DK2739646T3 - Omfattende buffersystem til renaturering af human proinsulin eller proinsulin-derivater - Google Patents
Omfattende buffersystem til renaturering af human proinsulin eller proinsulin-derivater Download PDFInfo
- Publication number
- DK2739646T3 DK2739646T3 DK12721415.3T DK12721415T DK2739646T3 DK 2739646 T3 DK2739646 T3 DK 2739646T3 DK 12721415 T DK12721415 T DK 12721415T DK 2739646 T3 DK2739646 T3 DK 2739646T3
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- proinsulin
- buffer
- concentration
- pka
- substance
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Claims (13)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af proinsulin eller et proinsulin-derivat ved rekombinant udtryk i en prokaryotisk organisme, omfattende trinnene: i A) opløsning af inklusionslegemer, B) oprensning af proinsulin eller et proinsulin-derivat fra opløste inklusionslegemer under anvendelse af ionbytter-kromatografi, C) genfoldning af proinsulin eller et proinsulin-derivat omfattende native disulfidbindinger, i D) udfældning af proinsulin eller et proinsulin-derivat indeholdende ikke- native disulfidbindinger, E) koncentrering af proinsulin eller et proinsulin-derivat omfattende native disulfidbindinger under anvendelse af ionbytter-kromatografi, F) oprensning af proinsulin eller et proinsulin-derivat omfattende native i disulfidbindinger under anvendelse af ionbytter-kromatografi, hvor alle trinnene udføres i en vandig buffer omfattende et organisk amfoterisk stof i en koncentration mellem 0,001 M og 0,5 M indeholdende mindst to funktionelle grupper, omfattende mindst en aminogruppe og en carboxylsyregruppe, i hvor de funktionelle grupper udviser pKa-værdier, der ligger mellem 2,0 og 10,0 og hvor forskellen mellem pKa-værdierne af mindst en aminogruppe og mindst en carboxylsyregruppe af det amfoteriske stof er mindst 7.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, hvor trinnene A) og B) udføres ved en pH » mellem pH = 9,0 og pH = 11,5.
3. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 eller 2, hvor trin C) udføres ved en pH mellem pH = 9,5 og pH = 10,5.
4. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 3, hvor trin D) udføres ved en pH mellem pH = 4,8 og pH = 5,6.
5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 4, hvor trin E) udføres ved en pH mellem pH = 3,5 og pH = 4,5.
6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 5, hvor trin F) udføres ved en pH mellem pH = 8,5 og pH = 10,5.
7. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 6, hvor det organiske amfoteriske stof er en aminosyre med en vandopløselighed på større end 150 g/l ved 20 °C.
8. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 7, hvor det organiske amfoteriske stof er en eller flere af: glycin, arginin, alanin, beta-alanin, serin, cystein eller prolin.
9. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 8, hvor det organiske amfoteriske stof bevarer cyanat-koncentrationen i en vandig opløsning indeholdende urinstof i et koncentrationsområde på 5 M til 8 M ved koncentrationer lavere end 1,5 mM.
10. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 9, hvor i trin D) et andet bufferstof tilsættes til den vandige buffer, hvor det andet bufferstof har mindst en pKa-værdi inden for de centrale 50 % af området defineret af pKa-værdierne af mindst en aminogruppe og mindst en carboxylsyregruppe af det amfoteriske stof.
11. Fremgangsmåde ifølge krav 10, hvor mindst en pKa-værdi af det andet bufferstof er mellem 4,5 og 5,9.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 10 eller 11, hvor det andet bufferstof er en monocarboxylsyre, i særdeleshed, eddike-, propion-, smør-, valeriane- eller benzoinsyre.
13. Fremgangsmåde ifølge krav 10 til 12, hvor det andet bufferstof er en dicarboxylsyre, i særdeleshed, succin-, glutar-, adipin-, pimelin-, suberin-, eller azelainsyre.
14. Fremgangsmåde ifølge krav 10 til 12, hvor det andet bufferstof er succinsyre.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP11003823 | 2011-05-10 | ||
| PCT/EP2012/001992 WO2012152439A1 (en) | 2011-05-10 | 2012-05-09 | Comprehensive buffer system for renaturing human proinsulin or proinsulin derivatives |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK2739646T3 true DK2739646T3 (da) | 2018-02-26 |
Family
ID=46085882
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK12721415.3T DK2739646T3 (da) | 2011-05-10 | 2012-05-09 | Omfattende buffersystem til renaturering af human proinsulin eller proinsulin-derivater |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2739646B1 (da) |
| DK (1) | DK2739646T3 (da) |
| PL (1) | PL2739646T3 (da) |
| WO (1) | WO2012152439A1 (da) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016014325A1 (en) * | 2014-07-21 | 2016-01-28 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Chromatography process for purification of inlsulin and insulin analogs |
| WO2020251952A2 (en) * | 2019-06-10 | 2020-12-17 | Sanford Burnham Prebys Medical Discovery Institute | Correcting protein misfolding in diabetes |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US76459A (en) | 1868-04-07 | hubbard | ||
| US425A (en) | 1837-10-12 | James bogardus | ||
| NZ199391A (en) | 1981-01-02 | 1985-12-13 | Genentech Inc | Chimeric polypeptides comprising a proinsulin sequence,and preparation by recombinant dna technique;production of human insulin |
| US4605513A (en) | 1984-08-08 | 1986-08-12 | Eli Lilly And Company | Process for inhibiting peptide carbamylation |
| DE3501641A1 (de) | 1985-01-19 | 1986-07-24 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur gewinnung von insulin-vorlaeufern aus reaktionsgemischen, die bei der faltung von insulin-vorlaeufern aus den entsprechenden s-sulfonaten anfallen |
| DE58906966D1 (de) | 1988-06-23 | 1994-03-24 | Hoechst Ag | Mini-Proinsulin, seine Herstellung und Verwendung. |
| US5514646A (en) * | 1989-02-09 | 1996-05-07 | Chance; Ronald E. | Insulin analogs modified at position 29 of the B chain |
| IL95495A (en) | 1989-08-29 | 1996-10-16 | Hoechst Ag | Fusion proteins their preparation and use |
| DE4405179A1 (de) * | 1994-02-18 | 1995-08-24 | Hoechst Ag | Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken |
| KR100253916B1 (ko) | 1997-12-29 | 2000-05-01 | 김충환 | 사람 인슐린 전구체의 제조방법 |
| US7459425B2 (en) | 2003-02-21 | 2008-12-02 | N.V. Organon | Reagents for protection of peptide/proteins carbamylation in urea solutions utilizing non-ethylene-diamine like compounds |
| EP2274318B1 (en) * | 2008-04-30 | 2014-08-13 | Wockhardt Limited | Processes for refolding of insulin |
| UA91281C2 (ru) * | 2008-11-26 | 2010-07-12 | Общество С Ограниченной Ответственностью «Мако» | Способ получения рекомбинантного инсулина человека |
-
2012
- 2012-05-09 DK DK12721415.3T patent/DK2739646T3/da active
- 2012-05-09 PL PL12721415T patent/PL2739646T3/pl unknown
- 2012-05-09 EP EP12721415.3A patent/EP2739646B1/en active Active
- 2012-05-09 WO PCT/EP2012/001992 patent/WO2012152439A1/en active Application Filing
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2739646A1 (en) | 2014-06-11 |
| WO2012152439A1 (en) | 2012-11-15 |
| PL2739646T3 (pl) | 2018-05-30 |
| EP2739646B1 (en) | 2018-01-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Cromwell et al. | Protein aggregation and bioprocessing | |
| Vallejo et al. | Optimized procedure for renaturation of recombinant human bone morphogenetic protein‐2 at high protein concentration | |
| RU2275377C2 (ru) | Способ пространственной упаковки химически синтезированных полипептидов | |
| US5473049A (en) | Process for obtaining proinsulin possessing correctly linked cystine bridges | |
| US9856287B2 (en) | Refolding proteins using a chemically controlled redox state | |
| CN101186940B (zh) | 获得具有正确键合的胱氨酸键的胰岛素或胰岛素衍生物的方法 | |
| Siew et al. | Downstream processing of recombinant human insulin and its analogues production from E. coli inclusion bodies | |
| JP4975895B2 (ja) | 高圧液体クロマトグラフィーによるインシュリンの単離方法 | |
| NO318424B1 (no) | Fremgangsmate for isolering av insulin med korrekt koblede cysteinbroer | |
| US11053278B2 (en) | Tangential flow filtration based protein refolding methods | |
| EP3398957A1 (en) | Method for synthesizing etelcalcetide | |
| US20150044718A1 (en) | On-column enzymatic cleavage | |
| DK2739646T3 (da) | Omfattende buffersystem til renaturering af human proinsulin eller proinsulin-derivater | |
| Chura-Chambi et al. | Refolding of endostatin from inclusion bodies using high hydrostatic pressure | |
| EP2274318B1 (en) | Processes for refolding of insulin | |
| US7189811B2 (en) | Process for solubilization of recombinant proteins expressed as inclusion body | |
| Asami et al. | An approach to the removal of yeast specific O-linked oligo-mannoses from human midkine expressed in Pichia pastoris using site-specific mutagenesis | |
| DK1735343T3 (da) | Fremgangsmåde til udvinding af insuliner ved hjælp af forbedret luftgasning af foldningen | |
| JP7227159B2 (ja) | 酵母における組換えｉｌ－１１の生産のためのシステムおよび方法 |