DK2092054T3 - Fremgangsmåde til styring af væksten af cellekulture - Google Patents

Claims (18)

1. Fremgangsmåde til styring af væksten af mikrober, dyrket i et dyrkningsmedium til høje celledensiteter ved fed-batch-teknologi, kendetegnet ved, at fremgangsmåden omfatter - at tilvejebringe et to-fase-system, der har (i) en flydende fase, der tjener som vækstmedie og (ii) en gel-lignende matrice valgt blandt agar-geler, karragen-geler eller gelatin-geler, hvor en substratleverende polymer valgt blandt et polysaccharid, polypeptid, protein, phosphatholdig forbindelse eller nitrogenholdig forbindelse, er immobiliseret eller integreret i den gel-lignende matrice, - at tilvejebringe et enzym og enzymatisk frigive, på en styret måde, fra den substrat-leverende polymer, et vækstbegrænsende substrat eller pH-justerende middel, og styre frigivelsesgraden deraf, for at tilvejebringe en ønsket frigivelsesgrad til bekæmpelse af væksten af mikroberne.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at mikroberne mangler substratleverende polymernedbrydende enzymer og den substratleverende polymer ikke direkte kan anvendes som carbonkilde af mikroberne.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at enzymet tilsættes til mediet.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at enzymet fremstilles af mikroberne.

5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at den gel-lignende matrice er i form af en nedre plade.

6. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at den gel-lignende matrice er i form af perler.

7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at der er en yderligere anden gel på den første gel-lignende matrice.

8. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at polysaccharidet er valgt blandt stivelse, agar, karragen, glykogen og peptidoglycaner.

9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at proteinet eller polypeptid er valgt blandt collagen og gelatin.

10. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den phosphatholdige forbindelse er valgt blandt nukleinsyrer og polyphosphater.

11. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den nitrogenholdige forbindelse er valgt blandt polyacrylamid eller polyamin eller protein.

12. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at det vækstbegrænsende substrat er et næringsstof.

13. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at det vækstbegrænsende substrat er et pH-justerende middel.

14. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af de foregående krav, kendeteg net ved, at enzymerne er valgt blandt amylaser, proteaser, peptidaser, nukleaser og amidaser.

15. Fremgangsmåde til at restringere syntesen af vækstbegrænsende metabolitter i en mikrobiel kultur, dyrket i et medium til høje celledensiteter ved fed-batch-teknologi, k e ndetegnet ved, at fremgangsmåden ifølge et hvilket som helst af krav 1-14 anvendes til at frigive det vækstbegrænsende substrat til cellerne, ved at styre frigivelsesgraden af det vækstbegrænsende substrat, for at restringere syntesen af vækstbegrænsende metabolitter.

16. Fremgangsmåde til forebyggelse af oxygenbegrænsning i en mikrobiel cellekultur dyrket til høje celledensiteter, kendetegnet ved, at fremgangsmåden ifølge et hvilket som helst af krav 1-15 anvendes til at frigive det vækstbegrænsende substrat langsomt til cellerne, for at restringere oxygenforbruget.

17. Fløj-celledensitets-fed-batch-teknologibaseret dyrkningssystem, til styring af væksten af mikrober dyrket i et medium, kendetegnet ved, at det omfatter et to-fase-system, der har en flydende fase og en gel-lignende matrice, som defineret i et hvilket som helst af krav 1-15, som tilvejebringer en substratleverende polymer, der er indrettet til at blive omdannet, på en styret måde, af et enzym, til et vækstbegrænsende substrat.

18. Fløj-celledensitets-fed-batch-teknologi-dyrkningskit, til styring af væksten af mikrober dyrket i et medium, kendetegnet ved, at det omfatter et to-fase-system, der har en flydende fase og en gel-lignende matrice, som defineret i et hvilket som helst af krav 1-15, som tilvejebringer en substratleverende polymer, der er indrettet til at blive omdannet, på en styret måde, af et enzym, til et vækstbegrænsende substrat.