparation du méthyl (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4H6-O-ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido- 3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-2- benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (n° 88)
Le composé 87 (130 mg, 32,8 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 74 pour donner le composé 88 (102,0 mg).
Rf = 0,33, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 17/9/2,2/5. Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithiurri sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-benzyloxycarbonylamino-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato- α-D-glucopyranoside (n° 89)
Le composé 88 (100 mg, 26,8 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 76 pour donner le composé 89 brut qui est engagé tel quel dans l'étape suivante.
Rf = 0,25, gel de silice, acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau 17/9/2,2/5.
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium )-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 90)
Le composé brut 89 (75 mg, 24,8 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 77 pour donner le composé 90 (48,2 mg).
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2183,42 ; masse expérimentale : 2095,07 ± 0,24 u.m.a. (acides iduroniques observés sous forme COOH)
Figure imgf000057_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- 3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D- glucopyranoside (n° 91)
Une solution de triflate de tert-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,15 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 27 (3.26 g, 3.62 mmol) et d'accepteur de glycosyle 58 (3.22 g, 3.29 mmol) dans du dichlorométhane (1 15 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (2.5 g). Après 1 h40 à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, par une solution aqueuse de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice (toluène-acétone) pour conduire à 91 (4.66 g, 83%).
Rf = 0.49 (toluène-acétone 7/3).
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4H6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-tert- butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 92)
A une solution du composé 91 (4.66 g, 2.71 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (542 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (1.2 g, 5 équivalents molaire). Après 2h d'agitation magnétique, la même quantité de réactif est rajoutée et après 2h, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice (toluène- acétone) pour donner le composé 92 (3.83 g, 87%).
Rf = 0.42 (toluène-acétone 3/1 ).
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-tert- butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 93) Une solution de triflate de tert-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 0,15 mole par mole d'imidate) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 27 (3.2 g, 3.55 mmol) et d'accepteur de glycosyle 92 (3.83 g, 2.36 mmol) dans du dichlorométhane (106 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (1.8 g). Après 2.5h à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, par une solution aqueuse de chlorure de sodium, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle/toluène) pour conduire à 93 (3.36 g, 61 %).
Rf = 0.47 (toluène-acétate d'éthyle 1/1 ).
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4Hméthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 94)
A une solution du composé 93 (3.36 g, 1.42 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (280 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (0.645 g, 4.93 équivalents molaire). Après 2.5h d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 94 (3.01 g, 96%).
Rf = 0.43 (toluène-acétone 4/1 ).
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 95)
Une solution 0.1 M de triflate de tert-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 ml_) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 71 (0.29 g, 0.3 mmol) et d'accepteur de glycosyle 94 (3.01 g, 1.33 mmol) dans du dichlorométhane (60 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (0.93 g). Après 10 min d'agitation magnétique à -200C (CCM), de l'imidate 71 est à nouveau ajouté à intervalle de temps compris entre 10 min et 2.5h, jusqu'à une quantité totale de 3.19 g. Après 2Oh à -200C (CCM), de l'hydrogénocarbonate de sodium solide est additionné jusqu'à neutralisation, et après filtration, lavage par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, par une solution aqueuse de chlorure de sodium, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 95 (2.58 g, 61 %).
Rf = 0.45 (toluène-acétone 4/1 ). Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 96)
A une solution de 95 (1.18 g, 0.37 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (1 1 1 ml_) est ajoutée une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (1.1 ml_), en présence de tamis moléculaire 3 A (463 mg). Après agitation pendant 20 h à température ambiante, le mélange est neutralisé par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange toluène/acétone pour fournir le composé 96 (773 mg, 77%).
Rf = 0.51 (toluène-acétone 4/1 ).
Figure imgf000061_0001
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-tert-butyldiphénylsilyle-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6- O-tert-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 97)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (761 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (1 1 ml_, 90 L/mol) du composé 96 (324 mg, 120 μmol). Après 17 heures d'agitation magnétique à 55° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis
0.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué par du méthanol puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 méthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé et, si nécessaire, remises à réagir dans les mêmes conditions. Le composé obtenu 97 est alors directement engagé dans l'étape suivante.
Rf = 0.5 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du méthyl (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-
(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O- ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl
2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 98)
A une solution du composé 97 précédemment obtenu dans du méthanol (16 mL) est ajouté du fluorure d'ammonium (361 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à 55°C pendant 48 h, le mélange réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 75/20/5 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour fournir le composé 98 (410 mg, 95%, 2 étapes).
Rf = 0.28 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16). Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithiumH1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H3-O-benzyl-2-O- lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithiumH1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 99) A une solution du composé 98 (202 mg, 57 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (9 ml_) est ajoutée, goutte à goutte et à 00C, une solution aqueuse 1 N de LiOH (1.8 ml_, 7.9 équivalents/fonction ester méthylique). Après 1 h d'agitation à 00C, puis 16 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 75/20/5 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 99 qui est directement engagé dans l'étape suivante.
Rf = 0.41 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16)
Préparation du méthyl (2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-lithium sulfonato-α- L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)- (1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4H2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 100)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (13 mL) du composé 99 précédemment obtenu sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (529 mg, 8.4 mmol) puis du Pd/C 10% (1.24 g). Après 4M 5 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 100 (78 mg, 66%, 2 étapes).
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 1992.8 ; masse expérimentale [M - Na - H] : 1971.03 ± 0.10 u.m.a. (acides iduroniques observés sous forme COOH).
Figure imgf000064_0001
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D- glucopyranoside (n° 101)
A une solution du composé 96 (570 mg, 194 μmol) dans du méthanol (66 ml_) est ajouté du fluorure d'ammonium (575 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à température ambiante pendant 14 h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis purifié sur colonne de silice (toluène/acétone) pour fournir le composé 101 (282 mg, 54%).
Rf = 0.37 (toluène-acétone 7/3).
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyle-2- désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D- glucopyranoside (n° 102)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (376 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (5.3 ml_, 90 L/mol) du composé 101 (160 mg, 59 μmol). Après 17 heures d'agitation magnétique à 55° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis 0.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué par du méthanol puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 éthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé. Le composé obtenu est alors directement engagé dans l'étape suivante.
Rf = 0.52 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du méthyl (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-
(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O- ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl
2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 103)
A une solution du composé 102 précédemment obtenu dans du méthanol (2.5 ml_) est ajouté du fluorure d'ammonium (42 mg, 60 équivalents molaires). Après agitation magnétique à température ambiante pendant 3h, à 45°C pendant 18 h, puis à
55°C pendant 4 h, du fluorure d'ammonium (14 mg, 20 équivalents molaires) est à nouveau ajouté, et le mélange réactionnel est agité pendant 24h à 55°C puis à température ambiante pendant 6Oh. Le mélange réactionnel est ensuite purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 75/20/5 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour fournir le composé 103 (35 mg, 54%).
Rf = 0.54 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithiumH1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithiumH1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonvHamino-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 104)
A une solution du composé 103 (155 mg, 41.6 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (7 mL) est ajoutée, goutte à goutte et à 00C, une solution aqueuse 1 N de LiOH (1.4 mL, 8.4 équivalents/fonction ester méthylique). Après 1 h d'agitation à 00C, puis 15 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 95/5 méthanol/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 104 (114 mg, 90%).
Rf = 0.25 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 1 1/7/1.6/4).
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 105) A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (8 ml_) du composé 104 (1 10 mg, 36 μmol) sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (298 mg,
4.72 mmol) puis du Pd/C 10% (715 mg). Après 4M 5 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 105 (63 mg, 80%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.08 ldoUAvl", 5.23* Glcv", 5.14 ldoUAvl, 5.24* Glcv, 5.14 ldoUAlv, 5.24* GIc'", 5.14 IdoUA",
4.73 GIc'
* : Les signaux peuvent être interchangés.
Figure imgf000068_0001
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1 - >4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside
(n° 106)
Une solution de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (1 M, 0,2 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajoutée, sous argon, à - 15° C, à une solution de l'imidate 63 (0.59 g, 0.54 mmol) et d'accepteur de glycosyle 92 (0.58 g, 0.36 mmol) dans du dichlorométhane (25 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (0.4 g). Après 45 min à -15°C (CCM), on ajoute à nouveau de l'imidate 63 (0.39 g, 0.35 mmol) puis du triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1 M, 1.1 ml_). Après 1 h10 à -15°C (CCM), de l'hydrogénocarbonate de sodium solide est additionné jusqu'à neutralisation. Après filtration, lavage par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1/1 éthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé puis le résidu est purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle/toluène) pour conduire à 106 (0.69 g, 75%).
Rf = 0.16 (toluène - acétone 9/1 ).
Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-α-D-glucopyranosyl)- (1→4Hméthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H6-O-acétyl-2- azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 107)
A une solution du composé 106 (1.41 g, 0.552 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (1 10 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (0.254 g, 2.76 équivalents molaire). Après 2h40 d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 107 (1.15 g, 85%).
Rf = 0.16 (toluène - acétone 9/1 ). Préparation du méthyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3- O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 108)
Une solution 0.1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1.1 ml_) est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 38 (0.67 g, 0.75 mmol) et d'accepteur de glycosyle 107 (1.23 g, 0.49 mmol) dans du dichlorométhane (32 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (0.55 g). Après 1.5 h à -200C (CCM), de l'hydrogénocarbonate de sodium solide est additionné jusqu'à neutralisation, et après filtration, lavage par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié à l'aide d'une colonne LH- 20 en utilisant un mélange 1/1 éthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé puis le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 108 (0.93 g, 59%).
Rf = 0.24 (cyclohexane - acétone 7/3).
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy- α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2- azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-α-D-glucopyranoside (n° 109)
A une solution de 108 (1.17 g, 0.36 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (109 mL) est ajoutée une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (1.6 mL), en présence de tamis moléculaire 3 A (458 mg). Après agitation pendant 18 h à température ambiante, le mélange est neutralisé par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange cyclohexane/acétate d'éthyle pour fournir le composé 109 (680 mg, 69%).
Rf = 0.34 (toluène - acétone 7/3).
Figure imgf000071_0001
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyle-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→^4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-3-O-benzyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-α-D-glucopyranoside (n° 110)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (267 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (4.4 ml_, 90 L/mol) du composé 109 (144 mg, 49 μmol). Après 16 heures d'agitation magnétique à 55° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis 0.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué par du méthanol puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 méthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont ensuite concentrées sous vide poussé. Le composé obtenu est alors directement engagé dans l'étape suivante.
Rf = 0.42 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-ammonium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4Hméthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3- O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 111)
A une solution du composé 110 précédemment obtenu dans du méthanol (5 mL) est ajouté du fluorure d'ammonium (133 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à 55°C pendant 48 h, le mélange réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 95/5 méthanol/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé. Si nécessaire, le brut réactionnel est engagé et traité à nouveau dans les mêmes conditions pour fournir le composé 111 (1 17 mg, 85%, 2 étapes).
Rf = 0.31 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-d→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 112)
A une solution du composé 111 (80 mg, 22.3 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (3.6 mL) est ajoutée, goutte à goutte et à 00C, une solution aqueuse 1 N de LiOH (0.7 ml_, 7.8 équivalents/fonction ester méthylique). Après 2h45 d'agitation à 00C, puis 17.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 75/20/5 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 112 (64 mg, 98%).
Rf = 0.25 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 56/32/7.6/18).
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium )-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy-α-D- glucopyranoside (n° 113)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (4.3 mL) du composé 112
(64 mg, 21.7 μmol) sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (178 mg, 2.8 mmol) puis du Pd/C 10% (0.42 g). Après 4h30 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 113 (29.5 mg, 65%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.18 ldoUAvl", 5.43 Glcv", 5.24 ldoUAvl, 5.45 Glcv, 5.25 ldoUAlv, 5.43 GIc'", 5.26 IdoUA", 5.01 GIc'
Figure imgf000074_0001
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyle-2-désoxy- α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2- azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D- glucopyranoside (n° 114)
A une solution du composé 109 (135 mg, 46 μmol) dans du méthanol (16 ml_) est ajouté du fluorure d'ammonium (136 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à température ambiante pendant 9 h, puis à -25°C pendant 15h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis purifié sur colonne de silice (toluène/acétone) pour fournir le composé 114 (57 mg, 46%).
Rf = 0.30 (toluène-méthanol 85/15).
Préparation du méthyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyle-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D- glucopyranoside (n° 115)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (317 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (4.5 ml_, 90 L/mol) du composé 114 (135 mg, 50 μmol). Après 16 heures d'agitation magnétique à 55° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis 0.5 h à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué par du méthanol puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 1 :1 éthanol/dichlorométhane comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé. Le composé 115 (168 mg, 86%) est alors obtenu.
Rf = 0.29 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 56/32/7.6/18).
Préparation du méthyl (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4H6-O-ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O- ammonium sulfonato-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-ammonium sulfonato-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-α-D-glucopyranoside (n° 116)
A une solution du composé 115 (168 mg, 43 μmol) dans du méthanol (5.6 ml_) est ajouté du fluorure d'ammonium (128 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à 55°C pendant 48 h, le mélange réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 95/5 méthanol/eau comme éluant. Si nécessaire, le résidu peut être engagé dans les mêmes conditions en contrôlant l'avancement de la réaction (CCM) et purifié de la même manière. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour fournir le composé 116 (109 mg, 81 %).
Rf = 0.21 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 56/32/7.6/18).
Préparation du méthyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D- glucopyranosvD-d→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithiumH1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonvHamino-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 117)
A une solution du composé 116 (89 mg, 28.5 μmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (3.8 ml_) est ajoutée, goutte à goutte et à 00C, une solution aqueuse 1 N de LiOH (0.7 mL). Après 3h d'agitation à 00C, puis 19h à température ambiante, le milieu réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 75/20/5 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé et si nécessaire, la réaction est à nouveau engagée puis traitée de la même manière pour conduire au composé désiré 117 (70 mg, 81 %).
Rf = 0.12 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 56/32/7.6/18).
Préparation du méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium )-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4H2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 118)
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (2.3 mL) du composé 117 (35 mg, 1 1.6 μmol) sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (95 mg, 1.51 mmol) puis du Pd/C 10% (229 mg). Après 4h30 d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 118 (1 1.1 mg, 45%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.17 ldoUAvl", 5.42 Glcv", 5.25 ldoUAvl, 5.45 Glcv, 5.24 ldoUAlv, 5.44 GIc'", 5.26 IdoUA", 5.03 GIc'
Figure imgf000077_0001
24 1 19: R = (CH2)5Ph 123: R = (CH2)5Ph
120: R = CH2CHPr2 124: R = CH2CHPr2
121 : R = (CH2J3C6H11 125: R = (CH2J3C6H11
122: R = (CH2)2CHPh2 126: R = (CH2)2CHPh2
Figure imgf000077_0002
131 : R = : (CH2)5Ph 127: R = (CH2)5Ph
132: R = : CH2CHPr2 128: R = CH2CHPr2
133: R = (CH^3C6H11 129: R = (CHj)3C6H11 134: R = (CH2)2CHPh2 130: R = (CH2)2CHPh2
Figure imgf000077_0003
135: R = (CH2)5Ph 139: R = (CH 2)5Ph
136: R = CH2CHPr2 140: R = CH2CHPr2 137^ = (CH2)AH11 141 : R = (CH2)AH11 138: R = (CH2)2CHPh2 142: R = (CH2)2CHPh2 Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 119)
Du triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (1.13 mL, 0,2 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate
24 (24.9 g, 24.6 mmol) et de 5-phénylpentanol (8.3 mL, 2 équivalents molaires) dans du dichlorométhane (1.1 L) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (31 g). Après 10 minutes (CCM), on ajoute une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium saturée à 00C, et l'agitation est maintenue pendant 1 h. On filtre la solution, on la lave par une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, on sèche (Na2SO4) et on évapore à sec. Une purification sur gel de silice conduit à 119 (21.9 g, 88%).
LC-MS m/z 1034.3 [(M + Na)+]. TR = 1.80 min
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 120)
Une solution 0.1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (2.78 mL, 0,2 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à - 200 C, à une solution de l'imidate 24 (1.2 g, 1.19 mmol) et de 2-propylpentanol (1 mL, 5 équivalents molaires) dans du dichlorométhane (63 mL) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (1.8 g). Après 10 minutes (CCM), on ajoute une solution aqueuse d'hydrogénocarbonate de sodium saturée à 0°C. On filtre la solution, on la lave avec de l'eau, on sèche (Na2SO4) et on évapore à sec. Une purification sur gel de silice conduit à 120 (0.91 g, 76%).
LC-MS m/z 1000.3 [(M + Na)+]. TR = 1.86 min
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 121)
Le composé 24 (1.2 g, 1.19 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 120 pour fournir le composé 121 (1.09 g, 91 %).
LC-MS m/z 1012.3 [(M + Na)+]. TR = 1.88 min
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 122) Le composé 24 (1.2 g, 1.19 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 120 pour fournir le composé 122 (1.02 g, 82%).
Rf = 0.34 (cyclohexane-acétone 7/3). Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-
L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 123)
A une solution de 119 (21.9 g, 21.6 mmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (260 m L) est additionné du [tBu2SnCI(OH)]2 (0.926 g, 0.15 équivalent molaire) préparé selon A. Orita et al., Chem. Eur. J. (2001 ) 7, 3321. Après agitation à 35°C pendant 7.5h puis à température ambiante pendant 17h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis engagé directement dans l'étape suivante.
LC-MS m/z 992.3 [(M + Na)+]. TR = 1.74 min Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 124)
A une solution de 120 (0.9 g, 0.93 mmol) dans un mélange 1 :1 méthanol/tétrahydrofurane (12 m L) est additionné du [tBu2SnCI(OH)]2 (0.037 g, 0.14 équivalent molaire) préparé selon A. Orita et al., Chem. Eur. J. (2001 ) 7, 3321. Après agitation à température ambiante pendant 16h puis à 35°C pendant 4h, le mélange réactionnel est concentré sous vide puis engagé directement dans l'étape suivante.
LC-MS m/z 959.2 [(M + Na)+]. TR = 1.79 min Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 125)
Le composé 121 (1.09 g, 1.10 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 124 pour fournir le composé 125 qui est directement engagé dans l'étape suivante.
LC-MS m/z 970.3 [(M + Na)+]. TR = 10.75 min
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 126)
Le composé 122 (0.844 g, 0.80 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 124. En cas de non complétion de la réaction, la même quantité de réactif peut éventuellement être rajoutée. Après traitement, le composé 126 est directement engagé dans l'étape suivante.
Rf = 0.41 (cyclohexane-acétone 3/2).
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 127)
Le composé 123 précédemment obtenu est mis en solution dans du dichlorométhane (173 ml_). A 00C et sous argon, sont additionnés successivement de la triéthylamine (7.6 ml_, 2.5 équivalents molaire), du 4-diméthylaminopyridine (1.3 g, 0.5 équivalent molaire), et du chlorure de te/f-butyldiphénylsilyle (1 1.2 ml_, 2 équivalents molaire). Après 5.5h d'agitation magnétique, le milieu réactionnel est dilué par du dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'hydrogénosulfate de potassium à 10%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séché
(Na2SC>4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est partiellement purifié sur silice (acétone - toluène) qui est engagé dans l'étape suivante.
LC-MS m/z 1231.2 [(M + Na)+]. TR = 2.13 min
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 128)
Le composé 124 précédemment obtenu est mis en solution dans du dichlorométhane (7.4 mL). A 00C et sous argon, sont additionnés successivement du
4-diméthylaminopyridine (57 mg, 0.5 équivalent molaire), de la triéthylamine (0.32 mL,
2.5 équivalents molaire), et du chlorure de te/f-butyldiphénylsilyle (0.48 mL, 2.0 équivalents molaire). Après 18h d'agitation magnétique, le milieu réactionnel est dilué par du dichlorométhane, lavé par une solution aqueuse d'hydrogénosulfate de potassium à 10%, par une solution aqueuse à 2% d'hydrogénocarbonate de sodium, puis par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séché (Na2SO4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est purifié sur silice (acétone - cyclohexane) pour conduire à 128 (962 mg, 88% (2 étapes)).
Rf = 0.46 (cyclohexane-acétone 3/2).
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 129)
Le composé 125 précédemment obtenu est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 128 pour fournir le composé 129 (1.12 g, 86% (2 étapes)). LC-MS m/z 1208.4 [(M + Na)+]. TR = 13.01 min
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 130)
Le composé 126 précédemment obtenu est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 128 pour fournir le composé 130 (0.97 g, 81 % (2 étapes)).
LC-MS m/z 1278.3 [(M + Na)+]. TR = 12.72 min
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 131)
A une solution du composé 127 précédemment obtenu dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (1.01 L) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (9.3 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h10 d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 131 (16.7 g, 70% (3 étapes)).
LC-MS m/z 1 133.3 [(M + Na)+]. TR = 2.12 min
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.19 IdoUA", 4.63 GIc'
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 132)
A une solution du composé 128 (0.96 g, 0.82 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (164 mL) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (0.38 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 132 (0.84 g, 96%).
Rf = 0.42 (cyclohexane-acétone 7/3).
Masse : méthode "ESI", mode positif : masse théorique = 1076.3326 ; masse expérimentale : 1098.5109 [M+Na]+.
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.15 IdoUA", 4.61 GIc' Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 133) Le composé 129 (1.12 g, 0.94 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 132 pour fournir le composé 133 (1.03 g, 98%).
LC-MS m/z 1 1 10.4 [(M + Na)+]. TR = 13.05 min
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.22 IdoUA", 4.64 GIc'
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 134)
Le composé 130 (0.96 g, 0.77 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 132 pour fournir le composé 134 (833 mg, 94%).
LC-MS m/z 1 180.5 [(M + Na)+]. TR = 12.22 min
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ
5.21 IdoUA", 4.54 GIc'
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 135)
Du triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (0.51 mL, 0,15 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 63 (24.7 g, 22.5 mmol) et d'accepteur de glycosyle 131 (16.7 g, 15 mmol) dans du dichlorométhane (788 mL) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (16.9 g). Après 2h45 à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 135 (20.6 g, 67%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, CDCI3) δ 5.35 ldoUAlv, 4.77 GIc'", 5.30 IdoUA", 4.61 GIc'
Rf = 0.41 (toluène-acétone 9/1 ).
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→^4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 136) Une solution 0.1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle dans du dichlorométhane (1.1 ml_, 0,15 mole par mole d'imidate) est ajouté, sous argon, à -
20° C, à une solution de l'imidate 63 (0.81 g, 0.73 mmol) et d'accepteur de glycosyle
132 (0.84 g, 0.78 mmol) dans du dichlorométhane (26 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (0.55 g). Après 2h30 à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 136 (0.66 g, 47%).
Rf = 0.23 (cyclohexane-acétone 4/1 ).
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4Hméthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 137)
Le donneur de glycosyle 63 (0.63 g, 0.57 mmol) et l'accepteur de glycosyle 133 (1.03 g, 0.95 mmol) sont traités selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 136 pour fournir le composé 137 (716 mg, 62%).
Rf = 0.20 (cyclohexane-acétone 3/1 ).
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O- lévulinoyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 138)
Le donneur de glycosyle 63 (0.63 g, 0.57 mmol) et l'accepteur de glycosyle 134 (0.83 g, 0.72 mmol) sont traités selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 136 pour fournir le composé 138.
