DE545973C

DE545973C - Process for the preparation of highly effective extracts from female internal secretory organs

Info

Publication number: DE545973C
Application number: DEG69618D
Authority: DE
Original assignee: Chemische Ind Ges; GESELLSCHAFT fur CHEMISCHE INDUSTRIE; Gesellschaft fuer Chemische Industrie in Basel CIBA
Current assignee: Chemische Ind Ges; GESELLSCHAFT fur CHEMISCHE INDUSTRIE; BASF Schweiz AG
Priority date: 1927-02-27
Filing date: 1927-02-27
Publication date: 1932-03-08

Description

Verfahren zur Darstellung von hochwirksamen Extrakten aus weiblichen innersekretorischen Organen Gemäß den bisher üblichen Verfahren zur Gewinnung wirksamer Extrakte aus weiblichen innersekretorischen Organen, wie Ovarien, Placenta, Corpus Iuteum u. dgl., pflegt man die frischen oder getrockneten, zerkleinerten Organe bei erhöhter Temperatur mit Lösungsmitteln zu extrahieren und gegebenenfalls die so erhaltenen Rohextrakte durch geeignete Maßnahmen zu reinigen. Die übliche Zerkleinerung der frischen Organe durch Zerhacken bewirkt naturgemäß nur eine sehr mangelhafte Aufschließung der Zellen, so daß bei der nachfolgenden Extraktion das Lösungsmittel nur in sehr beschränktem Maße in das Innere der Zelle eindringen kann, und daher die Ausbeute bei der Extraktion, auch wenn diese bei erhöhter Temperatur vorgenommen wird, zu wünschen übrig läßt. Sollen die Organe feinerer Zerkleinerung zugänglich gemacht werden, so müssen sie nach den bisherigen Verfahren vorerst getrocknet werden. Diese Trocknung bewirkt jedoch, auch wenn sie bei gewöhnlicher Temperatur durchgeführt wird, insbesondere aber. wenn dabei höhere Temperaturen angewendet werden, mehr oder weniger tiefgreifende Veränderungen an der Zellsubstanz, wie z. B. Oxydationen, Spaltungen u. dgl., die, sei es, daß sie die wirksamen Bestandteile selbst betreffen oder aber schwer entfernbare Zersetzungsprodukte in das Extrakt hineinbringeri, die Ausbeute an reiner, wirksamer Substanz wiederum stark beeinträchtigen.Process for the preparation of highly effective extracts from female internal secretory organs According to the usual procedures for obtaining more effective Extracts from female internal secretory organs, such as ovaries, placenta, corpus Iuteum and the like, one tends to the fresh or dried, comminuted organs to extract at elevated temperature with solvents and optionally the to purify the crude extracts obtained in this way by suitable measures. The usual crushing Chopping up the fresh organs naturally only causes a very poor one Disruption of the cells so that in the subsequent extraction the solvent can penetrate into the interior of the cell only to a very limited extent, and therefore the yield in the extraction, even if this is done at elevated temperature will leave something to be desired. Are to make the organs more accessible for finer comminution are made, they must first be dried according to the previous methods. This drying effects, however, even when carried out at ordinary temperature will, but in particular. if higher temperatures are used, more or less profound changes to the cell substance, such as B. Oxidations, Divisions and the like which, whether they concern the active constituents themselves or bring decomposition products that are difficult to remove into the extract, the yield of pure, active substance, in turn, severely impaired.

Es wurde nun gefunden, daß es gelingt, diese Nachteile zu vermeiden und unter vollkommener Sprengung der Zellwände einerseits und weitestgehender Schonung der kochempfindlichen Zellbestandsteile anderseits in besonders guter Ausbeute zu hochwirksamen Extrakten aus weiblichen innersekretorischen Organen zu gelangen, wenn man die frischen Organe mit wasserbindenden Mitteln und mit indifferenten Kühlmitteln, wie z. B. Kohlensäureschnee, flüssigem Stickstoff usw., versetzt und das erstarrte Gemisch fein pulverisiert.It has now been found that it is possible to avoid these disadvantages and with complete rupture of the cell walls on the one hand and as much protection as possible the boil-sensitive cell components, on the other hand, in particularly good yield to get highly effective extracts from female internal secretory organs, if the fresh organs are treated with water-binding agents and with inert coolants, such as B. carbon dioxide snow, liquid nitrogen, etc., added and solidified Mixture finely powdered.

Diese Vorbehandlung bedingt eine derart weitgehende Aufschließung des Zellinhaltes. daß es bei der nachfolgenden Extraktion mit den üblichen organischen Lösungsmitteln mit Leichtigkeit gelingt, alle löslichen Bestandteile zu gewinnen, und zwar nicht nur bei höherer, sondern auch bei gewöhnlicher Temperatur, d. h. unter Bedingungen, die wiederum eine weitgehende Schonung der empfindlichen Substanzen erlauben.This pretreatment requires such an extensive breakdown of the cell content. that it is used in the subsequent extraction with the usual organic Solvents manage to extract all soluble components with ease, and not only at higher, but also at ordinary temperature, i. H. under conditions that in turn largely protect the sensitive substances allow.

Wesentlich für den Erfolg des Verfahrens ist die gleichzeitige Verwendung von indifferenten Kühlmitteln und von wasserbindenden Mitteln, indem erstere die durch Luftzutritt bedingten oxydativen Prozesse von vornherein verhindern. letztere aber nicht nur die vollständigg. Zertrümmerung der Zellwände in wirksamer Weise erleichtern, sondern insbesondere 4us. dem ..zerkleinerten Organ alles Wasser aufnehmen, wodurch unerwünschte hydrolytische Prozesse beim Auftauen vermieden werden. Bei der nachfolgenden Extraktion mit wasserfreien organischen Lösungsmitteln, z. B. Äther, erhält man. sofort ein wasserfreies Extrakt. Das Verfahren erlaubt also unter Umgehung der üblichen, nachteiligen Trocknungsmethoden eine vollkommene Entwässerung der Organe ohne irgendwelche Schädigung derselben.Simultaneous use is essential for the success of the process of inert coolants and of water-binding agents, in that the former the Prevent oxidative processes caused by air access from the outset. latter but not only that complete Shattering of the cell walls in effectively facilitate, but especially 4us. the .. comminuted organ absorb all the water, creating undesirable hydrolytic processes during thawing be avoided. In the subsequent extraction with anhydrous organic Solvents, e.g. B. ether, one obtains. immediately an anhydrous extract. The procedure thus allows complete drying by bypassing the usual, disadvantageous drying methods Drainage of the organs without damaging them in any way.

Die so erhaltenen Rohextrakte können nötigenfalls in üblicher Weise von Ballaststoffen, wie Phosphatiden, Cholesterin, Cholesterinestern, Fetten und Fettsäuren, befreit werden.The crude extracts obtained in this way can, if necessary, in the customary manner of dietary fiber, such as phosphatides, cholesterol, cholesterol esters, and fats Fatty acids, get exempt.

Das vorliegende Verfahren ist den bekannten Verfahren nicht nur hinsichtlich Einfachheit, sondern insbesonders auch hinsichtlich der erzielten Ausbeuten, und zwar sowohl der Gewichts- als auch der Wirkungsausbeuten wesentlich überlegen.The present method is not only in terms of the known methods Simplicity, but especially in terms of the yields achieved, and although significantly superior in terms of both weight and efficacy yields.

Es ist schon vorgeschlagen worden (vgl. die Patentschrift 33466o), wässerige Chlorcalciumlösung in Form einer Kältemischung zur Gewinnung von Fermenten, Enzymen u. dgl. zu verwenden. Es handelt sich hier um die Verwertung einerseits der kühlenden und anderseits der lösenden Wirkung dieser Mischung. Eine Wasserbindung kam hierbei nicht in Frage. Beispiel i mit Aceton nachgewaschen. Die filtrierte Aceton-Äther-Lösung kann entweder unmittelbar oder aber nach Aufnahme in Oliven- oder Sesamöl im Vakuum unter tunlichstem Sauerstoffausschluß von Lösungsmitteln befreit werden. Be.ispiel2 i -kg frische Placenta wird mit 3 kg entwässertem Natriumsulfat versetzt, durch Zugabe von- flüssigem Stickstoff hart gefroren und vermahlen. Nun wird das erhaltene Pulver bei gewöhnlicher Temperatur mit je 51 absolutem Alkohol zweimal extrahiert. Die vereinigten klaren Filtrate werden im Vakuum bei 2o bis 25° C in Stickstoffatmosphäre eingetrocknet und der Rückstand in i 1 Äther aufgenommen. Die ätherische Lösung dampft man im Vakuum in Stickstoffatmosphäre bei i5° C auf 5o ccm ein. Diese Lösung wird wie in Beispiel i einer Acetonfällung und Tiefkühlung unterworfen und auf Reinextrakt verarbeitet. Beispiel 3 I kg frische Ovarien werden bei Gegenwart von 3 kg entwässertem Caleiumchlorid und Kohlensäureschnee vermahlen. Hierauf wird das erhaltene Pulver bei -2o° C mit je 4 bis 5 1 Aceton mehrmals extrahiert. Nach dem Eindunsten des Acetons bei niedriger Temperatur in Kohlensäueatmosphäre im Vakuum erhält man ohne weiteres ein weitgehend gereinigtes Extrakt. i kg frische Ovarien werden in Kohlensäureschnee gebracht und samt diesem. mit 3 kg entwässertem Natriumsulfat vermahlen. Das so erhaltene feine Pulver wird mit je etwa 4 bis 5 1 Äther bei gewöhnlicher Temperatur mehrmals extrahiert. Die filtrierten und vereinigten ätherischen Extraktlösungen werden im Vakuum bei niedriger Temperatur im Kohlensäurestrom auf etwa 50 ccm eingeengt und letztere mit 300 ccm Aceton, versetzt und die Mischung auf - 70° C abgekühlt. Die entstandene Fällung wird bei niedriger Temperatur abgenutscht und der RückstandIt has already been proposed (cf. patent specification 33466o) to use aqueous calcium chloride solution in the form of a cold mixture for the production of ferments, enzymes and the like. It is a question of the utilization of the cooling and the dissolving effect of this mixture on the one hand. A water binding was out of the question here. Example i washed with acetone. The filtered acetone-ether solution can be freed from solvents either immediately or after being absorbed in olive or sesame oil in vacuo with the greatest possible exclusion of oxygen. Example 2 1 kg of fresh placenta is mixed with 3 kg of dehydrated sodium sulfate, frozen hard by adding liquid nitrogen and ground. The powder obtained is then extracted twice with 5% absolute alcohol each time at normal temperature. The combined clear filtrates are dried in vacuo at 20 to 25 ° C. in a nitrogen atmosphere and the residue is taken up in 1 liter of ether. The ethereal solution is evaporated to 50 ccm in vacuo in a nitrogen atmosphere at 15 ° C. As in Example i, this solution is subjected to acetone precipitation and freezing and processed to obtain pure extract. Example 3 I kg of fresh ovaries are ground in the presence of 3 kg of dehydrated calcium chloride and carbonic acid snow. The powder obtained is then extracted several times at −20 ° C. with 4 to 5 liters of acetone each time. After the acetone has evaporated at low temperature in a carbonic acid atmosphere in vacuo, a largely purified extract is readily obtained. i kg of fresh ovaries are placed in carbonated snow and with this. ground with 3 kg of dehydrated sodium sulfate. The fine powder obtained in this way is extracted several times with about 4 to 5 liters of ether each time at normal temperature. The filtered and combined ethereal extract solutions are concentrated in vacuo at low temperature in a stream of carbonic acid to about 50 ccm and 300 cc of acetone are added to the latter and the mixture is cooled to -70 ° C. The resulting precipitate is filtered off with suction at low temperature and the residue

Claims

PATENT CLAIMS Process for the preparation of highly effective extracts from female internal secretory organs, characterized in that the fresh organs mixed with water-binding agents and inert coolants, the solidified mixture is powdered, then the resulting powder with organic solvents extracted and the extract obtained in this way, if desired, purified in the usual way.