DE22195354T1 - Verfahren zur erhöhung der replikation eines zirkulären dna-moleküls - Google Patents

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Abstract

Verfahren zur Herstellung von RNA umfassend die Schritte:(a) Gewinnung von RNA durch DNA-abhängige In-Vitro-Transkription eines linearisierten Plasmid-DNA-Templates unter Verwendung einer DNA-abhängigen RNA-Polymerase, wobei die Plasmid-DNA Folgendes umfasst:- einen bakteriellen Replikationsursprung,- eine Sequenz, die für einen Selektionsmarker kodiert, wobei die Sequenz ein Kanamycin-Resistenzgen ist oder der Marker ein durch Saccharose selektierbarer Marker ist,- einen Promotor für eine DNA-abhängige RNA-Polymerase,- ein Insert, das eine homopolymere Region umfasst, wobei die homopolymere Region mindestens eine Poly(A)-Sequenz umfasst, die einen Abschnitt von mindestens 60 Adenosin-Nukleotiden umfasst, wobei sich die homopolymere Region in einem Abstand von mindestens 500 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet und wobei das Insert, das die homopolymere Region umfasst, so ausgerichtet ist, dass die Transkriptionsrichtung des Inserts identisch mit der Replikationsrichtung des Replikationsursprungs ist; und(b) Reinigung der RNA.

Claims (25)

  1. Verfahren zur Herstellung von RNA umfassend die Schritte: (a) Gewinnung von RNA durch DNA-abhängige In-Vitro-Transkription eines linearisierten Plasmid-DNA-Templates unter Verwendung einer DNA-abhängigen RNA-Polymerase, wobei die Plasmid-DNA Folgendes umfasst: - einen bakteriellen Replikationsursprung, - eine Sequenz, die für einen Selektionsmarker kodiert, wobei die Sequenz ein Kanamycin-Resistenzgen ist oder der Marker ein durch Saccharose selektierbarer Marker ist, - einen Promotor für eine DNA-abhängige RNA-Polymerase, - ein Insert, das eine homopolymere Region umfasst, wobei die homopolymere Region mindestens eine Poly(A)-Sequenz umfasst, die einen Abschnitt von mindestens 60 Adenosin-Nukleotiden umfasst, wobei sich die homopolymere Region in einem Abstand von mindestens 500 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet und wobei das Insert, das die homopolymere Region umfasst, so ausgerichtet ist, dass die Transkriptionsrichtung des Inserts identisch mit der Replikationsrichtung des Replikationsursprungs ist; und (b) Reinigung der RNA.
  2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Poly(A)-Sequenz der Plasmid-DNA einen Abschnitt von 60 bis 250 Adenosin-Nukleotiden umfasst.
  3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei sich die homopolymere Region der Plasmid-DNA in einem Abstand von mindestens 2200 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet.
  4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei die in Schritt (a) verwendete DNA-abhängige RNA-Polymerase ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus T3-RNA-Polymerase, T7-RNA-Polymerase und SP6-RNA-Polymerase.
  5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei weitere in Schritt (a) verwendete Reagenzien Ribonukleosidtriphosphate (NTPs) für die vier Basen Adenin, Cytosin, Guanin und Uracil sind.
  6. Verfahren nach Anspruch 5, wobei ein Teil oder das gesamte mindestens eine Ribonukleosidtriphosphat durch ein modifiziertes Nukleosidtriphosphat ersetzt wird, wobei das modifizierte Nukleosidtriphosphat vorzugsweise ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Pseudouridin-5'-triphosphat, 1-Methylpseudouridin-5'-triphosphat, 2-Thiouridin-5'-triphosphat, 4-Thiouridin-5'-triphosphat und 5-Methylcytidin-5'-triphosphat.
  7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei ein weiteres in Schritt (a) verwendetes Reagenz (i) ein Cap-Analogon und/oder (ii) ein Ribonuklease-(RNase-)Inhibitor und/oder (iii) eine Pyrophosphatase und/oder (iv) MgCl2 und/oder (v) ein Puffer ist, der gegebenenfalls Antioxidantien und/oder Polyamine enthält.
  8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 7, wobei die Reinigung einen DNA-Template-Verdau und/oder eine Phenol-Chloroform-Extraktion und/oder eine LiCl-Fällung und/oder eine HPLC umfasst.
  9. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei die RNA mRNA ist.
  10. Verfahren nach Anspruch 9, wobei die mRNA eine offene Leserahmensequenz und eine 5'-UTR und/oder 3'-UTR umfasst.
  11. Verfahren nach Anspruch 10, wobei die offene Leserahmensequenz für ein pathogenes Antigen oder ein Fragment davon kodiert, wobei das pathogene Antigen vorzugsweise ein Oberflächenantigen ist, noch bevorzugter ein Oberflächenantigen, das sich an der Oberfläche eines Virus befindet.
  12. Verfahren nach Anspruch 11, wobei das pathogene Antigen von einem mit einer Infektionskrankheit assoziierten Erreger abgeleitet ist, wobei der Erreger ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Acinetobacter baumannii, Anaplasma-Genus, Anaplasma phagocytophilum, Ancylostoma braziliense, Ancylostoma duodenale, Arcanobacterium haemolyticum, Ascaris lumbricoides, Aspergillus-Genus, Astroviridae, Babesia-Genus, Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bartonella henselae, BK-Virus, Blastocystis hominis, Blastomyces dermatitidis, Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Borrelia-Genus, Borrelia spp., Brucella-Genus, Brugia malayi, Bunyaviridae-Familie, Burkholderia cepacia und andere Burkholderia-Arten, Burkholderia mallei, Burkholderia pseudomallei, Caliciviridae-Familie, Campylobacter-Genus, Candida albicans, Candida spp., Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psittaci, CJD-Prion, Clonorchis sinensis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium perfringens, Clostridium spp., Clostridium tetani, Coccidioides spp., Coronaviren, Corynebacterium diphtheriae, Coxiella bumetii, Krim-Kongo-Hämorrhagisches-Fieber-Virus, Cryptococcus neoformans, Cryptosporidium-Genus, Cytomegalovirus (CMV), Dengueviren (DEN-1, DEN-2, DEN-3 und DEN-4), Dientamoeba fragilis, Ebolavirus (EBOV), Echinococcus-Genus, Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii, Ehrlichia-Genus, Entamoeba histolytica, Enterococcus-Genus, Enterovirus-Genus, Enteroviren, hauptsächlich Coxsackie-A-Virus und Enterovirus 71 (EV71), Epidermophyton spp., Epstein-Barr-Virus (EBV), Escherichia coli O157:H7, O111 und 0104:H4, Fasciola hepatica und Fasciola gigantica, FFI-Prion, Filarioidea-Superfamilie, Flaviviren, Francisella tularensis, Fusobacterium-Genus, Geotrichum candidum, Giardia intestinalis, Gnathostoma spp., GSS-Prion, Guanarito-Virus, Haemophilus ducreyi, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Henipavirus (Hendra-Virus Nipah-Virus), Hepatitis-A-Virus, Hepatitis-B-Virus (HBV), Hepatitis-C-Virus (HCV), Hepatitis-D-Virus, Hepatitis-E-Virus, Herpes-simplex-Virus 1 und 2 (HSV-1 und HSV-2), Histoplasma capsulatum, HIV (Humanes Immundefizienz-Virus), Hortaea werneckii, Humanes Bocavirus (HBoV), Humanes Herpesvirus 6 (HHV-6) und Humanes Herpesvirus 7 (HHV-7), Humanes Metapneumovirus (hMPV), Humanes Papillomavirus (HPV), Humane Parainfluenzaviren (HPIV), Japanisches Enzephalitis-Virus, JC-Virus, Junin-Virus, Kingella kingae, Klebsiella granulomatis, Kuru-Prion, Lassa-Virus, Legionella pneumophila, Leishmani-Genus, Leptospira-Genus, Listeria monocytogenes, Lymphozytisches Choriomeningitis-Virus (LCMV), Machupo-Virus, Malassezia spp., Marburg-Virus, Masern-Virus, Metagonimus yokagawai, Microsporidia phylum, Molluscum-contagiosum-Virus (MCV), Mumps-Virus, Mycobacterium leprae und Mycobacterium