DK170859B1

DK170859B1 - Makrolidforbindelser, præparater indeholdende forbindelserne til anvendelse i human medicin og veterinær medicin og til bekæmpelse af skadedyr, ikke-terapeutisk fremgangsmåde til bekæmpelse af skadedyr samt fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne

Info

Publication number: DK170859B1
Application number: DK038589A
Authority: DK
Inventors: Michael Vincent John Ramsey; Derek Norman Evans; Derek Ronald Sutherland; Edward Patrick Tiley; John Barrie Ward; Niel Porter; Hazel Mary Noble; Richard Alan Fletton; David Noble
Original assignee: American Cyanamid Co
Priority date: 1988-01-28
Filing date: 1989-01-27
Publication date: 1996-02-12
Also published as: HU203242B; NZ227759A; DK38589A; IE62842B1; EP0327270A3; PT89536A; IE890259L; DE68913565D1; KR890011889A; JPH0816110B2; ATE102624T1; HUT49355A; HU905944D0; EP0327270A2; ES2061969T3; CA1320950C; JPH01224375A; GB8801908D0; AU618063B2; ZA89671B

Description

DK 170859 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte antibiotiske makro-lidforbindelser, præparater indeholdende forbindelserne til anvendelse i human medicin og veterinær medicin og til bekæmpelse af skadedyr, ikke-terapeutisk fremgangsmåde til bekæmpelse af skadedyr samt 5 fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne.

Et aspekt af opfindelsen angår således forbindelser med formlen (1):

Hv H

GH> /ia\.vv S. ** **]

„»U* I r E (I

laSi* l

H ]|lx fC

°V/o (1> II ®

3 ** JL

ϋ i\V^CE,

10 hvor BT

R^· er en methyl-, ethyl- eller isopropylgruppe.

Fra GB 2176182A kendes makrolidforbindelser, der er substituerede i 5-positionen og eventuelt også i 23-positionen. De foreliggende forbindelser adskiller sig således i strukturel henseende fra de 15 kendte forbindelser ved, at de foreliggende forbindelser er usub-stituerede i 5-positionen. Fra Mzorik et al., J. Med. Chem., 1982, bind 25, nr. 6, side 658-663, er det kendt, at hvis en 5-substituent i visse makrolidforbindelser, nemlig visse avermectiner, fjernes, resulterer dette i, at avermectinerne mister deres anthelmintiske 20 virkning. I forhold til dette har det overraskende vist sig, at de foreliggende, i 5-positionen usubstituerede makrolidforbindelser udviser en udmærket anthelmintisk virkning. Således har det vist sig, at den 5,23-usubstituerede forbindelse fra eksempel 5 nedenfor er aktiv både over for den frie nematode C. elegans og mod nematoden 25 Nematospiroides dubius i mus, idet forbindelsen ved oral dosering i en dosis på 2 mg/kg til mus gav en reduktion af mængden af sidstnævnte nematode i mus på 79X.

DK 170859 B1 2

Forbindelser med formlen (1) kan udover som antibiotiske makrolidfor-bindelser også anvendes som mellemprodukter.

I forbindelserne med formlen (1), er gruppen fortrinsvis en iso-propy1gruppe.

5 Som nævnt ovenfor kan forbindelserne ifølge opfindelsen anvendes som antibiotika.

Forbindelserne ifølge opfindelsen har antibiotisk aktivitet, fx aktivitet mod indvoldsorme, fx mod nematoder, og især anti-endopara-sitisk og anti-ektoparasitisk aktivitet.

10 Forbindelserne ifølge opfindelsen er således anvendelige i behandling af dyr og mennesker med endoparasitiske og/eller ektoparasitiske infektioner .

Ektoparasitter og endoparasitter inficerer mennesker og forskellige dyr og er specielt talrige i husdyr såsom svin, får, kvæg, geder og 15 fjerkræ (fx kyllinger og kalkuner), heste, kaniner, fuglevildt, burfugle og husdyr såsom hunde, katte, marsvin, hoppemus og hamstere. Parasitisk infektion af husdyrbesætninger, der fører til anæmi, fejlernæring og vægttab, er en hovedårsag til økonomisk tab verden over.

Eksempler på endoparasitiske slægter, der inficerer sådanne dyr 20 og/eller mennesker, er Ancylostoma, Ascaridia, Ascaris, Aspicularis, Brugia, Bunostomum, Capillaria, Chabertia, Cooperia, Dictyocaulus, Dirofilaria, Dracunculus, Enterobius, Haemonchus, Heterakis, Loa,

Necator, Nematodirus, Nematospiroides (Heligomoroides), Nippostrongy· lus, Oesophagostomum, Onchocerca, Ostertagia, Oxyuris, Parascaris, 25 Strongylus, Strongyloides, Syphacia, Toxascaris, Toxocara, Trichone-ma, Trichostrongylus, Trichinella, Trichuris, Triodontophorus, Un-cinaria og Wuchereria.