Rf = 0.34 (cyclohexane-acétone 7/3).
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 139)
A une solution du composé 135 (20.6 g, 10.0 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (500 mL) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (4.6 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h20 d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 139 (16.8 g, 86%).
Rf = 0.37 (toluène-acétone 9/1 ). Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 140)
A une solution du composé 136 (20.6 g, 10.0 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (500 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (4.6 g, 5 équivalents molaire). Après 1 h20 d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 140 (16.8 g, 86%).
Rf = 0.36 (toluène-méthanol 95/5).
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→^4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 141)
Le composé 137 (0.71 g, 0.35 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 140 pour fournir le composé 141 (0.65 g, 96%).
Rf = 0.37 (cyclohexane-acétone 7/3). Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β- D-glucopyranoside (n° 142)
Le composé 138 obtenu à l'étape précédente est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 140 pour fournir le composé 142 (0.518 g, 45% (2 étapes)).
Rf = 0.37 (toluène-acétone 9/1 ).
Figure imgf000085_0001
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-4-O-lévulinoyl-α- L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-
Figure imgf000085_0002
butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 143)
Du triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (0.42 ml_, 0,15 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 27 (1 1.1 g, 12.3 mmol) et d'accepteur de glycosyle 139 (16.8 g, 8.6 mmol) dans du dichlorométhane (430 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (10.4 g). Après 3h d'agitation magnétique à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 143 (14.71 g, 64%).
Rf = 0.31 (toluène-acétone 85/15).
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronateH1→4H6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 144)
A une solution du composé 143 (13.51 g, 5.0 mmol) dans un mélange 1 :2 toluène/éthanol (252 ml_) est ajouté de l'acétate d'hydrazine (2.31 g, 5 équivalents molaire). Après 0.5h d'agitation magnétique, le mélange est concentré sous vide puis purifié sur gel de silice pour donner le composé 144 (9.41 g, 72%).
Rf = 0.18 (toluène-acétone 85/15). Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 145)
Une solution 0.1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (7.2 ml_, 0,15 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à -20° C, à une solution de l'imidate 38 (4.29 g, 4.8 mmol) et d'accepteur de glycosyle 144 (10.33 g, 4.0 mmol) dans du dichlorométhane (170 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (3.7 g). Après 19h45 à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 145 (7.74 g, 58%).
Rf = 0.4 (toluène-acétone 85/15).
Figure imgf000087_0001
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
1 ,6-anhvdro-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-β-D-glucopyranose (n° 147)
A une solution du composé 146 (1 1.1 mmol) (WO2006/021653) dans du N,N- diméthylformamide (78 ml_) est ajouté, à O0C et sous argon, de l'hydrogénocarbonate de potassium (5.56 g, 5 équivalents molaire), puis de l'iodure de méthyle (6.9 ml_, 10 équivalents molaire). Après 17h d'agitation magnétique, les réactifs peuvent être à nouveau additionnés si nécessaire. Après complétion de la réaction (CCM), le milieu réactionnel est concentré sous vide, le brut réactionnel est dilué à l'acétate d'éthyle, lavé à l'eau puis par une solution aqueuse saturée en thiosulfate de sodium, séché
(Na2SC>4), filtré et concentré. Le résidu obtenu est engagé dans l'étape suivante sans purification.
LC-MS m/z 465.3 [(M + NH4)+]. TR = 0.8 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(i >4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-1 ,6-anhvdro-2-azido-3-O-benzyl- 2-désoxy-β-D-glucopyranose (n° 148)
Une solution 1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (0.95 mL, 0,15 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajoutée, sous argon, à - 20° C, à une solution de l'imidate 38 (5.68 g, 6.35 mmol) et d'accepteur de glycosyle 147 (4.2 g, 7 mmol) dans du dichlorométhane (222 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (4.8 g). Après 1.5h à -200C (CCM), du catalyseur est éventuellement addition jusqu'à complétion de la réaction (CCM), puis on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution saturée de chlorure de sodium, séchage (Na2SO4), filtration et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 148 (3.15 g, 38%).
Rf = 0.41 (cyclohexane-acétate d'éthyle 3/2). Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-
(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-1 ,6-di-O-acétyl-2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-α,β-D-glucopyranose (n° 149)
Le résidu obtenu à l'étape précédente est dissous dans de l'anhydride acétique (13 ml_), puis est additionné, à 00C et en 15 min, de l'acide trifluoroacétique (TFA) (1.3 ml_). Le mélange réactionnel est agité pendant 10 min à 00C, 18 h à température ambiante, puis est concentré, coévaporé au toluène, et purifié sur gel de silice (heptane - acétate d'éthyle), pour donner le composé 149 (2.99 g, 88%).
LC-MS m/z 1456.0 [(M + Na)+]. TR = 1.96 min
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α,β-D-glucopyranose (n° 150)
A une solution du composé 149 (2.99 g, 2.09 mmol) dans de l'éther diéthylique
(42 mL), est additionnée, à 0°C, de la benzylamine (BnNH2) (8.2 mL, 36 équivalents molaire). Après 1.5h d'agitation à 00C, puis 4.5h à température ambiante, le mélange réactionnel est neutralisé avec de l'HCI 1 N à froid (0-4°C), lavé à l'eau, séché (Na2SO4), filtré et concentré, et purifié sur gel de silice (heptane - acétate d'éthyle) pour conduire à 150 (2.6 g, 90%).
Rf = 0.21 (cyclohexane-acétate d'éthyle 3/2).
Préparation du (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)- (1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2- O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-α,β-D-glucopyranose trichloroacétimidate (n° 151)
A une solution du composé 150 (2.6 g, 1.9 mmol) dans le dichlorométhane (36 mL) est additionné sous argon et à 0°C, du carbonate de césium (Cs2CO3) (0.97 g, 1.6 équivalent molaire) puis du trichloroacétonitrile (CCI3CN) (0.94 ml_, 5.0 équivalents molaire). Après 1 h d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré, puis concentré. Le résidu est purifié sur gel de silice (acétate d'éthyle - cyclohexane + 0.1% de triéthylamine) pour donner 151 (2.25 g, 80%).
Rf = 0.38 (cyclohexane-acétate d'éthyle 3/2).
Figure imgf000089_0001
153: R = (CH2^C6H11 154: R = (CH2)3Ph2
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1 iAV
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 152)
Une solution 0.1 M de triflate de te/f-butyldiméthylsilyle (0.46 ml_, 0,15 mole par mole d'imidate) dans du dichlorométhane est ajouté, sous argon, à - 200C, à une solution de l'imidate 151 (0.56 g, 0.36 mmol) et d'accepteur de glycosyle 140 (0.59 g, 0.31 mmol) dans du dichlorométhane (1 1 ml_) en présence de tamis moléculaire 4 Λ (0.27 g). Après 5h à -200C (CCM), on ajoute de l'hydrogénocarbonate de sodium solide. Après filtration, lavage par une solution d'hydrogénocarbonate de sodium aqueuse à 2%, par une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, puis séchage (Na2SO4) et évaporation à sec, le résidu est purifié sur gel de silice pour conduire à 152 (0.82 g, 82%).
Rf = 0.32 (cyclohexane-acétone 7/3).
Préparation du 3-cyclohexyl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-
(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-0- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 153)
Le donneur de glycosyle 151 (0.56 g, 0.36 mmol) et l'accepteur de glycosyle
141 (0.65 g, 0.34 mmol) sont traités selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 152 pour fournir le composé 153 (808 mg, 73%).
Rf = 0.36 (cyclohexane-acétone 3/2).
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 2-O-acétyl-3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyD-d→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)- (6-O-acétyl-2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O- acétyl-3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-6-O-te/f- butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 2-O-acétyl-3-O-benzyl- α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2- [(benzyloxy)carbonyliamino-β-D-glucopyranoside (n° 154)
Le donneur de glycosyle 151 (0.51 g, 0.33 mmol) et l'accepteur de glycosyle
142 (0.52 g, 0.26 mmol) sont traités selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 152 pour fournir le composé 154 (635 mg, 73%).
Rf = 0.25 (cyclohexane-acétone 7/3).
Figure imgf000091_0001
174: R = (CH2J3Ph2 Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0- benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 155)
A une solution de 145 (639 mg, 0.192 mmol) dans un mélange 3/2 de méthanol/dichlorométhane (57 ml_) en présence de tamis moléculaire 3 A (230 mg) est ajouté, à 00C, une solution méthanolique 1 M de méthylate de sodium (0.427 ml_).
Après agitation à 00C pendant 3 h et à température ambiante pendant 15 h, le mélange est neutralisé à 00C par de la résine H+ Dowex 50WX4. Après filtration et concentration, le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange toluène/acétate d'éthyle/éthanol pour fournir le composé 155 (444 mg, 80%).
Rf = 0.28 (toluène-acétate d'éthyle-éthanol 7/3/0.3).
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O- benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 156)
Le composé 152 (420 mg, 0.128 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 155 pour fournir le composé 156 (178 mg, 46%).
Rf = 0.20 (cyclohexane-acétone 7/3).
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O- benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 157)
Le composé 153 (402 mg, 0.122 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 155 pour fournir le composé 157 (276 mg, 75%).
Rf = 0.40 (cyclohexane-acétone 7/3). Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-d→4)- (méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3- O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(méthyl 3-0- benzyl-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2- désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 158)
Le composé 154 (315 mg, 0.093 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 155 pour fournir le composé 158 (244 mg, 84%).
Rf = 0.13 (cyclohexane-acétone 7/3).
Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O- benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-3-O-benzyl-6- O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 159)
On ajoute du complexe triéthylamine/trioxyde de soufre (775 mg, 5 moles par fonction hydroxyle) à une solution dans le Λ/,Λ/-diméthylformamide (12.8 ml_, 90 L/mol) du composé 155 (438 mg, 142 μmol). Après 17 heures d'agitation magnétique à 50° C à l'abri de la lumière, on ajoute à 00C du méthanol et après 0.5 h d'agitation à 00C puis 1 h à température ambiante, le milieu réactionnel est dilué par du méthanol puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 159 (571 mg, 96%).
Rf = 0.48 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 29/13/3.4/7).
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronateH1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O- benzyl-6-O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-0- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-3-O-benzyl-6- O-fe/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 160)
Le composé 156 (178 mg, 0.054 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 159 pour fournir le composé 160 (196 mg, 75%).
Rf = 0.48 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 3-cyclohexyl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl
3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido- 3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(méthyl 3-
O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-3-O-benzyl-
6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside
(n° 161)
Le composé 157 (345 mg, 0.1 13 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 159 pour fournir le composé 161 (332 mg, 70%).
Rf = 0.48 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O- triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4H2-azido-3-O-benzyl-2- désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O- benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O- benzyl-2-désoxy-6-O-triéthylammonium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-(2-azido- 3-O-benzyl-6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(méthyl 3- O-benzyl-2-O-triéthylammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→^4)-3-O-benzyl- 6-O-te/f-butyldiphénylsilyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 162)
Le composé 158 (300 mg, 0.096 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 159. Si nécessaire, le mélange obtenu peut être purifié en phase inverse sur colonne RP-18 en utilisant un mélange méthanol-eau comme éluant pour fournir le composé 162 (21 1 mg, 52%).
Rf = 0.47 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 29/13/3.4/7). Préparation du 5-phényl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 163)
A une solution du composé 159 (520 mg, 125 μmol) dans du méthanol (16 ml_) est ajouté du fluorure d'ammonium (370 mg, 80 équivalents molaires). Après agitation magnétique à 55°C pendant 24 h puis à température ambiante pendant 16 h, le mélange réactionnel est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé puis le résidu est purifié sur gel de silice avec un mélange acétate d'éthyle/pyridine/acide acétique/eau comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors partiellement concentrées puis le résidu est purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,/V- diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour fournir le composé 163 (295 mg, 74%).
