DK144189B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af cephalosporansyrederivater og salte deraf - Google Patents

Description

(19) DANMARK

|Ay.<=r-|

m) oat FREMLÆGGELSESSKRIFT ου 144189 B

DIREKTOBATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. ^752/74 (51) IntCI* C 07 D 601 /36 (22) Indleveringsdag 6. s eP · 1 974 (24) Løbedag 6. sep. 1974 (41) Aim. tilgængelig 8. mar. 1975 (44) Fremlagt 11· jan. 1982 (86) International ansøgning nr. - (86) International indleveringsdag - (85) Videreførelsesdag - (62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 7- sep. 1975, 595102, US

(71) Ansøger BRISTOL-MYERS COMPANY, New York, US.

(72) Opfinder William J. Gottstein, US: Murray A. Kaplan, U5: Alphon= se P. Granatek, US.

(74) Fuldmægtig Th. Ostenfeld Patentbureau A/S- (54)Analogifremgangsmåde til fremstil= ling af c ephal o s por ans yr ed er i vat er og salte deraf.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte cephalosporansyrederivater med den almene formel: .^^>·<:η2ν-χ ~ ti

ffl 0 J,-N^^l-CHj-S-R

00 COOH

1 H0>-\ hvor X betegner -H- eller =CH—/ % og hvor R betegner

N.-- N N--N

eUer J^JJ-CHjOH

og farmaceutisk anvendelige salte deraf.

2 144189

De omhandlede cephalosporiner er især nyttige til behandling af bakterielle infektioner ved parenteral indgivelse.

Fra beskrivelsen til dansk patentansøgning nr. 2317/72, som svarer til dansk fremlæggelsesskrift nr. 137.192, kendes bl.a. cephalosporiner med formlen: ^X>:H2NH2

^ 1 ? S

YY \CH2CO-N__^ Ύ

--N ^.,-CH0-S-R

S YY 2

(A) C) Y

co2h hvor R bl.a. betegner

N --- N N-—N

J '1 eller II IL

”Yn/N (MR-S94) —YSY CH3 (MR-S96) CH3

Disse cephalosporiner er meget effektive derivater med et bredt aktivitetsspektrum. Deres begrænsede vandopløselighed (<2 mg/ml) viser sig imidlertid at bevirke krystalluria-dannelse, selv når de pågældende antibiotika er indgivet parenteralt som et let dissocier-bart opløseligt derivat.

Det har vist sig, at de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser generelt har samme antibakterielle aktivitetsspektrum som de nævnte kendte forbindelser, men udviser større vandopløselighed, således at man får nedsat risiko for krystalluria-dannelse.

3 146189

Opløselighederne bestemtes i en 0,1 M, pH 7,0 phosphat puffer.

^/CH2NH2 ^X^VCH2CO-NH——I^ 0i—N ch2-s-r

COOH

betegnelse ? = Opløselighed

N-—N

MR-S94 'Jj 1,9 mg/ml (jhoJLlandsk pat.

\N^ skrift nr.

^ 72/06326) MR-S96 li if 0,9 mg/ml (hollandsk pat.

-'-‘v Js CH3 skrift nr.

Ns^. 72/06326) N--N , „ BL-S685 j I] 2,35 mg/ml Π if 2,23 mg/ml

BL-S690 Jl J—CH2OH

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man omsætter en forbindelse med formlen: H2N---/ \

,-*1 -ch2-s-r II

0 ,

COOH

4 144189 hvor R har den ovenfor angivne betydning, eller et salt eller en let hydrolyserbar ester deraf, med et acyleringsmiddel for en primær aminogruppe, hvilket acyleringsmiddel indeholder resten . I 0 ^CH2C- hvor B betegner en blokerende gruppe, og derpå fjerner den blokerende gruppe, hvorefter man om ønsket omsætter den dannede forbindelse, hvori X betegner -H2, med salicylaldehyd til dannelse af den tilsvarende forbindelse, hvori X betegner OH-^— =ch —P y og om ønsket omdanner en fremstillet forbindelse I til et farmaceutisk ;anvendeligt salt deraf.

Saltene af de omhandlede forbindelser omfatter carboxylsyresalte, herunder ikke-toksiske metalsalte såsom natrium-, kalium-, calcium-og aluminiumsalte, ammoniumsalte og substituerede ammoniumsalte, fx. salte af ikke-toksiske aminer såsom trialkylaminer, herunder triethylamin, procain, dibenzylamin, N-benzyl-beta-phenetylamin, 1-ephe-namin, N,N'-dibenzylethylendiamin, dehydroabietylamin, Ν,Ν'-bis-dehydro-abietylethylendiamin, N- lavere alkylpiperidin f.eks. N-ethylpiperidin og andre aminer, der har været anvendt til dannelse af salte med benzyl-penicillin, og i alle tilfælde de ikke-toksiske syreadditionssalte deraf (d.v.s. aminsaltene), omfattende mineralsyreadditionssaltene såsom hydro-chloridsaltet, hydrobromidsaltet, hydroiodidsaltet, sulfatet, sulfamatet og phosphatet samt de organiske syreadditionssalte såsom maleatet, acetatet,. citratet, oxalatet, succinatet, benzoatet, tartratet, fumaratet, malatet, madelatet, ascorbatet og lignende.

Som et salt eller en let hydrolyserbar ester af forbindelserne med formlen II kan fx. anvendes de i USA patentskrift nr. 3.284.451 og britisk patentskrift nr. 1.229.453 omtalte og enhver af de i USA patentskrift nr. 3.249.622 beskrevne silylestere til anvendelse med 7-aminopenicillansyre og som omhandlet i britisk patentskrift nr.

1.073.530.

5 144189 I det til omsætning med forbindelsen med formel II anvendte acyle-ringsmiddel betegner B en blokerende gruppe af den enten ved peptidsynteser eller ved enhver anden af de talrige synteser af a-aminobenzylpenicillin ud fra 2-phenylglycin anvendte type. Særligt værdifulde blokerende grupper er en proton såsom i forbindelsen med formlen . HC1 . I 0 N:h2-c-ci eller en β-dikton såsom omhandlet i britisk patentskrift nr. 1.123,333 f.eks. methylacetoacetat, i hvilket tilfælde syren indeholdende den blokerede aminogruppe på foretrukken måde omdannes til et blandet anhydrid såsom med ethylchlorformiat før reaktionen med forbindelse II eller et salt deraf til dannelse af det ønskede produkt I efter syrespaltning.

De blokerende grupper, der anvendes i forbindelse med den frie aminogruppe på syrens sidekæde under syrens kobling med forbindelse II, fjernes til dannnelse af de omhandlede produkter, og således fjernes t-butoxy-carbonylgruppen ved behandling med myresyre, carbobenzyloxygruppen ved katalytisk hydrogenering, 2-hydroxy-l-napthcarbonylgruppen ved syrehydrolyse og trichlorethoxycarbonylgruppen ved behandling med zinkstøv i is-eddikesyre. Det er klart, at andre funktionelt ækvivalente blokerende grupper for en aminogruppe kan anvendes,

De funktionelle ækvivalenter af syren, som kobles med forbindelse II, omfatter de tilsvarende syreanhydrider, indbefattende blandede anhydrider og især de blandede anhydrider fremstillet ud fra stærkere syrer såsom de lavere alifatiske monoestere af carbonsyre, eller alkyl- og arylsulfon-syrer og mere hindrede syrer såsom diphenyleddikesyre, Hertil kommer, at et syreacid eller en aktiv ester af thioester (f.eks. med p-nitrophe-nol, 2,4-dinitrophenol, thiophenol eller thioeddikesyre) kan anvendes eller den frie syre selv kan kobles med forbindelse II, efter at den frie syre først er omsat med Ν,Ν'-dimethylchlorformiminiumchlorid (jvf. britisk patentskrift nr. 1,008.170 og Novak and Weichet, Experientia XXI,6, 360 (1965)) eller ved anvendelse af enzymer eller af Ν,Ν'-carbonyldiimida-zol eller en N,N'-carbonylditriazol (jvf. sydafrikansk patentskrift nr. 63/2684) eller et carbodiimidreagens (især N,N'-dicyclohexylcarbodiimid, N,N1-diisopropylcarbodiimid eller N-cyclohexyl-N'-(2-morpholinethyl)car-bodiimid; jvf. Sheehan and Hess, J. Amer. Chem. Soc., 11_, 1067 (1955) el- 6 144189 ler et alkylaminreagens (jvf. R. Buijle and H.G. Viehe, Angew Chem. International Edition 3^ 582 (1964)) eller et keteniminreagens (jvf. C.

L. Stevens and M.E. Mond, J. Amer. Chem. Soc., 130, (4065)) eller et iso-xazoliumsaltreagens (jvf. R.B. Woodward, R.A. Olofson and H. Mayer, J. Amer. Chem. Soc. j[3, 1010 (1961)). Et andet ækvivalent af syrechlo-ridet er et tilsvarende azolid, d.v.s. et amid af den tilsvarende syre, hvis amidnitrogen indgår i en quasiaromatisk femleddet ring indeholdende mindst to nitrogenatomer, d.v.s. imidazol, pyrazol, triazoler, benzimida-zol, benzotriazol samt substituerede derivater deraf. Som et eksempel på den almene fremgangsmåde til fremstilling af et azolid omsættes N,N'-carbonyldiimidazol med en carboxylsyre i ævkimolære forhold ved stuetemperatur i tetrahydrofuran, chloroform, dimethylformamid eller et tilsvarende inert opløsningsmiddel til dannelse af carboxylsyreimidazolidet i praktisk taget kvantitativt udbytte under frigørelse af carbondioxid og et mol imidazol. Dicarboxylsyrer giver diimidazolid. Biproduktet, imidazol, udfælder og kan separeres og imidazolidet isoleres, men dette er ikke essentielt. Fremgangsmåderne til udførelse af disse reaktioner til fremstilling af' en cephalosporin og fremgangsmåderne, der anvendes til isolering af den således fremstillede cephalosporin, er velkendte i teknikken.

Ved behandling af bakterielle infektioner hos mennesket indgives de omharidlede forbindelser parenteralt i overensstemmelse med konventionelle metoder til antibiotisk indgivelse i en mængde på 5-200 mg/kg/dag og fortrinsvis ca. 5-20 mg/kg/dag i delte doser, f.eks. 3 til 4 gange om dagen. Forbindelserne indgives i dosisenheder indeholdende f.eks. 125 eller 250 eller 500 mg af den aktive bestanddel sammen med passende fysiologisk anvendelige bærere eller eksipienter. Dosisenhederne har form af flydende præparater såsom opløsninger eller suspensioner.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan forløbe som angivet i følgende reaktionsskema, hvori også udgangsmaterialernes fremstilling angives: η 144189 "o'^f'-CHg-Q-O-CHj + ΙΠ

C02H r b SH

CEL

X 3

_ CH„-N XC~H

ΗΝτγ^Ι N—-N h X + 0 C02H * CHgC-OIia 0

bo2H

OH

^.®2M2 (^Tcho ©“t

0 COgH

H

^•vsiO

W“?H2 . R= -II or -CHpOH

OsC-rø-r-fS M 2 co2k 8 144189

p I I

w o

§ 4J K

K w 1 K\ O o f cp

-d il O W I

4J R —O K o O OJ

w I o K O ffi o jn o ΚΛΟ o o „ o E; o W 'i · _ w, o cu cm o-o o /—d o*

OJ K K ' ' m XV-R

rr o o-pK O \ / ° o Sf\ \ / o "cu °oj Vj S i'/ O 1 V ;« 5 / O —> I OJ o

S !?: 8 t_I

8 ^oj oi tu 6 6 I \ / I O i —i « s 1 0 \ w \ OJ r

m \ O OJ

$ \ -SK

\ O I O

m \ o o X i W

id \ pq o οι OJ

Q) Λ1 X. t; o I ^ r° tn ^lOQ-Pi v / o; tu o \ i o ηκ 4-) 6 o α. π o rj C OJ OJ ^ r-' OJ J χ'' >. sjrqpoioj^o tn o o i K K oi \ / 4J- O o tu 1 ύ U'd —» p tu

-P

i—I

^ I_I

9 144189 1 ?

CO

<M W

K co

-P O CM

W I W K

O /—H OJ o w 8 0-8 Jo01 Y5 /=\ <y o-o s?'o yf , g 8 J s g *

CM CM W '1 W

5 S f 8 W \ S 8 .

0 \ b.

1 __I \ A

\ W

Λι i ^ co CM '·

W

o w s· 4·8" M wo δ j X ~0J 8γ ^

rJo” -* s δ B

s v>“ / η ώ- ? u / Vi \ -p w w Ο» / i i / WO/ go ^

CM 0) O

6 S

b R" it

CC

144189 ίο

A

A jaP CM

Λ I O

O 5¾

* o t> I

iH W CO /Sv ih 8ΰ 5 Λ t- s

.* η? μ Ο O

H w 1 cvj I O

O 0 = 0 pq to. o cu I ' w cm a L 5 °« s 2» g I·

1 if 0 O

i 9 It 4

tp cm m P

c co ·«. W co ' 0 ft Θ £. . o ^ ^ t- cm ft

D

: (Λ o W ° CM cm w o ο ο a

o o o I

OJ CM K> OK

W W » w S ,

Ο Κ\ O CM W CM

i k i w o w 6 0“ 0 XI 144189

Methyl o-bromomethylphenylacetat

En blanding af methyl o-methylphenylacetat (82,0 g, 0,50 mol), N-bromosuccinimid (NBS,89,0 g, 0,50 mol), benzoylperoxid (1,0 g) og carbon-tetrachlorid (800 ml) opvarmedes under tilbagesvaling i 2 timer under bestråling med en 750 watt lyskilde, Succinimidet fjernedes ved filtrering, og opløsningsmidlet fjernedes fra filtratet, og remanensen desfil-leredes in vacuum til dannelse af 90,1 g (74%) af produktet med et kogepunkt på 95-105° (0,4 mm). NMR spektrum (CCl^) : Singletter ved 2,85 (4H), 5,50 (25)·, 6,31 (2H) og 6,38 (3H) .

o-azidomethylphenyleddikesyre

En blanding af methyl-ø-bromomethylphenylacetat (90,1 g, 0,371 mol), natriumazid (26,0 g, 0,40 mol) og 10% vandig acetone (750 ml) omrørtes ved stuetemperatur i 3 timer. Opløsningsmidlet fjernedes under formindsket tryk, og remanensen behandledes med æter (300 ml) og vand (100 ml), Det rå methyl o-azidomethylphenylacetat (74,8 g), opnået efter tørring og koncentrering af æteropløsningen, opløstes i 150 ml methanol. Denne opløsning afkøledes i is og behandledes med 150 ml 3 N methanolisk natriumhydroxid. Blandingen fik lov at stå ved stuetemperatur i 1 time og koncentreredes derpå til tørhed, hvorpå remanensen opløstes i vand, Den vandige opløsning syrnedes, produktet samledes ved filtrering, tørredes og rekrystalliseredes fra pthylacetat-n-hexan til dannelse af 49,5 g (70%) af syren med et smeltepunkt på 116-118°. NMR spektret (CDCl^): Skarpe singletter ved i 2,75 (4H>, 5,63 (2H) og 6,28 (2H) ? γ^°1 2100 og 1700

_ 1 IUclX

cm

Analyse beregnet for : C.56,53, H. 4,75, N. 21,98,

Fundet: C. 56,37, H, 4,65, N. 21,74.

o-acidomethylphenyleddlkesyre

En blanding af o-acidomethylphenyleddikesyre (9,6 g, 0,050 mol),10% palladium på trækul (2,5 g), methanol (150 ml) og 1 N saltsyre (50 ml) hydrogeneredes ved 30 psi i 3,5 time. Blandingen filtreredes, kohcen-treredes under formindsket tryk til et volumen på ca, 30 ml og ekstrahe-redes med æter. Fra æterekstrakten udvandtes 1-2 g urent udgangsmateriale. Den vandige opløsnings surhedsgrad indstilledes til pH 5,0 med fortyn4ef ammoniumhydroxid, og opløsningen afkøledes i is. Det hvide udfældede faststof opsamledes ved filtrering, vaskedes successivt med isvand, methanol og æter og tørredes i vacuum over E> °5' hvil^et 9av et udbytte på 5,4 g (65%) med et smeltepunkt på 179-181 (dekomponering). NMR (CF^CC^H); T*2,54 (s. 4H), 5,48 (q,2H) og 6,00 (s. 2H).

12 U4189 g-tert-butoxycarbonylaminomethylphenyleddikesyre

Triethylamin (14,4 g, 0,143 mol) sattes til en isafkølet suspension af o-aminomethylphenyleddikesyre (10,3 g, 0,0624 mol) i'100 ml vand efterfulgt af tilsætning af en opløsning af tert-butoxycarbonyl-azid (11/4 g, 0,080 mol) i 75 ml THF. Reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 16 timer, og derpå fjernedes det meste af tetrahydro-furanen under- formindsket tryk. Den vandige opløsning udvaskedes med ether, afdeltes med 125 ml ethylacetat og surhedsgraden indstilledes til pH 3,5 under isafkøling med fortyndet saltsyre. Ethylacetat-opløs-ningen tørredes, koncentreredes og den faste remanens rekrystallisere-des fra ethylacetat-n-hexan (1:1) til dannelse af X'4,4 g (87%) af hvide nålformede krystaller med et smeltepunkt på 114-116°.

Analyse'beregnet for C^H^gNO^: C, 63,39; H, 7,22; N, 5,28.

Fundet: C, 63,44; H, 7,21; N, 5,42.

2,4-dinitrophenyl o-tert-butoxycarbonylaminophenylacetat Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimid (1,0 g, 0,0050 mol) sattes til en isafkølet opløsning af o-tert-butoxycarbonylaminomethylphenyleddikesyre (1,33 g, 0,0050 mol) og 2,4-dinitrophenol (0,92 g, 0,0050 mol) i 12 ml vandffi tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen holdtes ved stuetemperatur i-1 time, hvorpå det udfældede Ν,Ν'-dicyclohexylurinstof fjernedes ved filtrering. Opløsningsmidlet fjernedes fra filtratet til dannelse af:den aktiverede ester som en viskos gul olié.

o-Tert-butoxycarbonylaminomethylphenyleddikesyren kan også reagere med thionylchlorid i nærværelse af triethylamin (methylenchlorid som opløsningsmiddel) eller pyridin (benzen som opløsningsmiddel) til dannelse af BOC-aminoacylchloridet, som direkte kan kobles med forbindelsen med formlen y—n Λ- ch2 - s - r O Q ffi

C02 Et3NH

hvor R har den ovenfor angivne betydning, i methylenchloridopløsning i nærværelse af triethylamin. Den beskyttende gruppe kan derpå fjernes ved behandling med kold trifluoreddikesyre.

o-aminomethylphenyleddikesyre kan også tilvejebringes ved en Beckmann-omlejring med 2-indanonoxim efterfulgt af hydrolyse af den resulterende lactam i overensstemmelse med følgende reaktionsskema: 13 144189 «

(N O

w o s o CM ΓΊ tu ffl U o 5 t * o

H

U 0) M

ta g s • ns Η > γμ oo n rH I i— O » * S r>- - ° g ta / \ β σ o / \ φ o oo

\ / g ID O

\ / β O

\_/ H U0 / \ >

Cn

O

o +J O CN O

o tn| o oo o ftj O o

η β £> H iH rH

Lf) H 0) H U 'ti 00 O S3 C 51 PM O ί fi

rH *H

— β η ω *IJ OO H1 O- O no h

2 I CO CM

,i οη Ό 0 H

Il oo i -H t3 ej n r~- Jn -Η Λί

f 7 oo 0 X

\ / [ H O

\ / oo n xt β -H

\_/ υ 'd +J

/-\ . * g 10 >i x / \ goo -H +i Λ rt \\ // Λ β o <u g β = V // udi DceuM-Hm '- 0 rH 0 M 0 14 2

. ίο β o m 4J

tjo ·Η(ΰ,βθ<ΰθ

Hh- ΐ ft H S Al o 'S· tu β tn o β σι +J ·Η O Η Λ» β

• rH β i ,β ,β o Q

b — S η PM U Ή = 14 1 AA 1 89

Fremstillingsmåde 1. Opløs 1000 g 2-indanonoxim i 31600 ml chloroform ved 20-25°C.

o 2. Afkøl opløsningen til -30 C (ved afkøling af 2-indanonoxim-opløsningen til -30°C, udkrystalliserer noget af oximen).