Eksempler på ektoparasitter, der inficerer dyr og/eller mennesker, er leddyrektoparasitter såsom bidende insekter, spyfluer, lopper, lus, 30 mider, sugende insekter, tæger og andre to-vingede skadedyr.

DK 170859 B1 3

Eksempler på slægter af sådanne ektoparasitter, der inficerer dyr og/eller mennesker, er Ambylomma, Boophilus, Chorioptes, Culliphore, Demodex, Damalinia, Dermatobia, Gastrophilus, Haematobia, Haematopi-nus, Haemophysalis, Hyaloma, Hypoderma, Ixodes, Linognathus, Lucilia, 5 Melophagus, Oestrus, Otobius, Otodectes, Psorergates, Psoroptes, Rhipicephalus, Sarcoptes, Stomoxys og Tabanus.

Forbindelserne ifølge opfindelsen har vist sig at være effektive både In vitro og in vivo mod en række endoparasitter og ektoparasitter.

Den antibiotiske virkning af forbindelserne ifølge opfindelsen kan fx 10 demonstreres ved deres virkning mod frit levende nematoder, fx Cae- norhabiditis elegans. Det har især vist sig, at forbindelserne ifølge opfindelsen er aktive mod parasitiske nematoder såsom Nematospri-roides dubius.

Endvidere er forbindelserne ifølge opfindelsen anvendelige som anti-15 svampemidler fx mod stammer af Candida sp. såsom Candida albicans og Candida glabrata, og mod gær såsom Saccharomyces carlsbergensis.

Forbindelserne ifølge opfindelsen er også anvendelige til bekæmpelse af skadedyr såsom insekter, mider og nematoder inden for landbrug, havebrug, skovbrug, sundhedsvæsenet og i lagrede produkter. Skadedyr 20 i jord og afgrøder, herunder kornafgrøder (fx hvede, byg, majs og ris), bomuld, tobak, grønsager (fx soja), frugt (fx æbler, vindruer og citrus) samt rodafgrøder (fx sukkerroer, kartofler) kan med fordel behandles. Specielle eksempler på sådanne skadedyr er frugtmider og bladlus såsom Aphis fabae, Aulacorthum circumflexum, Myzus persicae, 25 Nephotettix cincticeps, Nilparvata lugens, Panonychus ulmi, Phorodon humuli, Phyllocoptruta oleivora, Tetranychus urticae og medlemmer af slægten Trialeuroides; nematoder såsom medlemmer af slægterne Aphe-lencoides, Globodera, Heterodera, Meloidogyne og Panagrellus; sommerfugle såsom Heliothis, Plutella og Spodoptera; kornsnudebiller såsom 30 Anthonomus grandis og Sitophilus granarius; melbiller såsom Tribolium castaneum; fluer såsom Musca dornes tica; stikmyrer; bladminerer; Pear psylla; Thrips tabaci; kakerlakker såsom Blatella germanica og Peri-planeta americana og myg såsom Aedes aegypti.

DK 170859 B1 4 I overensstemmelse hermed angår opfindelsen derfor forbindelserne med formlen (1) som defineret ovenfor, som kan anvendes som antibiotika. Specielt kan de anvendes ved behandling af dyr og mennesker med en-doparasitiske, ektoparasitiske og/eller svampeinfektioner og inden 5 for landbrug, havebrug eller skovbrug som pesticider til bekæmpelse af skadelige insekter, mider og nematoder. De kan også anvendes generelt som pesticider til bekæmpelse eller kontrol af skadedyr under andre forhold, fx i butikker, bygninger eller andre offentlige steder, eller steder, hvor skadedyrene befinder sig. Generelt kan for-10 bindeiserne påføres enten til værten (dyr eller mennesker eller planter eller vegetation) eller til selve skadedyrene eller deres levested.

Opfindelsen angår også præparater til anvendelse i human medicin, til anvendelse i veterinær medicin eller til bekæmpelse af skadedyr, 15 hvilke præparater indeholder en effektiv mængde af mindst én forbindelse ifølge krav 1 sammen med én eller flere bærere og/eller excipienser.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan formuleres til administration på en hvilken som helst hensigtsmæssig måde til anvendelse i veteri-20 nær eller human medicin. Sådanne præparater kan præsenteres til anvendelse på konventionel måde ved hjælp af én eller flere egnede bærere eller excipienser. Præparaterne ifølge opfindelsen omfatter sådanne præparater i en fora, der er specielt formuleret til parenteral (herunder intrabryst-administration), oral, rektal, topisk, 25 oftalmisk, nasal eller genito-urinær anvendelse eller til implantation.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan formuleres til anvendelse i veterinær eller human medicin ved injektion og kan præsenteres i enhedsdosisform i ampuller eller andre enhedsdosisbeholdere eller i 30 multidosisbeholdere, om nødvendigt med et tilsat konserveringsmiddel. Præparaterne til injektion kan være i fora af suspensioner, opløsninger eller emulsioner i olieholdige eller vandige bærere, og kan indeholde forauleringshjælpestoffer såsom suspenderings-, stabiliserings-, solubiliserings- og/eller dispergeringsmidler. Alternativt 35 kan den aktive bestanddel være i steril pulverform til rekonstitue- DK 170859 B1 5 ring med en egnet bærer, fx sterilt pyrogen-frit vand, inden anvendelse. Olieholdige bærere omfatter polyvalente alkoholer og estere deraf såsom glycerolestere, fedtsyrer, vegetabilske olier såsom ara-chisolie eller bomuldsfrøolie, mineralolier såsom flydende paraffin 5 og ethyloleat og andre lignende forbindelser. Andre bærere såsom pro-pylenglycol kan også anvendes.