lepromatosis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma pneumoniae, Naegleria fowleri, Necator americanus, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Nocardia asteroides, Nocardia spp., Onchocerca volvulus, Orientia tsutsugamushi, Orthomyxoviridae-Familie (Influenza), Paracoccidioides brasiliensis, Paragonimus spp., Paragonimus westermani, Parvovirus B19, Pasteurella-Genus, Plasmodium-Genus, Pneumocystis jirovecii, Poliovirus, Rabiesvirus, Respiratorische Synzytial-Virus (RSV), Rhinovirus, Rhinoviren, Rickettsia akari, Rickettsia-Genus, Rickettsia prowazekii, Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, Rifttalfieber-Virus, Rotavirus, Rubellavirus, Sabia-Virus, Salmonellen-Genus, Sarcoptes scabiei, SARS-Coronavirus, Schistosoma-Genus, Shigella-Genus, Sin-Nombre-Virus, Hantavirus, Sporothrix schenckii, Staphylococcus-Genus, Staphylococcus-Genus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Strongyloides stercoralis, Taenia-Genus, Taenia solium, Tick-borne encephalitis-Virus (TBEV), Toxocara canis oder Toxocara cati, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Trichinella spiralis, Trichomonas vaginalis, Trichophyton spp., Trichuris trichiura, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Ureaplasma urealyticum, Varicella-Zoster-Virus (VZV), Varicella-Zoster-Virus (VZV), Variola major oder Variola minor, vCJD-Prion, Venezolanisches Pferdeenzephalitis-Virus, Vibrio cholerae, West-Nil-Virus, Westliches Pferdeenzephalitis-Virus, Wuchereria bancrofti, Gelbfieber-Virus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis und Yersinia pseudotuberculosis.
  13. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription, umfassend - einen bakteriellen Replikationsursprung, - eine Sequenz, die für einen Selektionsmarker kodiert, wobei die Sequenz ein Kanamycin-Resistenzgen ist oder der Marker ein durch Saccharose selektierbarer Marker ist, - einen Promotor für eine*DNA-abhängige RNA-Polymerase, - ein Insert, das eine homopolymere Region umfasst, wobei die homopolymere Region mindestens eine Poly(A)-Sequenz umfasst, die einen Abschnitt von mindestens 60 Adenosin-Nukleotiden umfasst, wobei sich die homopolymere Region in einem Abstand von mindestens 500 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet und wobei das Insert, das die homopolymere Region umfasst, so ausgerichtet ist, dass die Transkriptionsrichtung des Inserts identisch mit der Replikationsrichtung des Replikationsursprungs ist.
  14. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach Anspruch 13, wobei die Poly(A)-Sequenz einen Abschnitt von 60 bis 250 Adenosin-Nukleotiden umfasst.
  15. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach Anspruch 13 oder 14, wobei die Plasmid-DNA ferner eine Primosom-Assemblierungsstelle umfasst.
  16. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach einem der Ansprüche 13 bis 15, wobei sich die homopolymere Region in einem Abstand von mindestens 2200 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet.
  17. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach einem der Ansprüche 13 bis 16, wobei die Plasmid-DNA eine offene Leserahmensequenz und eine 5'-UTR und/oder 3'-UTR einer mRNA umfasst.
  18. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach Anspruch 17, wobei die offene Leserahmensequenz für ein pathogenes Antigen oder ein Fragment davon kodiert, wobei das pathogene Antigen vorzugsweise ein Oberflächenantigen ist, noch bevorzugter ein Oberflächenantigen, das sich an der Oberfläche eines Virus befindet.
  19. Lineares Plasmid-DNA-Template für die In-Vitro-Transkription nach Anspruch 18, wobei das pathogene Antigen von einem mit einer Infektionskrankheit assoziierten Erreger abgeleitet ist, wobei der Erreger ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Acinetobacter baumannii, Anaplasma-Genus, Anaplasma phagocytophilum, Ancylostoma braziliense, Ancylostoma duodenale, Arcanobacterium haemolyticum, Ascaris lumbricoides, Aspergillus-Genus, Astroviridae, Babesia-Genus, Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bartonella henselae, BK-Virus, Blastocystis hominis, Blastomyces dermatitidis, Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Borrelia-Genus, Borrelia spp., Brucella-Genus, Brugia malayi, Bunyaviridae-Familie, Burkholderia cepacia und andere Burkholderia-Arten, Burkholderia mallei, Burkholderia pseudomallei, Caliciviridae-Familie, Campylobacter-Genus, Candida albicans, Candida spp., Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psittaci, CJD-Prion, Clonorchis sinensis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium perfringens, Clostridium spp., Clostridium tetani, Coccidioides spp., Coronaviren, Corynebacterium diphtheriae, Coxiella burnetii, Krim-Kongo-Hämorrhagisches-Fieber-Virus, Cryptococcus neoformans, Cryptosporidium-Genus, Cytomegalovirus (CMV), Dengueviren (DEN-1, DEN-2, DEN-3 und DEN-4), Dientamoeba fragilis, Ebolavirus (EBOV), Echinococcus-Genus, Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii, Ehrlichia-Genus, Entamoeba histolytica, Enterococcus-Genus, Enterovirus-Genus, Enteroviren, hauptsächlich Coxsackie-A-Virus und Enterovirus 71 (EV71), Epidermophyton spp., Epstein-Barr-Virus (EBV), Escherichia coli O157:H7, 0111 und O104:H4, Fasciola hepatica und Fasciola gigantica, FFI-Prion, Filarioidea-Superfamilie, Flaviviren, Francisella tularensis, Fusobacterium-Genus, Geotrichum candidum, Giardia intestinalis, Gnathostoma spp., GSS-Prion, Guanarito-Virus, Haemophilus ducreyi, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Henipavirus (Hendra-Virus Nipah-Virus), Hepatitis-A-Virus, Hepatitis-B-Virus (HBV), Hepatitis-C-Virus (HCV), Hepatitis-D-Virus, Hepatitis-E-Virus, Herpes-simplex-Virus 1 und 2 (HSV-1 und HSV-2), Histoplasma capsulatum, HIV (Humanes Immundefizienz-Virus), Hortaea werneckii, Humanes Bocavirus (HBoV), Humanes Herpesvirus 6 (HHV-6) und Humanes Herpesvirus 7 (HHV-7), Humanes Metapneumovirus (hMPV), Humanes Papillomavirus (HPV), Humane Parainfluenzaviren (HPIV), Japanisches Enzephalitis-Virus, JC-Virus, Junin-Virus, Kingella kingae, Klebsiella granulomatis, Kuru-Prion, Lassa-Virus, Legionella pneumophila, Leishmani-Genus, Leptospira-Genus, Listeria monocytogenes, Lymphozytisches Choriomeningitis-Virus (LCMV), Machupo-Virus, Malassezia spp., Marburg-Virus, Masern-Virus, Metagonimus yokagawai, Microsporidia phylum, Molluscum-contagiosum-Virus (MCV), Mumps-Virus, Mycobacterium leprae und Mycobacterium lepromatosis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma pneumoniae, Naegleria fowleri, Necator americanus, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Nocardia asteroides, Nocardia spp., Onchocerca volvulus, Orientia tsutsugamushi, Orthomyxoviridae-Familie (Influenza), Paracoccidioides brasiliensis, Paragonimus spp., Paragonimus westermani, Parvovirus B19, Pasteurella-Genus, Plasmodium-Genus, Pneumocystis jirovecii, Poliovirus, Rabiesvirus, Respiratorische Synzytial-Virus (RSV), Rhinovirus, Rhinoviren, Rickettsia akari, Rickettsia-Genus, Rickettsia prowazekii, Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, Rifttalfieber-Virus, Rotavirus, Rubellavirus, Sabia-Virus, Salmonellen-Genus, Sarcoptes scabiei, SARS-Coronavirus, Schistosoma-Genus, Shigella-Genus, Sin-Nombre-Virus, Hantavirus, Sporothrix schenckii, Staphylococcus-Genus, Staphylococcus-Genus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Strongyloides stercoralis, Taenia-Genus, Taenia solium, Tick-borne encephalitis-Virus (TBEV), Toxocara canis oder Toxocara cati, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Trichinella spiralis, Trichomonas vaginalis, Trichophyton spp., Trichuris trichiura, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Ureaplasma urealyticum, Varicella-Zoster-Virus (VZV), Varicella-Zoster-Virus (VZV), Variola major oder Variola minor, vCJD-Prion, Venezolanisches Pferdeenzephalitis-Virus, Vibrio cholerae, West-Nil-Virus, Westliches Pferdeenzephalitis-Virus, Wuchereria bancrofti, Gelbfieber-Virus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis und Yersinia pseudotuberculosis.
  20. Verfahren zur Herstellung eines linearen Plasmid-DNA-Templates für die In-Vitro-Transkription, umfassend den Schritt: Linearisierung einer Plasmid-DNA, wobei die Plasmid-DNA Folgendes umfasst - einen bakteriellen Replikationsursprung, - eine Sequenz, die für einen Selektionsmarker kodiert, wobei die Sequenz ein Kanamycin-Resistenzgen ist oder der Marker ein durch Saccharose selektierbarer Marker ist, - einen Promotor für eine DNA-abhängige RNA-Polymerase, - ein Insert, das eine homopolymere Region umfasst, wobei die homopolymere Region mindestens eine Poly(A)-Sequenz umfasst, die einen Abschnitt von mindestens 60 Adenosin-Nukleotiden umfasst, wobei sich die homopolymere Region in einem Abstand von mindestens 500 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet und wobei das Insert, das die homopolymere Region umfasst, so ausgerichtet ist, dass die Transkriptionsrichtung des Inserts identisch mit der Replikationsrichtung des Replikationsursprungs ist.
  21. Verfahren nach Anspruch 20, wobei die Poly(A)-Sequenz der Plasmid-DNA einen Abschnitt von 60 bis 250 Adenosin-Nukleotiden umfasst.
  22. Verfahren nach Anspruch 20 oder 21, wobei sich die homopolymere Region der Plasmid-DNA in einem Abstand von mindestens 2200 bp vom Replikationsursprung in der Replikationsrichtung befindet.
  23. Verfahren nach einem der Ansprüche 20 bis 22, wobei die Plasmid-DNA eine offene Leserahmensequenz und eine 5'-UTR und/oder 3'-UTR einer mRNA umfasst.
  24. Verfahren nach Anspruch 23, wobei die offene Leserahmensequenz für ein pathogenes Antigen oder ein Fragment davon kodiert, wobei das pathogene Antigen vorzugsweise ein Oberflächenantigen ist, noch bevorzugter ein Oberflächenantigen, das sich an der Oberfläche eines Virus befindet.
  25. Verfahren nach Anspruch 24, wobei das pathogene Antigen von einem mit einer Infektionskrankheit assoziierten Erreger abgeleitet ist, wobei der Erreger ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Acinetobacter baumannii, Anaplasma-Genus, Anaplasma phagocytophilum, Ancylostoma braziliense, Ancylostoma duodenale, Arcanobacterium haemolyticum, Ascaris lumbricoides, Aspergillus-Genus, Astroviridae, Babesia-Genus, Bacillus anthracis, Bacillus cereus, Bartonella henselae, BK-Virus, Blastocystis hominis, Blastomyces dermatitidis, Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Borrelia-Genus, Borrelia spp., Brucella-Genus, Brugia malayi, Bunyaviridae-Familie, Burkholderia cepacia und andere Burkholderia-Arten, Burkholderia mallei, Burkholderia pseudomallei, Caliciviridae-Familie, Campylobacter-Genus, Candida albicans, Candida spp., Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psittaci, CJD-Prion, Clonorchis sinensis, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium perfringens, Clostridium spp., Clostridium tetani, Coccidioides spp., Coronaviren, Corynebacterium diphtheriae, Coxiella burnetii, Krim-Kongo-Hämorrhagisches-Fieber-Virus, Cryptococcus neoformans, Cryptosporidium-Genus, Cytomegalovirus (CMV), Dengueviren (DEN-1, DEN-2, DEN-3 und DEN-4), Dientamoeba fragilis, Ebolavirus (EBOV), Echinococcus-Genus, Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia ewingii, Ehrlichia-Genus, Entamoeba histolytica, Enterococcus-Genus, Enterovirus-Genus, Enteroviren, hauptsächlich Coxsackie-A-Virus und Enterovirus 71 (EV71), Epidermophyton spp., Epstein-Barr-Virus (EBV), Escherichia coli O157:H7, O111 und O104:H4, Fasciola hepatica und Fasciola gigantica, FFI-Prion, Filarioidea-Superfamilie, Flaviviren, Francisella tularensis, Fusobacterium-Genus, Geotrichum candidum, Giardia intestinalis, Gnathostoma spp., GSS-Prion, Guanarito-Virus, Haemophilus ducreyi, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Henipavirus (Hendra-Virus Nipah-Virus), Hepatitis-A-Virus, Hepatitis-B-Virus (HBV), Hepatitis-C-Virus (HCV), Hepatitis-D-Virus, Hepatitis-E-Virus, Herpes-simplex-Virus 1 und 2 (HSV-1 und HSV-2), Histoplasma capsulatum, HIV (Humanes Immundefizienz-Virus), Hortaea werneckii, Humanes Bocavirus (HBoV), Humanes Herpesvirus 6 (HHV-6) und Humanes Herpesvirus 7 (HHV-7), Humanes Metapneumovirus (hMPV), Humanes Papillomavirus (HPV), Humane Parainfluenzaviren (HPIV), Japanisches Enzephalitis-Virus, JC-Virus, Junin-Virus, Kingella kingae, Klebsiella granulomatis, Kuru-Prion, Lassa-Virus, Legionella pneumophila, Leishmani-Genus, Leptospira-Genus, Listeria monocytogenes, Lymphozytisches Choriomeningitis-Virus (LCMV), Machupo-Virus, Malassezia spp., Marburg-Virus, Masern-Virus, Metagonimus yokagawai, Microsporidia phylum, Molluscum-contagiosum-Virus (MCV), Mumps-Virus, Mycobacterium leprae und Mycobacterium lepromatosis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma pneumoniae, Naegleria fowleri, Necator americanus, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Nocardia asteroides, Nocardia spp., Onchocerca volvulus, Orientia tsutsugamushi, Orthomyxoviridae-Familie (Influenza), Paracoccidioides brasiliensis, Paragonimus spp., Paragonimus westermani, Parvovirus B19, Pasteurella-Genus, Plasmodium-Genus, Pneumocystis jirovecii, Poliovirus, Rabiesvirus, Respiratorische Synzytial-Virus (RSV), Rhinovirus, Rhinoviren, Rickettsia akari, Rickettsia-Genus, Rickettsia prowazekii, Rickettsia rickettsii, Rickettsia typhi, Rifttalfieber-Virus, Rotavirus, Rubellavirus, Sabia-Virus, Salmonellen-Genus, Sarcoptes scabiei, SARS-Coronavirus, Schistosoma-Genus, Shigella-Genus, Sin-Nombre-Virus, Hantavirus, Sporothrix schenckii, Staphylococcus-Genus, Staphylococcus-Genus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Strongyloides stercoralis, Taenia-Genus, Taenia solium, Tick-borne encephalitis-Virus (TBEV), Toxocara canis oder Toxocara cati, Toxoplasma gondii, Treponema pallidum, Trichinella spiralis, Trichomonas vaginalis, Trichophyton spp., Trichuris trichiura, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Ureaplasma urealyticum, Varicella-Zoster-Virus (VZV), Varicella-Zoster-Virus (VZV), Variola major oder Variola minor, vCJD-Prion, Venezolanisches Pferdeenzephalitis-Virus, Vibrio cholerae, West-Nil-Virus, Westliches Pferdeenzephalitis-Virus, Wuchereria bancrofti, Gelbfieber-Virus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis und Yersinia pseudotuberculosis.
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