DK145665B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af et peptid eller funktionelle derivater heraf - Google Patents
Analogifremgangsmaade til fremstilling af et peptid eller funktionelle derivater heraf Download PDFInfo
- Publication number
- DK145665B DK145665B DK171673AA DK171673A DK145665B DK 145665 B DK145665 B DK 145665B DK 171673A A DK171673A A DK 171673AA DK 171673 A DK171673 A DK 171673A DK 145665 B DK145665 B DK 145665B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- phe
- met
- glu
- boc
- lys
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 92
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 17
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 33
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 claims description 20
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 claims description 20
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 14
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 claims description 13
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 13
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 12
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 9
- ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N D-arginine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-SCSAIBSYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 5
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 150000007933 aliphatic carboxylic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 102100039111 FAD-linked sulfhydryl oxidase ALR Human genes 0.000 claims 1
- 101000959079 Homo sapiens FAD-linked sulfhydryl oxidase ALR Proteins 0.000 claims 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 135
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 67
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 58
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 39
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 37
- 229910052681 coesite Inorganic materials 0.000 description 35
- 229910052906 cristobalite Inorganic materials 0.000 description 35
- 229910052682 stishovite Inorganic materials 0.000 description 35
- 229910052905 tridymite Inorganic materials 0.000 description 35
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical group CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 32
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 32
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 23
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 19
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 18
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 15
- -1 β-alanyl Chemical group 0.000 description 15
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 14
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 13
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 13
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 13
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 13
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 12
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 12
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 11
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 10
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 10
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 9
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 8
- 150000003457 sulfones Chemical class 0.000 description 8
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 7
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 7
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 7
- OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N isoamyl nitrite Chemical compound CC(C)CCON=O OWFXIOWLTKNBAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 description 7
- 230000001003 psychopharmacologic effect Effects 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 6
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N (2s)-2,6-diaminohexanoic acid;(2s)-2-hydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O NWZSZGALRFJKBT-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 description 5
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 5
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine monohydrate Substances O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 5
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 4
- 102400000739 Corticotropin Human genes 0.000 description 4
- 101800000414 Corticotropin Proteins 0.000 description 4
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 4
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 description 4
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 4
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- PVFCXMDXBIEMQG-JTQLQIEISA-N (2s)-2-(phenylmethoxycarbonylamino)pentanedioic acid Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 PVFCXMDXBIEMQG-JTQLQIEISA-N 0.000 description 3
- VVQIIIAZJXTLRE-QMMMGPOBSA-N (2s)-2-amino-6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCCCC[C@H](N)C(O)=O VVQIIIAZJXTLRE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N D-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 3
- 150000004696 coordination complex Chemical class 0.000 description 3
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 3
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 3
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 3
- 229910000000 metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000004692 metal hydroxides Chemical class 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- OOCCDEMITAIZTP-QPJJXVBHSA-N (E)-cinnamyl alcohol Chemical compound OC\C=C\C1=CC=CC=C1 OOCCDEMITAIZTP-QPJJXVBHSA-N 0.000 description 2
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 2-phenylethanol Chemical compound OCCC1=CC=CC=C1 WRMNZCZEMHIOCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100313477 Arabidopsis thaliana THE1 gene Proteins 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N Dimethylamine Chemical compound CNC ROSDSFDQCJNGOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100027467 Pro-opiomelanocortin Human genes 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical group C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100412671 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RGA1 gene Proteins 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical group C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 150000004965 peroxy acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N tryptamine Chemical compound C1=CC=C2C(CCN)=CNC2=C1 APJYDQYYACXCRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L zinc dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Zn+2] JIAARYAFYJHUJI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- OZSSOVRIEPAIMP-SSDOTTSWSA-N (2r)-5-[amino(nitramido)methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N[N+]([O-])=O OZSSOVRIEPAIMP-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- OJTJKAUNOLVMDX-GFCCVEGCSA-N (2r)-6-azaniumyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)hexanoate Chemical compound NCCCC[C@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 OJTJKAUNOLVMDX-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- RKGFWMYLTBPZGL-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-amino-1-[(2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]sulfinyl-4-methylsulfanylbutan-1-one Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)S(=O)C(=O)[C@@H](N)CCSC RKGFWMYLTBPZGL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RZTMKPNHKUTQSB-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-amino-1-[(2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]sulfonyl-4-methylsulfanylbutan-1-one Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)S(=O)(=O)C(=O)[C@@H](N)CCSC RZTMKPNHKUTQSB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- HAAUASBAIUJHAN-LXOXETEGSA-N (4s)-4-[[(2s)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-(carboxymethylamino)-3-(1h-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-(1h-imidazol- Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(O)=O)C1=CN=CN1 HAAUASBAIUJHAN-LXOXETEGSA-N 0.000 description 1
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical group C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IKPSIIAXIDAQLG-UHFFFAOYSA-N 1-bromoundecane Chemical compound CCCCCCCCCCCBr IKPSIIAXIDAQLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 1H-imidazole Chemical compound C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]acetic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NCC(O)=O VRPJIFMKZZEXLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 3-Phenyl-1-propanol Chemical compound OCCCC1=CC=CC=C1 VAJVDSVGBWFCLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LYUQWQRTDLVQGA-UHFFFAOYSA-N 3-phenylpropylamine Chemical compound NCCCC1=CC=CC=C1 LYUQWQRTDLVQGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 4-ethylmorpholine Chemical compound CCN1CCOCC1 HVCNXQOWACZAFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCXJFMDOHDNDCC-UHFFFAOYSA-N 5-$l^{1}-oxidanyl-3,4-dihydropyrrol-2-one Chemical group O=C1CCC(=O)[N]1 HCXJFMDOHDNDCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101800001415 Bri23 peptide Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 102400000107 C-terminal peptide Human genes 0.000 description 1
- 101800000655 C-terminal peptide Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N Methanethial Chemical compound S=C DBTDEFJAFBUGPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- VSOYJNRFGMJBAV-UHFFFAOYSA-N N.[Mo+4] Chemical compound N.[Mo+4] VSOYJNRFGMJBAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010029333 Neurosis Diseases 0.000 description 1
- 102100035593 POU domain, class 2, transcription factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710084414 POU domain, class 2, transcription factor 1 Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N Phenylpropyl alcohol Natural products CCC(O)C1=CC=CC=C1 DYUQAZSOFZSPHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N Ser-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VVKVHAOOUGNDPJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000003023 adrenocorticotropic effect Effects 0.000 description 1
- OOCCDEMITAIZTP-UHFFFAOYSA-N allylic benzylic alcohol Natural products OCC=CC1=CC=CC=C1 OOCCDEMITAIZTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229940025084 amphetamine Drugs 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 239000003997 corticotropin derivative Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000002178 crystalline material Substances 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEZFGJCSBWYLCC-UHFFFAOYSA-N dicyclohexylazanium;bromide Chemical compound Br.C1CCCCC1NC1CCCCC1 FEZFGJCSBWYLCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N dihydromaleimide Natural products O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKIUAMUSENSFQQ-UHFFFAOYSA-N dimethylazanide Chemical compound C[N-]C QKIUAMUSENSFQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- TXKMVPPZCYKFAC-UHFFFAOYSA-N disulfur monoxide Inorganic materials O=S=S TXKMVPPZCYKFAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical group O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940124280 l-arginine Drugs 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 229910001463 metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- DILRJUIACXKSQE-UHFFFAOYSA-N n',n'-dimethylethane-1,2-diamine Chemical compound CN(C)CCN DILRJUIACXKSQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDAZUJBASMCUAK-UHFFFAOYSA-N n-[2-(1h-indol-3-yl)ethyl]pyridine-3-carboxamide Chemical compound C=1NC2=CC=CC=C2C=1CCNC(=O)C1=CC=CN=C1 ZDAZUJBASMCUAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000015238 neurotic disease Diseases 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- LQRJAEQXMSMEDP-XCHBZYMASA-N peptide a Chemical compound N([C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCCCC[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(\NC(=O)[C@@H](CCCCN)NC(=O)CNC(C)=O)=C/C=1C=CC=CC=1)C(N)=O)C(=O)C(\NC(=O)[C@@H](CCCCN)NC(=O)CNC(C)=O)=C\C1=CC=CC=C1 LQRJAEQXMSMEDP-XCHBZYMASA-N 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 125000000405 phenylalanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940067107 phenylethyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003170 phenylsulfonyl group Chemical group C1(=CC=CC=C1)S(=O)(=O)* 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- XTQHKBHJIVJGKJ-UHFFFAOYSA-N sulfur monoxide Chemical compound S=O XTQHKBHJIVJGKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- QOISWWBTZMFUEL-NSHDSACASA-N tert-butyl (2s)-2-amino-3-phenylpropanoate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 QOISWWBTZMFUEL-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
- 235000005074 zinc chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011592 zinc chloride Substances 0.000 description 1
- LRXTYHSAJDENHV-UHFFFAOYSA-H zinc phosphate Chemical compound [Zn+2].[Zn+2].[Zn+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O LRXTYHSAJDENHV-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229910000165 zinc phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
- C07K14/695—Corticotropin [ACTH]
- C07K14/6955—Corticotropin [ACTH] with at least 1 amino acid in D-form
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
Description
(19) DANMARK (%¾)
(12) FREMLÆGGELSESSKRIFT (ii) 145665 B
DIREKTORATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET
(21) Ansøgning nr. 1716/75 (51) Int.CI.3 C 07 C 103/52 (22) Indleveringsdag 29· mar. 1973 (24) Løbedag 29 · mar. 1973 (41) Aim. tilgængelig 1. okt. 1973 (44) Fremlagt 17· jan. 1983 (86) International ansøgning nr. - (86) International indleveringsdag (85) Videreførelsesdag - (62) Stamansøgning nr. -
(30) Prioritet 31 . mar. 1972, 7204422, NL
(71) Ansøger AKZO N.V., Arnhem, NL.
(72) Opfinder Hendrik Marie Greven, NL.
(74) Fuldmægtig Firmaet Chas. Hude.
(54) Analogifremgangsmåde til frem= stilling af et peptid eller funktionelle derivater heraf.
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af et hidtil ukendt peptid af den almene formel A-L-Glu(X)-L-His-L-Phe-D-Lys(eller D-Arg)-Y χ hvori A betegner H-L-Met, H-D-Met, H-L-Met(O), H-D-Met(O), 3 H-L-Met (02) / H-D-Met (Oj) # des-amino-Met, des-amino-Met (O) , ) des-amino-Met(O2) eller gruppen HjN-B-CO-, hvori B er en ^ ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med henholdsvis 1-6 ) og 2-6 carbonatomer, X betegner gruppen -OH eller -NH0, og l Y betegner gruppen hydroxy, -L-Trp-OH, -L-Phe-OH, , -L-Trp-Gly-OH, -L-Phe-Gly-OH, en (N-phenylalkyl)-aminogruppe ) af formlen 2 145665 -NH-Alk —^ eller en (Ν-β-indolylalkyl)-aminogruppe, hvori Alk betegner en ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med henholdsvis 1-6 og 2--6 carbonatomer,R betegner hydrogen, halogen, hydroxy, eller en alkyl- eller alkoxygruppe med 1-4 carbonatomer, eller funktionelle derivater deraf i form af farmaceutisk acceptable syreadditionssalte, eller N-acylderivater afledt af en alifatisk carboxylsyre med 1-6 carbonatomer, eller usubstituerede amider eller C^-Cg-alkylsubstituerede amider, eller estere afledt af alifatiske eller aralifatiske alkoholer med 1-18 carbonatomer, eller metalkomplekser af de ovennævnte peptider med et tungt opløseligt salt, hydroxid eller oxid af et metal.
Era European Journal of Pharmacology 2, 14 (1967) er det kendt, at visse peptidfragmenter af de naturlige adrenocorticotrope hormoner (ATCH) hæmmer ophævelsen af den betingede afværgereaktion. Peptidet med aminosyresequensen eller aminosyrerækken 1-10 i ACIH har specielt vist sig, at være virksom i denne henseende. Det viste sig yderligere, at de første tre aminosyrer (Ser-Tyr-Ser) endog kunne udelades fuldstændig uden større aktivitetstab. Artiklen ender med den konklusion, at peptidet med aminosyresequensen 4-10 i ACTH, nemlig H-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-OH, er det korteste peptid, og måske nøglesequensen for nævnte aktivitet.
Peptidet med aminosyresequensen 4-10 i ACTH udøver imidlertid ikke blot den psykofarmakologiske egenskab, der er nævnt ovenfor, men også en svag MSH-aktivitet, som sædvanlig i denne type af ACTH-fragmenter. Selv om virkningen af en lav dosering af et MSH-virksomt peptid til mennesker stadig er ukendt, blev der forsket for at finde frem til peptider med mindst den samme psykofarmakologiske virkning, men uden nogen eller i det mindste med reduceret MSH-aktivitet.
3
1456 δ B
I ansøgernes danske patentansøgning nr. 953/73 er det allerede angivet, at N-terminalaminosyren Ι-Met i det oprindelige 4-10 ACTH-pep-tid uden aktivitetstab kan erstattes med D-Met, L- eller D-Met(£ 0),..
I- eller D-Met (-¾ 02), desamino-Met, desamino-Met (-> O), desamino-Met (-> 02) eller gruppen: HgN-B-CO, hvori B betegner: en forgrenet eller uforgrenet alkylengruppe med 1-6 carbonatomer, såsom glycyl, valyl, alanyl, β-alanyl eller a-methylalanyl.
Yderligere beskrives i ansøgernes danske patentansøgning nr. 958/73, at en erstatning af C-terminalpeptidradikalet -I-Trp-Gly-OH i det oprindelige 4-10 ACIH-peptid med en gruppe valgt blandt L-Phe-OH,
I-Phe-Gly-OH og gruppen _^ R
-NH-Alk-^ (N-phenylalkylaminodel) forårsager en betydelig forøgelse af den psykofarmakologiske virkning.
Det har nu overraskende vist sig, at der opnås en yderligere forøgelse af den psykofarmakologiske virkning ved erstatning af aminosyren I-arginin eller L-lysin i det oprindelige 4-10 ACIH-peptid eller ethvert af de modificerede peptider, som er beskrevet i de ovennævnte tidligere indleverede danske patentansøgninger,med den tilsvarende D-aminosyre.
Ved at erstatte aminosyreradikalet L-Arg eller 1-lys i det oprindelige 4-10 ACTH-peptid med det tilsvarende D-Arg- eller D-Iiys-amino= syreradikal stiger den observerede psykofarmakologiske aktivitet almindeligvis med en faktor 10.
Denne modifikation (l-lys eller Ι-Arg mod D-Lys eller D-Arg) inkorporeret i peptiderne, som er angivet i de før nævnte patentansøgninger, forårsager en yderligere aktivitetsforøgelse.
Specielt foretrækkes peptider i overensstemmelse med den almene formel I, hvori I betegner L-Phe-OH, 1-Phe-Gly-OH, en (N-p-indolylal= kyl)-amino- eller (N-phenylalkyl)-aminogruppe, som tidligere defineret, og A kan have de før nævnte betydninger, men bør fortrinsvis betegne L-Met, l-Met(-*0), I-Met(-+02), desamino-Met, desamino-Met(-*0), desamino-Met(-^02) eller β-Ala.
. 145665 4
Specielt de følgende peptider viste sig at have en meget høj psyko-farmakologisk aktivitet: H-l-Met-l-Glu-I-His-Ii-Phe-D-Arg (eller D-lys)-I-Phe-OH, og det tilsvarende sulfoxid eller den tilsvarende sulfon, H-L-Met-L-Glu-I-His-Ii-Phe-D-Arg (eller D-lys)-I-Phe-Gly-OH, og det tilsvarende sulfoxid eller den tilsvarende sulfon, H-I-Met-L-Glu-I-His-L-Phe-D-Arg (eller D-Lys)-Ira (Tra = tryptamid) og sulfoxidet eller sulfonen, desamino-Met-Ir-Glu-l-His-L-Phe-D-Arg (eller D-Iys)-L-Phe-OH, eller det tilsvarende sulfoxid eller den tilsvarende sulfon, Η-β-Ala-L-Glu-Ii-His-Ii-Phe-D-Arg (eller D-lys)-L-Phe-OH, desamino-Met-l-Glu-l-His-Ii-Phe-D-lys (eller D-Arg)-Ira eller det tilsvarende sulfoxid eller den tilsvarende sulfon.
Udfra syntetisk-kemiske overvejelser .foretrækkes D-Lys-peptideme fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse i forhold til de tilsvarende D-Arg-peptider. De lysinholdige peptider synthetiseres i almindelighed lettere end de argininholdige peptider.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af de omhandlede hidtil ukendte forbindelser er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del anførte. Fremgangsmåderne, som almindeligvis anvendes til fremstilling af de omhandlede forbindelser, kan resumeres på følgende måde: a) kondensation af en forbindelse (aminosyre, peptid) med en fri carboxylgruppe og andre beskyttede reaktive grupper med en forbindelse (aminosyre, peptid eller amin) med en fri aminogruppe og andre beskyttede reaktive grupper i nærværelse af et kondensationsmiddel, b) kondensation af en forbindelse (aminosyre, peptid) med en aktiveret carboxylgruppe og eventuelt andre beskyttede reaktive grupper med en forbindelse (aminosyre, peptid, amin) med en fri NH2-SruPPe og eventuelt andre beskyttede reaktive grupper, 5 145665 c) kondensation af en forbindelse (aminosyre, peptid) med en fri carboxylgruppe og eventuelt andre beskyttede reaktive grupper med en forbindelse (aminosyre, peptid, amin) med en aktiveret aminogrup-pe og eventuelt andre beskyttede reaktive grupper, hvorefter beskyttelsesgrupperne fjernes om nødvendigt.
Aktiveringen af carboxylgruppen kan f.eks. gennemføres ved at omdanne carboxylgruppen til et syrehalogenid, et azid, anhydrid, imida= zolid, eller en aktiveret ester, såsom N-hydroxysuccinimidesteren eller p-nitrophenylesteren.
Aminogruppen kan aktiveres ved at den omdannes til et phosphitamid eller ved hjælp af "phosphor-azo"-metoden.
Fremgangsmåder, som sædvanligvis anvendes til de ovennævnte kondensationsreaktioner er: carbodiimidmetoden, azidmetoden, den blandede anhydridmetode og den i "Ihe Peptides" bind I, 1965 (Acad. Press) af E. Schroder og K. I/ubke beskrevne aktiverede estermetode. Yderligere kan Merrifields såkaldte fast-fase-metode, der er beskrevet i J.Am.Chem.Soc. 85, 2149 (1963)»anvendes til fremstillingen af de foreliggende peptider og peptidderivater.
De reaktive grupper, som ikke får lov til at deltage i kondensationsreaktionen, beskyttes effektivt ved hjælp af de såkaldte beskyttelsesgrupper, der let kan fjernes igen, f.eks. ved hydrolyse eller reduktion. En carboxylgruppe kan således beskyttes effektivt ved forestring med methanol, ethanol, tertiær butanol, benzylalkohol eller p-nitrobenzylalkohol, eller ved omdannelse til et amid. Denne sidstnævnte beskyttelsesgruppe er det imidlertid meget vanskeligt at fjerne, således at det anbefales kun at anvende denne gruppe til beskyttelse af carboxylgruppen i C-terminalaminosyren i det sidste peptid eller γ-carboxylgruppen i glutaminsyre. I dette tilfælde fører peptidsyntesen direkte til amidet af et peptid i overensstemmelse med formlen I.
Grupper, som er i stand til at beskytte en aminogruppe effektivt, er sædvanligvis syregrupper, f.eks. en syregruppe afledt af en ali-fatisk, aromatisk, aralifatisk eller heterocyclisk carboxylsyre, så- 145665 6 som eddikesyre, benzoesyre eller pyridinearboxylsyre eller en syregruppe afledt af en carbonsyre såsom gruppen ethoxycarbonyl, ben= zyloxycarbonyl, t-butyloxyearbonyl eller p-methyloxybenzyloxycarbo= nyl eller en syregruppe afledt af en sulfonsyre, såsom gruppen ben= zensulfonyl eller p-toluensulfonyl, men der kan også anvendes andre grupper, såsom substituerede eller usubstituerede aryl- eller aral= kylgrupper f.eks. benzyl og triphenylmethyl eller sådanne grupper, som ortho-nitrophenylsulfenyl og 2-benzoyl-l-methylvinyl.
For det meste kan det også anbefales, at beskytte arginins guani= dingruppe, lysins e-aminogruppe og histidins imidazolgruppe, men denne beskyttelse er ikke absolut nødvendig. Almindelige beskyttelsesgrupper i denne forbindelse er en tertiær butyloxyearbonylgruppe eller en tosylgruppe for lysins e-aminogruppe, en nitrogruppe for arginins guanidingruppe og en benzylgruppe, en dinitrophenylgruppe eller en tritylgruppe for histidins imidazolgruppe.
Beskyttelsesgrupperne kan afspaltes ved hjælp af forskellige sædvanlige metoder, afhaaigig af arten af den foreliggende gruppe, f.eks. ved hjælp af trifluoreddikesyre eller ved mild reduktion f.eks. med hydrogen og en katalysator såsom palladium eller med HBr i iseddi= kesyre.
De ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede peptider, der som N-terminalgruppen har en methionylsulfoxid- eller desaminomethionyl= sulfoxidgruppe, kan fremstilles udfra det tilsvarende Met- eller desamino-Met-peptid ved hjælp af en i og for sig kendt mild oxidation, f.eks. med fortyndet hydrogenperoxid eller en persyre. En sådan oxidation giver en blanding af S- og R-sulfoxidet (= d- eller 1-sulfoxid), hvilken blanding kan separeres i de særskilte diaste-reomere forbindelser på sædvanlige måde.
Ted kobling af S- eller R-sulfoxidet (= d- eller 1-sulfoxid) af methionin eller desaminomethionin med peptidet H-Glu(X)-His-Phe-D-Arg(eller D-Lys)-Y, hvori X og Y har de ovenfor anførte betydninger, kan de særskilte enantiomere også fås ad direkte vej.
Ifølge opfindelsen frenstillede peptider, der som N-terminalgruppen har en me= thionylsulfon- (Met402) eller desaminomethionylsulfongruppe (des= amino-Met-»02) kan mest hensigtsmæssigt fremstilles ved hjælp af en i og for sig kendt oxidation af det tilsvarende Met- eller desamino-
Met-peptid, f.eks. med #2^2 eller en persyre.
