DE2742874C2 - - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft sauerstoffabsorbierende Mittel und deren Verwendung zur Erzeugung einer sauerstoffarmen bzw. sauerstoff­ freien Atmosphäre bei der Züchtung anaerober Bakterien.

Die Verwendung sauerstoffabsorbierender Mittel zur Herab­ setzung bzw. Entfernung des Luftsauerstoffs bei anaeroben Kulturverfahren ist seit langem üblich. Gebräuchlich ist z. B. die Verwendung von Mischungen aus Pyrogallolpulver, Soda und Kieselgur, die entweder nach Wasserzugabe oder durch den aus dem Nährboden austretenden Wasserdampf durch­ feuchtet werden und dann Sauerstoff absorbieren. In J. clin. Microbiol. 1975, Seite 527, ist eine Mischung aus Stahlwolle und angesäuerter Kupfersulfatlösung zu diesem Zweck beschrie­ ben.

Die bekannten Mischungen haben den Nachteil, daß ihr Ab­ sorptionsvermögen für Sauerstoff nicht optimal ist. Bei der Mischung nach J. clin. Microbiol. muß vor der Verwen­ dung eine saure Kupfersulfatlösung hergestellt werden, mit der die Stahlwolle gesättigt wird. Nach einiger Zeit muß der Überschuß dieser Lösung abgeschüttet werden.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein sauerstoff­ absorbierendes Mittel zur Verfügung zu stellen, das ein optimales Absorptionsvermögen besitzt, einfach zu handhaben ist und sofort einsatzfähig ist.

Erfindungsgemäß wurde die Aufgabe dadurch gelöst, daß das sauerstoffabsorbierende Mittel ein Adsorptionsmittel, ein Metallpulver und einen Aktivator enthält.

Gegenstand der Erfindung sind somit sauerstoffabsorbierende Mittel, die ein Adsorptionsmittel enthalten, die gekenn­ zeichnet sind durch einen zusätzlichen Gehalt an einem Metallpulver, an einer anorganischen oder organischen Säure, einem Komplexierungsmittel oder dem Salz eines Edelmetalls als Aktivator und ggf. einem Reaktions­ vermittler.

Ferner umfaßt der Gegenstand der Erfindung die Verwendung des sauerstoffabsorbierenden Mittels zur Erzeugung einer sauerstoffarmen bzw. sauerstofffreien Atmosphäre bei der Züchtung anaerober Bakterien.

Überraschenderweise hat sich gezeigt, daß das erfindungs­ gemäße Mittel gegenüber der Mischung nach J. clin. Microbiol. ein 5- bis 10fach besseres Sauerstoffabsorptionsvermögen - bezogen auf die Eisenmenge - besitzt.

Die im erfindungsgemäßen Mittel enthaltenen Adsorptionsmittel dienen dazu, den flüssigen Reaktionsvermittler aufzusaugen und somit ein Zerfließen des Gemisches zu verhindern. Geeigne­ te Adsorptionsmittel sind z. B. Kieselgur, Kieselgel und Cellulose, vorzugsweise Kieselgur.

Als Metallpulver bzw. -späne eignen sich z. B. Schwermetalle wie Eisen, Mangan, Kobalt, Nickel usw., vorzugsweise Eisen­ pulver.

Geeignete Aktivatoren sind z. B. organische Säuren wie Citronensäure, Weinsäure, verdünnte Essigsäure usw., ver­ dünnte Mineralsäuren wie Salzsäure und Schwefelsäure sowie Komplexierungsmittel und Salze edler Metalle. Ein bevor­ zugter Aktivator nach der vorliegenden Erfindung ist Citronensäure.

In vielen Fällen ist es sinnvoll, dem sauerstoffabsor­ bierenden Mittel Soda zuzusetzen, um z. B. im geschlos­ senen Kulturgefäß einen gewissen Druckausgleich für den absorbierten Sauerstoff zu schaffen oder weil manche Bakterien zum optimalen Wachstum einen erhöhten Gehalt an Kohlendioxid in der Atmosphäre benötigen.

Das Gewichtsverhältnis der einzelnen Mischungsbestand­ teile in der Reihenfolge Adsorptionsmittel : Metallpulver : Aktivator : Soda beträgt vorzugsweise etwa 8 : 4 : 3 : 1. Bei Mischungen ohne Kohlendioxidentwicklung, d. h. ohne Zusatz von Soda, beträgt dieses Gewichtsverhältnis etwa 8 : 4 : 2 bis 8 : 4 : 1. Das Verhältnis von Soda zu Citronensäure als Aktivator hängt im wesentlichen von der gewünschten Menge Kohlendioxid ab. Das Verhältnis von Adsorptionsmittel zu Metallpulver kann in weiten Be­ reichen variiert werden. Geeignet sind im Falle von Kiesel­ gur zu Eisenpulver Gewichtsverhältnisse zwischen 5 : 1 bis 1 : 1, vorzugsweise 2 : 1. Wenn wesentlich mehr oder weniger Eisen eingesetzt wird, nimmt das Sauerstoffabsorptionsver­ mögen des erfindungsgemäßen Mittels ab.

Zur Erzeugung einer sauerstoffarmen bzw. sauerstofffreien Atmosphäre, wie sie z. B. bei der Züchtung anaerober Bak­ terien erforderlich ist, wird die trockene Mischung nach der Erfindung mit einem Reaktionsvermittler in Kontakt gebracht. Als Reaktionsvermittler dienen Lösungsmittel wie Wasser, Äthylenglykol und auch flüssige Säuren, wie Essigsäure, ver­ dünnte Salzsäure, Schwefelsäure usw., die ihrerseits als Aktivator und Reaktionsvermittler zugleich wirken. Der bevor­ zugte Reaktionsvermittler ist Wasser.

Sobald der Reaktionsvermittler mit dem sauerstoff­ absorbierenden Mittel in Berührung kommt, beginnt die feuchte Mischung verhältnismäßig schnell, den Sauerstoff zu absorbieren, gegebenenfalls unter gleichzeitiger Entwicklung von Kohlendioxid.

Beispiel 1

Zur Züchtung anaerober Bakterien werden 30 g einer Mischung aus

5,0 kg Kieselgur,
2,5 kg Eisenpulver
1,9 kg Citronensäure und
0,6 kg Soda

in einen Papierbeutel gefüllt und neben die Petrischalen mit Kulturen in den Anaerobentopf gestellt. Mit einer Spritze werden 20 ml Wasser in den Papierbeutel gegeben, der Topf wird verschlossen und zur Bebrütung stehengelas­ sen. Bereits nach wenigen Minuten entsteht eine praktisch sauerstofffreie Atmosphäre im Anaerobentopf.

Beispiel 2

Analog Beispiel 1 werden aliquote Teile einer Mischung aus

5,0 kg Kieselgur,
2,5 kg Kobaltpulver,
1,5 kg Weinsäure und
0,5 kg Soda

als sauerstoffabsorbierendes Mittel zur Züchtung anaerober Bakterien verwendet.

Beispiel 3

Zur Erzeugung einer sauerstoffarmen Atmosphäre ohne gleichzeitige Kohlendioxidentwicklung werden analog Beispiel 1 aliquote Teile der folgenden Mischungen verwendet:

• a) 5,0 kg Kieselgel
  2,5 kg Eisenpulver und
  1,0 kg Citronensäure
• b) 5,0 kg Kieselgur
  2,5 kg Kobaltpulver und
  0,8 kg Weinsäure.

Claims (5)

1. Sauerstoffabsorbierendes Mittel, enthaltend ein Ad­ sorptionsmittel, gekennzeichnet durch einen zusätz­ lichen Gehalt an einem Metallpulver, an einer anor­ ganischen oder organischen Säure, einem Komplexie­ rungsmittel oder dem Salz eines Edelmetalls als Aktivator und ggf. einem Reaktionsvermittler.

2. Sauerstoffabsorbierendes Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Reaktionsvermittler ein Lösungsmittel, vorzugsweise Wasser, ist.

3. Sauerstoffabsorbierendes Mittel nach Anspruch 1 und 2, enthaltend Kieselgur, Eisenpulver und Citronen­ säure.

4. Sauerstoffabsorbierendes Mittel nach den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß es zusätzlich Soda enthält.

5. Verwendung des sauerstoffabsorbierenden Mittels nach den Ansprüchen 1 bis 4 zur Erzeugung einer sauer­ stoffarmen bzw. sauerstofffreien Atmosphäre bei der Züchtung anaerober Bakterien.