DK161498B - Automatisk anlaeg til vaeskekromatografi - Google Patents

Description

DK 161498 B

Den foreliggende opfindelse angår et automatisk anlæg til væskekromatografi omfattende en kromatografikolonne, en recipient til det produkt, som skal fraktioneres, og mindst én recipient til et elueringsmiddel, og hvor recipienterne kan sæt-5 tes i forbindelse med kolonnetoppen via en indsprøjtningspumpe, automatisk styrede fødeventiler, som er monteret mellem indsprøjtningspumpen og hver af recipienterne både til et produkt, som skal fraktioneres, og til elueringsmidlerne, og en detektionsanordning, som er tilsluttet udløbet fra kolonnen og 10 afgiver mindst ét målesignal, der er repræsentativt for en egenskab ved den væske, som forlader kolonnen, en anordning til opsamling af fraktionerne med mindst én opsamlingsrecipient, som kan sættes i forbindelse med bunden af kolonnen og en styreenhed, der modtager målesignalet og omfatter organer 15 til styring af fraktionsopsamlingsanordningen.

Kromatografien er en fremgangsmåde til separation af bestanddele i en blanding og en fremgangsmåde, som kan anvendes analytisk eller industrielt.

20 Anvendelsesområdet for opfindelsen er især, men ikke udelukkende den industrielle kromatografi.

I dette tilfælde drejer det sig om en fremstillingsteknik ved ekstraktion af et eller flere kendte produkter ud fra en blanding, som indeholder dem. Som et eksempel kan den in-dustrielle kromatografi anvendes til at udskille proteiner, f.eks. til ekstraktion af albumin (æggehvidestof) fra blodplasma Det er almindeligt i dette tilfælde at anvende kolonner med et rumfang på adskillige gange 10 liter, endog flere hundrede 30 liter. Disse anlæg har ikke fælles mål med de apparater, der anvendes til analytisk kromatografi. Medens den analytiske kromatografi har til formål at adskille ofte meget talrige bestanddele i en blanding med henblik på at identificere dem og at måle deres forhold i blandingen, har den industrielle 2^ kromatografi til formål at udtrække et begrænset antal produkter fra en blanding, hvis indhold man kender.

Ved industriel kromatografi kræver forberedelsen af kolonnerne en stor omhu og ekstrem lang tid. De produkter, det drejer

DK 161498 B

2 sig om, kan endvidere være meget kostbare - dette gælder blodplasma fra mennesker. Af disse årsager kræver anlæggene en konstant overvågning som hidtil er blevet foretaget af kvalificeret personale for at undgå ethvert uheld, som kunne med-5 føre en beskadigelse af kolonnen eller et tab af produkter.

Det er derfor ønskeligt at automatisere sådanne anlæg for at sænke produktionsomkostninaerne.

Der er allerede foreslået flere automatisk systemer inden for kromatografiområdet.

10

Det er således kendt at anvende automatiske læseanordninger til et kromatogram for især at bestemme kvantiteten af den tilsvarende fraktion ved hver spids.

15 Det er ligeledes kendt automatisk at opsamle de forskellige fraktioner ved at sammenligne et målesignal frembragt af en detektionsanordning med en given tærskel for at sætte kolonnen i forbindelse med en opsamlingsrecipient, når målesignalet overskrider denne tærskel, og at føre en ny opsamlingsreci-20 pient i en forudbestemt position for at opsamle den følgende fraktion. Opsamlingsrecipienterne er anbragt på en transportør, f.eks. en roterende plade, som bevæges skridtvis. !

Andre automatiske systemer er beskrevet i US patentskrifterne nr. 3.701.609 og 3.826.905 og i en artikel af Codina, Interna-2 5 tional Laboratory, volum 9, nr. 11/12, siderne 63-66, 1979,

Fairfield, Connecticut (US).

Disse automatiske systemer vedrører kun en del af det samlede procesforløb. Man har således søgt at realisere en mere avance-30 ret automatisering, og det er blevet foreslået at anvende et forud programmeret ur eller tidskredsløb, som afgiver forskellige styresignaler med forudbestemte tidsintervaller for at udføre en kromatograficyklus. De tidspunkter, hvorpå forskellige operationer - såsom indsprøjtning af det produkt, som 35 skal fraktioneres, tilførsel af elueringsmidlet, opsamling af en fraktion - skal udføres, bestemmes på forhånd ud fra en model. Man forstår således, at tilfredsstillende resultater kun opnås, hvis arbejdsbetingelserne ikke adskiller sig fra

DK 161498 B

3 modellens. Men det er i praksis næsten aldrig tilfældet, eftersom parametre såsom kolonnens ladningstab ikke kan styres og er udsat for variationer.

5 Den foreliggende opfindelse har til formål at tilvejebringe et anlæg til væskekromatografi, som er fuldstændig automatisk og kan foretage gentagne kromatograficykler, uden at resultaterne er påvirket af variationer af arbejdsparametre såsom væskemængden i kolonnen, samtidig med at kun en let overvågning 10 af en operatør er nødvendig, og uden at der er risiko for beskadigelse af kolonnen eller tab af produktet.

Dette opnås ifølge opfindelsen med et anlæg af den i indledningen nævnte art, hvilket anlæg er ejendommeligt ved, at 15 en niveaudetektor er monteret i recipient for det produkt, som skal fraktioneres, og i hver af recipienterne for elueringsmidlerne til afgivelse af et signal, der angiver et lavt væskeniveau, når væskeniveauet i recipienterne kommer under en forudbestemt tærskelværdi, at mindst en automatisk styret af-20 gangsventil er monteret mellem kolonnen og opsamlingsrecipienten eller -terne, at en doseringsanordning er monteret i tilslutning til recipienten for det produkt, som skal fraktioneres, for at tillade indsprøjtning i kolonnen med en bestemt dosis af dette produkt hver gang, og at styreenheden omfatter: 25 en styreanordning, som modtager målesignalet eller hvert målesignal som tilføres af detektionsanordni ngen, og som styrer fødeventilerne og afgangsventilerne såvel som doseringsanordningerne for at realisere gentagne kromatograficykler, der hver især omfatter på hinanden følgende operationer omfattende 30 indsprøjtning i kolonnen af en bestemt dosis af det produkt, som skal fraktioneres, tilførsel af elueringsmid1 et og opsamling af en fraktion, og at styreenheden andvidere omfatter en sikkerhedsanordning forbundet til niveaudetektorerne for at beordre standsning af pumpen og forhindre tilførsel af det 35 produkt, som skal fraktioneres, eller elueringsmidlerne til kolonnen, når den tilsvarende niveaudetektor frembringer et signal for lavt niveau.