7 U5655
Med funktionelle derivater af peptiderne og peptidderivaterne, jder kan fremstilles ifølge opfindelsen, menes: 1. De farmaceutisk acceptable syreadditionssalte af peptiderne og peptidderivaterne, 2. peptider og peptidderivater, hvori én eller flere frie amino= grupper er blevet acyleret med en acylgruppe afledt af en alifatisk carboxylsyre med 1-6 carbonatomer, såsom en acetyl= gruppe, 3. usubstituerede amider eller med lavere alkyl (1-6 C) substituerede amider af de peptider og peptidderivater fremstillet ifølge opfindelsen, som har en fri carboxylgruppe, såsom en N(CH3)2-eller N(C2H5l2-rgruppe.
4. estere af de foreliggende peptider afledt af alifatiske eller aralifatiske alkoholer med 1-18 carbonatomer, specielt de lavere alifatiske (1-6 C) alkoholer, såsom methanol, ethanol, bu= tanol, pentanol eller cyclohexanol og de lavere aralifatiske (7-10 C) alkoholer, såsom benzylalkohol, phenylethylalkohol, phenylpropylalkohol eller cinnamylalkohol, 5. metalkomplekser dannet ved at bringe peptiderne af peptidderivaterne i kontakt med et tungt opløseligt salt, hydroxid eller oxid af et metal, fortrinsvis zink.
Syreadditionssaltene opnås ved at omsætte de foreliggende forbindelser med en farmaceutisk acceptabel, organisk eller uorganisk syre såsom HC1, phosphorsyre, eddikesyre, maleinsyre, vinsyre eller ci= tronsyre.
Som allerede kort fortalt har de foreliggende peptider og peptidde= rivater såvel som deres funktionelle derivater, der er defineret ovenfor, værdifulde psykofarmakologiske virkninger. De foreliggende forbindelser hæmmer ophævelsen af den betingede afværgereaktion, g 145S65 dette betyder, at de i almindelighed kan anvendes som antidepressions-midler. Mere specielt kan de anvendes til behandling af bestemte mentale forstyrrelser, hvorved en stimulering af den mentale optræden ønskes, såsom ved visse neurosetyper og ved alderdomsskrøbeligheder (senilitet).
De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan administreres parenteralt, oralt, sublingualt, rektalt eller intranasalt. Peptiderne tilberedes fortrinsvis til en form, som er velegnet til parenteral administration til hvilket formål de opløses, suspenderes eller emulgeres i en egnet væske. Blandet med egnede hjælpestoffer og/eller fyldstoffer kan peptiderne imidlertid også tilberedes i en form, som er velegnet til oral, sublingual, rektal eller intranasal administration.
De omhandlede peptider eller peptidderivater administreres fortrinsvis parenteralt i en daglig dosis fra 0,01 ug til 50 yg per kg legemsvægt, afhængig af peptidets aktivitetsniveau. Til oral, sublingual, rektal eller intranasal administration kan den daglige dosis være betydelig højere, fortrinsvis fra 0,1 mg til 50 mg per kg legemsvægt.
Metalkomplekser kan opnås ved at bringe peptiderne i kontakt med tungtopløselige metalsalte, metalhydroxider eller metaloxider. Som tungtopløselige metalsalte anvendes almindeligvis metalphosphaterne, metalpyrophos= phaterne og metalpolyphosphaterne.
Metaller, som kan anvendes ved denne fremgangsmåde, er metallerne, som hører til B-grupperne i det periodiske system, f.eks. cobolt, nikkel, kobber, jern og fortrinsvis zink, såvel som metallerne som hører til hovedgrupperne i det periodiske system, og er i stand til at danne komplekser såsom magnium og aluminium. Tilberedningen af de nævnte metalkomplekser finder sted på den sædvanlige måde.
Således kan et metalkompleks f.eks. fås ved at tilsætte peptidet og et tungtopløseligt metalsalt, metalhydroxid eller metaloxid til et vandigt medium. Metalkomplekset kan også fås ved at tilsætte et al= kalisk medium til en vandig opløsning af peptidet og et uopløseligt metalsalt til dannelse af det uopløselige peptid-/metalhydroxid-kompleks.
9 145666
Metalkomplekset kan yderligere fås ved at tilsætte peptldet et opløseligt metalsalt og et opløseligt salt til et vandigt, fortrinsvis alkalisk medium, til dannelse af et uopløseligt peptid-/metalsalt-kompleks in situ.
Metalkomplekserne kan anvendes straks som suspensioner, eller f.eks. lyophiliseres og derefter suspenderes igen.
Biologisk aktivitet: Ophævelse af den betingede afværgereaktion.
Hvide hanrotter, der hver vejer ca. 150 g, blev konditioneret ved hjælp af den såkaldte stangspringeprøve. Det betingede stimulus var et lys, der fandtes over buret i 5 sek., hvorpå det ikke-betingede chokstimulus blev leveret gennem burets gittergulv, I tre efter hinanden følgende dage blev der gennemført 10 prøver hver dag med et gennemsnitlig interval på 60 sek. Dagen efter denne tilegnelsesperiode blev ekstinktionen (ophævelsen) studeret i sessioner på 10 prøver. Alle dyrene, som havde 8 eller flere positive reaktioner i den første ekstinktionssession,blev behandlet med stoffet, som skal afprøves eller med placebo. Herefter blev ekstinktionssessioner på hver 10 prøver gennemført 2 og 4 timer efter behandlingen af dyrene med stoffet, som skal afprøves.
I den følgende tabel sammenlignes resultaterne med det kendte pep= tid 4-10 ACTH med nogle peptider fremstillet ifølge denne opfindelse.
10 145665
Peptid *) Dosis i Første Anden Tredie Styr- ·
Ug per sessi- sessi- sessi- kefor- dyr sub- on 0 on e£- on e£- hold cutant timer ter 2 ter 4 sammentimer timer lignet med 4- ____10Æ3H- H-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly- 100 887 OH (4-10 ACIH) 30 9 7 5 __________10_______9______6______3______1___ H-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-OH 10 9 8 6 3 9 7 4 >3 H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg- OH 10 9 7 6 3 9 6 4 >3 H-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Trp-OH 10 10 9 9 3 9 7 7 >10 H-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Phe-OH 0,3 8 8 9 0,1 9 8 5 300 H-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Tra 0,3 9 9 8 0,1 9 8 7 500 H-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-Gly-OH 0,3 9 8 8 0,1 9 8 4 300 H-Met (->0) -Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH 0,03 9 8 8 0,01 9 7 5 >1000 Η- β - Ala-Glu-His-Phe-D-Ity s-Phe-OH 0,3 8 9 8 0,1 9 8 7 500 H-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-L-Ami 1 997 0,3 9 8 4 100 H-Met (-*09) -Glu-His-Phe-D-lys-Phe- 0,1 10 9 7 OH ^ 0,03 9 7 4 1000 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Phe- 0,1 8 8 8 OH 0,03 10 10 7 0,01 9 6 2 1000 desamino-Met(-»0?)-Glu-His-Phe-D- 0,03 9 9 8 lys-Phe-OH 0,01 9 7 5 0,003 8 6 3 >1000 *iled hensyn til de forskellige forkortelser, som anvendes i denne beskrivelse, skal følgende bemærkes: I Hvis der ikke er blevet angivet nogen optisk konfiguration, menes 1-formen.
li 145665 II De følgende forkortelser er blevet anvendt for de beskyttende eller aktiverende grupper: Z = benzyloxycarbonyl
Boc = tertiær butyloxycarbonyl tBu = tertiær butyl
Me = methyl ONP = p-nitrophenyloxy
Su = succinimido III Bor opløsningsmidlerne eller reagenserne er blevet anvendt følgende forkortelser:
Bz = benzen lo = toluen
EtOH = ethanol
Bu = butanol
Py = pyridin
Ac eller HAc = eddikesyre
Bo = myresyre
Am = amylalkohol iPro = isopropanol DMB = dimethylformamid THE = tetrahydrofuran DCCI = dicyclohexylcarbodiimid DCHU = dicyclohexylurinstof IAA = triethylamin TEA = trifluoreddikesyre
Wa = vand IV Bor aminosyren er der blevet anvendt følgende forkortelser:
Met = methiony1 12 U5666
Met(*0) = methi onyIsulf oxid (racemisk)
Met(d, ->0) = methionyl(d) sulf oxid
Met(l,-»0) = methionyl(l)sulfoxid
Met(-*02) = methionylsulf on
Glu(X) eller Glu = glutamyl (X = OH)
Glu(X) eller Gin = glutaminyl (X = NH2)
His = histidyl
Phe = phenylalanyl
Arg = arginyl lys = lysyl
Gly = glycyl
Val = valyl
Ala = alanyl β-Ala = β-alanyl (a-Me)Ala = a-methylalanyl V forkortelser anvendt for andre rester:
Amf = (N-l-phenylis opropyl)-aminogruppe (afledt af amfetamin)
Ira = (N-p-indolylethyl)-aminogruppe (afledt af tryptamin) PEA = (N-phenylethyl)-aminogruppe PPA = (N-phenylpropyl)-aminogruppe HPEA = (N-p-hydroxyphenylethyl)-aminogruppe desamino-Met = desaminomethionyl (eller γ-methyl= thiobutyryl) desamino-Met (-^0) = desaminomethionyl sulf oxid desamino-Met (-»02) = desaminomethionylsulf on.
fremstilling af udgangsstoffer A. fremstilling af Boc-Met-Glu (OtBu) -His-I^H^ 1) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-OMe
Boc-Met-N2H^ (10,52 g) opløst i 75 ml DME afkøles til 0°C, hvor- 13 145665 efter der tilsættes 25,6 ml 3,4 N HC1 i THE1 og ved -20°C 5,85 ml (43,3 mmol) isoamylnitrit. Blandingen omrøres i 7 minutter ved -20°C og tilsættes derpå til en opløsning af 17,05 g H-Glu(OtBu)-His-OMe, 2HC1 i 50 ml dimethylformamid og tilstrækkeligt triethylamin til at indstille blandingens endelige pH-værdi på 6,9. Blandingen omrøres i 3 dage ved 0°C, hvorefter det dannede triethylamin,HC1 filtreres fra og filtratet inddampes til tørhed. Resten opløses i 150 ml ethyl= acetat/vand. Tandlaget skilles fra og ethylacetatlaget vaskes 2 gange med vand. Derpå forenes vandlagene og der ekstraheres igen med ethylacetat (2 gange med 25 ml). Ethylacetatlagene tørres, hvorefter opløsningen inddampes til ca. 100 ml og henstilles ved 0°C.
Smeltepunkt: 138-142°C.
Rf i Bu:Ac:Wa (4:1:1) = 0,59 på Si02· 2) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N2H5 3,7 g af den ovennævnte methylester opløses i 70 19I methanol, hvorefter der tilsættes 3,7 ml hydrazinhydrat. Blandingen omrøres i 5 timer ved stuetemperatur. Opløsningen inddampes til tørhed og omrøres derpå med vand og tørres.
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,39 på Si02.
B. Fremstilling af Boc-D-Met-Glu(0tBu)-His-N2H^ 1) Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-OMe
Boc-D-Met-N2H^ (10,52 g) opløst i 75 ml DMF afkøles til 0°C, hvorefter 25,6 ml 5,4 N saltsyre i THE1 tilsættes og ved -20°C 5,85 ml isoamylnitrit tilsættes. Blandingen omrøres i 7 minutter, hvorefter 17,05 g H-Glu(0tBu)-His-0Me,2HCl i 50 ml DMF tilsættes, og pH-værdi-en indstilles på 6,9 med triethylamin. Blandingen omrøres i 3 dage ved 0°C, hvorefter den filtreres og filtratet inddampes til tørhed i vakuum. Resten optages i 150 ml ethylacetat/vand og vaskes med vand. Efter tørring inddampes den organiske fase til 100 ml og henstilles ved 0°C. De resulterende krystaller tørres.