3. Tilsæt 1.482 g phosphorpentachlorid i portioner til den voldsomt omrørte suspension. Hold reaktionstemperaturen ved -28 til -32°C ved hjælp af den hastighed, hvormed det faste phosphorpentachlorid tilsættes (De bedste resultater opnåedes ved at lade reaktionen forløbe ved -30°C. Den kan også forløbe med gode resultater ved -10 - -5°C eller måske endog ved højere temperaturer, men det synes som om mere tjære og flere biprodukter, der vanskeliggør isoleringen af lactamen, da fremstilles).

4. Omrør reaktionsblandingen ved ca. -30°C i 10 minutter efter afslutning af tilsætningen og opvarm derpå reaktionsblandingen til 25°C i løbet af 3/4 time. I løbet af dette tidsrum opløses faststofferne, og et nyt faststof udfældes.

5. Omrør reaktionsblandingen ved 25°C i yderligere 3 timer og tilsæt derpå under grundig blanding 31.600 ml vand ved 0-5°C. (Reaktionen kan efterfølges af tyndtlagskromatografi. I et system bestående af 8 dele benzen og 2 dele eddikesyre har lactamen en Rf værdi på 0,36 og oximen en Rf værdi på 0,64. Pletterne fremkaldes ved hjælp af forstøvet 0,05% kaliumpermanganat. Oximpletten forsvinder muligvis ikke fuldstændigt, men den bør blive helt svag). Efterfølgende vaskningsope-rationer udførtes ved 20-25°C.

6. Separer lagene og vask chloroformfasen med 15800 ml vand.

7. Kombiner vandfraktionerne og ekstraher dem med 15800 ml chloroform.

8. Kombiner chloroformfraktionerne, lagdel med 15800 ml vand og titrer under god omblanding blandingen til ca. pH 7 ved hjælp af en 10% natriumhydroxidopløsning. Derved kan forbruges ca. 680 ml natriumhydroxidopløsning, og titreringen er 'langsom. (Denne basevask er vigtig til fjernelse af tjærefremkaldende biprodukter. Titreringen kan tage 1 til 2 timer).

9. Separer lagene og vask chloroformfasen med 15800 ml vand.

10. Foren vandfraktionerne, vask med 9200 ml chloroform og foren chloroformfraktionerne.

11. Carbonbehandel chloroformopløsningen med 1000 g aktiv kul ("Darko KB") ved ca. 25°C i 15-30 minutter.

12. Filtrer opløsningen igennem diatoméjord ("Dicalite") og vask kagen med chloroform og koncentrer filtratet ved formindsket tryk til 144189 15 opnåelse af o-aminomethylphenyleddikesyrelactamen som et tørt faststof.

13. Udbyttet af rå lactam er næsten 100%. Det er et gult krystallinsk faststof. (Hvis tjærefremkaldende materialer ikke er fjernet ved vaskningerne, opnås et mørkt produkt. Det kan rekrystalliseres fra varmt vand efter først at have indstillet vandopslæmningens surhedsgrad til pH 7,0 eller fra toluen-heptan).

Materialer Vægt, g Volumen, ml Mol Rå o-aminornethylphenyl-eddikesyrelactam fra 1000 g 2-indanonoxim 'v 1000 ^-'6,78

Koncentreret saltsyre 8000 "Darko KB" aktiv kul 100

Methylenchlorid 6000

Methylisobutylketon (MIBK) Efter behov 6 N ammoniumhydroxid Efter behov

Fremstillingsmåde 1. Sæt 8000 ml koncentreret saltsyre til ca. 1000-g af den rå lactam opnået fra oximomlejringen.

2. Omrør blandingen og varm den forsigtigt til tilbagesvaling i 3 timer. (Ved opvarmning af denne reaktionsblanding dannes en stor mængde skum som følge af HCL-overskuddets afgang. Dette skum kan fylde hele apparatet. Det kan formindskes ved hjælp af et silicone antiskummiddel. Efter skumningsstadiet til at begynde med er overstået, kan reaktionsblandingen tilbagesvales uden vanskelighed).

3. Afkøl den mørke opslæmning til ca. 40-50°C og tilsæt 100 g aktiv kul ("Darko KB") og fortsæt omrøringen.

4. Behandelmed carbon i 15-20 minutter, filtrer opslæmningen igennem en "Dicalite"-kage og vask kagen med ca. 4000 ml varmt vand.

5. Ekstraher det klare gule filtrat med 6000 ml methylenchlorid (1/2 volumen) og separer methylenchloridet. Gem C^CJ^-laget til undersøgelse for mulig genvinding af uomsat lactam.

6. Koncentrer vandfasen ved formindsket tryk til dannelse af fast o-aminomethylphenyleddikesyre,hydrochlorid.

7. Tilsæt MIBK til de våde faststoffer og fortsæt tilsætning af MIBK og destillation under formindsket tryk, indtil alt vand er fjernet fra faststoffet.

8. Fortsæt destillationen ved formindsket tryk, indtil al MIBK er fjernet fra faststofferne. (MIBK-destillationen overdestillerer ikke kun som en azeotrop med vand, men medtager også overskydende HC1).

16 144189 9. Genopløs faststofferne i 3900 ml vand og tilsæt 650 ml MIBK.

10. Indstil under omrøring ved 20-25°C opløsningens pH-værdi til 5,0 med'6N ammoniumhydroxid. o-aminomethylphenyleddikesyre zwitterionen begynder at udkrystallisere ved en pH-værdi på ca. 3,5.

11. Omrør zwitterion-opslæmningen og afkøl den til 0-5°C i 1 time.

12. Filtrer opslæmningen, vask kagen omhyggeligt med ca. 1000 ml iskoldt vand, derpå 2000 ml MIBK og derpå 5000 ml iskold acetone. De forenede filtrater og vaskevæsker bør undersøges for lactamindhold.

13. Sug kagen tør og tør den derpå i en luftcirkulationsovn ved 45°C. Udbyttet er 670-730 g; 60-65% baseret på oxim.

14. Reaktionerne og oparbejdningerne kan efterfølges af TLC under anvendelse af et opløsningsmiddelsystem bestående af 5 dele acetone, 1,5 del benzen, 1,0 del eddikesyre og 1,5 del vand, idet der fremkaldes med KMnO^. Lactamens R^-værdi er 0,88 og aminosyrens R^-værdi er 0,69.

o-aminomethylphenyleddikesyre,hydrochlorid I en 500 ml rundbundet kolbe forsynet med tilbagesvalingskondensator og en magnetisk omrører anbringes 10,1 g (0,075 mol) o-amino-methylphenyleddikesyrelactam og 100 ml koncentreret saltsyre. Blandingen tilbagesvales så i 3 timer. Reaktionsblandingen behandles, mens den endnu er varm med 2,0 g trækul ("Darko KB") i 5 minutter og filtreres. Filtratet koncentreres til tørhed ved 50-60°/15 mm og til slut ved højvakuum over (se fodnote 1). Faststoffet rekrystalliseres fra en forud fremstillet blanding af acetone:vand, 15:1 (se fodnote 2). Hydro-chloridet tørres i en vakuum ekssikkator over P2°5* Udbyttet af rent produkt smeltende ved 188-190° er 11,4 g (78%) .

Analyse beregnet for CgH12N02Cl: C, 53,73; H, 5,97; N, 6,96; Cl, 17,66. Fundet: C, 53,56; H, 6,02; N, 6,89; Cl, 17,76.

Fodnoter 1. Af hensyn til vellykket rekrystallisåtion behøves et absolut tørt materiale.

2. Forholdet mellem acetone og vand kan variere afhængig af det rå hy-drochlorids tørhedsgrad.

Kalium o-[l-carbomethoxypropen-2-ylaminomethylJ-phenylacetat I en 2000 ml rundbundet kolbe forsynet med tilbagesvalingskondensator og omrører anbragtes 45,92 g (0,28 mol) o-aminomethylphenyleddikesyre, 15,28 g (0,28 mol) KOH, 64,96 g (0,56 mol) methylacetoacetat og 1500 ml absolut methanol. Blandingen tilbagesvaledes så i 3 timer.

17 144189

Opløsningen koncentreredes så til et lille volumen (100-150 ml), filtreredes og fortyndedes med 400-700 ml vandfri ether. Ved skrabning krystalliserede produktet. Faststoffet frafiltreredes og tørredes i en vakuum ekssikkator over ?205· (Faststoffet var særdeles hygroskopisk.

Det bør filtreres så hurtigt som muligt og bør ikke lufttørres). Udbyttet af produktet, smeltende ved 140-148°, var 84,1 g (99%).

Analyse beregnet for ci4Hi§N04K: C, 54,20; H, 5,49; N, 4,52; KF, 2,90. Fundet: C, 53,72; H, 5,44; N, 4,56; KF, 2,92.

Natrium o-(1-ethoxycarbony1-1-propen-2-ylaminomethyl)phenylacetat

Til en ethanolisk opløsning af natriumethoxid, der var fremstillet ud fra 0,6 g (0,026 atom) metallisk natrium og 50 ml absolut ethanol sattes 4,27 g (0,026 mol) o-aminomethylphenyleddikesyre og 3,38 g (0,026 mol) ethylacetoacetat og blandingen tilbagesvaledes i 6 timer. Blandingen inddampedes til tørhed, og remanensen rekrystalliseredes fra ethanol til dannelse af 6,36 g (82%) natrium o-(1-ethoxycarbonyl-l-propen-2-ylaminomethyl)phenylacetat som farveløse nålformige krystaller smeltende ved 230-232°C.

IR: YKBr 3320, 1645, 1605, 1470, 1395, 1275, 1180 cm"'1.

IUcLX

Analyse beregnet for C^H^gNO^Na: C, 60,20; H, 6,06; N, 4,68.

Fundet: C, 59,95; H, 5,86; N, 4,67.

t-butoxycarbonylazid

Til en afkølet opløsning af 100 g (0,76 mol) t-butylcarbazat i 87 g iseddikesyre og 120 ml vand sattes dråbevis en opløsning af 60 g (0,85 mol) natriumnitrit i 50 ml vand i løbet af et tidsrum på 40 minutter, idet temperaturen holdtes ved 10-15°C. Efter tilsætningen var fuldendt fortsattes omrøringen i yderligere 30 minutter ved samme temperatur.

Til blandingen sattes 100 ml vand, og en udskilt olie ekstraheredes med fem 100 ml portioner methylenchlorid. De forenede organiske ekstrakter vaskedes successivt med 100 ml 10% natriumhydrogencarbonatopløsning og 100 ml vand og tørredes over vandfri natriumsulfat. Methylenchloridet fjernedes under formindsket tryk på vandbad, holdt ved 40-45°C. Det tilbageværende azid destilleredes og opsamledes ved 45°C/20 mm Hg. Det vejede 92,7 g (84%) .

o-(t-butoxycarbonylaminomethy1)phenyleddikesyre

Til en opløsning af 70 g (0,35 mol) o-aminomethylphenyleddikesyre, hydrochlorid og 116 g (1,15 mol) triethylamin (TEA) i 400 ml vand sattes dråbevis en opløsning af 64 g (0,45 mol) t-butoxycarbonylazid i 300 ml 18 144189 tetrahydrofuran (THF) under omrøring ved 0°C. Efter tilsætningen var afsluttet, fik temperaturen lov til at stige til stuetemperatur og omrøringen fortsattes i 20 timer. Tetrahydrofuranen afdestilieredes ved en temperatur under 40°C, og den vandige opløsning vaskedes med 200 ml ether, lagdeltes med 200 ml ethylacetat og syrnedes med fortyndet saltsyre til pH 3 under afkøling ved 0°C. Det organiske lag separeredes og det vandige lag ekstraheredes med fire 200 ml portioner ethylacetat. Den forenede ethylacetatopløsning vaskedes med 200 ml vand, tørredes over vandfri natriumsulfat og koncentreredes i vakuum. Koncentratet behandledes med 500 ml n-hexan til dannelse af 87,9 g (95%) o-(t-butoxycarbonylaminomethyDphenyleddikesyre som farveløse nålformige krystaller smeltende ved 114-116°C.

2.4- dinitrophenyl o-t-butoxycarbonylaminomethylphenylacetat

Dicyclohexylcarbodiimid (17,72 g, 0,086 mol) (DDC) sattes på en gang til en blanding af o-(t-butoxycarbonylaminomethyl)phenyleddikesyre (22,73 g, 0,086 mol) og 2,4-dinitrophenol (15,82 g, 0,086 mol) (2,4-DNP) i 250 ml tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen omrørtes i 2 timer ved stuetemperatur. Det udfældede dicyclohexylurinstof frafiltreredes og vaskedes med 100 ml THF. Filtratet og vaskeopløsningerne forenedes og koncentreredes under formindsket tryk under 50° til dannelse af en viskos gul olie, som tritureredes med n-hexan (150 ml)-til dannelse af 2.4- dinitrophenyl o-t-butoxycarbonylaminomethylphenyleddikesyre som gule nålformige krystaller. Udbytte 34,9 g (94%), smeltepunkt 76-77°C. IR: Ymax 3340' 1785' 1685' 1610' 1540f 1530, 1500, 1340 cm"1.

Analyse beregnet for C20H21N3O8' C' 55,68; H, 4,91; N, 9,74.

Fundet: C, 55,70; H, 5,05; N, 9,93.

o-tert-butoxycarbonylaminomethylphenyleddikesyre kan fremstilles i kvantitativt udbytte ud fra tert-butoxycarbonylazid og aminosyren ved anvendelse af triethylamin som base.

