DK155763B - Proevestand til maaling af stroemningsmodstanden i testemner - Google Patents

Description

DK 155763B

Opfindelsen angår en prøvestand til måling af strømningsmodstanden i testemner under brug af en pumpe, hvis trykside er koblet til testemnet.

5 Det har længe været kendt at måle en centr ifugal pumpes volumenstrøm ud fra pumpens omløbstal ved såkaldt passiv måling, dvs. ved at man fører pumpemedie gennem den stillestående pumpe, og pumpevæsken så bringer pumpens løbehjul til at rotere, hvorefter man måler volumenstrømmen ud fra måling af pumpens 10 omløbstal, idet sammenhængen mellem volumenstrøm og omløbstal er lineær. Denne målemetode, som også kaldes måleursmetoden, er imidlertid uegnet, når man skal foretage hurtige og præcise målinger på større testemner, f.eks. måling af om et tomt pumpehus opfylder en bestemt specifikation med hensyn til volu-15 menstrøm, idet testemnet udviser en bestemt strømningsmodstand.

Formålet med opfindelsen er at anvise en prøvestand af den ovenfor nævnte art, som muliggør hurtig og pålidelig måling 20 af, hvorvidt et testemne opfylder specifikationen med hensyn til strømningsmodstand og dermed til volumenstrøm.

Prøvestanden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at pumpen er en centrifugal- eller tandhjulspumpe, og at der til denne 25 er tilsluttet en omdrejningsta 1-må 1 er, som er indrettet til at afgive et signal til en programenhed, hvori strømningsmod-stand(ledningsmodstand)-omdrejningstal-karakteristikken for pumpen er indlagt, og at programenheden har et visningsfelt, hvorpå størrelsen af den strømn ingsmodstand(1edningsmodstand), 30 som pumpen i forbindelse med en vis volumenstrøm skal virke imod ved vedkommende testemne, direkte kan aflæses. Herved opnås på yderst hurtig og pålidelig måde, at strømningsmodstanden i testemnerne i en given produkt ionsserie let kan kontrolleres en efter en, efterhånden som de stilles op på prøvestanden.

35 Visningsfel tet vil umiddelbart vise strømningsmodstanden for det enkelte testemne.

Ifølge opfindelsen kan omdrejningstal-må 1eren tilligemed centrifugal- eller tandhjulspumpen og testemnet være monteret på 2

DK 155766B

O

varieres inden for et snævert område, er en besparelse kun mulig ved en nedsættelse af prøvevolumenet. Ved en agglu-tinationstest på testplader, ligesom en latex-test, reduceres prøvevolumenet til en tiendedel uden at påvirke prø-5 vens følsomhed. Friske blodpladesuspensioner er ikke egnet hertil, da de allerede indeholder blodpladeaggregater, der fremkalder en agglutination af nul-kontrollen.

Bestemmelsen af ristocetin-cofaktoren er allerede blevet forenklet yderligere ved anvendelse af garvede blod-10 plader. Ved fiksering med glutardialdehyd (DE offentliggørelsesskrift nr. 2.546.166) eller formaldehyd (Allain et al., J. Lab. Clin. Med. (1975), £5, 318) fås blodpladesuspensioner, der også er aktive efter oplagring, især når de frysetørres. Når man resuspenderer sådanne frysetør-15 rede blodplader, finder man ganske vist også en forøget mængde blodpladeaggregater, der begrænser anvendelsen ved en agglutinationstest, da nul-kontrollen også her udviser spontane agglutinationer. Også når blodplader frysetørres sammen med ristocetin dannes der spontant aggregater 20 ved resuspenderingen, som gør deres anvendelse ved en agglutinationstest umulig.

Det har nu vist sig, at de beskrevne ulemper ved de kendte fremgangsmåder kan undgås ved anvendelse af et reagens, der beror på, at det overraskende har vist sig, 25 at thrombocyter, der er behandlet med en proteaseinhibi-4 tor og et til fiksering af proteiner kendt garvestof, kan frysetørres sammen med ristocetin og hjælpemidler og oplagres længere tid ved stuetemperatur eller endog ved 37°C uden nedsættelse af deres anvendelighed til bestemmelse 30 af ristocetin-cofaktoren.

Opfindelsen angår et middel til bestemmelse af ristocetin-cofaktoren (v. Willebrand-faktoren, F VIII R:RCF), hvilket middel er ejendommeligt ved, at det indeholder thrombocyter, der er behandlet med en proteasein-35 hibitor, et til fiksering af proteiner kendt garvestof og eventuelt et til farvning af proteiner kendt farvestof, og ristocetin A.

O

3

DK 155766B

Det her omhandlede reagens muliggør en semikvantita-tiv bestemmelse af ristocetin-cofaktoren ifølge agglutina-tionsmetoden og med kun to pipetteringstrin (reagens og prøve) og under anvendelse af en kun ringe mængde ristoce-5 tin.

Det har vist sig at være gunstigt at fiksere blod pladerne med en opløsning af et C-^_^-alkanaldehyd, fortrinsvis formaldehyd, eller et C2_g-dialdehyd, fortrinsvis glutardialdehyd, i en mindstekoncentration på 0,2% 10 (w:v) i mindst 2 timer ved mellem 4 og 37°C og desuden behandle dem med en proteaseinhibitor, fortrinsvis diiso- — 6 propylfluorphosphat, i en mindstekoncentration på 10 M.

• Thrombocyterne farves eventuelt med et til farvning af proteiner kendt farvestof, især med et ved gelelektroforese 15 anvendt farvestof, såsom Coomassie-blåt eller et reaktionsfarvestof, såsom Remazol®-turkisblåt EEAD 50 5. Derved er koncentrationen af farvestof mindst 0,05 mg/ml, og farve-tiden er højst 24 timer.

Til suspensionen, der indeholder 10^ til 10^ throm-20 bocyter/ml, sættes så meget ristocetin A, at den indeholder 0,2-10 mg/ml, fortrinsvis 2,5 mg/ml. Suspensionen tørres sammen med frysetørringshjælpemidler. Som hjælpemidler anvendes der pr. ml suspension 1-100 mg af en eller flere aminosyrer, fortrinsvis glycin og natriumglutaminat, 25 2-30 mg af en sukkerart, fortrinsvis saccharose, og 0,5- -10 mg af et beskyttelseskolloid, fortrinsvis humanalbumin .

Opfindelsen forklares nærmere ved det følgende eksempel .

30

Eksempel 1,3 Liter thrombocytkoncentrat suspenderes i 4 liter phosphatpuffer, 0,15M, pH-værdi 7,2, og erythrocyterne fracentrifugeres. Vaskningen og centrifugeringen gentages 35 to gange, og den ovenstående væske indstilles derefter på 3 x 10 blodplader/ml. Under strenge forsigtighedsfor- 4

DK 155763B

2. Prøvestand ifølge krav 1, kendetegnet ved, at omdrejn ingstal-måleren (14) t i 11 i gemed centrifugal- eller tandhjulspumpen (3) og testemnet (10) er monteret på et podium (2) i et kar (1) med pumpevæske, og at såvel denne pumpes su- 5 gerør (5) som et på testemnet anbragt afgangsrør (12), er ført ned i karret (1), og at i hvert fald sugerøret (5) er nedstuk-ket i karrets (1) pumpevæske.

3. Prøvestand ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet 10 ved, at testemnet (10) er et tomt pumpehus (10), der er adskilt fra centrifugal- eller tandhjulspumpen (3).

4. Prøvestand ifølge krav 1, 2 eller 3, kendetegnet ved, at programenheden (17) er af en type, der har en elektro- 15 nisk regneenhed med hukommelse og digitalt display samt en enhed for accept/afvisning af testemner, og at omdrejningstal-måleren (14) er af typen med fotoelektrisk aftastning.

20 25 30 35 i i Ί