Rf i Bu:Ac:Wa (4:1:1) = 0,63 på Si02·
Smeltepunkt: 69-71°C.
14 145685 2) . Boc-D-Met-Glu( OtBu)-His-NgH^ 3,2 g (5,45 mmol) af den ovennævnte methylester opløses i 60 ml methanol, hvorefter der tilsættes 3,7 ml hydrazinhydrat. Blandingen omrøres i 5 timer ved stuetemperatur, hvorefter methanolet sidestilleres i vakuum og resten omrøres med vand. Efter tørring vi-derebehandles hydrazidet straks.
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,37 (Si02).
C. Fremstilling af Boc-Val-Glu(OtBu)-His-NgH^ 1) Boc-Val-Glu(OtBu)-His-OMe
Boc-Var-OH (3,26 g, 15 mmol) opløses i 20 ml methylenchlorid, hvorefter 1,73 g N-hydroxysuccinimid tilsættes. Blandingen afkøles til -20°C, hvorefter der tilsættes 3,09 g DCCI opløst i 20 ml afkølet methylenchlorid. Den resulterende opløsning omrøres i 1 time ved -20°C og derpå i 20 timer ved +20°C.
Efter filtrering af det resulterende DCHU inddampes filtratet til tørhed og resten opløses i 30 ml DMF, hvorefter 7,33 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe (fremstillet ifølge Kappier Helv. 44» 1991» 1961) og 1,4 g 10io palladium-på-carbon tilsættes. Hydrogen bobles gennem blandingen i 5 timer, hvorefter blandingen omrøres i 1 nat, filtreres og filtratet inddampes til tørhed.
Resten opløses i vandig ethylacetat og vaskes med vand, natriumhy= drogencarbonat og vand. Den organiske fase tørres, hvorefter ethyl= acetatet inddampes i vakuum. Resten omkrystalliseres fra ethylacetat/ petroleumsether.
Udbytte: 3,95 g, smeltepunkt: 117-119°C.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,55 (Si02).
2) Boc-Val-Glu(OtBu)-His-N2H3 3,73 g af den ovennævnte methylester opløses i 85 ml methanol, hvorefter 3,72 ml hydrazinhydrat tilsættes. Blandingen omrøres i 7 timer ved stuetemperatur, hvorefter opløsningen inddampes til tørhed og resten sønderdeles med ether.
25 145365
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,55 på Si02.
D. Fremstilling af Boc^-Ala-GluiOtBui-His-NgH^ 1) Boc^-Ala-Glu(OtBu)-His-OMe
Boc-p-Ala-OH (5,78 g) opløses i methylenchlorid. Opløsninge afkøles til 0°C, hvorefter 2,3 g N-hydroxysuccinimid tilsættes. Blandingen afkøles yderligere til -22°C, hvorefter der tilsættes 4,12 g DCCI. Blandingen omrøres successivt i 30 minutter ved -22°C, i 3 timer ved 0°C og i 12 timer ved stuetemperatur. Det dannede bundfald (DCHU) filtreres fra, filtratet inddampes til tørhed og resten optages i dimethylformamid. Til denne blanding tilsættes 9,77 g Z-Glu(OtBu)-His-OMe og yderligere 1,5 g palladium-på-carbon som katalysator. Hydrogengassen bobles gennem gassen i 5 timer, hvorefter blandingen omrøres i 12 timer. Katalysatoren affiltreres derpå og filtratet inddampes til tørhed. Resten optages i ethylacetat og opløsningen vaskes successivt med natriumhydrogencarbonatopløsning (5%) og vand. Ethylacetatfasen tørres, hvorefter opløsningen inddampes til tørhed og resten omkrystalliseres fra ethylacetat/petro= leumsether (1:1).
Smeltepunkt: 93-95°C.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,25 på Si02.
2) Boc-3-Ala-Glu(OtBu)-His-N2H5
Den under 1) opnåede methylester (3,0 g) opløses i 60 ml methanol, hvorefter der tilsættes 3 ml hydrazinhydrat. Blandingen omrøres i 6,5 timer ved stuetemperatur, hvorefter opløsningen inddampes til tørhed og resten sønderdeles med tør ether. Stoffet blev straks anvendt til yderligere reaktioner.
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,42 på SiOg.
E. Fremstilling af Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2H^ 1) Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-OMe På samme måde som beskrevet under C. l) fremstilles Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-OMe ved at omsætte Boc-Gly-OH med H-Glu(OtBu)-His-OMe.
16 145665
Smeltepunkt: 103-108°C.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,43 på SiOg.
2) Boc-Gly-Glu(OtBuJ-His-NgH^
Yed at omsætte dette stof med hydrazinhydrat som beskrevet under A.
2).fremstilles Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2H^.
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,32 på SiOg.
E. På samme måde som beskrevet under C og D fremstilles: 1) Boc-Ala-Glu(0tBu)-His-N2H3
Rf = 0,33 (Am:iPro:Wa = 10:4:5)· 2) . Boc- (cc-Me) Ala-Glu( OtBu) -His-NgH^
Rf = 0,31 (Am:iPro:Wa = 10:4:5)· 3) Des amino-Me t-Glu (OtBu) -Hi s -NgH^
Rf = 0,52 (Bu:Ac:¥a = 4:1:1).
G. fremstilling af Boc-Met-Gln-His-NgH^ På samme måde som beskrevet under C. l) kobles aminosyrederivatet boc-Met-OH til H-Gln-His-OMe opnået ud fra det tilsvarende Z-beskyt-tede peptid (Helv. 44, 476, 1961) ved hydrogenering med 10$ palla= dium-på-carbon, hvilket giver den beskyttede peptidester: Boc-Met-Gln-His-OMe, hvilket peptid middelbart efter viderebearbejdes til det tilsvarende hydrazid ved hjælp af den under C. 2) beskrevne fremgangsmåde .
Rf i Am:iPro:Wa (10:4:5) = 0,28 på SiOg.
H. Syntese af H-Phe-D-Arg-OH
1) Z-Phe-D-Arg (N02)-OMe
En opløsning af 12,8 g H-D-Arg(NOg)-OMe,HCl i 200 ml DME afkøles til +5°C, hvorefter der tilsættes 4,8 g IAA. Den resulterende tri= ethylamin, HC1 filtreres fra, hvorefter 20 g Z-Phe-ONP tilsættes.
17 145665
Blandingen omrøres i 4 dage ved stuetemperatur, hvorpå en del af DMP-mængden afdestilleres og resten fortyndes med 400 ml ethyl= acetat/vand. Den organiske fase vaskes med citronsyre, ammonium= hydroxid og vand, hvorefter ethylacetatlaget tørres og inddampes. Efter omkrystallisation fra ethylacetat/petroleumsether er smeltepunktet 89-93°C.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,62 (Si02).
2) Z-Phe-D-Arg(N02)-OH
5 g af det ovennævnte dipeptid opløses i dioxan og forsæbes derpå med 1,1 ækvivalent natriumhydroxid. Denne opløsning omrøres i 2 timer og syrnes derpå med IN saltsyre (pH-værdi = 2) og fortyndes med en tidobbelt vandmængde. Det resulterende bundfald omrøres i 3 timer ved 0°C og affiltreres.
Udbytte: 3,1 g. Smeltepunkt: 118-121°C (dekomponering).
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,11 (Si02).
3) H-Phe-D-Arg-OH,acetat 1 g af Z-Phe-D-Arg(N02)-OH fra 2) opløses i 20 ml 90 $ig eddikesyre, hvorefter der tilsættes 100 mg 10$ palladium-på-carbon. Hydrogen bobles gennem blandingen i 2 dage og herefter filtreres den sorte reaktionsblanding over hyflo, filtratet inddampes til tørhed og resten opløses i t-butanol/vand (l:l) og lyophiliseres.
Udbytte: 0,4 g dipeptidacetat.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,21 (SiOg).
4) På samme måde som beskrevet under 3) omdannes Z-Phe-D-Arg(N02)-OMe (fra 1)) til H-Phe-D-Arg-OMe,acetatet.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,40 (Si02).
E. Syntese af H-Phe-D-lys(Boc)-OH
l) Z-Phe-D-lys(Boc)-OBzl
Ud fra 17,7 g H-D-Iiys(Boc)-OBzl,HCl fremstilles dipeptidet Z-Phe-
18 U566S
D-lys(Boc)-OBzl på samme måde som beskrevet i eksempel H. l).
Udbytte efter krystallisation fra ethylacetat/ether: 72fo (olie).
Rf i Bz:EtOH (9:1) = 0,54 (Si02).
2) H-Phe-D-lys(Boc)-OH
2 g Z-Phe-Iys(Boc)-OBzl opløses i 50 ml methanol, hvorefter 0,2 g 10fo palladium-på-carbon tilsættes og hydrogen bobles gennem blandingen i 5 timer. Blandingen filtreres derpå og filtratet inddampes til tørhed.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,31 (Si02).
I. Syntese af H-Phe-D-Lys(Boc)-Trp-OH og derivater
1) Z-Phe-D-lys(Boc)-2!rp-0H
Z-Phe-ONP (4,6 g) opløses i 60 ml DMF. Derpå tilsættes 4j4 g H-D-Iys(Boc)-Irp-OMe og blandingen omrøres i 20 timer ved 20°C, hvorefter der tilsættes 0,2 g 2-dimethylaminoethylamin. Reaktionsblandingen omrores i yderligere 2 timer, hvorefter opløsningsmidlet inddampes og resten opløses i 250 ml ethylacetat/vand. Denne opløsning vaskes successivt med en opløsning af 5f« kaliumcarbonat i vand, 0,5 N saltsyre og vand, hvorefter den organiske fase tørres på natrium= sulfat.
Efter filtrering inddampes filtratet til tørhed og den olieagtige rest forsæbes. lil dette formål opløses 6,54 g af esteren i 100 ml dioxan, hvorefter der tilsættes 11,8 ml 1,5 N NaOH. Blandingen omrøres i 2 timer, hvorefter den opnåede reaktionsblanding syrnes med 1,5 N saltsyre til en pH-værdi 7, hvorpå dioxanet bringes til at fordampe i vakuum. lil resten tilsættes ethylacetat/vand og det vandige lags pH-værdi indstilles på 2 med fortyndet saltsyre uden separering af lagene. Den organiske fase vaskes med vand og tørres. Fjernelse af ethylacetatet ved destillation i vakuum gav en olie, der størknede efter omrøring med ether.
Rf i Am:Py:Wa (5:3:2) = 0,81 (Si02). Smeltepunkt 85°C (dekomponering).
2) H-Phe-D-lys(Boc)-Trp-OH,HC1 19 145665 1,85 g af tripeptidsyren fra 1) opløses i 40 ml DM]? og 1 ækvivalent saltsyre. Derpå tilsættes 350 mg 105¾ palladium-på-carbon, hvorefter hydrogen bobles gennem blandingen i 6 timer. Efter reduktionen fra-filtreres katalysatoren og filtratet viderebehandles straks yderligere.
Rf i Am:Py:Wa (5:3:2) = 0,70 (Si02).
3) Z-Phe-D-Lys(Boc)-Trp-NH2 eller Z-Phe-D-Iys(Boc)-!Drp-N(CH^)2 2 g af den rå ester (opnået ved hjælp af den under 1) beskrevne fremgangsmåde) tilsættes til 25 ml af en 10 N ammoniakopløsning eller dimethylaminopløsning i methanol. Blandingen omrøres derpå i 2 dage, hvorefter den inddampes til tørhed og resten omkrystalliseres fra methanol.
