DK158790B - Fremgangsmaade til fremstilling af 24-oxo-steroidforbindelser - Google Patents

Description

DK 158790 B

o

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af 24-oxo-steroidforbindelser, som er anvendelige som mellemprodukter, der' kan omdannes til vitamin D^-analoge.

5 Steroidforbindelser med en oxogruppe i sidekæden, såsom 24-oxocholesterol, har tidligere været kendt som mellemprodukter til fremstilling af aktivt vitamin D^, såsom la,25-dihydroxycholecalciferol og la,24-dihydroxy-cholecalciferol.

10 Som beskrevet i f.eks. J. Am. Chem. Soc. 66, 723 (1944) og i offentliggjort japansk patentansøgning nr. 42864/77 er det kendt, at disse steroidforbindelser med en oxogruppe i sidekæden kan fremstilles ved at omsætte et syrechlorid med en steroidkerne og isopropyl-15 cadmium.

I J. Am. Chem. Soc., 66, 723, (1944) er beskrevet et eksempel, hvor 24-oxocholesterol fås i et udbytte på 46% ved omsætning af 33~acetoxychol-5-enyl-chlorid med diisopropylcadmium i et etheropløsningsmid-20 del. Da det imidlertid er kendt, at den som opløsningsmiddel anvendte diethylether reagerer med syrechloridet til dannelse af ethylesteren af carboxylsyren som biprodukt, hvorved udbyttet af det ønskede produkt formindskes, er der i offentliggjort japansk patentansøg-25 ning nr. 42864/77 beskrevet en fremgangsmåde, ved hvil ken 3a-acetoxycholanylchlorid omsættes med diisopropylcadmium i et opløsningsmiddel, der fås ved at sætte .benzen til ether, som anvendes ved fremstillingen af diisopropylcadmium, hvorefter etheren afdestilleres. Ved denne 30 reaktion er udbyttet af slutproduktet, 3a-hydroxy-24-oxo--53-cholestan, kun 48,4%. I forbindelse med den foreliggende opfindelse er det konstateret, at steroidforbindelsen med en oxogruppe i sidekæden fås i omtrent samme udbytte.

35 i

DK 158790 B

2

O

Det er ligeledes kendt, at sidereaktionen af syre-halogenidet med en ether som opløsningsmiddel kan inhibe-res ved anvendelse af dibutylether som opløsningsmiddel, jf. J. Am. Chem. Soc., 68, 2078 (1946). Forsøg har imid-5 lertid vist, at der ved omsætning af 3(3-acetoxychol~ -5-enylchlorid med isopropyl-zinkbromid i dibutylether som opløsningsmiddel kun opnås et udbytte på 42-52% af den ønskede 24-oxocholesterol.

Formålet med opfindelsen er at fremstille 24-oxo-10 -steroidforbindelser ved en kommercielt fordelagtig metode, nemlig således, at der opnås et højt udbytte.

Denne fordel kan ifølge den foreliggende opfindelse opnås ved den her omhandelde fremgangsmåde til fremstilling af 24-oxo-steroidforbindelser med den almene 15 formel 0 CH3 CH3 fCH2 ^-C-H (I) I έκ3 20 ά hvor R er et steroidskelet bundet via 17-stillingen, og m betyder 0 eller et helt tal fra 1 til 4, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at et syrehalogenid med formlen 25 0 ch3 (ch2)2-c-y (III) i? 30 2 hvor R er det samme steroidskelet som R eller dette steroid-skelet, hvori mindst én hydroxygruppe er beskyttet, og Y er et halogenatom, i praktisk taget fraværelse af vand, kondenseres med en organozinkforbindelse med formlen 35

DK 158790B

3

O

CH-3 !

Zn_f__(CH2)-r„c-H]pXg (II) ch3 5 hvor p er 1 eller 2, og q er 0 eller 1, forudsat at p + q = 2, X er et halogenatom, og m har den ovenfor anførte betydning, i et indifferent organisk medium i nærværelse af 0,1 til 2 mol, pr. mol organozinkforbindelse, 10 af en aliphatisk ether med 2-10 carbonatomer eller en 5- eller 6-leddet alicyclisk ether indeholdende ét ether-oxygenatom i molekylet, hvorefter det fremkomne produkt om ønsket hydrolyseres.

Det ved den her omhandlede fremgangsmåde anvend-15 te syrehalogenid er illustreret ved formlen (III), hvor er et steroidskelet, og Y er et halogenatom såsom chlor, brom eller iod, fortrinsvis chlor eller brom. Steroidskelettet kan f.eks. være af gonan-, østran- eller androstantypen. Bindingen mellem ring A 20 og ring B i disse steroidskeletter kan være trans eller cis.

Blandt sådanne syrehalogenider foretrækkes - androstan-syrehalogenider med formlen 25 2

ch3 (ch2^--C-Y

R10 "I

30 I ___ /S/Vq (III-a) ^R9

H

R

35

DK 158790 B

O

4 4 5 hvor Y har den ovenfor anførte betydning, og R , R , 6 V 8 q 10 R , R, R °, R3 og R1 hver især er et hydrogenatom eller 6 7 en beskyttet hydroxylgruppe, og R og R tilsammen kan

O

danne en carbon-carbon-binding, i hvilket tilfælde R og g 5 R endvidere kan danne en carbon-carbon-binding, eller r5 og R® tilsammen kan danne en carbon-carbon-binding, 7 medens R er en beskyttet hydroxylgruppe,idet disse halo-genider er egnede mellemprodukter til vitamin D3-analoge.

Da de er forholdsvis let tilgængelige, er de velegnede 10 udgangsmaterialer til anvendelse ved den her omhandlede fremgangsmåde.

4 10 I formlen (Ill-a) er R -R hver især et hydrogenatom eller en beskyttet hydroxylgruppe. Forbindelser med formlen (Ill-a) , hvor R~*, R5 og R^, R^ og R^® 15 eller R^, R® og R“^ alle repræsenterer en beskyttet hydroxylgruppe, kan lét fremstilles på i og for sig kendt måde ud fra naturligt forekommende stoffer med en fri hydroxylgruppe. Som eksempler på beskyttelsesgrupper for hydroxylgruppen kan nævnes aliphatiske carboxylsyre-20 rester, såsom formyl, acetyl, propionyl og pivaloyl, aromatiske carboxylsyrereste:^ såsom benzoyl, p-nitro-benzoyl, o-methylbenzoyl og p-methoxybenzoyl og grupper, der danner en etherbinding, såsom benzyl, trityl, tetrahydropyranyl, β-ethoxyethyl, t-butyl- 25 dimethylsilyl og trimethylsilyl.

6 7 R og R kan tilsammen danne en carbon-carbon- 8 9 binding, i hvilket tilfælde R og R tilsammen yderligere kan danne en carbon-carbon-binding. I førstnævnte tilfælde er dobbeltbindingen i 5-stillingen i stero-30 idkernen, og i sidstnævnte tilfælde er der to dobbeltbindinger i 5- og 7-stillingen i steroidkernen.

5 6

Eller R og R kan danne en carbon-carbon 7 dobbeltbinding, og samtidig kan R være en beskyttet hydroxylgruppe.

35 Syrehalogenidet med formlen (Ill-a) kan almin deligvis fremstilles ved omsætning af den tilsvarende carboxylsyre med et halogeneringsmiddel. Denne metode er i og for sig kendt og beskrevet i f.eks. J. Pharm.

Soc. (Japan), 57, 963 (1937).

DK 158790B

O

..5

Som eksempler på syrehalogenider med formlen (III) eller (Ill-a) kan nævnes 33-acetoxychol-5-enylhalogeni-der, 33-acetoxy-22,23-bisnor-chol-5-enylhalogenider, 3β--acetoxy-23-nor-chol-5-enylhalogenider, 33-acetoxy-23a-5 -homo-chol-5-enylhalogenider, cholanylhalogenider, 3a,6a-diacetoxycholanylhalogenider, 3a-acetoxycholanyl-halogenider, 33-acetoxychol-5,7-dienylhalogenider og 63-methoxy-3a,5-cyclo-5a-cholanylhalogenider. Det skal forstås, at disse eksemplificerede halogenider f.eks.

10 er syrechlorider eller syrebromider, og acetoxygruppen som beskyttelsesgruppe for hydroxylgruppen er et eksempel på en beskyttelsesgruppe for hydroxylgruppen, og de tilsvarende syrehalogenider, hvori hydroxylgruppen er beskyttet med de ovenfor nævnte grupper, er ligeledes 15 eksempler på syrehalogenider med formlen (III) eller (Ill-a).

Organozinkforbindelsen, som er det andet udgangsmateriale ved den her omhandlede fremgangsmåde, er illustreret ved formlen 20 CH, i

Zn-HCH2+5—-C-B]pXq (ID

ch3 hvor p er 1 eller 2, q er 0 eller 1, X er et halogenatom, 25 og m er 0 eller et helt tal fra 1 til 4, idet dog p + q er 2, svarende til valensen for zink.

X er et halogenatom, såsom chlor, brom eller iod, fortrinsvis chlor eller brom.

Organozinkforbindelsen kan fremstilles ved om-30 sætning af det tilsvarende zinkhalogenid med et Grig-nard-reagens som beskrevet detaljeret i det følgende.

Eksempler på organozinkforbindelser er 35

O

DK 158790 B

6

Zn[CH(CH3)2l2, Zn[CH2CH(CH3)2]2, Zn[(CH2)2CH(CH3)2]2 og Zn[ (ch2)4ch(ch3)212, 5 når p = 2 og q = O, og Zn[CH(CH3)2]Br, Zn[CH(CH3) 2]Cl,

Zn[CH2CH(CH3)2]Brr Zn[CH2CH(CH3)2]C1, Zn[(CH2)2CH(CH3)2JBr, Zn[(CH2)2CH(CH3)2]Cl, Zn[ (CH2) 3CH(CH3) 2]C1 og

Zn[(CH2)4CH(CH3)2]Br.

10

Den her omhandlede fremgangsmåde gennemføres ved at kondensere syrehalogenidet med formlen (III) med or-ganozinkforbindelsen med formlen (II) i et indifferent organisk medium i nærværelse af en ether, der er i stand 15 til at danne et kompleks med organozinkforbindelsen.

Det har vist sig, at de ethere, der kan anvendes ved den her omhandlede fremgangsmåde, er begrænset til de, der er i stand til at danne et kompleks med organozinkforbindelsen. Det antages derfor, at den her omhand-20 lede reaktion forløber under dannelse af et kompleks mellem organozinkforbindelsen og etheren.

Det er også nødvendigt, at den her omhandlede reaktion gennemføres under anvendelse af etheren i en mængde på 0,1 til 2, fortrinsvis 0,3-1,5, mol pr. mol 25 organozinkforbindelse. Det har vist sig, at såfremt etheren er til stede i for stor mængde i reaktionssystemet, formindskes produktudbyttet langt mere end forventet, idet således slutproduktudbyttet er tilbøjeligt til at falde brat, når etheren anvendes som opløsningsmiddel eller anvendes i en 30 mængde, der ligger over den angivne mængde.

Ethere til anvendelse ved den her omhandlede fremgangsmåde er de, der har 1 etheroxygenatom i molekylet. Eksempler på sådanne ethere er aliphatiske ethere med 2-10 carbonatomer, såsom dimethylether, methylethylether, 35 diethylether, diisopropylether, dibutylether og diamylether, og 5- eller 6-leddede, aliphatiske ethere, såsom tetrahydro-furan og tetrahydropyran.

O

7 DK 158790 B

Støkiometrisk reagerer 1 mol af syrehalogenidet med formlen (III) med 1 mol (når p-1 og q=l i formlen (II)) eller 0,5 mol (når p=2 og q=0 i formlen (II)) af organozinkforbindelsen med formlen (II). Med hen-5 blik på reaktionshastigheden, slutproduktudbyttet og reaktionsprocessen er det almindeligvis ønskeligt at anvende organozinkforbindelsen i en mængde på 2,5-50 mol, fortrinsvis 5-10 mol, pr. mol af syrehalogenidet.

10 Som organozinkforbindelse kan anvendes en for bindelse med formlen (II), hvor p=l og q=l, en forbindelse med formlen (II), hvor p=2 og q=0, eller en blanding af disse. Sædvanligvis giver forbindelsen med formlen (II), hvor p=l og q=l, et højere udbytte af 15 det ønskede produkt end forbindelsen med formlen (II), hvor p=2 og q=0. En blanding af disse giver et udbytte, der ligger mellem de udbyttemængder, der fås ved anvendelse af hver af de to forbindelser, afhængigt af blandingsforholdet.

20 Det indifferente organiske medium er f.eks. en forbindelse, som er væskeformig under reaktionsbetingelserne, hensigtsmæssigt ved stuetemperatur. Eksempler på det indifferente organiske medium er aromatiske carbonhydridei; såsom benzen, toluen, xylen og blandede 25 xylener samt aliphatiske eller alicycliske carbon- hydrider, såsom petroleumsether, hexan, ligroin, cyclo-hexan og decalin. Ved "indifferent" skal her forstås, at mediet ikke reagerer med de udgangsmaterialer, som anvendes ved den her omhandlede fremgangsmåde, eller 30 med det ønskede slutprodukt.

Mængden af det indifferente organiske medium kan være en hvilken som helst mængde, der bevirker, at reaktionen forløber glat. Sædvanligvis er den 10-100 vægtdele, fortrinsvis 15-60 vægtdele, pr. vægtdel af det 3S anvendte syrehalogenid.

O

DK 158790 B

8

Reaktionstemperaturen varierer afhængigt af arten og mængden af det indifferente organiske medium, udgangsmaterialerne etc. Almindeligvis ligger den i området fra ca. -20°C til ca. 100°C, fortrinsvis 5 5-50°C, især 10-15°C.

Der fremstilles således ved den her omhandlede fremgangsmåde en 24-oxo-steroidforbindélse med.formlen o ch3 cl3 /(CH2t~c——H (I‘a) 10 £2 CH3 med en oxogruppe i sidekæden og eventuelt med mindst en be skyttet hydroxylgruppe.

I formlen (I-a) har R og m den ovenfor anførte be- o 15 tydning. Nærmere betegnet er R samme steroidskelet som R, idet det dog eventuelt har mindst en beskyttet hydroxylgrup- pe. Beskyttelsesgrupperne for hydroxylgruppen er de ovenfor beskrevne.

