DE680456C

DE680456C - Method of making an antithyroid substance

Info

Publication number: DE680456C
Application number: DEB150606D
Authority: DE
Original assignee: Saechsisches Serumwerk Dresden
Current assignee: GlaxoSmithKline Biologicals Dresden
Priority date: 1931-06-18
Filing date: 1931-06-18
Publication date: 1939-08-29

Description

Verfahren zur Herstellung eines antithyreoidalen Stoffes Es ist bekannt, dem Blut das Fett durch Auslaugen mit Alkohol zu entziehen, indem man das Blut in mehrere Volumina Alkohol einfließen läßt. Hierbei wird nach mehrstündigem Steherlassen filtriert, alsdann der Eiweißrückstand 6 bis 8 Stunden mit Alkoholdämpfen extrahiert, worauf man die beiden Alkoholextrakte vereinigt, verseift und die Fettsäuren gewinnt. Bei diesem bekannten Verfahren, bei dem es auf die Gewinnung von Fett ankommt, wird zum Extrahieren ein starker Alkohol angewendet.Process for the preparation of an antithyroid substance It is known to remove the fat from the blood by leaching with alcohol by putting the blood in pour in several volumes of alcohol. This is done after standing for several hours filtered, then the protein residue extracted 6 to 8 hours with alcohol vapors, whereupon the two alcohol extracts are combined, saponified and the fatty acids are recovered. In this known method, which depends on the extraction of fat, is a strong alcohol used to extract.

Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung eines antithyreoidalen Stoffes aus Blut oder Teilen von Blut, wie roten Blutkörperchen, Hämoglobin usw., oder anderen geeigneten Organen, wie Leber-, Milzgewebe usw., das darin besteht, daß man das Eiweiß dieser Stoffe mit Alkohol, Aceton oder verdünnter Säure koaguliert, das Koagulat von der Lösung trennt, es mit Wasser oder gleichwirkenden Lösungsmitteln behandelt und die erhaltenen Lösungen und die vom Koagulat abgetrennte Flüssigkeit schonend konzentriert oder zur Trockne bringt.The invention relates to a method for producing an antithyroid Substance from blood or parts of blood, such as red blood cells, hemoglobin, etc. or other suitable organs, such as liver, spleen tissue, etc., which consists of that the protein of these substances is coagulated with alcohol, acetone or dilute acid, the coagulate separates from the solution, it with water or similar solvents treated and the solutions obtained and the liquid separated from the coagulate Gently concentrated or brought to dryness.

Im Gegensatz zu den bekannten Verfahren wird also hier zu dem Blut nur so viel Alkohol zugesetzt, als zum Gerinnen des Eiweißes erforderlich ist, so daß ein stark wasserhaltiger Alkoholextrakt vorliegt.In contrast to the known method, it becomes the blood here only as much alcohol added as is necessary to coagulate the protein, like that that there is a high water content alcohol extract.

Frühere Untersuchungen haben ergeben, daß in jedem Normalblut, im Blut schilddrüsenloser Tiere ohne besondere Mengenvermehrung, eine antithyreoidale Komponente vorhanden ist, die offenbar eine wichtige Ein-Wirkung auf die Regulierung der Schilddr üsentätigkeit ausübt. Auf Grund neuerer Versuche ergab sich, daß die genannte antithyreoidale Wirkung des Blutes nicht auf eine Adsorption von Schilddrüsenstoffen oder auf eine schützende kolloidale Beschaffenheit des Blutes zurückzuführen ist, daß sie vielmehr einer bestimmten hormonartigen Komponente des Blutes zuzuschreiben ist.Previous research has shown that in every normal blood, im Blood of thyroid-free animals without any particular increase in quantity, an antithyroid Component is present which apparently has an important one-way effect on regulation who has thyroid activity. On the basis of recent experiments it was found that the called antithyroidal effect of the blood does not affect an adsorption of thyroid substances or is due to a protective colloidal nature of the blood, that they are rather attributed to a certain hormone-like component of the blood is.

Bei dem neuen Verfahren wird nun diese antithyreoidal wirkende Komponente in solcher Konzentration gewonnen, daß man einen hochwirksamen, therapeutisch außerordentlich wichtigen Schilddrüsenschutzstoff erhält.In the new method, this antithyroid component is now used obtained in such a concentration that you get a highly effective, therapeutically extraordinary important thyroid protective substance receives.

Während bisher große Mengen Blut verabreicht werden mußten, um wegen der geringen Konzentration des Hormons im Blut eine therapeutische Wirkung zu erzielen, gelingt dies infolge des neuen Verfahrens mit kleinen Mengen der angereicherten Extrakte. Außerdem ist auch durch die erreichte Eiweißfreiheit der Extrakte eine Zuführung durch Injektion, die bisher unmöglich war, ermöglicht.While previously large amounts of blood had to be administered because of to achieve a therapeutic effect due to the low concentration of the hormone in the blood, this succeeds as a result of the new process with small amounts of the enriched Extracts. In addition, thanks to the fact that the extracts are protein-free Allows delivery by injection, which was previously impossible.

Als Ausgangsstoff für das neue Verfahren eignet sich am besten das Gesamtblut. Vergleichende Untersuchungen haben ergeben, daß in diesem die roten Blutkörperchen und insbesondere deren Hämoglobin die hauptsächlichsten Träger der antithyreoidalen Kraft darstellen. Die antithyreoidale Komponente wird isoliert, wenn man sie aus ihrer lockeren Verbindung mit Blut- (Organ-) Eiweiß abscheidet, indem man, sei es das Gesamtblut; seien es die vom Plasma befreiten roten Blutkörperchen oder deren Hämoglobin, durch eiweißniederschlagende Verfahren ausfällt und dem Koagulum die nunmehr in Freiheit versetzte antithyreoidale Komponente entzieht. So kann man beispielsweise durch Zusatz von Alkohol und Aceton zum Blut den Eiweißanteil des Blutes und die roten Blutkörperchen niederschlagen. Durch die Anwesenheit des Wassers im Blut geht hierbei gleichzeitig mit der Abspaltung der antithyreoidalen Komponente ein Teil derselben in das Gemisch von Alkohol bzw. Aceton mit dem Blutwasser über. Nach Abdestillieren des Acetons verbleibt in dem wäßrigen Rückstand dieser Teil der Komponente, und zwar frei von anhaftendem Eiweiß. Der Hauptteil der gelockerten antithyreoidalen Komponente wird durch einfache Wasserentziehung bei gelindem Erwärmen aus dem abgetrennten Eiweiß erhalten.This is the best starting material for the new process Whole blood. Comparative studies have shown that the red Blood cells and especially their hemoglobin are the main carriers of the represent antithyroid force. The antithyroid component is isolated, if they are separated from their loose connection with blood (organ) protein, by, be it the whole blood; be it the red blood cells freed from the plasma or their hemoglobin, precipitates through protein-precipitating processes and removes the now released antithyroid component from the coagulum. For example, you can increase the protein content by adding alcohol and acetone to the blood of the blood and knock down the red blood cells. The presence of the Water in the blood goes here at the same time with the splitting off of the antithyroidals Component part of the same in the mixture of alcohol or acetone with the blood water above. After the acetone has been distilled off, it remains in the aqueous residue Part of the component, free of adhering protein. The main part of the loosened antithyroid component is obtained by simple dehydration with gentle heating obtained from the separated egg white.

Der Schutzstoff läßt sich am besten biologisch charakterisieren, z. B. dadurch, daß er die sehr prägnante Einwirkung von Schilddrüsenpräparaten (Dijodtyrosin-Dijodoxyphenyläther) auf Amphibien (überstürzte Metamorphose und Wachstumshemmung) aufhebt oder weitgehend abschwächt. Bestimmte Mengen, z. B. von Dijodtyrosin-Dijodoxyphenyläther, dessen umwandelnde Kraft -etwa ,auf Kaulquappen - jeweils quantitativ festzustellen ist, werden von genau dosierbaren Mengen der antithyreoidalen Komponente in ihrer Wirkung aufgehoben.The protective substance can best be characterized biologically, e.g. B. by the fact that he has the very concise effect of thyroid preparations (Dijodtyrosin-Dijodoxyphenyläther) on amphibians (hasty metamorphosis and growth inhibition) cancels or largely weakens. Certain amounts, e.g. B. Dijodtyrosin-Dijodoxyphenyläther, its transforming force - for example, on tadpoles - can be determined quantitatively, are of precisely dosed amounts of the antithyroid component in their effect canceled.

Beispiele i. i 1 Blut oder zerkleinertes Gewebe von Leber oder Milz wird in Aceton oder Alkohol einfließen gelassen, so daß Koagulation und dadurch Sprengung der Bindung der antithyreoidalen Komponente von Eiweiß eintritt. Nach längerem Stehen werden Koagulat und Lösung getrennt. Nach schonendem Abdestillieren des Lösungsmittels wird ausgeschiedenes Fett entfernt. Die wäßrige Lösung wird schonend konzentriert und eventuell zur Trockne gebracht und kann direkt verwendet werden. Weitere Mengen von Wirkstoffen sind aus dem Koagulat dadurch zu gewinnen, daß man dieses mit i bis :21 Wasser bei gelindem Erwärmen behandelt. Nach Abtrennen des Koagulats wird die Lösung stark eingeengt, das etwa in Lösung gegangene Eiweiß mit Alkohol oder Aceton gefällt. Das eiweißfreie Filtrat wird nach Verjagen des Lösungsmittels eingeengt und kann therapeutisch verwendet werden.Examples i. i 1 blood or shredded tissue from liver or spleen is poured into acetone or alcohol, so that coagulation and thereby Breaking the bond of the antithyroid component of protein occurs. To If the patient is left standing for a long time, the coagulate and the solution are separated. After careful distillation the solvent removes the excreted fat. The aqueous solution is gentle concentrated and possibly brought to dryness and can be used directly. Further amounts of active ingredients can be obtained from the coagulate by this treated with 1 to: 21 water with gentle heating. After removing the Coagulate, the solution is strongly concentrated, and any protein that may have gone into solution Alcohol or acetone like. The protein-free filtrate becomes after driving off the solvent constricted and can be used therapeutically.

2. i 1 Blut wird erwärmt und mit so viel HI S 04 versetzt, daß das Gemisch etwa 1% ,prozentig ist. Aus dem Extrakt wird die Schwefelsäure mit Bariumhydroxy d als Bariumverbindung gefällt, die neutrale Lösung abgeschieden und eingeengt, etwaiges doch noch in Lösung verbliebenes Eiweiß, wie in Beispiel i angegeben, gefällt. Die Weiterbehandlung erfolgt nach den Angaben des Beispiels i.2. i 1 blood is warmed up and so much HI S 04 is added that the Mixture is about 1%, percent. The extract is converted into sulfuric acid with barium hydroxide d precipitated as a barium compound, the neutral solution separated and concentrated, any protein still remaining in solution, as indicated in example i, is precipitated. The further processing takes place according to the details of example i.

Es ist bekannt, Blut sowie Organe, wie Milz, der Einwirkung von Säuren, wie Salzsäure, zu unterwerfen, jedoch wird hier die Einwirkung der Säuren durch starke Konzentration und hohe Temperaturen so weit getrieben, daß ein Abbau bis zu den Grundstoffen, den Aminosäuren, stattfindet. Demgegenüber soll im Sinne des neuen Verfahrens die Behandlung der Ausgangsstoffe in schonender Weise bei Verdünnung und bei nicht überhohen Temperaturen lediglich zu dein Zweck erfolgen, die antitliyreoidale Komponente aus ihrer lockeren Verbindung mit Eiweiß abzuspalten. Eine Behandlung nach dem bisher bekannten Verfahren würde nicht nur ungünstig auf die antithyreoidale Komponente wirken, sondern würde auch störende, schwer wieder abtrennbare Eiweißspaltlinge (Aininosäuren usw.) den antithyreoidaleii Extrakten zuführen.It is known to affect blood as well as organs such as the spleen, the action of acids, like hydrochloric acid, but here the action of the acids is through strong concentration and high temperatures pushed so far that a degradation up to the basic substances, the amino acids. In contrast, in the sense of new process, the treatment of the starting materials in a gentle way with dilution and if the temperature is not excessively high, the antitliyreoidal should only be used for your own purposes To split off components from their loose connection with protein. One treatment using the previously known method would not only adversely affect the antithyroid Component work, but would also be troublesome, hard-to-separate protein splinters Add (amino acids, etc.) to the antithyroid extracts.

Es ist auch nicht mehr neu, frische Leber zur Gewinnung des antiperniziösen Prinzips der Leber mit Alkohol und Schwefelsäure zu behandeln, den Extrakt ohne Entfernung der Schwefelsäure einzudampfen, mit absolutem Alkohol zu behandeln, zu filtrieren, wieder einzudampfen und den entstandenen Sirup durch wiederholte Behandlung mit absolutem Alkohol zu trocknen.It is also no longer new to obtain fresh liver for the antipernicious Principle of treating the liver with alcohol and sulfuric acid, the extract without Evaporate removal of sulfuric acid, treat with absolute alcohol, too filter, evaporate again and the resulting syrup by repeated treatment to dry with absolute alcohol.

Im Gegensatz hierzu wird bei dem beanspruchten Verfahren eine antithyreoidale Komponente gewonnen und beim Arbeiten mit Schwefelsäure diese vor dem Eindampfen sorgfältig entfernt.In contrast, the claimed method is an antithyroid Component obtained and when working with sulfuric acid this before evaporation carefully removed.

Claims

PATENT CLAIM: Process for the production of an antithyroid substance from blood or parts of blood, such as red blood cells, hemoglobin, etc., or other suitable organs, such as liver, spleen tissue, etc., characterized in that the protein of these substances with alcohol, acetone or dilute acid coagulates, separates the coagulate from the solution, treats it with water or similar solvents and gently concentrates the resulting solutions and the liquid separated from the coagulate, optionally after removing the acid, or brings them to dryness.