DK167873B1

DK167873B1 - Substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyrederivater, samt laegemidler indeholdende disse derivater

Info

Publication number: DK167873B1
Application number: DK119188A
Authority: DK
Inventors: Ekkehard Baader; Martin Bickel; Dietrich Brocks; Volkmar Guenzler; Stephan Henke; Hartmut Hanauske-Abel
Original assignee: Hoechst Ag
Priority date: 1987-03-07
Filing date: 1988-03-04
Publication date: 1993-12-27
Also published as: CA1321391C; ES2061532T3; US5356909A; IE880628L; AU1264488A; JPS63238059A; KR960004860B1; IL85658A; EP0281943A3; EP0281943A2; ZA881561B; KR880011104A; PT86904A; EP0281943B1; DE3707429A1; PT86904B; DE3886963D1; DK119188A; US5004748A; AU614074B2

Description

DK 167873 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte, substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyrederivater, kendte sådanne derivater til anvendelse som lægemidler samt lægemidler indeholdende såvel de hidtil ukendte som de kendte deri-5 vater samt disse derivater til inhibering af prolin- og lysinhydroxylase.

Forbindelser, som inhiberer prolin- og ly-sinhydroxylasen, bevirker en meget selektiv hæmning af collagenbiosyntesen ved hjælp af collagen-specifik-10 ke hydroxyleringsreaktioner. Ved disse forløb hydrox-yleres protein-bundet prolin eller lysin ved hjælp af enzymerne prolin- og lysinhydroxylase. Dersom denne reaktion hindres af inhibitorer, opstår der et ikke--funktionsdygtigt, underhydroxyleret collagenmolekyle, 15 som kun kan afgives fra cellerne i ringe mængde til det ekstracellulære rum. Det underhydroxylerede collagen kan desuden ikke indbygges i collagenmatricen og nedbrydes meget let proteolytisk. Som følge af disse virkninger forringes mængden af ekstracellulært aflejret 20 collagen totalt.

Det er kendt, at inhibering af prolinhydroxy-lase ved hjælp af kendte inhibitorer, såsom α,α'-dipyri-dyl, fører til en hæmning af Cl^-biosyntesen af makrofager [W. Muller m.fl., FEBS Lett. jK), 218 (1978); og Im-25 munbiology 155, 47 (1978)]. Derved kommer det til et svigt . af komplementaktiveringens klassiske vej. Inhibitorer af prolinhydroxylase virker derfor også som im-munsuppressiva, f.eks. ved immunkomplekssygdomme.

Det er kendt, at prolinhydroxylase hæmmes 30 effektivt af pyridin-2,4- og -2,5-dicarboxylsyre [K.

Mayamaa m.fl., Eur. J. Biochem. 138, 239-245 (1984)].

Disse forbindelser er ganske vist kun virksomme som hæmningsstoffer i cellekultur i meget høje koncentrationer [V. Gunzler m.fl., Collagen and Rel. Research _3, 35 71 (1983)].

2

Ulv Ιο/Ο/ό D I

DE offentliggørelsesskrift nr. 3.432.094 beskriver pyridin-2,4- og -2,5-dicarboxylsyrediestere med 1-6 carbonatomer i esteralkyIdelen som lægemidler til in-hibering af prolin- og lysinhydroxylase.

5 Disse lav-alkylerede diestere har dog den u- lempe, at de spaltes for hurtigt i organismen til syrerne og ikke når frem til deres virkningssted i cellen i tilstrækkelig høj koncentration og således er mindre egnede til indgift som lægemiddel.

10 Det har tidligere været foreslået (DE offentliggø relsesskrifter nr. 3.703.959, 3.703.962 og 3.703.963) at anvende blandede estere/amider, højere alkylerede diestere og diamider af pyridin-2,4- og -2,5-dicarboxyl-syre for effektivt at hæmme collagenbiosyntesen i dy-15 remodelforsøg.

Det har nu overraskende vist sig, at også blandede estere/amider, højere alkylerede diestere og diamider af pyridin-2,4-dicarboxylsyre, som i pyridinringens 5-stilling bærer en yderligere substituent, er udmærke-20 de hæmningsstaffer af collagenbiosyntesen i dyremodelforsøgene , og det fremgår af de i det føglende angivne resultater af sammenligningsforsøg, at de 5-substituerede forbindelser ifølge opfindelsen har en overraskende kraftigere virkning end de nært beslægtede kendte forbindelser og 25 derfor kan anvendes i langt lavere koncentrationer til opnåelse af samme virkning.

De hidtil foreslåede blandede estere/amider eller højere alkylerede diestere og diamiderne hydrolyserer mere eller mindre hurtigt til pyridin-2,4- og 30 -2,5-dicarboxylsyre, som ifølge den hidtidige viden udgør det egentlige aktive stof (jfr. K. Mayama, supra).

Det er derfor så meget desto mere overraskende, at også de 5-substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyre-deri-vater er udmærkede hæmningsstoffer for collagenbiosyn-35 tesen i dyremodelforsøg, da disse forbindelser ikke hydrolyserer til de rene dicarboxylsyrer, men til dicarb-oxylsyrer, som er substitueret i 5-stillingen.

3 DK 167873 B1

Opfindelsen angår således hidtil ukendte, substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyre-derivater, der er ejendommelige ved, at de har formlen 5 2 R2

10 S

hvor R1 er halogen, alkyl, alkenyl eller alkynyl med op til 9 carbonatomer, idet de nævnte grupper even-15 tuelt er mono- eller disubstituerede med halogen, hydroxy, nitro, cyano, amino, Ci_4-al-koxy, carboxyl, c1_4-alkoxycarbonyl, c1«4-alkylcar-bonyloxy, C1_4-alkyl- eller Ci_4-dialkylamino eller benzylamino, 20 eller er en substituent med formlen -OR3 eller -N(R3)2, hvor R3 er hydrogen eller C1_9-alkyl, C^.g-alkenyl, C1_9-alkynyl eller Ci_9-alkylcarbonyl, idet disse grupper eventuelt er substitueret med phenyl, og 25 idet de to substituenter R3 i -N(R3)2 også kan være forskellige fra hinanden, og R2 er en substituent med formlen -OR4 eller -NHR4, hvor R4 er hydrogen eller C1_12"alky1/ som even-30 tuelt er substitueret 1 eller 2 gange med hydroxy eller C1_4-alkoxy eller c·]^-alkylcarbonyloxy, idet de to grupper R2 også kan være forskellige fra hinanden, eller er deres fysiologisk acceptable salte med uorganiske eller organiske syrer, undtagen 5-ethyl-pyridin-2,4-dicar-35 boxylsyren og de forbindelser, hvor R1 er en aminomethyl-gruppe, og endvidere undtagen 5-methyl-pyridin-2,4-dicar- 4 boxylsyredimethylester og 5-methoxy-pyridin-2,4-dicarboxyl-syredimethylester.

Særligt foretrukne substituerede pyridin-2,4-dicarboxyl-syrederivater er ifølge opfindelsen sådanne, der er omfattet 5 af den ovenfor angivne definition, og i hvilke R1 er halogen, C1-4-alkyl, C2-4-alkenyl eller -alky-nyl, idet de 3 sidstnævnte grupper eventuelt er mono-substituerede med halogen, hydroxy, nitro, cyano, amino eller carboxyl, 10 eller er en substituent med formlen -OR3 eller -N (R3) 2 / hvor R3 er hydrogen, C1_3-alkylcarbonyl eller Ci_3-alkyl, idet begge substituenterne R3 i -N(R3)2 kan være forskellige.

15 Opfindelsen angår også substituerede pyridin-2,4- -dicarboxylsyre-derivater med formlen 0 H2' 20 V Ta n 0 25 hvor substituenterne R1' og R2' har de samme betydninger som R·*· og R2 i formlen I samt endvidere de betydninger, der svarer til forbindelserne pyridin-2,4,5-tricarboxylsyre, 5-ethyl-pyridin-2,4-dicarboxylsyre og de forbindelser, hvor 30 R1' er en aminomethylgruppe, samt pyridin-2,4,5-tricarboxyl- syretrimethylester, 5-methyl-pyridin-2,4-dicarboxylsyredime-thylester, 5-methoxy-pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethylester, pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethylester-5-carboxylsyreethyl-ester og pyridin-2,5-dicarboxylsyrediethylester-4-carboxyl-35 syremethylester, til anvendelse som lægemidler.

Specielt kan ifølge opfindelsen substituerede pyridin- DK 167873 B1 5 2,4-dicarboxylsyre-derivater med formlen la, hvor R1' og R2' har de samme betydninger som R1 og R2 i krav 2, anvendes som lægemidler.

Ved halogen skal forstås fluor, chlor, brom 5 og iod, især chlor, brom og iod.

Ved flere ganges substitution kan substituen-terne også være uafhængigt forskellige fra hinanden.

Forbindelserne med formlen I kan fremstilles ved, at enten pyridin-2,4-dimethyl-5-halogen først overføres til 10 pyridin-2,4,5-trimethyl, som oxideres til pyridin-2,4,5- tricarboxylsyre, som overføres til trimethoxycarbonyl-forbindelsen og derpå omsættes til pyridin-2,4-5-tricarboxylsyre--trikaliumsaltet, eller pyridin-2,4-dimethyl-5-halogen oxideres til en forbindelse med formlen 15 COOH Ib

"tS

COOH

20 hvor X er halogen, og derpå eventuelt 25 (a) forbindelsen med formlen Ib overføres til en forbindelse med formlen 0 R2 ‘tiv hvor X er halogen, og 2 R har den for formlen I anførte betydning, 35 hvorefter forbindelsen med formlen Ic eventuelt om-' sættes med en forbindelse med formlen 0 6

Ul\ lb/S/,5 d I

R6 - C Ξ CH eller R6-CH=CH2 II II* g 5 hvor R er C^_^-alkyl, som eventuelt er mono- eller disubstitueret med halogen, hydroxy, nitro, cyano, amino, C^^-alkoxy, carboxyl, C^_4-alkoxycarbonyl, C^_4-alkyl-eller C^_4-dialkylamino, eller eventuelt 10 er substitueret med phenyl, naphthyl, thi enyl, furyl, pyrrolyl eller pyridyl, idet disse nævnte aryl- eller heteroarylgrupper igen eventuelt er monosubstitueret med halogen, carboxyl, amino, C^_4-alkyl- eller 15 C^_4-dialkylamino eller hydroxy, og hvor de eventuelt forekommende frie carboxylgrup-per eventuelt er beskyttet, og eventuelt den tilbageblevne C-C-tredobbelt- eller C-C-dobbeltbinding i det nu til pyridinskelettet bund-20 ne fragment, som afledes af forbindelsen med formlen II eller II*, hydrogeneres, eller eventuelt forbindelsen med formlen Ic omsættes med en forbindelse med 3 3 formlen E^N-R , hvor R har den for formlen I anførte betydning, og hvor eventuelt forekommende frie carbox-25 ylgruppe: eventuelt er beskyttet, eller at en forbindelse med formlen Ic på i og for sig kendt måde overføres til en forbindelse med formlen o-c-R2 k 0 hvor Y er 0 eller NH, og 2 R har den for formlen I anførte betydning, 1 som eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen DK 167873 B1 7

O O

X'-R3 eller X'-C-R3 III III’ hvor X' er chlor, brom eller iod, og 3 5 R har den for formlen I anførte betydning, og hvor de eventuelt forekommende frie carboxylgrup-per eventuelt er beskyttet, eller forbindelse med formlen Ic eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen 10

R1-X' IV

hvor X' er chlor, brom eller iod, og R^ har den for formlen I anførte betydning, 3 3 15 idet betydningerne -OR og -N(R )9, hvor 3 z R har den for formlen I anførte betydning, er undtagen, og hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, eller forbindelse med formlen Ic eventuelt omsættes 20 med en forbindelse med formlen

G-Y'-R3 V

hvor Y' er O eller NR3, 25 G er et alkalimetal, 3 R har den for formlen I anførte betydning, og hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper e-ventuelt er beskyttet, eller eventuelt 30 (b) forbindelsen med formlen Ib omsættes med en forbindelse med formlen II eller II', hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, og derpå eventuelt de i pyridinskelettets 2- og 4-stilling forekommende carboxylsyrer forestres eller 35 overføres til diamiderne eller estere/amider, og eventuelt den tilbageblevne C-C-tredobbelte binding eller 0 L/IY lU/O/O Dl 8 C-C-dobbeltbinding i det nu til pyridinskelettet bundne fragment, som afledes fra forbindelsen med formlen II eller II', hydrogeneres, eller forbindelsen med formlen Ib eventuelt omsættes med en forbindelse med form-3 3 5 len H2N-R , hvor R har den for formlen I anførte betydning, og hvor eventuelt forekommende frie carboxyl-grupper eventuelt er beskyttet, eller forbindelsen med formlen Ib overføres til en forbindelse 10 med formlen

C00H

"Ά

St^cooh 15 hvor Y er O eller NH, og eventuelt derpå de i 2- og 4-stillingen i pyridinskelettet forekommende carboxylsyrer forestres eller overføres til diamiderne eller ester/amiderne, 20 og derpå eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen III eller III', hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, eller forbindelsen med formlen Ib eventuelt omsættes med en 25 forbindelse med formlen IV, hvor de eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, og hvor forbindelserne med formlen R30-I og (R3)_N-I, 3 ^ hvor R har den for formlen I anførte betydning, er udelukket, 30 eller forbindelsen med formlen Ib eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen V, hvor de eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, og derpå eventuelt de i de ifølge (b) opnåede produkter e-35 ventuelt forekommende carboxylsyrer i pyridinskelet-tets 2- og 4-stilling forestres eller overføres til

O

9 DK 167873 B1 diamiderne eller ester/amiderne, eller (c) de i forbindelsen med formlen Ib forekommende carboxylgrupper i pyridinskelettets 2- og 4-stil-5 ling først beskyttes med en beskyttelsesgruppe, hvorved der fås en forbindelse med formlen

COE

’tX.

hvor E er en beskyttelsesgruppe, og derpå eventuelt forbindelsen med formlen Ik omsættes med en forbindelse med formlen II eller II', hvor e-ventuelt forekommede frie carboxylgrupper eventuelt er 15 beskyttet, og eventuelt derpå beskyttelsesgrupperne E for carboxylgrupperne i pyridinskelettets 2- og 4-stilling fraspaltes enten selektivt eller samlet, og de opnåede frie carboxylsyrer eventuelt forestres eller overføres til diamiderne eller ester/amiderne, og e-20 ventuelt den tilbageblevne C-C-tredobbelte binding eller C-C-dobbeltbinding i det nu til pyridinskelettet bundne fragment, som afledes fra forbindelsen med formlen II eller II', hydrogeneres, eller forbindelsen med formlen lk eventuelt omsættes 3 3 25 med en forbindelse med formlen E^N-R , hvor R har den for formlen I anførte betydning, og hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, eller forbindelsen med formlen Ik eventuelt overføres til en 30 forbindelse med formlen

COE

"ύ

COE

35 10

Ulv Ib/o/^ b 1 o hvor Y er O eller NH, og derpå eventuelt beskyttelsesgrupperne E for carboxyl-grupperne i pyridinskelettets 2- og 4-stilling fraspaltes enten selektivt eller samlet, og de opnåede frie 5 carboxylsyrer eventuelt forestres eller overføres til diamiderne eller ester/amiderne, og eventuelt derpå omsættes med en forbindelse med formlen III eller III1, hvor eventuelt forekommende frie carb-oxylgrupper eventuelt er beskyttet, 10 eller forbindelsen med formlen Ik eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen IV, hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, og hvor 3 3 3

forbindelserne med formlen R 0-1 og (R )2N-I, hvor R

15 har den for fomlen I anførte betydning, er udelukket, eller forbindelsen med formlen Ik eventuelt omsættes med en forbindelse med formlen V, hvor eventuelt forekommende frie carboxylgrupper eventuelt er beskyttet, og even-20 tuelt derpå i de ifølge (c) opnåede produkter de eventuelt forekommende beskyttelsesgrupper E for carboxyl-grupperne i pyridinskelettets 2- og 4-stilling fraspaltes enten selektivt eller samlet, og eventuelt de opnåede frie carboxylsyrer forestres eller 25 overføres til diamiderne eller ester/amiderne, og derpå eventuelt de i produkterne forekommende beskyttelsesgrupper fraspaltes hydrolytisk eller hydro-genolytisk, og eventuelt de ifølge (a), (b) eller (c) opnåede forbindelser overføres til deres fysiologisk 30 acceptable salte.

Fremstillingen af forbindelserne ifølge opfindelsen er illustreret i det følgende synteseskema.

35 11 DK 167873 B1

Svntes.eskema_ 2 ω2Ε2 °h R °2Cv\ fl -l'·] - Ov CH3 2 L 2 i

COE OOOH COR

*Π ‘,5 -,-¾. .

^M^COE ^Kl^COOH ^NK^COR^ || ]

Ik x.a IC · ^n^co2k I b ' i \ " 1 lår \ \ \ ”τ5 \ Λ \ ·: ^w^cca kfj^caa \ i \g-y'-r3 \ hy-e3

IcUIe, II. V*' NT \ *7 Uwf/ \ \ \ \

COA \ CQA \ - COA i 3v f°A

^ό„ pcX, \ *tX ^5- ‘ tX.

Ig,In,Io * Ih,Iq,Ir 1 If,Ii,Im Ij,IsrIt ix,IyfIæ \-i_ / b/ _ °« R2 /~ / \ cooh1 ί6, *·&ί ''ύ™,

COE

1 5 / \ A= OH, R2, Ξ * \° 2

G= Alkaliiretal. "* JP°H

X= f, a, Br, J RYl — Yl - Yj_ 2 -

X- Cl, Br, J LwiJW . ^C-S2 ^“V

" o 0 E = Beskyttelsesgruppe Ο Σ

Y = 0, NH

Υ' = Ο, NR

3

Ulv ΙΌ/0/*3 D I

O

12

Forbindelserne med formlen Ib fås f.eks. ved halogenering af pyridin-2,4-dimethyl. Reaktionen kan foretages i koncentreret svovlsyre eller i oleum, fortrinsvis med et SO^-indhold på 25-65% ved temperaturer fra 40 til 80°C. Som halogeneringsmiddel kan der anvendes chlor, brom eller iod, som fortrinsvis anvendes med et halvt mol pr. mol pyridin-2,4-dimethyl. Reaktionstiden er fortrinsvis 1-6 timer. Derpå foretages oxidationen af pyridin-5-halogen-2,4-dimethyl til forbindel- 10 sen med formlen Ib i gængse oxidationsmidler, såsom salpetersyre, chromsyre, dichromat eller kaliumperman-ganat. Opløsningsmidlerne er f.eks. iseddike, svovlsyre eller vand, idet pH-værdien, når der anvendes vand, fortrinsvis ligger på 7-9.

15

Af pyridin-5-halogen-2,4-dimethyl kan der efter methylering i 5-stillingen ved hjælp af oxidation fremstilles pyridin-2,4,5-tricarboxylsyre, som f.eks. ved omsætning med KOH i methanol kan overføres til det tilsvarende pyridin-2,4,5-tricarboxylsyre-trikalium-salt.

Ved fremstilling af yderligere forbindelser ifølge opfindelsen kan der benyttes tre forskellige fremgangsmådevarianter:

Fremgangsmådevariant (a)

Forbindelserne med formlen Ib omsættes til di-carboxylsyrederivaterne med formlen Ic. Omsætningen sker på en måde, der er analog med de i DE offentliggørelsesskrifterne nr. 3.703.959, 3.703.962 og 3Q 3.703.963 til pyridin-2,4- og f2,5-dicarboxylsyrer foreslåede.

Fremgangsmådevariant (b)

Forbindelserne med formlen Ib anvendes videre uden forudgående omsætning.

Fremgangsmådevariant (c)

De i forbindelserne med formlen Ib forekommende to carboxylgrupper i pyridinringens 2- og 4-stil- 35

O

13 DK 167873 B1 ling beskyttes med en gængs carboxylbeskyttelsesgruppe (forbindelse Ik).

Som midlertidige carboxylbeskyttelsesgrupper egner sig esterbeskyttelsesgrupper, således som de og-5 så finder anvendelse ved peptidsyntese (jfr. f.eks.

Kontakte Merck 3/79, side 15 og 19 ff).

Hyppigt anvendes methyl-, benzyl- eller tert. butylestere, endvidere ONbzl, OMbzl, OPic. Fraspalt-ning sker alt afhængigt af beskyttelsesgruppe ved sur 10 eller alkalisk hydrolyse eller ved hydrogenering i nærvær af en overgangsmetalkatalysator (Houben-Weyl, Me-thoden der Organischen Chemie bd. E5, 496-504, 4. opl., 1085, Georg Thieme Verlag, Stuttgart).

De andre omsætninger af forbindelserne Ib, 15 Ic eller Ik beror på en substituering af halogenatomet i 5-stillingen.

Således kan f.eks. forbindelsen med formlen Ib, Ic eller Ik omsættes med en forbindelse med formlen II eller II'. Fortrinsvis foregår reaktionen i nærvær 20 af en katalysator, såsom [(CgH,-)^P]gPdClg ved samtidig tilstedeværelse af en base, såsom triethylamin, og samtidig kobberkatalyse. Reaktionen ske uden opløsningsmidler eller i opløsningsmidler, såsom chlorerede car-bonhydrider, f.eks. methylenchlorid, chloroform, tri-25 eller tetrachlorethylen,· eller benzen eller toluen og ved temperaturer fra stuetemperatur til opløsningsmidlets kogepunkt med en reaktionstid fra 30 minutter til 16 timer [jfr. J. Med. Chem. 3JD, 185-193 (1985) ] .

Ved reaktionen mellem alk-(1)-yn-derivatet 30 eller alk(1)-en-drivatet og pyridin-5-halogen-2,4-di-carboxylsyreesteren fås en forbindelse med formlen lu,

Iv eller Iw, som indeholder en tredobbelt C-C-binding eller en C-C-dobbeltbinding, som eventuelt derpå med gængse hydrogeneringsmidler, såsom H2/Pd, kan hydro-35 generes selektivt og/eller fuldstændigt. Hertil anvendes gængse opløsningsmidler som alkoholer, især 0 14 υι\ ιο/ο/ο di methanol, ethanol eller isopropanol.

Ligeledes kan forbindelserne med formlen Ib, 3

Ic og Ik omsættes med en amm E^N-R , som adderes i 5--stillingen under hydrogenhalogenidfraspaltning (for-5 bindeiserne Ix, ly og læ). Omsætningen sker fortrinsvis i nærvær af indifferente opløsningsmidler som toluen ved kogetemperatur, fortrinsvis ved 110-130°C. A-minerne med formlen H2N-R^ kan - dersom de ikke fås i handelen - fremstilles på enkel måde ifølge kendte 10 fremgangsmåder.

Ved fremstilling af de i 5-stillingen med 3 3 -OR eller -N(R )2 substituerede pyridin-2,4-dicarbox-ylsyre-derivater overføres først forbindelsen Ib, Ic eller Ik til de tilsvarende alkoholer eller aminer 15 (id, le og II: Y = O, NH). Dette kan f.eks. ske ved omsætning af forbindelsen Ib, Ic eller Ik med natrium- eller kaliumhydroxidopløsning, som fortrinsvis er 1-15 N (Id, le, II: Y = O) eller med en ammoniakopløsning, hvis densitet ligger mellem 0,7 og 0,89, 20 i autoklaver, fortrinsvis ved temperaturer på 100-160°C og med reaktionstider på 1-4 timer (Id, le, Ik: Y = NH).

En katalysator som f.eks. et kobbersalt, fortrinsvis kobbersulfat, kan anvendes til begge reaktioner.

De opnåede alkoholer eller aminer omsættes 25 derpå eventuelt i det efterfølgende reaktionstrin med forbindelser med formlen III eller III'. Dersom der anvendes forbindelser med formlen III eller III1, der indeholder fire carboxylgrupper, er det formålstjenligt at beskytte disse før omsætningen med en egnet beskyttel-30 sesgruppe, som efter afsluttet reaktion eventuelt igen kan fraspaltes (jfr. supra, Kontakte Merck, Houben-Weyl bd. E5).

De to reaktanter, alkoholen eller aminen med formlen Id, le eller II (Y = O, NH) og halogenidet med 35 formlen III eller III' blandes i ækvimolære mængder eller et 1-5-dobbelt overskud i III eller III' og omsæt-

O

15 DK 167873 B1 tes ved temperaturer mellem stuetemperatur og 100°C, fortrinsvis mellem 30 og 60°C indtil reaktionens afslutning. Reaktionens afslutning kan bestemmes ved hjælp af tyndtlagschromatografi (TLC-kontrol). En 5 variant af denne fremgangsmåde består i, at der arbejdes i et egnet opløsningsmiddel, såsom diethylether eller dimethoxyethan eller tetrahydrofuran, chlorerede carbonhydrider, såsom methylenchlorid, chloroform, tri-eller tetrachlorethylen, benzen eller toluen eller polære 10 opløsningsmidler, såsom dimethylformamid eller acetone eller dimethylsulfoxid. Også her kan der anvendes et overskud af halogenid med formlen III eller III', som kan være op til ca. den 5-dobbelte mængde. Reaktionstemperaturerne ligger mellem stuetemperatur og op-15 løsningsmidlets kogepunkt f idet temperaturer i intervallet fra stuetemperatur til 130°C er særlig foretrukne.

Eventuelt kan reaktionen også finde sted i nærvær af baser. Som yderligere baser kan nævnes uorganiske syreacceptorer, såsom carbonater eller hydro-20 gencarbonater, f.eks. natrium- eller kaliumcarbonat, eller natrium- eller kaliumhydrogencarbonat, eller organiske syreacceptorer, såsom tertiære aminer, som tri-ethylamin, tributylamin,eller ethyldiisopropylamin, eller heterocycliske aminer, såsom N-alkylmorpholin, py-25 ridin eller guinolin, eller dialkylaniliner, men også alkalimetalhydrider, såsom natriumhydrid.

En yderligere mulighed for fremstilling af forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen If, li eller Im består i, at en forbindelse med formlen Ib, Ic eller 30 Ik omsættes med et substitueret eller usubstitueret mættet eller enkelt umættet alkylhalogenid, fortrinsvis iodid eller bromid (formel IV). Fortrinsvis sker reaktionen i nærvær af en stærk base som butyllithium.

Forbindelserne med formlen Ij, Is og It kan 35 fremstilles ved, at forbindelserne med formlen Ib, Ic eller Ik <~>msættes med et alkalimetalsalt af en alkohol med

Ulv ΙΟ/ΰ/,5 D I

16 o formlen V. Hertil anvendes fortrinsvis methanol, e-thanol eller isopropanol, alkalimetallet kan fortrinsvis være natrium eller kalium. Omsætningen sker ved temperaturer mellem stuetemperatur og opløsningsmid-5 lets kogepunkt, og reaktionstiderne kan ligge mellem 10 og 100 timer, fortrinsvis 60 timer.

Ifølge fremgangsmådevariant (b) overføres først - som beskrevet ovenfor - 5-halogen-pyridin-2,4--dicarboxylsyrerne til forbindelserne If, Ig, Ij, lu, 10 Ix, Id eller Ih og omsættes først da eventuelt i et efterfølgende reaktionstrin ifølge fremgangsmåderne i DE offentliggørelsesskrifterne nr. 3.703.959, 3.703.962 og 3.703.963 til produkterne med formlen I ifølge opfindelsen.

15 Ifølge fremgangsmådevariant (c) fjernes eventuelt til fremstilling af yderligere stoffer ifølge opfindelsen de i forbindelserne lo, Ir, II, Im, Iw, ly og It forkommende carboxylbeskyttelsesgrupper enten selektivt efter hinanden eller samlet, og forbin-20 delserne overføres til de tilsvarende R -derivater, således som det er foreslået i DE offentliggørelsesskrifterne nr. 3.703.959, 3.703.962 og 3.703.963 for pyri-din-2,4- og -2,5-dicarboxylsyrediestere/diamider/esteramider. Dette giver mulighed for at fremstille både 25 symmetrisk og usymmetrisk substituerede diestere, diamider eller ester/amider.

Det er desuden muligt ved et passende valg af beskyttelsesgrupper og fremgangsmåde til fraspalt-ning af disse beskyttelsesgrupper at forestre både de 30 i substituenten eventuelt forekommende carboxylgrup-per og de carboxylgrupper, der findes i pyridinringens 2- og 4-stilling, med forskellige eller - dersom det er formålstjenligt - med identiske substituenter.

Forbindelserne med formlen II fås, dersom 35 de ikke kan købes, f.eks. af 1,2-dihalogenider, især 1,2-dibromider efter dobbelt dehydrohalogenering el-

O

17 DK 167873 B1 ler ved omsætning af ketoner eller aldehyder med acetylen og eventuelt efterfølgende reduktion af den dannede alkohol. Tilsvarende metoder er beskrevet f.eks.

i Organikum, Organisch chemisches Grundpraktikum, 15.

5 opl. VEB Deutscher Verlag der Wissenschaften, Berlin, side 299ff. (1976) (af dihalogenider) og side 560ff. (e-thylering). Substituerede alkvnderivater med formlen II kan f.eks. fremstilles af de tilsvarende alk-(1)-ynoler, som ifølge kendte metoder f.eks. kan oxideres direkte 10 til carboxylsyrer, som eventuelt kan overføres til e-stere eller amider. På den anden side kan alk(l)ynol også overføres til et halogenderivat, fortrinsvis chlor-derivat, idet chloratomet på sin side derpå kan erstattes f.eks. af en nitrilgruppe, som igen eventuelt kan 15 omsættes til en amin. Om ønsket kan denne amin også yderligere opoxideres til de tilsvarende nitroforbin-delser. Ligeledes kan nitrilgruppen forsæbes til en carboxylsyre, som så igen kan overføres til estere eller amider. På analog måde kan også disusbstituerede 20 alkynderivater med formlen II fremstilles. En yderligere metode til fremstilling af substituerede alkynderivater med formlen II er den nucleophile substitution af halogenforbindelser, som f.eks. halogenalka- ner, med natriumacetylid. Tilsvarende metoder er f.

25 eks. beskrevet i "Reaktionen und Synthesen" i Org.

Chem. Praktikum, Tietze/Eicher, Thieme-Verlag, Stutt- gart/New York 1981, side 38.

Alkenforbindelserne med formlen II' kan - for så vidt de ikke fås i handelen - fremstilles på 30 enkel måde ifølge kendte metoder.

Forbindelserne med formlen III, III' og IV kan ligeledes, for så vidt de ikke kan købes, syntetiseres på enkel måde (f.eks. Organikum, Organisch chemisches Grundpraktikum, VEB Deutscher Verlag der Wis-35 senshaften, 15. opl. Berlin 1976; en oversigt findes 1 metoderegisteret side 826: Halogenverbindungen).

Ulv 10/0/0 D I

18

Hvis der i forbindelserne med formlen III, III' eller IV findes frie carboxylgrupper, forsynes disse eventuelt før omsætning med forbindelserne med formlen Id, Ie/Il eller Ic/Ib/Ik med en egnet beskyt-5 telsesgruppe (jfr. supra Kontakte Merck), som efter foretaget omsætning eventuelt igen kan fraspaltes hy-drolytisk eller hydrogenolytisk (jfr. supra Houben-Weyl, bd. E5).

Forbindelserne med formlen V kan fremstilles 10 ifølge gængse metoder ved omsætning af ækvimolære mængder af et alkalimetal og en alkohol. Også her kan e-ventuelt forekommende carboxylgrupper forsynes med en midlertidig beskyttelsesgruppe (jfr. supra Kontakte Merck).

15 Eventuelt kan oparbejdningen af produkterne f.eks. ske ved ekstraktion eller ved chromatografi f. eks. over kiselgel. Det isolerede produkt kan omkrystalliseres og eventuelt omsættes med en egnet syre til et fysiologisk acceptabelt salt. Som egnede syrer kan 20 f.eks. nævnes:

Mineralsyrer, såsom hydrogenchlorid- eller hy-drogenbromidsyre, samt svovl-, phosphor-, salpeter- eller perchlorsyre eller organiske syrer, såsom myresyre, eddikesyre, propionsyre, ravsyre, glycolsyre, mælke-25 syre, æblesyre, vinsyre, citronsyre, maleinsyre, fu-marsyre, phenyleddikesyre, benzoesyre, methansulfon-syre, toluensulfonsyre, oxalsyre, 4-aminobenzoesyre, naphthalin-l,5-disulfon- eller ascorbinsyre.

Forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen 30 I og forbindelserne med formlen la har værdifulde farmakologiske egenskaber og udviser især aktivitet som hæmmere af prolin- og lysinhydroxylase, som fibrosuppressiva og immun-suppresiva.

Fibrogenases aktivitet kan bestemmes ved 35 radioimmunologisk måling af det N-endestillede propep-tid i collagen type III eller det N- og C-endestille-de tværbindingsdomæne i collagen type IV (7s-collagen

Ulv 10/0/0 D I

19 og tyPe IV-collagen-NC^) i serum.

Hertil måles hydroxyprolin-, procollagen-III--peptid-.. 7s-collagen- og type-IV-collagen-NC^-koncentra-tionerne i leveren fra 5 (a) ubehandlede rotter (kontrol) (b) rotter, som gives carbontetrachlorid (CCl^-kontrol) (c) rotter, som først gives CCl^ og derpå en forbindelse ifølge opfindelsen 10 [denne prøvemetode beskrives af C.Rouiller, Experimental toxic injury of the liver; i The Liver, C. Rouiller, bd. 2, 335-476, New York, Academic Press (1964)].

Den farmakologiske aktivitet hos forbindelserne ifølge opfindelsen undersøges. Herved viser der 15 sig en klar hæmning af prolin- og lysinhydroxylase.

Optagelsen af prolylhydroxylase-proinhibitorer er blevet bestemt for en række forbindelser ifølge opfindelsen og en kendt, nærtbeslægtet forbindelse ved forsøg med perfunderet isoleret rottelever under anvendelse af de metoder, 20 der er beskrevet i Biochem. Z. 336f 460-467 (1963), P.S.E.B.M. 128. 760-772 (1968) og Manual of pharmacological calculations, Springer-Verlag, New York (1981).

25 30 35 DK ΊΒ7ο7ο ΒΊ 20 Følgende resultater er opnået:

Kinetik for optagelse i isoleret 5 rottelever

Forsøgsforbindelse Kone. Hældning* Th Substituent i μg/ml min. 5-stillingen 10 Pyridin-2,4-dicar- 46 0,016 19 ingen boxylsyre-di-(2-methoxyethyl) -amid (kendt) 15 Forbindelse I 42 0,006 50 -OCH3 iflg. opf.

Forbindelse II 44 0,008 37 -Br iflg. opf.

20

Forbindelse III 48 0,004 75 -NH2 iflg. opf.

25 *) hældning af regressionslinier, log c = a^a^T

Forbindelserne I, II og III svarer til sammenligningsforbindelsen, bortset fra 5-substituenterne.

Det fremgår heraf, at de aktive metaboliter dannet ud fra I, II og III vil være meget længere tilgængelige i 30 leveren end for sammenligningsforbindelsernes vedkommende.

I, II og III vil derfor have længere virkningsvarighed.

Der er endvidere foretaget bestemmelser af IC5g-værdier (IC5o = koncentration i μΜ, ved hvilken 50% af enzymet, pyrolyl-4-hydroxylase, hæmmes) ved de metoder, der er angivet 35 i Anal. Biochem. 6j6, 279-286 (1,75) og Meth. Enzym. 82, 245-304 (1982), idet pyridin-2,4-dicarboxylsyre (Forbindelse 1), samme forbindelse med 5-NH2 (Forbindelse 2) og samme forbindelse med 5-OH (Forbindelse 3) er sammenlignet:

Forbindelse IC5g (μΜ) 40 _ _ 1 120 2 80 3 105

De 5-substituerede dicarboxylsyrer virker således klart 45 kraftigere end den usubstituerede forbindelse 1.

DK 167873 Bl 21

Forbindelserne med formlen I og la kan anvendes som lægemidler i form af farmaceutiske præparater, som indeholder forbindelserne sammen med acceptable farmaceutiske bærere. Forbindelserne kan anvendes som lægemidler, f.eks. i form 5 af farmaceutiske præparater, som indeholder disse forbindelser blandet med en til enteral, percutan eller parenteral anvendelse egnet farmaceutisk, organisk eller uorganisk bærer, f.eks. vand, gummi arabicum, gelatine, mælkesukker, stivelse, magnesiumstearat, talkum, planteolier, polyalkylen-10 glycoler eller vaseline.

De farmaceutiske præparater kan foreligge i fast form, f.eks. som tabletter, dragéer, suppositorier eller kapsler, i halvfast form, f.eks. som salver, eller i flydende form, f.eks. som opløsninger, suspensio-15 ner eller emulsioner. Eventuelt er de steriliseret og/ eller indeholder hjælpestoffer, såsom konserverings-, stabiliserings-, fugte- eller emulgeringsmidler, salte til ændring af det osmotiske tryk eller puffere. De kan også indeholde andre terapeutisk aktive stoffer.

20 Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret ved hjælp af eksempler.

25 30 35

O

DK 167873 B1 22

Eksempel 1

Fremstilling af 5-brom-2,4-dimethylpyridin

Til 28,9 ml 2,4-dimethylpyridin dryppes under isafkøling og omrøring 150 ml 65% oleum, så at temperaturen ikke overstiger 35°C. Når opløsningen er homogeniseret, tildryppes der langsomt under omrøring 6,42 10 ml brom. Der omrøres ved 80°C i 3,5 timer. Efter afkøling lader man forsigtigt blandingen dryppe på 1 kg is, neutraliserer med fast Naog ekstraherer 3 gange hver med 300 ml ether. Det organiske lag skilles fra og tørres med magnesiumsulfat. Efter fjernelse af opløsnings-15 midlet ved destillation i vakuum fås 34,6 g bleggul olie, som består af isomerene 5-brom-2,4-dimethylpyridin og 3-brom-2,4-dimethylpyridin. De isomere adskilles ved søj-lechromatografi på siliciumdioxidgel, hvorved fås 10 g 5-brom-2,4-dimethylpyridin som en farveløs væske (13,0 g 20 3 -brom-2,4-dimethylpyridin). Udbytte: 22%.

Eksempel 2

Fremstilling af 5-brom-2,4-pyridincarboxylsyre

COCH

4 g 5-brom-2,4-dimethylpyridin fra eksempel 1 opvarmes i 200 ml vand og 2,4 g KOH til 70-80°C. Derpå 30 tilsættes portionsvis halvdelen af 12,74 g kaliumperman-ganat. Opløsningen opvarmes til kogepunktet, og resten af kaliumpermanganatet tilsættes. Der omrøres i 20 timer ved 70-80°C, bundfaldet suges varmt fra og vaskes 4 gange med 50 ml-portioner varmt vand. De kombinerede 35 filtrater inddampes i vakuum til 100 ml. Opløsningen justeres med koncentreret saltsyre til pH 1, hvorefter

O

23 DK1b/»/3B1 den henstår i 20 timer ved 0°C. Det krystallinske faste stof suges fra og tørres ved 100°C i vakuum. Udbyttet er 2,9 g.

Smeltepunkt: 261-263°C.

5

Udbytte: 55%.

Eksempel 3

Fremstilling af 5-brom-2,4-pyridincarboxylsyredimethyl-ester (i det følgende kaldt "5-bromdicarboxylsyredime- 10 thylester").

coys 'TX, 15 1 g 5-brom-2,4-pyridincarboxylsyre opløses i 20 ml methanol, og der tildryppes 1 ml koncentreret svovlsyre. Opløsningen omrøres i 24 timer ved 75°C. Opløsningen afkøles derpå, gøres alkalisk med mættet natri-umhydrogencarbonatopløsning og ekstraheres 3 gange med 20 eddikesyreester. De kombinerede organiske faser vaskes med vand, tørres med magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum. Der bliver 1,0 g tilbage af et hvidt fast stof med smeltepunkt 102-104°C. Udbytte: 90%.

25

Eksempel 4

Fremstilling af 5-hydroxy-2,4-pyridincarboxylsyre

COCH

80 yS

30 l'„<1.

CCCH

En blanding af 500 mg 5-brom-2,4-pyridincarboxylsyre fra eksempel 2, 20 ml 10N vandig natriumhydroxidopløsning og 250 mg kobbervitriol opvarmes i autoklav i 4 timer til 165°C. Efter afkøling suges fra kobbersal-35 tet, der indstilles til pH 1 med koncentreret saltsyre, og opløsningen inddampes. Det faste stof opvarmes i DK 167873 B1 24 o lidt methanol, filtreres fra saltene, og opløsningen henstår ved 0°C i 20 timer. Det udfældede faste stof skilles fra og tørres.

Udbytte: 70 mg. Smeltepunkt: 280-285°C.

5

Eksempel 5

Fremstilling af 5-amino-pyridin-2,4-dicarboxylsyre

COGH

"Yx N αχ»

En blanding af 500 mg 5-brom-pyridin-2,4-di-carboxylsyre fra eksempel 2, 100 mg kobbervitriol og 20 ml ammoniakopløsning ( d = 0,91) opvarmes i autoklav i 15 4 timer til 160°C. Opløsningen inddampes til tørhed, det faste stof opvarmes med lidt methanol, og opløsningen skilles fra det uopløselige. Efter 20 timer ved 0°C udfældes et hvidt fast stof, der filtreres fra og tørres. Udbytte: 70 mg. Smeltepunkt: 315°C (dekom-20 ponering) .

Eksempel 6

Fremstilling af 5-methoxypyridin-2,4-dicarboxylsyredi-methylester 25 «i* Ύχ 300 mg 5-brompyridin-2,4-dicarboxylsyredimeth- ylester (fra eksempel 3) opløses i 5 ml absolut methanol, 30 og der tilsættes 120 mg natriummethylat. Efter 60 timers tilbagesvaling hældes blandingen på is og 2 ml 2N HC1, gøres alkalisk med NaHCO^ og ekstraheres med CH^C^ 2 gange. Efter tørring med MgSO^ inddampes opløsningsmidlet. Der bliver 175 mg hvidt fast stof tilbage.

Smeltepunkt: 133-135°C.

DK 167873 Bl

O

25

Eksempel 7

Fremstilling af 5-(4-hydroxy-l-buty.nyl)-pyridin-2,4-di-carboxylsyredimethylester c C^—!e _ SL.

I en med argon skyllet kolbe opløses 461 mg 5--brompyridin-2f4-dicarboxylsyredimethylester (fra eksem-10 pel 3) og 142 mg 4-hydroxy-1-butyn i methylenchlorid, og der tildryppes 680 μΐ triethylamin. Der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur, der tilsættes 13 mg ((CgH^) 2pdCl2 °9 2 mg CuJ, og dette koges i 2 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling fortyndes med meth-15 ylenchlorid, vaskes med vand og natriumchloridopløsning, og de kombinerede organiske faser tørres med kaliumcarb-onat. Efter afdampning af opløsningsmidlet bliver der 347 mg tilbage af et hvidt fast stof.

Smeltepunkt: 87°C.

20

Eksempel 8

Fremstilling af 5- (3-hydroxy-l-penty.nyl) -pyridin-2,4--dicarboxylsyre-dimethylester 25 I en med argon skyllet kolbe opløses 546 mg 5--bromdicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) og 202 mg 3-hydroxy-l-pentynyl i methylenchlorid, og der til-30 dryppes 840 μΐ triethylamin. Der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur, tilsættes 28 mg ((CgH,-) ^P) 2pdCl2 °9 4 mg CuJ og koges i 18 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling fortyndes med methylenchlorid, vaskes med vand og natriumchlorid-opløsning, og de kombinerede or-35 ganiske faser tørres med kaliumcarbonat. Efter inddamp-ning bliver der 404 mg af en gul olie tilbage, som kry- DK 167873 Bl

O

26 stalliserer ved 0°C.

Smeltepunkt: 65°C.

Eksempel 9 5 Fremstilling af 5-(4-methoxycarbonyl-l-butynyl)-pyridin--2,4-dicarboxylsyredimethylester OO^te “ί— 10 I en med argon skyllet kolbe opløses 546 mg 5- -bromdicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) og 269 mg 4-pentynsyremethylester i methylenchlorid, og der til-dryppes 840 μΐ triethylamin. Der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur, tilsættes 28 mg ((CgHg) ^P) 2Ρ^12 15 4 mg CuJ og koges i 18 timer under tilbagesvaling.

Efter afkøling fortyndes med methylenchlorid, vaskes med vand og natriumchlorid-opløsning, og de kombinerede organiske faser tørres med kaliumcarbonat. Efter inddampning og chromatografi på kiselgel bliver 460 mg af et hvidt 20 fast stof tilbage.

Smeltepunkt: 113°C.

Eksempel 10

Fremstilling af 5-(3-hydroxy-l-propynyl)-pyridin-2,4-di-25 carboxylsyredimethylester COjife 1 en med argon skyllet kolbe opløses 500 mg 5-30 -bromdicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) og 121 mg propargylalkohol i methylenchlorid, og der tildryppes 840 μΐ triethylamin. Der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur, tilsættes 25 mg ((CgH,.) ^P) 2P<^cl-2 °9 ^ m<3 ^uJ og koges i 30 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling 35 fortyndes med methylenchlorid, vaskes med vand og natriumchlor idopløsning, og de kombinerede organiske faser tørres

O

DK 167873 B1 27 med kaliumcarbonat. Efter inddampning bliver der efter chromatografi på kiselgel 260 mg hvidt fast stof tilbage. Smeltepunkt: 104-106°C.

5

Eksempel 11

Fremstilling af 5-(5-cyano-l-penly nyl)-pyridin-2,4-di-carboxylsyredimethylester COJte I en med argon skyllet kolbe opløses 500 mg 5- -bromdicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) og 201 mg hexynsyrenitril i methylenchlorid, og der tildryppes 840 μΐ triethylamin. Der omrøres i 15 minutter ved stue-15 temperatur, tilsættes 25 mg ((CgH^)gP)2PdCl2 og 4 mg CuJ og koges i 40 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling fortyndes med methylenchlorid, der vaskes med vand og natriumchloridopløsning, og de kombinerede organiske faser tørres med kaliumcarbonat. Efter inddampning bliver 20 der 364 mg hvidt fast stof tilbages.

Smeltepunkt: 55-57°C.

Eksempel 12

Fremstilling af 5-(N-benzylamino-l-prop.ynyl)-pyridin-2,4-25 -dicarboxylsyredimethylester 30 I en med argon skyllet kolbe opløses 2 g 5--bromdicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) og 1,25 g N-benzylpropargylamin i methylenchlorid,og 3,4 ml triethylamin tildryppes. Der omrøres i 15 minutter ved stuetemperatur, tilsættes 25 mg ( (C^H-)QP)„PdCln og 4 mg CuJ 35 o z) j Å Å og omrøres i 36 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling fortyndes med methylenchlorid, vaskes med vand og DK 167873 Bl 28 o natriumchloridopløsning, og de kombinerede organiske faser tørres med kaliumcarbonat. Efter inddampning bliver der 1,25 g mørk olie tilbage, som hydrogeneres uden rensning (eksempel 18).

5

Eksempel 13

Fremstilling af 5-(4-hydroxy-butyl)-pyridin-2,4-dicarbox-ylsyredimethylester 10 200 mg 5-(4-hydroxy-l-butynyl)-pyridin-2,4-di-carboxylsyredimethylester (fra eksempel 7) opløses i 25 15 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palladium-katalysatoren (10% på kul). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum. Den farveløse olie chromatograferes på kiselgel.

20 Udbytte: 157 mg olie.

Eksempel 14

Fremstilling af 5-(3-hydroxy-pentyl)-pyridin-2,4-dicarb- oxylsyredimethylester 25

OH

Xa 317 mg 5-(3-hydroxy-l-pentynyl)-pyridin-2,4- 30 -dicarboxylsyredimethylester (eksempel 8) opløses i 25 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palla-diumkatalysatoren (10% på kul). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum. Den far-35 veløse olie chromatograferes på kiselgel.

Udbytte: 200 mg. Smeltepunkt: 77-78°C.

Eksempel 15

Fremstilling af 5-(4-methoxycarbonyl-butyl)-pyridin- -2,4-dicarboxylsyredimethylester 29 DK 167873 Bl

O

c O C3»Ma 305 mg 5-(4-methoxycarbonyl-l-buty nyl)-pyri-din-2,4-dicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 9) op- 10 løses i 30 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palladiumkatalysatoren (10% på kul). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum.

Den farveløse olie chromatograferes på kiselgel.

15 o

Udbytte: 260 mg. Smeltepunkt: 39 C.

Eksempel 16

Fremstilling af 5-(3-hydroxy-propyl)-pyridin-2,4-dicarb- oxylsyredimethylester 20 cn-fe 655 mg 5-(3-hydroxy-l-propy.nyl)-pyridin-2,4-di-25 carboxylsyredimethylester (eksempel 10) opløses i 50 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palladiumkatalysatoren (10% på carbon). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum. Den farveløse o-30 lie chromatograferes pa kiselgel.

Udbytte 540 mg. Smeltepunkt: 92-94uC.

35

O

30 DK 167873 Bl

Eksempel 17

Fremstilling af 5-(5-cyano-pentyl)-pyridin-2,4-dicarb-oxylsyredimethylester CO-I* 5 64 mg 5-(5-cyano-l-pentynyl)-pyridin-2,4-di-carboxylsyredimethylester (fra eksempel 11) opløses i 25 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palladium-10 katalysatoren (10% på carbon). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum.

Den farveløse olie chromatograferes på kiselgel.

Udbytte 47 mg olie.

15

Eksempel 18

Fremstilling af 5-( 3-N-benzyl-aminopropyl)-pyridin--2,4- dicarboxylsyredimethylester

C3J4S

20 1,25 g 5-(N-benzylamino-l-propYnyl)-pyridin--2,4-dicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 12) opløses ilO ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning 25 af palladiumkatalysatoren (10% på carbon). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer (tyndtlagskontrol). Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum. Den farveløse olie chromatograferes på kiselgel.

Udbytte: 1,01 g olie.

30 35

Eksempel 19

Fremstilling af 5-amino-pyridin-2,4-dicarboxylsyredi- ethylester

O

31 DK 167873 B1 COjEt 5 ^N^COjEt 850 mg 5-amino-pyridin-2,4-dicarboxylsyre (fra eksempel 5) opløses i 100 ml absolut ethanol, der tilsættes 5 ml koncentreret svovlsyre og opvarmes i 20 10 timer under tilbagesvaling. Opløsningen inddampes, der tilsættes eddikesyreethylester og mættet natrium-hydrogencarbonatopløsning og ekstraheres. Den vandige alkaliske fase ekstraheres yderligere 3 gange med eddikesyreethylester, de kombinerede organiske faser tørres 15 med magnesiumsulfat og inddampes. Der bliver 850 mg hvidt fast stof tilbage.

Smeltepunkt: 155-157°C.

Eksempel 20 20 Fremstilling af 5-(3-chlorpropyl)-pyridin-2,4-dicarbox-ylsyredimethylester 25 370 mg 5-(3-hydroxypropyl)-pyridin-2,4-dicarb-oxylsyredimethylester (fra eksempel 16) opløses i 10 ml chloroform, afkøles til 0°C, og der tilsættes langsomt 0,18 ml thionylchlorid i 2 ml chloroform. Der omrøres 30 én time ved stuetemperatur og derpå én time ved 60°C.

Efter afkøling inddampes der og tages op med chloroform og vand; faserne adskilles, den organiske fase vaskes med natriumsulfatopløsning, tørres med magnesiumsulfat og inddampes. Der bliver efter chromatografi på kisel-35 gel 286 mg gul olie tilbage.

DK TG78/3 bl

O

32

Eksempel 21

Fremstilling af 3-phenyl-propionsyre-N-([2,4-diethoxy-carbonyll-pyridyl)-amid (Οι η 5 0 N ^ CD2Et 100 mg 5-amino-pyridin-2,4-dicarboxylsyredie-thylester (fra eksempel 19) opløses i 10 ml tetrahydro-10 furan, og der tilsættes langsomt under nitrogenatmosfære 20,2 mg natriumhydrid (50%'s suspension i mineralolie Derefter opvarmes én time til 60°C, hvorefter der afkøles og tildryppes 70,9 mg 3-phenylpropionsyrechlorid i 10 ml tetrahydrofuran ved 0°C. Opløsningen koges i 6 ti-15 mer og omrøres derpå i 16 timer ved stuetemp. Der sættes derpå vand ved 0°C til blandingen, som fortyndes yderligere med ether, og den organiske fase skilles fra. Den vandige fase ekstraheres endnu én gang med ether, de kombinerede organiske faser tørres med magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet 20 afdampes. Efter chromatografi på kiselgel bliver der 106 mg farveløs olie tilbage.

Eksemepl 22

Fremstilling af 5-(3-phenylpropylamino)-pyridin-2,4-di-carboxylsyredimethylester 25 .. co-ite 500 mg 5-brom-pyridin-2,4-dicarboxylsyredimeth-ylester (fra eksempel 3) opløses i 10 ml toluen. Hertil 30 dryppes 0,26 ml phenylpropylamin, og der omrøres i 10 timer ved 120°C. Efter afkøling afdampes opløsningsmidlet, remanensen tages op i eddikesyreethylester, og den organiske fase vaskes 2 gange med citronsyre, natrium-hydrogencarbonatopløsning og vand. Efter tørring med 35 magnesiumsulfat afdampes opløsningsmidlet. Efter chromatografi på kiselgel fås 117 mg produkt med smeltepunkt 102-104°C.

Eksempel 23

Fremstilling af 5-(2-methoxycarbonyl-ethenyl)-pyridin- -2,4-dicarboxylsyredimethylester 33 DK 167873 Bl

O

o æ-ife 5 ^'Nii\co2!fe 500 mg 5-brom-pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 3) opvarmes med 10 ml methylacrylat, 10 0,5 ml triethylamin, 11 mg palladiumdiacetat og 22 mg triphenylphosphin i 14 timer ved 140°C i en autoklav.

Efter afkøling fortyndes der med eddikesyreethylester, der filtreres fra det faste stof, og opløsningsmidlet afdampes sammen med overskydende methylacrylat. Produk-15 tet chromatograferes (kiselgel) og giver 330 mg hvidt fast stof.

Smeltepunkt: 126-128°C.

Eksempel 24 20 Fremstilling af 5-(2-methoxycarbonyl-ethyl)-pyridin-2,4--dicarboxylsyredimethylester , cz~^ o " “ UK*.

25 260 mg 5-(2-methoxycarbonyl-ethenyl)-pyridin- -2,4-dicarboxylsyredimethylester (fra eksempel 23) opløses i 25 ml methanol og hydrogeneres efter tilsætning af palladiumkatalysator (10% på carbon). Omsætningen er afsluttet efter 4 timer. Katalysatoren filtreres fra, 30 og opløsningen inddampes i vakuum. Den gule olie chromatograferes (kiselgel), og produktet udkrystalliserer. Smeltepunkt: 64°C.

35 34

UK D I

På tilsvarende måde fremstilles:

Pyridin-5-amino-2,4-dicarboxylsyre-di-(2-hydroxyethyl)-amid, smp. 168°C.

Pyridin-5-amino-2,4-dicarboxylsyre-di-(4-aminobutyl)-amid, 5 smp. 192°C.

Pyridin-5-amino-2,4-dicarboxylsyre-di-(2-methylcarbonyloxy-ethyl)-amid, olie, smp. kan ikke bestemmes.

10 15 20 25 30 35

Claims

1. Substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyrederivater, kendetegnet ved, at de har formlen 5

0 R2 - tL· 10 o hvor R1 er halogen, alkyl, alkenyl eller alkynyl med op til 9 carbonatomer, idet de nævnte grupper even-15 tuelt er mono- eller disubstituerede med halogen, hydroxy, nitro, cyano, araino, Ci^-al-koxy, carboxyl, Cle4-alkoxycarbonyl, C1-4-alkylcar-bonyloxy, C1_4-alkyl- eller C1_4-dialkylamino eller benzylamino, 20 eller er en substituent med formlen -OR3 eller -N(R3)2, hvor R3 er hydrogen eller C^g-alkyl, C^_9-alkenyl, Ci-g-alkynyl eller Ci-g-alkylcarbonyl, idet disse grupper eventuelt er substitueret med phenyl, og 25 idet de to substituenter R3 i -N(R3)2 også kan være forskellige fra hinanden, og R2 er en substituent med formlen -OR4 eller -NHR4, hvor R4 er hydrogen eller C1_12-alkyl, som even-30 tuelt er substitueret 1 eller 2 gange med hydroxy eller C1_4-alkoxy eller C1_4-alkylcarbonyloxy, idet de to grupper R2 også kan være forskellige fra hinanden, eller er deres fysiologisk acceptable salte med uorganiske eller organiske syrer, undtagen 5-ethyl-pyridin-2,4-dicar-35 boxylsyren og de forbindelser, hvor R1 er en aminomethyl-gruppe, og endvidere undtagen 5-methyl-pyridin-2,4-dicar- DK 167873 Bl 36 boxylsyredimethylester og 5-methoxy-pyridin-2,4-dicarboxyl-syredimethylester.

2. Substituerede pyridin-2,4-dicarboxyl syre-derivater ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 5 R3· er halogen, Ci_4-alkyl, C2_4-alkenyl eller -alky- nyl, idet de 3 sidstnævnte grupper eventuelt er mono-substituerede med halogen, hydroxy, nitro, cyano, amino eller carboxyl, eller er 10 en substituent med formlen -OR3 eller -N(R3)2, hvor R3 er hydrogen, 0^-3-alkylcarbonyl eller Ci_3-alkyl, idet begge substituenteme R3 i -N(R3)2 kan være forskellige.

3. Substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyre-derivater 15 med formlen 9» o ir C la ·« 0 25 hvor substituenteme R1' og R2' har de samme betydninger som R1 og R2 i krav 1 samt endvidere de betydninger, der svarer til forbindelserne pyridin-2,4,5-tricarboxylsyre, 5-ethyl-pyridin-2,4-dicarboxylsyre og de forbindelser, hvor R1' er en aminomethylgruppe, samt pyridin-2,4,5-tricarboxylsyretri- 30 methylester, 5-methyl-pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethyl-ester, 5-methoxy-pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethylester, pyridin-2,4-dicarboxylsyredimethylester-5-carboxylsyreethyl-ester og pyridin-2,5-dicarboxylsyrediethylester-4-carboxyl-syremethylester, til anvendelse som lægemidler.

4. Substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyre-derivater ifølge krav 3, hvor R1' og R2' har de samme betydninger som 37 DK 167873 B1 R1 og R2 i krav 2, til anvendelse som lægemidler.

5. Substituerede pyridin-2,4-dicarboxylsyrederivater ifølge et af kravene 1-4 til inhibering af prolin- og lysin-hydroxylase. 5

6. Lægemiddel, kendetegnet ved, at det inde holder et substitueret pyridin-2,4-dicarboxylsyrederivat ifølge krav 1-4 sammen med acceptable farmaceutiske bærere. 10 15 20 25 30 35