Ifølge en særligt foretrukken udførelsesform for 20 fremgangsmåden ifølge opfindelsen har det vist sig, at det ønskede slutprodukt kan fås i særlig højt udbytte, og undertiden i næsten kvantitative udbytter, ved anvendelse af en organozinkforbindelse med formlen 25 f ^CH3 \

Zn-f-CHT (H-b) \ ^CH3/pXq 30 hvor X, p og q har de ovenfor anførte betydninger, og hvor det carbonatom, der skal knyttes til carbonylgrup-pen i syrehalogenidet, er et sekundært carbonatom.

Denne foretrukne udførelsesform er ligeledes fordelagtig derved, at den tillader dannelse af en steroidforbindel- 35 se med 8 carbonatomer i sidekæden, hvilken forbindelse er et betydningsfuldt mellemprodukt for en vitamin D^- 9

O

DK 158790 B

analog, ved anvendelse af et syrehalogenid af den hydroxy-beskyttede type af kommercielt tilgængelig 3f3-hydroxychol--5-en-syre (cholensyre).

Ifølge den her omhandlede fremgangsmåde fremstil-5 les det ønskede slutprodukt i højt udbytte ved gennemførelse af kondensationsreaktionen i alt væsentligt i fraværelse af vand. Derfor underkastes reaktionsmediet og etheren, som er de bestanddele, der mest sandsynligt bringer vand ind i reaktionssystemet, en dehydratiseringsbehandling 10 på i og for sig kendt måde før anvendelsen. Tilstedeværelsen af vand kan i alt væsentligt udelukkes, f.eks. ved behandling af carbonhydridmediet med metallisk natrium eller ved behandling deraf med tetrahydrofuran eller vandfrit calciumsulfat og ved yderligere behandling med 15 lithiumaluminiumhydrid på destillationstidspunktet.

Isolering og rensning af den ønskede steroidforbindelse ved den her omhandlede fremgangsmåde kan gennemføres ved en i og for sig kendt metode, der f.eks. omfatter direkte behandling af reaktionsproduktblandingen med en mine-20 ralsyre, behandling af det organiske lag med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørring af den behandlede masse med vandfrit magnesiumsulfat, koncentrering af det ønskede produkt og eventuelt rensning af remanensen (råprodukt) ved omkrystallisation eller søjlechromatografi.

25 Da den ovenfor beskrevne steroidforbindelse imidlertid fås i næsten kvantitativt udbytte ved den her omhandlede fremgangsmåde, og hydroxylgruppen helst skal foreligge i fri form til anvendelse som udgangsmateriale til vitamin D3~analoge, er det ligeledes mu-30 ligt at fremstille det ønskede produkt ved direkte hydrolyse af reaktionsblandingen som fremkommet ved kondensationsreaktionen.

Hydrolysen kan gennemføres ved en i og for sig kendt metode, der f.eks. omfatter opvarmning af den kon-35 centrerede remanens (råprodukt), der er fremkommet ved den ovenfor beskrevne isolerings- og rensningspro-

O

DK 158790 B

10 ces, f.eks. ved en temperatur i området 40-80°C sammen med en alkalisk alkohol, såsom KOH/CH^OH, under omrøring, efter eventuel tilsætning af et opløsningsmiddel, såsom benzen, for at forøge remanensens opløselighed.

5 Isoleringen og rensningen af hydrolyseproduktet kan gennemføres ved en i og for sig kendt metode, der f.eks. består i at tilsætte vand til den fremkomne reaktionsblanding, ekstrahering deraf med et organisk medium såsom benzen, vaskning af ekstrakten med en mineralsyre, 10 behandling deraf med en mættet vandig natriumhydrogen-carbonatopløsning, yderligere behandling med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørring af det behandlede produkt med vandfrit natriumsulfat, koncentrering deraf og eventuelt rensning af koncentratet ved 15 omkrystallisation eller chromatografi.

Ved den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles en steroidforbindelse, som har en oxogruppe i sidekæden, og som har formlen 0 CH3 20 CH-. (CH,-)-C-fCHn-}--C-H (I) ^2 z m j S CH3 hvor R og m har de ovenfor anførte betydninger.

25 Som anført ovenfor er R i formlen (I) et stero idskelet, som kan indeholde en hydroxylgruppe eller en beskyttet hydroxylgruppe.

30 35

DK 158790B

11 o

Som eksempler på steroidforbindelser med formlen (I) kan nævnes 3p-hydroxy-24-oxocholest-5-en (24-oxocholesterol), 33-acetoxy-24-oxocholest-5-en, 5 24-oxo-53-cholestan, 24-oxo-24a-homo-53-cholestan, 3a,6a-dihydroxy-24-oxo-50-cholestan, 3a,6a-diacetoxy-24-oxo-53-cholestan, 3a,6a-diacetoxy-24-oxo-24a-homo-53-cholestan, 10 3a,6a-dihydroxy-24-oxo-24a,24b-bis-homo-53-chol- estan, 3 α - hy d r oxy- 2 4 - oxo - 5 β - cho 1 e s t an, 3a-acetoxy-24-oxo-53-cholestan, 3a-benzoyloxy-24-oxo-53-cholestan, 15 3a-ethoxycarbonyloxy-24-oxo-53-cholestan, 3a-hydroxy-24-oxo-24a-homo-53-cholestan, 3a-hydroxy-24-oxo-24a,24b-bis-homo-53-cholestan, 33-hydroxy-24-oxocholesta-5,7-dien, 33-acetoxy-24-oxocholesta-5,7-dien, 2o la, 33-dihydroxy-24-oxocholesta-5,7-dien, la, 3(3-diacetoxy-24-oxocholesta-5,7-dien og 63-methoxy-3a,5-cyclo-24-oxo-5a-cholestan.

Organozinkforbindelsen med formlen (II) kan fremstilles ud fra et Grignard-reagens, hvorpå et syrehalogenid 25 med formlen (III) sættes direkte til den fremkomne reaktionsblanding. Der foregår herved en kondensations-reaktion mellem organozinkforbindelsen og syrehaloge-nidet, hvorefter det dannede reaktionsprodukt eventuelt hydrolyseres.

30 Denne kombinerede fremgangsmåde er industrielt fordelagtig derved, at den ved dannelsen ud fra Grignard--reagenset fremkomne reaktionsblanding kan anvendes direkte i et efterfølgende trin, hvori der gennemføres en kondensationsreaktion mellem organozinkforbindelsen 35 og syrehalogenidet. Dette er.i modsætning til den i beskrivelsen til offentliggjort japansk patentansøgning nr. 42864/77 beskrevne fremgangsmåde, ved hvilken det

DK 158790 B

12 til fremstilling ud fra Grignard-reagenset anvendte opløsningsmiddel fjernes på grund af, at det forårsager en sidereaktion, Og derfor gennemføres den efterfølgende kondensationsreaktion i et frisk tilført opløsningsmiddel.

