EA011718B1 - Method for producing dialdehydedextran - Google Patents
Method for producing dialdehydedextran Download PDFInfo
- Publication number
- EA011718B1 EA011718B1 EA200801377A EA200801377A EA011718B1 EA 011718 B1 EA011718 B1 EA 011718B1 EA 200801377 A EA200801377 A EA 200801377A EA 200801377 A EA200801377 A EA 200801377A EA 011718 B1 EA011718 B1 EA 011718B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- dextran
- dialdehydedextran
- solution
- oxidation
- amount
- Prior art date
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Изобретение относится к способу получения производных природных соединений - декстранов, которые применяются в качестве носителей и модификаторов природных и синтетических биологически активных веществ и фармакологических субстанций.The invention relates to a method for producing derivatives of natural compounds - dextrans, which are used as carriers and modifiers of natural and synthetic biologically active substances and pharmacological substances.
Уровень техникиState of the art
В предшествующем уровне техники широко известно использование декстранов и их производных, в частности диальдегиддекстрана, в качестве носителей лекарственных препаратов, а также модификаторов активных веществ. В частности, известно использование диальдегиддекстрана для получения конъюгата с таким лекарственным средством, как изониазид, с целью получения эффективного противотуберкулезного препарата. Для эффективного использования диальдегиддекстрана в составе лекарственных препаратов исходный диальдегиддекстран должен удовлетворять определенным требованиям по составу примесных компонентов. Он не должен содержать токсичных примесей и примесей, взаимодействующих с активным веществом при хранении лекарственного препарата, что приводит к снижению активности лекарственного препарата.In the prior art, it is widely known to use dextrans and their derivatives, in particular dialdehydedextran, as drug carriers as well as active substance modifiers. In particular, it is known to use dialdehydedextran to produce a conjugate with a drug such as isoniazid in order to obtain an effective anti-TB drug. For the effective use of dialdehydedextran in the composition of drugs, the initial dialdehydedextran must meet certain requirements for the composition of impurity components. It should not contain toxic impurities and impurities that interact with the active substance during storage of the drug, which leads to a decrease in the activity of the drug.
Формула диальдегиддекстрана (ДАД) известна, например, из статьи Торчилин В.П. и др. «Иммобилизация ферментов на биосовместимых носителях. III. Иммобилизация α-химотрипсина на растворимых декстранах». Биоорганическая химия, т. 2, № 9, 1976 г., с. 1252-1257. Для анализа полученного ДАД в нем определяют карбонильные группы каким-либо общепринятым методом, например широко распространенным методом количественного анализа карбонилсодержащих продуктов по реакции с 2,4динитрофенилгидразином.The formula of dialdehydedextran (DBP) is known, for example, from an article by Torchilin V.P. et al. “Immobilization of enzymes on biocompatible carriers. III. Immobilization of α-chymotrypsin on soluble dextrans. " Bioorganic chemistry, vol. 2, No. 9, 1976, p. 1252-1257. For the analysis of the obtained DBP, carbonyl groups are determined in it by any generally accepted method, for example, the widely used method of quantitative analysis of carbonyl-containing products by reaction with 2,4dinitrophenylhydrazine.
Из документа КН 2087146 известен способ получения диальдегиддекстрана, включающий выделение фракций декстрана с молекулярной массой 20-40 кДа из коммерческого препарата «Реополиглюкин» путем осаждения этанолом (десятикратным объемом охлажденного до 10°С этанола), окисление декстрана периодатом натрия, остановку реакции окисления путем связывания окислителя этиленгликолем, осаждение диальдегиддекстрана этанолом (путем добавления десятикратного объема охлажденного до 10°С этанола). Недостатком известного способа является наличие в диальдегиддекстране йодсодержащих примесей, которые обладают токсическим действием и снижают эффективность использования диальдегиддекстрана в составе лекарственного препарата. Кроме того, конъюгаты диальдегиддекстрана, полученного по изложенному выше способу, с таким лекарственным средством как изониазид являются нестойкими при хранении и содержат низкое количество связанного активного вещества изониазида.A document for the production of dialdehydedextran is known from document KN 2087146, which involves the separation of fractions of dextran with a molecular weight of 20-40 kDa from the commercial preparation Reopoliglukin by precipitation with ethanol (ten times the volume of ethanol cooled to 10 ° C), oxidation of dextran with sodium periodate, stopping the oxidation reaction by binding oxidizing agent with ethylene glycol; precipitation of dialdehydedextran with ethanol (by adding ten times the volume of ethanol cooled to 10 ° C). The disadvantage of this method is the presence in dialdehydedextran of iodine-containing impurities that have a toxic effect and reduce the efficiency of using dialdehydedextran in the composition of the drug. In addition, the conjugates of dialdehydedextran obtained by the above method with a drug such as isoniazid are unstable during storage and contain a low amount of the bound active substance of isoniazid.