BOC-aminosyren reagerer med thionylchlorid i nærværelse af triethylamin (methylenchlorid som opløsningsmiddel) eller pyridin (benzen som opløsningsmiddel) til dannelse af BOC-aminoacylchlorid, som kan kobles direkte med forbindelsen med formlen h2n --/ \ y—vJ-ch2-s-r 0 ' Θ ffl

C02 Et3NH

19 1 AA 1 89 hvor R har den ovenfor anførte betydning, i methylenchloridopløsning i nærværelse af triethylamin. Den beskyttende gruppe kan derpå fjernes ved behandling med kold trifluoreddikesyre.

7-amino-3-[2-(l,3,4-thiadiazolyl)-thiomethyl1-3-cephem-4-carboxylsyre /S.

H K-i f N N-N

2 II li xe o T s

COOH

2-mercapto-l,3,4-thiadiazol

Den af d· Goerdeler, J. Ohm og 0. Tegtmeyer, Berichte 89, 1534 (1956) omhandlede fremgangsmåde fulgtes. Til en opløsning af 160 ml 48% brom-brintesyre og 100 mg pulveriseret kobber sattes ved -7° langsomt og skiftevis 13,6 g (0,1 mol) 2-amino-l,3,4-thiadiazol (Eastman) og 32 g natriumnitrit i små portioner i løbet af et tidsrum på 1/2 time. Blandingen omrørtes i 1 1/2 time ved 0° og i 1 time ved stuetemperatur. Blandingen neutraliseredes så med 50% kaliumhydroxid til pH 9,5. Blandingen filtreredes og filtratet ekstraheredes kontinuerligt med ether i 6 timer. Etheren afdampedes ved 15 mm (25°) til dannelse af et faststof, som så opløstes i 40 ml ethylalkohol og behandledes med 5 g thio-urinstof. Opløsningen opvarmedes ved tilbagesvaling i 1 1/2 time. En opløsning af 4,5 g kaliumhydroxid i 65 ml vand tilsattes, og blandingen opvarmedes ved tilbagesvaling i yderligere 1 1/2 time. Alkoholen afdampedes ved 15 mm (32°) og surhedsgraden i den vandige remanens indstilledes med koncentreret saltsyre til pH 3,5. Efter afkøling i 2 timer i isbad opnåedes 3,5 g 2-mercapto-l,3,4-thiadiazol som gule krystaller med et smeltepunkt på 125-127°.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

7-amino-3-[2-(1,3,4-thiadiazolyl)-thiomethyl3-3-cephem-4-carboxylsyre♦

Til en suspension af 8,1 g (0,03 mol) 7-aminocephalosporansyre og 3,5 g (0,03 mol) 2-mercapto-l,3,4-thiadiazol i 200 ml 0,1 M phosphat-puffer (pH 6,5) fattes under omrøring 5,4 g (0,064 mol) natriumhydrogen-carbonat. Blandingen omrørtes ved 55° under nitrogen, og alt faststof opløstes. Omrøringen fortsattes i 3 timer, og opløsningen afkøledes til 5°, hvorefter surhedsgraden indstilledes til pH 5 med iseddikesyre. Blandingen henstod i 2 timer, og produktet, 7-amino~3-[2-(1,3,4-thia-diazolyl)-thiomethyl]-3-cephem-4-carboxylsyre, med et smeltepunkt på 20 144189 over 140° (langsom dekomponering) opnåedes i et udbytte på 9 g. IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

7-amino-3-[2-(5-hydroxymethyl-l,3,4-thiadiazolyl)thiomethylj-3-cephem- 4-carboxylsyre

Η0ΝΊ—r > N-N

ε I li II II

.C-CHo0H

O *- ^

• CO OH

1- hydroxyacetylthiosemicarbazid

En blanding af 18,2 g (0,2 mol) thiosemicarbazid og 30,4 g (0,4 mol) glycolsyre opvarmedes ved 80-90° i 2 timer og under god omrøring. Blandingen afkøledes ved stuetemperatur og vaskedes med kold absolut alkohol. Faststoffet opsamledes og lufttørredes til en vægt på 40 g. Produktet rekrystalliseredes fra 100 ml kogende 50% alkohol til dannelse af 23 g af det krystallinske 1-hydroxyacetylthiosemicarbazid. Smeltepunkt 189-190°.

Analyse beregnet for C^HyN^OS; C, 24,18; H, 4,74; N, 28,21; S, 21,51. Fundet: C, 24,08; H, 4,50; N, 27,67; S, 21,35.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

2- acetoxymethyl-5-amino-l,3,4-thiadiazol

En blanding af 22,4 g (0,15 mol) 1-hydroxyacetylthiosemicarbazid og 60 ml acetylchlorid omrørtes ved stuetemperatur i 2 timer og opvarmedes derpå til 40°, indtil alt faststof var opløst (ca. 2 timer). Acetylchloridet fjernedes under formindsket tryk (40°, 15 minutter), og remanensen omrørtes med 100 ml isvand. Blandingens surhedsgrad indstilledes til pH 9,2 med 10% KOH, og produktet opsamledes. Det rå faststof rekrystalliseredes fra absolut alkohol til dannelse af 6 g krystallinsk 2-acetoxymethy1-5-amino-1,3,4-thiadiazol, smeltepunkt 191-192°C, efter lufttørring.

Analyse beregnet for CjjHyN^C^S: c, 34,63; H, 4,07; N, 24,26.

Fundet: C, 35,16; H, 4,35; N, 24,38.

2-hydroxymethyl-5-mercapto-l,3,4-thiadiazol

Den af Goerdler et al omhandlede fremgangsmåde fulgtes under 21 144189 'anvendelse af 34,6 g (0,2 mol) 2-acetoxymethyl-5-amino-l, 3,4-thiadiazol og 64 g (0,9 mol) natriumnitrit i 320 ml 48% brombrintesyre og 0,1 g pulveriseret kobber. Bromforbindelsen behandledes med 7,6 g (0,1 mol) thiourinstof og 11,2 g kaliumhydroxid i 25 ml vand. Efter syrning med 6 N brombrintesyre ekstraheredes mercaptan i ethylacetat og behandledes med 17 g kalium 2-ethylhexanoat. Kaliumsaltet opsamledes, vaskedes med ethylacetat og tørredes til en vægt på 12,2 g. Saltet rekrystallisere-des fra acetone-vand til dannelse af 7,6 g krystallinsk kalium 2-hydroxymethyl-5-mercapto-l,3,4-thiadiazol, smeltepunkt 130-131°C.

Analyse beregnet for C^H^K^S^.I^O: c, 17,64? H, 2,46? N, 13,70.