5 Nærmere betegnet indbefatter denne kombinationsfrem gangsmåde en additionsreaktion mellem metallisk magnesium og et alkylhalogenid med formlen CH-, 10 I 3 [H-C-(CH2)m]X1 (IV) ch3 15 hvor m har den ovenfor anførte betydning, og X1 er et halogenatom, i nærværelse af den nødvendige mængde af en ether af den i indledningen til krav 1 angivne art i et indifferent, organisk medium, hvorved der fås en blanding indeholdende en organomagnesiumforbindelse med formlen 20 CH0 .3 , (V)

Mg[H -C-fCH^J X1 CH-3 25 3 hvor X1 og m har de ovenfor anførte betydninger, tilsætning af et zinkhalogenid med formlen 30 Zn(X2)2 (VI) hvor X2 er et halogenatom, til den fremkomne blanding, hvorved der fås en blanding indeholdende en organozinkforbindelse med formlen 35 13

DK 158790 B

CH3

Zltt_H-CH2^_i^H]pXq (II) 5 CH3 hvor m, p og q har de ovenfor anførte betydninger, og X er et halogentom repræsenteret ved X1 eller X2, og den nødvendige mængde af en ether af den i indledningen til Jcrav 1 10 angivne art, tilsætning af et syrehalogenid med formlen

O

CH3^^/(CH2^ C“Y (III)

R

15 hvor R og Y har de ovenfor anførte betydninger, til gennemførelse af kondensationsreaktionen mellem organozinkfor-bindelsen og syrehalogenidet og eventuelt hydrolyse af det fremkomne produkt, hvorved fås steroidforbindelsen med form-20 len (I) med en oxogruppe i sidekæden.

I den ovenfor beskrevne fremgangsmåde består det første trin i at gennemføre en additionsreaktion mellem alkylhalogenidet med formlen (IV) og metallisk magnesium i et indifferent organisk medium i nærværelse af en ether.

25 Eksempler på alkylhalogenider er isopropylbromid, isopropylchlorid, isobutylbromid, isoamylbromid og isoamyl-chlorid.

Den ether, der anvendes som katalysator, og det indifferente organiske medium kan være de samme som de ovenfor 30 anførte. Den ether, der anvendes i første trin, behøver imidlertid ikke altid at være i stand til at danne et kompleks med den i andet trin dannede organozinkforbindelse, jf. Chemistry and Industry, side 426 (1965). Ved den her omhandlede kombinationsfremgangsmåde anvendes imidlertid 35 ethere med en sådan egenskab.

O

DK 158790 B

14 Mængden af alkylhalogenidet og det metalliske magnesium er hver for sig fortrinsvis 5-50 mol pr. mol af det i tredje trin anvendte syrehalogenid.

Den anvendte ethermængde er fortrinsvis 0,1-2 mol, 5 især 0,3-1,5 mol, pr. mol af det metalliske magnesium.

Reaktionstemperaturen er fortrinsvis 15-80°C, især 40-50°C.

Der fås således i første trin en blanding indeholdende organomagnesiumforbindelsen med formlen (V).

10 I andet reaktionstrin sættes zinkhalogenidet med formlen (VI) til blandingen indeholdende organomagnesiumforbindelsen med formlen (V), og zinkhalogenidet omsættes med organomagnesiumforbindelsen i et indifferent organisk medium i nærværelse af en ether.

15 Som zinkhalogenid kan f.eks. anvendes zinkbromid, zinkchlorid og zinkiodid. Zinkbromid foretrækkes.

Mængden af zinkchlorid er 2,5-250 mol, fortrinsvis 2,5-50 mol, pr. mol af det i tredje trin anvendte syrehalogenid. Hvis zinkhalogenidet anvendes i for stor 20 mængde, vil reaktionssystemet være tilbøjeligt til at danne en tung opslæmning.

Reaktionstemperaturen er almindeligvis 15-80°C, fortrinsvis 55-65°C.

Ved andet trin fås således en blanding indehol-25 dende organozinkforbindelsen med formlen (II) og den nødvendige mængde af den i første trin anvendte ether, der er i stand til at danne et kompleks med organozink-forbindelsen.

1 2 X i formlen (II), X i formlen (IV) og X i form-30 len (VI) betyder hver især et halogenatom.

I overensstemmelse med det tredje trin sættes syrehalogenidet med formlen (III) til den fremkomne reaktionsblanding, enten som det er eller som en opløsning i et indifferent, organisk medium, og reaktionen mellem 35 syrehalogenidet og den ovenfor detaljeret beskrevne

DK 158790 B

15 0 organozinkforbindelse gennemføres i nærværelse af den nødvendige mængde ether.

Efter omsætningen hydrolyseres reaktionsblandingen eventuelt, og reaktionsproduktet isoleres og ren ses. Den ønskede steroidforbindelse med formlen (I) med 5 en oxogruppe i sidekæden kan således fremstilles i højt udbytte, undertiden i næsten kvantitativt udbytte.

Den fremstillede steroidforbindelse kan omdannes til en farmakologisk aktiv vitamin D^-analog på kendt måde. F.eks. kan 24-oxocholesterol med formlen 10 O

II

i 1

HO

fremstillet ved den her omhandlede fremgangsmåde, omdan-20 nes til la,24-dihydroxycholecalciferol med formlen

OH

25 ^

V

30 II

HQ ''"'" ^ nr 686 35

DK 158790 B

16 0 som har fremragende farmakologisk virkning, ved at omdanne den til la,24-dihydroxycholesterol ved en kendt metode ifølge D.H.R. Barton et al, jf. The Journal of the American Chemical Society, 95, 2748 (1973), fremstilling af den tilsvarende 5,7-dien deraf på kendt 5 måde og termisk isomerisering deraf ved lysbestråling, jf. f.eks. U.S. patent nr. 4.022.891.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler.

Eksempel 1 10 Fremstilling af 3ft-hydroxy-24-oxocholest-5-en.

a) Fremstilling af 3B-acetoxychol-5-enylchlorid 4,16 g (10 mmol) 3£-acetoxychol-5-ensyre sættes til 60 ml vandfri benzen. Opløsningen afkøles med is under omrøring, og 4,5 ml thionylchlorid tilsættes drå-15 bevis. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 2,5 timer. Reaktionsblandingen koncentreres under formindsket tryk, og til remanensen sættes 20 ml vandfri benzen, som er fremstillet ved tørring af benzen med natrium. Blandingen koncentreres 20 gentagne gange under formindsket tryk til fjernelse af det thionylchlorid, som indeholdes i remanensen. Det fremkomne, faste råprodukt, 33-acetoxychol-5-enylchlorid anvendes som udgangsforbindelse i det efterfølgende trin uden rensning.

25 b) Fremstilling af 3B-hydroxy-24-oxocholest-5-en 1) 1,9 g (78,8 mmol) magnesiumflager og 6,4 ml (78,8 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 40 ml vandfri benzen. Den fremkomne suspension opvarmes på et varmt bad ved 45°C. Under omrøring tilsættes dråbe- 30 vis en opløsning af 7,0 ml (75 mmol) isopropylbromid i 40 ml vandfri benzen, og efter tilsætningen omrøres blandingen under opvarmning til fuldstændig opløsning af magnesium.

2) Opløsningen afkøles, og derpå tilsættes 16,9 g 35 (75 mmol) vandfrit zinkbromidpulver. Blandingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C i 2 timer under omrøring.

ir 686

DK 158790 B

17 O 3) Opløsningen afkøles, og under isafkøling (5°) og omrøring tilsættes dråbevis 30 ml af en opløsning af det rå 33-acetoxychol-5-enylchlorid i vandfri benzen. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes yderligere 50 ml 5 koldt vand og 17 ml 6 F saltsyre til afslutning af reaktionen.