Præparater til veterinær medicin kan også formuleres som intrabryst-præparater i enten langtidsvirkende baser eller baser til hurtig frigivelse og kan være sterile opløsninger eller suspensioner i vandige 10 eller olieholdige bærere eventuelt indeholdende et fortykkelses- eller suspenderingsmiddel såsom bløde eller hårde paraffiner, bivoks, 12-hydroxy-stearin, hydrogeneret ricinusolie, aluminiumstearater eller glycerylmonostearat. Konventionelle ikke-ioniske, kationiske eller anioniske overfladeaktive midler kan anvendes alene eller i 15 kombination i præparatet.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også formuleres til veterinær eller human anvendelse i en form egnet til oral administration, fx i form af opløsninger, sirupper eller suspensioner eller et tørt pulver til konstituering med vand eller en anden egnet bærer inden anvendel-20 se, eventuelt med smags- og farvestoffer. Faste præparater såsom tabletter, kapsler, pastiller, piller, boli, pulvere, pastaer, granuler, kugler eller præmikspræparater kan også anvendes. Faste og flydende præparater til oral anvendelse kan fremstilles ifølge metoder, der er velkendte på området. Sådanne præparater kan også indeholde én 25 eller flere farmaceutisk acceptable bærere og excipienser, som kan være i fast eller flydende form. Eksempler på egnede farmaceutisk acceptable bærere til anvendelse i faste dosisformer er bindemidler (fx prægelatineret majsstivelse, polyvinylpyrrolidon eller hydroxy-propylmethylcellulose); fyldstoffer (fx lactose, mikrokrystallinsk 30 cellulose eller calciumphosphat); smøremidler (fx magnesiumstearat, talkum eller silica); desintegranter (fx kartoffelstivelse eller na-triumstivelsesglycollat); eller befugtningsmidler (fx natriumlauryl-sulfat). Tabletter kan overtrækkes ved metoder, der er velkendte på området.

DK 170859 Bl 6

Eksempler på egnede farmaceutisk acceptable tilsætningsstoffer til anvendelse i flydende dosisformer er suspenderingsmidler (fx sorbitolsirup, methylcellulose eller hydrogenerede spiselige fedtstoffer); emulgeringsmidler (fx lecitin eller akaciegummi); ikke-vandige bærere 5 (fx mandelolie, olieagtige estere eller ethylalkohol); og konserveringsmidler (fx methyl- eller propyl-p-hydroxybenzoater eller sorbin-syre); stabiliserings- og solubiliseringsmidler kan også inkluderes.

Pastaer til oral administration kan formuleres ifølge metoder, der er velkendte på området. Eksempler på egnede farmaceutisk acceptable 10 tilsætningsstoffer til anvendelse i pastaformuleringer er suspenderings- eller geleringsmidler, fx aluminiumdistearat eller hydrogene -ret ricinusolie; dispergeringsmidler, fx polysorbater, ikke-vandige bærere, fx arachisolie eller olieagtige estere; stabiliserings- og solubiliseringsmidler. Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også ad-15 ministreres i veterinær medicin ved inkorporering deraf i dyrenes daglige faste eller flydende foder, fx som en del af det daglige foder eller det daglige drikkevand.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også administreres oralt i veterinær medicin i form af en stor flydende dosis såsom en opløsning, 20 suspension eller dispersion af den aktive bestanddel sammen med en farmaceutisk acceptabel bærer eller excipiens.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fx også formuleres som suppositorier, fx indeholdende konventionelle suppositoriebaser til anvendelse i veterinær eller human medicin eller som pessarier, fx inde-25 holdende konventionelle pessariebaser.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan formuleres til topisk administration til anvendelse i veterinær og human medicin som salver, cremer, lotioner, shampooer, pulvere, pessarier, sprays, dips, aerosoler, dråber (fx øjen- eller næsedråber) eller "pour-ons". Salver og 30 cremer kan fx formuleres med en vandig eller olieholdig base med tilsætning af egnede fortykkelses- og/eller geleringsmidler. Salver til administration til øjet kan fremstilles på steril måde under anvendelse af steriliserede komponenter. "Pour-ons" kan fx formuleres til veterinær anvendelse i olier indeholdende organiske opløsningsmidler, DK 170859 B1 7 eventuelt med formuleringshjælpestoffer, fx stabiliserings- og solu-biliseringsmidler.

Lotioner kan formuleres med en vandig eller olieholdig base og kan generelt også indeholde ét eller flere emulgeringsmidler, stabili-5 seringsmidler, dispergeringsmidler, suspenderingsmidler, fortykkelsesmidler eller farvestoffer.

Pulvere kan formuleres ved hjælp af en hvilken som helst egnet pulverbase. Dråber kan formuleres med en vandig eller ikke-vandig base også omfattende ét eller flere dispergeringsmidler, stabiliserings-10 midler, solubiliseringsmidler eller suspenderingsmidler. De kan også indeholde et konserveringsmiddel.

Til topisk administration ved inhalation kan forbindelserne ifølge opfindelsen leveres til anvendelse i veterinær eller human medicin i form af en aerosolspray eller en insufflator.

15 Forbindelserne ifølge opfindelsen kan administreres i kombination med andre farmaceutisk aktive bestanddele.

De totale daglige doser af forbindelserne ifølge opfindelsen anvendt i både veterinær og human medicin vil passende være i området 1-2000 μg/kg legemsvægt, fortrinsvis 50-1000 μg/kg, og disse kan gi-20 ves i delte doser, fx 1-4 gange dagligt.

Opfindelsen angår også en ikke-terapeutisk fremgangsmåde til bekæmpelse af skadedyr inden for landbrug, havebrug eller skovbrug eller i butikker, bygninger eller andre offentlige steder eller skadedyrenes levesteder, der er ejendommelig ved, at planter eller anden vegeta-25 tion eller skadedyrene selv eller deres levested behandles med en effektiv mængde af én eller flere forbindelser ifølge krav 1.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan formuleres på en hvilken som helst hensigtsmæssig måde til bekæmpelse af skadedyr, typisk indenfor havebrug eller landbrug, og præparater omfattende en forbindelse 30 ifølge opfindelsen bearbejdet til havebrugs- eller landbrugsanvendelse ligger derfor som anført ovenfor inden for opfindelsens rammer.

DK 170859 B1 8 Sådanne formuleringer omfatter tørre eller flydende typer, fx puddere, herunder pudderbaser eller -koncentrater, pulvere, herunder opløselige eller befugtelige pulvere, granulater, herunder mikrogra-nuler og dispergerbare granuler, pellets, "flowables", emulsioner 5 såsom fortyndede emulsioner eller emulgerbare koncentrater, dips såsom dips til rødder og frø, frøbejdser, frøpellets, oliekoncentrater, olieopløsninger, injektioner, fx stængelinjektioner, sprays, røg og tåger.

Sådanne formuleringer vil generelt omfatte forbindelsen i forbindelse 10 med en egnet bærer eller et egnet fortyndingsmiddel. Sådanne bærere kan være flydende eller faste og er udformet til at lette påføring af forbindelsen enten ved at dispergere den, hvor den skal påføres, eller ved at tilvejebringe en formulering, som af brugeren kan laves til et dispergerbart præparat. Sådanne formuleringer er velkendte på 15 området og kan fremstilles ved konventionelle metoder såsom fx ved blanding og/eller formaling af den aktive bestanddel eller de aktive bestanddele sammen med bæreren eller fortyndingsmidlet, fx en fast bærer, et opløsningsmiddel eller et overfladeaktivt middel.

Egnede faste bærere til anvendelse i formuleringer såsom puddere, 20 granulater og pulvere kan vælges blandt fx naturlige mineralske fyldstoffer såsom diatomit, talkum, kaolinit, montmorillonit, pyrophyllit eller attapulgit. Højdispers kiselsyre eller højdisperse absorberende polymerer kan, om ønsket, omfattes af præparatet. Granulerede adsor-berende bærere, som kan anvendes, kan være porøse (såsom pimpsten, 25 formalet mursten, sepiolit eller bentonit) eller ikke-porøse (såsom calcit eller sand). Egnede prægranulerede materialer, som kan anvendes, og som kan være organiske eller uorganiske, omfatter dolomit og formalede planterester.

Egnede opløsningsmidler til anvendelse som bærere eller fortyndings-30 midler omfatter aromatiske carbonhydrider, alifatiske carbonhydrider, alkoholer og glycoler eller ethere deraf, estere, ketoner, syreamider, stærkt polære opløsningsmidler, eventuelt epoxiderede vegetabilske olier og vand.

DK 170859 B1 9

Konventionelle ikke-ioniske, kationiske eller anioniske overfladeaktive midler, fx ethoxylerede alkylphenoler og alkoholer, alkalimetal-eller alkaliske jordmetalsalte af alkylbenzensulfonsyrer, lignosul-fonsyrer eller sulforavsyrer eller sulfonater af polymere phenoler, 5 som har gode emulgerings-, dispergerings- og/eller befugtningsegen-skaber, kan anvendes enten alene eller i kombination i præparaterne.