Rf i Bz:Et0H (8:2) = 0,35 (Si02) for amidet og 0,41 for dimethylami= det.
4) Z-Phe-D-Iys(Boc)-Trp-OC^ H23 Z-Phe-D-Iys(Boc)-Trp-OH fra l) (3,6 g) opløses i 45 ml DM3?, hvorefter der tilsættes 1,35 g undecylbromid og 1,0 g dicyclohexylamin. Blandingen omrøres i 48 timer ved 35°C og i 2 timer ved 0°C, hvorefter det dannede dicyclohexylammoniumbromid filtreres fra og filtratet inddampes til tørhed i vakuum. Resten optages i ethylacetat, vaskes med 0,1 N HC1, vand, en 10$ig hydrogencarbonatopløsning og vand. Den organiske fase tørres i et kort tidsrum på natriumsulfat, inddampes derpå delvis i vakuum og krystalliseres ved tilsætning af n-hexan. Udbytte: 3,2 g.
Rf i Bz:Et0H (8:2) = 0,45 (Si02).
5) Fjernelse af Z-gruppe På tilsvarende måde som beskrevet under 2) hydrogeneres 1 g af tripeptiderne fremstillet under 3) og 4) med hydrogen i nærværelse af palladium-på-carbon.
Der blev opnået HCl-saltene af de følgende peptider: 1. H-Phe-D-lys(Boc)-Irp-NH2 Rf* = 0,73 på Si02 20 145865 2. H-Phe-D-Lys(Boc)-Trp-N(CH^)2 Rf* = 0,77 på SiOg 3. H-Phe-D-Lys(Boc)-Irp-OCi;LH25 Rf* = 0,78 på Si02
Rf i Am:Py:¥a (5:3:2).
M. Syntese af H-Phe-D-Lys(Boc)-Tra 1) Z-Phe-D-Iys(Boc)-!Era
Udfra Z-Phe-ONP og H-D-Lys(Boc)-Tra (olie; Rf i Am:Po:¥a (7:2:1) = 0,70) fremstilles peptidet Z-Phe-D-lys(Boc)-Tra på samme måde som beskrevet i eksempel 1. 1).
Omkrystallisation fra methanol/ether/petroleumsether gav efter få dages forløb et krystallinsk materiale.
Smeltepunkt: 159-162°C.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,73 (SlOg).
2) H-Phe-D-Lys(Boc)-Ira
Hydrogenering af dipeptidamidet fra l) i methanol med 10fo palladium-på-carbon som katalysator gav H-Phe-D-lys(Boc)-Tra.
Udbytte: 92<fo.
Rf i Am:Py:¥a (5:3:2) = 0,75 på Si02 Rf i Bu:Ac:¥a (4:1:1) = 0,80 på SiOg.
N. Syntese af H-Phe-D-Arg-Tra 1) Z-Phe-D-Arg(NOg)-Ira A-Phe-ONP (2,1 g) opløses i 20 ml DM3?, hvorefter denne lysegule opløsning afkøles til -5°C. Derpå tilsættes en afkølet opløsning af 1,81 g H-D-Arg(NOg)-Tra, opnået ud fra Boc-D-Arg(NOg)-Tra (smeltepunkt 114°C, dekomponering), til denne opløsning. Blandingen omrøres i 20 timer ved 0°C og i 5 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen inddampes til tørhed og resten omrøres tre gange med ether.
Det lysegule bundfald krystalliseres nogle få gange fra ethanol/ 21 145665 ether.
Rf i Bz:Et0H (8:2) = 0,41 på Si02.
2) H-Phe-D-Arg-Tra,acetat 1,5 g af det ovennævnte peptid opløses i 20 ml 90 $ig eddikesyre, hvorefter der tilsættes 150 mg 10 <?<> palladium-på-carbon. Derpå bobles hydrogen gennem blandingen i 2 dage, hvorefter reaktionsblandingen filtreres over hyflo, filtratet inddampes til tørhed, resten opløses i t-butanol/vand (1:1) og derpå lyophiliseres.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4?l/4:l) = 0,26 på SiOg.
0. Syntese af H-Phe-D-Arg-Irp-Gly-OH,acetat
1) Boc-D-Arg(N02)-Irp-Gly-0H
Boc-D-Arg(N02)-OH (5,76 g) opløses i 70 ml DMF og 2,52 ml TAA. Denne opløsning afkøles til -10°C, hvorefter der tilsættes 2,38 ml isobutylchlorformiat og blandingen omrøres i 10 minutter ved -10°C.
En opløsning af 4,7 g H-Trp-Gly-OH i 40 ml DME og 2,0 ml triethyl= amin afkøles til -5°C og tilsættes til det blandede anhydrid, hvorefter slut-pH-værdien indstilles på 7,2 med SAA. Blandingen omrøres i 2 timer ved 0°C og i 20 timer ved stuetemperatur, hvorefter bundfaldet filtreres fra og filtratet inddampes til tørhed. Derpå opløses reaten i vandig ethylacetat. Den organiske fase vaskes med ci= tronsyre, derpå med saltholdigt vand ag tørres derpå.
Efter filtrering afdampes en del af ethylacetatet til et volumen på ca. 100 ml, hvorefter der tilsættes tilstrækkeligt ether til at forårsage uklarhed. Blandingen henstår i nogen tid, hvorefter det på denne måde opnåede bundfald filtreres fra.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,65 på Si02· 2) H-D-Arg(N02)-Trp-Gly-OH,HC1 6 g tripeptid suspenderes i methylenchlorid, hvorefter tør hydrogen= chloridgas bobles gennem i 30 minutter. Efter nogen tid påbegyndes udfældningen af HCl-saltet af tripeptidet. Blandingen filtreres ef- 22 145665 ter 2 timers omrøring ved 20°C. Resten vaskes 3 gange med tør ether og tørres over fast kaliumhydroxid.
Rf i Am:Py:Wa (5:3:2) = 0,54 på Si02.
3) Udfra tripeptidet H-D-Arg(N02)-Srp-Gly-0H,HCl beskrevet under 2) fremstilles tetrapeptidet ved kondensation med Z-Phe-ONP på den i eksempel N. l) beskrevne måde. Udbytte af Z-Phe-D-Arg(N02)-Trp-Gly-OH: 63$.
Rf i BzrEtOH (8:2) = 0,12 på Si02.
4) H-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH,acetat 1,5 g af peptidet fra 3) hydrogeneres på samme måde som beskrevet i eksempel N. 2).
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,21 på Si02· P. Syntese af H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu 1) Z-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu Z-D-lys(Boc)-ONP (10,03 g) opløses i 50 ml DMF. Denne opløsning afkøles til -20°C, hvorefter den tilsættes til en opløsning af 4,1 ' g H-Phe-OtBu i 75 ml DME. Blandingen omrøres i 1 time ved 0°C og i 20 timer ved 20°C, hvorefter reaktionsblandingen inddampes til tørhed. Den gule rest opløses i ethylacetat/vand og vaskes med 5$ ka= liumcarbonat, vand, 5$ citronsyre og vand. Den organiske fase tørres og inddampes til tørhed. Resten opløses i ethylacetat, hvorefter der tilsættes tilstrækkeligt petroleumsether 40/60 til at forårsage uklarhed. Det resulterende bundfald filtreres fra.
Rf i Bz:EtOH (9:1) = 0,64 på Si02.
2) H-D-lys(Boc)-Phe-OtBu 3 g af dipeptidet opløses i 60 ml methanol. Derpå tilsættes 10$ pal= ladium-på-carbon, hvorefter hydrogen bobles gennem blandingen, indtil der ikke undslipper mere C02 (2 timer). Efter filtrering inddampes filtratet til tørhed til opnåelse af skum.
Rf i To.-EtOH (9:1) = 0,21 på Si02· 23 145665 3) Z-Phe-D-lys(Boc)-Phe-OtBu Z-Phe-ONP (2,18 g) opløses i 15 ml DM3?. Derpå tilsættes en opløsning af 2,24 g H-D-lys(Boc)-Phe-OtBu fra 2) i 30 ml DM3?, hvorefter blandingen omrøres ved 20°C i 15 timer. Efter fordampning af den gule opløsning opløses resten i 15 ml ethylacetat, hvorefter der tilsættes 50 ml petroleumsether. Derpå henstilles blandingen i ·3 timer ved 0°C, hvorpå det dannede bundfald filtreres fra.
Smeltepunkt: 135-138°C.
Rf i To:EtOH (8:2) = 0,60 på Si02.
4) H-Phe-D-lys(Boc)-Phe-OtBu 2,5 g af det under 3) opnåede tripeptid hydrogeneres på samme måde som beskrevet under 2).
Rf i To:EtOH (8:2) = 0,43 på Si02.
Q. Syntese af H-Phe-D-lys(Boc)-Phe-Gly-0tBu 1) Z-D-lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu 2-D-lys(Boc)-0NP (10,03 g) kondenseres med en opløsning af 5>1 g H-Phe-Gly-OtBu i 20 ml DM3? på samme måde som beskrevet i eksempel P. l), og inddampes derpå. Den resulterende rest opløses i ethyl= acetat på den beskrevne måde, vaskes og inddampes til tørhed. Resten viderebehandles straks yderligere.
Rf i To:EtOH (9:1) = 0,63 på Si02· 2) H-D-Iys(Boc)-Phe-Gly-OtBu
Hydrogenering som beskrevet i eksempel P. 2) giver tripeptidet som et skum i et praktisk taget kvantitativt udbytte.
Rf i To:EtOH (9:1) = 0,24 på Si02.
3) Z-Phe-D-Iys(Boc)-Phe-Gly-OtBu
Reaktion af 2,18 g Z-Phe-ONP med 2,6 g H-D-Iys(Boc)-Phe-Gly-OtBu i 30 ml DM3? i 24 timer på den i eksempel P. 3) beskrevne måde giver tetrapeptidet i et udbytte på 75$ efter krystallisation fra ethyl= acetat/petroleumsether. Pør krystallisation blev ethylacetatlaget 24 145665 vasket med citronsyre.
Smeltepunkt: 78-80°C.
Rf i Io:EtOH (8:2) = 0,85 på Si02.
4) H-Phe-D-Iys(Boc)-Phe-Gly-OtBu
Hydrogenering af det under 3) opnåede tetrapeptid i overensstemmelse med eksempel P. 2) giver H-Phe-D-lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu som et skum.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,57 på Si02· R. Syntese af H-Phe-D-Lys(Boc)-(N-uhenylalkyl)-amidderivater
1) Z-D-Iys(Boc)-PPA
Z-D-lys(Boc)-ONP (10,33 g) opløses i 80 ml methylenchlorid. Opløsningen afkøles til 0°C, hvorefter der tilsættes 2,7 g 3-phenylpro= pylamin og blandingen omrøres i 30 minutter ved 0°C og i 20 timer ved 20°C. Reaktionsblandingen inddampes til tørhed og resten optages i ethylacetat. Den organiske fase vaskes successivt med vand, citronsyre, vand, 5$ natriumhydrogencarbonat og vand og tørres derpå. Herefter afdestllleres ethylacetatet i vakuum. Resten omkrystalliseres fra ethylacetat/ether.
Rf i Bz:EtOH (9:1) = 0,53 på Si02.
2) H-D-lys(Boc)-PPA
8,75 g af amidet fra l) opløses i 120 ml methanol, hvorefter der tilsættes 105¾ palladium-på-carbon. Derpå bobles hydrogen gennem blandingen i 4 timer, hvorefter blandingen filtreres. Piltratet inddampes derpå til tørhed og resten (olie) viderebehandles straks yderligere.