Efter reaktionen tilsættes vand og benzen for at adskille reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres 10 med benzenlaget, og blandingen vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne råprodukt, 33-acetoxy-24-oxochalest-5-en underkastes en hydrolysereaktion uden rensning.

15 Nærmere betegnet opløses det rå 33-acetoxy-24- -oxo-cholest-5-en i 100 ml af en 1:1 methanol/benzen-blanding. Til opløsningen sættes dråbevis en 10%'s methanolopløsning af kaliumhydroxid ved stuetemperatur under omrøring. Efter tilsætningen omrøres blandingen 20 ved 70°C i 4 timer. Efter reaktionen tilsættes 100 ml vand for at adskille reaktionsblandingen i lag.

Det fremkomne vandige lag ekstraheres to gange med benzen. Benzenekstrakterne kombineres med det organiske lag. Blandingen vaskes successivt med fortyndet salt-25 syre, en mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og koncentreres, hvorved fås 3,6 g 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en som et hvidt fast stof (udbytte: 90%, beregnet på 33-acetoxychol-5-30 -ensyre). Produktet har følgende egenskaber:

Smp: 135-136°C, IR (KBr): 3450, 2945, 1708, 1465, 1375 cm *. NMR (CDCl^, TMS) , (/(ppm): 0,67 (3H, .s, C-18-CH3), 0,91 (IH, d, J=6Hz, C-25-H), 1,01 (3H, S, C-19-CH3), 1,09 (6H, d, J=6HZ, C-26-CH^, C-27-CH,), 35 1,59 (ih, s, C-3-OH), 3,52 (IH, bm, C-3-H), 5,32 (IH, bd, C-6-H).

Il nr 686

18 DK 158790B

O Eksempel 2

Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at der anvendes 8,1 ml diethyl- ·. ether i..stedet for de i eksempel 1 anvendte 6,4 ml te-trahydrofuran. Der fås 3,3 g 3£-hydroxy-24-oxocholest-5 -5-en (udbytte: 82,5%) .

Sammenligningseksempel 1 Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at der anvendes 10,6 g ethylen-glycol-dimethylether i stedet for de i eksempel 1 an-10 vendte 6,4 ml tetrahydrofuran. Der kan ikke konstateres dannelse af det ønskede 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en.

Af dette resultat fremgår, at ethylenglyaol--dimethylether ikke kan anvendes som ether ved den her omhandlede fremgangsmåde.

15 Sammenligningseksempel 2

Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at der anvendes 10,6 g dioxan i stedet for de i eksempel 1 anvendte 6,4 ml tetrahydrofuran. Der fås kun 0,2 g 33-hydroxy-24-oxocholest-20 -5-en (udbytte: 5%).

Af dette resultat fremgår, at heller ikke dioxan kan anvendes som ether ved den her omhandlede fremgangsmåde.

Eksempel 3 25 Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde genta ges med den undtagelse, at mængden af tetrahydrofuran ændres til 3,4 ml. Der fås 2,5 g 33-hydroxy-24-oxochol-est-5-en (udbytte: 62,5%).

Sammenligningseksempel 3 30 Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde genta ges med den undtagelse, at mængden af tetrahydrofuran ændres til 68,4 ml. Der fås kun 0,2 g af det ønskede 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en (udbytte: 5%).

Af dette resultat fremgår, at tilstedeværelse af 35 for megen ether i reaktionssystemet hæmmer reaktionen, 386 19

DK 158790B

O selv om etheren er én af de ved den her omhandlede fremgangsmåde anvendelige.

Eksempel 4

Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at der anvendes toluen som reaktions-5 medium i stedet for benzen i samme mængde. Der fås 3,1 g 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en (udbytte: 77,5%).

Eksempel 5

Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at der anvendes xylen som reaktions-10 medium i stedet for benzen i samme mængde. Der fås 2,9 g 3p-hydroxy-24-oxocholest-5-en (udbytte: 72,5%).

Eksempel 6

Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde gentages med den undtagelse, at mængden af det vandfri zinkbromid 15 ændres til 12,7 g (56,25 mmol). Der fås 2,5 g 33-hydroxy--24-oxocholest-5-en (udbytte: 62,5%).

Eksempel 7

Fremstilling af 3a,6a-dihydroxy-24-oxo-53-cholestan.

a) Fremstilling af 3a,6a-diacetoxycholanylchlorid 20 (hyodeoxycholylchlorid - 3a,6a-diacetat - udgangs forbindelse).

14 g (29,4 mmol) hyodeoxycholsyre - 3a,6a-di-acetat sættes til 200 ml vandfri benzen. Opløsningen afkøles med is, og under omrøring tilsættes dråbevis 25 15 ml thionylchlorid. Efter tilsætningen bringes bian*.

dingen til omsætning ved stuetemperatur i 3,5 timer under omrøring. Reaktionsblandingen koncentreres under formindsket tryk. Til remanensen sættes 60 ml vandfri benzen, og blandingen koncentreres gentagne gange under formind-30 sket tryk til fjernelse af det i remanensen indeholdte thionylchlorid. Det fremkomne faste råprodukt, hyodeoxycholylchlorid - 3a,6a-diacetat, anvendes som udgangsforbindelse i det efterfølgende trin uden rensning.

b) Fremstilling af 3a,6a-dihydroxy-24-oxo-53-cholestan 35 1) 5,6 g (232 mmol) magnesiumflager og 18,8 ml I nr 686 20

DK 158790B

0 (232 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 120 ml vandfri benzen. Den fremkomne suspension opvarmes véd en badtemperatur på 45°C. Under omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af 20,6 ml (220 mmol) isopropyl-bromid i 120 ml vandfri benzen. Efter tilsætningen om-5 røres opløsningen i 2 timer under opvarmning til fuldstændig opløsning af magnesium.

2) Opløsningen afkøles, og der tilsættes 49,6 g (220 mmol) vandfrit zinkbromidpulver. Derpå opvarmes blandingen ved en badtemperatur på 55°C i 2 timer under 10 omrøring.

3) Blandingen afkøles, og under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis 100 ml af en opløsning af det rå hyodeoxycholylchlorid-3a,6a-diacetat i vandfri benzen. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved 15 stuetemperatur i 1 time, og 100 ml koldt vand og 50 ml 6 N saltsyre tilsættes dråbevis for at tilendebringe reaktionen. Efter reaktionen tilsættes vand og benzen for at adskille reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombine-20 res med benzenlaget. Blandingen vaskes med en vandig opløsning af en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, 3α,6α--diacetoxy-24-oxo-53~cholestan underkastes hydrolyse-25 reaktion uden rensning.

Nærmere betegnet opløses det rå 3a,6a-diacet-oxy-24-oxo-53-cholestan i en 1:1 blanding af methanol og benzen. Til opløsningen sættes dråbevis en 10%'s methanolopløsning af kaliumhydroxid ved stuetemperatur 30 under omrøring. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved 70°C i 4 timer. Efter reaktionen tilsættes 500 ml vand for at adskille reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres to gange med dichlormethan. Di-chlormethanekstrakterne kombineres med det organiske 35 lag. Blandingen vaskes successivt med fortyndet saltsyre, 686 .;

DK 158790B

21 7::.

O en mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og koncentreres, hvorved fås 9,0 g 3a,6a-dihydroxy-2å-oxo-53-cholestan som et hvidt fast stof (udbytte: 73%¾ beregnet på hyo-'5 deoxycholsyre-3a,6a-diacetat). Produktet har følgende egenskaber: '

Smp: 182-183°C (omkrystalliseret fra methylen-chlorid/ethylacetat).

IR (KBr): 3375, 2925, 2860, 1710, 1460, 1376 cm'1.

10 NMR (CDCl3, TMS) , (j (ppm) : 0,64 (3H, s, C-18-CH3), 0,91 (3H, s, C-19-CH3), 1,10 (6H, d, J=6Hz, C-26-CH3 og C-27-CU^), 1,54 (2H, s, C-3-0H, C-6-0H), 3,63, 4,04 (hver IH, bm, C-3-H og C-6-H), 15 Højresolveringsmassespektrum (70eV): M+ 418,3442 (C27H4603).

Eksempel 8

Fremstilling af 3a-hydroxy-24-oxo-53-cholestan a) Fremstilling af 3a-acetoxy-58-cholanylchlorid 20 (udga-ngsforbindelse) .

4,18 g (10 mmol) 3a-acetoxy-53-cholansyre sættes til 60 ml vandfri benzen. Opløsningen afkøles med is, og under omrøring tilsættes dråbevis 4,5 ml thionylchlorid.

Efter tilsætningen bringes blandingen til omsætning ved 25 stuetemperatur i 2,5 timer under omrøring. Reaktionsblandingen koncentreres under formindsket tryk, og remanensen tilsættes 20 ml vandfri benzen. Blandingen koncentreres gentagne gange under formindsket tryk til fjernelse af det i remanensen indeholdte thionylchlorid. Det 30 fremkomne faste råprodukt, 3a-acetoxy-53-cholanylchlorid anvendes som udgangsforbindelse i det efterfølgende trin uden rensning.

b) Fremstilling af 3a-hydroxy-24-oxo-58-cholestan 1) 1,9 g (78,8 mmol) magnesiumflager og 6,4 ml 35 (78,8 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 40 ml vandfri benzen.

I nr· βββ

DK 158790 B

22 O Den fremkomne suspension opvarmes ved en badtemperatur på 45°C, og under omrøring tilsættes dråbevis en opløs-ning af 7,0 ml (75 mmol) isopropylbromid i 40 ml vandfri benzen. Efter tilsætningen opvarmes blandingen i 2 timer under omrøring til fuldstændig opløsning af mag-5 nesium.

2) Opløsningen afkøles, og der tilsættes 16,9 g (75 mmol) vandfrit zinkbromidpulver. Blandingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C i 2 timer under omrøring.

3) Blandingen afkøles. Under isafkøling (5°C) 10 og omrøring tilsættes dråbevis 30 ml af en opløsning af 3a-acetoxy-53-cholanylchloridet i vandfri benzen.

Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes yderligere 100 ml koldt vand og 50 ml 6 N saltsyre for at tilendebringe reak-15 tionen. Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen til adskillelse af reaktionsblandingen i lag.

Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vand-20 frit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, 3a-acetoxy-24-oxo-53-chol-estan underkastes hydrolysereaktion uden rensning.

Nærmere betegnet opløses det rå 3a-acetoxy-24-oxo-53“ -cholestan i en 1:1 blanding af methanol og benzen, og 25 en 10%'s methanolisk opløsning af natriumhydroxid sættes dråbevis til den fremkomne opløsning. Efter tilsætningen omrøres opløsningen ved 70°C i 4 timer. Efter reaktionen tilsættes 100 ml vand til adskillelse af reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres to gange 30 med benzen. Det organiske lag kombineres med benzenekstrakten. Blandingen vaskes successivt med fortyndet saltsyre, en mættet vandig natriumhydrogencarbonatop-løsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og koncentre-35 res, hvorved fås 2,95 g 3a-hydroxy-24-oxo-53-cholestan 1686

DK 158790 B

23 0 som et hvidt fast stof (udbytte: 73%, beregnet på 3a--acetoxy-5£-cholansyre). Dette produkt har følgende egenskaber: IR (KBr): 3450, 2970, 2900, 1720, 1475, 1460, 1390, 1050 cm”1.

5 NMR (CDC13, TMS), J(ppm): 0,65 (3H, s, C-18-CH3), 0,92 (3H, s, C-19-CH3), 1,09 (6H, d, J=6Hz, C-26-CH3 og C-27-CH3), 3,60 (IH, bm, C-3-H).

Højresolveringsmassespektrum (70eV): 10 M+ 402,3524 (C2?H4602)

Eksempel 9

Fremstilling af 3fi-hydroxy-24-oxo-24a-homocholest-5-en 380 mg (15,76 mmol) magnesiumflager og 1,28 ml (15,76 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 8 ml 15 vandfri benzen. Til den fremkomne suspension sættes dråbevis en opløsning af 2,06 g (15 mmol) isobutylbromid i 8 ml vandfri benzen under omrøring ved stuetemperatur.

Efter tilsætningen omrøres blandingen i 0,5 time til fuldstændig opløsning af magnesium.

20 Opløsningen afkøles, og der tilsættes 3,38 g (15 mmol) vandfrit zinkbromidpulver. Blandingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C i 2 timer under omrøring og afkøles. Under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis 6 ml af en opløsning i vandfri benzen af 25 råt 33-acetoxychol-5-enylchlorid. fremstillet som beskrevet i eksempel 1 a) under anvendelse af 832 mg (2 mmol) 33-acetoxychol-5-ensyre. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes 10 ml koldt vand og 4 ml 6 N saltsyre for at'tilende-30 bringe reaktionen.

Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen for at adskille reaktionsblandingen i lag.

Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en 35 mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vand- 3!. nr. 686 24

DK 158790B

0 frit\.magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, '33-acetoxy-24-oxo-24a-homo-cholest-5-en, underkastes hydrolysereaktion uden rensning. Nærmere betegnet opløses det rå 33-acetoxy-24--oxo-24a-homocholest-5-en i en 1:1 blanding af methanol 5 og benzen. En 10%'s methanolopløsning af kaliumhydroxid sættes dråbevis til opløsningen under omrøring ved stuetemperatur. Efter tilsætningen omrøres opløsningen ved 70°C i 4 timer. Efter omsætningen tilsættes 100 ml vand for at adskille reaktionsblandingen i lag. Det 10 vandige lag ekstraheres to gange med benzen. Benzenekstrakterne kombineres med det organiske lag. Blandingen vaskes successivt med fortyndet saltsyre, en mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit 15 natriumsulfat, filtreres og koncentreres, hvorved fås 662 mg 33-hydroxy-24-oxo-24a-homocholest-5-en som et hvidt fast stof (udbytte: 80%, beregnet på 33-acetoxy-chol-5-ensyre). Produktet har følgende egenskaber: IR (KBr): 2950, 1715, 1475, 1375, 1060 cm"1.

20 NMR (CDC13, TMS) , L.‘ (ppm) : 0,68 (3H, s, C-18-CH3), 0,92 (6H, d, J=6Hz, C-26-CH3, C-27-CH3), 1,01 (3H, s, C-19-CH3), 3,50 (IH, bm, C-3-H), 5,32 (IH, bm, C-6-H). Højresolveringsmassespektrum (70eV): 25 M+ 414,3502 (C2gH4602).

Eksempel 10

Fremstilling af 33-hydroxy-24-oxo-24a,24b-bishomo--cholest-5-en 380 mg (15,76 mmol) magnesiumflager og 1,28 ml 30 (15,76 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 8 ml vandfri benzen. Til den fremkomne suspension sættes dråbevis en opløsning af 2,27 g (15 mmol) isoamylbromid i 8 ml; vandfri benzen under omrøring ved stuetemperatur.

Efter tilsætningen omrøres blandingen i 0,5 time til 35 fuldstændig opløsning af magnesium. Opløsningen afkøles, 686

DK 158790B

25 O og der tilsættes 3,38 g (15 irunol) vandfrit zinkbromid-pulver. Blandingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C under omrøring og afkøles derpå. Under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis 6 ml af en opløsning i vandfri benzen af råt 33-acetoxychol-5-enylchlo-5 rid fremstillet ved den i eksempel 1 a) beskrevne metode under anvendelse af 832 mg (2 mmol) 3B-acetoxychol--5-ensyre. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time. Der tilsættes dråbevis 10 ml koldt vand og 4 ml 6 N saltsyre for at tilendebringe 10 reaktionen.

Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen til adskillelse af reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vas-15 kes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesium, filtreres og tørres. Det fremkomne råprodukt, 33-acetoxy-24-oxo-24a,24b-bishomo-cholest-5-en underkastes hydrolysereaktion uden rensning.

20 Nærmere betegnet opløses det rå 3£-acetoxy-24- -oxo-24a,24b-bishomocholest-5-en i 20 ml af en 1:1 blanding af methanol og benzen, og til opløsningen sættes dråbevis en 10%1 s methanolopløsning af kaliumhydroxid. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved 25 70°C i 4 timer. Efter omsætningen tilsættes 100 ml vand til adskillelse af reaktionsblandingen i lag.

Det vandige lag ekstraheres to gange med benzen. Benzenekstrakterne kombineres med det organiske lag. Blandingen vaskes med fortyndet saltsyre, en mættet vandig 30 natriumhydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og koncentreres, hvorved fås 678 mg 33-hydroxy-24-oxo-24a,24b-bishomocholest-5-en som et hvidt fast stof (udbytte: 79%, beregnet på 3(3-acetoxy-35 chol-5-ensyre). Produktet har følgende egenskaber: 26

DK 158790B

O IR (KBr): 3470, 2970, 1720, 1475, 1380, 1060 cm"1.

NMR (CDC13, TMS) , (f (ppm) : 0,68 (3H, s, C-18-CH3), 0,92 (6H, d, J=6Hz, C-26-CH3, C-27-CH3), 1,01 (3H, s, C-19-CH3), 5 3,50 (IH, bm, C-3-H), 5,31 (IH, br, C-6-H).

Højresolveringsmassespektrum (70eV): M+ 428,3638 (C2gH4802).

Eksempel 11

Fremstilling af 38-hydroxy-24-oxo-cholest-5-en 10 a) Fremstilling af 33-acetoxychol-5-enylchlorid (udgangsforbindelse) 500 g (1,2 mol) 33-acetoxychol-5-ensyre sættes til 8 liter vandfri benzen fremstillet ved dehydratisering med en molekylsigte. Den fremkomne opløsning afkøles 15 med is, og under omrøring tilsættes dråbevis 390 ml (5,4 mol) thionylchlorid. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 4 timer. Reaktionsblandingen koncentreres under formindsket tryk, og til remanensen sættes 2 liter vandfri benzen, som er fremkommet 20 ved dehydratisering med en molekylsigte. Blandingen koncentreres gentagne gange under formindsket tryk (5 gange) til fjernelse af thionylchlorid indeholdt i remanensen.

Det fremkomne faste råprodukt, 3|3-acetoxy-chol“5-enyl-chlorid, anvendes i det efterfølgende trin som udgangs-25 forbindelse uden rensning.

. b) Fremstilling af 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en 1) 219 g (9,0 mol) magnesiumflager og 681 g (9,4 mol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 8 liter vandfri benzen fremkommet ved dehydratisering med en molekyl-30 sigte. Den dannede suspension opvarmes ved en badtemperatur på 50-55°C, og under omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af 1 kg (8,1 mol) isopropylbromid i 3 liter vandfri benzen. Efter tilsætningen opvarmes blandingen i 2 timer; under omrøring til opløsning af magnesium.

35 2) Opløsningen afkøles, og der tilsættes 2,2 kg 686

DK 158790 B

27 O (9/8 mol) vandfri zinkbromidpulver. Derpå opvarmes blandingen ved en badtemperatur på 55°C i 2 timer under omrøring .

3) Blandingen afkøles, og under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af det rå 5 33-acetoxy-chol-5-enylchlorid i 6 liter vandfri benzen.

Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes yderligere 3 liter koldt vand og 1,2 liter 6 N saltsyre for at tilendebringe reaktionen. Efter reaktionen tilsættes vand og benzen for at 10 adskille reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag eks-traheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en mættet vandig na-triumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres.

15 Det fremkomne råprodukt, 3|3-acetoxy-24-oxochol- est-5-en, underkastes hydrolysereaktion uden rensning.

Nærmere betegnet opløses det rå 33~acetoxy-24-oxo-cholest-5-en i 7,2 liter af en 1:1 blanding af methanol og benzen. Under omrøring ved stuetemperatur tilsættes 20 dråbevis 3,6 liter af en 10%'s methanolopløsning af kaliumhydroxid. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved 70°C i 6 timer.

Efter omsætningen tilsættes vand for at adskille reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres 25 to gange med benzen. Benzenekstrakterne kombineres med det organiske lag. Blandingen vaskes successivt med fortyndet saltsyre, en mættet vandig natriumhydrogencarbo-natopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres og koncen-30 treres, hvorved fås 369 g 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en som et hvidt fast stof (udbytte: 77%, beregnet på 33-acetoxychol-5-ensyre).

Sammenligningseksempel 4

Fremgangsmåde med anvendelse af en organocadmiumforbln" 35 delse og en katalytisk mængde ether.

28

DK 158790B

O 1) 1,9 g (78,8 mmol) magnesiumflager og 6,4 ml (78,8 mmol) vandfri tetrahydrofuran sættes til 40 ml vandfri benzen- Den fremkomne suspension opvarmes ved en badtemperatur på 45°C, og under omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af 7,0 ml (75 mmol) isopropyl-5 bromid i 40 ml vandfri benzen. Efter tilsætningen opvarmes blandingen i 2 timer under omrøring til fuldstændig opløsning af magnesium.

2) Opløsningen afkøles, og der tilsættes 20,4 g (75 mmol) af et vandfrit cadmiumbromidpulver. Blan- 10 dingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C under omrøring og afkøles derpå, hvorved fås en benzenopløsning af isopropylcadmiumforbindelsen.

3) Under isafkøling (5°C) og omrøring sættes dråbevis 30 ml af en opløsning i vandfri benzen af 3β- 15 -acetoxychol-5-enylchlorid fremstillet som beskrevet i eksempel 1 a) under anvendelse af 4,16 g (10 mmol) 33-acetoxychol-5-ensyre til den under 2) fremstillede benzenopløsning. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes dråbevis 20 50 ml koldt vand og 17 ml 6 N saltsyre for at tilende bringe reaktionen.

Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen til adskillelse af reaktionsblandingen i lag.

Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrak-25 ten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, 33-acetoxy-24-oxocholest-5-en, underkastes hydrolysereaktion som beskrevet i eksempel 1 30 uden rensning. Produktet isoleres og renses, hvorved fås 1,84 g 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en (udbytte: 46%, beregnet på 33-acetoxychol-5-ensyre).

Produktet har samme egenskaber som de i eksempel 1 beskrevne.

35 686

DK 158790 B

29 0 Sammenligningseksempel 5

Konventional fremgangsmåde med anvendelse af en organo-cadmiumforbindelse og udskiftning af et opløsningsmiddel 727 mg (30 mmol) magnesiumflager sættes til 20 ml tørret ether. Den fremkomne suspension opvarmes ved 5 en badtemperatur på 45°C, og under omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af 2,81 ml (30 mmol) isopropylbromid i 10 ml tør ether. Efter tilsætningen opvarmes blandingen i 1 time under omrøring til fuldstændig opløsning af magnesium. Opløsningen afkøles, og der tilsættes 4,36 mg 10 (16 mmol) vandfrit cadmiumbromidpulver. Blandingen opvar mes ved en badtemperatur på 55°C under omrøring. Der tilsættes derpå 50 ml tør benzen, og etheren afdestilleres.

Under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis en opløsning i 10 ml vandfri benzen af 1,04 g (2,4 mmol) råt 15 38-acetoxychol-5-enylchlorid fremstillet som beskrevet i eksempel 1 a) under anvendelse af 998 mg (2,4 mmol) 3β--acetoxychol-5-ensyre. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes 50 ml koldt vand og 17 ml 6 N saltsyre for at tilendebrin-20 ge reaktionen.

Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen til adskillelse af reaktionsblandingen i lag. Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en mættet 25 vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, 33-acetoxy-24-oxocholest-5-en, renses ved søjlechromatografi og underkastes derefter hydrolysereaktion og isoleres og renses. Der fås således 357 mg 30 33-hydroxy-24-oxocholest-5-en som et hvidt fast stof (Udbytte: 37%, beregnet på 33-acetoxychol-5-ensyre). Produktet har samme egenskaber som de i eksempel 1 beskrevne .

I nr 35 30

DK 158790B

0 Sammenligningseksempel 6

Konventionel fremgangsmåde med anvendelse af dibutylether som opløsningsmiddel.

18,2 g (0,75 mol) magnesiumflager sættes til 250 ml vandfri dibutylether. Den fremkomne suspension 5 opvarmes ved en badtemperatur på 45°C, og under omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af 775 ml (0,825 mol) isopropylbromid i 125 ml vandfri dibutylether. Efter tilsætningen opvarmes blandingen under omrøring i 2 timer til fuldstændig opløsning af magnesium. Opløsningen 10 afkøles, og der tilsættes 169 g (0,75 mol) vandfrit zink-bromidpulver. Blandingen opvarmes ved en badtemperatur på 55°C under omrøring og afkøles. Under isafkøling (5°C) og omrøring tilsættes dråbevis en opløsning af råt 33-acetoxychol-5-enylchlorid fremstillet som beskrevet 15 i eksempel 1 a) under anvendelse af 46,8 g (112,5 mmol) 33-acetoxychol-5-ensvre i 375 ml vandfri benzen. Efter tilsætningen omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 time, og der tilsættes yderligere dråbevis 50 ml koldt vand og 17 ml 6 N saltsyre for at tilendebringe reaktionen.

20 Efter reaktionen tilsættes passende mængder vand og benzen til at adskille reaktionsblandingen i lag.

Det vandige lag ekstraheres med benzen. Benzenekstrakten kombineres med benzenlaget. Blandingen vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vand-25 frit magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres. Det fremkomne faste råprodukt, 33-acetoxy-24-oxocholest-5-en, underkastes hydrolysereaktion uden rensning som beskrevet i eksempel 1 og isoleres derpå og renses.

Der fås 23,3 g 3£-hydroxy-24-oxocholest-5-en som 30 et hvidt fast stof (udbytte: 52%, beregnet på 3|3-acetoxy-choli-5-ensyre) . Produktet har samme egenskaber som de i eksempel 1 beskrevne.

>86 35

Claims (8)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af 24-oxo-ste-roidforbindelser med den almene formel 5 ?, CH3 CH3 (CH2} 2-C-^CH2^m-?-H (I) V CH3 R hvor R er et steroidskelet bundet via 17-stillingen, 10 og m betyder 0 eller et helt tal fra 1 til 4, kendetegnet ved, at et syrehalogenid med formlen 0 CH " \ /(ΟΕ2*2-C-Y (111)

15 To R 2 hvor R er det samme steroidskelet som R eller dette steroidskelet, hvori mindst én hydroxygruppe er beskyttet, og Y er et halogenatom, i praktisk taget fraværelse af vand konden-20 seres med en organozinkforbindelse med formlen CH3 Zn-KCH2^_c-H]0Xg CH3 ' 25 hvor p er 1 eller 2, og q er 0 eller 1, forudsat at p + q = 2, X er et halogenatom, og m har den ovenfor anførte betydning, i et indifferent organisk medium i nærværelse af 0,1 til 2 mol, pr. mol organozinkforbindelse, af en alipha-30 tisk ether med 2-10 carbonatomer eller en 5- eller 6-leddet alicyclisk ether indeholdende ét etheroxygenatom i molekylet, hvorefter det fremkomne produkt om ønsket hydrolyseres .

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg- 35 net ved, at mængden af etheren er 0,3-1,5 mol pr. mol organozinkforbindelse. O DK 158790B

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at kondensationsreaktionstemperaturen er fra ca. -20°C til ca. 100°C.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg-5 net ved, at organozinkforbindelsen er en forbindelse med formlen CH3 Zn-E- (CH~-)—-c-H] X 2 m » (Il-a) CH-, 10 3 hvor m og X har de i krav 1 anførte betydninger.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at organozinkforbindelsen er en forbindelse 15 med formlen f h^chA Zn- CH\ , (Il-b) V. ' CH3 y p q 20 hvor p, q og X har de i krav 1 anførte betydninger.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at syrehalogenidet er en forbindelse med formlen. 25 O CH3 ,(CH2*2-C-Y R10 V R4 j I

30 R /\ ^ (III-a) f Λ'Γ> R O DK 158790B 4 5 hvor Y har den i krav 1 anførte betydning, og R , R , R^, R^, R^, R^ og R10 hver især er et hydrogenatom c n eller en beskyttet hydroxylgruppe, R og R tilsammen O kan danne en carbon-carbon-binding, i hvilket tilfælde R 9 5 og R endvidere kan danne en carbon-aarbon-binding, eller 5 6 R og R tilsammen kan danne en carbon-carbon-binding, 7 medens R er en beskyttet hydroxylgruppe. 10 15 20 25 30 35