Rf = 0.45 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 29/13/3.4/7).
Préparation du 2-propyl-pentyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 164)
Le composé 160 (196 mg, 0.048 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 163. La durée de la réaction peut éventuellement être raccourcie en fonction du suivi par CCM. Par ailleurs, une purification en phase inverse peut s'avérer nécessaire pour fournir le composé 164 (104 mg, 59%).
Rf = 0.32 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-(1→^4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 165)
Le composé 161 (230 mg, 0.055 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 164 pour fournir le composé 165 (1 15 mg, 56%).
Rf = 0.57 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (méthyl 3,4-di-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O- ammonium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(méthyl 3-O-benzyl-2-O-ammonium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate)-d→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D- glucopyranoside (n° 166)
Le composé 162 (43 mg, 10.2 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 163 pour fournir le composé 166.
Rf = 0.32 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 29/13/3.4/7).
Préparation du 5-phényl-pentyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-d→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-d→^4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 167)
A une solution du composé 163 (289 mg, 91 μmol) dans du méthanol (3.59 mL) sont ajoutés, à 00C, une solution aqueuse de peroxyde d'hydrogène à 30% (2.23 mL) puis, goutte à goutte, une solution aqueuse 5N de LiOH (1.46 mL). Après 3h d'agitation à 00C, 16 h à température ambiante, puis 27 h à 45°C, le milieu réactionnel est neutralisé à 00C par addition d'acide chlorhydrique 3N, puis purifié à l'aide d'une colonne LH-20 en utilisant un mélange 9:1 méthanol/Λ/,Λ/-diméthylformamide comme éluant. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 167 (267 mg, 95%).
Rf = 0.25 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 2-propyl-pentyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 168)
Le composé 164 (104 mg, 0.029 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 167 pour fournir le composé 168.
Rf = 0.28 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16). Préparation du 3-cvclohexyl-propyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→^4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithiumH1→4H2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosvD-d→^4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→^4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-[(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 169)
Le composé 165 (1 10 mg, 0.030 mmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 167 pour fournir le composé 169 (76 mg, 83%).
Rf = 0.20 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 3,3-diphényl-propyl (3,4-di-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4H3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithium)-(1→^4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-6-O-lithium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→^4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de lithiumH1→4)-(2-azido-3-O-benzyl-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(3-O-benzyl-2-O-lithium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de lithium)-(1→4)-3-O-benzyl-2-désoxy-2-r(benzyloxy)carbonyl1amino-β-D-glucopyranoside (n° 170)
Le composé 166 est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 167. Si nécessaire, le résidu obtenu peut être engagé dans les mêmes conditions pour fournir le composé 170 (27 mg, 87% (2 étapes)).
Rf = 0.39 (AcOEt-pyridine-AcOH-H2O 57/29/7.2/16).
Préparation du 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2- désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy- β-D-glucopyranoside (n° 171 )
A une solution dans un mélange 1 :1 te/f-butanol/eau (16.1 ml_) du composé 167 précédemment obtenu sont ajoutés successivement du formiate d'ammonium (658 mg, 10.4 mmol) puis du Pd/C 10% (1.61 g). Après 4h d'agitation vigoureuse à température ambiante, le milieu réactionnel est filtré, partiellement concentré sous vide, puis on dépose la solution au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 171 (109 mg, 62%).
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 663.08 [M-3H]3"
(forme acide).
Préparation du 2-propyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2- désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)- (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-amino-2-désoxy- β-D-glucopyranoside (n° 172)
Le composé 168 est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 171 pour fournir le composé 172 (47 mg, 74% (2 étapes)).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, D2O) δ 5.29* ldoUAvl", 5.50** Glcv", 5.29* ldoUAvl, 5.48** Glcv, 5.29* ldoUAlv, 5.48** GIc'", 5.22* IdollA", 4.78** GIc1
* et ** : Les signaux peuvent être interchangés.
Préparation du 3-cvclohexyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside (n° 173)
Le composé 169 (88 mg, 29 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 171 pour fournir le composé 173 (63 mg, 99%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, D2O) δ 5.29* ldoUAvl", 5.50** Glcv", 5.29* ldoUAvl, 5.48** Glcv, 5.29* ldoUAlv, 5.48** GIc'", 5.22* IdoUA", 4.78** GIc'
* et ** : Les signaux peuvent être interchangés.
Préparation du 3,3-diphényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodiumH1→4H2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-amino-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-amino-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-amino-2-désoxy-β-D-glucopyranoside (n° 174)
Le composé 170 (17.4 mg, 5.6 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 171 pour fournir le composé 174 (5.5 mg, 44%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.15 ldoUAvl", 5.42 Glcv", 5.23 ldoUAvl, 5.40 Glcv, 5.23 ldoUAlv, 5.38 GIc'", 5.19 IdoUA", 4.39 GIc'
Exemples de composés selon l'invention :
EXEMPLE 1 : Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodiumH1→4H2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxv-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β- p-glucopyranoside (composé n° 1)
Figure imgf000100_0001
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (2.1 ml_) du composé 43 (39 mg, 16.6 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium
(223 mg, 2.66 mmol), puis goutte à goutte et à O0C, de l'anhydride acétique (126 μl_, 1.33 mmol). Après 3h d'agitation vigoureuse à O0C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 1 (30 mg, 73%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, D2O) δ 5.14 ldoUAvl", 5.13 Glcv", 5.16 ldoUAvl, 5.13 Glcv, 5.15 ldoUAlv, 5.14 GIc'", 5.17 IdoUA", 4.51 GIc'
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2509.72 ; masse expérimentale : 2508.82 ± 0,34 u.m.a.
EXEMPLE 2 : Pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-
(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6- 0-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (composé n° 2)
Figure imgf000101_0001
A une solution du composé 43 (26 mg, 1 1.1 μmol) dans un mélange 7:3 N,N- diméthylformamide/eau (2.9 ml_) sont additionnés goutte à goutte et à O0C de la diisopropyléthylamine (33 μl_, 17 équivalents molaires) en solution dans du N, N- diméthylformamide (100 μl_), ainsi que du butyrate de N-hydroxysuccinimide (27.4 mg,
13 équivalents molaires) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (100 μl_). Une agitation est maintenue à température ambiante pendant 4h, puis la même quantité de réactif est additionnée dans les mêmes conditions à deux reprises. Après un total de
18h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 2 (26 mg, 89%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.14 ldoUAvl", 5.12* Glcv", 5.14 ldoUAvl, 5.1 1 * Glcv, 5.14 ldoUAlv, 5.10* GIc'", 5.15 IdoUA", 4.50 GIc'
* : Les signaux peuvent être interchangés.
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 588.1095 [M-4H]4"
(forme acide).
EXEMPLE 3 : Pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium )-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2-désoxy-2-
(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6- 0-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (composé n° 3)
Figure imgf000102_0001
A une solution du composé 43 (10 mg, 4.27 μmol) dans l'eau (0.3 ml_) sont additionnés goutte à goutte et à O0C de la diisopropyléthylamine (20 μl_, 26.8 équivalents molaires) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (200 μl_), ainsi que de l'hexanoate de N-hydroxysuccinimide (18.2 mg, 20 équivalents molaires) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (500 μl_). Une agitation est maintenue à O0C pendant 15 min puis à température ambiante pendant 16h. Le milieu réactionnel est ensuite déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 3 (4 mg, 34%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.1 1 ldoUAvl", 5.08 Glcv", 5.14 ldoUAvl, 5.09 Glcv, 5.13 ldoUAlv, 5.10 GIc'", 5.14 IdoUA", 4.47
GIc'
A-
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 627.6120 [M-4H] (forme acide). EXEMPLE 4 : Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-[(cvclopentylcarbonyl)amino1-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-[(cvclopentylcarbonyl)amino1-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-[(cvclopentylcarbonyl)amino1-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-2-r(cvclopentylcarbonyl)amino1-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D- glucopyranoside (composé n° 4)
Figure imgf000102_0002
A une solution du composé 43 (9 mg, 3.84 μmol) dans de l'eau (0.3 ml_) sont additionnés goutte à goutte et à 00C du Λ/,Λ/-diméthylformamide (0.5 ml_), de la diisopropyléthylamine (7 μl_, 2.6 équivalents molaires par aminé libre) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (50 μl_), ainsi que du cyclopentane carboxylate de N- hydroxysuccinimide (6.6 mg, 2 équivalents molaires par aminé libre) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (50 μl_). Une agitation est maintenue à température ambiante pendant 2h, puis la même quantité de réactif est additionnée dans les mêmes conditions à quatre reprises. Après un total de 18h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G- 25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 4 (5.6 mg, 55%). En cas de réaction incomplète, le produit obtenu peut être ré-engagé dans les mêmes conditions. Si nécessaire, il peut être purifié par chromatographie d'échange d'ions en utilisant une colonne Dionex CarboPac® PA100 semi-préparative (9 x 250 mm) avec un gradient partant d'un éluant A vers un éluant B, l'éluant A étant constitué d'un mélange eau/acétonitrile (4/1 ) + 0.01 % de diméthylsulfoxyde, et l'éluant B d'un mélange d'une solution de chlorure de sodium 2N et d'acétonitrile (4/1 ). On concentre alors les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant une colonne de Sephadex® G-25 éluée à l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 4.
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.06* ldoUAvl", 5.05** Glcv", 5.08* ldoUAvl, 5.03** Glcv, 5.06* ldoUAlv, 5.05** GIc'", 5.08* IdoUA", 4.44** GIc'
* et ** : Les signaux peuvent être interchangés.
[α]D 15.4° (C 0.25 ; H2O). EXEMPLE 5 : Undecyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β- p-glucopyranoside (composé n° 5)
Figure imgf000104_0001
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (2.3 ml_) du composé 52 (32 mg, 13.2 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium
(174 mg, 2.08 mmol), puis goutte à goutte et à O0C, de l'anhydride acétique (100 μl_,
1.05 mmol). Après 2.5h d'agitation vigoureuse à O0C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 5 (31 mg,
91%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, D2O) δ 5.14 ldoUAvl", 5.13* Glcv", 5.14** ldoUAvl, 5.13* Glcv, 5.15** ldoUAlv, 5.13* GIc'", 5.16 IdoUA", 4.50 GIc'
* et ** : Les signaux peuvent être interchangés.
[α]D 18.6° (c 1 ; H20).
EXEMPLE 6 : 5-phényl-pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β- p-glucopyranoside (composé n° 6)
Figure imgf000104_0002
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (2.7 mL) du composé 53 (36 mg, 14.8 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium (199 mg, 2.38 mmol), puis goutte à goutte et à 00C, de l'anhydride acétique (1 12 μl_, 1.19 mmol). Après 2.5h d'agitation vigoureuse à 00C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 6 (25.6 mg, 68%). Si nécessaire, il peut être purifié par chromatographie d'échange d'ions en utilisant une colonne Dionex CarboPac® PA100 semi-préparative (9 x 250 mm) avec un gradient partant d'un éluant A vers un éluant B, l'éluant A étant constitué d'un mélange eau/acétonitrile (4/1 ) + 0.01 % de diméthylsulfoxyde, et l'éluant B d'un mélange d'une solution de chlorure de sodium 2N et d'acétonitrile (4/1 ). On concentre alors les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant une colonne de Sephadex® G- 25 éluée à l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 6.
Déplacements chimiques des protons anomériques (500 MHz, D2O) δ 5.14 ldoUAvl", 5.12 Glcv", 5.16 ldoUAvl, 5.12 Glcv, 5.16 ldoUAlv, 5.12 GIc'", 5.17 IdoUA", 4.48
GIc'
A-
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 579.0867 [M-4H] (forme acide).