В патенте КН 2143900 описан способ получения диальдегиддекстрана, включающий облучение раствора коммерческого препарата «Реополиглюкин» тормозным γ-излучением в дозах 2,5-3,5 Мрад на ускорителе электронов ЭЛВ-2. При действии γ-излучения на водный раствор декстрана происходит радиационно-химическое окисление декстрана с образованием диальдегиддекстрана. Способ осуществляют в одну стадию, он не предполагает использования токсичных реагентов. Недостатком способа является использование сложного и дорогостоящего оборудования типа ускорителя электронов, которое, дополнительно, является весьма энергоемким (потребляемая мощность при работе ускорителя электронов составляет более 100 кВт). Другим недостатком известного способа является содержание в облученном продукте органических и неорганических перекисей, которые образуются при радиолизе водных растворов. Присутствие в диальдегиддекстране перекисей даже в микроколичествах значительно снижает стабильность диальдегиддекстрана. Это не позволяет в дальнейшем эффективно использовать его для получения конъюгатов с лекарственными средствами и фармацевтическими субстанциями, поскольку полученные конъюгаты оказываются нестабильными при хранении.Patent KN 2143900 describes a method for producing dialdehydedextran, which involves irradiating a solution of the commercial drug Reopoliglukin with γ-radiation in doses of 2.5-3.5 Mrad using an ELV-2 electron accelerator. Under the influence of γ-radiation on an aqueous solution of dextran, the chemical radiation oxidation of dextran occurs with the formation of dialdehydedextran. The method is carried out in one stage, it does not involve the use of toxic reagents. The disadvantage of this method is the use of complex and expensive equipment such as an electron accelerator, which, in addition, is very energy intensive (power consumption during operation of the electron accelerator is more than 100 kW). Another disadvantage of this method is the content in the irradiated product of organic and inorganic peroxides, which are formed during the radiolysis of aqueous solutions. The presence of peroxides in dialdehydedextran even in trace amounts significantly reduces the stability of dialdehydedextran. This does not allow further effective use of it to obtain conjugates with drugs and pharmaceutical substances, since the resulting conjugates are unstable during storage.
Известен способ получения диальдегиддекстрана, включающий окисление декстрана периодатом натрия, остановку реакции окисления путем связывания окислителя этиленгликолем, удаление непрореагировавшего периодата натрия и других примесей с помощью диализа смеси против дистиллированной воды, осаждение диальдегиддекстрана этанолом (путем добавления охлажденного до 4-6°С этанола в течение 24 ч), очистку полученного диальдегиддекстрана путем трехкратного промывания ацетоном с последующим переосаждением, высушивание на воздухе. Выход конечного продукта составляет 54% от теоретического. Окислению может быть подвергнут декстран с молекулярной массой 65-75 кДа, как это описано в патентных документах КН 2163120, КН 2168994 и КН 2185166, или коммерческий декстран с молекулярной массой 40 кДа (Р1ика, Швейцария), как это описано в патентном документе КН 2125451. Последний выбран в качестве прототипа изобретения.A known method of producing dialdehydedextran, including the oxidation of dextran with sodium periodate, stopping the oxidation reaction by binding the oxidizing agent with ethylene glycol, removing unreacted sodium periodate and other impurities by dialysis of the mixture against distilled water, precipitating dialdehydedextran with ethanol (by adding ethanol cooled to 4-6 ° C during 24 h), purification of the obtained dialdehydedextran by washing with acetone three times, followed by reprecipitation, drying in air. The yield of the final product is 54% of theoretical. Dextran with a molecular weight of 65-75 kDa can be oxidized, as described in patent documents KN 2163120, KN 2168994 and KN 2185166, or commercial dextran with a molecular weight of 40 kDa (P1ika, Switzerland), as described in patent document KN 2125451 The latter is selected as a prototype of the invention.
Недостатком известного способа является многостадийность и длительность процедуры, обусловленные необходимостью отделения целевого вещества от токсичного периодата натрия и иных примесных компонентов, к которым относятся соли иодной кислоты и этиленгликоль.The disadvantage of this method is the multi-stage and duration of the procedure, due to the need to separate the target substance from the toxic sodium periodate and other impurity components, which include salts of iodic acid and ethylene glycol.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Задачей, на решение которой направлено изобретение, является предложение простого способа получения диальдегиддекстрана, не содержащего токсичных иодсодержащих примесей, с высоким выходом целевого продукта.The problem to which the invention is directed, is to offer a simple method for producing dialdehydedextran, which does not contain toxic iodine-containing impurities, with a high yield of the target product.
Поставленная задача решается тем, что в способе получения диальдегиддекстрана, включающемThe problem is solved in that in the method of producing dialdehydedextran, including
- 1 011718 окисление декстрана, удаление примесей, осаждение диальдегиддекстрана, промывание и высушивание диальдегиддекстрана, декстран окисляют перманганатом калия в кислой среде при нагревании, удаление примесей осуществляют путем отделения жидкости от осадка, выпавшего на стадии окисления декстрана и содержащего двуокись марганца и осаждение диальдегиддекстрана проводят из указанного раствора.- 1 011718 oxidation of dextran, removal of impurities, precipitation of dialdehydedextran, washing and drying of dialdehydedextran, dextran is oxidized with potassium permanganate in an acidic medium when heated, removal of impurities is carried out by separating the liquid from the precipitate that has precipitated at the stage of oxidation of dextran and containing manganese dioxide and the dialdehyde precipitation is carried out the specified solution.
Преимущественно в качестве исходного продукта используют декстран с молекулярной массой 2075 кДа в виде 5-15% водного или водно-солевого раствора.Mostly, dextran with a molecular weight of 2075 kDa is used as the starting product in the form of a 5-15% aqueous or aqueous salt solution.
Для создания кислой среды предпочтительно используют уксусную или муравьиную кислоту в концентрации 5-35% и количестве 0,5-2,0% от исходного объема раствора декстрана, а для окисления декстрана используют 0,5-10% водный раствор перманганата калия в количестве от 1 до 6% от объема раствора декстрана.To create an acidic environment, acetic or formic acid is preferably used in a concentration of 5-35% and an amount of 0.5-2.0% of the initial volume of the dextran solution, and for the oxidation of dextran, a 0.5-10% aqueous solution of potassium permanganate in an amount of 1 to 6% of the volume of dextran solution.
Окисление декстрана проводят при температуре 80-100°С.The oxidation of dextran is carried out at a temperature of 80-100 ° C.
В соответствии с настоящим изобретением в качестве окислителя декстрана используют перманганат калия. Использование перманганата калия вместо периодата натрия приводит к получению продукта, не загрязненного соединениями иода. Кроме того, при окислении декстрана перманганатом калия образуется осадок диоксида марганца, который в ходе образования захватывает примесные компоненты, подлежащие удалению. По отношению к способу-прототипу это позволило исключить протяженную во времени стадию диализа окисленной смеси, предназначенную для отделения непрореагировавшего периодата и иных примесей, и отделить примеси путем отделения жидкости, содержащей диальдегиддекстран, от осадка, содержащего диоксид марганца.In accordance with the present invention, potassium permanganate is used as an oxidizing agent for dextran. The use of potassium permanganate instead of sodium periodate results in a product that is not contaminated with iodine compounds. In addition, during the oxidation of dextran with potassium permanganate, a precipitate of manganese dioxide forms, which during the formation captures the impurity components to be removed. In relation to the prototype method, this eliminated the time-consuming stage of dialysis of the oxidized mixture, intended to separate unreacted periodate and other impurities, and to separate impurities by separating the liquid containing dialdehydedextran from the precipitate containing manganese dioxide.
В качестве исходного продукта может быть использован любой декстран, однако, предпочтительно использовать декстран с молекулярной массой 20-75 кДа в виде 5-15% водного или водно-солевого раствора. Декстран является доступным соединением, например, таким как коммерческий препарат «Реополиглюкин», представляющий собой водно-солевой раствор декстрана с молекулярной массой 20-40 кДа с содержанием основного вещества 10% (по массе) или коммерческий препарат декстрана с молекулярной массой 40 кДа (Р1ика, Швейцария), или декстран с молекулярной массой 65-75 кДа (производство «Сигма», США) и др. Преимущественно декстран используют в виде водного или водно-солевого раствора.Any dextran can be used as a starting product, however, it is preferable to use dextran with a molecular weight of 20-75 kDa in the form of a 5-15% aqueous or aqueous salt solution. Dextran is an available compound, for example, such as the commercial preparation Reopoliglukin, which is an aqueous-salt solution of dextran with a molecular weight of 20-40 kDa with a basic substance content of 10% (by weight) or a commercial preparation of dextran with a molecular weight of 40 kDa (P1ika , Switzerland), or dextran with a molecular weight of 65-75 kDa (manufactured by Sigma, USA) and others. Mostly, dextran is used in the form of an aqueous or water-salt solution.
При использовании декстрана с мМ более 75 кДа его водные растворы имеют высокую вязкость, пропорционально мМ, что затрудняет фильтрацию (чем выше мМ тем ниже скорость фильтрации) при отделении раствора окисленного декстрана от двуокиси марганца. Кроме того, биологические эффекты декстранов с мМ более 75 кДа малоизученны и они не применяются в медицине, возможно вследствие их кумуляции в организме за счет длительного периода выведения. Использование декстранов с мМ ниже 20 кДа не позволяет использовать их для последующей конъюгации с биологически активными веществами, так как они не будут обладать пролонгированным фармакологическим действием за счет быстрого выведения из организма. Технологическим недостатком получения окисленных низкомолекулярных декстранов с мМ менее 20 кДа является необходимость использования больших объемов этанола для его осаждения (1:5 и более).When using dextran with mM more than 75 kDa, its aqueous solutions have a high viscosity proportional to mM, which makes it difficult to filter (the higher the mM, the lower the filtration rate) when separating an oxidized dextran solution from manganese dioxide. In addition, the biological effects of dextrans with mM greater than 75 kDa are poorly understood and are not used in medicine, possibly due to their cumulation in the body due to a long elimination period. The use of dextrans with mM below 20 kDa does not allow their use for subsequent conjugation with biologically active substances, since they will not have a prolonged pharmacological effect due to rapid excretion from the body. The technological disadvantage of obtaining oxidized low molecular weight dextrans with mM less than 20 kDa is the need to use large volumes of ethanol for its precipitation (1: 5 or more).
