DE19824306A1 - Autologe Fibrinkleber - Google Patents

Autologe Fibrinkleber

Info

Publication number
DE19824306A1
DE19824306A1 DE1998124306 DE19824306A DE19824306A1 DE 19824306 A1 DE19824306 A1 DE 19824306A1 DE 1998124306 DE1998124306 DE 1998124306 DE 19824306 A DE19824306 A DE 19824306A DE 19824306 A1 DE19824306 A1 DE 19824306A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
autologous
fibrin glue
thrombin
prothrombin
component
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE1998124306
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Sittinger
Alexander Loch
Andreas Haisch
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Transtissue Technologies 10117 Berlin De GmbH
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to DE1998124306 priority Critical patent/DE19824306A1/de
Publication of DE19824306A1 publication Critical patent/DE19824306A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0068General culture methods using substrates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46Hydrolases (3)
    • A61K38/48Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4833Thrombin (3.4.21.5)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/10Polypeptides; Proteins
    • A61L24/106Fibrin; Fibrinogen
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/50Proteins
    • C12N2533/56Fibrin; Thrombin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft durch Aufbereitung von Plasma hergestellte autologe Fibrinkleber - bestehend aus autologem Fibrinogen und autologem Thrombin. Die Verwendungsmöglichkeiten des erfindungsgemäßen Klebers und von autologen Plasmakomponenten liegen im Tissue Engineering, der Biotechnologie und der operativen Medizin. Sie eignen sich als Trägermaterial und als Kulturmedium für Zellen und Gewebe, zum Umhüllen von Implantaten (z. B. von Biosensoren) sowie zum Kleben und Adaptieren von Geweben (Haut, Knorpel, Knochen, Gefäßen oder Dura.), zur Blutstillung sowie als Träger zur Freisetzung von Wirkstoffen, wie Antibiotika, Wachstumsfaktoren oder wundheilungsfördernden Zusätzen.

Description

Die Erfindung betrifft durch Aufbereitung von Plasma hergestellte autologe Fibrinkleber - bestehend aus autologem Fibrinogen und autologem Thrombin - sowie die Verwendung von autologem Fibrinkleber und autologen Plasmakomponenten im Tissue Engineering, der Biotechnologie und der operativen Medizin.
Durch Fortschritte in der Biotechnologie und in der Zellkulturtechnik besteht ein erhöhter Bedarf an bioabbaubaren, biokompatiblen Trägermaterialien. Fibrinkleber haben sich hierfür als ausgesprochen geeignet erwiesen. Die in Europa verfügbaren Fibrinkleber werden ausnahmslos aus gepooltem Plasma von ausgewählten Spendern hergestellt. Eine Virusübertragung kann trotz hoher Sicherheitsstandards bei diesen Präparaten nicht vollständig ausgeschlossen werden. Des weiteren bilden diese Produkte einen erheblichen Kostenfaktor.
In den USA sind die hier erhältlichen Produkte nicht zugelassen, dort werden direkt in den Kliniken Fibrinogenkonzentrate auf autologer Basis hergestellt. Bei der Herstellung der zweiten Kleberkomponente, dem Thrombin, wird jedoch nach wie vor auf gepooltes bovines Thrombin zurückgegriffen, das bei wiederholter Anwendung zum Teil erhebliche immunologische Nebenwirkungen bis zum anaphylaktischen Schock gezeigt hat (Berguer, R. et al., Warning: Fatal Reaction to the Use of Fibrin Glue in Deep Hepatic Wounds. Case Report. J., Trauma 31: 408-411, 1991; Israels, S. J. and Israels, E.D., Develop ment of Antibodies to Bovine and Human Factor V in two Children After Exposuere to Topical Bovine Thrombin, Am. Pediatr. Hematol. Oncol. 16 (3): 249-254, 1994; Berruyer, M. et al., Immunisation by bovine thrombin used with fibrin glue during cardiovascular operations, Thorac. Cardiovasc. Surg. 105: 892-897, 1993).
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, einen verbesserten Fibrinkleber bereitzustellen, der die Risiken einer Virusübertragung und immunologischer Nebenwirkungen verringert. Die Aufgabe wurde durch einen Kleber gelöst, der neben Fibrinogenkonzentraten auf autologer Basis auch autologes Thrombin als zweite Komponente enthält. Die Lösung liegt in der Aufbereitung von humanem Plasma, das von einem einzigen Patienten gewonnen wird.
Die Herstellung des erfindungsgemäßen Klebers erfolgt durch Aufbereitung von humanem oder tierischem (Pferd, Hund, Schwein etc.) Plasma. Dabei wird humanes oder tierisches Plasma zunächst von Fibrinogen gereinigt - welches die erste Komponente des autologen Fibrinklebers darstellt - und die zweite Komponente aus dem Überstand gewonnen. Dazu wird Prothrombin aus dem Überstand herausadsorbiert und durch einen Elutionspuffer abgelöst. Das Konzentrat an Prothrombin und Thrombin durchläuft dann eine Gelfiltration, ehe restliches Prothrombin zu Thrombin gespalten und aktiviert wird.
Es ist auch möglich, das Prothrombin aus dem Überstand durch Bariumchlorid zu fällen.
Die Spaltung und Aktivierung des Prothrombins zu Thrombin erfolgt an negativen Gruppen von Glaswänden und von Zellulose oder durch zusätzliches Zufügen von Thromboplastin.
Das Konzentrat an autologem Thrombin wird in einer calciumhaltigen Lösung aufgefangen. Es stellt die zweite Komponente des Klebers dar und enthält zusätzlich thrombinstabilisierende Faktoren.
Es hat sich überraschenderweise herausgestellt, daß der erfindungsgemäße Kleber als Trägermaterial und als Kulturmedium für Zellen und Gewebe, zum Adaptieren von Gewebe, zur Blutstillung und als Träger zur Freisetzung von Wirkstoffen geeignet ist. Durch die autologe Anwendung des erfindungsgemäßen Fibrinklebers können sowohl infektiöse als auch immunologische Reaktionen sicher ausgeschlossen werden.
Der erfindungsgemäße Fibrinkleber kann in der Biotechnologie - neben dem Einsatz als Trägermaterial und Kulturmedium für Zellen und Gewebe - überraschenderweise auch zum Umhüllen von Implantaten, z. B. von Biosensoren, verwendet werden.
Der erfindungsgemäße autologe Fibrinkleber eignet sich ferner zur Verwendung im Tissue Engineering und in der operativen Medizin, z. B. zum Kleben und Adaptieren von Geweben (Haut, Knorpel, Knochen, Gefäßen, Dura etc.), zur Blutstillung sowie als Träger zur Freisetzung von Wirkstoffen, wie Antibiotika, Wachstumsfaktoren, wundheilungsfördernden Zusätzen und ähnlichem.
Die Erfindung soll an einem Ausführungsbeispiel näher erläutert werden:
Ausführungsbeispiel
Plasma wird zunächst von Fibrinogen gereinigt, z. B. durch Kryopräzipitation, oder durch andere Fällungsmethoden (mit Ethanol, Ammoniumsulfat, Polyethylenglykol etc.). Die Fibrinogenfraktion enthält außer dem Fibrinogen noch die Faktoren VIII und XIII der Blutgerinnung und stellt die erste Komponente des Klebers dar.
Der Überstand wird nach in der Transfusionsmedizin üblichen Verfahren steril in ein speziell hierfür angefertigtes System überführt. In diesem System wird Prothrombin aus dem Überstand mit Diethylaminoethyl-Cellulose, z. B. mit DEAE-Sephadex A-50, herausadsorbiert.
In einem weiteren Schritt wird das Restplasma innerhalb des Systems abfiltriert und gesammelt. Dieses Restplasma kann als Zusatz in Nährmedien zum Züchten von Zellen verwendet werden.
Das gebundene Prothrombin kann nun durch einen Elutionspuffer von Sephadex abgelöst werden.
Dieses Konzentrat an Prothrombin durchläuft innerhalb des Systems eine Stufe der Gelfiltration, in der es von den Salzen des Elutionspuffers befreit wird.
Die Spaltung und Aktivierung des Prothrombins zu Thrombin erfolgt an den negativen Gruppen von Glaswänden und der Zellulose oder durch zusätzliches Zufügen von Thromboplastin. Möglich ist auch eine Fällung des Prothrombins durch bariumchloridhaltige Lösungen.
Letztlich wird das Konzentrat in einer calciumhaltigen Lösung aufgefangen, die zusätzlich thrombinstabilisierende Faktoren enthalten kann ("Stabilisiertes Thrombinpräparat" - Patentschrift DE 30 19 612 und "Verfahren zur Wärmebehandlung von Thrombin" - DE 38 09 991). Diese Lösung stellt die zweite Komponente des Klebers dar.

