DK141533B - Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer. - Google Patents

Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer. Download PDF

Info

Publication number
DK141533B
DK141533B DK446374AA DK446374A DK141533B DK 141533 B DK141533 B DK 141533B DK 446374A A DK446374A A DK 446374AA DK 446374 A DK446374 A DK 446374A DK 141533 B DK141533 B DK 141533B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
enzymes
carrier
proteins
product
protein
Prior art date
Application number
DK446374AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK141533C (da
DK446374A (da
Inventor
Regula Boeniger
Victor Krasnobajew
Original Assignee
Givaudan & Cie Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DK45874AA external-priority patent/DK138750B/da
Priority claimed from CH941574A external-priority patent/CH592694A5/xx
Priority to SE7410542A priority Critical patent/SE7410542L/xx
Priority to DK446374AA priority patent/DK141533B/da
Application filed by Givaudan & Cie Sa filed Critical Givaudan & Cie Sa
Priority to DE19752529604 priority patent/DE2529604A1/de
Priority to JP50083898A priority patent/JPS5133185A/ja
Priority to FR7521397A priority patent/FR2277841A2/fr
Priority to CA231,082A priority patent/CA1052305A/en
Priority to GB28888/75A priority patent/GB1512066A/en
Priority to NL7508189A priority patent/NL7508189A/xx
Priority to BE158126A priority patent/BE831168R/xx
Publication of DK446374A publication Critical patent/DK446374A/da
Priority to US05/714,153 priority patent/US4066504A/en
Publication of DK141533B publication Critical patent/DK141533B/da
Publication of DK141533C publication Critical patent/DK141533C/da
Application granted granted Critical

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/089—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/091—Phenol resins; Amino resins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G12/00—Condensation polymers of aldehydes or ketones with only compounds containing hydrogen attached to nitrogen
    • C08G12/02—Condensation polymers of aldehydes or ketones with only compounds containing hydrogen attached to nitrogen of aldehydes
    • C08G12/04—Condensation polymers of aldehydes or ketones with only compounds containing hydrogen attached to nitrogen of aldehydes with acyclic or carbocyclic compounds
    • C08G12/06—Amines
    • C08G12/08—Amines aromatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/087—Acrylic polymers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Polymers With Sulfur, Phosphorus Or Metals In The Main Chain (AREA)
  • Phenolic Resins Or Amino Resins (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

(w V Rft OD FREMLÆeeiLSESSKRIFT 141533 i«) Tillæg til patent nr. 138750 DANMARK ln, cl·3 c o® S 'Vål C 12 N 11/08 «(21) Ansøgning nr. 4463/74 (22) Indleveret dsn 21 . aug. 1974 (23) Løbedag 21. aug. 1974 (44) Ansøgningen fremfagt og fremlasggeteesskrtftet oHentlfggjort den 1 4. apr. 1 980
DIREKTORATET FOR
PATENT-OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Prioritet begæret fra den
9. Jul. 1974, 9415/74, CH
(7i) L. GIVAUDAN & GIE SOCIETE ANONYME, CH-1214 Vernier, Geneve, CH.
(72) Opfinder: Regula Boeniger, Hirzerenstraeee, Greifensee, CH: Victor Krasnobajew, Langwattstrasse 50, Zollikerberg, CH.
(74) Fuldmægtig under sagens behandling:
Plougmann & Vingtoft Patentbureau.
(54) Polykondensatlonsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.
Dansk patent nr. 138.750 angår et polykondensatlonsprodukt af en aromatisk diamin og et aliphatisk aldehyd til binding af proteiner eller enzymer, hvilket polykondensatlonsprodukt eventuelt er dia-zoteret, og hvilket produkt er ejendommeligt ved, at det er fremstillet ved omsætning af 1,3-phenylendiamin med glutardialdehyd i et molforhold fra 1:1 til 1:10, eventuelt i nærværelse af et finkornet, fast, inert uorganisk bæremateriale for proteiner eller enzymer, som kan være en siliciumforbindelse eller et metaloxid, og det derved vundne produkt udmærker sig ved stor bindingskapacitet til proteiner.
Det har nu vist sig, at en række andre strukturelt beslægtede aminer kan omsættes med samme eller strukturelt lignende dialdehyder eller med acrolein på samme måde til kondensationsharpikser, som ligeledes 2 141533 på fremragende måde er egnet til samme formål, altså til binding af proteiner.
Opfindelsen bygger på denne erkendelse og angår et polykondensations-produkt til binding af proteiner eller enzymer, hvilket produkt eventuelt er diazoteret, og hvilket produkt er ejendommeligt ved, at det er fremstillet ved omsætning af 1 mol af en én- eller tokernet carbocyc-lisk aromatisk di- eller triamin, hvorhos de to kerner i den tokerne-de amin er bundet til hinanden med en direkte binding eller via ét broatom, med 1 - 10 mol af et aliphatisk dialdehyd med 2-5 carbon-atomer eller acrolein, eventuelt i nærværelse af et finkornet, fast, inert uorganisk bæremateriale for proteiner eller enzymer, med de undtagelser, at polykondensationsproduktet ikke er fremstillet ved omsætning af 1,4-phenylendiamin og et aliphatisk dialdehyd med 2-5 car-bonatomer, og at polykondensationsproduktet ikke er det i krav 1 i patent nr, 138.750 omhandlede.
Polykondensationsprodukter på basis af polyaminer såsom ethylendiamin, paraphenylendiamin, hexamethylendiamin, urinstof og sebacinsyredihydra-zid og dialdehyder er f.eks. beskrevet i fransk patentskrift nr. 1.052.578. De dér beskrevne produkter anvendes imidlertid i kunststofindustrien. At sådanne kondensationsprodukter skulle kunne anvendes til binding af proteiner eller enzymer fremgår ikke af det nævnte franske patentskrift og er ej heller nærliggende på baggrund heraf.
I USA patentskrift nr. 3.706.633 er beskrevet en fremgangsmåde til fiksering eller uopløseliggørelse af proteiner. Der gås her ud fra dialdehydstivelse, som i første trin' omsættes til et kondensationsprodukt med en polyamin. Derefter følger et reaktionstrin, der udføres ved hjælp af natriumborhydrid, og endelig diazotering af kondensationsproduktet og fiksering af proteinet. I USA patentskrift nr. 3.821.083, som svarer til dansk patentskrift nr. 133.010, er det også anført, at der til fremstilling af bærestoffer for proteiner som udgangsmateriale anvendes polymere med aldehydgrupper. F.eks. omdannes polyacrolein til acetalen, denne fikseres på en inert bærer, og endelig genfremstilles de frie aldehydgrupper ved sur hydrolyse af acetalen. På den således forberedte bærer kan proteinet derefter anbringes.
Polykondensationsprodukterne ifølge opfindelsen udmærker sig i forhold til de kendte ved at være fremstillet ud fra billigere udgangsmaterialer og ved at være fremstillet på mindre kompliceret måde.
3 141533
De i USA patentskrift nr. 3.706.633 beskrevne partikler kan desuden ikke anvendes til søjlechromatografi, idet de er amorfe og for fine. Polykon-densationsprodukterne ifølge den foreliggende opfindelse har desuden meget større bindingsevne end de kendte stoffer.
Eksempler på carbocycliske aromatiske di- eller triaminer er f.eks. enkeltkernede forbindelser såsom phenylendiaminer, f.eks. p-phenylen-diamin, phenylentriamlner såsom 2,4,6-triaminophenol og 2,4,6-tri-aminotoluen, tokernede forbindelser såsom biphenyldiaminer, f.eks. benzidin, eller tokernede forbindelser, i hvilke de to kerner er forbundet via ét broatom, f.eks. diaminodiphenylmethaner.
Foruden aminogrupper kan de aromatiske kerner også have andre substi-tuenter, f.eks. lavere alkylgrupper såsom methyl og ethyl, lavere alkoxygrupper såsom methoxy og ethoxy, hydroxy-, halogen-, carboxy-, mercapto-, lavere alkylthio- eller sulfonylgrupper.
Endelig kan der ved fremstillingen af de omhandlede kondensationsprodukter også anvendes blandinger af forskellige siminer.
Eksempler på aliphatiske dialdehyder er glutardialdehyd, ravsyredi-aldehyd og glyoxal. Ifølge opfindelsen foretrækkes glutardialdehyd, da dette dialdehyd fører til produkter med høj bindingsevne.
Foretrukne aminokomponenter er benzidin og 2,4,6-triaminotoluen, da polykondensationsprodukter fremstillet hermed har særlig god bindingsevne. Ifølge opfindelsen foretrækkes derfor kondensationsprodukter, som er fremstillet ved, at der til benzidin sættes glutardialdehyd, eller som er fremstillet ved, at der til 2,4,6--triaminotoluen sættes glutardialdehyd.
Om de ved fremgangsmåden vundne produkter er egnede til binding af enzymer, kan fastslås eksperimentelt på let måde ved behandling af det vundne produkt med enzym, fortrinsvis amyloglucosidase, og måling af det bundne enzyms aktivitet. Produktet er velegnet, når denne aktivitet andrager mindst 50 - 100 enheder pr. g bærestof.
Til dette formål kan følgende forsøgsmetode benyttes: 4 141533 1 g af bærestoffet fyldes i en chromatografisøjle (1,5 x 15 cm).
En opløsning af 1 g amyloglucosidase (50 enheder/mg) i 100 ml 16 millimol acetatpuffer (pH-værdi 4,8) sættes på søjlen ved stuetemperatur og med en gennemstrømningshastighed på 20 ml/time. Det bundne enzym skal, som ovenfor anført, have en aktivitet på mindst 50 -100 enheder/g bærestof.
Aktiviteten måles efter Zulkoski's metode på grundlag af den af fra opløselig stivelse frigjorte glucose. Den frigjorte glucose bestemmes enzymatisk ved hjælp af glucoseoxidase/peroxidase-tests (Bergmeyer, Metho-den der enzymatischen Analyse, I, (1970) 416). 1 Enhed = den mængde enzym, som frigør ét /Umol glucose/minut ved en reaktionstemperatur på 60"C ved pH-værdi 4,8 fra opløselig stivelse.
På den anden side er egnetheden givet, når bærematerialet mindst binder 10 mg af et protein (f.eks. kvægserumalbumin) pr. g bærestof.
Den bundne proteinmængde kan bestemmes ved hydrolyse af det bærestofbundne protein med 6N HCl og påfølgende bestemmelse af mængden af frigjorte aminosyrer ved hjælp af en hvilken som helst gængs analysemetode for aminosyrer.
Som proteiner, der kan bindes til de omhandlede kondensationsprodukter, kan anføres polypeptider, antigener, antistoffer, proteininhibitorer eller især enzymer. Enzymerne kan være af vegetabilsk, animalsk eller mikrobiel oprindelse. Der kan anvendes hydrolaser (peptidaser, proteinaser, desaminaser, carbohydraser og esteraser), lyaser eller desmolaser (hydrolyaser, decarboxylaser og aldolaser), transferaser, isomeraser, oxidoreduktaser og ligaser. Eksempler på enzymer, ud fra hvilke der ifølge opfindelsen kan fremstilles uopløselige enzympræparater, er alkoholdehydrogenase, naringinase, hesperidinase, β-glucosidase, a-amylase, invertase, amyloglucosidase, urease, trypsin, ficin, papain, bromelin, subtilopeptidase, rennin, glucoseisomerase, glucoseoxidase, peroxidase, katalase, acylase og cytochrom.
Molforholdet mellem kondensationspartnerne polyamin og aldehyd liggerf som ovenfor anført, mellem 1:1 og 1:10, fortrinsvis ved ca. 1:3.
Omsætningen kan udføres på i og for sig kendt måde, f.eks. i vandig opløsning, fortrinsvis under tilsætning af en syre. Ved en særlig 5 141533 udførelsesform arbejdes der i nærværelse af et inert, finkornet, uorganisk, især silicatholdigt, hjælpemiddel. Eksempler på sådanne hjælpemidler er silicagel, pimpsten, diatoméjord (kisel-gur), bentonit, wollastonit og porøst glas, men der kan også anvendes metaloxider såsom aluminiumoxid eller hydroxylapatit. Der anvendes fortrinsvis silicagel, f.eks. med en partikelstørrelse på 0,05 - 0,2 mm (70 - 325 mesh). Ved tilstedeværelse af sådanne bærematerialer kan der opnås en homogen partikeldannelse véd kondensationen, hvilket igen medfører bedre sedimentation. Bedre, dvs. hurtig, separation muliggør en hurtig og mere ren fraskillelse af det bundne bærestof. Kondensationen i nærværelse af et bæremateriale udføres hensigtsmæssigt på den måde, at partiklerne først bringes i berøring med en af de to komponenter, hvorefter den anden tilsættes under samtidig eller påfølgende let syrning.
Kondensationen kan foretages i homogen fase eller fortrinsvis i et 2-fasesystem under tilsætning af en syre, fortrinsvis saltsyre, under kraftig omrøring eller omrystning. Anvendelsen af et 2-fasesystem befordrer dannelsen af sfæriske, i udstrakt grad homogene, let fil-trerbare og godt sedimenterende partikler, som er særlig velegnede som bærestoffer.
Som anden fase kan anvendes inerte, med vand ikke-blandbare organiske opløsningsmidler, f.eks. dichlormethan, chloroform, carbontetrachlorid, benzen, toluen, ethylacetat, dioxan eller carbondisulfid. Det foretrækkes især som organisk opløsningsmiddel at anvende chloroform.^
Der kan dog også anvendes acetone.
Ifølge opfindelsen fås et allerede meget aktivt bærestof, som dog ved diazotering kan aktiveres yderligere. Diazoteringen kan udføres på i og for sig kendt måde ved behandling af kondensationsproduktet med nitrit og syre.
Til fiksering (kemisk binding) af proteinet til bærestoffet behandles sidstnævnte med en vandig, fortrinsvis pufret, opløsning af proteinet (1 - 50 mg/ml) ved en temperatur på ca. 0 - ca. 30°C, fortrinsvis mellem 4°C og stuetemperatur, og behandlingen kan foretages ved omrøring eller rystning. På grund af den høje aktivitet hos det om- 6 141533 handlede bærestof kan bindingen af proteinerne fordelagtigt også udføres ved simpel filtrering af proteinopløsningen gennem et bærestoflag, fortrinsvis en med bærestof fyldt søjle, som det f.eks. er sædvanligt ved søjlechromatografi. Således kan man f.eks. lade kulturfiltrater af mikroorganismer, som indeholder proteiner eller enzymer, løbe direkte over en bærestofsøjle, hvorhos proteinerne eller enzymerne bindes selektivt. Det er hensigtsmæssigt at efter-vaske med pufferopløsning og 1M kaliumchloridopløsning for at fjerne ikke-bundne proteiner.
De på de omhandlede bærestoffer bundne proteiner er i almindelighed meget stabile, og med enzymer fås der meget høje specifikke aktiviteter (enhed/g). Der kan opnås forhold på fra 1:3 til 1:10 vægtdele protein/bærestof.
De omhandlede bærestofbundne proteiner, især enzymerne, kan anvendes på i og for sig kendt måde, f.eks. til analytiske eller præparative formål eller i levnedsmiddelteknologien, f.eks. til fremstilling af glucose ud fra stivelse (jfr. f.eks. Scientific American 224, (nr. 3) 26 - 33 (1971), Angew. Chemie 84, (8) 319 - 268 (1972),
Chemiker Zeitung 96, (11), 595 - 602 (1972), C & EN, (15.2.71), 86 -87) .
Opfindelsen belyses nærmere ved nedenstående eksempler, i hvilke mængdeangivelserne af det vundne eller anvendte bærestof er beregnet på tørvægt:
Eksempel 1.
Til en opløsning eller suspension af 5 g af polyaminen i 200 ml chloroform sættes under kraftig omrøring først 20 g aldehyd (80 ml af en 25%'s opløsning i vand) og efter yderligere 5 minutters forløb portionsvis 20 ml 7N saltsyreopløsning. Reaktionsblandingen størkner.
Der tilsættes 300 ml vand og rystes i 5 minutter, til den igen bliver flydende. De polymere småkorn lades henstå under lejligheds omrøring i 1 time. Efter frasugning af reaktionsblandingen over en Buchner--tragt vaskes polymerpartiklerne tre gange med 200 ml acetone og 7 141533 derefter med O,IN NaOH-opløsning. Resterende chloroform fjernes ved vask med acetone. De således vundne bærestofpartikler er sfæriske, homogene og godt filtrerbare; de opbevares i vand eller fortyndet natriumhydroxidopløsning. De kan, eventuelt efter diazotering, anvendes til enzymbinding.
Eksempel A.
1 g bærestof fyldes i en chromatografisøjle (1,5 x 15 cm) og vaskes med den til efterfølgende enzymbinding anvendte pufferopløsning.
Den puf rede enzymopløsning (1 - 100 mg protein/ml puffer) hældes med en gennemstrømningshastighed på 20 ml/time gennem søjlen.
Koblingskapaciteten er udtømt, når der i eluatet kan påvises protein, hvilket f.eks. kan konstateres ved måling af absorptionen ved 280 nm. Det ikke bundne enzym fjernes ved vask af søjlen med 1M KCl-opløsning og pufferopløsningen. Derefter foretages aktivitetsbestemmelse af en alikvot af materialet med det pågældende substrat under de givne reaktionsbetingelser. Efter aktivitetsbestemmelse vaskes en alikvot af enzympræparatet med vand og tørres, og det tørrede materiale undersøges. På denne måde kan antal enheder enzymaktivitet/g bærestof bestemmes. 1 nedenstående tabel I er opstillet de ifølge eksempel 1 fremstillede kondensationsprodukter og de dertil svarende, ifølge eksempel A bestemte aktiviteter.
8 141533
<D
U
ffi
A
S1 OOOOOOOgOO § O O
1¾ ssssssssss sss
I I I I 1 I 1 1 1 1 III
-¾¾ SSSSSS^10^^ minin 'O?'» .......... ...
,ggm Ο ΟΟϋ ϋϋυυυϋ ϋϋϋ
I I
0) -H
I «I ^ mi® o S ® A (1) Ό S 1
d ,¾ O’ O
§ O -s
n^H 3 <D
M “ Φ Η M
,0¾ tn tf
+i 9 <u -"O
Q) P £ ^ , 3 λ λ λ λ λ Q Ο Ο Ο Ο Ο Ο
lun® nooooåoomo OOO
Ή Ο ^“'“’•^„„lOCMPOLn m οο 'Χ) ιϋΗ .. αοοο-^Γ'-Ο®^^ >1^· Η ^ •Ρ g +> 0) (Π Q) -p'-'-p -Η ·Η > ε >
• ·Η WH
Η 4-> Ν -Ρ Ο
Ai fi ,Μ -Ρ Η c 0) Π5 μ <ΰ A HJ Bi
'd’dtJ'd'd'O'O'O'O'O
Λ A A A A A -¾ -C A A A
t ί ίί ίίί 2 s fi •s 55555¾¾¾¾¾ ΐ I 3 2 S S S 51 S S « S S S i • £ * 3333S33333 >,8 8 τ3 ΟΟΟΟΟΟ^ΟΟΟ Oco^ S a fi 3 (d o i ir A **-* -*-* S A Η t>
O 0) 3 C
•H Pi ε in <u -μ h c -Η 'i 'i ^ S 3§3 ti C £ £ C C 3 s -S S 5 3 -i c ® ® ® ε ε ε cu gxiooofo *5 »S *§ 5 § 5
>§ § 3, -P 3 tn P
§ 5 c fi o fi h 5 5 Λ 5 5 5
w C! .p4 »r4 jJ rrt H o o - C ti C
W § g g O O o SSHmhhh h (d (d fi fi i se M ti. sL ti.
>ι -Η -P -Η -P 'tf „ 6 g " " f*
d βρρεει522 SH m m S
ύ ,S^^55 85qq5|IA.AA
t ^ * ti ? ? g N J j N fi ΐ ΐ ΐ η ,.,.......10)--(1)6-^7
DK446374AA 1974-01-29 1974-08-21 Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer. DK141533B (da)

Priority Applications (10)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE7410542A SE7410542L (sv) 1974-01-29 1974-08-19 Kondensationsprodukter.
DK446374AA DK141533B (da) 1974-01-29 1974-08-21 Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.
DE19752529604 DE2529604A1 (de) 1974-01-29 1975-07-02 Kondensationsprodukte
JP50083898A JPS5133185A (da) 1974-01-29 1975-07-08
FR7521397A FR2277841A2 (fr) 1974-01-29 1975-07-08 Produits de condensation polymeres
CA231,082A CA1052305A (en) 1974-01-29 1975-07-08 Insolubilized proteins on polymeric condensation products
GB28888/75A GB1512066A (en) 1974-01-29 1975-07-09 Proteinated condensation products
BE158126A BE831168R (fr) 1974-01-29 1975-07-09 Produit de condensation
NL7508189A NL7508189A (nl) 1974-01-29 1975-07-09 Condensatieprodukten.
US05/714,153 US4066504A (en) 1974-01-29 1976-08-13 Aliphatic dialdehyde-aromatic polyamine condensation products bound to proteins and enzymes

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK45874AA DK138750B (da) 1973-02-22 1974-01-29 Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.
DK45874 1974-01-29
CH941574A CH592694A5 (en) 1974-07-09 1974-07-09 Condensn prods of aromatic polyamines with dialdehydes or acrolein
CH941574 1974-07-09
DK446374 1974-08-21
DK446374AA DK141533B (da) 1974-01-29 1974-08-21 Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK446374A DK446374A (da) 1976-01-10
DK141533B true DK141533B (da) 1980-04-14
DK141533C DK141533C (da) 1980-09-15

Family

ID=27176221

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK446374AA DK141533B (da) 1974-01-29 1974-08-21 Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.

Country Status (9)

Country Link
JP (1) JPS5133185A (da)
BE (1) BE831168R (da)
CA (1) CA1052305A (da)
DE (1) DE2529604A1 (da)
DK (1) DK141533B (da)
FR (1) FR2277841A2 (da)
GB (1) GB1512066A (da)
NL (1) NL7508189A (da)
SE (1) SE7410542L (da)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT64790B (en) * 1975-02-18 1977-07-07 Uop Inc Immobilized enzyme conjugates
JPS52116131A (en) * 1976-03-26 1977-09-29 Toshiba Corp Microprogram instruction control unit
DE2708018A1 (de) * 1977-02-24 1978-09-07 Boehringer Mannheim Gmbh An polyamid fixiertes biologisch aktives protein und verfahren zu seiner herstellung
JPS59232064A (ja) * 1983-06-14 1984-12-26 Nippon Sanso Kk 加工魚類の香気成分回収法および調味料の製法
JPS60176563A (ja) * 1984-02-22 1985-09-10 San Ei Chem Ind Ltd 親油性食用色素の製造法
KR101328896B1 (ko) 2005-07-26 2013-11-13 크나우프 인설레이션 게엠베하 접착제 및 이들로 만들어진 물질
EP2450493B1 (en) 2007-01-25 2024-10-02 Knauf Insulation SPRL Mineral fibre board
US8501838B2 (en) 2007-01-25 2013-08-06 Knauf Insulation Sprl Composite wood board
WO2008091256A1 (en) 2007-01-25 2008-07-31 Knauf Insulation Gmbh Binders and materials made therewith
EP2137223B1 (en) 2007-04-13 2019-02-27 Knauf Insulation GmbH Composite maillard-resole binders
GB0715100D0 (en) 2007-08-03 2007-09-12 Knauf Insulation Ltd Binders
CA2753863C (en) * 2009-03-04 2014-12-16 Xerox Corporation Structured organic films
US8900495B2 (en) 2009-08-07 2014-12-02 Knauf Insulation Molasses binder
JPWO2011102330A1 (ja) * 2010-02-18 2013-06-17 綜研化学株式会社 新規ポリアゾメチン
KR102023264B1 (ko) * 2010-05-07 2019-11-04 크나우프 인설레이션, 인크. 탄수화물 폴리아민 결합제 및 이를 이용하여 제조된 물질
MX339649B (es) * 2010-05-07 2016-06-02 Knauf Insulation * Aglutinantes de carbohidrato y materiales hechos con los mismos.
WO2011154368A1 (en) 2010-06-07 2011-12-15 Knauf Insulation Fiber products having temperature control additives
US9567425B2 (en) * 2010-06-15 2017-02-14 Xerox Corporation Periodic structured organic films
WO2012152731A1 (en) 2011-05-07 2012-11-15 Knauf Insulation Liquid high solids binder composition
FR2982267A1 (fr) * 2011-11-07 2013-05-10 Knauf Insulation Liants et materiaux qui en decoulent
FR2982268A1 (fr) * 2011-11-07 2013-05-10 Knauf Insulation Liants et materiaux qui en decoulent
GB201206193D0 (en) 2012-04-05 2012-05-23 Knauf Insulation Ltd Binders and associated products
GB201214734D0 (en) 2012-08-17 2012-10-03 Knauf Insulation Ltd Wood board and process for its production
EP2928936B1 (en) 2012-12-05 2022-04-13 Knauf Insulation SPRL Binder
MX2016010192A (es) 2014-02-07 2017-01-09 Knauf Insulation Inc Articulos no curados con estabilidad en almacen mejorada.
GB201408909D0 (en) 2014-05-20 2014-07-02 Knauf Insulation Ltd Binders
GB201517867D0 (en) 2015-10-09 2015-11-25 Knauf Insulation Ltd Wood particle boards
GB201610063D0 (en) 2016-06-09 2016-07-27 Knauf Insulation Ltd Binders
GB201701569D0 (en) 2017-01-31 2017-03-15 Knauf Insulation Ltd Improved binder compositions and uses thereof
GB201804907D0 (en) 2018-03-27 2018-05-09 Knauf Insulation Ltd Composite products
GB201804908D0 (en) 2018-03-27 2018-05-09 Knauf Insulation Ltd Binder compositions and uses thereof
CN115557601A (zh) * 2022-11-08 2023-01-03 成都理工大学 生物质微球及其制备方法与应用、生物反应器、地下井

Also Published As

Publication number Publication date
BE831168R (fr) 1976-01-09
DE2529604A1 (de) 1976-01-29
CA1052305A (en) 1979-04-10
DK141533C (da) 1980-09-15
JPS5133185A (da) 1976-03-22
FR2277841B2 (da) 1981-08-07
DK446374A (da) 1976-01-10
GB1512066A (en) 1978-05-24
FR2277841A2 (fr) 1976-02-06
SE7410542L (sv) 1976-01-12
NL7508189A (nl) 1976-01-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK141533B (da) Polykondensationsprodukt til binding af proteiner eller enzymer.
US4560504A (en) Carboxyl anchored immobilized antibodies
KR101953865B1 (ko) 가교된 폴리-ｅ-라이신 입자
US4184986A (en) Novel condensation products having high activity to insolubilize proteins and protein-insolubilized products
US4186053A (en) Insolubilized enzyme product
US3983000A (en) Bonding proteins to inorganic supports
US4201857A (en) Novel condensation products having high activity to insolubilize proteins and protein-insolubilized products
GB1597757A (en) Derivatives of hs-group-containing polymers
GB1571993A (en) Process for producing insoluble solid supports
US3985617A (en) Immobilization of biologically active proteins with a polypeptide azide
EP0325404B1 (en) Method of immobilizing physiologically active substances
Hsiao et al. Immobilization of glycoenzymes through carbohydrate side chains
CA1084860A (en) Immobilized biologically active proteins
US4268419A (en) Support matrices for immobilized enzymes
US4066504A (en) Aliphatic dialdehyde-aromatic polyamine condensation products bound to proteins and enzymes
Smiley et al. Immobilized enzymes
Moeschel et al. Immobilization of thermolysin to polyamide nonwoven materials
CN110204618A (zh) 制备抗体-链霉亲和素偶联物的方法
CS209424B2 (en) Method of making the anorganic-organic base for immobilization of enzymes
FI60216B (fi) Biologiskt aktivt vid affinitetsreaktioner anvaendbart adsorbtionsmedel
DK142033B (da) Biologisk aktive proteiner, især enzymer, bundet til et polykondensationsprodukt, samt fremgangsmåde til fremstilling deraf.
JPH04183392A (ja) 生理活性物質を固定化した膜の製造方法
Dua et al. Carboxypeptidase a immobilization on activated styrene–maleic anhydride systems
WO2003031610A1 (en) Method for enzyme immobilization using silicagel or composite silicagel carrier
JPH01320985A (ja) 生理活性物質の固定化法および固定化生理活性物質