Rf i Am:Po:¥a (7:2:1) = 0,58 på Si02·
3) Z-Phe-D-lys(Boc)-PPA
6,39 g af amidet 2) opløses i 68,5 ml DMF, hvorefter der tilsættes 7,61 g Z-Phe-ONP i 20 ml DMP. Blandingen omrøres i 20 timer ved stuetemperatur, hvorefter opløsningsmidlet bringes til at fordampe i va- 25 145665 kuum. Resten opløses 1 170 ml ethylacetat og ethylacetatfasen vaskes som beskrevet uner l) og tørres. Resten opløses i den mindst mulige mængde ethylacetat og henstilles ved 0°C. Efter 3 dages forløb affiltreres bundfaldet.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,72 (Si02).
4) H-Phe-D-lys(Boc)-PPA,HC1
Dipeptid-amidet fra 3) (9~,07 g) opløses i 300 ml DME, hvorefter der tilsættes 4 il 4 K HC1 og 1,5 g 10$ palladium-på-carbon. Derpå bobles hydrogen gennem blandingen i 4 timer under omrøring, hvorefter katalysatoren filtreres fra og,filtratet inddampes til tørhed. Den tilbageblevne olie omrøres med ether.
Rf i Bu:Ac:Wa (4:1:1) = 0,65 (Si02).
5) På tilsvarende måde fremstilles: H-Phe-D-Iys(Boc)-Amf Rf* = 0,39 på Si02 H-Phe-D-Iys(Boc)-PEA Rf* = 0,34 på Si02 H-Phe-D-Iys(Boc)-HPEA Rf* = 0,29 på Si02 *^Rf i To:EtOH (8:2).
Eksempel I.
H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-OH og den tilsvarende methvlester
1. Bos-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-OH
1,17 g Boc-Met-Glu(0tBu)-His-N2H^ (A. 2)) opløses i 20 ml DME. Denne opløsning afkøles til 0°C, hvorefter der tilsættes 3 ml 2 N HCl/ THE og derpå ved -20°C 0,27 ml isoamylnitrit. Blandingen omrøres i 7 minutter ved -20°C, hvorefter den tilsættes til en opløsning af 0,76 g H-Phe-D-Arg-OH,acetat (H. 3)), hvorefter pH-værdien indstilles på 7,2 med TAA. Blandingen omrøres i 70 timer ved 0°C, hvorefter DME afdestilleres i vakuum, hvorpå resten optages i vandig ethylace= tat og vaskes tre gange med saltholdigt vand.
26 U56B5
Ethylacetatet afdestilleres og resten omkrystalliseres fra tør e thylacetat/petroleums ether,
Udbytte: 1,2 g»
Rf i Bu:Py:Ac:¥a (2:3/4:1/4:1) = 0,56.
2. Fjernelse af beskyttelsesgrupper 1 g peptid opløses i 10 ml 90 fo trifluoreddikesyre, hvorefter opløsningen omrøres i 30 minutter. Derpå tildryppes reaktionsblandingen til peroxidfri ether. Det dannede bundfald filtreres fra og sønderdeles med ether. Resten tørres over fast KOH. Derpå opløses stoffet i 25 ml t-butanol/vand, hvorefter "Dowex" wX-8 i acetatform tilsættes til ionbytning af trifluoracetatet med acetatet (pH-værdi til slut 4-5). Ionbytteren filtreres fra, hvorefter filtratet lyophiliseres.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (2:3/4:1/4:1) = 0,18 (Si02).
3. På samme måde som beskrevet under 1. og 2. kobles peptidet Boc-Met-Glu(0tBu)-His-N2H5 (A. 2)) til H-Phe-D-Arg-OMe (H. 4)), hvilket efter fjernelse af beskyttelsesgrupperne resulterer i H-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-OMe,acetat.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,22 på Si02.
Eksempel II.
H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-OH
1. Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-0H
1,17 g Boc-Met-Glu(0tBu)-His-N2Ej (A. 2)) opløses i 20 ml DMF, hvorefter 3 ml 2N HC1 i IHF tilsættes ved 0°C og 0,27 ml isoamylnitrit tilsættes ved -20°C. Blandingen omrøres i 7 minutter, hvorefter den tilsættes til en opløsning af 0,9 g H-Phe-D-Iys(Boc)-OH (K. 2)) i 10 ml DMF, hvorpå pH-værdien til sidst indstilles med TAA på 7,2. Blandingen omrøres i 70 timer ved 0°C, hvorefter DMF afdestilleres og resten optages i vandig ethylacetat.
27 145665
Den organiske fase vaskes med. saltholdigt vand, derpå med vand og tørres derpå og inddampes. Resten omkrystalliseres fra ethylacetat/ petroleumsether.
Rf i Io:EtOH (8:2) = 0,27 på Si02· 2. fjernelse af beskyttelsesgrupper fjernelsen gennemføres på samme måde som beskrevet i eksempel I. 2., men omrøring finder sted med 90$ trifluoreddikesyre i 1 time.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,19 på Si02.
3. På tilsvarende måde fremstilles:
Rf i Bu:Py: Ac:Wa (4:3/4: 1/4:1) H-D-Met-Glu-His-Phe-D-lys-OH man starter med B. 2 0,18 og K. 2 Η-β-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-OH man starter med D. 2 0,16 og K. 2 H-Val-Glu-His-Phe-D-Lys-OH man starter med D. 2 0,18 og K. 2 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys- man starter med F. 3 0,26 OH og E. 2 H-Met-Gln-His-Bhe-D-Iys-OH man starter med G og 0,25 E. 2
Eksempel III.
A-Glu-His-Phe-D-Iiys-Trp-Y
1. Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Iys(Boc)-Irp-OH
Udfra 1,05 g (2 mmol) Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-N2H^ (f. l)) fremstilles azidet ved hjælp af den i eksempel II. 1. beskrevne fremgangsmåde. Dette azid tilsættes til 1,23 g H-Phe-D-Iys(Boc)-Irp-OH,HCl (eksempel L. 2)) opløst i 10 ml DMB, hvorefter pH-værdien til slut indstilles på 7,3- med TAA. Reaktionsblandingen omrøres i 70 timer, 28 145665 hvorefter den inddampes til tørhed og resten omrores med vandig ethylacetat.
Ethylacetatet vaskes to gange med vand og inddampes derpå til tørhed. Resten omkrystalliseres fra alkohol-peroxidfri ether (l:l).
Smeltepunkt: 173°C, dekomponering.
. Rf i BzrEtOH (8:2) = 0,27 på Si02.
2. Boc-Yal-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Trp-NHg
Udfra 1,11 g Boc-Yal-Glu(OtBu)-His-N2H5 (C. 2)) og 1,22 g H-Phe-D-Iys(Boc)-frp-NH2,HCl (1. 5) 1.) fås det ovennævnte peptidamid på samme måde som beskrevet under 1. Yed at hælde reaktionsblandingen i den tidobbelte mængde vand fås et bundfald. Dette bundfald omrøres med ethylacetat/petroleumsether, hvilket giver 1,3 g peptid.
Rf i Am:Py:Wa (5:3:2) = 0,84 på Si02.
3. På samme måde som beskrevet vinder 1. eller 2. fås:
Boc-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Trp-OC11H2^ (fra E.l og 1.5.3) Boc-Yal-Glu(OtBu) -His-Phe-D-lys (Boc-3?rp-0H (fra C.2 og 1.2)
Boc-Yal-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Trp-N(CH^)2 (fra C.2 og L.5.2) Boc-Yal-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Trp-0C11H2^ (fra C.2 og 1.5.3) Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Trp-OH (fra A.2 og 1.2) desamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Trp-0H (fra F.3 og 1.2) 4. fjernelse af beskyttelsesgrupper
En times behandling af de vinder 1, 2 og 3 nævnte peptider i 9 Of trifluoreddikesyre som beskrevet i eksempel I. 2 giver hexapepti= derne, som acetaterne: 29 145665
Rf* H-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Trp-OH 0,23 på Si02 H-Val-Glu-His-Phe-D-Lys-iDrp-NH2 0,31 på Si02 H-Ala-Glu-His-Phe-D-Iys-Trp-OCi;LH25 0,38 på Si02 H-Yal-Glu-His-Phe-D-Iiys-Trp-OH 0,26 på Si02 H-Yal-Glu-His-Phe-D-lys-Trp-N(CH3)2 0,33 på Si02 H-Val-Glu-His-Phe-D-Iys-Trp-OCi:LH23 0,40 på Si02 H-Met-Glu-His-Phe-D-iys-Trp-OH 0,25 på S102 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-Trp-OH 0,29 på Si02 *^Rf i BuiPy:Ac:¥a (4:3/4:1/4:1)-
Eksempel IY.
H-Gly-Glu-His-Phe-D-Arg-Jra 1. Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Tra 2 mmol Boc-Gly-Glu(OtBu)-His-N2H3 (E. 2)) omdannes til azidet ved hjælp af den i eksempel I beskrevne fremgangsmåde og kobles med 2 mmol af det tidligere beskrevne peptid H-Phe-D-Arg-Tra,acetat (N. 2)). pH-værdien til slut indstilles på 7,1 med TAA. Efter 70 timers omrøring ved 0°C fortyndes DMP-opløsningen med ethylacetat og denne fase vaskes med vand og en natriumhydrogencarbonatopløs-ning (5$). Pasen vaskes igen med vand, hvorefter ethylacetatet af-destilleres.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,39 på Si02.
2. Fjernelse af beskyttelsesgrupper 1 g af stoffet opløses i 20 ml 90 TEA under forsigtig opvarmning og behandles yderligere som beskrevet før (eksempel I. 2). Eør fjernelse af “Bewex" ^ionhytteren ved filtrering opvarmes stoffet forsigtigt.
Acetat af H-Gly-Glu-His-Phe-D-Arg-Tra: 30 145666
Rf i Bu:Py:Ac:¾¾ (4:5/4:1/4:1) = 0,19 på Si02<
Eksempel Ύ.
A-Glu-His-Phe-D-Arg-Tra og A-Glu-His-Phe-D-Lys-Ira 1·. Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Ira 2 mmol H-Phe-D-Arg-Ira,acetat (N. 2)) tilsættes til det ifølge eksempel I. 1 fremstillede azid og tilstrækkeligt TAA til at indstille pH-værdien på 7,2 til slut.
Blandingen omrøres i 70 timer, hvorefter reaktionsblandingen filtreres og filtratet inddampes til tørhed. Resten omrøres tre gange med tør ethylacetat, hvorefter resten opløses i alkohol og tildryppes til tør ethylacetat til opnåelse af en bundfald, som affiltreres.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,25 på Si02· 2. Boc-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Ira 2 mmol H-Phe-D-Lys(Boc)-Ira (M. 2)) tilsættes til det i eksempel I.
1 opnåede azid, og tilstrækkeligt ΪΑΑ til opnåelse af en pH-værdi til slut på 7,2.
Reaktionsblandingen inddampes til tørhed, hvorefter den ledes i vandig ethylacetat, hvorunder peptidet udkrystalliserer. Efter 3 timers omrøring ved +5°C finder filtrering sted.
Udbytte: 1,2 g.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,37 på SiOg.
På tilsvarende måde fremstilles: Boc-D-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys (Boc)-Tra,
Boc-p~Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Iys(Boc)-Tra og desamino-Met-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Ira.
3. Fjernelse af beskyttelsesgrupper i peptiderne fra 1 og 2.
31 165565
De ovennævnte peptider behandles på den tidligere beskrevne måde.
