DE7430545U - Reaction vessel for the collection of isolated adrenal cells - Google Patents

Reaction vessel for the collection of isolated adrenal cells

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2000 HAMBURG 36, den 10.9.1974 Nauar Wall 10 T«l<ifon: (040) 540045 Teliigramm-Adr.: Invantiui Hamburg2000 HAMBURG 36, September 10, 1974 Nauar Wall 10 T «l <ifon: (040) 540045 Teliigram address: Invantiui Hamburg

un..„ Akt«: 3851-III-1570un .. "Nude": 3851-III-1570

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Marianne Pilaski, 2090 WinsenMarianne Pilaski, 2090 Winsen

Reaktionsgefäß zur Gewinnung von isolierten NebennierenrindenzellenReaction vessel for the collection of isolated adrenal cells

Aufgabe der Erfindung ist es, ein Reaktionsgefäß zur Gewinnung von isolierten Nebennierenrindenzellen zu schaffen, mit dem aus zerkleinerten Nebennieren von Ratten in Trypsin-Lösung hohe Ausbeuten an Steroid-Produkten nach Inkuba'ton mit ACTH erhältlich sind.The object of the invention is to create a reaction vessel for obtaining isolated adrenal cortex cells, with from the crushed adrenal glands of rats in trypsin solution, high yields of steroid products according to Inkuba'ton with ACTH are available.

Zur Lösung dieser Aufgabe wird ein Reaktionsgefäß zur Gewinnung von isolierten Nebennierenrindenzellen vorgeschlagen, das gemäß der Erfindung durch einen zylindrischen, oben offen aus-To solve this problem, a reaction vessel for obtaining isolated adrenal cortex cells is proposed according to the invention by a cylindrical, open at the top

Konton: DauKdia Book AG Homburn, Klo.-Nr. 7/02456 · Po*tadwddncX>: Hamburg UOI S5-2O4Account: DauKdia Book AG Homburn, toilet no. 7/02456 Po * tadwddncX> : Hamburg UOI S5-2O4

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gebildeten Behälter aus Polytetrafluoräthylen mit einem lösbar mit dem Behälter verbundenen Deckelteil aus Polytetrafluoräthylen , der mit einer Zulaufleitung und einer Ablaufleitung versehen ist, deren Durchmesser kleiner als der Durchmesser der Zulaufleitung ausgebildet ist, und in dem mittig eine in Behälterlängsrichtung verlaufende Achse drehbar gelagert ist, deren oberes aus dem Deckelteil herausgeführtes freies Ende ein Antriebsrad trägt, während das im Behälterinnenraum liegende andere Ende der Achse einen L-förmigen Rührflügel aus Polytetrafluoräthylen trägt, der mittels eines Schraubgewindes längenverstellbar mit dem Achsenende verbunden ist und dessen, abgewinkelter Flansch in einem geringen Abstand vom Boden des Behälters angeordnet ist, gekennzeichnet ist.formed container made of polytetrafluoroethylene with a detachably connected to the container cover part made of polytetrafluoroethylene , which is provided with an inlet line and an outlet line, the diameter of which is smaller is designed as the diameter of the feed line, and in the middle one running in the longitudinal direction of the container Axis is rotatably mounted, the upper free end of which, led out of the cover part, carries a drive wheel, while the other end of the axis located in the interior of the container has an L-shaped agitator blade made of polytetrafluoroethylene carries, which is connected in length adjustable by means of a screw thread to the end of the axle and its, angled Flange is arranged at a small distance from the bottom of the container, is characterized.

Nach einer weiteren erfindungs gem äßen Ausführungsform weist der Behälter eine gegenüber dem Behälterdurchmesser entsprechende doppelte Länge auf.According to a further embodiment according to the invention the container has a length that is twice as long as the container diameter.

In der Zeichnung ist der Erfindungsgegenstand beispielsweise dargestellt, und zwar zeigt:-In the drawing, the subject of the invention is shown, for example, namely shows: -

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Fig. 1 ein Reaktions gefäß zur Gewinnung vonFig. 1 shows a reaction vessel for the recovery of

isolierten Nebennierenrindenzellen, teils in Ansicht, teils in einem senkrechten Schnitt,isolated adrenal cells, partly in view, partly in a vertical position Cut,

Fig. 2 einen senkrechten Längsschnitt durch das Reaktionsgefäß bei abgenommenem Deckelteil,2 shows a vertical longitudinal section through the reaction vessel with the cover part removed,

Fig. 3 den Deckelteil des Reaktionsgefäßes mit einem Flügelrührer, teils in Ansicht, teils in einem senkrechten Schnitt,3 shows the cover part of the reaction vessel with a paddle stirrer, partly in view, partly in a vertical cut,

Fig. 4 den Deckelteil in einer Ansicht von oben undFig. 4 the cover part in a view from above and

Fig. 5 einen senkrechten Schnitt gemäß Linie V-V in Fig. 3.FIG. 5 shows a vertical section along line V-V in FIG. 3.

Das er findungs gemäß ausgebildete Reaktions gefäß zur Gewinnung von isolierten Nebennierenrindenzellen besteht aus einem zylindrischen Behälter 10 mit einem Bodenteil 11. Die Länge des Behälters 10 entspricht etwa seinem doppelten Durchmesser (Fig. 1 und 2).He according to the invention trained reaction vessel for recovery of isolated adrenal cortex cells consists of a cylindrical container 10 with a bottom part 11. The length of the container 10 corresponds to about twice its diameter (FIG. 1 and 2).

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ii ι ιι ι

Der Behälter IQ iöt mittels eines Deckelteils 13 verschließbar ausgebildet, der mit einem halsartigen Abschnitt 13a vergehen ist, dessen Außendurchmesser etwa dem Innendurchmesser des Behälters 10 entspricht, Auf seinem äußeren Umfang ist der halsartige Abschnitt 13a des Deckelteils 13 mit einem Außengewinde 15 versehen. Der Behälter 10 weist benachbart zu seinem oberen umlaufenden Rand an seiner Wandungsinnenfläche ein entsprechendes Innengewinde 14 auf, so daß der Deckelteil 13 mit seinem Außengewinde 15 beim Aufsetzen auf den Behälter 10 in dessen Innengewinde 14 einschraubbar ist.The container IQ iöt can be closed by means of a cover part 13 formed, which has passed with a neck-like portion 13a, the outer diameter of which is approximately the inner diameter of the container 10 corresponds to, on its outer periphery, the neck-like portion 13a of the lid part 13 with a External thread 15 provided. The container 10 has a corresponding internal thread 14 adjacent to its upper circumferential edge on its inner wall surface, so that the Cover part 13 with its external thread 15 can be screwed into the internal thread 14 of the container 10 when it is placed on the container 10 is.

Der Decllcelteil 13 trägt mittig eine in Behälterlängerichtung verlaufende Achse 20, die im Deckelteü drehbar gelagert ist (Fig. 3). Das obere freie aus dem Deckelteü 13 herausgeführte Ende 20a der Achse 20 trägt ein Antriebsrad 25, das als Schnurrad ausgebildet ist und das über einen in der Zeichnung nicht dargestellten Keilriemen aus Gummi oder elastischen Werkstoffen mit einer Antriebseinrichtung verbindbar ist. Das untere freie Ende 20b der Achse 20, das in den Innenraum 12 ds3 Behälters 10 hineinreicht, ist mit einem Außengewinde 22 versehen. Auf dieses Gewinde 22 is+. ein Flügelrührer 30 mit einem entsprechend ausgebildeten Innengewinde 31 aufgeschraubt. Der Flügelrührer 30,The cover part 13 carries in the middle an axis 20 which extends in the longitudinal direction of the container and which is rotatably mounted in the cover part (FIG. 3). The upper free end 20a of the axle 20 led out of the cover part 13 carries a drive wheel 25 which is designed as a cord wheel and which can be connected to a drive device via a V-belt made of rubber or elastic materials, not shown in the drawing. The lower free end 20b of the axis 20, which extends into the interior 12 of the container 10, is provided with an external thread 22. On this thread 22 is + . a paddle stirrer 30 with a correspondingly designed internal thread 31 is screwed on. The paddle stirrer 30,

der L-förmig ausgebildet ist, w- t einen stabartigen Arm 32 auf, an dessen unterem freien Ende ein abgewinkelter Flansch 33 angeformt ist. Während der stabförmige Arm 32 des Flügelrührers 30 einen etwa kreisförmigen Durchmesser aufweist, ist der abgewinkelte Flansch 33 des Flügelrührers 30 mit einem etwa rechteckförmigen Querschnitt versehen, und weist gegenüber dem Außendurch messer des kreisförmigen Querschnittes des stabförmigen Armes 32 des Rührers 30 eingezogene Seitenwandungen 33a, 33b auf (Fig. 5). Die Länge des Flügelrührers 30 ist etwa so bemessen, daß sein abgewinkelter Flansch 33 oberhalb des Bodenteils 11 des Behälters 10 zu liegen kommt. Der Abstand des abgewinkelten Flansches 33 des Flügelrührers 30 vom Bodenteil 11 des Behälters 10 ist durch Verdrehen des Flügelrührers 30 auf der Drehachse 20 veränderbar. Aufgrund dieser Abstands verstellbarkeit ist eine Anpassung der Wirkungsweise des Reaktionsgefäßes an die jeweilig verwendete Men^e an Nebennieren von Ratten möglich. which is L-shaped with a rod-like arm 32, at the lower free end of which an angled flange 33 is formed. While the rod-shaped arm 32 of the impeller 30 has an approximately circular diameter, the angled flange 33 of the Blade stirrer 30 is provided with an approximately rectangular cross-section, and has opposite the outer diameter the circular cross-section of the rod-shaped arm 32 of the stirrer 30 retracted side walls 33a, 33b (Fig. 5). The length of the impeller 30 is approximately dimensioned so that its angled flange 33 comes to lie above the bottom part 11 of the container 10. The distance between the angled flange 33 of the paddle stirrer 30 from the bottom part 11 of the container 10 can be changed by rotating the paddle stirrer 30 on the axis of rotation 20. Due to this distance adjustability is an adaptation of the mode of operation of the reaction vessel to the respectively used menu of adrenal glands of rats possible.

Der Deckelteil 13 ist ferner mit einer Zulaufleitung 40 und einer Ablaufleitung 41 verbunden. Über die Zulaufleitung wird ein Sauerstoff/COo-Gemisch eingeleitet. Damit imThe cover part 13 is also connected to an inlet line 40 and an outlet line 41. An oxygen / CO o mixture is introduced via the feed line. So that in

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Innenraum 12 des Behälters 10 ein Überdruck ausgebildet wird, ist der Durchmesser der Ablaufleitung 41 gegenüber dem Durchmesser der Zulaufleitung 40 geringer bemessen (Fig. 4),Inside the interior 12 of the container 10 an overpressure is formed, the diameter of the drain line 41 is opposite dimensioned smaller than the diameter of the inlet line 40 (Fig. 4),

Der Behälter 10, der Deckelteil 13 und der Flügelrührer 30 sind aus Polytetrafluoräthylen hergestellt, das unter dem Handelsnamen TEFLON bekannt ist. Es können jedoch auch andere geeignete dem Polytetrafluoräthylen ähnliche Werkstoffe zur Anwendung gelangen. Dadurch, daß der Deckelteil 13 aus Kunststoffen besteht, braucht die Dreh- . achse 20 in dem Deckelteil 13 nicht mehr besonders gelagert zu werden.The container 10, the lid part 13 and the impeller 30 are made of polytetrafluoroethylene, which is under the Trade name TEFLON is known. However, other suitable polytetrafluoroethylene similar ones can also be used Materials are used. Because the cover part 13 is made of plastics, the rotary needs. axis 20 in the cover part 13 no longer to be specially stored.

Das erf in dungs gemäß ausgebildete Reaktionsgefäß zur Gewinnung von isolierten Nebennierenrindenzellen wird in der Weise verwandt, daß die zerkleinerten Nebennieren von Ratten mit Trypsin-Lösung versetzt in den Behälterinnenraum hineingegeben werden. Das gesamte Reaktionsgefäß wird in ein Wasserbad gesetzt und auf die jeweils gewünschte Temperatur gebracht. Hierauf anschließend wird der Antrieb für den Flügelrührer 30 in Betrieb gesetzt und nach Ablauf der Reaktionszeit die isolierten Nebennierenrirdenzellen abgetrennt. Von beson-The reaction vessel designed according to the invention for obtaining isolated adrenal cortical cells is in the manner related to the fact that the minced adrenal glands of rats mixed with trypsin solution were added to the interior of the container will. The entire reaction vessel is placed in a water bath and brought to the temperature desired in each case. The drive for the paddle stirrer 30 is then put into operation and after the reaction time has elapsed the isolated adrenal gland cells separated. Of particular-

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derem Vorteil ist, daß mittels des erfindungsgemäß ausgebildeten Reaktionsgefäßes sehr hohe Ausbeuten an Steroid-Produkten nach Inkubation mit ACTH erhalten werden. Die hohen erhältlichen Ausbeuten sind darauf zurückzuführen, daß alle Teile des Reaktionsgefäßes, mit denen das Reaktionsprodukt in Berührung kommt, aus Polytetrafluoräthylen bestehen und daß im Innenraum des Gefäßes ein leichter Überdruck ausgebildet ist. Durch die Längenverstellung des Flügelrührers und die damit verbundene Abstandsein stellung des unteren Endes dee Flügelrührers vom Boden des Reaktionsgefäßes ist eine Anpassung an die jeweils verwendeten Mengen an Ausgangeprodukten möglich. Zur Sicherung des eingestellten Abs tan de s -See Flügelrührers 30 vom Deckelteil 13 sind auf das freie Ende 20a der Achse 20 Unterlegscheiben 26 aufgesetzt. Das Reaktionsgefäß wird vorzugsweise in der in der Zeichnung dargestellten Größe verwendet.Their advantage is that very high yields of steroid products are obtained after incubation with ACTH by means of the reaction vessel designed according to the invention. The high yields obtainable are due to the fact that all parts of the reaction vessel with which the reaction product comes into contact are made of polytetrafluoroethylene and that there is a slight excess pressure in the interior of the vessel. By adjusting the length of the vane and the associated Abstandsein of the lower end position dee paddle from the bottom of the reaction vessel is an adaptation to the used amounts of Ausgangeprodukten possible. To secure the set Abs tan de s -See vane stirrer 30 from the cover part 13, washers 26 are placed on the free end 20a of the axis 20. The reaction vessel is preferably used in the size shown in the drawing.

- Schutzansprüche -- Protection claims -

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Claims (3)

SCHUTZANSPRÜCHEPROTECTION CLAIMS 1. Reaktions gefäß zur Gewinnung von isolierten Nebennierenrindenzellen, gekennzeichnet durch einen zylindrischen, oben offen ausgebildeten Behälter (10) aus Polytetrafluoräthylen mit einem lösbar mit dem Behälter (10) verbundenen Deckel teil (13) aus Polytetrafluoräthylen , der mit einer Zulaufleitung (40) und einer Ablaufleitung (41) versehen ist, deren D rchmesser kleiner als der Durchmesser der Zulaufleitung (40) bemessen ist, und in dem mittig eine in Behälterlängsrichtung verlaufende Achse (20) drehbar gelagert ist, deren oberes aus den? Deckelteil (13) herausgeführtes freies Ende ein Antriebsrad (25) trägt, während das im Behälterinnenraum (12) liegende andere Ende der Achse (20) einen L-for mi gen Rührflügel (30) aus Polytetrafluoräthylen trägt, der mittels eines Schraubgewindes (22, 31) längenverstellbar mit dem Achsenende (21b) verbunden ist und dessen abgewinkelter Flansch (33) in einem geringen Abstand vom Bodenteil (11) des Behälters (i0) angeordnet ist,1. reaction vessel for obtaining isolated adrenal cells, characterized by a cylindrical container (10) with an open top Made of polytetrafluoroethylene with a cover part (13) made of polytetrafluoroethylene that is detachably connected to the container (10) , which is provided with an inlet line (40) and an outlet line (41) whose The diameter is smaller than the diameter of the feed line (40), and in the middle an axis (20) running in the longitudinal direction of the container is rotatably mounted, the upper one of which consists of the? Cover part (13) brought out free end carries a drive wheel (25), while the inside of the container (12) lying other end of the axis (20) has an L-shape Agitator blade (30) made of polytetrafluoroethylene, adjustable in length by means of a screw thread (22, 31) is connected to the axle end (21b) and its angled flange (33) at a small distance from the bottom part (11) of the container (i0) is arranged, 743054519.1174743054519.1174 2. Reaktion s ge faß nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Behälter (10) eine gegenüber dem Behälterdurchmesser entsprechende doppelte Länge aufweist.2. reaction s ge barrel according to claim 1, characterized in that that the container (10) is twice as long as the container diameter having. 3. Reaktionsgefäß nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß der abgewinkelte Flansch (33) des L-förmigen Flügeirührers (30) einen etwa rschteckförmigen Querschnitt mit gegenüber dem Außendurchmesser des einen kreisförmigen Querschnitt aufweisenden stabförmigen Armes (32) des Flügeirührers (30) eingezogene Seitenwandungen (33a, 33b) aufweist.3. Reaction vessel according to claim 1 and 2, characterized in that the angled flange (33) of the L-shaped flight stirrer (30) has an approximately rectangular cross-section with compared to the outer diameter of the rod-shaped arm (32) of the flight stirrer, which has a circular cross-section (30) has indented side walls (33a, 33b). 743054519.12.74743054519.12.74
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