DK 161498 B

4

De forskellige operationer, der udføres i løbet af en cyklus, styres således ikke med på forhånd faste tidsintervaller, men udføres på tidspunkter, der bestemmes som funktion af informationer tilført af detektionsanordningen (eller styreanordningen). Anvendelsen af en doseringsanordning gør det i 5 øvrigt muligt automatisk at foretage gentagne cykler, uden at operatøren skal foretage sig andet, end hvad der er nødvendigt for periodisk at genopfylde recipienterne for det produkt, som skal fraktioneres, og for elueringsmidlerne og tømme opsamlingsrecipienten eller recipienterne. Sikkerhedsanord--*·0 ningen forhindrer endvidere en utilsigtet tilførsel af luft, hvilket ville sætte kolonnen ud af drift.

Detektionsanordningen omfatter fortrinsvis flere detektorer, som kan afgive forskellige målesignaler, der er repræsentative for forskellige egenskaber ved den væske, som kommer ud fra kolonnen.

Styreanordningen omfatter på i og for sig kendt måde en kompara-tor til at udløse opsamlingen af en fraktion, når et målesignal, der er tilført af detektionsanordningen, overskrider en første indstillelig,forudbestemt tærskelværdi i den ene retning. Styreanordningen kan med fordel omfatte en anden komparator til at afbryde opsamlingen af fraktionen, når målesignalet ændrer sig i den modsatte retning og derved overskrider en anden 25 forudbestemt tærskelværdi, som kan indstilles uafhængigt af den første. I forhold til de kendte forud-indstillingssayste-mer, hvori én og samme tærskelværdi anvendes til at udløse og afbryde opsamliTigen af en fraktion, tillader dette system med todimensionale uafhængige tærskelværdier frit at regulere den 30 fraktion af en "spids" af målesignalet, hvori opsamlingen finder sted. Det drejer sig her om en interessant egenskab, eftersom man ved, at i visse tilfælde er det ønskeligt at begrænse opsamlingen af fraktionen til en del af en "spids", f.eks. for at undgå at opsamle generende produkter ud over det 35 ønskede.

Styreanordningen kan endvidere med fordel omfatte organer, som styrer tilførslen af et elueringsmiddel til kolonnen og organer til detektion af en ligevægtstilstand for kolonnen

DK 161498 B

5 med dette elueringsmiddel, hvilke organer reagerer på mindst ét målesignal for at beordre indsprøjtning af en dosis af det produkt, som skal fraktioneres. Disse organer til detektion 5 af en ligevægtstilstand omfatter en anordning til sammenligning, som modtager målesignalet og afgiver et udgangssignal, når amplituden af målesignalet ligger inden for et forudbestemt og indstilleligt område. Det anvendte målesignal kan f.eks. repræsentere pH-værdien og/eller koncentrationen af den væske, 20 som løber ud fra kolonnen.

Den separate genvinding af flere forskellige fraktioner over samme kolonne udføres efter indsprøjtning af det produkt, som skal fraktioneres, ved at lade flere på hinanden følgende elueringsmidler cirkulere i en sådan rækkefølge, at deres X ^ elueringsevne vokser. Ifølge en anden egenskab ved anlægget ifølge opfindelsen kan det omfatte flere recipienter for elueringsmidler, og styreanordningen modtager et eller flere målesignaler fra detektionsanordningen for at styre gentagne cykler, 2o der hver især omfatter indsprøjtning af en bestemt dosis af det produkt, som skal fraktioneres, tilførsel af et første elueringsmiddel til kolonnen, opsamling af en første fraktion, tilførsel af et andet elueringsmiddel til kolonnen, opsamling af en anden fraktion, i givet fald mindst én supplerende un-dercyklus omfattende tilførsel af et andet elueringsmiddel til kolonnen, og opsamling af den tilsvarende fraktion, og endelig tilførsel af et første elueringsmiddel til kolonnen for at skabe en fornyet ligevægt i denne forud for påbegyndelsen af den følgende cyklus.

30

Tilførslen af et elueringsmiddel styres f.eks. i afhængighed af afslutningen af indsprøjtningen af det produkt, som skal fraktioneres, eller ved afslutningen af opsamlingen af en fraktion.

3 5

Opsamlingen af de forskellige fraktioner udføres i forskellige opsamlingsrecipienter. Man kan anbringe de forskellige opsamlingsrecipienter på en transportøranordning, som successivt fører dem til en forudbestemt position, idet en enkelt afgangsventil er indrettet til at sætte kolonnen i forbindelse med

DK 16149 8 B

6 de forskellige opsamlingsrecipienter. Når det drejer sig om industrielle kromatografianlæg, er de rumfang, som behandles, imidlertid relativt betydelige, og det er derfor fordelagtigt at anvende flere opsamlingsrecipieriter på faste steder, i 5

et antal, der mindst er lig med det antal fraktioner, som skal opsamles. Hver opsamlingsrecipient kan sættes i forbindelse med kolonnen, enten med en fælles afgangsventil via en mellemlig gende fordelingsanordning eller ved hjælp af en afgangsventil, J

som specielt styres af styreanordningen. En niveaudetektor j kan med fordel være knyttet til hver opsamlingsrecipient for at afgive et signal for højt niveau, når vaskeniveauet i recipienten kommer op over en forudbestemt tærskel, og vare forbundet til en sikkerhedsanordning for at forhindre opsamling af væske, når signalet for højt niveau er til stede.

15 J J .

Processen standses således, når en recipient for et produkt, som skal fraktioneres, eller et elueringsmiddel er ved at.· løbe tør, eller når en opsamlingsrecipient er ved at løbe over. .Niveausignalerne kan også anvendes til at påvirke en alarm, som viser operatøren, at påfyldning eller tømning af en recipient er påkrævet.

Opfindelsen skal i det følgende forklares nærmere under henvis-· ning til tegningerne, hvor 25 fig, 1 viser et generelt diagram af et kromatografianlæg ifølge opfindelsen, fig. 2 et diagram af en udførelsesform for en koncentrations-30 detektor til anlægget i fig. 1, fig. 3 et generelt diagram af en udførelsesform for styreenheden til anlægget i fig. 1, 35 fig. 4-7 detaljerede diagrammer af forskellige kredsløb i styreenheden i fig. 3, fig. 8 et diagram over signaler, som modtages og afsendes af styreenheden i tilfælde af en kromatografi i seks trin og

DK 161498 B

7 fig 9 et diagram af signaler modtaget og afsendt af styreenheden i tilfælde af en afsaltningsoperation.

