DK164973B - Undersoegelsesmetode til bestemmelse af 1,25-dihydroxy vitamin d og saet til brug ved denne metode - Google Patents

Undersoegelsesmetode til bestemmelse af 1,25-dihydroxy vitamin d og saet til brug ved denne metode Download PDF

Info

Publication number
DK164973B
DK164973B DK037590A DK37590A DK164973B DK 164973 B DK164973 B DK 164973B DK 037590 A DK037590 A DK 037590A DK 37590 A DK37590 A DK 37590A DK 164973 B DK164973 B DK 164973B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
antibody
dihydroxy vitamin
receptor protein
vitamin
binding
Prior art date
Application number
DK037590A
Other languages
English (en)
Other versions
DK37590A (da
DK164973C (da
DK37590D0 (da
Inventor
Hector F Deluca
Margaret C Dame
Eric A Pierce
Original Assignee
Wisconsin Alumni Res Found
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wisconsin Alumni Res Found filed Critical Wisconsin Alumni Res Found
Publication of DK37590D0 publication Critical patent/DK37590D0/da
Publication of DK37590A publication Critical patent/DK37590A/da
Publication of DK164973B publication Critical patent/DK164973B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK164973C publication Critical patent/DK164973C/da

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/82—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving vitamins or their receptors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807—Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/808—Automated or kit
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

DK 164973B
i
Den foreliggende opfindelse angår en undersøgelsesmetode til konstantering af 1,25-dihydroxy vitamin D niveauet i pattedyrblod, serum eller plasma og et sæt til brug ved denne metode.
5
Vitamin D er et velkendt vitamin, der har mange vigtige funktioner i pattedyr. Det aktiveres ved 25-hydroxylering i leveren og herefter ved 1-hydroxylering i nyrerne. Dette stimulerer tarmcalciumtransport, mobiliseringen af Ί0 calcium fra knogler og en forøget reabsorption af calcium i nyrerne. Produktionen af den endelige form af vitamin D, 1,25-dihydroxy vitamin D, reguleres afhængig af behovet for calcium og phosphor. Lav serum calciumkoncentration stimulerer parathyroidea til at udskille det para-15 thyroide hormon, der for sit vedkommende styrer produktionen af "1,25-(OH)2D" i nyrerne. l,25-(OH)2D dirigerer herefter tarmen til at absorbere calcium og phosphor og knoglerne til at mobilisere calcium, og det stimulerer nyre-reabsorption af calcium. Disse virkninger øger blod-20 calcium til normale niveauer, der for sit vedkommende neddæmper den parathyoroide sekretion yderligere, hvorved der lukkes for yderligere produktion af 1,25-(0H)2D. Måling af niveauet af 1,25-dihydroxy vitamin D i blodet er derfor et vigtigt diagnostisk redskab ved visse sygdomme 25 (f.eks. nyresvigt, osteoporose). Herudover kan den yderligere give værdifulde rent videnskabelige informationer.
Måling af niveauerne i blod af precursoren, 25-hydroxy vitamin D, er hidtil blevet udført ved væskekromatografi 30 med høj ydeevne og ved kompetitive proteinbindingsundersøgelsesmetoder. J. Eisman et al., 80 Anal. Biochem. 298-305 (1977); J. Haddad et al., 33 J. Clin. Endocr. 992-995 (1971). Der henvises herved til alle disse artikler og andre artikler, som er angivet nedenfor. Et protein, der 35 er blevet anvendt tidligere ved kompetitive bindingsundersøgelsesmetoder, var vitamin D transportproteinet, betegnet "DBP". Dette protein har en stærk preference for
DK 164973 B
2 at binde 25-OH vitamin D i modsætning til vitamin D selv eller 1,25-(011)20- R. Bouillion et al., 13 J. Steriod Biochem. 1029-1034 (1980).
5 Der har også tidligere været gjort forsøg på at undersøge for 1,25-(OH)2 vitamin D. D. Shigeharu et al., 116 Anal. Biochem. 211-222 (1981); J. Eisman et al., 187 Arch. Biochem. Biophys. 235-243 (1976). Disse metoder hviler på kompetitive bindingsundersøgelsesteknikker eller udvik-10 lingen af et antistof, der binder til vitamin D metaboli-ter (f.eks. dihydroxycholecalciferol). Se generelt H.
Perry et al., 112 Biochem. Biophys. Res. Commun. 431-436 (1983); R. Bouillon et al., 41 Ann. Endocrin. 435-36 (1980); R. Bouillon, 26 Clin. Chem. 562-567 (1980); R.
15 Bouillon, 66 Eur. J.' Biochem., 285-291 (1976).
Ved disse undersøgelsemetoder behandles pattedyrblod eller serum med et organisk opløsningsmiddel, der ekstrahe-rer vitamin D og metaboliter heraf. Herefter forrenses 20 ekstrakten på en søjle. Det halv-rensede 1,25-(OH^D renses herefter yderligere ved væskekromatografi med høj ydeevne hvilket giver det rensede 1,25-(OH)2D. Under disse trin er der sædvanligvis tab af 1,25-(OH)2D. For at korrigere for disse tab tilsættes det oprindelige plasma 25 eller serumekstrakt en udmålt mængde radiomærket 1,25-(OH^D. Efter slutisolering og inden egentlig måling ved bindingsundersøgelsesmetoden tælles den tilbageblevne radioaktivitet i et isoleret . materiale for at muliggøre computerbehandling af en genfindelse. Denne genfindelse 30 anvendes herefter i den endelige beregning for at korrigere for tabene af 1,25-(OH)2D under rensningen.
Det isolerede 1,25-(OH)2D fra serum sættes herefter til en blanding af radiomærket 1,25-(OH)2D og enten 1,25-35 (OH)2D receptor, der er et protein, der specifikt binder 1,25-(OH)2D, eller et antistof frembragt overfor vitamin D metaboliter. Det umærkede 1,25-(OH)2D i serumet vil
DK 164973 B
3 konkurrere med det radiomærkede 1,25-(0H)2D. Den grad, hvormed bindingen af mærket l,25-(OH)2D reduceres af umærket l,25-(OH)2D anvendes til at konstruere en standardkurve til bestemmelse af den mængde af 1,25-(OH)2D, 5 der findes i prøven.
Niveauet af bundet, mærket 1,25-(0H)2D bestemmes ved at absorbere det frie eller ubundne mærkede l,25-(OH)2D på dextran-overtrukket trækul. Se f.eks. J. Haddad et al., 10 33 J. Clin. Endocr. 992-995 (1971). Som det ses, kræver disse tidligere anvendte undersøgelsesmetoder adskillige dage for at blive fuldført og har mange mulige fejlkilder. De er også unødigt kostbare. Der er derfor et behov for en enkelt, hurtig, forholdsvis billig og nøjagtig un-15 dersøgelsemetode for 1,25-(0H)2D.
Dette behov dækkes af opfindelsen, der tilvejebringer en kompetitiv bindingsundersøgelsesmetode for tilstedeværelsen af 1,25-dihydroxy vitamin D i en prøve, der indehol-20 der vitamin D transportprotein. Det skal bemærkes, at "1,25-dihydroxy vitamin D" anvendt i foreliggende beskrivelse med krav anvendes generisk. Udtrykket dækker således 1,25-dihydroxy vitamin Dx, hvor x = 2, 3, 4, 5 og/el-ler 6.
25
Ved denne undersøgelsesmetode sætter man til prøven receptorprotein, der er i stand til at binde til 1,25-dihydroxy vitamin D, mærket 1,25 -? di hydroxy vitamin D og antistof, der er i stand til at binde til receptorproteinet.
30 Herefter måler man den relative bindingsgrad af antistof til receptorprotein, der er bundet til mærket 1,25-dihy-droxy vitamin D. Fortrinsvis er det mærkede 1,25-dihydr-oxy vitamin D radiomærket, og inden målingstrinnet immu-nopræcipiteres receptor bundet til antistoffet. Svinere-35 ceptor foretrækkes, da man har fundet et antistof overfor dette, der ikke vil binde med nært beslægtede humane blodbestanddele. Denne undersøgelsesmetode fjerner be-
DK 164973 B
4 hovet for ekstraktion af vitamin D og metaboliter heraf fra blodplasmaet eller serumet inden undersøgelsen, og den fjerner også behovet for kromatografisk rensning af 1.25- (OH)2D inden undersøgelsen.
5
Et sæt til udførelse af sådanne undersøgelsesmetoder tilvejebringes også, der omfatter mærket 1,25-dihydroxy vitamin D, receptorprotein, der er i stand til at binde til 1,25-dihydroxy vitamin D, og et antistof, der er i 10 stand til at binde til receptoren.
Herudover tilvejebringer opfindelsen en immunoundersøgel-sesmetode af ovennævnte art, ved hvilken der kan undersøges for 1,25-dihydroxy vitamin D.
15
Opfindelsen tilvejebringer således en undersøgelsesmetode af ovennævnte art, der er enkel, forholdsvis billig og let at udføre. i 20 Desuden tilvejebringer opfindelsen undersøgelsessæt til brug ved undersøgelsesmetoder af ovennævnte art.
Opfindelsen beskrives nærmere i det efterfølgende.
25 For bedre at forstå opfindelsen henvises til medfølgende tegning, hvor fig. 1 viser opfindelsens ide i skematisk form.
30 Materialer
Svine receptor (1 i fig. 1) blev fremstillet som beskrevet i M. Dame et al., 25 Biochemistry 4523-4534 (1985) (ikke kendt teknik).
35 1.25- (0H)2D-[26,27-^H] vitamin D^ (160 Ci/mmol) 2 fra fig. 1) blev fremstillet som tidligere angivet af J.
DK 164973 B
5
Napoli et al., 19 Biochemistry 2515-2521 (1980). Dette kan nu også leveres af New England Nuclear/Dupont.
Ikke-radioaktivt l^S-iOH^Dg (3 i fig. 1) blev leveret 5 af Hoffman-La Roche Company (Nutley, NJ).
Antistoffet (4) XVI E6E6GIO overfor svinereceptoren (1) blev fremstillet som beskrevet i M. Dame et al., 25 Biochemistry 4523-4534 (1986) (ikke kendt teknik).
’10
Hybridomer, der er i stand til at frembringe dette antistof, blev deponeret i American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland, U.S.A., under ATCC nr. HB9496 11. august 1987, idet deponeringen blev 15 opgraderet til en Budapesttraktatdeponering ved en anmodning dateret 22. juli 1988 og vil være tilgængelig ved udstedelsen af dette patent og som det ellers er gjort tilgængeligt ved lov i de designerede lande. Tilgængelighed af deponeringen er ikke at betragte som en licens.
20
Antistof (4) kan biotinyleres (5) med n-hydroxysuccinimi-dobiotin (NHSB,bMAB) under anvendelse af metoderne, der er analoge med de, der er beskrevet i D. Hullet, doktordisputats, "Biotinylation Of Antibodies", U. Wisconsin-25 Madison, p. 180-204 (1984). Koncentrationen af anvendt antistof er den mængde, der er nødvendig for at udfælde receptoren fastlagt ved hjælp af mætningskurver.
Avidin-Sepharose blev fremstillet i laboratoriet som be-30 skrevet af J. Kohn et al., 107 Biochem. Biophys. Res.
Commun. 878-884 (1982). Det anvendte rumfang er 25% mere, end hvad der er nødvendigt for at udfælde alle immunkomplekser fastlagt ved mætningskurver.
35 Den foretrukne puffer er 50 mM Tris (hydroxymethyl) ami-nomethanhydrochlorid (Tris-HCl), 1,5 mM ethylendiaminte-traeddikesyre (EDTA), 5 mM dithiothreitol og 300 mM KC1,
DK 164973 B
6 pH 7,4 ved 25 °C.
PSB-Triton er 1,5 mM KH^PO^, 8,1 mM Na2HPO^, 1,37 mM NaCl, 2,7 mM KC1, 0,5% (v/v) Triton X-100 (pH 8,0), 0,02% 5 NaN3.
EKSEMPEL
Til en prøve af specifikt bindingsprotein for l,25-(OH)2D 10 (dvs. svinetarms-kerneesktraktreceptor) sættes 1,25- (OH^D mærket med særdeles høj specifik aktivitet på 160 Ci/mmol. Så lidt som 50 ul og så meget som 200 μΐ af human plasmaprøve eller serum (6) sættes til receptoren.
Til dette sættes antistoffet (4) rettet mod svinerecepto-15 ren (1). Antistoffet er forud blevet biotinyleret (5). Inkubering foretages i 1 time ved stuetemperatur.
De bedste resultater opnås, dersom radiomærket vitamin D
(2) sættes til 90% eller mere mætning af svinereceptor og 20 et 10-fold eller større overskud af antistof overfor svi-nereceptoren anvendes. Avidin-Sepharose, der kan være fremstillet kommercielt eller fremstillet som beskrevet ovenfor, tilsættes, hvirvelblandes et kort stykke tid og henstår for at inkubere 1 time i Eppendorf rør eller 25 brønde. Herefter centrifugeres for at få udfældningen til at bundfælde. Den supernatente del bortkastes, og immuno-præcipitatet vaskes tre gange yderligere med PBS-Triton.
Hele røret og bundfaldet sættes herefter til et scintil-30 lationsglas indeholdende scintillationsvæske, og mængden af radioaktivitet i prøven bestemmes. For at frembringe en standardkurve inkuberes det specifikke bindingsprotein med det radiomærkede 1,25-(0H)2D3 (2) og stigende mængder umærket 1,25-(OH)2D i 1 time ved stuetemperatur sammen 35 med det biotinylerede antistof. Avidin-Sepharose tilsættes som med den ukendte prøve, centrifugeres, og immuno-præcipitatet vaskes som tidligere. Herefter anbringes
DK 164973 B
7 disse prøver også i scintillationsrør med scintillations-væske og tælles. Mængden af ombytning af radiomærke fra bindingsproteinet med det umærkede 1,25-(0H)2D i blod beregnes .
5 I et specifikt forsøg inkuberes et Eppendorf rør (1,5 ml Brinkman Instruments) indeholdende 1,2 nM, 1,25- 3 (0H)2[26,27- H]Dg, svinetarme-kerneekstrakt, der udviser 50 fmol l,25-(OH)2Dg bindingsevne, 50-200 nl forsøgsse-10 rum, 5 ul monoklonalt antistof og en puffer bestående af Tris 50 mM, pH 7,5 EDTA 1,5 mM, dithiothreitol 5 mM, og kaliumchlorid 300 mM til et slutrumfang på 250 μΐ 1 time ved stuetemperatur. En standardkurve udføres herefter med en række Eppendorf rør som beskrevet ovenfor, men idet 15 man erstatter den humane serumprøve eller plasma med stigende mængder umærket 1,25-(OH)2Dg. Et muligt område er fra 10 uM til 0,001 uM. Tre 50 μΐ prøver fjernes fra hver af ovennænte eppendorf rør og inkuberes på is med 50 μΐ Avidin-Sepharose (opslæmning) og hvirvelblandes med 20 20 minutters mellemrum i 1 time i Immulon II flytbare brønde (Dynatech). Disse Immulon flytbare brønde centrifugeres ved 2000 omdrejninger pr. minut i 8 minutter.
Den supernatante del fjernes, og immunopræcipitatet vas-25 kes tre gange med PBS-Triton. Herefter itubrydes brøndene, og hver anbringes i et tælleglas med 4 ml 3a70b scin-tillationsvæske (Packard Instruments, Downers Grove, IL) og radioaktiviteten måles under anvendelse af en PRIAS Model 400 CL/D scintillationstæller (Packard Instruments) 30 med omtrentlig effektivitet på 40% for tritium. Standardkurver fremstilles ud fra den tilstedeværende radioaktivitet i standkurverørene, og denne standardkurve anvendes herefter til direkte aflæsning af tilstedeværende mængde l,25~(OH)2D i den oprindelige blodprøve.
Et vigtigt aspekt ved denne bestemmelse er tilstedeværelsen af vitamin D transportproteinet DBP (7) i serum eller 35
DK 164973B
8 plasmaprøven (6). Dette protein er nødvendigt for at binde 25-OH-D (8) og andre metaboliter af vitamin D i blodet, der ville inteferere med undersøgelsesmetoden. På grund af den høje og specifikke affinitet af svinerecep-5 torproteinet for 1,25-(0H)2D, fjernes denne metabolit fra transportproteinet med receptorproteinet, medens andre metaboliter i udstrakt grad forbliver bundet til trans-portproteinet. Dette fjerner overraskende nødvendigheden for ekstraktion og for kromatografisk rensning.
10 15 20 25 30 35

Claims (10)

1. En kompetitiv bindingsundersøgelsesmetode til bestem-5 melse af forekomsten af 1,25-dihydroxy vitamin D i en prøve indeholdende vitamin D transportprotein, kendetegnet ved, at prøven tilsættes receptorprotein, der er i stand til '10 at binde til 1,25-dihydroxy vitamin D, mærket 1,25-dihy-droxy vitamin D, og antistof, der er i stand til at binde til receptorproteinet; og at den relative grad af binding af antistoffet til recep-15 torproteinet, der er bundet til mærket 1,25-dihydroxy vitamin D, måles.
2. Undersøgelsesmetode ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det mærkede 1,25-dihydroxy vitamin D er 20 radiomærket 1,25-dihydroxy vitamin D.
3. Undersøgelsesmetode ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at receptorproteinet bundet til antistoffet inden målingen immunopræcipiteres. 25
4. Undersøgelsesmetode ifølge et vilkårligt af kravene 1 til 3, kendetegnet ved, at prøven er menneskeblod, menneskeplasma eller menneskeblodserum, og at receptorproteinet er svinereceptor. 30
5. Undersøgelsesmetode ifølge krav 4, kendetegnet ved, at antistoffet er et antistof overfor svine-receptorproteinet.
6. Undersøgelsesmetode ifølge et vilkårligt af kravene 1 til 5, kendetegnet ved, at antistoffet er frembragt af hybridomet af ATCC HP9496. DK 164973 B
7. Kompetitivt undersøgelsessæt, kendetegnet ved, at det omfatter mærket 1,25-dihydroxy vitamin D, receptorprotein, der er i stand til at binde til 1,25-dihydroxy vitamin D, og antistof, der er i stand til at binde 5 til receptorproteinet, idet antistoffet er knyttet til en fastbindende forbindelse.
8. Sæt ifølge krav 7, kendetegnet ved, at det mærkede 1,25-dihydroxy vitamin D er radiomærket, og at 10 receptorproteinet er svinereceptorprotein.
9. Sæt ifølge et vilkårligt af kravene 7 og 8, kendetegnet ved, at sættet yderligere omfatter umærket 1,25-dihydroxy vitamin D, og at antistoffet er bioti- 15 nyleret.
10. Sæt ifølge et vilkårligt af kravene 7 til 9, kendetegnet ved, at antistoffet er frembragt af hy-bridomet af ATCC HP9496. 20 25 30 35
DK037590A 1987-08-14 1990-02-13 Undersoegelsesmetode til bestemmelse af 1,25-dihydroxy vitamin d og saet til brug ved denne metode DK164973C (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/086,413 US4816417A (en) 1987-08-14 1987-08-14 Assay for 1,25-dihydroxy vitamin D in sample containing vitamin D transport protein
US8641387 1987-08-14
US8802693 1988-08-08
PCT/US1988/002693 WO1989001631A1 (en) 1987-08-14 1988-08-08 Assay for 1,25-dihydroxy vitamin d

Publications (4)

Publication Number Publication Date
DK37590D0 DK37590D0 (da) 1990-02-13
DK37590A DK37590A (da) 1990-04-06
DK164973B true DK164973B (da) 1992-09-21
DK164973C DK164973C (da) 1993-02-08

Family

ID=22198408

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK037590A DK164973C (da) 1987-08-14 1990-02-13 Undersoegelsesmetode til bestemmelse af 1,25-dihydroxy vitamin d og saet til brug ved denne metode

Country Status (11)

Country Link
US (1) US4816417A (da)
EP (1) EP0374172B1 (da)
JP (1) JPH02503355A (da)
KR (1) KR940009957B1 (da)
AU (1) AU618025B2 (da)
CA (1) CA1306189C (da)
DE (1) DE3875619T2 (da)
DK (1) DK164973C (da)
IE (1) IE61127B1 (da)
IL (1) IL87378A (da)
WO (1) WO1989001631A1 (da)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5202266A (en) * 1987-10-14 1993-04-13 Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha 25-hydroxy vitamin D3 derivatives, process for their production, and assay method using the same
US5064770A (en) * 1989-08-01 1991-11-12 Wisconsin Alumni Research Foundation Assay for 1,25-dihydroxy vitamin d receptor protein
JPH06109727A (ja) * 1992-08-14 1994-04-22 Wisconsin Alumni Res Found １，２５−ジヒドロキシビタミンｄの検定法
JP2000503641A (ja) * 1995-12-29 2000-03-28 エイ・アンド・ディ・アッセイ・インコーポレイテッド 標識ビタミンｄ化合物およびその使用
US8133694B2 (en) * 1998-06-25 2012-03-13 Immundiagnostik Ag Functional vitamin D derivatives and method of determining 25-hydroxy- and 1α, 25-dihydroxy vitamin D
US7087395B1 (en) 2001-01-16 2006-08-08 Quest Diagnostics Investments Incorporated Vitamin D assay
US7700365B2 (en) 2004-10-29 2010-04-20 Mayo Foundation For Medical Education And Research Vitamin D deficiencies
US20110212534A1 (en) * 2008-08-11 2011-09-01 Taylor Robert L Methods for determining levels of 1,25 dihydroxy vitamin d2 and d3
WO2012094550A2 (en) * 2011-01-07 2012-07-12 The General Hospital Corporation Assays and methods of treatment relating to vitamin d insufficiency
US9052308B2 (en) 2011-01-07 2015-06-09 The General Hospital Corporation Assays and methods of treatment relating to vitamin D insufficiency
WO2014179737A2 (en) 2013-05-03 2014-11-06 The General Hospital Corporation Assays and methods of treatment relating to vitamin d insufficiency
US9140711B2 (en) 2011-04-04 2015-09-22 Immundiagnostik Ag Determination of vitamin D metabolites in dried blood
US9244083B2 (en) 2012-11-30 2016-01-26 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Compositions and methods for detecting vitamin D
US10983136B2 (en) 2013-01-28 2021-04-20 Diasorin S.P.A. Use of 1,25-dihydroxyvitamin D values in ratio with PTH as a prognostic biomarker
EP2759550B1 (en) * 2013-01-28 2018-08-15 DiaSorin S.p.A. Method and kit for detecting 1,25-dihydroxyvitamin D and related antibodies
US11261257B2 (en) 2013-01-28 2022-03-01 Diasorin S.P.A. Methods for detecting 1,25-dihydroxyvitamin D and related antibodies
US9618523B2 (en) 2013-02-28 2017-04-11 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Methods and reagents for determining isomeric analytes
CN110749664A (zh) * 2019-08-29 2020-02-04 重庆同怡生物技术研究院有限公司 一种25-羟基维生素d结合蛋白的解离方法
CN116500281B (zh) * 2023-06-26 2023-11-07 天津赛飞乐生物技术有限公司 1,25-二羟基维生素d的检测材料及制备方法、1,25-二羟基维生素d的检测方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL7713952A (nl) * 1977-12-16 1979-06-19 Philips Nv Radio-immunologische methode voor het bepalen van de schildklierfunktie door een in vitro onderzoek in bloedserum.
GB8317124D0 (en) * 1983-06-23 1983-07-27 Ekins R P Free ligand assay
US4585741A (en) * 1983-08-25 1986-04-29 Clevinger Brian L Method of assay for vitamin D metabolites

Also Published As

Publication number Publication date
DE3875619T2 (de) 1993-03-11
IE61127B1 (en) 1994-10-05
EP0374172A1 (en) 1990-06-27
KR940009957B1 (ko) 1994-10-19
DE3875619D1 (de) 1992-12-03
CA1306189C (en) 1992-08-11
IL87378A (en) 1992-07-15
WO1989001631A1 (en) 1989-02-23
DK37590A (da) 1990-04-06
JPH0551863B2 (da) 1993-08-03
JPH02503355A (ja) 1990-10-11
AU618025B2 (en) 1991-12-12
DK164973C (da) 1993-02-08
DK37590D0 (da) 1990-02-13
IE882485L (en) 1989-02-14
US4816417A (en) 1989-03-28
AU2325688A (en) 1989-03-09
EP0374172B1 (en) 1992-10-28
IL87378A0 (en) 1989-01-31
KR890702039A (ko) 1989-12-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK164973B (da) Undersoegelsesmetode til bestemmelse af 1,25-dihydroxy vitamin d og saet til brug ved denne metode
US6689566B1 (en) Methods, kits, and antibodies for detecting parathyroid hormone
Endres et al. Immunochemiluminometric and immunoradiometric determinations of intact and total immunoreactive parathyrin: performance in the differential diagnosis of hypercalcemia and hypoparathyroidism
Pratt et al. Estimation of plasma testosterone without extraction and chromatography
Fraser et al. Measurement of plasma 1, 25 dihydroxyvitamin D using a novel immunoextraction technique and immunoassay with iodine labelled vitamin D tracer
US5698407A (en) Method for the immunological determination of the carboxyterminal propeptide of type I procollagen
JPS58758A (ja) がん胎児性抗原の定量方法
CA1279006C (en) Assay for human breast cancer
AU647746B2 (en) Assay for 1,25-dihydroxy vitamin D receptor protein
EP0583945A2 (en) Assay for 1,25 Dihydroxy Vitamin D
EP0304292B1 (en) Antibody to propeptide of procollagen type III, and assay method using it
US4190593A (en) Cortisol radioimmunoassay method and cortisol derivatives useful therefor
CA1211391A (en) Method of assay for vitamin d metabolites
Power et al. Radioimmunoassay of osteocalcin with polyclonal and monoclonal antibodies.
CN104066749B (zh) 用于特异性识别人肝羧酸酯酶1的单克隆抗体、生成单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其用途
US4916055A (en) Detection of human cancer with a monoclonal antibody specific for antigen gp650
JPS6070360A (ja) 抗特異タイプの標識付モノクロ−ナル抗体を用いる受容体測定法
Rainier et al. Rapid characterization of cellular retinoid-binding proteins by high-performance size-exclusion chromatography
Christakos et al. [60] Radioimmunoassay for chick intestinal calcium-binding protein
Haddad Jr [53] Purification, characterization, and quantitation of the human serum binding protein for vitamin D and its metabolites
Dray Sensitivity and specificity of eicosanoid radioimmunoassays: new strategy
KoBAYAsHI et al. Bovine Serum Albumin through the C-3 or C-24 Position
Pflanz et al. Induction and rapid screening of monoclonal antibodies against cyclosporin A
WO1983001118A1 (en) Monoclonal antibody detection system
MXPA06009204A (en) Method for detecting the formation of endothelins for medical diagnosis, and antibodies and kits for carrying out one such method

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed