DE19850072A1 - Phosphinat-Peptidanaloga zur Behandlung von fibrotischen Erkrankungen - Google Patents
Phosphinat-Peptidanaloga zur Behandlung von fibrotischen ErkrankungenInfo
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Abstract
Die Erfindung betrifft die Verwendung von Phosphinat-Peptidanaloga der allgemeinen Formel (I) DOLLAR F1 als Inhibitoren der Procollagen-C-Proteinase (PCP) zur Behandlung fibrotischer Erkrankungen.
Description
Die Erfindung betrifft die Verwendung von Phosphinat-Peptidanaloga als Inhibitoren
der Procollagen-C-Proteinase (PCP) zur Behandlung fibrotischer Erkrankungen.
Es ist bekannt, daß die Procollagen-C-Proteinase (PCP) ein Schlüsselenzym der
Fibrogenese ist. Sie katalysiert die hydrolytische Abspaltung der Procollagen
propeptide von den Procollagenen I, II, II und IV sowie Laminin V [vgl. Amano S.
Takahara K; Gerecke D, Nishiyama T, Lee S. Greenspan DS, Burgeson RE (1996)
Bone morphogenetic protein-1 is the processing enzyme for laminin 5 in human
keratinocytes. Mol. Biol. Cell 7 (suppl.) 58A]. Somit ist die PCP ein Schlüsselenzym
der Collagenprozessierung [vgl. Olsen BJ (1996) Morphogenesis: collagen it takes
and bone it makes. Curr. Biol. 6: 645-647]. In BMP-I-knock-out-Mäusen wurde
nachgewiesen, daß eine komplette Abwesenheit der PCP zu einer unvollständigen
Collagenprozessierung mit der Ablagerung von atypischen, lockeren Collagen
fibrillen führt [vgl. Suzuki N, Labosky PA, Furata Y, Hargett I, Dunn R, Fogo AB,
Takahara K, Peters DM, Greenspan DS, Hogan BL (1996) Failure of ventral body
wall c1osure in mouse embryos lacking a procollagen C-proteinase encoded by BMP-
1, a mammalian gene related to Drosophila tolloid. Development 122: 3587-3595].
Die PCP ist wahrscheinlich auch für die hydrolytische Abspaltung der Propeptid
sequenz der Lysyloxidase verantwortlich. Wahrscheinlich führt die Abspaltung der
Prosequenz zur Aktivierung der katalytischen Lysyloxidaseaktivität der maturen
Form [vgl. Pachenko MV, Stetler-Stevenson WG, Trubetskoy OV, Gacheru SN,
Kagan HM (1996) Metalloproteinase activity secreted by fibrogenic cells in the pro
cessing of prolyslyl oxidase. Potential role of procollagen C-proteinase. J. Biol.
Chem. 271: 7113-7119]. Aktive Lysyloxidase verknüpft gegenüberliegende Colla
genfibrillen kovalent miteinander. Auf diese Weise wird die biologische Stabilität
des Collagens gegenüber dem Abbau durch Collagenasen indirekt auch durch die
PCP erhöht.
Die PCP oder eng verwandte Proteine scheinen auch bei der Freisetzung von TGFß
artigen Wachstumsfaktoren eine Rolle zu spielen. Durch neue Arbeiten konnte ge
zeigt werden, daß PCP-ähnliche Proteasen TGFß-artige Wachstumsfaktoren aus
einem inaktiven Komplex mit TGFß-Bindungsproteinen herauslösen können [vgl.
Kessler E, Takahara K, Biniaminow L, Brusel M, Greenspan DS (1996) Bone
morphogenetic protein-1: The type I procollagen C-proteinase]. Dabei wird der
Bindungspartner der TGFßartigen Wachstumsfaktoren durch spezifische Proteolyse
zersetzt. Indirekt besitzt die PCP also möglicherweise auch eine TGFß-agonistische
Aktivität. Daher kann der PCP eine entscheidende Rolle in der Fibrogenese zuge
sprochen werden.
Die PCP-Aktivität geht auf Splicevarianteri des BMP-I-Gens zurück [vgl. Kessler E,
Takahara K, Biniaminow L, Brusel M, Greenspan DS (1996) Bone morphogenetic
protein-1: The type I procollagen C-proteinase; Reddi AH (1996) BMP-1: Resur
rection as procollagen C-proteinase. Science 217 : 463; Li SW, Sieron AL, Fertala A,
Hojima Y, Arnold WV, Prockop DJ (1996) The C-proteinase that processes
procollagens to fibrillar collagens is identical to the protein previosly identified as
bone morphogenetic protein-1. Proc. Natl. Acad. Sci. 93: 5127-S 130]. Bislang wur
den verschiedene Splicevarianten dieses Proteins identifiziert, deren biologische
Funktion zum Teil unklar ist. Bislang ist gesichert, daß die Splicevarianten BMP I-I
und BMP I-III (tld-Variante) Procollagen und Pro-Lysyloxidase spezifisch schneiden
können. Durch neuere Arbeiten wurden weitere BMP-1-Splicevarianten identifiziert,
deren biologische Funktion und Substratspezifität aber zum Teil noch ungeklärt ist
[vgl. Janitz M, Heiser V, Böttcher U, Landt O, Lauster R (1998) Three alternatively
spliced variants of the gene coding for the human bone morphogenetic protein-1. J.
Mol. Med. 76: 141-146].
Obwohl die Expressionsclonierung und Aufreinigung der PCP bisher nur in kleinen
Ausbeuten gelungen ist, sind von dem Enzym zahlreiche strukturelle Details bekannt.
Die PCP gehört nämlich zur Familie der Astacinproteasen, und die Kristallstruktur
dieses Proteins ist im Detail bekannt. Zwischen der katalytischen Domäne von BMP-
I und Astacin gibt es einen sehr hohen Grad an struktureller Homologie, so daß es
möglich war, vielen Aminosäuren der PCP-Proteasedomäne aufgrund dieser Homo
logie die wahrscheinliche strukturelle und biochemische Funktion zuzuordnen [vgl.
Stöcker W, Gomis-Rüth FX, Bode W, Zwilling R (1993) Implications of the three
dimensional structure of astacin for the structure and function of the astacin family of
zinc-endopeptidases. Eur. J. Biochem. 214: 215-231].
Durch computergesteuertes "Molecular Modelling" konnte in der Vergangenheit die
Substratbindung an das aktive Zentrum der Astacine im molekularen Detail
hergeleitet werden [vgl. Stöcker W, Grams F, Baumann U, Reinemer P, Gomis-Rüth
FX, McKay DB, Bode W (1995) The metzincins - Topological and sequential
relations between the astacins, adamalysins, serralysins, and matrixins (collagenases)
define a superfamily of zinc-endopeptidases. Prot. Sci.: 823-840]. Diese Arbeiten
führten zum "rational design" von Phosphinat-Peptidanaloga, die das Astacin mit
hoher Wirkpotenz inhibieren. Der Komplex zwischen einem Phosphinatinhibitor und
Astacin wurde strukturell aufgeklärt [vgl. Grams F, Dive V, Yiotakis A, Yiallouros I,
Vassilou S. Zwilling R, Bode W, Stöcker W (1996) Structure of astcin with
transition-state analogue inhibitor. Nature Struct. Biol. 3: 671-675].
Bisher wurde trotz der hohen strukturellen Homologie zwischen Astacin und der
katalytischen Domäne von BMP-1 davon ausgegangen, daß die beiden Proteasen sich
aufgrund biochemischer Unterschiede hinsichtlich ihres Reaktionsverhaltens auch in
der Hemmbarkeit durch Proteaseinhibitoren deutlich unterscheiden. Biochemische
Unterschiede zwischen Astacin und BMP-I bestehen z. B. hinsichtlich der Substrat
spezifität (Astacin hydrolysiert als Verdauungsenzym des Flußkrebses relativ unspe
zifisch kollagenartige Proteine, während die PCP hochspezifisch an nur einer Stelle
im Procollagenmolekül und in der Pro-Lysyloxidase schneidet).
In der Literatur sind bisher nur niederpotente Inhibitoren der PCP beschrieben, denen
eine antifibrotische Wirkung zugeschrieben wird [vgl. Brenner M, Ho WB (1996) C-
proteinase inhibitors for the treatment of disorders related to the overproduction of
collagen. WO 97/05865].
Überraschenderweise wurde jetzt gefunden, daß Phosphinatpeptidanaloga der all
gemeinen Formel (I),
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und deren Salze und Isomere die PCP mit sehr hoher Wirkpotenz inhibieren und deshalb zur Behandlung und Prophylaxe von fibrotischen Erkrankungen verwendet werden können.
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und deren Salze und Isomere die PCP mit sehr hoher Wirkpotenz inhibieren und deshalb zur Behandlung und Prophylaxe von fibrotischen Erkrankungen verwendet werden können.
Im Rahmen der Erfindung sind physiologisch unbedenkliche Salze bevorzugt. Physio
logisch unbedenkliche Salze sind im allgemeinen Salze der erfindungsgemäßen Ver
bindungen mit anorganischen oder organischen Säuren. Bevorzugt werden Salze mit
anorganischen Säuren, wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Phosphorsäure oder
Schwefelsäure oder Salze mit organischen Carbon- oder Sulfonsäuren, wie Essigsäure,
Maleinsäure, Fumarsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Weinsäure, Milchsäure, Benzoe
säure, oder Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Phenylsulfonsäure, Toluolsulfon
säure oder Naphthalindisulfonsäure.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in stereoisomeren Formen existieren,
die sich entweder wie Bild und Spiegelbild (Enantiomere), oder die sich nicht wie Bild
und Spiegelbild (Diastereomere) verhalten. Die Erfindung betrifft sowohl die Anti
poden als auch die Racemformen sowie die Diastereomerengemische.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können in allen enantiomeren und
diastereomeren Formen vorliegen. Bevorzugt sind diejenigen Isomeren, in denen die
aus Prolin, Lysin und Leucin gebildeten Molekülteile die L-Konfiguration besitzen,
ebenso wie deren Salze und Prodrugs.
Besonders bevorzugt werden Phosphinatpeptidanaloge der allgemeinen Formel (I)
mit aufgezeigter Konfiguration
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und deren Salze und Isomere zur Behandlung und Prophylaxe von fibrotischen Erkrankungen verwendet.
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und deren Salze und Isomere zur Behandlung und Prophylaxe von fibrotischen Erkrankungen verwendet.
Ganz besonders bevorzugt wird die Verbindung der allgemeinen Formel (Ib)
im folgenden als Z-PKF(PC)APL-O-Me bezeichnet,
deren Enantiomere und deren Salze zur Behandlung und Prophylaxe von fibrotischen
Erkrankungen verwendet.
Die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) sind bekannt und können nach
üblichen Methoden der Peptidsynthese aus entsprechenden Phinioylverbindungen
hergestellt werden [vgl. hierzu Yiotakis A, Vassilio S. Jiracek J, Dive V (1996)
Protection of the Hydroxyphosphinyl Function of Phosphinic Dipeptides by Ada
mantyl. Application to the Solid-Phase Synthesis of Phosphinic Peptides. J. Org.
Chem. 61: 6601-6605; Campagne JM, Coste J, Guillou L, Heitz A, Jouin P (1993)
Solid phase synthesis of phosphinic peptides. Tetrahedron Lett. 34: 4181-4184].
Die Ergebnisse waren unerwartet, weil sich BMP-I, Meprin und Astacin vor allem im
sogenannten Sl'-Loop unterscheiden. Ein Ausschnitt aus diesem Loop ist hier
dargestellt:
Astacin: T-DPYD
BMP-I: KPPIG-Q
Meprin: I-IG-Q
Astacin: T-DPYD
BMP-I: KPPIG-Q
Meprin: I-IG-Q
Dieser Loop bildet den essentiellen Teil der SI'-Bindungstasche der Astacin-ähn
lichen Proteasen. Hier liegt, wie am Beispiel des Astacins und des Meprins gezeigt
wurde, der Schlüssel zur unterschiedlichen Substrat- und Inhibitorspezifität beider
Enzyme. In der SI'-Tasche unterscheiden sich Meprin und Astacin sehr deutlich. Die
PCP hat zusätzlich zwei Prolinreste und einen Lysinrest in dieser Region. Wie durch
Computermodelling der Proteasedomäne der PCP gezeigt werden konnte, ist der
Lysinrest sehr wahrscheinlich an der Bindung der Carboxylgruppe in der Seitenkette
des Aspartats in P1' neben der Spaltstelle im Procollagen beteiligt. Die Prolinreste
liegen nach dem Modell in der cis-Konfiguration vor und sind eine Eigentümlichkeit
der BMP-I-Subfamilie unter den Astacinen. Im Gegensatz dazu spaltet Astacin nicht
neben sauren Resten. Aus diesen Gründen war es völlig unerwartet, daß sich ein für
die Inhibition von Astacin entworfenes Phosphinat [vgl. Yiallouros I, Vassiliou S,
Yiotakis A, Zwilling R, Stöcker W, Dive V (1998) Phosphinic peptides, the first
potent inhibitors of astacin, behave as extremely slow-binding inhibitors. Biochem. J.
331: 375-379] als effektiver PCP-Hemmstoff erwies.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel (I) zeigen ein nicht
vorhersehbares, wertvolles pharmakologisches Wirkspektrum.
Überraschenderweise zeichnen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen durch eine
sehr hohe Wirkpotenz bei der Inhibition der PCP aus.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind deshalb zur Behandlung von Leber
fibrosen jeder Genese und von Fibrosen mit anderer Organmanifestation geeignet.
Dazu gehören diverse Gruppen von Krankheiten, die mit einer qualitativ veränderten
Collagenproduktion oder mit einer verstärkten Ablagerung von Collagen im Extra
cellulärraum einhergehen, wie Leberfibrosen unterschiedlichen Ursprungs, wie z. B.
alkoholische Leberzirrhose, biliäre Zirrhose, Hepatitiden viraler oder anderer Genese,
idiopathische interstitielle Fibrosen, idiopathische Lungenfibrosen, akute pulmonale
Fibrosen, das "acute respiratory distress syndrome" (ARDS), perimuskuläre Fibro
sen, perizentrale Fibrosen, Dermatoffbrome, Nierenfibrosen, die diabetische Nephro
pathie, Glomerulonephritiden, die systemische oder lokale Sklerodermie, Keloide,
die hypertrophe Narbenbildung, Gelenkadhäsionen, Arthrosen, Myelofibrosen,
Vernarbungen der Comea, die cystische Fibrose, muskuläre Fibrosen, die
Duchenne'sche Muskeldystrophie, Ösophagusstrikturen, Morbus Ormond, Morbus
Crohn, Colitis ulcerosa und Aneurysmen der großen Gefäße.
Außerdem umfaßt die Erfindung fibrotische Erkrankungen, die initiiert oder hervor
gerufen werden durch chirurgische Narbenrevisionen, plastische Chirurgie, Glau
kome, Kataraktfibrosen, Vernarbungen der Cornea, die sogenannte "graft versus host
disease", chirurgische Eingriffe an Sehnen, Nerveneinklemmungssyndrome, die
Dupuytren'sche Kontraktur, Adhäsionen infolge gynäkologischer Eingriffe, pelvi
sche Adhäsionen, peridurale Fibrosen, Erkrankungen der Schilddrüse oder der
Nebenschilddrüsen, durch metastatischen Knochenbefall, durch das multiple Myelom
oder durch Restenosen.
Zum Nachweis der PCP-Aktivität wurde ein synthetisches Dekapeptidsubstrat mit
der Sequenz
DABCYL-Asp-Phe-Tyr-Arg-Ala-Asp-Gen-Pro-Arg-Asp (EDANS)-
NH2
durch Zusatz von PCP gespalten. Diese Peptidfrequenz entspricht der Region im
Procollagen α2 (I), die von PCP gespalten wird. Die Spaltsequenz ist biochemischen
Experten bekannt [vgl. Lee ST; Kessler E, Greenspan DS (1990) Analysis of site
directed mutations in human pro-α2 (I) collagen which block cleavage by the C-
proteinase. J. Biol. Chem. 265: 21992-21996], ebenso das Verfahren des Dequerich
tests [vgl. Matayoshi ED, Wang GT, Krafft GA, Erickson J (1989) Novel fluorogenic
substrates for assaying retroviral proteases by resonance energy transfer. Science
247: 954-958].
Die Konzentration des synthetischen Peptids war 5.6 µM, die finalen Pufferbedin
gungen waren: 50 mM Tris pH 7.5, 150 mM NaCl und 0,005% Brij35.
Die Durchführung des kinetischen Test erfolgte wie im folgenden beschrieben: Das
Fluoreszenzsubstrat wurde in 90 µl Reaktionspuffer gelöst. Die Kinetik des Substrat
umsatzes durch MMP-2 wurde in Doppelbestimmungen durch Fluoreszenzmessung
(Ex. 365 nm/Em. 450 nm) zwischen 0 bis 120 min detektiert. Die Reaktion wurde
durch Zugabe einer geeigneten Aktivität von PCP, in 10 µl Reaktionspuffer gelöst,
gestartet. In Zeitintervallen von anfangs 5 min und später in größeren Zeitintervallen
wurde die Emission als ein Maß der proteolytischen Aktivität gemessen. Als Nega
tivkontrolle wurde der spontane Zerfall des Fluoreszenzsubstrats bei Zugabe von
Reaktionspuffer ohne PCP-Aktivität gemessen. Die Fluoreszenzmessungen erfolgten
über einen Zeitraum von ca. 4 h bei 37°C. Nach Ablauf der Reaktion wurde das
Substrat durch Zugabe von Proteinase K (Boehringer Mannheim, 1,44 µg/Reak
tionsansatz, gelöst in 10 µl PBS) und Inkubation bei 37°C für 20 min vollständig
zersetzt. Die Vollständigkeit der Hydrolyse wurde dadurch gezeigt, daß keine Zu
nahme der Fluoreszenz in Abhängigkeit von der Zeit mehr erfolgte.
Der relative Substratumsatz in % der Gesamtmenge errechnete sich aus:
% Umsatz = (Ft-F-t)÷(Ftotal-Fini) × 100%
wobei Ft die relative Fluoreszenz nach einem Zeitintervall t unter Inkubation mit
PCP ist. F-t ist die korrespondierende relative Fluoreszenz nach dem Zeitintervall t
ohne PCP-Zusatz, Ftotal ist die Fluoreszenz nach Totalhydrolyse durch Zusatz von
Proteinase K, und Fini ist die initiale relative Fluoreszenz vor Start der Reaktion
durch Zugabe von Proteinase K.
In dem Test wurde die verwendete PCP-Aktivität typischerweise so eingestellt, daß
mit ininhibiertem Enzym innerhalb des Meßzeitraumes ca. 20% des Substrats
umgesetzt wurden.
In Abb. I ist eine typische Reaktionskinetik (% Umsatz) unter Zugabe des
Phospinatinhibitors Z-PKF(PC)APC-O-Me dargestellt.
Die prozentuale Inhibition unter Zugabe der Inhibitoren errechnete sich nach:
% Inhibition = 100% × % Umsatz (mit Inhibitor) ÷ % Umsatz (ohne Inhibitor)
In Abb. 2 wird die Konzentrations-Wirkungsbeziehung eines Phosphinat
inhibitors dargestellt.
Im Fluoreszenzaktivitätstest wurde die katalytische Domäne von BMP-I eingesetzt.
Die entsprechende cDNA-Sequenz ist aus der Literatur bekannt [vgl. Wozney JM,
Rosen V, Celeste AJ, Mitsock LM, Whitters MJ, Kriz RW, Hewick RM, Wang EA
(1988) Novel regualtors of bone formation: molecular clones and activities. Science
242: 1528-1534] und wurde durch RT-PCR erhalten. Die entsprechenden Primers
enthielten upstream eine EclXI und downstream eine SalI-Schnittstelle, so daß das
Insert gemäß den Angaben des Herstellers Biometra [vgl. Instruction manual strep
tag II system, Biometra 1994] in den E coli-Expressionsvektor pASK75 inseriert
werden konnte. Dies geschah durch einen Verdau des Plasmids pASK75 mit den
Restriktionsenzymen BsaI und SalI. Diese Schnittstellen sind Bestandteile der
"multiple cloning site" von pASK75. Die Details dieser Clonierungsschnitte sind
molekularbiologischen Experten aus der Literatur bekannt [vgl. Sambrook J, Fritsch
EF, Maniatis T (1989) Molecular Cloning. A Laboratory Manual. 2nd edition. Cold
Spring Harbor Laboratory Press].
Die Besonderheit dieses Clonierungsansatzes liegt darin, daß die Proteasedomäne
ohne zwischengeschaltete Aminosäuren auf die Prosequenz des "outer membrane
protein A" (ompA) folgt. Da die Prosequenz von ompA bei der Sekretion ins
Periplasma proteolytisch abgespalten wird, wird bei erfolgreicher periplasmatischer
Sekretion der N-Terminus der katalytischen Domäne von BMP-I freigelegt. Es ist
bekannt, daß der N-Terminus bei Proteasen aus der Astacinfamilie eine besondere
Rolle bei deren Aktivierung spielt. Er faltet sich nämlich ins aktive Zentrum des
Enzyms zurück und bildet so über Wasserstoffbrückenbindungen die stabile aktive
Konformation des Enzyms aus.
Die Expression der Proteasedomäne von BMP-I wird durch zwei Faktoren erschwert:
- 1. Das Protein neigt zur Bildung von schwer löslichen inclusion bodies. Dies zeigt sich z. B. dadurch, daß in den meisten E. coli-Stämmen bei der Expression dieses Proteins keine löslichen Formen gefunden wurden. Außerdem ist die Verweildauer des rekombinanten Proteins im Cytoplasma wahrscheinlich sehr kurz, so daß bei seiner Expression regelmäßig das N- terminale Methionin nicht abgespalten wird. Somit ist es häufig schwierig, den freien N-Terminus zu rekonstituieren, der für die Herstellung der enzymatische Aktivität der Proteasedomäne notwendig ist.
- 2. Das aktive Protein ist für E. coli toxisch, so daß die Expression von ATG- Vektoren in den meisten Stämmen zu schlechten oder überhaupt keinen Ausbeuten an rekombinantem Protein führt.
Bisher sind nur wenige Literaturstellen bekannt, in denen über die erfolgreiche
rekombinante Expression des Proteins berichtet wird. Die beschriebenen Ausbeuten
sind jeweils sehr gering. In Verbindung mit der niedrigen Wechselzahl der PCP (6 h-1)
[vgl. Prockop DJ, Sieron AL, Li SW (1998) Procollagen N-proteinase and
procollagen C-proteinase. Two unsusual metalloproteinases that are essential for
procollagen processing probably have important roles in development and cell
signaling. Matrix Biol. 16: 399-408] wird klar, weshalb bisher erst wenige potente
Inhibitoren der PCP beschrieben wurden.
Für die Testung und Findung von PCP-Inhibitoren ist die Herstellung größerer
Aktivitäten an PCP unerlässlich. Dieses Problem wurde mit dem oben beschriebenen
Konstrukt gelöst. Durch die periplasmatische Sekretion des Proteins wird die cyto
plasmatische Toxizität gemindert, zumal die PCP erst beim Übertritt ins Perisplasma
durch die ompA-spaltende Protease aktiviert wird. Die exzessive inclusion body-
Bildung kann durch Absenkung der Reaktionstemperatur gemäß den Empfehlungen
aus dem Protokoll des Herstellers und durch die Auswahl eines geeigneten Expres
sionsstamms erreicht werden.
MMP-2 (72 kD Type IV Collagenase, Gelatinase A) gehört zur Familie der Matrix
metalloproteasen, die in der Lage sind, Bestandteile der extrazellulären Matrix
(Elastin, Fibronectin, Kollagene Typ IV, VII und X in helikalen Domänen und
Gelantine) abzubauen [vgl. Aimes, RT & Quigley JP (1995) Matrix Metalloprotease-
2 is an interstitial Collagenase-Inhibitor-free enzyme that catalyzes the cleavage of
collagen fibrills and soluble native type-I collagen generating the specific 3/4-length
and 1/4-length fragments, J. Biol. Chem., 270: 5872-5876]. Das Enzym wird als
inaktive Vorstufe (72 kD) von zahlreichen Zellen mesenchymalen Ursprungs
sezerniert. Zur Bildung der aktiven 62 kD-Form wird in vivo ein aminoterminales
Propeptid abgespalten. Im nachfolgend beschriebenen Enzymassay (in vitro) wurde
durch p-Aminophenyl-Quecksilberacetat (APMA) die latente in die aktive Form
überführt.
Aktivierung: 1 U MMP-2 (Boehringer Mannheim, isoliert aus humanen Fibro
sarcoma-Zellen, 200 U/mg) wurde in 50 mM Tris/Cl pH 7,5, 0.05% (v/v) Triton X
100, 1 mM CaCl2 mit 2.5 mM APMA 30 Minuten bei 37°C aktiviert [vgl. Gregory
A. Grant, Arthur Z. Eiseb, Barry L. Marmer, William T. Roswit, and Gregory I.
Goldberg (1987) The Activation of Human Fibroblast Procollagenase. J. Biol. Chem.
262: 5886-5889].
Enzymassay: In einem Volumen von 195 µL wurden 0,5 U aktivierte MMP-2 mit
1 µM Z-PKF(PC)APC-O-Me 10 Minuten bei 37°C inkubiert. Durch Zugabe von
5 µl Substrat (final 50µM) ((Dnp-Pro-β-cyclohexyl-Ala-Gly-Cys(Me)-His-Ala-
Lys(N-Me-Abz)-NH2), Bachem AG, wurde die enzymatische Reaktion gestartet
[vgl. Bickett DM, Green MD, Berman J, Dezube M, Howe AS, Brown PJ, Roth JT,
McGeehan GM (1993) A high throughput fluorogenic substrate for interstitial
collagenase (MMP-1) and gelatinase (MMP-9). Anal Biochem. 212: 58-64]. Die
Emmision wurde als ein Maß der protolytischen Enzymaktivität von MMP-2 durch
Fluoreszenzmessung (Excitationswellenlänge 365 nm und initiale Emission bei 538
nm) in Zeitintervallen zwischen 0 bis 120 min detektiert. Die Spaltsequenz ist
biochemischen Experten bekannt [vgl. Lee ST; Kessler E, Greenspan DS (1990)
Analysis of sitedirected mutations in human pro-α2(I) collagen which block
cleavage by the C-proteinase. J. Biol. Chem. 265: 21992-21996], ebenso das Ver
fahren des Dequerichtests [vgl. Matayoshi ED, Wang GT, Krafft GA, Erickson J
(1989) Novel fluorogenic substrates for assaying retroviral proteases by resonance
energy transfer. Science 247: 954-958].
Folgende Reaktionsansätze wurden durchgeführt: Als Negativkontrolle diente der
spontane Zerfall des Substrates ohne MMP-2. Nicht aktivierte MMP-2, bzw. durch
APMA aktivierte MMP-2, diente als Referenz zur aktivierten MMP-2 inkubiert mit
1 µM Z-PKF(PC)APC-O-Me (Abb. 2).
Abb. 2 zeigt klar die Spezifität des hochwirksamen Phosphinat-Peptidanalogen
Z-PKF(PC)APC-O-Me zu PCB. Die verwendete aktivierte Matrix-Metall
oprotease Typ 2 wird auch bei Konzentrationen bis zu 1 µM (dosisabhängig) nur
unwesentlich bei der Umsetzung des fluoreszenzmarkierten Peptids inhibiert.
Die biologische Wirksamkeit der Substanzen kann in Zellkulturassays und in vivo
demonstriert werden. Nach Applikation der Inhibitoren kann in humanen Zellinien
z. B. der Abfall der Konzentration an freiem Procollagen α1 (III) Propeptid in den
Überständen gemessen werden, weil dieses Peptid durch die Aktivität der PCP
freigesetzt wird. Zur Messung der PIIICP-Konzentrationen im Überstand kann ein
kürzlich etablierter Assay verwendet werden [vgl. Burchardt ER, Schröder W, Heke
M, Kohlmeyer J, Neumann R, Kroll W (1997) Expression cloning of C-terminal
procollagen (III) propeptide and its use in a novel serum assay to monitor liver
fibrogenesis. Hepatology 26: 487A].
Zum Nachweis des antifibrotischen Effekts der Substanzen in der Leber können z. B.
das Tiermodell der akuten [vgl. Johnson S J, Hines JE, Burt AD. Phenotypic
modulation of perisinusoidal cells following acute liver injury: a quantitative
analysis. Int. J. Exp. Path. 1992; 73: 765-772] oder chronischen [vgl. Molean E,
Molean A, Sutton P. Instant Cirrhosis. An improved method for producing cirrhosis
of the liver in rats by simultaneous administration of carbon tetrachloride and
phenobarbitone. Br. J. Exp. Pathol. 1969; 50: 502-506] Tetrachlorkohlenstoff
induzierten Leberschädigung, das Modell der Leberfibrose durch Gallengangsligatur
[vgl. Kountouras J, Billing B, Scheuer P. Prolonged bile obstruction: a new
experimental model for cirrhosis in the rat. Br. J. Exp. Pathol. 1984; 65: 305-311]
oder die durch heterologes Serum induzierte Leberfibrose [vgl. Bhunchet E, Wake K.
Suppression of experimental hepatic fibrosis by administration of vitamin A. Lab.
Invest. 1985; 52: 182-194] verwendet werden. Auch andere Tiermodelle, bei denen
eine Leberfibrose auftritt, können zum Nachweis des antifibrotischen Effekts
verwendet werden.
Je nach Organmanifestation oder Art der fibrotischen Schädigung können auch
Tiermodelle für andere Fibrosemanifestationen, z. B. im Herzen, in den Nieren, in
den Lungen, in der Haut oder anderen Organen verwendet werden.
Die Reduktion der Collagenablagerung kann z. B. durch die Bestimmung des
Hydroxyprolingehalts [vgl. Gerling B, Becker M, Waldschmidt J, Rehmann M,
Schuppan D. Elevated serum aminoterminal procollagen type-III-peptide parallels
collagen accumulation in rats with secondary biliary fibrosis. Hepatology 1996; 25:
79-84] der fibrotischen Organe oder durch quantitative Morphometrie erfolgen [vgl.
Kauschke SG, Knorr A, Olzen M, Burchardt ER (1997) Expression of collagen (III)
as determined by quantitative PCR and its correlation with extracellular collagen
deposition in the rat CCl4 model of liver fibrosis. Hepatology 26: 538A].
Abb. 1 zeigt den Substratumsatz des DABCYL-EDANS-Dekapeptides durch
rekombinante PCP in Abhängigkeit von der Zeit. Die Enzymaktivität wird in
Anwesenheit von 100 nM Inhibitor fast vollständig inhibiert.
Abb. 2 zeigt die Konzentrations-Wirkungsbeziehung des Phosphinatinhibitors
Z-PKF(PC)APC-O-Me
Abb. 3 zeigt den Umsatz eines MMP-2 proteasespezifischen fluoreszenz
markierten Substrats durch Metalloprotease Typ 2 in Abhängigkeit von der Zeit.
Die MMP-2 Enzymaktivität wird in Anwesenheit von 1 µM Z-PKF(PC)APC-O-
Me nicht inhibiert.
- a) Substrat: spontaner Zerfall von 50 µM Substrat in Testpuffer
- b) APMA: APMA und 50 µM Substrat
- c) MMP-2 inaktiv: MMP-2, nicht APMA-aktiviert und 50 µM Substrat
- d) MMP/APMA: MMP-2, APMA-aktiviert und 50 µM Substrat
- e) 1 µM Z-PKF(PC)APC-O-Me:
MMP-2, APMA-aktiviert und 50 µM Substrat
+ 1 µM Z-PKF(PC)APC-O-Me
Zur vorliegenden Erfindung gehören auch pharmazeutische Zubereitungen, die neben
inerten, nicht-toxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfs- und Trägerstoffen eine oder
mehrere Verbindungen der allgemeinen Formel (I) enthalten, oder die aus einem oder
mehreren Wirkstoffen der Formeln (I) bestehen, sowie Verfahren zur Herstellung
dieser Zubereitungen.
Die Wirkstoffe der Formeln (I) sollen in diesen Zubereitungen in einer Konzentration
von 0,1 bis 99,5 Gew.-%, bevorzugt von 0,5 bis 95 Gew.-% der Gesamtmischung
vorhanden sein.
Neben den Wirkstoffen der Formeln (I) können die pharmazeutischen Zubereitungen
auch andere pharmazeutische Wirkstoffe enthalten.
Die oben aufgeführten pharmazeutischen Zubereitungen können in üblicher Weise
nach bekannten Methoden hergestellt werden, beispielsweise mit dem oder den Hilfs-
oder Trägerstoffen.
Im allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, den oder die Wirkstoffe der
Formeln (I) in Gesamtmengen von etwa 0,01 bis etwa 100 mg/kg, bevorzugt in
Gesamtmengen von etwa 1 mg/kg bis 50 mg/kg Körpergewicht je 24 Stunden, gege
benenfalls in Form mehrerer Einzelgaben, zur Erzielung des gewünschten Ergebnisses
zu verabreichen.
Es kann aber gegebenenfalls vorteilhaft sein, von den genannten Mengen abzuweichen,
und zwar in Abhängigkeit von der Art und vom Körpergewicht des behandelten
Individuums, vom individuellen Verhalten gegenüber dem Medikament, der Art und
Schwere der Erkrankung, der Art der Zubereitung und Applikation, sowie dem Zeit
punkt bzw. Intervall, zu welchem die Verabreichung erfolgt.
Claims (4)
1. Verwendung von Phosphinat-Peptidanaloga der allgemeinen Formel (I)
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und/oder deren Stereoisomeren und Salzen zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung von fibrotischen Erkrankungen.
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und/oder deren Stereoisomeren und Salzen zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung von fibrotischen Erkrankungen.
2. Verwendung gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Verbindungen
der allgemeinen Formel (I) mit der in der Formel (Ia) aufgezeigten Konfi
guration
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und/oder deren Stereoisomere und Salze verwendet werden.
in welcher
R1 für Wasserstoff oder Methyl steht,
und/oder deren Stereoisomere und Salze verwendet werden.
3. Verwendung gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbin
dung der Formel (Ib)
und/oder deren Enantiomere und Salze verwendet wird.
und/oder deren Enantiomere und Salze verwendet wird.
4. Verwendung gemäß Anspruch 1 zur Behandlung von Leberfibrose.
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003007980A1 (de) * | 2001-07-14 | 2003-01-30 | Elmar Reinhold Burchardt | Phosphinat-peptidanaloga als inhibitoren der procollagen-c-proteinase (pcp) zur behandlung von fibrotischen erkrankungen |
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