Før lyophilisering tilsættes ekstra eddikesyre for at forøge opløseligheden.
På denne måde opnås acetaterne af:
Rf*) Η-Met-Glu-His-Phe-D-Arg-Ira 0,18 på SiOg H-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-lra 0,23 på Si02 H-D-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Tra 0,20 på Si02 H-p-Ala-Glu-His-Phe-D-Iys-Ura 0,19 på Si02 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Tra 0,26 på Si02 * ^Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1).
Eksempel 71.
A-Glu-His-Phe-D-Arg-Irp-Gly-OH
1 o Boc-Yal-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH
Udfra Boc-Yal-Glu(0tBu)-His-N2H^ (C. 2)) og acetatet af H-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH (0. 4)) fremstilles det ovennævnte heptapeptid på en 2 mmol skala ved hjælp af den i eksempel I beskrevne fremgangsmåde. Blandingen omrøres i 70 timer ved 0°C, hvorefter reaktionsblandingen hældes i vand og omrøres i yderligere 3 timer. Derpå affiltreres bundfaldet.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,57 på Si02.
2. Fjernelse af beskyttelsesgrupper
Behandling af dette peptid, som beskrevet i eksempel I. 2, giver H-Yal-Glu-His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH,acetatet.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4=1) = 0,21 på Si02.
3. På samme måde fremstilles acetaterne af: 32 145665
Rf (i Bu:Py:Ac;Wa -4:3/4:1/4:1) . H-rMet-Glu-His-Phe-D-Arg-lrp-Gly-OH 0,17 på Si02 Η-β-Ala-Glu-His-Phe-D-Arg-Irp-Gly-OH 0,14 på Si02 desamino-Met-Glu—His-Phe-D-Arg-Trp-Gly-OH 0,22 på Si02.
Eksempel VII.
A-Glu-His-Phe-D-Iiys-Phe-OH
1. Boc-p-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-Piie-OtBu 4 mmol Boc-p-Ala-Glu(0tBu)-His-N2H^ (D. 2)) opløses i 25 ml DM3?.
Denne opløsning afkøles til -5°C, hvorefter der tilsættes 4 ml 3 N HC1/TH3? og 0,55 ml isoamylnitrit ved -20°C. Blandingen omrøres i 7 minutter ved -20°C, hvorefter halvdelen af denne azidopløsning tilsættes til en opløsning af 1,2 g H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OtBu (P.
4)) i 10 ml DM3?, forud afkølet til -10°C. Blandingens pH-værdi indstilles med IAA på 7,3, hvorefter reaktionsblandingen omrøres ved 0°C i 71 timer, hvorpå den hældes i vand. Filtrering af det resulterende bundfald giver det rå peptid i et udbytte på 62$, og dette omkrystalliseres 3 gange fra ethylacetat/petroleumsether.
Smeltepunkt: 193°C, dekomponering.
Rf i Io:EtOH (8:2) = 0,51 på Si02· 2. Behandling af det ovennævnte peptid ved hjælp af den i eksempel I. 2 beskrevne fremgangsmåde giver acetatet af Η-β-Ala-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-OH i et udbytte på 75$.
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,21 på Si02_.
3. På samme måde fremstilles acetaterne af:
Peptid Rf Udgangsprodukt Η-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH 0,58* A. 2 + P. 4 H-Yal-Glu-His-Phe-D-Iys-Phe-OH 0,35* C. 2 + P. 4 33 145665 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH 0,24 P.3 + Ρ·4 H-Met-Gln-His-Phe-D-Lys-Phe-OH 0,25* G + P.4 *Rf i Bu:Py:Ac:¥a (2:3/4:1/4:1) på Si02 **Rf i Bu:Py:Ac:¥a (4:3/4:1/4:1) på SiOg.
Eksempel VIII.
H-B-Ala-Glu-His-Fhe-D-hys-Phe-Gly-OH
1. Boc^-Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-I.ys(Boc)-Phe-Gly-OtBu
Udfra den (anden halvdel af) azidopløsningen, som blev fremstillet i eksempel VII. 1, fås det ovennævnte heptapeptid ved kondensation på samme måde med 2 mmol H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-Gly-OtBu (Q. 4)) og produktet isoleres.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,53 på SiOg.
2. Fjernelse af beskyttelsesgrupper
Behandling af dette peptid på samme måde som beskrevet i eksempel I. 1 giver acetatet af:
Η-β-Ala-Glu-His-Phe-D-Iys-Phe-Gly-OH
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1) = 0,19 på SiOg.
3. På samme måde fremstilles acetaterne af: H-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-Gly-OH Rf* =0,28 H-(α-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-Gly-OH Rf* = 0,26 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Phe-Gly-OH Rf = 0,31 *Rf i Bu:Py:Ac:¥a (2:3/4:1/4:1) på SiOg.
Eksempel IX.
34 145665 Η-(α-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Iys-phenylalkylamider
1. Boc(α-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-Phe-D-lys(Boc)-PPA
0,96 g Boc-(a-Me)Ala-Glu(OtBu)-His-N,pH.j (F. 2)) opløses i 10 ml DMF, hvorefter hydrazidet omdannes til azidet med 3 ml 1 N HCl/ IHF og 0,13 ml isoamylnitrit på sædvanlig måde. Dette azid tilsættes til 1 mmol H-Phe-D-Iys(Boc)-PPA,HCl (fremstillet under R. 4)), hvorefter pH-værdien indstilles på 7,3 med IAA.
Reaktionsblandingen omrøres i 75 timer, hvorefter den inddampes og resten omrøres med vand (tre gange). Den uopløselige del renses yderligere ved opløsning af denne i ethylacetat og ved at hælde den i den samme mængde petroleumsether til udfældning af peptidet 'igen.
Rf i Bz:EtOH (8:2) = 0,31 (SiOg).
2. Fjernelse af beskyttelsesgrupper
Behandling i trifluoreddikesyre som beskrevet i eksempel I. 2 giver trifluoracetatet, som ved hjælp af "Dowex" ®Xt8 i acetatf ormen omdannes til det tilsvarende acetat H-(a-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-lys-PPA.
Fif i Bu:Py:Ac:Wa (2:3/4:1/4:1) = 0,34 på SiOg.
3. På samme måde fremstilles acetaterne af: H-(α-Me)Ala-Glu-His-Phe-D-Iys-Amf Rf* =0,33 H-(α-Me(Ala-Glu-His-Ehe-D-Lys-PEA Rf* = 0,35 Η-β-Ala-Glu-His-Phe-D-Iy s-PPA Rf* =0,30 desamino-Met-Glu-His-Phe-D-Iys-Amf Rf* = 0,45 *Rf i Bu:Py:Ac:Wa (2:3/4:1/4:1) på SiOg.
Eksempel X.
H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-phenylalkylamider 55 145665 På samme måde, som beskrevet i eksempel IX, bliver ved kondensation af Boc-Met-Glu(OtBu)-His-N^ (opnået ved at behandle hydrazi= det fra A. 2) med isoamylnitrit på sædvanlig måde) med et af de peptidamidderivater fremstillet under R. 4) og R. 5) efterfulgt af fjernelsen af beskyttelsen af peptidet opnået fra dem, fremstilles acetaterne af: Η-Me t-Glu-Hi s-Phe-D-Lys-PPA Rf* =0,39 H-Met-Glu-His-Phe-D-Lys-PEA Rf* = 0,38 Η-Me t-Glu-Hi s - Phe-D- ly s - Amf Rf* = 0,42 H-Met-Gly-His-Phe-D-lys-HPEA Rf* =0,35 *Rf i Bu:Py:Ac:¥a (2:3/4:1/4:1) på Si02.
Eksempel XI.
Sulfoner af Met- eller desamino-Met-holdige peptider 1. 175 mg af peptidet H-Met-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH opløses i en blanding af 0,5 ml vand, 0,1 ml 4 N perchlorsyre, 0,02 ml 0,5 M ammoniummolybdæt, hvorefter 0,06 ml 30 $ig Hg Og tilsættes. Blandingen omrøres ved en temperatur på ca. 10°C i 2 timer og fortyndes derpå med 25 ml t-butanol/vand, hvorefter der tilsættes "Dowex" ® i acetatformen. Efter 30 minutters omrøring affiltreres ionbytteren og filtratet lyophiliseres, hvilket givet H-Met(-*02)-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH.
Rf i Bu:Ac:Wa (4:1:1) = 0,25 på Si02.
2. På samme måde fremstilles følgende sulfoner:
Peptider Rf på Si02 (Bu:Ac:Wa 4:1:1) Η-Met (-»02) -Gly-His-Phe-D-lys-Phe-Gly-OH 0,23 H-Met (->02) -Glu-His-Phe-D-ly s-PPA 0,32 desamino-Met (-»02 )-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH 0,33 desamino-Met (->02)-Glu-His-Phe-D-lys-!ra 0,37 36 145665 desamino-Met (^02)-Glu-His-Phe-D-lys-Amf 0,42 desamino-Met (-fC>2 ) -Glu-His-Ph.e-D-Arg-Trp-Gly-OH 0,27 H-Met(402)-Gln-His-Phe-D-Lys-Fhe-OH 0,29.
Eksempel XII.
Sulfoxider af Met- og desamino-Met-peptider 50 mg af peptidet, som skal oxideres, opløses i 5 ml eddikesyre, hvorefter der tilsættes 15 μΐ 30 $ig hydrogenperoxid.
Blandingen omrores ved 20°C i 1 time, hvorefter der tilsættes en suspension af 40 mg platinsort i iseddikesyre og blandingen omrøres i 50 minutter.
Efter filtrering afdestilleres eddikesyren i vakuum.
Den resulterende rest opløses i en blanding af t-butanol/vand (1:1) og lyophiliseres derpå.
På denne måde fås følgende sulfoxider:
Peptid Rf1 på Si02 H-Met (-+0)- Glu-Hi s -Phe -D-Ar g- OH 0,16 H-Met(40)-Gly-His-Phe-D-Iys-OH 0,20 H-Met(40)-Glu-His-Phe-D-lys-Irp-0H 0,19 H-Met (-vO) -Glu-His-Phe-D-Arg-Irp-Gly-OH 0,17 H-Met (-j-O) -Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH 0,19 H-Met (-40) -Glu-His-Phe-D-iys-PPA 0,24 H-Met(^O)-Glu-His-Phe-D-lys-Tra 0,17 desamino-Met (-40) -Glu-His-Phe-D-Iy s-Phe-OH 0,25 desamino-Met(»Oj-Glu-His-Phe-D-lys-Sra 0,22 desamino-Met (-10)-Glu-His-Phe-D-ly s-PPA 0,26
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (4:3/4:1/4:1).
Eksempel XIII.
37 145665
Fremstilling af H-Met(l,-»Q)-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH
Boc-l-Met(l,-»0)-OH fremstilles ved at omsætte Boc-azid med H-L-Met (l,->0)-0H, beskrevet i J. Biol. Chem. 169, 477 (1947)· Boc-L-Met (l,-*0)-0H: smeltepunkt 68°C; [a]p® = -58° (c = 1, DMF).