Anlægget i fig. 1 omfatter en recipient eller beholder 10 til 5 et Produkt, som skal fraktioneres, og til denne beholder er knyttet en doseringsbeholder 10'. Endvidere omfatter anlægget flere recipienter 11-16 til elueringsmidler. En elektrisk styretventil, f.eks. en magnetvent i IV'10 er monteret på en rørledning CIO, som forbinder recipienten 10 til doseringsbeholderen jq 10'. Den sidstnævnte og beholderne til elueringsmidler kan sættes i forbindelse med en kromatografikolonne·18 via en rørledning Cll og en indsprøjtningspumpe 17. Mellem rørledningen Cll og doseringsbeholderen 10' og hver af recipienterne 11-16 er installeret magnetventiler V10-V16. En detektionsanord-Ig ning bestående af flere detektorer 19a,19b,19c er anbragt på udgangen fra kolonnen. Neden for disse detektorer er kolonnen 18 forbundet til en rørledning C20. Opsamlingsrecipienter 20-26 kan sættes i forbindelse med rørledningen C20 via magnetventiler V20-V26. Recipienten 20 er beregnet til at opsamle 2o den del, som kasseres, medens recipienterne 21-26 er beregnet til at opsamle elueringsmidlerne, som indeholder de produkter, der skal regenereres. Hver af recipienterne 10-16 er forsynet med en niveauføler henholdsvis S10-S16, som er indrettet til at afgive et signal SB0-SB6, når væskeniveauet i recipienten 25 kommer ned under en nedre tærskel, som er forudbestemt i henhold til placeringen af føleren i recipienten. Tilsvarende følere S20-S26 er placeret i recipienterne 20-26, men er indrettet til at afgive et signal SH0-SH6, når væskeniveauet i recipienten kommer op over en øvre forudbestemt tærskel.

30 To andre følere SB10' og SH101 er placeret i doseringsbeholderen 10' i forskellig højde, og niveauforskellen mellem den nedre sonde SB10' og den øvre sonde SH10' bestemmer rumfanget af en dosis af fraktioneringsproduktet.

35 En styreenhed 30 består af en sikkerhedsanordning 31, som modtager signalerne SB0-SB6 fra følerne S10-S16 og signalerne SH0-SH6 fra følerne S20-S26, og som afgiver et signal SP til pumpen 17 til blokering af dennes funktion for at forhindre tapning i en af recipienterne 10-16, når den nedre tærskel

DK 161498B

8

i den pågældende recipient er overskredet, og for at forhindre en opfyldning i en af recipienterne 20-26,. når den øvre tærskel i den pågældende recipient er overskredet. Signalerne SB0-SB6 og SH0-SH6 modtages af en ELLER-port 01, som afgiver signalet 5 SP på sin udgang. En trykføler kan være anbragt mellem pumpen 17 og toppen af kolonnen 18 for til en indgang på ELLER-porten 01 at afgive et signal indrettet til at beordre standsning af pumpen i tilfælde af et unormalt overtryk. Enheden 30 omfatter endvidere en styreanordning 32, som modtager signalerne 10 SDl og SD2 frembragt af følerne SB10* og SH10' såvel som måle- J

signaler SUV og SCO og SPH tilført af detektorerne 19a,19b ! i og 19c, og som repræsenterer forskellige egenskaber for væsken, som kommer ud af kolonnen. Afhængig af de modtagne signaler styrer anordningen 32 magnetventilerne V'10,V10-V16 og V20-V26 15 via signaler SV'1Q,SV10-SV16 og SV20-SV25.

Endelig overføres signalerne SUV,SCO og SpH ligeledes til en skriver 39 med flere spor.

2Q Ved klassisk industriel væskekromatografi går man normalt frem på følgende måde. Før starten på en cyklus, dvs. før indsprøjtningen af en dosis af fraktioneringsproduktet, afbalanceres kolonnen med det første elueringsmiddel. Dette sker ved, at man lader det første elueringsmiddel cirkulere i kolon-nen, indtil væsken på udgangen af kolonnen har i hovedsagen de samme egenskaber som det første elueringsmiddel, f.eks. den samme pH-værdi og/eller samme ionkraft. Når afbalanceringen af kolonnen er udført, afbryder man tilgangen for det første elueringsmiddel og indsprøjter en dosis af fraktioneringsproduk-30 tet. Derefter lader man forskellige elueringsmidler cirkulere successivt og opsamler hver gang den tilsvarende fraktion. Elueringsmidlerne er opløsninger, hvis kemiske sammensætning kan være identisk eller forske 1*1 ig og med eventuelt forskellige koncentrationsgrader og pH-værdier. Tilgangen af elueringsmidler

O C

sker som oftest efter stigende koncentrationsgrad, idet elusions-evnen i sådanne tilfalde vokser med koncentrationsgraden, hvorimod en sådan regel ikke gælder for pH-værdien. For hvert elueringsmiddel overvåger man et målesignal tilført af en detektor og repræsentativt for en egenskab ved den væske,

DK 161498B

g der kommer ud fra kolonnen, og man opsamler den tilsvarende fraktion under hele eller under en del af en målesignalspids.

Når den sidste fraktion er blevet opsamlet, tilføres det første elueringsmiddel på ny til kolonnen for igen at afbalancere 5 denne med henblik på en ny cyklus.

Anlægget vist i fig. 1 tillader den automatiske udførelse af de ovenfor anførte operationer. I det viste eksempel er der indrettet seks recipienter 11-16 til elueringsnidler og 10 seks tilsvarende fraktionsopsamlingsrecipienter 21-26. Det er klart, at antallet af elueringsmiddelrecipienter og fraktionsopsamlingsrecipienter kan vælges lavere eller højere end seks alt efter behov. Endvidere er det, som man vil se, senere muligt at planlægge en simpel forudindstilling af styre-15 enheden, således at anlægget kan fungere med et antal forskellige vilkårligt ønskede elueringsmidler.

Detektorerne 19a,19b,19c afgiver til styreanordningen de informationer, som er nødvendige til detektion af afbalanceringen 20 af kolonnen og detektion af signalspidser. Fortrinsvis anvendes flere detektorer af forskellig art. En eller flere af disse detektorer kan være tilknyttet detekteringen af kolonnens afbalancering, medens detektionen af signalspidserne foretages på signalet af mindst én anden detektor. Til detektionen af signalspidserne kan enhver detektor af kendt type anvendes med en funktion, der fortrinsvis er afpasset efter arten af de fraktioner, som skal opsamles, f.eks. en detektor for ultra--violet lys 19a. Til detektion af kolonnens afbalancering er det muligt at anvende en pH-sonde eller en iondetektor.

30 I det viste eksempel anvender man samtidig en iondetektor 19b (eller koncentrationsdetektor) og en pH-detektor 19c. pH-detektoren er en pS-føler 19c af i og for sig kendt type.

Til koncentrationsdetektionen kan man, som det er velkendt, anvende en ledningsevnemåler, som neddyppes i væsken og afgiver 35 et signal, som viser den elektriske ledningsevne for væsken.

For at undgå det elektrolysefænomen, som kan være knyttet til passagen af en strøm i vasken, kan koncentrationsdetektoren 19.b dog også være af den type, der er vist i fig. 2.

DK 161498 B

10

Denne detektor består af et rør 40 i et isolerende materiale, f.eks. glas, indskudt mellem forbindelsesstykker eller fittings 41,42 på et rørsystem 43, der er forbundet parallelt med udgangsrøret fra kolonnen. Midterpassagen 44 i røret 40 gennemløbes 5 af den væske, hvis ionkoncentration skal måles. Denne passage 44 har en relativ lille diameter (f.eks. 1-2 mm). En spole 45 omgiver røret 40, og en koncentrationsændring i væsken i røret vil bevirke en tilsvarende ændring af spolens selvinduktion. Spolen er forbundet til et kredsløb 46, som frembringer signalet 20 SCO svarende til selvinduktionen af spolen 45. Kredsløbet 46 består af en oscillator 47 stabiliseret af et krystal 48 og afgiver et højfrekvenssignal, som påtrykkes symmetrisk på to ledninger 49a og 49b via en resistiv spændingsdeler 50. Ledningsgrenen 49a indeholder i serie to kondensatorer 25 5la,52a og en diode 53a mellem spændingsdeleren 50 og en indgang til en differentialforstærker 54. Et resonanskredsløb 55a dannet af én variabel kondensator 56a er parallel med en spole 57a er forbundet mellem fællespunktet mellem kondensatorerne 51a og 52a og stel. Den anden ledningsgren 49b er forbundet 20 mellem spændingsdeleren 50 og den anden indgang på forstærkeren 54 og er opbygget på samme måde som grenen 49a, idet spolen i resonanskredsløbet udgøres af spolen 45. Uligevægten mellem grenene 49a og 49b repræsenterer ionkoncentrationen i den væske, som gennemløber røret 40, og omformes til et signal 25 SCO på udgangen af forstærkeren 54. Resonanskredsløbene er afstemt til en frekvens, som afviger lidt fra frekvensen af signalet fra oscillatoren 47, idet indstillingen er således, at det koncentrationsområde, der skal måles i, svarer til en i det væsentlige lineær del af den nedadgående eller stigende 30 resonanskurve.

Styreanordningen 32 skal i det følgende beskrives nærmere under henvisning til fig. 3-9.

35 Denne styreanordning omfatter i det væsentlige et kredsløb 34 til detektion af afbalanceringen af kolonnen 18, et kredsløb 35 til styring af indsprøjtningen af .en dosis af fraktionerings-produktet, et kredsløb 36 til styring af opsamlingen af en fraktion og et kommuteringskredsløb 37.

DK 161498 B

11

Kredsløbet 34 (fig. 4) består af et kredsløb 34a, som modtager målesignalet SpH og et referencesignal spl-l, som tilføres af et indstillingspotentiometer PpH, og et kredsløb 34b, som modtager målesignalet SCO og et referencesignal sCO tilført 5 af indstillingspotentiometeret PCO.

I kredsløbet 34a påtrykkes signalet spH via en modstand 70, dels på indgangen af en Darlington-kobling 71 med to transistorer Tl,T2 og dels på et knudepunkt Pi via en modstand72. På udgan-1ΰ gen af Darlington-koblingen ligger emitterkollektorstrækningen i transistoren T2 i serie med en modstand 73 mellem et punkt med spændingen +V og stel, medens T2's emitter er forbundet til et knudepunkt P2 via en modstand 74. En indstillelig modistand 75 er forbundet mellem Pi og P2. På grund af dette kredsløb 15 er der mellem knudepunkterne Pi og P2 en spændingsforskel ΔρΗ med en konstant amplitude uanset spændingen på punkterne PI eller P2. Potentiometeret PpH gør det muligt at regulere denne spænding og i et givet reguleringsområde at forskyde et spændings"vindue" af given størrelse ApH, idet denne størrelse 2 0 kan justeres ved hjælp af den variable modstand 75. Punkterne Pi og P2 er forbundet via modstande 76,77 til to punkter P3,P4, hvorimellem der er tilsluttet en variabel modstand 78. Modstandene 76,77 og 78 danner en spændingsdeler, som gør det muligt mellem P3 og P4 at definere et andet spcandings"vindue" pH', 2 5, som ligger i det første. Størrelsen af dette andet vindue er mindre end størrelsen af det første og kan reguleres med modstanden 78. Ved endvidere at vælge samme værdi for modstandene 76 og 77 vil det andet vindue ligge midt i det første. Punkterne PI og P3 er forbundet til hver sin ikke inverterende indgang O η på to forstærkere henholdsvis 81 og 83, medens punkterne P2 og P4 er forbundet til hver sin inverterende indgang på to forstærkere henholdsvis 82 og 84. Signalet SpH påtrykkes via en modstand 79 til de inverterende indgange på forstærkerne

Bl og 83 og til de ikke inverterende indgange på forstærkerne 3 5 %2 og 84. Udgangene fra forstærkerne 81 og 82 er forbundet hil indgangene på en OG-port 85 og en lysemitterende diode TiEDl er tilsluttet i serie med en modstand 87 mellem stel øg udgangen på porten 85. Endelig er udgangene for forstærkerne

DK 161498B

12 83 og 84 forbundet til indgangene på en OG-port 88, hvis udgang er forbundet til stel via en modstand 89 og en anden lysemitte-rende diode- LED2..

5 Det ovenfor beskrevne kredsløb 34a fungerer på følgende måde.

Når signalet SpH har en amplitude, som befinder sig i det første vindue ^.pH, dvs. når denne amplitude ligger mellem værdierne pHl og pH2 for spændingerne på punkterne Pi og P2, vil udgangene fra forstærkerne 81 og 82, som fungerer som jQ komparatorer, begge ligge på et højt logisk niveau. Kun i dette tilfælde vil et signal A med et højt logisk niveau fremkomme på udgangen af porten 85, og dioden LEDI vil lyse. Når signalet SpH har en amplitude, som ikke alene befinder sig i det første vindue, men ligeledes i det andet ApH', vil et 15 signal A1 med et højt logisk niveau fremkomme på udgangen af porten 88, og dioden LED2 vil lyse. Forudindstillingen af kredsløbet 34 foretages ved at lade det elueringsmiddel, hvormed kolonnen sidst blev bragt i ligevægt, cirkulere direkte i pH detektoren 19c og samtidig justere potentiometeret PpH, 20 indtil dioden LED 2 lyser. pH referenceværdien svarer da i hovedsagen til midten af vinduet pH. Derefter anvender man kun signalet A, som angiver, at pH-værdien befinder sig mellem grænserne pHl og pH2, dvs. i vinduet dpH til detektion af kolonnens ligevægtstilstand.

25

Opbygningen og funktionen af kredsløbet 34b er identisk med opbygning og funktion af kredsløbet 34a. En lysemitterende diode LED'2 anvendes til forudindstillingen af dette kredsløb ved hjælp af potentiometeret PCO, når elueringsmidlet cirkulerer 30 direkte i koncentrationsdetektoren 19b. Medens kolonnen bringes i ligevægt, frembringes et signal B, og en diode LED'l lyser, når koncentrationen befinder sig mellem grænserne C01 og C02 i det forud indstillede vindue ACO.

35 En OG-port 90 modtager signalerne A og B og afgiver et signal .

C, når den målte pH-værdi og den målte koncentration befinder sig inden for de forudbestemte grænser. For at undgå en utidig detektion, f.eks. på grund af passage af en luftboble tages signalet C ikke direkte i betragtning, men udløser et monostabilt

DK 161498 B

13 kredsløb 91, som igen udløser et andet monostabilt kredsløb 92. Kredsløbet 91 frembringer en impuls med en relativ lang varighed, f.eks. 1 minut. En sådan varighed er lang sammenlignet med forbigående fænomener, som repræsenterer passagen af en luftboble, men kort sammenlignet med varigheden af en fase 5 for en kromatograficyklus. Kredsløbet 92 frembringer en impuls af en meget kortere varighed. Udgangene fra porten 90 og det monostabile kredsløb 92 er forbundet til indgangene på en OG-port 93. Udgangssignalet fra porten 93 påtrykkes på en indgang på en OG-port 94 og på en indgang X på en flip-flop 10 95. Efter signalet D på udgangen af porten 93 vil en udgang på flip-floppen 95 skifte til det lave logiske niveau, hvilket blokerer porten 94. Dvs. at når signalet C er til stede, udløses det monostabile kredsløb 91, og hvis signalet C stadig er til stede ved afslutningen af den impuls, der er afgivet af 15 dette monostabrle kredsløb, udsendes signalet D, og en impuls DE for detektion af en ligevægt frembringes på udgangen af porten 94. Signalet D udløser endvidere flip-floppen 95, hvilket forhindrer, at der tages hensyn til ethvert andet senere signal D, indtil flip-floppen 95 tilbagestilles af et signal RS påtrykt 20 pa en indgang Y på flip-floppen 95.

Impulsen DE modtages af kredsløbet 35 til styring af indsprøjtningen af prøven (fig. 5). Hver føler SB10',SH10' består af et par kontakter placeret i indbyrdes afstand. Den ene af 25 kontakterne ligger på stel, medens den anden er forbundet til en spænding +V via en modstand med en høj impedans og til en inverterende port henholdsvis 101 og 102. Signalerne SDl,SD2 fra følerne SB10',SH10' inverteres af invertionsportene 101,102, hvis udgang ligger på et højt logisk niveau, når 3 0 følerne er fugtede, dvs. dækket af væsken. Signalerne på udgangen af portene 101,102 påtrykkes dels to inverterende porte henholdsvis 103 og 104 og dels de to indgange på en OG-port 105. Udgangene fra invertionsportene 103,104 forbindes til to indgange på en OG-port 106. Udgangen fra OG-porten 105 ligger på et 3 5 højt logisk niveau, når de to følere SB10' og SH10' er våde. Omvendt ligger udgangen fra porten 106 på et højt logisk niveau, når de to følere SB10' og SH101 er tørre. Signalerne på udgangen af portene 105 og 106 inverteres af invertionsporte 107,108 14

DK 161.498 B

med det formål at styre henholdsvis udløsningen og tilbagestillingen af en flip-flop 109. Signalet på udgangen af flip-floppen 109 udgør styresignalet SV10'. Det samme signal inverteres af en port 110 og påtrykkes klokindgangen på..en. binær tæller 5 1.01. En udgang fra denne tæller er forbundet til indgangen på en OG-port 112, hvis anden indgang er forbundet til udgangen af porten 110. Udgangssignalet fra porten 112 danner styresignal SV10. I øvrigt er udgangen fra porten 112 ligeledes forbundet til en invertionsport 114, hvorfra udgangssignalet påtrykkes 10 en OG-port 115. Denne port 115 modtager på en anden indgang et signal TO frembragt af kommutationskredsløbet 37. Endelig påtrykkes signalet DE nulstillingsindgangen på tælleren 111.

Kredsløbet 35 fungerer som beskrevet i det følgende. -Når de 15 to følere SB10' og SV10' er tørre, ligger udgangen på flip-flop-pen 109 på et højt niveau, og dette bevirker fremkomsten af signalet SV10', som åbner magnetventilen V10'. Det produkt, som skal fraktioneres, strømmer på grund af tyngdekraften ned i doseringsbeholderen 10'."Når de to følere SB10' og SH10' 20 er våde, skifter flip-floppen 109 tilstand. Signalet SV101 ophører, og udgangen af porten 110 skifter til det høje niveau. Tælleren 111 forøges med én. Et signal på det lave logiske niveau er til stede på udgangen af tælleren, der er forbundet til porten 112. Når signalet DE fremkommer, nulstilles tælleren 25 111, og signalet på dens udgang skifter til et højt logisk niveau. Udgangen af porten 112 skifter da til det høje logiske niveau, hvilket bevirker fremkomsten af signalet SV10. Produkter strømmer fra doseringsbeholderen 10'. Så snart de to sonder SB10' og SH10' på ny er tørre, skifter flip-floppen 109 tilstand, 3Ό og signalet SV10 ophører. Ventilen V10 lukker sig, men til gengæld åbner ventilen V'10 sig, og dette bevirker en fornyet opfyldning af doseringsbeholderen 10*. En ny indsprøjtning af en dosis af produktet, som skal fraktioneres, finder dog ikke sted før efter et nyt signal DE for detektion af en lige-35 vagtstilstand. Porten 114 inverterer signalet V10 og tillader derved passagen for signalet TQ gennem porten 115 for at danne signalet SVll til styring af åbningen af ventilen Vil. Det første elueringsmiddel i recipienten 11 kan således eventuelt

DK 161498 B

15 strømme ned i kolonnen før indsprøjtningen af en dosis af produktet, der skal fraktioneres (for at bringe kolonnen i ligevægt med det første elueringsmiddel), og efter indsprøjtningen (opsamlingsfasen af den første fraktion).

5

Kredsløbet 36 til styring af opsamlingen af fraktionen (fig.

6) modtager målesignalet SUV afsendt af detektoren 19a til detektion af ultraviolet lys. Dette signal forstærkes af en forstærker 120 og sammenlignes med to tærskelværdier og ved hjælp af to komparatorer 121,122. De to tærskelværdier s. ocf s'. er de tærskelværdier, som siqnalet SUV skal overskride i " i - i den ene retning (for s^) for at beordre starten på opsamlingen af en fraktion og derefter i den modsatte retning (for s'^) for at beordre ophøret af opsamlingen af denne fraktion. Vær-15 dierne s^ og s1. kan indstilles uafhængigt af hinanden for de forskellige opsamlingsfraktioner. Signalerne for de forud indstillede værdier for s. og s', svarende til den fraktion, hvis opsamling skal reguleres, tilføres af kommutationskredsløbet 37. En invertionsport 123 er tilsluttet på udgangen af kompara-20 toren 121 for at udløse et monostabilt kredsløb 124, når tærskelen s^ overskrides i opadgående retning, medens udgangen af komparatoren 122 er forbundet direkte til et monostabilt kredsløb 125 for at udløse dette, når tærskelen s', overskrides i i nedadgående retning. Impulserne, som frembringes af de mono-25 stabile kredsløb 124,125 påtrykkes gennem OG-porte 127,128 på indgangene for at udløse og tilbagestille en flip-flop 126, som på sin udgang frembringer et signal R til styring af opsamlingen i det tidsinterval, som adskiller overskridelsen af tærsklerne s^ i den opadgående retning og s'^ i den nedad-30 gående retning. En flip-flop 129 modtager på sine indgange de impulser, som frembringes af de monostabile kredsløb henholdsvis 124,125 henholdsvis direkte og efter passage gennem porten 128, og afgiver på udgangen et styresignal for portene 127,128. Flip-floppen 129 udløses af impulsen fra det monostabile kreds-35 løb 124 for at åbne portene 127 og 128 og tilbagestilles af impulsen fra det monostabile kredsløb 125 for at lukke portene 127,128. Signalet R såvel som signalet H på udgangen af porten 128 afsendes til kommutationskredsløbet 37 beskrevet nedenfor.

DK 161498B

16

Kredsløbet 37 (fig. 3 og 7) er forbundet til potentiometrene PS1-PS6 og PS'l-PS'6, som afgiver signalerne S1-S6 og S'l-S'6,· som repræsenterer tærskelværdierne ved start af. opsamling og ved afslutning af opsamling for de forskellige fraktioner 5 (i tilfælde af en kromatograficyklus med seks elueringsmidler). s^ afgives til et udgangspunkt 130 forbundet til potentiometrene PS1-PS6 via styrede afbrydere henholdsvis IS1-IS6 af den analoge type, medens signalet sV afgives til et udgangspunkt 131 forbundet til potentiometrene PS'IPS'6 via styrede 10 afbrydere henholdsvis IS'1-IS'6.·En tæller 132 modtager signalet H på sin klokindgang og har flere udgange, som aktiveres successivt ved hver forøgelse af tælleren, og som afgiver signalerne TO og SV12-SV16. Signalerne TO og SV12-SV16 styrer hver for sig henholdsvis lukningen af afbryderparrene ISl-IS'l 15 til IS6-IS'6 såvel som lukningen af de styrede afbrydere IRl til IRS af den analoge type. Afbryderne IRl til IRS modtager signalet R og afgiver tilsvarende signalerne SV21 til SV26i Disse forskellige signaler påtrykkes i øvrigt via respektive modstande til basis på en transistor 133 med jordet emitter, 20 og hvis kollektor dels er forbundet via en modstand 134 til et punkt med spændingen +V og dels afgiver signalet SV20.

Kommutationskredsløbet fungerer på følgende måde. Ved afslutningen af opsamling af fraktionen svarende til elueringsmidlet 2 5 med rangen n (n ligger mellem 1 og 5) frembringes en impuls H, som forøger tælleren 132 med én. En ny udgang fra tælleren aktiveres,·og derved beordres lukningen af afbryderne med rangen n + 1 med henblik på opsamling af den følgende fraktion.

I tidsintervallet mellem to impulser R er transistoren 133 3 0 blokeret, eftersom intet signal med en logisk høj værdi er til stede på dens basis. Kollektoren af denne, transistor ligger derfor på et højt niveau, og signalet SV20 er.til stede. Ventilen V20. er derfor åben, og recipienten 20 opsamler den væske, som indeholder de ikke interessante bestanddele af det produkt, 3 5 som bliver fraktioneret. Man skal bemærke, at efter afslutningen af opsamling af en fraktion forhindrer flip-floppen 129 i kredsløbet 36 udsendelsen af et ps.rasitsignal H, af den art, som ville kunne forekomme, hvis den nye gyldige tærskelværdi

DK 161498 B

17 s'^ ved afslutningen af opsamlingen er lavere end den foregående. Portene 127 og 128 åbnes ikke igen før overskridelsen af den nye tærskelværdi s^. Når den fraktion, der svarer til 5 det sidste elueringsniddel, er blevet opsamlet, føres tælleren 132 tilbage til begyndelsestilstanden, og signalet TO udsendes og giver dermed adgang for det første elueringsniddel for på ny at bringe kolonnen i en ligevægtstilstand.

-*·0 Tællerens 132 tilbagevenden til begyndelsestilstanden styres normalt af bagkanten af en impuls RAZ frembragt af en nonostabil multivibrator 135. De manuelt styrede afbrydere II til IS og til gensidig udelukkelse modtager signalerne henholdsvis SV21 til SV26 på hver sin første kontakt og har hver sin anden kontakt forbundet i fællesskab til indgangen til udløsning af det monostabile kredsløb 135. Hvis afbryderen 16 lukkes, er afbryderne II til 15 åbne, og bagkanten af signalet SV26 (afslutningen af opsamlingen af den sjette fraktion)' udløser det monostabile kredsløb 135, som igen fører tælleren 132 20 tilbage til begyndelsestilstanden. I det tilfælde, hvor antallet af anvendte elueringsmidler og af fraktioner, som skal opsamles, afviger fra seks, er det tilstrækkeligt for operatøren at lukke den af afbryderne II til IS, der svarer til dette tal.

På denne måde opnår man, at efter opsamlingen af den sidste 25 fraktion, dvs. ved afslutningen af en kromatrograficyklus, igangsættes automatisk en afbalancering af kolonnen, dvs. kolonnen vil blive bragt i ligevægt på ny. Nulstillingen af tælleren 132 kan også beordres ved lukning af en afbryder 10 for at påtrykke et signal ARZO på indgangen til nulstilling 30 af tælleren 132, idet afbryderen 10 og det monostabile kredsløb 135 er forbundet til denne indgang gennem en ELL.ER-port 13S.

Det manuelle nulstillingssignal ARZO kan også sendes gennem kredsløbet 35 (fig. 5) til nulstilling af tælleren 111. Signalet på udgangen af porten 135 udgør ligeledes signalet RS, som 35 påtrykkes flip-floppen 95 på kredsløbet 34 (fig. 4).

·- t

DK 161498B

18

Afviklingen af en kronatograficyklus med seks trin'er illustreret i fig. 8.

5 Starten på perioden er valgt vilkårlig til øjeblikket tQ, j hvor signalet for detektion af en ligevægtstilstand frembrin- | i ges, dvs. når den målte pH-værdi befinder sig i området mellem pHl og pH2, og når den målte koncentration befinder sig i området C01 til C02 (se de kurver, som viser SpH og SCO).

10 !

Til tiden tg åbner magnetventilen V10 for at indsprøjte en ·

dosis af det produkt, som skal fraktioneres, medens magnetventi- I

lerne V'IO, Vil til V16 og V21 til V26 er i den lukkede stilling og magnetventilen V20 er i den åbne stilling. Kort tid efter t„ vil føleren SHlQ' blive tør, og signalet SD2 skifter til 15 υ det høje niveau.

Til tiden t'g bliver føleren SB10' tør, og signalet SD1 skifter til det høje niveau, hvilket bevirker lukningen af magnetventilen V10 (og derved afslutningen af indsprøjtningen af produktet, 20 som skal fraktioneres) og åbningen af magnetventilen V'IO (genopfyldning af doseringsbeholderen) og Vil (adgang for det første elueringsmiddel). Når de to følere SB10' og SH10' er blevet våde, på tidspunktet t ,; lukkes magnetventilen V'IO.

25 Afbryderne ISl, IS'l og IRl er lukket, og opsamlingen af den første fraktion begynder til tiden t^, når tærskelen s^ overskrides i opadgående retning (se kurven for SUV). Magnetventilen V21 åbnes, medens magnetventilen V20 lukkes. Til tiden t'^ overskrides tærskelen s'^ i nedadgående retning, og dette 30 bevirker lukningen af magnetventilerne Vil og~V21, åbning af magnetventilerne V12 og V20 og lukningen af afbryderne IS2,IS'2 og IR2 til opsamling af den anden fraktion.

Perioden fortsætter således, magnetventilerne V22 - · V26 åbner 35 til tiderne t~ til t^ for overskridelsen af tærsklerne s0 til Sg og lukker til tidspunkterne t1^ til t'g ved overskridelsen af tærsklerne s'2 til s'g. Magnetventilerne V12 til V16 åbner

DK 161498 B

19 til tiderne t'-j til t'5 og lukker til tiderne t'2 til t'g. Magnetventilen V20 åbnes, når alle de andre magnetventiler på udgangen er lukket.

Efter afslutningen af opsamlingen af den sjette fraktion - 5 (til tiden t'g) åbnes magnetventilen Vil på ny for at til- \ vejebringe en ny ligevægtstilstand. En ny cyklus begynder til tiden t^, hvor kolonnen på ny er i ligevægt med det første elueringsmiddel.

10

Fig. 9 viser et andet udførelseseksempel ifølge opfindelsen i tilfælde af en kromatografi i to trin og ved anvendelse af kun to detektorer 19b og 19c. Der anvendes kun én recipient for elueringsnidlet 11 og to opsamlingsrecipienter 20 og 21.

15 I dette tilfælde anvendes signalerne SPH og SCO som i det foregående til at detektere ligevægtstilstanden for kolonnen, medens signalet SCO også anvendes til at styre afslutningen af opsamlingen af den fraktion, som skal regenereres. Begyndelsen på regenerationen er sammenfaldende med afslutningen 2 0" af tilgangen for det produkt, der skal fraktioneres. Dette er kun sandt i forbindelse med anvendelsen af visse harpikser i kolonnen, især af den art, som er beskrevet i FR-PS 2.378.008, hvor den kromatografi, son realiseres, er en afsaltning, og hvor den tilsvarende fraktion med en topkoncentration rent 25 faktisk er den fraktion, som skal kasseres. Nar det produkt, som skal fraktioneres, er indsprøjtet (til tiden t'g), beordres som ovenfor en ny genopfyldning af doseringsbeholderen (tidspunkterne t'n til t ) og endvidere åbningen af magnetventi- len V21 og lukningen af magnetventilen V20.

30 Når koncentrationen passerer en given tærskel til tidspunktet t-| (f.eks tærskelen SC02), lukkes magnetventilen V21, medens magnetventilen V20 åbnes. Den fraktion, som skal regenereres, er den, som er opsamlet i recipienten 21, medens den fraktion, 35 som er opsamlet i recipienten 20, er den, son skal kasseres.

Ventilen Vil er altid åben, når en ny cyklus begynder, eftersom kolonnen på ny er bragt i ligevægt med elueringsnidlet.

Claims (12)

1. 5 Man ved, at i mange tilfælde opnås separationen af en given bestanddel ved successive kromatografioperationer. I sådanne tilfælde forbinder man en styreanordning og en speciel sikkerhedsanordning til hver kolonne. Eftersom den regenererede fraktion i én opsamlingsrecipient i en første kolonne anvendes jq som det produkt, der skal fraktioneres i en følgende kolonne, anvender man denne opsamlingsrecipient ved at tilslutte den til en doseringsanordning som recipient for produktet, der skal fraktioneres, for den anden kolonne. Patentkrav. 15 .....................
2. 1. Automatisk anlæg til væskekromatografi omfattende en kro-matografikolonne (18), en recipient (10) til det produkt, som skal fraktioneres, og mindst én recipient (11-16) til et elue-20 ringsmiddel, og hvor recipienterne kan sættes i forbindelse med kolonnetoppen via en indsprøjtningspumpe (17), automatisk styrede fødeventiler (V10-V16), som er monteret mellem indsprøjtningspumpen (17) og hver af recipienterne (10-16) både til et produkt, som skal fraktioneres, og til elueringsmidler-25 ne, en detektionsanordning (19a, 19b, 19c), som er tilsluttet udløbet fra kolonnen (18) og afgiver mindst ét målesignal (SUV, SCO, SpH), der er repræsentativt for en egenskab ved den væske, som forlader kolonnen, en anordning til opsamling af fraktionerne med mindst én opsaml ingsr.eeipient (20-26), som 30 kan sættes i forbindelse med bunden af kolonnen, , og en styreenhed (30), der modtager målesignalet og omfatter organer (32) til styring af fraktionsopsamliogsanordningen, kendetegnet ved, at en niveaudetektor (S10-S16) er monteret i recipienten (10) for det produkt, som skal fraktioneres, 35 og i hver af recipienterne (11-16) for elueringsmidlerne til afgivelse af et signal, der angiver et lavt væskeniveau (SB0-SB6), når væskeniveauet i recipienterne kommer under en forudbestemt tærskelværdi, DK 161498 B at mindst en automatisk styret afgangsventil (V20-V26) er monteret mellem kolonnen (18) og opsamlingsrecipienten eller -enterne (20-26), & at en doser ingsanordning (10') er monteret i tilslutning til recipienten (10) for det produkt, som skal fraktioneres, for \ at tillade indsprøjtning i kolonnen (18) med en bestemt dosis af dette produkt hver gang, og at styreenheden (30) omfatter: en styreanordning (32), som 10 modtaget målesignalet eller hvert målesignal (SUV, SpH, SCO), som tilføres af detektionsanordningen (19a, 19b, 19c), og som styrer fødeventi lerne (V10-V16) og afgangsventilerne (V20-V26) såvel som doseringsanordningen (10') for at realisere gentagne kromatograficykler, der hver især omfatter på hinanden følgen-I5 de operationer omfattende indsprøjtning i kolonnen af en bestemt dosis af det produkt, som skal fraktioneres, tilførsel af elueringsmidlet og opsamling af en fraktion, og at styreenheden (30) endvidere omfatter en sikkerhedsanord-20 ning (31) forbundet til niveaudetektorerne (S10-S16) for at beordre standsning af pumpen og forhindre tilførsel af det produkt, som skal fraktioneres, eller elueringsmidlerne til kolonnen (18), når den tilsvarende niveaudetektor frembringer et signal for lavt niveau. 25
3. 2. Anlæg ifølge krav 1, kendetegnet ved, at detek- tionsanordningen omfatter flere detektorer (19a, 19b, 19c), til at afgive forskellige målesignaler (SUV, SpH, SCO), som repræsenterer forskellige egenskaber ved den væske, som kommer ud forneden af kolonnen (18). 30
4. 3. Anlæg ifølge krav 1 eller 2, og hvori styreanordningen (32) omfatter en komparator til af udløse opsamlingen af en fraktion, når et målesignal, som afgives af detekti onsanordningen, overskrider en første indstillelig forudbestemt tær- 35 skelværdi i én retning, kendetegnet ved, at styreanordningen endvidere omfatter en anden komparator til at afbryde opsamlingen af fraktionen, når målesignalet ændrer sig i DK 16149 8 B den modsatte retning, og derved overskrider en anden, forudbestemt tærskelværdi, som kan indstilles uafhængigt af den første. •4. Anlæg ifølge krav 1, 2 eller 3, kendetegnet 5 ved, at styreanordningen (32) omfatter organer, som styrer tilførslen af et elueringsmiddel i kolonnen, og organer (34) til detektion af en ligevægtstilstand for kolonnen med dette elueringsmiddel, hvilke sidste organer (34) reagerer på mindst ét målesignal (SpH, SCO) for at styre indsprøjtningen af en dosis af det produkt, som skal fraktioneres.
5. 5. Anlæg ifølge lerav 4, kendetegnet ved, at organerne til detektion af ligevægtstilstanden omfatter en sammenlignings- anordning, som modtager målesignalet og afgiver et udgangssig-15 nal, når amplituden af målesignalet ligger inden for et indstilleligt bestemt område.
6. 6. Anlæg ifølge krav 4 eller 5, kendetegnet ved, at organerne til detektion af ligevægtstilstanden omfatter 20 et kredsløb til eliminering af utidige detektioner.
7. 7. Anlæg ifølge et eller flere af kravene 1-6, kendetegnet ved, at det omfatter flere recipienter til elue-ringsmidler (11-16), og at styreanordningen (32) modtager 25 målesignalet eller målesignalerne fra detektionsanordningen for at styre gentagne cykler, som hver især omfatter: indsprøjtning af en bestemt dosis af prøven, tilførsel af et første elueringsmiddel til kolonnen, opsamling af en første fraktion, tilførsel af et andet elueringsmiddel til kolonnen, opsamling 30 af en anden fraktion, éventuelt mindst.én supplerende undercyklus omfattende tilførsel af et andet elueringsmiddel i kolonnen og opsamling af den tilsvarende fraktion og endelig tilførsel af det første elueringsmiddel i kolonnen for på ny at skabe ligevægt med det første elueringsmiddel forud for påbegyndelsen 35 af den følgende cyklus.
8. 8. Anlæg ifølge krav 7, kendetegnet ved, at styreanordningen omfatter styreorganer til styring af tilførslen DK 161498 B af elueringsmidler, hvilke styreorganer træder i funktion ved afslutningen af indsprøjtning af en dosis af produktet, som skal fraktioneres, eller ved afslutningen af opsamlingen af en fraktion. 5
9. 9. Anlæg ifølge et eller flere af kravene 1-8, kendetegnet ved, at det omfatter flere opsamlingsrecipienter (20-26), som har hver sin specielle afgangsvent.il (V20-V26) styret af styreanordningen for at sætte recipienten i forbin- „ „ delse med kolonnen, og endvidere har hver sin niveaudetektor 10 (S20-S2S), som er indrettet til at afgive et signal for et højt niveau (SH0-SH6), når væskeniveauet i recipienten kommer op over en forudbestemt tærskel, og hvilke niveaudetektorer er forbundet til sikkerhedsanordningen (31). 15
10. 10. Anlæg ifølge et eller flere af kravene 1-9, kendetegnet ved, at detektionsanordningen omfatter en koncentrationsdetektor indbefattende et rør (40), hvori den væske, som kommer ud fra kolonnen, kan cirkulere, en spole (45) placeret 2o omkring røret og et kredsløb til måling af variationerne i spolens (45) selvinduktion.
11. 11. Anlæg .ifølge et eller flere af kravene 1-10, kendetegnet ved, at det omfatter flere kromatografikolonner, 25 som hver især er tilknyttet en speciel styreenhed, og ved at en opsamlingsrecipient hørende til en kolonne er monteret i tilknytning til en doseringsanordning for at udgøre recipienten for det produkt, som skal fraktioneres i tilknytning til en anden kolonne. 30
12. 12. Anlæg ifølge et eller flere af kravene 1-11, kendetegnet ved, at doseringsanordningen omfatter en recipient (10'), som er forsynet med to følere (SB101,SH10') placeret i forskellige niveauer, og hvilken recipient kan være forbun-3c det til for det første recipienten (10) for det produkt, som skal fraktioneres, via en første ventil (V'10), og for det andet til kolonnen (18) via en anden ventil (V10), og ved at styreanordningen omfatter et kredsløb (35), som modtager DK 161498 B signalerne (SDl,SD2) fra de to niveaufølere'knyttet til doserings-anordningen (10' ), og et styresignal (DE), og som styrer ventilerne (νΐθ,ν'10) for i doseringsbeholderen (10') at indføre - eller at udtage fra denne - en væskemængde svarende til niveauforskellen mellem følerne SB10',SH101). 5 10 .1 15 20 25 30 - . \ 35