DK2794641T3

DK2794641T3 - Polypeptider med glucoamylaseaktivitet og fremgangsmåder til fremstilling heraf

Info

Publication number: DK2794641T3
Application number: DK12812244.7T
Authority: DK
Inventors: Jacob Flyvholm Cramer; Neville Marshall Fish; Igor Nikolaev; Paulien Kruithof; Solingen Piet Van; Stigt Thans Sander Van; Suzy Breneman; Jayarama K Shetty; Sung Ho Lee; Peter Edvard Degn
Original assignee: Dupont Nutrition Biosci Aps
Priority date: 2011-12-22
Filing date: 2012-12-20
Publication date: 2017-03-13
Also published as: CN104011067A; US20140356922A1; ES2616917T3; WO2013092840A1; EP2794641A1; US9677058B2; EP2794641B1; CN104011067B

Claims

POLYPEPTIDER MED GLUCO AMYLASE AKTIVITET OG FREMGANGSMÅDER TIL FREMSTILLING HERAF

1. Isoleret polypeptid med glucoamylaseaktivitet, hvilket polypeptid omfatter en aminosyresekvens, der er mindst 80 % sekvensidentisk med en aminosyresekvens, der er udvalgt fra gruppen bestående af det modne polypeptid ifølge SEQ ID NO: 3 og 6.
2. Polypeptid ifølge krav 1, hvor aminosyresekvensen omfatter mindst én eller flere aminosyrerester, der er udvalgt fra følgende grupper: a) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af A og P i en position, der svarer til position 459 i SEQ ID NO: 3 eller 6, b) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af C og S i en position, der svarer til position 473 i SEQ ID NO: 3 eller 6, c) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af A og R i en position, der svarer til position 474 i SEQ ID NO: 3 eller 6, d) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af A og P i en position, der svarer til position 475 i SEQ ID NO: 3 eller 6, e) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af T og Y i en position, der svarer til position 476 i SEQ ID NO: 3 eller 6, f) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af P og G i en position, der svarer til position 477 i SEQ ID NO: 3 eller 6, g) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af A og G i en position, der svarer til position 479 i SEQ ID NO: 3 eller 6 og/eller h) en aminosyrerest, der er udvalgt fra gruppen bestående af V og R i en position, der svarer til position 480 i SEQ ID NO: 3 eller 6.
3. Polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-2, hvor aminosyresekvensen er mindst 81 %, 82 %, 83 %, 84 %, 85 %, 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % eller 100 % sekvensidentisk med aminosyresekvensen ifølge SEQ ID NO: 3 eller 6.
4. Polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-3, der omfatter eller består af det modne polypeptid ifølge SEQ ID NO: 3 eller 6.
5. Polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, hvilket polypeptid er inaktiveret ved pasteurisering såsom anvendelse af mindre end 50, 45, 40, 35, 30, 25, 24, 23, 22, 21 eller 20 pasteuriseringsenheder (PU) i øl.
6. Polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-5, der er opnået ved rekombinant ekspression i en værtscelle.
7. Nukleinsyre, der koder for et polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6.
8. Ekspressionsvektor, der omfatter en nukleinsyre ifølge krav 7 eller er i stand til at udtrykke et polypeptid ifølge et hvilket som helst af kravene 1 -6, hvilken ekspressionsvektor eventuelt omfatter én eller flere af: a. en promoter, der er afledt af Trichoderma, såsom en T. reesei cbhl-afledt promoter; b. en terminator, der er afledt af Trichoderma, såsom en T. reesei cbhl-afledt terminator; c. én eller flere selektive markører, såsom Aspergillus nidulans amdS og pyrG; og d. ét eller flere telomerområder, der muliggør en ikke-kromosomal plasmidopretholdelse i en værtscelle.
9. Værtscelle med heterolog ekspression af et polypeptid som defineret ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6.
10. Sammensætning, der omfatter ét eller flere polypeptider som defineret ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6.
11. Sammensætning ifølge krav 10, hvor sammensætningen er udvalgt fra en stivelseshydrolyserende sammensætning, en forsukrende sammensætning, en detergentsammensætning, en enzymatisk alkoholfermenteringssammensætning og en dyrefodersammensætning, hvor sammensætningen eventuelt omfatter ét eller flere yderligere enzymer, hvor det ene eller flere yderligere enzymer er udvalgt fra alpha-amylase, beta-amylase, peptidase (protease, proteinase, endopeptidase, exopeptidase), pullulanase, isoamylase, cellulase, endo-glucanase og relaterede hydrolytiske accessoriske betaglucanenzymer, xylanase og accessoriske xylanaseenzymer (for eksempel, arabinofuranosidase, ferulasyreesterase, xylanacetylesterase), acetolaktatdecarboxylase og glucoamylase, der indbefatter en hvilken som helst kombination heraf.
12. Fremgangsmåde, der omfatter tilsætning af et polypeptid som defineret ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6 eller sammensætning som defineret ifølge et hvilket som helst af kravene 10-11 før eller efter et fermenteringstrin, såsom et fermenteringstrin med gær.
13. Fremgangsmåde ifølge krav 12, hvor fermenteringen indgår i en fremgangsmåde til fremstilling af en gæret drikkevare.
14. Fremgangsmåde til fremstilling af et fødevare-, foder- eller drikkevareprodukt, såsom en alkoholisk eller ikke-alkoholisk drikkevare, såsom en kornsort- eller maltbaseret drikkevare, såsom øl eller whisky, såsom vin, cider, eddike, risvin, soyasauce eller juice, hvilken fremgangsmåde omfatter trinnet med behandling af et stivelses- og/eller sukkerholdigt plantemateriale med et polypeptid ifølge kravene 1-6, eller en sammensætning som defineret ifølge et hvilket som helst af kravene 10-11.