Fundet: C, 17,81? H, 2,43? N, 13,66.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

7-amino-3-[2-(5-hydroxymethyl-l,3,4-thiadiazolyl)thiomethyl]-3-cephem-4-carboxylsyre

Den fulgte fremgangsmåde var den samme som den ved usubstitueret thiadiazol benyttede fremgangsmåde, og der anvendtes 2,25 g (0,012 mol) mercaptan, 3,3 g (0,012 mol) 7-aminocephalosporansyre og 1 g (0,012 mol) natriumhydrogencarbonat i 100 ml 1M phosphatpuffer til dannelse af 3,15' g af en tan-farvet, fast 7-amino-3-[2-(5-hydroxymethyl-l,3,4-thiadiazolyl) thiomethyl ]-3-cephem-4-carboxylsyre, smeltepunkt 170-175°C, dek. IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses i det følgende ved eksempler. Alle temperaturer er angivet i Pc. . "Skellysolve B" er en petroleumsetherfraktion med et kogepunkt på 60-68°C, i alt væsentligt bestående af n-hexan. "IR-120" kaldes også "Amberlite IR-120" og er en stærk kationbytterharpiks indeholdende sulfonsyregrupper. "Amberlite IR-120" er en handelsmæssigt tilgængelig kationbytterharpiks af polystyrensulfonsyretypen og er således en kernesulfoneret polystyrenharpiks, der er tværbundet med divinylbenzen og opnået ved den af Kunin, Ion Exchange Resins, 2. udgave (1958), John Wiley and Sons, Inc., omhandlede fremgangsmåde. Der skal især henvises til side 84 og 87 i dette trykskrift.

Eksempel 1

CHgCONH-j—ζ ^ j| N

-S-C CH

0 / d COOH

22 144189 7- [2-aminomethylphenylacetamidQ]-3-[2- (1,3,4-thiadiazolyl)-thiomethyl] - 3-cephem-3-carboxylsyre

En blanding af 4,8 g (0,015 mol) natrium 2-N- (I-carbethoxypropen- 2-yl)aminomethyl-phenylacetat og 5 dråber Ν,Ν-dimethylbenzylamin i 94 ml tetrahydrofuran.ved -40° omrørtes kraftigt med 2,1 g (0,0156 mol) iso-butylchlorformiat, Blandingen omrørtes i 5 minutter og sattes til en opløsning af 3,8 g (0,01 mol) 7-amino-3-[2-(1,3,4-rfhiadiazolyl) thio-methyl]-3-cephem-4-carboxylsyre og 2,9 ml N-methylmorpholin i 53 ml vand ved 3°. Den resulterende opløsning omrørtes i 2 timer, og tetrahydrofuran afdampedes ved 30° og 15 mm.. Opløsningens surhedsgrad indstilledes til pH 6,5 med koncentreret saltsyre og opløsningen henstod i 3 timer ved 5°. Cephalosporinen, der opnåedes, vejede 2,3 g og havde et smeltepunkt på over 140°, idet den dekomponerede.

Analyse beregnet for .H20: C, 44,64; H, 4,14; N, 13,69.

Fundet: C, 44,81; H, 4,31; N, 13,46.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

Eksempel 2 ,ΗΟ.

ή

N---N

^CH2C0NHt—^ ^ || ||

J—N^^J-CHg-S-C^ y,CK

O I s

COOH

Kalium -7~[(2-N-salicylidenaminomethylphenyl)acetamido]-3-[2-(1,3,4-thiadiazolyl)thiomethyl]-3-cephem-4-carboxylsyre

Til 1 g (0,02 mol) af den i eksempel 1 opnåede qephalosporansyre i 15 ml methanol sattes 280 mg (0,023 mol) salicylaldehyd og 200 mg (0,020 mol) triethylamin. Opløsningen opvarmedes til 50 på et dampbad, filtreredes, og 360 mg kalium 2-ethylhexanoat tilsattes. Methanolen inddampedes ved 30° (15 minutter) til det halve volumen, og det opnåede kaliumsalt vejede 650 mg, og havde et smeltepunkt på 145° under de-komponering.

Analyse beregnet for C26H24KN5Q5S3‘H20: C, 46,96; H, 3,79; N, 10,98. Fundet: C, 48,99; H, 4,04; N, 10,55.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

144189 23

Eksempel 3 ch2nh2

OC^ccimp^S 5 J

J-Ns^-cH -S-C /C-CH OH

O T

dOOH

7- (2-aminomethylphenylacetamido)-3- C2·" (5-hydroxymethyl-l,3,4-thiadiazo-lyl)thiomethyl]-3-cephem-4-carboxylsyre

Den anvendte fremgangsmåde svarede til den ved usubstitueret 1,3,4-thiadiazolcephalosporin i eksempel 1 anvendte. 3,6 g (0,012 mol) af enaminen, 1,6 g (0,012 mol) isobutylchlorformiat og 0,4 ml N,N-dimethylbenzylamin i 71 ml tetrahydrofuran sattes ved -^40° til en opløsning af 2,9 g (0,1 mol) af amino-cephalosporansyren i 2,3 ml N-methylmorpholin og 41 ml vand ved 0°. Der opnåedes et udbytte på 1,6 g og produktet havde et smeltepunkt på over 140°, idet det dekomponerede. Analyse beregnet for C, 45,69; H, 4,40; N, 13,32.

Fundet: C, 45,34; H, 4,30; N, 12,91.

IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

Eksempel 4

JiO

OV-hH

i 'M--N

SN^CH COMI—f ^ „ H

^L-N^^J-CHg-S-C ^O-Ci^OH

0

Kalium 7-[2-N-salicylidenaminomethylphenylacetamidQ]-3-[2-(5-hydroxy-methyl-1,3,4-thiadiazolyl)thiomethyl]-3-cephem-4-carboxylsyre

Der anvendtes samme fremgangsmåde som ved den usubstituerede thia-diazol. 750 mg (0,0015 mol) af cephalosporinen fra eksempel 3, 162 mg (0,0016 mol) triethylamin, 219 mg (0,0018 mol) salicylaldehyd og 292 mg (0,0016 mol) kalium 2-ethylhexanoat i 10 ml methanol gav 530 mg gule krystaller, smeltepunkt over 140°, idet produktet komponerede langsomt. Analyse beregnet for 027^24^5053^: 0, 48,55; H, 3,92; N, 10,34.

Fundet: C, 49,03; H, 4,48; N, 10,28.

24 144189 IR- og NMR-spektrene stemte overens med strukturen.

Tabellen nedenfor belyser den kraftige in vitro aktivitet af de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser og belyser også den tydelige forøgelse i aktivitet især imod Gram-negative bakterier fremkaldt ved tilsyneladende små variationer i thiolen i 3-stillingen.