Denne N-beskyttede aminosyre omdannes til den tilsvarende N-hydroxy= succinimidester ved behandling med DCCI og HOSu. Den opnåede aktive ester anvendes straks til en koblingsreaktion med H-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH (opnået ved kondensation af Z-Glu(OtBu)-His-azid med H-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-OH efterfulgt af hydrogenering af Z-delen) i nærværelse af N-ethylmorpholin. Det resulterende peptid= derivat: Boc-l-Met(1,40)-Glu(OtBu)-His-Phe-D-Lys(Boc)-Phe-0H,
Rf i Bu:Ac:¥a (4:1:1) = 0,45 på Si02, får fjernet beskyttelsen på samme måde som tidligere beskrevet ved hjælp af TEA og omdannes til acetatet: H-1-Met(l,AO)-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH,acetat:
Rf i Bu:Py:Ac:Wa (2:3/4:1/4:1) = 0,23.
På samme måde fremstilles peptid-sulfoxidet H-I-Met(d,-»0)-Glu-His-Phe-D-lys-Phe-OH,acetat udfra Boc-l-Met(d,-*0)-OH, smeltepunkt 135°C.
Eksempel XIV.
Zinkkomplekser
Af en opløsning af zinkchlorid indeholdende 50 mg zink per ml tilsættes 1,5 ml til en opløsning af 31,5 mg NagHPO^,2H20 i 30 ml destilleret vand. Det dannede bundfald af zinkphosphat opløses igen ved at tilsætte 4 N HC1. Derpå tilsættes 175 mg NaCl og 0,5 g ben= zylalkohol til denne blanding. Herefter opløses 1,5 mg af hexapep= tidet H-l-Met-l-Glu-l-His-l-Phe-D-lys-l-Phe-OH i denne blanding, hvorpå der tilsættes tilstrækkeligt 1 N natriumhydroxid til at indstille blandingens pH-værdi på 6,5. Herefter bringes voluminet på 50 ml med destilleret vand.
1 ml suspension indeholder:
Claims (1)
- 38 145865 30 μg hexapeptid 1.5 mg zink 0,63 mg Na2HP0^,2H20 3.5 mg NaCl 10 mg benzylalkohol. Analogifremgangsmåde til fremstilling af et peptid af den almene formel A-L-Glu(X)-L-His-L-Phe-D-Lys(eller D-Arg)-Y hvori A betegner H-L-Met, H-D-Met, H-L-Met(0), H-D-Met(0), H-L-Met(02), H-D-Met(02)f des-amino-Met, des-amino-Met(0), des-amino-Met(02) eller gruppen H2N-B-C0-, hvori B er en ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med henholdsvis 1-6 og 2-6 carbon-atomer, X betegner gruppen -OH eller -NH2, og Y betegner gruppen hydroxy, -L-Trp-0H, -L-Phe-OH, -L-Trp-Gly-0H, -L-Phe-Gly-OH, en (N-phenylalkyl)-aminogruppe af formlen -NH-Alk *—(/ y eller en (Ν-β-indolylalkyl)-aminogruppe, hvori Alk betegner en ligekædet eller forgrenet alkylengruppe med henholdsvis 1-6 og 2-6 carbonatomer, R betegner hydrogen, halogen, hydroxy eller en alkyl- eller alkoxygruppe med 1-4 carbonatomer, eller funktionelle derivater deraf i form af farmaceutisk acceptable syreadditionssalte, eller N-acylderivater afledt af en alifatisk carboxylsyre med 1-6 carbonatomer, eller usubstituerede amider eller C-^-Cg-alkylsubstituerede amider, eller estere afledt af alifatiske eller aralifatiske alkoholer med 1-18 carbonatomer, eller metalkomplekser af de ovennævnte peptider med et tungt opløseligt salt, hydroxid eller oxid af et metal, kende-
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL7204422 | 1972-03-31 | ||
| NLAANVRAGE7204422,A NL175174C (nl) | 1972-03-31 | 1972-03-31 | Werkwijze ter bereiding van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, dat een peptide of peptide-derivaat als actief bestanddeel bevat, alsmede een werkwijze ter bereiding van deze peptiden. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK145665B true DK145665B (da) | 1983-01-17 |
| DK145665C DK145665C (da) | 1983-07-18 |
Family
ID=19815760
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK171673A DK145665C (da) | 1972-03-31 | 1973-03-29 | Analogifremgangsmaade til fremstilling af et peptid eller funktionelle derivater heraf |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3842064A (da) |
| JP (1) | JPS5747666B2 (da) |
| BE (1) | BE797612A (da) |
| CA (1) | CA1025440A (da) |
| CH (1) | CH591429A5 (da) |
| DE (1) | DE2315826C2 (da) |
| DK (1) | DK145665C (da) |
| FR (1) | FR2182918B1 (da) |
| GB (1) | GB1429195A (da) |
| HU (1) | HU169158B (da) |
| NL (1) | NL175174C (da) |
| SE (1) | SE392613B (da) |
| ZA (1) | ZA731921B (da) |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL7607684A (nl) * | 1976-07-12 | 1978-01-16 | Akzo Nv | Werkwijze ter bereiding van nieuwe peptiden en peptide-derivaten en de toepassing hiervan. |
| US4180712A (en) * | 1978-07-13 | 1979-12-25 | Switchcraft, Inc. | Slide switch |
| US4356119A (en) * | 1978-09-28 | 1982-10-26 | Nordisk Insulinlaboratorium | Therapeutically active polypeptides or acid addition salts and a process for producing such compounds |
| FR2491922A1 (fr) | 1980-10-14 | 1982-04-16 | Roussel Uclaf | Nouveaux hexapeptides, procede pour leur preparation et application comme medicaments |
| NL8101724A (nl) * | 1981-04-08 | 1982-11-01 | Akzo Nv | Peptiden met zenuw-regenererende eigenschappen. |
| US4500713A (en) * | 1982-09-23 | 1985-02-19 | Usv Pharmaceutical Corporation | Therapeutic dipeptides |
| US4623715A (en) * | 1984-10-22 | 1986-11-18 | Hoechst Aktiengeselleschaft | Novel peptides which are active on the central nervous system and have an action on the cholinergic system |
| US5462927A (en) * | 1985-04-30 | 1995-10-31 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Peptides aiding nerve regeneration |
| DE3601398A1 (de) * | 1986-01-18 | 1987-07-23 | Fresenius Ag | Verwendung von oligopeptiden zur behandlung von cerebralen stoerungen |
| DE3863027D1 (de) * | 1987-08-14 | 1991-07-04 | Akzo Nv | Praeparat zur verhuetung oder bekaempfung von komplikationen bei diabetes. |
| ES2045092T3 (es) * | 1987-11-11 | 1994-01-16 | Akzo Nv | Un procedimiento de manufactura de un producto farmaceutico para tratamiento de cancer. |
| JPH0230413U (da) * | 1989-08-14 | 1990-02-27 | ||
| ZA914684B (en) * | 1990-07-18 | 1992-04-29 | Akzo Nv | Use of a centrally acting acth analog in the manufacture of a medicament |
| DE10241622A1 (de) | 2002-09-04 | 2004-03-18 | Takata-Petri Ag | Airbageinheit für Kraftfahrzeuge |
| US20130059914A1 (en) | 2010-04-21 | 2013-03-07 | Signature Therapeutics, Inc. | Compositions Comprising Enzyme-Cleavable Amphetamine Prodrugs and Inhibitors Thereof |
| WO2023055830A1 (en) | 2021-09-29 | 2023-04-06 | Ensysce Biosciences, Inc. | Enzyme-cleavable methadone prodrugs and methods of use thereof |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL6509727A (da) * | 1965-07-28 | 1967-01-30 |
-
1972
- 1972-03-31 NL NLAANVRAGE7204422,A patent/NL175174C/xx not_active IP Right Cessation
-
1973
- 1973-03-19 US US00342338A patent/US3842064A/en not_active Expired - Lifetime
- 1973-03-19 ZA ZA731921A patent/ZA731921B/xx unknown
- 1973-03-21 GB GB1353373A patent/GB1429195A/en not_active Expired
- 1973-03-28 CA CA167,350A patent/CA1025440A/en not_active Expired
- 1973-03-29 DK DK171673A patent/DK145665C/da not_active IP Right Cessation
- 1973-03-29 CH CH454573A patent/CH591429A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-03-29 DE DE2315826A patent/DE2315826C2/de not_active Expired
- 1973-03-30 JP JP48036611A patent/JPS5747666B2/ja not_active Expired
- 1973-03-30 SE SE7304520A patent/SE392613B/xx unknown
- 1973-03-30 FR FR7311621A patent/FR2182918B1/fr not_active Expired
- 1973-03-30 HU HUAO356A patent/HU169158B/hu unknown
- 1973-03-30 BE BE129515A patent/BE797612A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HU169158B (da) | 1976-10-28 |
| CA1025440A (en) | 1978-01-31 |
| CH591429A5 (da) | 1977-09-15 |
| ZA731921B (en) | 1973-12-19 |
| FR2182918A1 (da) | 1973-12-14 |
| GB1429195A (en) | 1976-03-24 |
| BE797612A (fr) | 1973-10-01 |
| NL175174C (nl) | 1984-10-01 |
| US3842064A (en) | 1974-10-15 |
| SE392613B (sv) | 1977-04-04 |
| DE2315826A1 (de) | 1973-10-11 |
| NL175174B (nl) | 1984-05-01 |
| JPS5747666B2 (da) | 1982-10-12 |
| AU5357873A (en) | 1974-09-26 |
| DK145665C (da) | 1983-07-18 |
| JPS4913168A (da) | 1974-02-05 |
| DE2315826C2 (de) | 1983-11-03 |
| NL7204422A (da) | 1973-10-02 |
| FR2182918B1 (da) | 1976-09-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK145665B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af et peptid eller funktionelle derivater heraf | |
| Roeske et al. | Synthesis of a Protected Tetrapeptide Amide Containing the Carboxyl Terminal Sequence of Lysine-Vasopressin1 | |
| AU611850B2 (en) | Oligopeptidyl nitrile derivatives, agents containing them, a process for their preparation, and their use | |
| US3853836A (en) | Psychopharmacologically active peptides related to acth | |
| US4487765A (en) | Peptides | |
| CA2107088A1 (en) | Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides | |
| US4104371A (en) | Psychopharmacologically active peptides and peptide-derivatives, and the use thereof | |
| JPH075632B2 (ja) | 新規なペプチド類 | |
| US3856770A (en) | Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides | |
| US5811548A (en) | Tri-and tetracyclic compounds | |
| DK149113B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af et acth-derivat indeholdende fra 10 til 21 aminosyreester eller farmakologisk acceptable salte eller metalkomplekser deraf | |
| JPS5936611B2 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
| US3862928A (en) | Psychopharmacological hexa-peptides containing a d-phenylalanyl residue | |
| CS199708B2 (en) | Method of producing polypeptides and derivatives thereof having effect similar morphine | |
| US3850904A (en) | Psychopharmacologically active d-glu or d-his containing peptides | |
| SU993816A3 (ru) | Способ получени октапептидов | |
| CZ293445B6 (cs) | Způsob přípravy derivátu pentapeptidu, meziprodukt pro tuto přípravu a použití tohoto derivátu | |
| HU181402B (en) | Process for preparing new peptides with psychopharmacological activity | |
| US4271152A (en) | Psycho-pharmacological peptides | |
| Bentley et al. | 1176. Polypeptides. Part I. The synthesis of peptides related to eledoisin | |
| US3373151A (en) | Patricin a and b and related compounds | |
| US3749706A (en) | Novel dipeptide amide and process for its manufacture | |
| JPS595578B2 (ja) | ペプチドの製造方法 | |
| JPH047360B2 (da) | ||
| US3585180A (en) | Process for preparing peptides containing histidine protected with a 2,2,2,-trihalogeno - n -benzyloxycarbonylaminoethyl group |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |