Verfahren zur Anreicherung des Darmwirkstoffes aus tierischen Organen
Im tierischen Darm und anderen Organen, z. 13.
in der Milz, findet sich ein
Wirkstoff, der für die Lebensvorgänge von Bedeutung ist ' weil durch ihn
die Kontraktion des Darmes gesteuert wird (Darmwirkstoff). Eine -.Methode, diesen
Darmwirkstoff aus den Rohstoffen in höherer Konzentration möglichst frei von störenden
Beimengungen, insbesondere von den in den Organen vorhandenen stark blutdruckwirksamen
Stoffen zu erhalten, ist bislang nicht bekannt. Durch die bisher angewandten Extraktions-
und Reinigungsmethoden, z. B. mittels Methanol, Äthanol, Kochextrakt, Chloroform,
Aceton, Aussalzung usw., gelang zwar eine Anreicherung des Darmwirkstoffes, aber
nicht zugleich eine Trennung von stark blutdruckwirksamer Substanz. Im günstigsten
Fall wurde durch einen Arbeitsgang eine Anreicherung des Darrnwirkstoffes auf das
etwa Vierfache erhalten (bezogen auf den Rohextrakt).Process for the enrichment of the intestinal active substance from animal organs In the animal intestine and other organs, e.g. 13 in the spleen, there is a drug that is for the life processes of importance 'because through him the contraction of the intestines is controlled (bowel drug). A method of obtaining this intestinal active ingredient from the raw materials in a higher concentration as free as possible from troublesome admixtures, in particular from the substances that have a strong blood pressure effect in the organs, has not yet been known. The extraction and purification methods used so far, e.g. B. by means of methanol, ethanol, cooking extract, chloroform, acetone, salting out, etc., although an enrichment of the intestinal active substance succeeded, but not at the same time a separation of substances that have a strong blood pressure effect. In the best case, an enrichment of the intestinal active ingredient was obtained by about four times (based on the crude extract) in one operation.
Es wurde nun gefunden, daß eine Anreicherung des Wirkstoffes auf das
Zehrifache und darüber erreicht werden kann, wenn die aus tierischen Organen erhaltenen
eiweißarrnen und entfetteten wässerigen Extrakte (Rohextrakte), zweckmäßig nach
Konzentration auf ein möglichst kleines Volumen, mit höheren, mit Wasser nicht oder
nur wenig mischbaren Alkoholen, wie z. B. Butanolen, AmvIalkoholen ti. a., ausgeschüttelt
werden, wobei der Darrnwirkstoff von diesen aufgenommen wird, während die blutdruckwirksamen
Ballaststoffe hauptsächlich in der wässerigen Phase verbleiben. Eine Vorreinigung
des wässerigen Rohextraktes z. B. mittels Aceton, Chloroform u. a. nach bereits
bekannten Verfahren ist nicht notwendig; der Rohextrakt
kann direkt
zur Extraktion verwendet werden, ohne daß dadurch Ausbeute oder Reinheitsgrad des
Endproduktes verschlechtert wird.It has now been found that an accumulation of the active ingredient on the
Twice and above can be achieved when obtained from animal organs
Protein-poor and defatted aqueous extracts (crude extracts), expediently after
Concentration on the smallest possible volume, with higher, with water not or
only slightly miscible alcohols, such as. B. Butanols, AmvIalkoholen ti. a., shaken out
The active ingredient in the intestine is absorbed by these, while the blood pressure actives
Dietary fiber mainly remains in the watery phase. A pre-cleaning
of the aqueous crude extract z. By means of acetone, chloroform and others. after already
known procedure is not necessary; the crude extract
can direct
be used for extraction without affecting the yield or purity of the
End product is deteriorated.
Beispiele i. Der im Fleischwolf zerkleinerte Rinderdarm wird mit der
dreifachen Menge Äthanol extrahiert, der Extrakt auf etwa 1/16 seines Volumens
im Vakuum konzeniriert, mit Äther ausgeschüttelt und der so erhaltene eiweißarme,
entfettete wässerige Rohextrakt weiter im Vakuum bei niedriger Temperatur auf etwa
1/2o des ursprünglichen Volumens eingedampft. Das Konzentrat wird zweimal mit der
gleichen Menge sek. Butanol ausgeschüttelt, die vereinigten Butanollösungen mit
Wasser (l/2 Vol. des Konzentrates) gewaschen und darauf das Butanol unter allmählicher
Zugabe von Wasser im Vakuum bei niedriger Temperatur und bei einem pH von etwa 4,o
abdestilliert. Man erhält so eine "vässerige Lösung des Darmwirkstoffes in einer
Ausbeute von 82010 (berechnet auf das Ausgangsmaterial). Die Bestimmung des Trockenrückstandes
ergibt, daß der Darmwirkstoff etwa auf das Elffache angereichert worden ist: im
Rohextrakt war i E des Wirkstoffes in 16 mg Substanz enthalten, im Butanolextrakt
dagegen bereits in 1,5 mg Substanz (als i E bezeichnet man die Menge des
Wirkstoffes, die gerade am Mäusedarm eine Kontraktion hervorruft). Ferner betrug
das NT erhältnis von Blutdruckwirkstoff zum Darrnwirkstoff im Rohextrakt 6,4
: I,0, im Butanolextrakt jedoch ij : i,o, ist also um das Sechsfache
günstiger geworden, ein Beweis dafür, daß der gewünschte Darmwirkstoff bereits durch
diesen einen Arbeitsgang weitgehend von unerwünschten Begleitstoffen befreit worden
ist. Die wässerige Lösung wird bei gutem Vakuum und niedriger Temperatur bis zum
Sirup konzentriert und dieser nach dem Einfrieren im Vakuum bis zur Trockne abgedampft.
Man erhält so ein hellgelbes Pulver.Examples i. The beef intestine chopped up in the meat grinder is extracted with three times the amount of ethanol, the extract concentrated to about 1/16 of its volume in vacuo, shaken out with ether and the low-protein, defatted aqueous crude extract further reduced in vacuo at low temperature to about 1 / 2o des original volume evaporated. The concentrate is twice with the same amount of sec. Shaken out butanol, washed the combined butanol solutions with water (1/2 vol. Of the concentrate) and then distilled off the butanol with the gradual addition of water in vacuo at low temperature and at a pH of about 4. This gives a "vässerige solution of the intestinal active compound in a yield of 82010 (calculated on the starting material) The determination of the dry residue reveals that the intestinal active ingredient is about enriched to eleven times. In the crude extract i E of the active ingredient was contained in 16 mg of substance , in the butanol extract on the other hand already in 1.5 mg of substance (as i e is defined as the amount of active ingredient that just causes a contraction in the mouse intestine) Furthermore was the NT erhältnis blood pressure agent for Darrnwirkstoff in the crude extract 6.4. I, 0, in the butanol extract, however, ij : i, o, has become six times cheaper, proof that the desired intestinal active ingredient has already been largely freed from undesirable accompanying substances in this one operation The syrup is concentrated and this is evaporated to dryness after freezing in vacuo, giving a light yellow powder.
2. An Stelle von Rinderdarm wird, wie im Beispiel i beschrieben, Rindermilz
verarbeitet und der Rohextrakt mit sek. Butanol extrahiert. Die Wirkstoffanreicherung
beträgt in diesem Falle etwa das Neunfache: im Rohextrakt ist i E in 3,8m9
Substanz enthalten, in dem gereinigten Präparat in o,4 mg Substanz. Ausbeute 671/o
des im Rohextrakt enthaltenen Wirkstoffes in gereinigter Form.2. Instead of beef intestine, beef spleen is processed as described in Example i and the crude extract is treated with sec. Butanol extracted. The accumulation of active substance is about nine times in this case: in the crude extract E i is included in 3,8m9 substance mg in the purified preparation in o.4 substance. Yield 671 / o of the active ingredient contained in the crude extract in purified form.
3. Wie im Beispiel 2 beschrieben, wird Rindermilz verarbeitet
und der Rohextrakt mit n-Butanol extrahiert. Die Wirkstoffanreicherung beträgt auch
hier etwa das Neunfache: im Rohextrakt ist i E in etwa 1,9 mg Substanz, im
gereinigten Präparat in 0,2 Mg Substanz enthalten. Ausbeute: 651)/9. 3. As described in Example 2, beef spleen is processed and the crude extract is extracted with n-butanol. The active compound enrichment is also about nine times: in the crude extract E i is included in about 1.9 mg of substance in the purified preparation in 0.2 Mg substance. Yield: 651) / 9.