Перманганат калия следует использовать в количестве, достаточном для полного окисления декстрана до целевого продукта, которое легко может быть опеределено специалистом в данной области техники. Предпочтительно перманганат калия используют в виде 0,5-10% водного в количестве от 1 до 6% от объема раствора декстрана.Potassium permanganate should be used in an amount sufficient to completely oxidize dextran to the desired product, which can easily be determined by a person skilled in the art. Preferably, potassium permanganate is used in the form of 0.5-10% aqueous in an amount of from 1 to 6% by volume of a solution of dextran.
При использовании раствора перманганата в количестве менее 1% в окисленном декстране образуется недостаточно много карбонильных групп с тем, чтобы использовать его для последующей коньюгации с биологически активными веществами. При использовании раствора перманганата в количестве 6% от раствора окисляемого декстрана карбонильная емкость окисленного декстрана по реакции с 2,4динитрофенилгидразином (см. С. Сиггиа, Дж.Г. Ханна «Количественный органический анализ по функциональным группам, Москва, Изд-во «Химия», 1983 г., 672 с.) достигает максимального значения и не увеличивается при увеличении количества перманганата, напротив избыток перманганата может привести к деструкции полимера (см. табл. 1). В качестве контрольного раствора при определении карбонильной емкости окисленного декстрана используют неокисленный декстран, который не вступает в реакцию с 2,4-динитрофенилгидразином.When using a solution of permanganate in an amount of less than 1% in an oxidized dextran not enough carbonyl groups are formed in order to use it for subsequent conjugation with biologically active substances. When using a solution of permanganate in an amount of 6% of a solution of oxidizable dextran, the carbonyl capacity of oxidized dextran by reaction with 2,4dinitrophenylhydrazine (see S. Siggia, J.G. Hannah "Quantitative Organic Analysis by Functional Groups, Moscow, Chemistry Publishing House" , 1983, 672 pp.) Reaches its maximum value and does not increase with an increase in the amount of permanganate; on the contrary, an excess of permanganate can lead to polymer degradation (see Table 1). As a control solution, when determining the carbonyl capacity of oxidized dextran, unoxidized dextran is used, which does not react with 2,4-dinitrophenylhydrazine.
- 2 011718- 2 011718
Таблица 1Table 1
Окисление декстрана перманганатом калия проводят в слабокислой среде, где образуется осадок диоксида марганца. Предпочтительно стадию окисления проводят при рН 3-5, более предпочтительно при рН 4-4,5. Для создания требуемой величины рН могут быть использованы любые кислоты, предпочтительно используют органические кислоты или их смесь, более предпочтительным является использование уксусной или муравьиной кислоты. Так, например, при использовании в качестве исходного декстрана 10% водного раствора декстрана к нему последовательно добавляют слабокислую органическую кислоту в концентрации 5-35% и в количестве 0,5-2,0% от исходного объема раствора декстрана и 2% раствор перманганата калия в количестве от 1 до 6% от объема исходного раствора декстрана.Oxidation of dextran with potassium permanganate is carried out in a slightly acidic environment, where a precipitate of manganese dioxide is formed. Preferably, the oxidation step is carried out at pH 3-5, more preferably at pH 4-4.5. Any acid can be used to create the desired pH, preferably organic acids or a mixture of them are used, more preferred is the use of acetic or formic acid. So, for example, when using a 10% aqueous solution of dextran as the initial dextran, weakly acidic organic acid is successively added to it at a concentration of 5-35% and in an amount of 0.5-2.0% of the initial volume of the dextran solution and 2% potassium permanganate solution in an amount of 1 to 6% of the volume of the initial dextran solution.
При рН <3,0 может происходить частичная кислотная деструкция полимера, что приведет к снижению его молекулярной массы, в то же время выход карбонильных групп будет таким же, как в диапазоне рН 3,0-5,0. При увеличении рН в нейтральную и щелочную сторону количество карбонильных групп при окислении перманганатом калия снижается, особенно в области нейтрального значения рН. Кроме того, при увеличении рН растворимость двуокиси марганца, ввиду ее амфотерности, увеличивается, что соответственно может вызвать загрязнение окисленного декстрана растворимыми солями марганца. При нейтральных и, особенно, щелочных значениях рН осаждение окисленного декстрана этанолом сильно замедляется ввиду формирования тонкодисперсной трудно осаждаемой взвеси. В используемом диапазоне рН 3,0-5,0 не происходит деструкции декстрана, карбонильная емкость окисленного декстрана максимально высока и он легко осаждается этанолом.At pH <3.0, partial acid destruction of the polymer may occur, which will lead to a decrease in its molecular weight, while the yield of carbonyl groups will be the same as in the pH range 3.0–5.0. With increasing pH in the neutral and alkaline side, the amount of carbonyl groups during oxidation with potassium permanganate decreases, especially in the region of neutral pH. In addition, with increasing pH, the solubility of manganese dioxide, due to its amphotericity, increases, which, accordingly, can cause pollution of oxidized dextran with soluble salts of manganese. At neutral and, especially, alkaline pH values, the deposition of oxidized dextran with ethanol slows down significantly due to the formation of a finely dispersed, difficult to precipitate suspension. In the used pH range 3.0–5.0, dextran does not degrade, the carbonyl capacity of oxidized dextran is maximally high, and it is easily precipitated with ethanol.