Claims (12)

1. Autologe Fibrinkleber.
2. Autologe Fibrinkleber nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Komponente aus Fibrinogenkonzentraten auf autologer Basis und die andere aus autologem Thrombin besteht.
3. Autologe Fibrinkleber nach Anspruch 1 und 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie durch Aufbereitung von humanem oder tierischem Plasma gewonnen werden.
4. Verfahren zur Herstellung von autologem Fibrinkleber nach Anspruch 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß humanes oder tierisches Plasma zunächst von Fibrinogen gereinigt wird, welches die erste Komponente des autologen Klebers darstellt, die auch den Faktor XIII enthält und dadurch, daß die zweite Komponente aus dem Überstand gewonnen wird.
5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß Prothrombin aus dem Oberstand herausadsorbiert und durch einen Elutionspuffer abgelöst wird, das Konzentrat an Prothrombin und Thrombin eine Gelfiltration durchläuft und restliches Prothrombin zu Thrombin gespalten und aktiviert wird.
6. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß Prothrombin aus dem Überstand durch Bariumchlorid gefällt wird.
7. Verfahren nach Anspruch 4 bis 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Spaltung und Aktivierung des Prothrombins zu Thrombin an negativen Gruppen von Glaswänden und von Zellulose oder durch zusätzliches Zufügen von Thromboplastin erfolgt.
8. Verfahren nach Anspruch 4 bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß Konzentrat an autologem Thrombin in einer calciumhaltigen Lösung aufgefangen wird und die zweite Komponente des Klebers darstellt.
9. Verfahren nach Anspruch 4 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß die zweite Komponente thrombinstabilisierende Faktoren enthält.
10. Verwendung von autologem Fibrinkleber nach Anspruch 1 bis 9 im Tissue Engineering, der Biotechnologie und der operativen Medizin.
11. Verwendung von autologem Fibrinkleber nach Anspruch 1 bis 9 gemäß Anspruch 10 zum Kleben und Adaptieren von Geweben (wie Haut, Knorpel, Knochen, Gefäße oder Dura), zur Blutstillung sowie als Träger zur Freisetzung von Wirkstoffen, wie Antibiotika, Wachstumsfaktoren oder wundheilungsfördernden Zusätzen.
12. Verwendung von autologem Fibrinkleber nach Anspruch 1 bis 9 gemäß Anspruch 10 zum Umhüllen von Implantaten, wie z. B. Biosensoren.
DE1998124306 1998-05-21 1998-05-21 Autologe Fibrinkleber Withdrawn DE19824306A1 (de)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1998124306 DE19824306A1 (de) 1998-05-21 1998-05-21 Autologe Fibrinkleber

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE1998124306 DE19824306A1 (de) 1998-05-21 1998-05-21 Autologe Fibrinkleber

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE19824306A1 true DE19824306A1 (de) 1999-11-25

Family

ID=7869454

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE1998124306 Withdrawn DE19824306A1 (de) 1998-05-21 1998-05-21 Autologe Fibrinkleber

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19824306A1 (de)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004011024A1 (de) * 2002-07-23 2004-02-05 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Thrombingenerierfähige und thrombinhältige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel
US7494971B2 (en) 2002-07-23 2009-02-24 Bio & Bio Licensing Sa Pharmaceutical preparations and medicines capable of generating, and/or containing, thrombin
US8268362B2 (en) 1997-11-12 2012-09-18 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Medicinal product for the promotion of wound healing
WO2016084097A1 (en) 2014-11-13 2016-06-02 Hemarus Therapeutics Ltd. Process for producing fibrinogen and thrombin

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8268362B2 (en) 1997-11-12 2012-09-18 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Medicinal product for the promotion of wound healing
WO2004011024A1 (de) * 2002-07-23 2004-02-05 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Thrombingenerierfähige und thrombinhältige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel
WO2004011023A1 (de) * 2002-07-23 2004-02-05 Bio-Products & Bio-Engineering Aktiengesellschaft Thrombingenerierfähige und thrombinhältige pharmazeutische wirkstoffzubereitungen und arzneimittel
US7371722B2 (en) 2002-07-23 2008-05-13 Bio & Bio Licensing S.A. Pharmaceutical preparations and medicine capable of generating and/or containing thrombin
US7494971B2 (en) 2002-07-23 2009-02-24 Bio & Bio Licensing Sa Pharmaceutical preparations and medicines capable of generating, and/or containing, thrombin
EP2082748A1 (de) * 2002-07-23 2009-07-29 Bio & Bio Licensing SA Thrombingenerierfähige und thrombinhältige pharmazeutische Wirkstoffzubereitungen und Arzneimittel
WO2016084097A1 (en) 2014-11-13 2016-06-02 Hemarus Therapeutics Ltd. Process for producing fibrinogen and thrombin
US9932388B2 (en) 2014-11-13 2018-04-03 Hemarus Therapeutics Limited Chromatographic process for producing high purity fibrinogen and thrombin

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69229272T2 (de) Topischer fibrinogenkomplex
DE69227705T2 (de) Verwendung von vernetztem kollagen zur herstellung einer nähfähigen bioverträglichen langsam resorbierbaren membran
EP1981553B1 (de) Kleber für medizinische anwendungen und mittel zur blutstillung
DE60027695T2 (de) Verfahren zur herstellung von fibrinogen und fibronectin sowie proteinzusammesetzungen, welche damit herstellbar sind
DE3891033C2 (de) Verwendung von mikrovaskularen Endothelzellen zur Reendothelisierung des von Endothelzellen im wesentlichen entkleideten Gefäßkanals eines Patienten
AU654857B2 (en) Device and method for treating facial lines
CH667394A5 (de) Kuenstliches knochenbildendes biomaterial und dieses enthaltendes implantationsmaterial.
DE3740728A1 (de) Klebstoff
DE68918922T2 (de) Biologische Unterlage für Zellkulturen, bestehend aus durch Thrombin koagulierte Plasmaproteine, ihre Verwendung für die Keratinozytenkultur, deren Rückgewinnung und Transport für therapeutische Verwendungszwecke.
EP0090997A2 (de) Gewebeverklebbare kollagene Wundauflage
EP0049469A1 (de) Kollagene Wundauflage
DE69422165T2 (de) Zweikomponenten-fibrinkleber
JPS59164723A (ja) 再生コラーゲンフイブリルを含有する基質及びその製造方法
EP0271668A1 (de) Wachstumstimulierendes Material, Herstellungsverfahren und therapeutische Zusammensetzung
JPS6042326A (ja) 血管閉鎖剤
DE68913991T2 (de) Implantat zur verwendung in der knochenchirurgie.
WO1992013578A1 (en) A biologically derived medical adhesive and its uses
AT411326B (de) Hämostatische collagen-pellets
DE2645993C2 (de)
DE19824306A1 (de) Autologe Fibrinkleber
CN112494712A (zh) 一种具有止血和促骨愈合功能的可吸收海绵状骨蜡及其制备方法
DE69727736T2 (de) Verfahren zur Aktivierung von Prothrombin zu Thrombin
DE69230932T2 (de) Depotzubereitung
CN1138483A (zh) 纤维蛋白原复合物及其制备方法
WO2022258734A1 (de) Sterilisierte mehr-komponenten-zusammensetzung zur entfernung von partikeln

Legal Events

Date Code Title Description
8110 Request for examination paragraph 44
8127 New person/name/address of the applicant

Owner name: TRANSTISSUE TECHNOLOGIES GMBH, 10117 BERLIN, DE

8181 Inventor (new situation)

Free format text: SITTINGER, MICHAEL, DR., 12349 BERLIN, DE LOCH, ALEXANDER, 10555 BERLIN, DE HAISCH, ANDREAS, DR., 12205 BERLIN, DE

8125 Change of the main classification

Ipc: A61L 24/00

8139 Disposal/non-payment of the annual fee