25 144189

03 00 CO

I ΙΟ O i—i ΓΟ n o o h oo ro co o o ό ro Lnuomro p CD - - — — > ·- — — — k ID Π O] [N * OOO O OOCMOHOOOHHHHHOri· 03 I tn ro od in ρ cn o o oo m vo od co n ro ro in in ro p co ^ ^ k - - - - - - - ro ro ro ro - co OOO O ooroocoHriHcOi—ihcohh Λ

03 OD OD

I ro Η H ro i_3 od οοι-ι in roro id in in ro inininro p co - s - - s - - - - ro ro ro ro - cm OOO O ooriiorocori^HioHHHHoo

A. A

P CO CO

I CM O O OD OD OD OD

jo ooo in η η η Η n ro ro in in in in p co - - - - ------ CO - ODCMCMCM -

H OOO O OOOOCMi—IrHi—Il—! Η H CM i—I

Β Λ \ P CO o tji i i-i i-ι η n β ρ oo o o cm ro co ro co n ro ro nnnro — ^ p CO - - - - - - - - - '•ODCMCMCM·' — OOO O Οι—ICMOCMi—ICMi—I H r^l Η i—li—100 C c/3 'sr 0 iroooro rooooo od •H pooooo HoonHcoro ro n n ro -P p co - - - - ------ - cm ro cm · CCJ OOO O OOOOOOHOri’ijjlOHOri’

Pi

•PtQ

C i ri· ro ro ro n in 0) pcpooH cm ro co rococo co n nro U p CD - - - - ' ' ' - CO CM Γ0 00 - β OOO O OOHOOOCMOHi^HCOr—I O ri· 0 ro

X · P co CO

cn I o o o ro n co coco co

44 ρ o o o h roi+ro H ro Η n ro η H

CBHPco -- - - - - ----- rococo·' •H OOO O ΟΟΠΟΟΟΟΟΉ·γ:ΗΠΗΟΗ

Pi rH

0 · p ri· ri· •PiQinooioooooco ri* co co co

ri joo ooo r-ι onnoronnn n niH

43 p P CO -- - - - -- -- -- - CM CD 00 - -H OOO O ΟΟΟΟΟΟΟΟ^ι^ΙΗΗΟΗ 4h c p co co •Hl HHronnnco K co o o pH oocmcm h cd co co n 00 rH SOD -- - - - - - oo co ro -

(Ci ooo o OOCMOOOCMO'a’Hr-HVOOCM

B

•η p co oo β I o o co ro co coco co

•Η κ ri* o o o Η H ro oroo ro n rH

^ cn - - - - - - --- - oo oo-

ooo O OOi-HOOOrHOCNr^COroOiH

n ri· r~ r- ιοηΓ"Η<η[^·οθΓθκι!σιιοΓ~<η oooro ro oocnroHr^roonroHnnn neon n cocoonHcnHcriHri’Ocococo mm σι o cncnncnncnncnnooocncncn ri! ri! ri! ri! ri!ri!Hri!Hri!Hri!iHi3DCM<;<Cri! ri! ri! <! ri! ri! ri! oo

X X — — O

g XX — CO 00 H — - β — — ri· I i —ri1 —' ri1 •H roro i o o | ---^1 Γβ I I o g rH H en o —ri· ri· ri· — i o — — — dl O O i—I β — —- CL) r-H ri* I I I ri* O H ri· ri· ri· g HH —' Pi Di '—' I OOOI H'-'lll en 0) roroi o Η Η Π o ^ ooo

tjl 43 tfl rorO-cnH'-''-''-'Η 03 Η Η H

β XX +> co co 43 -Η “ •H to ·Η 0\0 Η Η + τι <U 0) 0) 0) 0)

Pi d)Q)gO XXCUHHPP-HHOUCUCDCL) (¾ Ρ β Ρ η ΜΡ32!+>43·Η·ΗΗ-Ηβϋ3βββ β ·Η Ο + -Η Ο β G Η β -Η 03 Ο Ο ϋ

0) β Cd æ in- ino3d3PiH)0043PtnUPPP

0) g OOP Pri· Ρ β β CD ggPtnPPlOOO

•d en g >, cu cu i pcup+i-hpppipiPiphhh

β·Η POjPiPIO PlPlPlPHOCU-HOCUgOOU

α> β . o p PH PpPooPcggP

•d ρ β · p ρp p p o cu a ....

iHtJiftPl H . . . Pi +> +> +> η pi ._μ.. · · · ρ · · · Pi Μ tn Ρ β β' β

(+ o Qp PP PPPPWW^fPfPPHPHMH

26 146189 g

<N

S

co 3_J

ώω| > CO —ti I «Λ p\ t-l CO I rn co S—/ 1 I \ Al

t-ΐκυ I O JN

e rvo £=/ E

ø ^ ,

5 S co sJ

Q) ° i vo Λ» g cm ^ σ\ IJ? » g *-( H To?=( 0 v4 CFV i m

g WO £-J

1 co FK

<1> i ΙΑ I &_►_} Ό CO tirre M Ol Λ=/ ** ø i 1A I ' P)U3 **· <U t-3 co i y3 g, s=f

I—I

^ K\ ,_,

g ' S ? ΓΛ I O

^ 7 ^=i, fQ'S' ί2ΓΥ 4. u cb·

0 2σ> W

g 5 tc\

ø rH K

øø S

0) 0<i V

m ft co s-s N\ co V=\

0\o c 1 i ~ \ K · CU I W

Si .ø pi'St I έ-ο F1 θ'» * _/

10 c EC\ S=T

+ 0 1 ιϋ £ 0 øø •0 (U τ3 > 0) ° _ £ 0* 0) <U »

> Ό CO

S- C W

0 <D W

ft Ό O

tu i? r-l o t “ 0-8 a) c Vsr

Ό <D I

>1 Ό KL

«0*0 S ΚΛ ø o tc Λί _ O S +

W bl OJ CJ

•øø W K

-0-0 O o στ) i / •Q >< il5/ n js U . æ 0 0 < fe «

« K

27 1åA189 BL-S685 og BL-S690 har et antibakterielt spektrum, som svarer til MR-S94, men er ca. 2 gange mindre aktive. De er imidlertid noget mere opløselige (2,5 - 3,5 mg/ml) i vand end MR-S94. Undersøgelser af koncentrationen i blod viser, at^lfter IM-indgiveIse på 10 mg/kg giver maksimale koncentrationer, som kan sammenlignes med den ved MR-S94 opnåelige. Ingen af forbindelserne absorberes i væsentlig grad ved oral indgivelse. Den procentvise mængde af disse farmaceutiske midler, som bandt sig til menneskeserumproteiner var i tilfælde af BL-S685 52 og BL-S690 36, sammenlignet med 51 i tilfælde af MR-S94. Ved crystalluria-undersøgelser hos rotter gav BL-S685 og BL-S690 tilfredsstillende høje serum og urinkoncentrationer uden tegn på krystalluria.

Claims (1)

1, Analogi fremgangsmåde til freinstilling af cephalosporansyre- derivater med den almene formel· 28 144189 ^ II 0 y~~^\^-cH2-s-R 1 O COOH ΠΟ, hvori X betegner -H2 eller -CH-^ ^ 0g hvor R betegner N-- N N---N \=/ 1. ii eller I IL —-k / —1k / CH^OH eller farmaceutisk anvendelige salte S deraf, kendetegnet ved, at man omsætter en forbindelse med formlen H2N—k'L I ii j—s\^j"CH2*s'r COOH hvor R har den ovenfor angivne betydning, eller et salt eller en let hydrolyserbar ester deraf, med et acyleringsmiddel for en primær aminogruppe, hvilket acyleringsmiddel indeholder resten v I 0