Окисление декстрана перманганатом калия проводят при нагревании, т. к. увеличение температуры реакции увеличивает ее скорость. Преимущественно температура на стадии окисления декстрана составляет 80-100°С, однако может быть использована и иная температура. Специалист в данной области техники может без труда подобрать рабочие значения температуры стадии окисления.Oxidation of dextran with potassium permanganate is carried out with heating, since an increase in the reaction temperature increases its speed. Mostly the temperature at the stage of oxidation of dextran is 80-100 ° C, but a different temperature can be used. A person skilled in the art can easily select the operating temperature values of the oxidation step.
Целевым продуктом окисления декстрана является диальдегиддекстран, который находится в водной фазе, при этом на стадии окисления образуется осадок диоксида марганца, который в процессе его образования захватывает примесные компоненты. Осадок отделяют от раствора целевого продукта любым известным специалисту методом, например центрифугированием, фильтрованием, декантированием и т. д.The target product of the oxidation of dextran is dialdehydedextran, which is in the aqueous phase, while at the oxidation stage a precipitate of manganese dioxide is formed, which during its formation captures impurity components. The precipitate is separated from the solution of the target product by any method known to the person skilled in the art, for example by centrifugation, filtration, decantation, etc.
Диальдегиддекстран выделяют из надосадочной жидкости методом осаждения. Наиболее простым, быстрым и количественным является осаждение диальдегиддекстрана этанолом при нагревании. Условия и количества добавляемого этанола известны из уровня техники. Так, например, если этанол добавляют в виде 95%-ного раствора, то объемное соотношении этанола к указанной жидкости составляет около 2:1.Dialdehydedextran is isolated from the supernatant by precipitation. The simplest, fastest and most quantitative is the precipitation of dialdehydedextran with ethanol when heated. Conditions and amounts of ethanol added are known in the art. So, for example, if ethanol is added in the form of a 95% solution, the volume ratio of ethanol to said liquid is about 2: 1.
Температура на стадии осаждения диальдегиддекстрана предпочтительно составляет 60-80°С. Для осаждения диальдегиддекстрана могут быть использованы и иные, известные из уровня техники методы осаждения, например, путем использования охлажденного этанола, как это раскрыто в документах КП 2163120, НИ 2168994, КП 2185166 и КП 2125451, однако эти методы требуют большего времени.The temperature in the precipitation stage of dialdehydedextran is preferably 60-80 ° C. Other precipitation methods known from the prior art can be used to precipitate dialdehydedextran, for example, by using chilled ethanol, as disclosed in documents KP 2163120, NI 2168994, KP 2185166 and KP 2125451, however, these methods require more time.
Осажденный диальдегиддекстран промывают и высушивают. Промывку диальдегиддекстрана проводят этанолом, однако промывка может быть выполнена любым известным из уровня техники методом, например с использованием ацетона с последующим переосаждением целевого продукта, как это раскрыто в документах КП 2163120, КП 2168994, КП 2185166 и КП 2125451. Однако известные из уровня техники методы требуют большего времени, чем метод с использованием этанола. Высушивание целевого продукта может быть выполнено любым способом, известным специалисту в данной области техники. В частности, высушивание может быть проведено на воздухе, либо при небольшом нагревании в сушильном шкафу, или в иных условиях с использованием традиционного для этой цели оборудования.The precipitated dialdehydedextran is washed and dried. The washing of dialdehydedextran is carried out with ethanol, but the washing can be performed by any method known in the art, for example using acetone followed by reprecipitation of the target product, as disclosed in KP 2163120, KP 2168994, KP 2185166 and KP 2125451. However, the methods known from the prior art require more time than the ethanol method. Drying of the target product can be performed by any method known to a person skilled in the art. In particular, drying can be carried out in air, or with a little heating in an oven, or in other conditions using equipment traditional for this purpose.
Так как в примерах осаждение продукта проводят этанолом, то осадок представляет собой сам окисленный декстран, а не низкомолекулярные продукты (например, олигосахариды, глюкоза, глиоксаль), которые этанолом не осаждаются. В осажденном этанолом окисленном декстране после его повторного растворения в воде определяли количество карбонильных групп по реакции с 2,4динитрофенилгидразином. В качестве контрольного раствора при определении карбонильной емкости окисленного декстрана используют неокисленный декстран, который не вступает в реакцию с 2,4Since in the examples the precipitation of the product is carried out with ethanol, the precipitate is the oxidized dextran itself, and not low molecular weight products (for example, oligosaccharides, glucose, glyoxal) that do not precipitate with ethanol. In the oxidized dextran precipitated with ethanol after it was redissolved in water, the number of carbonyl groups was determined by reaction with 2,4 dinitrophenylhydrazine. As a control solution, in determining the carbonyl capacity of oxidized dextran, unoxidized dextran is used, which does not react with 2.4
- 3 011718 динитрофенилгидразином. Таким образом, осажденный полимер не содержит низкомолекулярных примесей, которые остаются в этаноле, и содержит альдегидные группы, свойственные для ДАД, получаемого периодатным методом. Выход готового продукта, окисленного декстрана, рассчитывали по отношению к количеству взятого декстрана.- 3 011718 dinitrophenylhydrazine. Thus, the precipitated polymer does not contain low molecular weight impurities that remain in ethanol and contains aldehyde groups characteristic of DBP obtained by the periodic method. The yield of oxidized dextran was calculated in relation to the amount of dextran taken.
Примеры осуществления изобретенияExamples of carrying out the invention
Пример 1.Example 1
Коммерческий препарат «Реополиглюкин» нагревают на кипящей водяной бане до температуры 100°С, прибавляют к нему 35%-ный раствор уксусной кислоты в количестве 0,5% от объема раствора «Реополиглюкина» для получения рН 4,5, смесь перемешивают и прибавляют 10%-ный раствор перманганата калия в количестве 1% от исходного объема Реополиглюкина. Реакционную смесь нагревают до выпадения коричневато-черного осадка двуокиси марганца, надосадочную жидкость сливают, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют, например, с помощью фильтровальной бумаги. К полученному фильтрату (надосадочной жидкости) прибавляют двойной объем 95%-го раствора этанола, смесь нагревают до температуры 60-80°С и перемешивают, после выпадения осадка (диальдегиддекстрана) надосадочную жидкость сливают, выпавший в осадок диальдегиддекстран промывают небольшим количеством 95%-го раствора этанола (например, в количестве 25% от объема слитой надосадочной жидкости), высушивают, например, при температуре 50°С в термостате. Выход целевого продукта составляет 82%.The commercial preparation Reopoliglukin is heated in a boiling water bath to a temperature of 100 ° C, a 35% solution of acetic acid is added to it in an amount of 0.5% of the volume of the Reopoliglukin solution to obtain a pH of 4.5, the mixture is stirred and 10 added % solution of potassium permanganate in an amount of 1% of the initial volume of Reopoliglyukin. The reaction mixture is heated until a brownish-black precipitate of manganese dioxide precipitates, the supernatant is drained, cooled to room temperature and filtered, for example, with filter paper. A double volume of a 95% ethanol solution is added to the obtained filtrate (supernatant), the mixture is heated to a temperature of 60-80 ° С and stirred, after precipitation (dialdehydedextran), the supernatant is drained, the precipitated dialdehydedextran is washed with a small amount of 95% ethanol solution (for example, in an amount of 25% of the volume of the drained supernatant), dried, for example, at a temperature of 50 ° C in a thermostat. The yield of the target product is 82%.
Пример 2.Example 2
5%-ный раствор декстрана с молекулярной массой 40 кДа нагревают на кипящей водяной бане до температуры 80°С, прибавляют к нему 5%-ный раствор уксусной кислоты в количестве 2,0% от объема исходного раствора декстрана для получения рН 4,0, смесь перемешивают и прибавляют 2%-ный раствор перманганата калия в количестве 3% от объема исходного раствора декстрана. Реакционную смесь нагревают до выпадения коричневато-черного осадка, охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, например, через бумажный фильтр. К полученному фильтрату добавляют двойной объем 95%-го раствора этанола, смесь нагревают до температуры 60-80°С и перемешивают, после выпадения осадка надосадочную жидкость сливают, осадок промывают небольшим количеством 95%-го раствора этанола (например, в количестве 20% от объема слитой надосадочной жидкости), высушивают, например, при температуре 2°С. Выход целевого продукта составляет 88%.A 5% solution of dextran with a molecular weight of 40 kDa is heated in a boiling water bath to a temperature of 80 ° C, a 5% solution of acetic acid is added to it in an amount of 2.0% of the volume of the initial solution of dextran to obtain a pH of 4.0, the mixture is stirred and a 2% potassium permanganate solution is added in an amount of 3% of the volume of the initial dextran solution. The reaction mixture is heated to a brownish-black precipitate, cooled to room temperature, filtered, for example, through a paper filter. A double volume of a 95% ethanol solution is added to the obtained filtrate, the mixture is heated to a temperature of 60-80 ° C and stirred, after precipitation, the supernatant is drained, the precipitate is washed with a small amount of a 95% ethanol solution (for example, in an amount of 20% of volume of the drained supernatant), dried, for example, at a temperature of 2 ° C. The yield of the target product is 88%.
Пример 3.Example 3
15%-ный раствор декстрана с молекулярной массой 65-75 кДа нагревают на кипящей водяной бане до температуры 90°С, прибавляют к нему 35%-ный раствор муравьиной кислоты в количестве 0,5% от объема исходного раствора декстрана до получения рН 4,5, полученную смесь перемешивают и прибавляют 10%-ный раствор перманганата калия в количестве 6% от объема исходного раствора декстрана. Реакционную смесь нагревают до выпадения коричневато-черного осадка, охлаждают до комнатной температуры, фильтруют, например, через бумажный фильтр. К полученному фильтрату добавляют двойной объем 95%-го раствора этанола, смесь нагревают до температуры 60-80°С и перемешивают до выпадения осадка, надосадочную жидкость сливают, осадок промывают небольшим количеством 95%-го раствора этанола (например, в количестве 20% от объема слитой надосадочной жидкости), высушивают, например, при температуре 40°С. Выход целевого продукта составляет 85%.A 15% solution of dextran with a molecular weight of 65-75 kDa is heated in a boiling water bath to a temperature of 90 ° C, a 35% solution of formic acid is added to it in an amount of 0.5% of the volume of the initial solution of dextran to obtain a pH of 4, 5, the resulting mixture is stirred and 10% potassium permanganate solution is added in an amount of 6% of the volume of the initial dextran solution. The reaction mixture is heated to a brownish-black precipitate, cooled to room temperature, filtered, for example, through a paper filter. A double volume of a 95% ethanol solution was added to the obtained filtrate, the mixture was heated to a temperature of 60-80 ° C and stirred until a precipitate formed, the supernatant was drained, the precipitate was washed with a small amount of a 95% ethanol solution (for example, in an amount of 20% of volume of the drained supernatant), dried, for example, at a temperature of 40 ° C. The yield of the target product is 85%.
Пример 4.Example 4
Коммерческий препарат «Реополиглюкин» нагревают на кипящей водяной бане до температуры 100°С, прибавляют к нему 5%-ный раствор муравьиной кислоты в количестве 2% от исходного объема Реополиглюкина до получения рН 4,0, смесь перемешивают и прибавляют 2%-ный раствор перманганата калия в количестве 5% от исходного объема Реополиглюкина. Реакционную смесь нагревают до выпадения коричневато-черного осадка, охлаждают до комнатной температуры, фильтруют. К полученному фильтрату добавляют двойной объем 95%-го раствора этанола, смесь нагревают до температуры 60-80°С и перемешивают до выпадения осадка. Надосадочную жидкость сливают, осадок промывают небольшим количеством 95%-го раствора этанола (не менее 15% от объема слитой надосадочной жидкости), высушивают. Выход целевого продукта составляет 84%.The commercial preparation Reopoliglukin is heated in a boiling water bath to a temperature of 100 ° C, a 5% solution of formic acid is added to it in an amount of 2% of the initial volume of Reopoliglukin to obtain a pH of 4.0, the mixture is stirred and a 2% solution is added potassium permanganate in an amount of 5% of the initial volume of Reopoliglukin. The reaction mixture is heated until a brownish-black precipitate is formed, cooled to room temperature, filtered. A double volume of a 95% ethanol solution was added to the obtained filtrate, the mixture was heated to a temperature of 60-80 ° C and stirred until a precipitate formed. The supernatant is drained, the precipitate is washed with a small amount of a 95% ethanol solution (at least 15% of the volume of the supernatant drained), and dried. The yield of the target product is 84%.
Claims (5)
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2008111173/04A RU2008111173A (en) | 2008-03-21 | 2008-03-21 | METHOD FOR OBTAINING DIALDEHYDE DEXTRAN |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA200801377A1 EA200801377A1 (en) | 2009-04-28 |
| EA011718B1 true EA011718B1 (en) | 2009-04-28 |
Family
ID=40852075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA200801377A EA011718B1 (en) | 2008-03-21 | 2008-05-15 | Method for producing dialdehydedextran |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EA (1) | EA011718B1 (en) |
| RU (1) | RU2008111173A (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2542534C1 (en) * | 2013-08-27 | 2015-02-20 | Открытое акционерное общество "Федеральный научно-производственный центр "Алтай" | Method of producing dialdehyde dextran |
| RU2618341C1 (en) * | 2016-02-09 | 2017-05-03 | Общество с ограниченной ответственностью "Генерис Фарм" | Method for oxidized dextran obtaining |
| RU2646451C1 (en) * | 2017-05-11 | 2018-03-05 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины" (НИИЭКМ) | Method of quantitative identification of aldehyde groups in oxidized dextran |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB927510A (en) * | 1960-07-25 | 1963-05-29 | Miles Lab | Process for improving the properties of dialdehyde polysaccharides |
| SU1530630A1 (en) * | 1986-12-30 | 1989-12-23 | Научно-производственное объединение "Биолар" | Method of producing dialdehyde dextrane |
| RU2125451C1 (en) * | 1994-11-09 | 1999-01-27 | Новосибирский медицинский институт | Method of preparing a conjugate isoniazid-dextran |