EXEMPLE 7 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- r(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)1?-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (composé n° 7)
Figure imgf000105_0001
A une solution du composé 77 (10,8 mg, 4,73 μmol) dans une solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (472 μL) sont ajoutés successivement, à 00C et sous atmosphère inerte, l'hydrogénocarbonate de sodium solide (64 mg) et l'anhydride acétique (36 μl_). Après 18h d'agitation à température ambiante, le mélange réactionnel est filtré (filtre Millipore® LSWP 5 μm) puis déposé sur une colonne de gel Sephadex® G-25 fine éluée par une solution aqueuse de NaCI 0,2 M. Les fractions contenant le composé attendu sont réunies, et déposées sur une colonne de Sephadex® G-25 fine (95 x 2 cm) éluée par de l'eau et on obtient 6,7 mg du composé 7.
1H RMN (D2O) δ des protons anomériques : 5,20 ; 5,18 (2 H) ; 5,17 (2H) ; 5,16 ; 5,15 ; 4,78 ppm.
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2453,62 ; masse expérimentale : 2453,22 ± 0,17 u.m.a.
EXEMPLE 8 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodiumH1→4H2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (composé n° 8)
Figure imgf000106_0001
Le composé 85 (23,0 mg, 1 1 ,1 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation du composé 7 pour donner le composé 8 (25,2 mg).
1H RMN (D2O) δ des protons anomériques : 5,45 ; 5,42 (2 H) ; 5,22 ; 5,21 ; 5,20 ; 5,18 ; 5,03 ppm.
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2249,53 ; masse expérimentale : 2249,19 ± 0,18 u.m.a. EXEMPLE 9 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (composé n° 9)
Figure imgf000107_0001
Le composé 90 (52,1 mg, 23,9 μmol) est traité selon le même mode opératoire que celui décrit pour la préparation de l'exemple 7 pour donner le composé 9 (50,7 mg).
1H RMN (D2O) δ des protons anomériques : 5,18 ; 5,16 (2H); 5,14 ; 5,15 ; 5,13 ; 5,09 ; 4,75 ppm.
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2351 ,57 ; masse expérimentale : 2350,88 ± 0,10 u.m.a.
EXEMPLE 10 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodiumH1→4H2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4H2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (composé n° 10)
Figure imgf000107_0002
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (3.7 ml_) du composé 100 (76 mg, 37 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium
(497 mg, 5.92 mmol), puis goutte à goutte et à 00C, de l'anhydride acétique (283 μl_, 3.0 mmol). Après 3h d'agitation vigoureuse à 00C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 10 (61 mg, 73%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.13 ldoUAvl", 5.13 Glcv", 5.15 ldoUAvl, 5.13 Glcv, 5.16 ldoUAlv, 5.10 GIc'", 5.16 IdoUA", 4.75 GIc'
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2249.53 ; masse expérimentale : 2249.02 ± 0,35 u.m.a.
EXEMPLE 1 1 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (composé n° 11)
Figure imgf000108_0001
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (2.6 mL) du composé 105 (56 mg, 26 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium (349 mg, 4.16 mmol), puis goutte à goutte et à 00C, de l'anhydride acétique (194 μL, 2.05 mmol). Après 3h d'agitation vigoureuse à 00C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 11 (45 mg, 74%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.13 ldoUAvl", 5.12 Glcv", 5.16 ldoUAvl, 5.12 Glcv, 5.15 ldoUAlv, 5.13 GIc'", 5.17 IdoUA", 4.72 GIc'
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2351.57 ; masse expérimentale : 2351.13 ± 0.06 u.m.a.
EXEMPLE 12 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranoside (composé n° 12)
Figure imgf000109_0001
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (1.4 ml_) du composé 113 (29.5 mg, 14 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium
(188 mg, 2.24 mmol), puis goutte à goutte et à O0C, de l'anhydride acétique (105 μl_,
1.12 mmol). Après 3h d'agitation vigoureuse à O0C puis 15h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 12 (29 mg,
92%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.12 ldoUAvl", 5.06 Glcv", 5.14 ldoUAvl, 5.1 1 Glcv, 5.13 ldoUAlv, 5.09 GIc'", 5.14 IdoUA", 4.73 GIc'
[α]D 1 15.3° (c 0.3 ; H2O).
EXEMPLE 13 : Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodiumH1→4H2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (composé n° 13)
Figure imgf000110_0001
A une solution aqueuse saturée d'hydrogénocarbonate de sodium (1.26 ml_) du composé 118 (27 mg, 12.6 μmol) sont additionnés de l'hydrogénocarbonate de sodium (169 mg, 2.02 mmol), puis goutte à goutte et à 00C, de l'anhydride acétique (95 μl_, 1.01 mmol). Après 3h d'agitation vigoureuse à 00C puis 16h à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 13 (26.5 mg, 89%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.12 ldoUAvl", 5.05 Glcv", 5.13 ldoUAvl, 5.10 Glcv, 5.13 ldoUAlv, 5.10 GIc'", 5.14 IdoUA", 4.72 GIc'
Masse : méthode "ESI", mode négatif : masse théorique = 2351.57 ; masse expérimentale : 2350.96 ± 0.20 u.m.a.
EXEMPLE 14 : 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-
(1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (composé n° 14)
Figure imgf000111_0001
A une solution du composé 171 (126 mg, 56.9 μmol) dans un mélange 7 :3 Λ/,Λ/-diméthylformamide/eau (12.6 ml_) sont additionnés goutte à goutte et à O0C de la diisopropyléthylamine (148 μl_, 14.9 équivalents molaires) en solution dans du N, N- diméthylformamide (100 μl_), ainsi que du butyrate de N-hydroxysuccinimide (1 16 mg, 1 1 équivalents molaires) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (100 μl_). Une agitation est maintenue à température ambiante pendant 3h, puis la même quantité de réactif est additionnée dans les mêmes conditions à trois reprises. Après un total de 23h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 14 (133 mg, 93%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.07 ldoUAvl", 4.99 Glcv", 5.09 ldoUAvl, 5.04 Glcv, 5.10 ldoUAlv, 5.01 GIc'", 5.06 IdoUA", 4.38
GIc'
[α]D 50.5° (c 1 ; H2O).
EXEMPLE 15 : 2-propyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-
(1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (composé n° 15)
Figure imgf000111_0002
Le composé 172 (47 mg, 22 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 14 pour fournir le composé 15 (46 mg, 85%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.33 ldoUAvl", 5.30 Glcv", 5.35 ldoUAvl, 5.24 Glcv, 5.36 ldoUAlv, 5.27 GIc'", 5.32 IdoUA", 4.63
GIc'
[α]D 60° (c 1 ; H2O).
EXEMPLE 16 : 3-cvclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-d→4)-(2-désoxy-2-acétamido-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4H2-désoxy-2-acétamido-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosvD-d→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-d→4)-(2-désoxy-2-acétamido-α- D-glucopyranosyl)-d→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- d→4)-2-désoxy-2-acétamido-β-D-glucopyranoside (composé n° 16)
Figure imgf000112_0001
Le composé 172 (10 mg, 4.56 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 13 pour fournir le composé 16 (8.8 mg, 82%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.15 ldoUAvl", 5.08 Glcv", 5.17 ldoUAvl, 5.13 Glcv, 5.17 ldoUAlv, 5.1 1 GIc'", 5.16 IdoUA", 4.50
GIc'
[α]D +40.9° (c 0.88 ; H2O).
EXEMPLE 17 : 3-cvclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosylH1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-d→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β- p-glucopyranoside (composé n° 17)
Figure imgf000113_0001
Le composé 173 (10 mg, 4.56 μmol) est traité selon un protocole similaire à celui décrit pour la synthèse de 14 pour fournir le composé 17 (7.7 mg, 69%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.23 ldoUAvl", 5.20 Glcv", 5.25 ldoUAvl, 5.15 Glcv, 5.26 ldoUAlv, 5.17 GIc'", 5.22 IdoUA", 4.57
GIc'
[α]D +53.8° (c 0.77 ; H2O).
EXEMPLE 18 : 3,3-diphényl-propyl (2-0-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4H2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β- p-glucopyranoside (composé n° 18)
Figure imgf000113_0002
A une solution du composé 174 (5.5 mg, 2.4 μmol) dans un mélange 2 :1 N,N- diméthylformamide/eau (4.8 mL) sont additionnés goutte à goutte et à O0C de la diisopropyléthylamine (63 μL, 15 équivalents molaires) en solution dans du N,N- diméthylformamide (43 μL), ainsi que du butyrate de N-hydroxysuccinimide (49 mg, 1 1 équivalents molaires) en solution dans du Λ/,Λ/-diméthylformamide (43 μL). Une agitation est maintenue à température ambiante pendant 3h, puis la même quantité de réactif est additionnée dans les mêmes conditions à trois reprises. Après un total de 24h d'agitation à température ambiante, le milieu réactionnel est déposé au sommet d'une colonne de Sephadex® G-25 éluée par du chlorure de sodium 0,2 M. On concentre les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant la même colonne éluée par l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 18 (6 mg, 98%).
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.22 ldoUAvl", 5.19 Glcv", 5.23 ldoUAvl, 5.13 Glcv, 5.23 ldoUAlv, 5.17 GIc'", 5.20 IdoUA", 4.48 GIc'
[α]D +24° (c 0.48, H2O).
EXEMPLE 19 : 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosvIuronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(3-méthyl-1- oxobutvDamino-β-D-glucopyranoside (composé n° 19)
Figure imgf000114_0001
Une solution du composé 171 (84 mg, 37.8 μmol) dans un mélange 7:3 N,N- diméthylformamide/eau (8.4 mL) est traité avec de la 1-[(3-methylbutanoyl)oxy] pyrrolidine-2,5-dione selon un procédé analogue à la synthèse du composé 14 pour conduire au composé désiré 19 (41.8 mg, 43%). Si nécessaire, il peut être purifié par chromatographie d'échange d'ions en utilisant une colonne Dionex CarboPac® PA100 semi-préparative (9 x 250 mm) avec un gradient partant d'un éluant A vers un éluant B, l'éluant A étant constitué d'un mélange eau/acétonitrile (4/1 ) + 0.01 % de diméthylsulfoxyde, et l'éluant B d'un mélange d'une solution de chlorure de sodium 2N et d'acétonitrile (4/1 ). On concentre alors les fractions contenant le produit et on dessale en utilisant une colonne de Sephadex® G-25 éluée à l'eau. Les fractions contenant le produit sont alors concentrées sous vide poussé pour conduire au composé désiré 19 pur.
Déplacements chimiques des protons anomériques (600 MHz, D2O) δ 5.23 ldoUAvl", 5.19 Glcv", 5.24 ldoUAvl, 5.13 Glcv, 5.25 ldoUAlv, 5.17 GIc'", 5.22 IdoUA", 4.55 GIc'
Méthode "ESI", mode négatif : ion multichargé détecté m/z 581.3517 [M-4H]4" (forme acide). Les composés selon l'invention ont fait l'objet d'essais pharmacologiques permettant de déterminer leur effet agoniste des récepteurs des FGFs et leur activité sur l'angiogenèse, ainsi que sur la revascularisation post-ischémique.
Modèle d'angiogenèse in vitro : activité spécifique envers le FGF2
Le modèle d'angiogenèse in vitro correspond à un réarrangement de cellules endothéliales veineuses humaines sur une matrice biologique. La matrice est réalisée en distribuant, dans chaque puits d 'une plaque de 96 puits (Becton Dickinson 353872), 60 μl de Matrigel® dilué au 1/3 (Growth factor reduced Matrigel® : Becton Dickinson 356230) dans du collagène (rat Tail collagène, type I : Becton Dickinson 354249 ). La matrice biologique se durcit après 1 heure à 37°C.
Des cellules endothéliales veineuses humaines (HUVEC réf : C-12200 - Promocell) ensemencées sur la matrice biologique à 7800 cellules/puits dans 120 μl de milieu EBM® (Endothelial Basai Médium, Lonza C3121 ) + 2% SVF (sérum de veau fœtal - Lonza) + hEGF (Epidermal Growth Factor Humaine Recombinante - Lonza) 10 μg/ml. Les cellules sont stimulées avec le FGF2 (R&D Systems / 234 - FSE - 0 50) 10 ng/ml ou avec les produits de l'invention pendant 18 heures à 37°C en présence de 5% de CO2. Après 24 heures, les cellules sont observées au microscope (objectif X4) et l'analyse de la longueur des pseudo-tubules est effectuée à l'aide d'un logiciel d'image (BIOCOM-logiciel Visiolab 2000).
Dans ce test d'angiogenèse in vitro, les composés de l'invention présentent une activité spécifique comprise entre 10"6 M et 10"12 M. Par exemple, les composés n° 1 et 2 sont actifs à 10"11 M.
Modèle d'implant en cellulose chez la souris
Ce modèle est une adaptation du modèle décrit par Andrade et al.
(Microvascular Research, 1997, 54, 253-61 ) afin de tester des produits pharmacologiques susceptibles d'activer l'apparition de l'angiogenèse.
Les animaux (souris blanches BALB/c J consanguines) sont anesthésiées avec un mélange Xylazine (Rompun®, 10 mg/kg) / Kétamine (Imalgène® 1000, 100 mg/kg) par voie intra-péritonéale. Le dos de l'animal est rasé et désinfecté à l'Héxomédine®. Une poche d'air est créée en sous-cutané sur le dos de la souris par injection de 5 ml d'air stérile. Une incision d'environ 2 cm, sur le haut du dos de l'animal est réalisée afin d'introduire un implant de cellulose stérile (disque de 1 cm de diamètre, 2 mm d'épaisseur, Cellspon® ref 0501 ) imprégné avec 50 μl de solution stérile contenant le produit à tester. L'incision est ensuite suturée et nettoyée à l'Héxomédine®.
Les jours suivants la pose de l'implant, les souris peuvent recevoir dans l'implant le produit par une injection à travers la peau (50 μl/implant/jour) sous anesthésie gazeuse (Isoflurane à 5% (Aerrane®, Baxter)).
Sept jours après la pose de l'éponge, les souris sont sacrifiées par une dose létale de Pentobarbital sodique (CEVA santé animale), administrée par voie intra- péritonéale. La peau est ensuite découpée, environ 1 cm autour de l'éponge en évitant la cicatrice afin de dégager la peau et l'éponge. L'éponge est ensuite découpée en plusieurs morceaux et placée dans un tube Ribolyser® contenant 1 ml de tampon de lyse (CeII Death Détection ELISA, Roche). Les tubes sont agités 4 fois consécutives, durant 20 secondes, force 4, au broyeur cellulaire (FastPrep® FP 120). Les tubes sont ensuite centrifugés 10 minutes à 2000 g à 200C et les surnageants sont congelés à -200C en attendant le dosage de l'hémoglobine. Le jour du dosage, les tubes sont à nouveau centrifugés après décongélation et la concentration d'hémoglobine est mesurée avec le réactif de Drabkin (Sigma, volume à volume) par lecture au spectrophotomètre à 405 nm contre une gamme étalon d'hémoglobine bovine (Sigma).
La concentration d'hémoglobine dans chaque échantillon est exprimée en mg/ml d'après la régression polynomiale réalisée à partir de la gamme. Les résultats sont exprimés en valeur moyenne (± sem) pour chaque groupe. Les différences entre les groupes sont testées avec une ANOVA suivie d'un test de Dunnett sur la racine carrée des valeurs.
Dans ce test in vivo, les composés de l'invention ont démontré une activité spécifique comprise entre 5 et 45 ng/site. Par exemple, les composés n° 1 et 2 sont actifs à 45 ng/site, et le composé n° 7 est actif à 15 ng/site.
A titre de comparaison par rapport à un composé analogue au composé n° 7 selon l'invention, mais dans lequel tous les groupes -NH-acyle sont remplacés par des groupes -NH-SO3-, le composé n° 7 selon l'invention présente dans ce test une activité supérieure de 21% par rapport audit analogue entièrement sulfaté, ce qui montre l'importance des groupements N-acyles dans les composés selon l'invention. Pharmacocinétique Le profil pharmacocinétique des composés selon l'invention est évalué après administration sous-cutanée , chez la souris OF1 ou C57/BL6 , à une concentration de 30 mg/kg. L 'exposition systémique des composés est évaluée après une administration unique chez l'animal prélablement anesthésié au pentobarbital. Le sang est prélevé au niveau de la veine cave, puis transféré dans des tubes en plastique contenant de l'héparine de lithium. Après centrifugation (2000 g pour 10 minutes à 8°C ), la concentration des composés dans le plasma est quantifiée par LC/MS-MS.
D'une façon générale, les composés testés présentent un profil pharmacocinétique amélioré (notamment AUC et concentration plasmatique plus élevées, temps de demi-vie plus longs) par rapport à des composés analogues entièrement sulfatés (remplacement des groupes N-acyles par des groupes -NH-SO3-). A titre d'exemple, les paramètres pharmacocinétiques des composés n° 1 , 6 et 7 selon l'invention sont décrits dans le tableau qui suit, en comparaison avec un analogue entièrement sulfaté n° 175 de formule suivante :
Figure imgf000117_0001
Composé 175
Figure imgf000117_0002
. AUC (O-tlast) : Aire sous la courbe (« Area Under the Curve ») entre le temps 0
(temps initial d'administration du composé) et tlast (le temps de la dernière mesure.
- T1/2 (h) : Temps de demi-vie
. Plasma conc, t = 4h : Concentration plasmatique à 4h Ces résultats montrent l'importance des groupements N-acyles dans les composés selon l'invention, qui les rendent particulièrement adaptés à leur utilisation en tant que médicaments. II ressort de ce qui précède que les composés selon l'invention ont une activité agoniste des récepteurs des FGFs et une activité sur l'angiogenèse, ainsi que sur la revascularisation post-ischémique. Les composés selon l'invention peuvent donc être utilisés pour la préparation de médicaments, notamment de médicaments utiles pour le traitement des maladies nécessitant une activation des récepteurs des FGFs ou de médicaments utiles dans des pathologies nécessitant une activation de l'angiogenèse et une revascularisation post-ischémique.
Ainsi, selon un autre de ses aspects, l'invention a donc pour objet des médicaments qui comprennent un composé de formule (l)/(l') selon l'invention, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce dernier.
Ces médicaments trouvent leur emploi en thérapeutique, notamment dans le traitement de l'ischémie (ischémie cardiaque, ischémie artérielle des membres inférieurs), le traitement des maladies associées à un rétrécissement ou à une obstruction des artères ou des artérites, le traitement des angines de poitrine, le traitement de la thromboangéite oblitérante, le traitement de l'athérosclérose, le traitement de l'inhibition de la resténose après angioplastie ou endoartérectomie, le traitement de la cicatrisation, le traitement pour la régénération musculaire, le traitement pour la survie des myoblastes, le traitement de la neuropathie périphérique, le traitement des dommages nerveux post-opératoires, le traitement de déficiences nerveuses telles que la maladie de Parkinson, la maladie d'Alzheimer, la maladie du prion et la dégénérescence neuronale chez l'alcoolique, le traitement de démences, le traitement pour l'amélioration de la survie du greffon de pancréas bioartificiel chez le patient diabétique, le traitement de l'amélioration de la la revascularisation des greffons et de la survie des greffes, le traitement de la dégénérescence rétinienne, le traitement de la rétinite pigmentaire, le traitement de lOstéoarthrite, le traitement de la pré- éclampsie ou le traitement des lésions vasculaires et du syndrome de détresse respiratoire aiguë, le traitement pour la réparation des cartilages, le traitement pour la réparation et la protection osseuse, le traitement pour la réparation et la protection des follicules pileux et pour la protection et la régulation de la croissance capillaire. L'ischémie est une diminution de la circulation artérielle dans un organe entraînant une baisse de la concentration en oxygène dans les tissus lésés. Dans les mécanismes de revascularisation post-ischémiques, deux mécanismes principaux entrent en jeu : l'angiogenèse et l'artériogenèse. L'angiogenèse est le processus de génération de nouveaux vaisseaux capillaires à partir de vaisseaux pré-existants. L'artériogenèse contribue au développement (augmentation en taille et en calibre) des vaisseaux collatéraux autour de la zone ischémiée ou avasculaire.
Parmi les facteurs de croissance impliqués dans ces processus de revascularisation, la famille des FGF et notamment le FGF-2 a été la plus largement décrite (Post, M. J., Laham, R., Sellke, F. W. & Simons, M. Therapeutic angiogenesis in cardiology using protein formulations. Cardiovasc Res 49, 522-31 , 2001 ). Ainsi, le FGF2 et ses récepteurs représentent des cibles très pertinentes pour les thérapies visant à induire les processus d'angiogenèse et d'artériogenèse (Khurana, R. & Simons, M. Insights from angiogenesis trials using fibroblast growth factor for advanced arteriosclerotic disease. Trends Cardiovasc Med 13, 1 16-22, 2003).
L'une des applications des composés de l'invention est le traitement post- ischémique après occlusion au niveau cardiaque ou des artères périphériques. En ce qui concerne le traitement de l'ischémie cardiaque, un des essais cliniques les plus prometteurs est un essai clinique où du FGF-2 était séquestré dans des micro-sphères d'alginate en présence d'héparine (Laham, R. J. et al. Local perivascular delivery of basic fibroblast growth factor in patients undergoing coronary bypass surgery: results of a phase I randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Circulation 100, 1865- 71 , 1999). Ces micro-sphères étaient implantées proche du foyer ischémique au niveau du myocarde. Après 90 jours, tous les patients traités au FGF2 ne présentaient aucun symptôme cardiaque ischémique. En comparaison, dans le groupe contrôle, 3 des 7 patients possédaient à 90 jours des symptômes persistants et 2 patients ont eu recours à de la chirurgie vasculaire. De façon intéressante, le bénéfice de la thérapie étaient maintenu après 3 ans de suivi. Ces observations suggèrent que des composés mimant le FGF2 peuvent représenter une thérapie de choix pour le traitement des conséquences de l'ischémie cardiaque.
Trois essais cliniques sur l'injection de FGF2 dans l'artère coronaire ont été réalisés lors de traitement du rétrécissement des artères coronaires (Laham, R. J. et al. Intracoronary basic fibroblast growth factor (FGF-2) in patients with severe ischémie heart disease: results of a phase I open-label dose escalation study. J Am CoII Cardiol 36, 2132-9, 2000; Simons, M. et al. Pharmacological treatment of coronary artery disease with recombinant fibroblast growth factor-2: double-blind, randomized, controlled clinical trial. Circulation 105, 788-93, 2002 ; Unger, E. F. et al. Effects of a single intracoronary injection of basic fibroblast growth factor in stable angina pectoris. Am J Cardiol 85, 1414-9, 2000). Le résultat de ces trois essais montre que les infusions intra-coronaires de FGF2 sont bien tolérées et améliorent significativement l'état des patients. Ainsi, les composés décrits dans l'invention peuvent trouver une application dans le traitement des maladies associées à un rétrécissement des artères coronaires et notamment dans le traitement des angines de poitrine.
Les maladies des artères distales et notamment les artérites des membres inférieurs sont dues à l'obstruction chronique des artérioles irriguant les extrémités. Ces pathologies touchent principalement les membres inférieurs. Dans un essai clinique de phase I, des patients ayant des pathologies des artères périphériques entraînant la claudication ont reçu des injections de FGF2 (Lazarous, D. F. et al., Basic fibroblast growth factor in patients with intermittent claudication: results of a phase I trial. J Am CoII Cardiol 36, 1239-44, 2000). Dans ce contexte, le FGF2 était bien toléré chez ces patients et les données cliniques suggèrent un effet bénéfique du FGF2 notamment sur l'amélioration de la marche. Ces données cliniques suggèrent que les composés de l'invention représentent un outil thérapeutique de choix pour le traitement des maladies associées à une obstruction des artères distales.
La maladie de Buerger ou thromboangéite oblitérante affecte les structures vasculaires distales et se caractérisent par une artérite distale des jambes avec douleurs et ulcérations. Dans ce contexte, une induction de l'angiogenèse et de la vasculogenèse représenterait une thérapie pour cette pathologie. Les composés de ladite invention représentent une thérapie de choix pour la thromboangéite oblitérante. La neuropathie périphérique est une atteinte axonale ou démyélinisante du nerf périphérique moteur et/ou sensitif qui entraîne une désensibilisation des membres distaux. Une des complications secondaires majeures du diabète est le développement chronique d'une neuropathie périphérique. Dans ce contexte, II a été démontré que le FGF2 induisait une régénération axonale qui pourrait être une thérapie de choix dans dans le traitement de la lésion des nerfs périphériques et donc dans la neuropathie périphérique (Basic fibroblast growth factor isoforms promote axonal elongation and branching of adult sensory neurons in vitro. Klimaschewski L, Nindl W, Feurle J, Kavakebi P, Kostron H. Neuroscience. 2004;126(2):347-53). De par l'activité agoniste des récepteurs du FGF, les composés de ladite invention représenteraient un traitement de choix dans la neuropathie périphérique chez le patient sain ou diabétique.
Il est clairement établit que le FGF2 est un activateur des cellules nerveuses durant le développement. Des résultats récents suggèrent que le FGF2 serait également un facteur pivotai pour promovoir la régénération des neurones chez l'adulte (Sapieha PS, Peltier M, Rendahl KG, Manning WC, Di Polo A., Fibroblast growth factor-2 gène delivery stimulâtes axon growth by adult retinal ganglion cells after acute optic nerve injury. Mol CeII Neurosci. 2003 Nov;24(3):656-72.). Par leurs activités agonistes des récepteurs des FGF, les composés de ladite invention représenterait une thérapie de choix dans la réparation des dommages nerveux postopératoires, dans la réparation de déficiences nerveuses tel que la maladie de Parkinson, la maladie d'Alzheimer, la maladie du prion, la dégénérescence neuronale chez l'alcoolique ou dans les cas de démences. La prolifération et la migration des cellules musculaires lisses vasculaires contribuent à l'hypertrophie intimale des artères et joue ainsi un rôle prépondérant dans l'athérosclérose et dans la resténose après angioplastie et endoarterectomie. Il a été démontré qu'un facteur angiogène, le VEGF, réduisait significativement l'épaississement de l'intima en accélérant la ré-endothélialisation (Van Belle, E., Maillard, L., Tio, F. O. & Isner, J. M. Accelerated endothelialization by local delivery of recombinant human vascular endothelial growth factor reduces in-stent intimai formation. Biochem Biophys Res Commun 235, 31 1-6, 1997). Ainsi, les composés de la présente invention, possédant une activité pro-angiogène, peuvent être utiles dans le traitement de l'athérosclérose et dans l'inhibition de la resténose après angioplastie ou endoarterectomie.
Le réseau vasculaire est essentiel au développement et à la préservation des tissus. En promouvant la délivrance des nutriments, de l'oxygène et des cellules, les vaisseaux sanguins aident à maintenir l'intégrité fonctionnelle et structurale des tissus. Dans ce contexte, l'angiogenèse et la vasculogenèse permettent de préserver et de perfuser les tissus après une ischémie. Les facteurs de croissance angiogéniques comme le VEGF et le FGF2 favorisent ainsi la revascularisation pour la régénération des tissus. Les composés présentés dans l'invention pourraient représenter un traitement de choix dans le traitement pour la régénération des muscles.
Les processus de régénération musculaire sur les muscles dystrophiques ou normaux dépendent de l'apport de cytokines et de facteurs de croissance angiogéniques au niveau local (Fibbi, G., D'Alessio, S., Pucci, M., Cerletti, M. & DeI Rosso, M. Growth factor-dependent prolifération and invasion of muscle satellite cells require the cell-associated fibrinolytic System. Biol Chem 383, 127-36, 2002). Il a été proposé que le système FGF était un système critique de la régénération musculaire, de la survie et de la prolifération des myoblastes (Neuhaus, P. et al. Reduced mobility of fibroblast growth factor (FGF)-deficient myoblasts might contribute to dystrophic changes in the musculature of FGF2/FGF6/mdx triple-mutant mice. Mol CeII Biol 23, 6037-48, 2003). Le FGF2 ainsi que les composés de ladite invention pourraient être exploités afin de promouvoir la régénération cardiaque. Ils amélioreraient ainsi la perfusion du myocarde après ischémie (Hendel, R. C. et al. Effect of intracoronary recombinant human vascular endothelial growth factor on myocardial perfusion: évidence for a dose-dependent effect. Circulation 101 , 1 18-21 , 2000) ainsi que la survie et la progression de myoblastes transplantés et notamment dans la dystrophie musculaire de Duchenne.
L'angiogenèse est un phénomène essentiel durant la cicatrisation cutanée. Les nouveaux vaisseaux formés apportent l'oxygène et les nutriments nécessaires à la réparation tissulaire. Dans le cas de patient diabétique, la cicatrisation est un processus lent et difficile présentant des défauts d'angiogenèse. Les FGFS font partie des facteurs de croissance les plus impliqués dans les processus d'angiogenèse durant la phase de cicatrisation. Certains FGF sont fortements sur-régulés dans les cellules du derme après une blessure cutanée. Par leurs activités agonistes des récepteurs du FGF, les composés de ladite invention représenteraient une thérapie de choix pour le traitement de la cicatrisation chez le patient sain ou diabétique
La transplantation de pancréas bio-artificiel est une technique très prometteuse pour le traitement de certains type de diabète. Il a été démontré, chez le rat diabétique, que la vascularisation dans les pancréas bio-artificiel était beaucoup plus importante quand les pancréas étaient imprégnées de microsphères portant du FGF2 (Sakurai, Tomonori; Satake, Akira, Sumi, Shoichiro, Inoue, Kazutomo, Nagata, Natsuki, Tabata, Yasuhiko. The Efficient Prevascularization Induced by Fibroblast Growth Factor 2 With a Collagen-Coated Device Improves the CeII Survival of a Bioartificial Pancréas. Pancréas. 28(3):e70-e79, April 2004). Cette revasculaisation améliore ainsi la survie des pancréas bio-artificiel implantés et par conséquent la survie du greffon. Par leurs activités agonistes des récepteurs du FGF, les composés de ladite invention représenteraient une thérapie de choix dans l'amélioration de la survie du greffon de pancréas bioartificiel chez le patient diabétique et de façon plus générale dans l'amélioration de la la revascularisation des greffons et par conséquent dans la survie des greffes.
La rétinite pigmentaire est une pathologie impliquant la dégénérescence progressive de la rétine caractérisée par une dégénérescence des photorécepteurs et une oblitération des vaisseaux rétiniens. Lahdenranta et al. (An anti-angiogenic state in mice and humans with retinal photoreceptor cell degeneration. Proc Natl Acad Sci USA 98, 10368-73, 2001 ) ont proposé que des facteurs de croissance angiogéniques régulent la coordination neurale et la vascularisation associée de la rétine en fonctionnant simultanément comme facteurs de survie des photorécepteurs et comme régulateur des cellules endothéliales. Dans ce contexte, l'injection intra-vitréenne de FGF2 retarde la dégénérescence des photorécepteurs en agissant sur la survie et sur l'angiogenèse rétinienne (Faktorovich, E. G., Steinberg, R. H., Yasumura, D., Matthes, M. T. & LaVail, M. M. Basic fibroblast growth factor and local injury protect photoreceptors from light damage in the rat. J Neurosci 12, 3554-67,1992). Ces observations démontrent l'intérêt des composés décrits dans l'invention comme thérapie dans la dégénérescence rétinienne et notamment dans la rétinite pigmentaire.
Dans le domaine de rosteoarthrite, de nombreuses études sont réalisées pour restaurer le cartilage articulaire détruit. Dans ce contexte, il a été reporté que la prolifération et la différenciation des chondrocytes étaient stimulées par le FGF2 in vitro (Kato Y, Gospodarowicz D. Sulfated proteoglycan synthesis by confluent cultures of rabbit costal chondrocytes grown in the présence of fibroblast growth factor. J CeII Biol. 1985 Feb;100(2):477-85). De plus, Cuevas et al. ont montré que le FGF2 induit la réparation du cartilage in vivo (Cuevas P, Burgos J, Baird A. Basic fibroblast growth factor (FGF) promûtes cartilage repair in vivo. Biochem Biophys Res Commun. 1988 Oct 31 ;156(2):61 1-8). Takafuji et al. ont également montré que des implants de FGF2 amélioraient de façon significative des cartilages temporo-mandibulaires de lapins souffrant d'ostéoarthrites (Takafuji H, Suzuki T, Okubo Y, Fujimura K, Bessho K Régénération of articular cartilage defects in the temporomandibular joint of rabbits by fibroblast growth factor-2: a pilot study. lnt J Oral Maxillofac Surg. 2007 Oct;36(10):934-7). Ces observations démontrent l'intérêt des composés décrits dans l'invention comme thérapie dans le traitement de l'ostéoarthrite et de la réparation des cartilages. Dans le domaine de la réparation osseuse, un des besoins essentiels est de trouver des agents qui stimulent la formation de l'os. Parmi les principaux facteurs de croissance, il est établi que l'administration systémique de FGF2 facilite la réparation de l'os (Accélération of fracture healing in nonhuman primates by fibroblast growth factor-2. Kawaguchi H, Nakamura K, Tabata Y, Ikada Y, Aoyama I, Anzai J, Nakamura T, Hiyama Y, Tamura M. J Clin Endocrinol Metab. 2001 Feb;86(2), 875-880). L'application locale de FGF2 dans des matrices de gélatine accélère la réparation osseuse chez des primates suggérant l'utilité clinique du FGF2 dans le traitement des fractures. Par les propriétés agonistes pour les récepteurs du FGF, les composés de ladite invention pourrait représenter un traitement de choix dans la réparation osseuse
La pré-eclampsie est une pathologie du placenta associée à un défaut de vascularisation (Sherer, D. M. & Abulafia, O. Angiogenesis during implantation, and placental and early embryonic development. Placenta 22, 1-13, 2001 ). Ces défauts de vascularisation seraient dus à un défaut d'angiogenèse et entraîneraient des perturbations au niveau du placenta pouvant aboutir à la mort du fœtus. Les composés de l'invention pourraient être un traitement de choix pour pallier à un défaut d'angiogenèse dans les placentas pré-éclamptiques.
En plus des effets inducteurs de l'angiogenèse, les facteurs de croissance comme le VEGF ou le FGF2 protègent les cellules endothéliales des inducteurs intrinsèques et extrinsèques de l'apoptose. La voie de signalisation intrinsèque est activée par les mitochondries en réponse à un stress comme la déprivation ou les dommages sur l'ADN, alors que la voie de signalisation extrinsèque est induite par la liaison de facteurs pro-apoptotique comme le TNF-α ou Fas. Il est maintenant clairement décrit que le VEGF et le FGF2 sont deux facteurs de survie des cellules endothéliales (RoIe of Raf in Vascular Protection from Distinct Apoptotic Stimuli : A Alavi, J. D. Hood, R. Frausto, D. G. Stupack, D.A. Cheresh : Science 4 JuIy 2003: Vol. 301. no. 5629, pp. 94-96). Le Syndrome de Détresse Respiratoire Aiguë (ARDS) se caractérisent par des problèmes cardio-vasculaires et neuropsychiatriques. Dans le cadre des problèmes cardio-vasculaires les patients présentent des lésions vasculaires importantes et notamment une induction de l'apoptose des cellules endothéliales élevée. Récemment, Harnacher & al. ont démontré que les fluides de lavages bronchoalvéolaires de patients atteint d'ARDS présentaient une activité pro- apoptotique contre les cellules endothéliales micro-vasculaire de poumon (Tumor necrosis factor-alpha and angiostatin are mediators of endothelial cytotoxicity in bronchoalveolar lavages of patients with acute respiratory distress syndrome. Am J Respir Crit Care Med. 2002 Sep 1 ;166(5):651-6 : Harnacher J, Lucas R, Lijnen HR, Buschke S, Dunant Y, Wendel A, Grau GE, Suter PM, Ricou B.). Par leur activité de survie sur les cellules endothéliales, les produits de l'invention pourraient présenter un traitement de choix dans l'amélioration vasculaire des patients atteints de lésions vasculaires et notamment des patients atteint d'ARDS.
La surrégulation endogène de FGF7 (ou KGF) et de FGF18 semble être un important mécanisme pour favoriser la prolifération, la migration et la protection des follicules pileux dans des cas pathologiques ou suite à un traitement tumoral (Comprehensive Analysis of FGF and FGFR Expression in Skin: FGF18 Is Highly Expressed in Hair Follicles and Capable of Inducing Anagen from Telogen Stage Hair Follicles. Mitsuko Kawano, Akiko Komi-Kuramochi, Masahiro Asada, Masashi Suzuki, Junko Oki, Ju Jiang and Toru Imamura). Par leur activité agoniste sur les récepteurs du FGF, les composés de ladite invention pourraient présenter un traitement de choix pour la réparation et la protection des follicules pileux et dans la protection et la régulation de la croissance capillaire.
Selon un autre de ses aspects, la présente invention concerne des compositions pharmaceutiques comprenant, en tant que principe actif, un composé selon l'invention. Ces compositions pharmaceutiques contiennent une dose efficace d'au moins un composé selon l'invention, ou un sel pharmaceutiquement acceptable dudit composé, ainsi qu'au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable. Lesdits excipients sont choisis selon la forme pharmaceutique et le mode d'administration souhaité, parmi les excipients habituels qui sont connus de l'Homme du métier.
Dans les compositions pharmaceutiques de la présente invention pour l'administration orale, sublinguale, sous-cutanée, intramusculaire, intra-veineuse, topique, locale, intratrachéale, intranasale, transdermique ou rectale, le principe actif de formule (l)/(l') ci-dessus ou son sel peut être administré sous forme unitaire d'administration, en mélange avec des excipients pharmaceutiques classiques, aux animaux et aux êtres humains pour la prévention ou le traitement des troubles ou des maladies ci-dessus.
Les formes unitaires d'administration appropriées comprennent les formes par voie orale telles que les comprimés, les gélules molles ou dures, les poudres, les granules et les solutions ou suspensions orales, les formes d'administration sublinguale, buccale, intratrachéale, intraoculaire, intranasale, par inhalation, les formes d'administration topique, transdermique, sous-cutanée, intramusculaire ou intraveineuse, les formes d'administration rectale et les implants. Pour l'application topique, on peut utiliser les composés selon l'invention dans des crèmes, gels, pommades ou lotions.
Les formes d'administration injectables sont particulièrement avantageuses, comprenant de façon classique le composé actif mis en solution dans de l'eau pour injection, en présence de chlorure de sodium. La dose unitaire de composé actif doit être adaptée à l'effet thérapeutique recherché ; elle peut être comprise par exemple entre 0.1 et 100 mg de principe actif.
La présente invention, selon un autre de ses aspects, concerne également une méthode de traitement des pathologies ci-dessus indiquées qui comprend l'administration à un patient d'une dose efficace d'un composé selon l'invention ou un de ses sels pharmaceutiquement acceptables.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composés octasaccharidiques répondant à la formule (I) :
Figure imgf000127_0001
dans laquelle :
- le trait ondulé désigne une liaison située soit au-dessous, soit au-dessus du plan du cycle pyranosique de l'unité glucosamine,
- Ri représente un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de
1 à 16 atomes de carbone et est éventuellement substitué par un ou plusieurs groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes aryles et cycloalkyles,
- R2 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle,
- R3 représente un groupe alkyle, cycloalkyle ou alkyl-cycloalkyle, et
- R4 représente un disaccharide de formule (II) :
Figure imgf000127_0002
dans laquelle :
- R3 est tel que défini ci-dessus,
- R5 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle, et
- R6 représente un disaccharide de formule (III) :
Figure imgf000127_0003
dans laquelle : - R3 est tel que défini ci-dessus,
- R7 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle, et
- R3 représente un disaccharide de formule (IV) :
Figure imgf000128_0001
dans laquelle :
- R3 est tel que défini ci-dessus,
- R9 représente soit un groupe OSO3 ", soit un groupe hydroxyle,
sous forme acide ou sous la forme de l'un quelconque de leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
2. Composés selon la revendication 1 , dans lesquels Ri représente :
- soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 5 à 16 atomes de carbone,
- soit un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 1 à 8 atomes de carbone et est substitué par 1 ou 2 groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes aryles et cycloalkyles.
3. Composés selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lesquels Ri représente un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 5 à 12 atomes de carbone.
4. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, dans lesquels Ri représente un groupe O-alkyle, dans lequel ledit groupe alkyle comporte de 3 à 6 atomes de carbone et est substitué par 1 ou 2 groupes, identiques ou différents, choisis parmi les groupes phényle et cycloalkyles.
5. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, dans lesquels R3 représente soit un groupe alkyle comprenant de 2 à 6 atomes de carbone, soit un groupe cycloalkyle.
6. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, dans lesquels au moins l'un des groupes R2, Rs, R7 et R9 représente un groupe hydroxyle.
7. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, dans lesquels au moins l'un des groupes R2, R5, R7 et R9 représente un groupe hydroxyle et au moins l'un des groupes R2, R5, R7 et R9 représente un groupe OSO3 ".
8. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisés en ce qu'ils répondent à la formule (I'), dans laquelle Ri, R2, R3, R5, R7 et R9 sont tels que définis dans l'une quelconque des revendications 1 à 7 :
Figure imgf000129_0001
(I1)
9. Composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, choisis parmi les composés suivants :
- Pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 1) ;
- Pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1- oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6- 0-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 2) ;
- Pentyl (2-0-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1- oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino- 6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxohexyl)amino-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 3) ;
- Pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2- [(cyclopentylcarbonyl)amino]-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 4) ;
- Undecyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 5) ;
- 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-β-D-glucopyranoside (n° 6) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-[(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)]2-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α- D-glucopyranoside (n° 7) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido- 2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 8) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O- sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido- 2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 9) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α- D-glucopyranoside (n° 10) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato- α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 11) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-α- D-glucopyranoside (n° 12) ;
- Méthyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2- acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-acétamido-2-désoxy-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-acétamido-2-désoxy-6- O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranoside (n° 13) ;
- 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α- D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-désoxy-2-(1-oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 14) ;
- 2-propyl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-
(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-α- D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-2-désoxy-2-(1-oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 15) ;
- 3-cyclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-acétamido-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- acétamido-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α- L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-acétamido-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2- acétamido-β-D-glucopyranoside (n° 16) ; - 3-cyclohexyl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)- (1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (n° 17) ;
- 3,3-diphényl-propyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D-glucopyranosyl)-
(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-(2-désoxy-2- (1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L- idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(1-oxobutyl)amino-β-D- glucopyranoside (n° 18) ; et
- 5-phényl-pentyl (2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-6-O-sodium sulfonato-α-D- glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O-sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)- (1→4)-(2-désoxy-2-(3-méthyl-1 -oxobutyl)amino-α-D-glucopyranosyl)-(1→4)-(2-O- sodium sulfonato-α-L-idopyranosyluronate de sodium)-(1→4)-2-désoxy-2-(3-méthyl-1- oxobutyl)amino-β-D-glucopyranoside (n° 19).
10. Médicament, caractérisé en ce qu'il comprend un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce dernier.
1 1. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, ou un sel pharmaceutiquement acceptable de ce dernier, ainsi qu'au moins un excipient pharmaceutiquement acceptable.
12. Composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9 pour son utilisation dans le traitement des pathologies nécessitant une activation des récepteurs des FGFs.
13. Composé selon la revendication 12, pour son utilisation dans le traitement des pathologies nécessitant une activation de l'angiogenèse et une revascularisation post-ischémique.
14. Composé selon la revendication 12 ou la revendication 13, pour son utilisation dans le traitement de l'ischémie, telle que l'ischémie cardiaque et l'ischémie artérielle des membres inférieurs, le traitement des maladies associées à un rétrécissement ou à une obstruction des artères ou des artérites, le traitement des angines de poitrine, le traitement de la thromboangéite oblitérante, le traitement de l'athérosclérose, le traitement de l'inhibition de la resténose après angioplastie ou endoartérectomie, le traitement de la cicatrisation, le traitement pour la régénération musculaire, le traitement pour la survie des myoblastes, le traitement de la neuropathie périphérique, le traitement des dommages nerveux post-opératoires, le traitement de déficiences nerveuses telles que la maladie de Parkinson, la maladie d'Alzheimer, la maladie du prion et la dégénérescence neuronale chez l'alcoolique, le traitement de démences, le traitement pour l'amélioration de la survie du greffon de pancréas bioartificiel chez le patient diabétique, le traitement de l'amélioration de la la revascularisation des greffons et de la survie des greffes, le traitement de la dégénérescence rétinienne, le traitement de la rétinite pigmentaire, le traitement de l'ostéoarthrite, le traitement de la pré-éclampsie ou le traitement des lésions vasculaires et du syndrome de détresse respiratoire aiguë, le traitement pour la réparation des cartilages, le traitement pour la réparation et la protection osseuse, le traitement pour la réparation et la protection des follicules pileux et pour la protection et la régulation de la croissance capillaire.
15. Composé de formule (V), dans laquelle AIk représente un groupe alkyle, Ri est tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4, Pg, Pg' et Pg", identiques ou différents les uns des autres, représentent des groupes protecteurs :
Figure imgf000135_0001
16. Composé selon la revendication 15, dans lequel Pg, Pg' et Pg" représentent respectivement des groupes benzyle, tBDPS et acétyle, AIk représente un groupe méthyle et R1 est tel que défini dans l'une quelconque des revendications 1 à 4.
17. Composé selon la revendication 15 ou 16, dans lequel Pg, Pg' et Pg" représentent respectivement des groupes benzyle, tBDPS et acétyle, AIk représente un groupe méthyle et R1 est choisi parmi les groupes suivants : -O-méthyle, -O-(CH2)5- phényle, -O-CH2-CH(C3H7)2, -0-(CHz)3-C6HiI et -O-(CH2)2-CH(phényle)2.
18. Composé de formule (Vl), dans laquelle AIk représente un groupe alkyle et Pg, Pg' et Pg", identiques ou différents les uns des autres, représentent des groupes protecteurs :
Figure imgf000135_0002
19. Composé selon la revendication 18, dans lequel AIk représente un groupe méthyle et Pg, Pg' et Pg" représentent respectivement des groupes benzyle, lévulinyle et acétyle.
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