Stabilisatorer, antikagedannelsesmidler, antiskumningsmidler, viskositetsregulatorer, bindemidler og klæbemidler, fotostabilisatorer samt gødningsstoffer, fodringsstimulanter og andre aktive bestanddele 10 kan, om ønsket, inkluderes i præparaterne. Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også formuleres i blanding med andre insekticider, aca-ricider og nematicider.

1 formuleringerne er koncentrationen af aktivt materiale normalt fra 0,01 til 99 vægtprocent, og især mellem 0,01 og 40 vægtprocent.

15 Kommercielle produkter tilvejebringes normalt som koncentrerede præparater, der skal fortyndes til en passende koncentration inden anvendelse, fx fra 0,001 til 0,0001 vægtprocent.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, der er ejendommelig ved det i krav 8's kende-20 tegnende del angivne og som er diskuteret nedenfor. I de følgende formler har R^· den i formlen (1) anførte betydning.

Et yderligere aspekt af opfindelsen angår således en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelser med formlen (1), hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at en forbindelse med formlen (2) DK 170859 B1 10

Η H

^ N>ca, CH, \ o rS *'

II V

H OH Lq

5 . jT

L· [hvor L betegner et atom eller gruppe, der kan fjernes ved reduktion, fx ved homolytisk reduktion, såsom et halogenatom (fx et chlor-, brom- eller iodatom), en gruppe R^0C(-S)0- (hvor er Cj_.g-alkyl, aryl såsom phenyl eller (C^.g-alkyl)-aryl såsom p-tolyl) eller en 5 gruppe R^^02CC(-0)0- (hvor R^ er C^.^-alkyl, fx methyl eller ethyl)] reduceres.

Reduktionen kan udføres under anvendelse af et reduceringsmiddel såsom et alkyltinhydrid (fx tri-n-butyltinhydrid) i nærværelse af en radikal initiator såsom et peroxid, en azobisisobutyrnitril eller 10 lys.

Reaktionen kan hensigtsmæssigt udføres i et egnet opløsningsmiddel såsom et carbonhydrid, fx hexan, benzen eller toluen. Kombinationer af sådanne opløsningsmidler kan også anvendes.

Reaktionen kan udføres ved en temperatur på fra 0eC til 200°C, for-15 trinsvis fra 20eC til 130eC.

Hvis L i forbindelserne med formlen (2) betegner et halogenatom, har forbindelserne fortrinsvis strukturen (2a) DK 170859 B1 11

Η H

ca,

ch.iH1 N. -\^r ** I

‘Il o J® *' (2a)

II V

II OH Lg 5 i L.

og hvis L i forbindelserne med formlen (2) betegner en gruppe R^2qc(-S)0- eller R^c^CC(=0)0-, har forbindelserne fortrinsvis strukturen (2b)

Η H

CHj XN/ CB*^1 V (2b)

Si Π oh l>a il

Mellemprodukterne med formlen (2a) er hidtil ukendte forbindelser.

5 Forbindelserne med formlen (2) kan fremstilles ud fra de tilsvarende 5-hydroxyforbindelser med formlen (3) DK 170859 B1 12 e c3 CH, / 1λ'

ca^lx IL

Ml o^/É s‘ <3> J] OH Læ

S CH

Forbindelserne med formlen (2a) kan således fremstilles ved at behandle en forbindelse med formlen (3) med et egnet halogenerings-middel. Fx kan chlorering opnås ved behandling med et reagens 5 (R^0)2P(-0)C1 (hvor er en halogeneret alkylgruppe, fx CCI3CH2-) i nærværelse af en trilakylamin (fx diisopropylethylamin) og dimethy-laminopyridin. Alternativt kan chlorering udføres under anvendelse af en triarylphosphin (fx triphenylphosphin) og carbontetrachlorid i et opløsningsmiddel såsom en nitril (fx acetonitril).

10 Forbindelser med formlen (2b), hvor L betegner R^0C(-S)0-, kan fremstilles ved, at en forbindelse med formlen (3) behandles med et reagens R^0C(-S)C1 i et egnet opløsningsmiddel, fx et halogeneret car-bonhydrid såsom dichlormethan ved lav temperatur, fx 0°C.

15 Forbindelser med formlen (2b), hvor L betegner R^02cc(“°)°· > ^an fremstilles ved, at en forbindelse med formlen (3) behandles med et reagens R^02CC(-0)C1 i nærværelse af et alkalimetalcarbonat såsom calciumcarbonat og i et opløsningsmiddel såsom en ether, fx diethyl-ether.

DK 170859 B1 13

Opfindelsen illustreres yderligere ved de følgende mellemprodukter og eksempler, hvor forbindelserne benævnes derivater af "faktor A".

Faktor A er en forbindelse med formlen (3), hvor R^· er isopropyl, er en hydroxygruppe, og R^ er hydrogen.

5 MELLEMPRODUKT 1

5-epi-Chlor, 23-desoxy faktor A

2,2,2-Trichlorethylphosphorchloridat (2,67 g) blev under nitrogen sat til en omrørt opløsning af 23-desoxy faktor A (978 mg, eksempel 27 i GB 2176182A), N,N-diisopropylethylamin (2,85 ml) og 4-dimethylamino-10 pyridin (290 mg) i tør tetrahydrofuran (16 ml). Efter 1,5 timer blev blandingen oparbejdet og oprenset ved kromatografi over Merck® Kie-selgel 60 (300 g) under eluering af søjlen med hexan:ethylacetat (4:1) og (3:1) til dannelse af titelforbindelsen (514 mg), 244,6 nm (emax 18,200) δ (CDC13) omfatter 0,68 (d, 5HZ; 3H), 0,94 (d, 15 6Hz; 3H) 1,01 (d, 6Hz; 3H), 1,05 (d, 6Hz; 3H) 1,52 (s; 3H), 1,59 (s; 3H), 1,95 (s; 3H) 3,12 (m; IH), 3,42 (d, 9Hz; IH), 3,66 (s; 3H), 4,17 (s; IH) og 4,40 (s; IH).

MELLEMPRODUKT 2

5-Methyl-oxalat, 23-desoxy faktor A

20 En blanding af 23-desoxy faktor A (120 mg), calciumcarbonat (60 mg) og methyloxalylchlorid (108 mg) blev omrørt i 59 timer inden adskillelse mellem 2N saltsyre:ether (1:1, 40 ml). Den organiske fase blev fraskilt, vasket med vand og saltopløsning og blev derefter tørret og inddampet til et skum (110 mg), der blev oprenset ved flash-kromato-25 grafi over Kieselgel 60, 230-400 mesh (63-38 μιη) silica (25 g). Eluering af søjlen med hexan:ethylacetat (5:1) gav titelforbindelsen (24 mg), vmax (CHBr3) 3470 (OH), 1770 og 1740 (0C0C02Me) og 1708 cm-1 (C02R), S (CDC13) omfatter 0,69 (d, 5Hz; 3H), 0,94 (d, 6Hz; 3H) 0,99 (d, 6Hz; 3H), 1,03 (d, 6Hz; 3H), 1,81 (s; 3H), 3,38 (m; IH), 3,42 (d, 30 10Hz; IH), 3,91 (s; 3H) og 5,60 (m; 2H).

DK 170859 B1 14 EKSEMPEL 1

5,23-Bis-desoxy faktor A

(a) Mellemprodukt 1 (208 mg) i benzen (5 ml) blev sat til en tilbage-svalende opløsning af tri-n-butyltinhydrid (0,45 ml) i toluen i nær- 5 værelse af 2,2'-3-azobis(2-methylpropionitril) (5 mg). Efter 15 minutter ved tilbagesvalingstemperatur blev produktet oparbejdet og oprenset ved inddampning til en olie, der som en opløsning i hexan:-ethylacetat (4:1) blev filtreret gennem en pude af Kieselgel 60 efterfulgt af inddampning af filtratet og præparativ HPLC-oprensning 10 af det således opnåede serum til dannelse af titel forbindelsen (15 mg) som et hvidt skum. [a]^ + 172° {C 0,3, CH2C12), AggH 236,4 (emax 25,800) og 245 ran, (emax 29,500), »/max (CHBr3) 3500 (OH) og 1702 cm-1 (lacton)) 6 (CDCI3) omfatter 0,68 (d, 5HZ; 3H), 0,94 (d, 6Hz; 3H), 0,99 (d, 6Hz; 3H), 1,04 (d, 6Hz; 3H), 1,76 (s; 3H), 3,08 15 (m; IH), 3,42 (d, 10Hz; IH) og 3,81 (d, 6Hz; IH).

(b) En tilbagesvalende opløsning af mellemprodukt 2 (13 mg) og 2,2'-3-azobis(2-methylpropionitril) (1 mg) i toluen (2 ml) blev behandlet under nitrogen med tri-n-butyltinhydrid (25 mg). Efter 1 time blev produktet oparbejdet og oprenset ifølge fremgangsmåden i afsnit (a) 20 ovenfor til dannelse af titelforbindelsen (udbytte, 18%). Produktet lignede kromatografisk den forbindelse, der blev fremstillet i afsnit (a) ovenfor.

Multidosis parenteral injektion EKSEMPEL 1 25 X vægt/volumen område

Aktiv bestanddel 2,0 0,1-6,0% vægt/vol.

Benzylalkohol 1,0

Polysorbat 80 10,0

Glycerolformal 50,0 30 Vand til injektioner til 100,0 DK 170859 B1 15

Den aktive bestanddel blandes i polysorbat 80 og glycerolformal. Ben-zylalkohol tilsættes, og vand til injektioner tilsættes til slutvolu-menet. Produktet steriliseres ved konventionelle metoder, fx ved sterilfiltrering eller ved opvarmning i en autoklave, og pakkes asep-5 tisk.

EKSEMPEL 2 X vægt/volumen område

Aktiv bestanddel 4,0 0,1-7,5% vægt/vol.

Benzylalkohol 2,0 10 Glyceryltriacetat 30,0

Propylenglycol til 100,0

Den aktive bestanddel opløses i benzylalkohol og glyceryltriacetat. Propylenglycol tilsættes til slutvolumenet. Produktet steriliseres ved konventionelle farmaceutiske metoder, fx sterilfiltrering, og 15 pakkes aseptisk.

EKSEMPEL 3 X område

Aktiv bestanddel 2,0 vægt/vol. 0,1-7,5% vægt/vol.

Ethanol 36,0 vol./vol.

20 Ikke-ionisk overfladeaktivt middel (fx Synperonic® PE L441) 10,0 vægt/vol.

Propylenglycol til 100,0

Den aktive bestanddel opløses i ethanol og overfladeaktivt middel, og 25 der fyldes op til slutvolumenet. Produktet steriliseres ved konventionelle farmaceutiske metoder, fx sterilfiltrering, og pakkes aseptisk.

Varemærke 1CI

DK 170859 B1 16 EKSEMPEL 4 % område

Aktiv bestanddel 2,0 vægt/vol. 0,1-3,0% vægt/vol.

Ikke-ionisk overflade -5 aktivt middel (fx Synperonic® PE F68*) 2,0 vægt/vol.

Benzylalkohol 1,0 vægt/vol.

Miglyol® 840 ** 16,0 vol./vol.

Vand til injektioner til 100,0 10 Den aktive bestanddel opløses i Miglyol® 840. Det ikke-ioniske overfladeaktive middel og benzylalkohol opløses i hovedparten af vandet. Emulsionen fremstilles ved tilsætning af den olieagtige opløsning til den vandige opløsning under homogenisering ved anvendelse af konventionelle midler. Der fyldes op til slutvolumenet. Der fremstilles og 15 pakkes aseptisk.

* Varemærke ICI ** Varemærke Dynamit Nobel

Aerosol spray Vægtprocent område 20 Aktiv bestanddel 0,1 0,01-2,0 vægtprocent

Trichlorethan 29,9

Trichlorfluormethan 35,0

Dichlordifluormethan 35,0 25 Den aktive bestanddel blandes med trichlorethan og fyldes i en aerosolbeholder. Drivgassen fyldes på og ventilen sættes på plads. Den krævede vægtmængde flydende drivmiddel påfyldes gennem ventilen under tryk. Beholderne udstyres med udløsere og støvkapsler.

DK 170859 B1 17

Tablet

Fremstillingsmetode - vådgranulering mg

Aktiv bestanddel 250,0 5 Magnesiumstearat 4,5

Majsstivelse 22,5

Natriumstivelsesglycollat 9,0

Natriumlaurylsulfat 4,5

Mikrokrystallinsk cellulose 10 til tabletkernevægt på 450

En tilstrækkelig mængde af en 10% stivelsespasta sættes til den aktive bestanddel til dannelse af en passende våd masse til granulering. Granulerne fremstilles og tørres under anvendelse af en bakke-eller fluid-bed-tørrer. Der sigtes gennem en si, de øvrige bestandde-15 le tilsættes, og der komprimeres til tabletter.

Om nødvendigt kan tabletkernerne filmovertrækkes under anvendelse af hydroxypropylmethylcellulose eller andre lignende filmdannende materialer under anvendelse af enten et vandigt eller ikke-vandigt opløsningsmiddelsystem . Et blødgøringsmiddel og en passende farve kan in-20 kluderes i filmovertræksopløsningen.

Veterinær tablet til små-/husdyrbrug Fremstillingsmetode - tør granulering mg

Aktiv bestanddel 50,0 25 Magnesiumstearat 7,5

Mikrokrystallinsk cellulose til tabletkernevægt på 75,0

Den aktive bestanddel blandes med magnesiumstearat og mikrokrystallinsk cellulose. Blandingen komprimeres til kugler. Kuglerne ned- DK 170859 B1 18 brydes ved at lade dem passere gennem en roterende granulator til dannelse af fritflydende granuler. Der komprimeres til tabletter.

Tabletkernerne kan derefter, om ønsket, filmovertrækkes som beskrevet ovenfor.

5 Veterinær intrabryst-injektion mg/dos is område

Aktiv bestanddel 150 mg 0,05-1,0 g

Polysorbat 60 3,0 vægtprocent) )

Hvid bivoks 6,0 vægtprocent) til 3 g) til 3 eller 15 g 10 Arachisolie 91,0 vægtprocent) )

Arachisolie, bivoks og polysorbat 60 opvarmes til 160°C under omrø ring. Blandingen holdes ved 160eC i 2 timer og afkøles derefter til stuetemperatur under omrøring. Den aktive bestanddel sættes aseptisk til bæreren og dispergeres under anvendelse af en højhastighedsmixer.

15 Blandingen findeles ved at passere den gennem en kolloidmølle. Produktet fyldes aseptisk i sterile plasticsprøjter.

Veterinær bolus til langsom frigivelse vægtprocent område

Aktiv bestanddel 0,25-2 g 20 Kolloidt silicium- ) til den krævede dioxid 2,0) fyldvægt

Mikrokrystallinsk ) cellulose til 100,0)

Den aktive bestanddel blandes med det kolloide siliciumdioxid og mi-25 krokrystallinsk cellulose under anvendelse af en passende alikvot blandingsteknik til opnåelse af en tilfredsstillende fordeling af den aktive bestanddel i bæreren. Blandingen inkorporeres i anordningen til langsom frigivelse og giver (1) en konstant frigivelse af den DK 170859 B1 19 aktive bestanddel eller (2) en pulseret frigivelse af den aktive bestanddel .

Veterinær oral dosis % vægt/vol. område 5 Aktiv bestanddel 0,35 0,01-2% vægt/vol.

Polysorbat 85 5,0

Benzylalkohol 3,0

Propylenglycol 30,0

Phosphatbuffer til pH 6,0-6,5 10 Vand til 100,0

Den aktive bestanddel opløses i polysorbat 85, benzylalkohol og pro pylenglycol. En del af vandet tilsættes, og pH justeres, om nødvendigt, til 6,0-6,5 med phosphatbuffer. Der fyldes med vand til slut-volumenet. Produktet fyldes i dosisbeholderen.

15 Veterinær oral pasta vægtprocent område

Aktiv bestanddel 4,0 1-20 vægtprocent

Saccharinnatrium 2,5

Polysorbat 85 3,0 20 Aluminiumdistearat 5,0

Fraktioneret kokosolie til 100,0

Aluminiumdistearatet dispergeres i den fraktionerede kokosolie og polysorbat 85 ved opvarmning. Der afkøles til stuetemperatur, og saccharinnatrium dispergeres i den olieagtige bærer. Den aktive bestand-25 del dispergeres i basen. Plastsprøjter fyldes dermed.

Granuler til veterinær administration i foder vægtprocent område

Aktiv bestanddel 2,5 0,05-5 vægtprocent

Calciumsulfat, hemi-hydrat til 100,0 DK 170859 B1 20

Den aktive bestanddel blandes med calciumsulfatet. Granulerne fremstilles under anvendelse af en vådgranuleringsfremgangsmåde. Der tørres under anvendelse af en bakke- eller fluid-bed-tørrer. En egnet beholder fyldes.

5 Veterinær "pour-on" X vægt/vol. område

Aktiv bestanddel 2,0 0,1 til 30%

Dimethylsulfoxid 10,0

Methylisobutylketon 30,0 10 Propylenglycol (og pigment) til 100,0

Den aktive bestanddel opløses i dimethylsulfoxid og methylisobutylketon. Pigmentet tilsættes, og der fyldes til slutvolumenet med propylenglycol. "Pour-on"-beholderen fyldes.

Emulgerbart koncentrat 15 Aktiv bestanddel 50 g

Anionisk emulgator 40 g (fx Phenylsulfonat CALX)

Ikke-ionisk emulgator 60 g (fx Synperonic® NPI3) * 20 Aromatisk opløsningsmiddel til 1 liter (fx Solvesso® 100)

Samtlige ingredienser blandes, og der omrøres til opløsning.

* Varemærke ICI®

Claims

15 PATENTKRAV

1. Makrolidforbindelser med formlen (1) Η H c"'3' h|| > °w° Jiu in 0—Μ*0* kendetegnet ved, at R*· er en methyl-, ethyl- eller isopropylgruppe. DK 170859 B1 22

2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at rA er en isopropylgruppe.

3. Præparat til anvendelse i human medicin, kendetegnet ved, at det indeholder en effektiv mængde af 5 mindst én forbindelse ifølge krav 1 sammen med én eller flere bærere og/eller excipienser.

4. Præparat til anvendelse i veterinær medicin, kendetegnet ved, at det indeholder en effektiv mængde af mindst én forbindelse ifølge krav 1 sammen med én eller flere bærere 10 og/eller excipienser.

5. Præparat til bekæmpelse af skadedyr, kendetegnet ved, at det indeholder en effektiv mængde af mindst én forbindelse ifølge krav 1 sammen med én eller flere bærere og/eller excipienser.

6. Ikke-terapeutisk fremgangsmåde til bekæmpelse af skadedyr inden for landbrug, havebrug eller skovbrug eller i butikker, bygninger eller andre offentlige steder eller skadedyrenes levesteder, kendetegnet ved, at planter eller anden vegetation eller skadedyrene selv eller deres levested behandles med en effektiv mæng-20 de af én eller flere forbindelser ifølge krav 1.

7. Fremgangsmåde ifølge krav 6, kendetegnet ved, at skadedyrene er insekter, mider eller nematoder.

8. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse ifølge krav 1, 25 kendetegnet ved, at en forbindelse med formlen (2) DK 170859 B1 23 Η H T3 « r^i""CH3 CH""K ° H || 3 “I n T\ ^R1 S. II i 1) L hvor R^· har de i krav 1 anførte betydninger og hvor L betegner et atom eller en gruppe, der kan fjernes ved reduktion, reduceres.