| RU2143900C1 (en) * | 1999-03-31 | 2000-01-10 | Институт цитологии и генетики СО РАН | Method of preparing isoniazid with prolonged effect |
| RU2163120C1 (en) * | 1999-10-12 | 2001-02-20 | Новосибирский медицинский институт | Isoniazid-dextran conjugate and application thereof |
-
2008
- 2008-03-21 RU RU2008111173/04A patent/RU2008111173A/en not_active Application Discontinuation
- 2008-05-15 EA EA200801377A patent/EA011718B1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB927510A (en) * | 1960-07-25 | 1963-05-29 | Miles Lab | Process for improving the properties of dialdehyde polysaccharides |
| SU1530630A1 (en) * | 1986-12-30 | 1989-12-23 | Научно-производственное объединение "Биолар" | Method of producing dialdehyde dextrane |
| RU2125451C1 (en) * | 1994-11-09 | 1999-01-27 | Новосибирский медицинский институт | Method of preparing a conjugate isoniazid-dextran |
| RU2143900C1 (en) * | 1999-03-31 | 2000-01-10 | Институт цитологии и генетики СО РАН | Method of preparing isoniazid with prolonged effect |
| RU2163120C1 (en) * | 1999-10-12 | 2001-02-20 | Новосибирский медицинский институт | Isoniazid-dextran conjugate and application thereof |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2542534C1 (en) * | 2013-08-27 | 2015-02-20 | Открытое акционерное общество "Федеральный научно-производственный центр "Алтай" | Method of producing dialdehyde dextran |
| RU2618341C1 (en) * | 2016-02-09 | 2017-05-03 | Общество с ограниченной ответственностью "Генерис Фарм" | Method for oxidized dextran obtaining |
| RU2646451C1 (en) * | 2017-05-11 | 2018-03-05 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины" (НИИЭКМ) | Method of quantitative identification of aldehyde groups in oxidized dextran |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EA200801377A1 (en) | 2009-04-28 |
| RU2008111173A (en) | 2009-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Yao et al. | Chitosan-based hydrogels | |
| Liu et al. | On importance of impurities, potential leachables and extractables in algal nanocellulose for biomedical use | |
| CN1147322C (en) | Iron-dextran compound for use as component in therapeutical composition for prophylaxis or treatment of iron-deficiency, process for producing said iron-dextran compound and use of said compound for p | |
| CH638819A5 (en) | INCLUSION COMPLEX OF CYCLODEXTRIN WITH INDOMETHACIN AND METHOD FOR PRODUCING THE COMPLEX. | |
| CN107982534B (en) | Preparation method of chitosan/copper sulfide nano composite hollow sphere, product thereof and application thereof | |
| CN103450369B (en) | The preparation method of poly glycol monomethyl ether-chitosan derivatives | |
| CN106496430B (en) | Antimicrobial macromolecule with biocompatibility | |
| CN107163160A (en) | A kind of Ascorbic acid chitosan quaternary ammonium salt and its preparation method and application | |
| Chatterjee et al. | Chitosan: source, chemistry, and properties | |
| WO2021059119A1 (en) | Process for extracting and purifying chitin by using green solvents | |
| EA011718B1 (en) | Method for producing dialdehydedextran | |
| CN107602726B (en) | Low molecular weight C6-carboxyl chitin and preparation method thereof | |
| EP2723774B1 (en) | Method for manufacturing hydroxyethyl starch derivatives | |
| DE602005001837T2 (en) | Process for the preparation of an alpha-lipoic acid / cyclodextrin complex and products prepared in this way | |
| Baranov et al. | Long-acting bioactive composition based on chitosan and taxifolin | |
| AU2008324749B2 (en) | Anti-microbial polymers and their compositions | |
| CN110628049B (en) | Photoresponse antibacterial self-repairing collagen gel and preparation method thereof | |
| EP2044141A1 (en) | Process for preparing linear, methylated polyglycerol derivatives and their use for functionalizing surfaces | |
| CN110452315B (en) | Carboxymethyl chitosan derivative containing thiourea salt and preparation method and application thereof | |
| CN103936886B (en) | O-thiazolidine methyl esters-N-trimethyl chitin quaternary ammonium salt and method for making and application | |
| CN108635340B (en) | Triamcinolone acetonide high-molecular drug long-acting sustained-release membrane and preparation method thereof | |
| Swain et al. | Chitosan Nanocomposites: Bionanomechanical Applications | |
| RU2408618C2 (en) | Novel cross-linking reagents for producing chitosan-based biocompatible materials | |
| RU2623877C1 (en) | Method for obtaining of rifampicine polymeric complexes with reduced toxicity and high antituberculosis activity | |
| RU2618341C1 (en) | Method for oxidized dextran obtaining |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM MD TM |
|
| TC4A | Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent |
Designated state(s): AM KZ KG MD TJ TM |
|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): TJ |
|
| QB4A | Registration of a licence in a contracting state | ||
| TC4A | Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent | ||
| TC4A | Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent | ||
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AZ BY KZ KG |
|
| QZ4A | Registered corrections and amendments in a licence | ||
| TC4A | Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent |