DE19638591A1 - Kugelförmige magnetische Partikel - Google Patents
Kugelförmige magnetische PartikelInfo
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Description
Die Erfindung betrifft kugelförmige magnetische Partikel auf der Basis von
monodispersen SiO₂-Partikeln Herstellung und ihre Verwendung.
Die Verwendung magnetischer Partikel für die Immobilisierung und Tren
nung von biologischen Materialien gewinnt zunehmend an Bedeutung. Im
allgemeinen bestehen diese Partikel aus einem magnetischen Kern und
einer Schutzschicht aus einem Metalloxid, auf der sich eine Polymer
schicht befindet, die eine reversible Bindung des biologischen Materials
an die magnetischen Partikel ermöglicht.
US 4 343 901 beschreibt magnetische Partikel für die Immobilisierung
von Enzymen, die aus einem anorganischen Oxid und ferromagnetischen
Partikeln bestehen, die durch eine Sol-Gel-Technik erhalten werden. Die
Oberfläche der kalzinierten Partikel ist mit einem vernetzten Polyamin und
Glutaraldehyd imprägniert.
US 4 152 210 beschreibt eine biochemisch aktive Substanz, die aus ferro
magnetischen Partikeln und einen daran haftenden Enzym besteht. Die
Partikel bestehen entweder aus mit Nickel beschichtetem Eisen oder aus
gefälltem Eisenoxid. In beiden Fällen sind sie mit Aminopropyltriethoxy
silan und Glutaraldehyd beschichtet. Die Partikel werden zur Abtrennung
von biologisch aktivem Material aus Fermentationslösungen eingesetzt.
US 4 280 918 beschreibt eine Dispersion magnetischer Partikel, die durch
Mischen einer Dispersion von je Fe₂O₃ oder Kobalt dotiertem Fe₃O₄ mit
positiver Ladung mit kolloidalem SiO₂ mit negativer Ladung und nachfol
gender Behandlung mit Ultraschall hergestellt wird.
EP 0 343 934 beschreibt magnetische Partikel, die aus einem Kern aus
einem magnetischen Material und einer Hülle aus einem anorganischen
Oxid bestehen. Die Herstellung erfolgt durch Emulgieren der Lösung eines
Salzes oder eines wäßrigen Sols des magnetischen Materials und einer
Lösung eines Salzes oder eines wäßrigen Sols des anorganischen Oxids
in einer mit Wasser nicht mischbaren Flüssigkeit, wobei diskrete Tropfen
gebildet werden. Durch Einleiten von Ammoniak werden die Tropfen in
eine Gel umgewandelt, anschließend von der flüssigen Phase getrennt,
entwässert und kalziniert. Die erhaltenen Partikel haben überwiegend eine
kugelförmige Gestalt.
Die aus dem Stand der Technik bekannten magnetischen Partikel haben
den Nachteil, daß sie keine einheitliche Größe besitzen, Agglomerate
nicht verhindert werden können und das Masseverhältnis zwischen
magnetischem Kern und Hüllschicht Schwankungen unterworfen ist.
Dadurch zeigen die Partikel kein einheitliches Verhalten im Magnetfeld,
was sich negativ auf den Trennprozeß auswirkt.
Aufgabe der Erfindung ist es, monodisperse magnetische Partikel mit
einer weitestgehend einheitlichen Größe und einem einstellbaren Ver
hältnis zwischen magnetischem Material und übrigen Bestandteilen
bereitzustellen.
Diese Aufgabe wird gemäß der Erfindung gelöst durch monodisperse
magnetische Partikel einer Teilchengröße von 50 bis 1500 nm, mit einem
kugelförmigen Kern aus Siliciumdioxid, der punktuell mit Magnetikpartikeln
einer Teilchengröße von maximal 60 nm beschichtet ist und eine Deck
schicht aus Siliciumdioxid besitzt. In einer besonderen Ausführungsform
sind die magnetischen Partikel in bekannter Weise silanisiert.
Weiterhin wird diese Aufgabe gemäß der Erfindung gelöst durch ein Ver
fahren zur Herstellung der magnetischen Partikel, indem in einer ersten
Stufe Kieselgel-Monospher in vollentsalztem Wasser bei 20°C dispergiert
und durch Zugabe einer Lösung aus Eisen(II)-sulfat und Eisen(III)-sulfat
mit einer Dosiergeschwindigkeit von 0,05 bis 3 mg Fe₃O₄ pro Min. und pro
m² Oberfläche der Monospher, wobei durch gleichzeitige Zugabe einer
Base ein pH-Wert von 8 eingehalten wird, mit Fe₃O₄ punktuell beschichtet
werden und in einer zweiten Stufe zu der Suspension der beschichteten
Monospher eine wäßrige, essigsaure Tetraethylorthosilanlösung mit einer
Geschwindigkeit von 0,1 bis 5 mg SiO₂ pro Min. und pro m² Oberfläche
der unbeschichteten Monospher zudosiert wird, anschließend innerhalb
von 30 Min. durch Zugabe einer Base die Suspension auf einen pH-Wert
von 9 eingestellt und nachfolgend auf 75°C erwärmt wird und danach die
erhaltenen magnetischen Partikel (Monospher-Magnetbeads) abgetrennt,
mit Wasser gewaschen und bei 60 bis 100°C, gegebenenfalls im Vakuum,
getrocknet werden.
Gegebenenfalls können die erhaltenen Monospher-Magnetbeads in einer
dritten Stufe nach bekannten Verfahren silanisiert werden.
Gegenstand der Erfindung ist auch die Verwendung der erfindungsge
mäßen magnetischen Partikel für die Isolierung von Nucleinsäuren und
Biotin sowie biotinylierter Proteine aus wäßrigen Lösungen.
Die als Ausgangsmaterial zu verwendenden kugelförmigen monodis
persen SiO₂-Partikel sind an sich aus dem Stand der Technik bekannt.
Die grundliegenden Reaktionsbedingungen zur Herstellung von SiO₂-Par
tikeln durch hydrolytische Polykondensation sind beispielsweise aus
den Publikationen von W. Stöber et al. in J. Colloid and Interface Science
26,62 (1968) und 30,568 (1969) sowie dem US-Patent 3,634,588 zu ent
nehmen. Die so hergestellten Partikel zeigen aber oft große Standard
abweichungen für die Teilchendurchmesser und weisen eine gewisse
Porosität auf.
Für die Herstellung von hochmonodispersen, unporösen, kugelförmigen
SiO₂-Partikeln, die eine Standardabweichung von nicht mehr als 5%
aufweisen, wird auf EP 0 216 278 hingewiesen, die ein entsprechend
abgestelltes Herstellungsverfahren auf Basis von hydrolytischer Poly
kondensation offenbart. Kern dieses Verfahrens, das für die Herstellung
der SiO₂-Partikel gemäß vorliegender Erfindung bevorzugt wird, ist eine
zweistufige Vorgehensweise. Hierbei wird zu nächst durch hydrolytische
Polykondensation von Tetraalkoxysilanen in wäßrig-alkalisch-ammonia
kalischem Medium ein Sol bzw. eine Suspension von Primärteilchen
gebildet, die man daran anschließend durch dosierte Zugabe von
weiterem Tetraalkoxysilan auf die gewünschte Endgröße bringt.
Das Verfahren zur Herstellung von hoch monodispersen, unporösen
kugelförmigen SiO₂-Partikel erfolgt in zwei Schritten.
In einem ersten Schritt wird zunächst ein Sol von Primärteilchen herge
stellt. Hierzu wird das Tetraalkoxysilan in ein wäßrig-alkoholisch-ammo
niakalisches Hydrolysegemisch gebracht und innig durchmischt. Als
geeignete Tetraalkoxysilane können alle problemlos hydrolysierbaren
Kieselsäureorthoester aliphatischer Alkohole eingesetzt werden. In erster
Linie kommen hierbei die Ester aliphatischer Alkohole mit 1-5 C-Atomen
in Betracht wie etwa von Methanol, Ethanol, n- oder i-Propanol sowie der
isomeren Butanole und Pentanole. Diese können einzeln, aber auch im
Gemisch eingesetzt werden. Bevorzugt sind die Kieselsäureorthoester der
C₁-C₃-Alkohole, insbesondere Tetraethoxysilan. Das Hydrolysegemisch
sollte neben aliphatischen Alkoholen einen Gehalt von etwa 0,5 bis etwa
8 mol/l Ammoniak und von etwa 1 bis etwa 15 mol/l Wasser enthalten. Als
Alkoholkomponente sind geeignet, aliphatische C₁-C₃-Alkohole, bevorzugt
C₁-C₃-Alkohole wie Methanol, Ethanol sowie n- oder i-Propanol. Diese
können einzeln, aber auch im Gemisch miteinander im Hydrolysegemisch
vorliegen. Die Zugabe des Tetraalkoxysilans zum Hydrolysegemisch
erfolgt vorzugsweise in einer Portion, wobei der Reaktand in reiner Form
oder auch in Lösung in einem der genannten Alkohole vorliegen kann. Zur
Erzeugung der Primärteilchen kann eine Konzentration von Tetraalkoxy
silan im Hydrolysegemisch zwischen etwa 0,01 bis etwa 1 mol/l gewählt
werden. Nach dem Zusammenbringen der Reaktanden setzt die Reaktion
sofort oder nach wenigen Minuten ein, was sich durch eine alsbaldige
Opaleszenz bzw. Trübung des Reaktionsgemisches durch die entstehen
den Teilchen zeigt. Nach im allgemeinen nicht mehr als 15-30 Minuten, in
ungünstigen Spezialfällen auch länger, ist die Reaktion abgelaufen. Je
nach Wahl der Reaktanden sowie ihrer Konzentrationen im Reaktions
gemisch lassen sich in Übereinstimmung mit bekannten Verfahren Teil
chen mit mittlerem Durchmesser zwischen etwa 0,01 und etwa 2 µm
erhalten.
Bevorzugt wird in diesem ersten Schrift des erfindungsgemäßen Verfah
rens mit Reaktionsgemischen gearbeitet, die 3-13 mol/l Wasser, 0,5 bis
4,5 mol/l Ammoniak, 10 bis 25 mol/l Alkohol und 0,1-0,5 mol/l Tetraalk
oxysilan enthalten. Man erhält hierbei Primärteilchen mit mittleren Durch
messern zwischen 0,01 und 1 µm. In diesem Stadium können dem Sol
von Primärteilchen Proben entnommen werden, um die Teilchen beispiels
weise mit Hilfe der Elektronenmikroskopie auf ihre Teilchengröße, Form
treue und Teilchengrößenverteilung zu untersuchen.
Durch Isolation von Teilchenproben besteht die Möglichkeit, die Porosität
der Primärteilchen beispielsweise durch Gasadsorptionsmessung zu
bestimmen.
Als vorteilhaft hat sich erwiesen, die Reaktion zur Erzeugung der Primär
teilchen bei höherer Temperatur durchzuführen. Günstig sind hierbei Tem
peraturen zwischen 35 und 75°C, vorzugsweise zwischen 40 und 65°C.
Es zeigte sich, daß bei erhöhter Temperatur die Teilchengrößenstreuung
abnimmt, allerdings auch die mittlere Teilchengröße. Bei niedrigeren Tem
peraturen, d. h. um Raumtemperatur, erhält man bei sonst gleichen Bedin
gungen größere Teilchen mit höherer Größenstreuung. Weiterhin ist hier
auch vermehrt unerwünschte Agglomeratbildung zu verzeichnen.
Im zweiten Schritt des Verfahrens erfolgt bei gleichmäßiger Durch
mischung ein langsames, kontinuierliches Zudosieren von weiterem Tetra
alkoxysilan zu dem Sol von Primärteilchen. Hierbei ist es wesentlich, daß
die Geschwindigkeit des Zudosierens so gesteuert wird, daß ein soforti
ges, vollständiges Abreagieren mit den im Sol vorliegenden Teilchen er
folgt, ohne daß ein Überschuß Tetraalkoxysilan entsteht, aus dem sich
Keime für neue Primärteilchen bilden können. Unter dieser Verfahrens
maßnahme des nach Maßgabe des Abreagierens kontrollierten Zudosie
rens von Tetraalkoxysilan wird ein gesteuertes Nachwachsen der Teilchen
im Sol erreicht, wobei sich die letztendlich zu erzielende Teilchengröße
nach der Menge des insgesamt zugesetzten Tetraalkoxysilans richtet. Die
Menge des insgesamt zuzusetzenden Alkoxysilans ist im Prinzip unkri
tisch, solange das Hydrolysegemisch im Übeschuß vorhanden ist, bzw.
durch eventuelles Nachgeben von Hydrolysegemisch im Überschuß
gehalten wird. Ein zeitliches Limit bei der Zugabe des Tetraalkoxysilans
ist nicht gesetzt; die Zugabe kann sich über Stunden bis Tage erstrecken.
Auch Unterbrechungen und Wiederaufnahme des Nachwachsens sind
möglich, da die Teilchen in allen Stadien ihres Wachstums stabil sind.
Auch im Nachwachsvorgang wird bevorzugt bei erhöhter Temperatur,
etwa um 40°C, gearbeitet.
Nach diesem Verfahren können monodisperse kugelförmige Kieselsäure-
Partikel mit einer Partikelgröße von 50 bis 1500 nm hergestellt werden,
wobei eine gewünschte Größe sehr genau einstellbar ist, da die Standard
abweichung vom mittleren Teilchendurchmesser nur 2 bis 5% beträgt.
Die punktförmige Beschichtung der Kieselsäure-Monospher mit Magnetit
erfolgt durch Ausfällen aus einer Lösung von Eisen(II)- und Eisen(III)-sal
zen, bevorzugt aus einer Lösung von Eisen(II)- und Eisen(III)-sulfat.
Das Mol-Verhältnis zwischen dem zweiwertigen und dreiwertigen Eisen
salz ist 1 : 1. Es ist zu beachten, daß die Fällungslösungen vor Oxidation
geschützt werden müssen. Während der Fällung ist die Gegenwart von
Oxidations- oder Reduktionsmitteln nicht erforderlich.
Der pH-Wert der Monospherdispersion wird für die Fällung des magneti
schen Fe₃O₄ (Magnetit) auf Werte zwischen 7 bis 9, bevorzugt 7,5 bis 8,5
eingestellt. Der pH-Wert wird während der Fällungsreaktion durch Zugabe
einer Base konstant gehalten, bevorzugt wird 25%ige wäßrige Ammoniak
lösung verwendet. Die Temperatur der Suspension wird auf 0 bis 40°C
eingestellt.
Die Dosiergeschwindigkeit der Eisen(II)-Eisen(III)-salzlösung liegt zwi
schen 0,05 bis 3 mg Fe₃O₄ pro Min. und pro m² Oberfläche, bevorzugt
zwischen 0,2 bis 1 mg Fe₃O₄ pro Min. und pro m² Oberfläche der Mono
spher.
Unter den angegebenen Bedingungen erfolgt eine punktförmige Abschei
dung des Magnetits auf der Oberfläche der Monospher. Die Größe der
Magnetitpartikel beträgt maximal 60 nm.
Die weitere Beschichtung der magnetischen Partikel mit SiO₂ erfolgt durch
Hydrolyse von Tetraalkylorthosilanen, bevorzugt Tetraethylorthosilan.
Hierfür wird die Suspension der mit Magnetit beschichteten Monospher auf
eine Temperatur von 0 bis 40°C, bevorzugt 10 bis 30°C eingestellt und
bei einem pH-Wert von 7 bis 9, bevorzugt 7,5 bis 8,5 eine wäßrige, essig
saure Lösung von Tetraethylorthosilan zudosiert. Die Konzentration des
Silans in der Lösung beträgt 10 bis 50, bevorzugt 20 bis 40 g SiO₂/l. Die
Dosiergeschwindigkeit wird auf 0,1 bis 5 mg SiO₂ pro Min. und pro m²
Oberfläche der unbeschichteten Monospher, bevorzugt 1 bis 2 g SiO₂
pro Min. und pro m² Oberfläche eingestellt. Nach dem Beenden des Zu
dosierens wird die Suspension auf 60 bis 90°C, bevorzugt 70 bis 80°C
erwärmt und der pH-Wert innerhalb von 30 Min. auf 8 bis 10 mit 25%iger
Ammoniaklösung angehoben und die Suspension 30 Min. bei dieser Tem
peratur und bei diesem pH-Wert gehalten. Nach Abkühlen auf Raumtem
peratur werden die mit SiO₂ beschichteten magnetischen Partikel abge
trennt und mit vollentsalztem Wasser salzfrei gewaschen. Anschließend
werden sie in vollentsalztem Wasser redispergiert.
Die erfindungsgemäßen magnetischen Partikel bestehen aus einem
SiO₂-Kern, beschichtet mit 5 bis 60, bevorzugt 20 bis 40 Gew.-% Magnetit,
bezogen auf den SiO₂-Kern und einer SiO₂-Nachbeschichtung von 5 bis
30, bevorzugt 10 bis 20 Gew.-% SiO₂, bezogen auf den SiO₂-Kern.
In einer besonderen Ausführungsform kann die Oberfläche der magne
tischen Partikel durch kovalent gebundene organische Gruppen modifiziert
werden. Die hierfür verwendeten Silane sind so konstruiert, daß sie funk
tionelle Gruppen aufweisen, mit denen sich eine reversible Bindung des
abzutrennenden Materials an die magnetischen Partikel erreichen läßt.
Geeignete Silanisierungsmittel sind Verbindungen der Formel
[R¹R²R³]Si-(CH₂)₁-X-R⁴ (I)
worin
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴
mit
Y = CH oder
Y = CH oder
Z = OR oder zwei Reste Z gemeinsam -O-,
und m, n die Zahlen 0-6,
oder
oder
wobei
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen.
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen.
Die auf den magnetischen Partikeln befindliche Deckschicht aus SiO₂
besitzt freie oder hydratisierte Element-O- oder Element-OH-Gruppen an
der Oberfläche, die einer chemischen Reaktion mit dem Silanisierungs
mittel unter Ausbildung kovalenter Silicium-Sauerstoff-Siliciumverbin
dungen zugänglich sind. Die magnetischen Partikel werden in einer
wäßrigen-alkoholischen Suspension, wobei das Verhältnis von Wasser
zu Ethanol 2,5 : 1,5 beträgt, mit dem Silanisierungsmittel umgesetzt. Einzel
heiten der Silanisierung können DE 42 33 396 und DE 43 16 814 ent
nommen werden, aus denen auch die obengenannten Silanisierungsmittel
bekannt sind.
Die erfindungsgemäßen magnetischen Partikel können für die Isolierung
von Nucleinsäuren aus wäßrigen Lösungen und für die Isolierung und Auf
reinigung von Biotin und biotinylierten Proteinen aus wäßrigen Lösungen
verwendet werden.
Da Nucleinsäuren direkt an Siliciumdioxid gebunden werden, ist eine
Nachbeschichtung der magnetischen Partikel, beispielsweise mit Silanen,
nicht erforderlich.
Für die Extraktion von DNA aus Agarose-Gel wird ein Stück des mit Ethi
diumbromid behandelten Gels in ein geeignetes Gefäß überführt und ein
Silica bindender Puffer mit einem pH-Wert von 8,0 zugegeben. Das Gel
wird resuspendiert und mit magnetischen Partikeln vermischt. Nach Erwär
men der Suspension auf 50°C für 10 Min. werden mit Hilfe eines Magne
ten die Partikel an die Gefäßwand gezogen und die verbleibende Flüssig
keit entfernt. Nach einmaligem Redispergieren und Waschen der magne
tischen Partikel mit der obengenannten Pufferlösung wird das Waschen
mit einem Ethanol enthaltenden Puffer mit einem pH-Wert von 7,2 wieder
holt. Anschließend werden die magnetischen Partikel getrocknet, in einem
Tris-HCl Puffer mit einem pH-Wert von 8,0 resuspendiert und nach Erwär
men auf 50°C für 5 Min. eluiert. Die magnetischen Partikel werden von
der Pufferlösung, die die DNA enthält, im Magnetfeld abgetrennt.
Die Pufferlösungen, die für die Abtrennung von DNA aus wäßrigen
Lösungen mit Hilfe magnetischer Partikel benötigt werden, werden von
der Merck KGaA angeboten. Sie enthalten als wesentlichste Bestandteile
NaClO₄, Tris-HCl und EDTA. Dieses Trennverfahren ist von folgenden
Autoren näher beschrieben worden: Vogelstein, B.; Gillespie, D. (1979).
Preparative and analytical purification of DNA from agarose. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA 76, 615-619; Yang, R.C.A.; Lis, J.; Wu, B. (1979). Elution
of DNA from agarose gels after electrophoresis; Methods Enzymol, 68,
176-182; Boom, R.; Sol, C.J.A.; Salimans, M.M.M.; Jansen, C.L.;
Wertheim-van Dillen, P.M.E.; van der Noordaa, J. (1990). Rapid and
simple method for purification of nucleic acids. J. Clin. Microbiol. 28,
495-503.
Für die Isolierung und Aufreinigung von Biotin und biotinylierten Proteinen
oder Nucleinsäuren aus wäßrigen Lösungen mit Hilfe von magnetischen
Partikeln, an die Streptavidin gekoppelt ist, ist eine Modifizierung der
Oberfläche der magnetischen Partikel mit organischen Gruppen notwen
dig. Hierfür sind die oben erwähnten Silane, beispielsweise γ-Aminopro
pylsilan, geeignet. Die Kopplung von Streptavidin wird noch verbessert,
wenn nach der Silanisierung der SiO₂-Oberfläche noch eine Modifikation
mit Azlacton erfolgt. Dieses Verfahren für die Gewinnung von Biotin und
biotinylierten Proteinen oder Nucleinsäuren aus wäßrigen Lösungen wird
von folgenden Autoren näher beschrieben: Hultman T, Stahl S, Hornes E,
Uhl´n M. Direct solid phase sequencing of genomic and plasmid DNA
using magnetic beads as solid support Nucleic Acids Research 1989;
17(13): 4937-4946; Ahmed ARH, Olivier GWJ, Adams G, Erskine ME,
Kinsman RG, Branch SK, Moss SH, Notarianni LJ, Pouton CW. Isolation
and partial purification of a melaocyte-stimulating hormone recptor from
B16 murine melanoma cells; A novel approach using a cleavable biotiny
lated photoactivated ligand and streptavidin-coated-magnetic beads.
Biochem J 1992; 286: 377-382; Wahlberg J, Hultman T, Uhl´n M. Solid
phase sequencing of PCR products in: McPherson MJ, ed. PCR II - A
Practical Approach. Oxford: IRL Press, Oxford University Press, 1994;
Danilo A. Tagle, Manju Swaroop, Michael Lovett and Francis S. Collins
(1993). Magnetic bead capture of expressed sequences encoded within
large genomic segments Nature 361m 751-753.
Mit Streptavidin gekoppelte magnetische Partikel werden von der
Merck KGaA unter der Bezeichnung "Bio Beads Streptavidin" angeboten.
Die Bindekapazität der erfindungsgemäßen magnetischen Partikel liegt für
DNA bei ca. 5 µg/mg Beads. Für die Streptavidin beschichteten Partikel ist
die Bindekapazität sehr stark abhängig von der zu isolierenden Substanz.
Die erfindungsgemäßen kugelförmigen magnetischen Partikel haben den
Vorteil, daß sie monodispers, unporös und in verschiedenen Größen her
stellbar sind. Die Standardabweichung vom mittleren Durchmesser beträgt
weniger als 5%. Das Masseverhältnis zwischen dem magnetischen Mate
rial und den übrigen Bestandteilen ist in engen Grenzen einstellbar. Da
durch zeigen die Partikel ein gleiches Verhalten im Magnetfeld.
Die nachfolgenden Beispiele sollen die Erfindung erläutern, ohne sie zu
begrenzen.
700 g Monospher (bez. auf SiO₂-Gehalt) mit einem mittleren Teilchen
durchmesser von 500 nm werden unter Rühren in 1500 g vollentsalztes
Wasser eingerührt und das Gemisch eine Stunde mit einem Ultra-Turax
dispergiert. Anschließend wird mit 11 800 g vollentsalztem Wasser die Dis
persion auf einen SiO₂-Gehalt von 5% eingestellt und auf 20°C tempe
riert.
210 g Eisen(II)-sulfat-heptahydrat (Artikel-Nr. von Merck KGaA: 1.03965)
und 380 g Eisen(III)-sulfathydrat 80% (Artikel-Nr. von Merck KGaA: 3926)
werden unter Rühren in 4500 g vollentsalztem Wasser gelöst und in ein
verschließbares Vorratsgefäß gegeben.
Weiterhin wird eine 10%ige wäßrige Ammoniaklösung zur Konstant
haltung des pH-Wertes in ein geschlossenes Vorratsgefäß überführt.
Die Eisensulfatlösung wird nun innerhalb von 2 Stunden zu der auf 20°C
temperierten Monospherdispersion zudosiert, wobei durch gleichzeitige
Zugabe der Ammoniaklösung der pH-Wert auf 7,7 eingestellt wird. Nach
einer halben Stunde Nachreaktion wird mit der SiO₂-Beschichtung begon
nen.
350 g Tetraethylorthosilan werden unter Rühren in einer geschlossenen
Apparatur in einem Gemisch aus 290 g Eisessig und 2275 g vollentsalz
tem Wasser innerhalb von 30 Min. gelöst. Die erhaltene Lösung wird mit
einer Geschwindigkeit von 120 ml/Min. der Dispersion der mit Magnetit
beschichteten Monospher zudosiert. Danach wird innerhalb von 30 Min.
der pH-Wert mit der wäßrigen Ammoniaklösung auf 9,0 angehoben und
die Dispersion auf 75°C erwärmt und für 30 Min. auf diesem Wert
gehalten. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Dispersion
aufgearbeitet.
Innerhalb von 8 Stunden wird die Dispersion fünfmal dekantierend mit 6 l
vollentsalztem Wasser gewaschen, wobei die Sedimentationsgeschwin
digkeit der magnetischen Partikel durch Anlegen eines Magnetfeldes
beschleunigt wird. Die erhaltene Dispersion wird auf einen Massegehalt
von 20% eingestellt.
Zu 400 ml einer nach Beispiel 1 erhaltenen Suspension magnetischer
Partikel werden 190 ml Ethanol zugesetzt, um ein Volumenverhältnis von
Wasser zu Ethanol von 2,5 : 1,5 einzustellen. Dann wird ein Gemisch von
57,5 g γ-Aminopropyltriethoxysilan in 57,5 g Ethanol zugesetzt. Es wird
noch 10 Stunden am Rückfluß gekocht, danach das Lösungsmittel ent
fernt, die Partikel mit Ethanol gewaschen und in Wasser redispergiert,
wobei der Gehalt an Trockensubstanz auf 20 Gew.-% eingestellt wird. Die
magnetischen Partikel besitzen an der Oberfläche gebundene endstän
dige Amino-Gruppen. Die weitere Verwendung der magnetischen Partikel
erfolgt in Form der wäßrigen Dispersion.
Claims (5)
1. Monodisperse magnetische Partikel einer Teilchengröße von 50
bis 1500 nm mit einem kugelförmigen Kern aus Siliciumdioxid, der
punktuell mit Magnetitpartikeln einer Teilchengröße von weniger als
60 nm beschichtet ist und darauf eine Deckschicht aus Siliciumdioxid
besitzt.
2. Partikel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie mit einer
Verbindung der Formel I
[R¹R²R³]Si-(CH₂)₁-X-R⁴ (I)worin
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴ mit
Y = CH oder Z = OR oder zwei Reste Z gemeinsam -O-, und m, n die Zahlen 0-6,
oder wobei
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen modifiziert sind.
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴ mit
Y = CH oder Z = OR oder zwei Reste Z gemeinsam -O-, und m, n die Zahlen 0-6,
oder wobei
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen modifiziert sind.
3. Verfahren zur Herstellung monodisperser magnetischer Partikel nach
Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß in einer ersten Stufe
Kieselgel-Monospher in vollentsalztem Wasser bei 20°C dispergiert
und durch Zugabe einer Lösung von Eisen(II)-sulfat und Eisen(III)-sul
fat mit einer Dosiergeschwindigkeit von 0,05 bis 3 mg Fe₃O₄ pro
Min. und pro m² Oberfläche der Monospher, wobei durch Zugabe
einer Base ein pH-Wert von 8 eingehalten wird, mit Fe₃O₄ punktuell
beschichtet werden und in einer zweiten Stufe zu der Suspension der
beschichteten Monospher eine wäßrige, essigsaure Tetraalkylortho
silanlösung mit einer Geschwindigkeit von 1 bis 5 mg SiO₂ pro Min.
und pro m² Oberfläche der unbeschichteten Monospher zudosiert
wird, anschließend die Suspension auf 75°C erwärmt und innerhalb
von 30 Min. durch Zugabe einer Base auf einen pH-Wert von 9 ein
gestellt wird und danach die erhaltenen magnetischen Partikel abge
trennt, mit Wasser gewaschen und in vollentsalztem Wasser redis
pergiert werden.
4. Verfahren zur Herstellung monodisperser magnetischer Partikel nach
Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß zu der Dispersion der
magnetischen Partikel Ethanol in einer Menge zugegeben wird, bis
ein Volumenverhältnis von Wasser zu Ethanol von 2 : 1,5 erreicht ist
und anschließend in einer ethanolischen Lösung eine Verbindung
der Formel I
[R¹R²R³]Si-(CH₂)₁-X-R⁴ (I)worin
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴ mit
Y = CH oder Z = OR oder zwei Reste Z gemeinsam -O-, und m, n die Zahlen 0-6,
oder wobei
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen, zugegeben wird und nach Kochen am Rückfluß für 5 bis 24 Stunden die modifizierten magnetischen Partikel abgetrennt, gewaschen und in vollentsalztem Wasser redispergiert werden.
R¹ Cl oder Alkoxy mit 1-6 C-Atomen
R², R³ Alkyl mit 1-6 C-Atomen oder die Bedeutung von R¹
1 die Zahlen 1-6
X eine Einfachbindung, O, NH, CONH, NHCONH
R⁴ mit
Y = CH oder Z = OR oder zwei Reste Z gemeinsam -O-, und m, n die Zahlen 0-6,
oder wobei
X eine Einfachbindung ist,
mit R, R′, R′′ = H oder Alkyl mit 1-6 C-Atomen, zugegeben wird und nach Kochen am Rückfluß für 5 bis 24 Stunden die modifizierten magnetischen Partikel abgetrennt, gewaschen und in vollentsalztem Wasser redispergiert werden.
5. Verwendung der magnetischen Partikel nach den Ansprüchen 1 oder
2 für die Isolierung von Nucleinsäuren und Biotin sowie biotinylierter
Proteine aus wäßrigen Lösungen.
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10065761A1 (de) * | 2000-12-30 | 2002-07-11 | Merck Patent Gmbh | Plättchenförmige magnetische Partikel |
GB2408504B (en) * | 2002-08-29 | 2007-01-24 | Nippon Sheet Glass Co Ltd | Exothermic elements for hyperthermic treatment, and method of manufacturing same |
WO2007036682A1 (en) * | 2005-06-17 | 2007-04-05 | Nanosphere Limited | Coated microspheres |
WO2020064430A1 (de) | 2018-09-24 | 2020-04-02 | RTI Rauschendorf Tittel Ingenieure GmbH | Mahlkörper, vorrichtung und verfahren zur herstellung der mahlkörper sowie verwendung |
Families Citing this family (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6822081B2 (en) * | 2000-01-13 | 2004-11-23 | Max-Planck Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Process for the isolation and/or purification of a proteinaceous material |
AU2001263800B2 (en) | 2000-03-24 | 2006-03-09 | Qiagen Gmbh | Porous ferro- or ferrimagnetic glass particles for isolating molecules |
WO2002016571A1 (fr) | 2000-08-21 | 2002-02-28 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | Particules magnetiques ayant une temperature de solution critique de limite inferieure |
DE10355409A1 (de) | 2003-11-25 | 2005-06-30 | Magnamedics Gmbh | Sphärische, magnetische Silicagel-Träger mit vergrößerter Oberfläche für die Aufreinigung von Nukleinsäuren |
KR101157174B1 (ko) * | 2005-11-24 | 2012-06-20 | 삼성전자주식회사 | 세포 또는 바이러스의 신속한 파괴 방법 및 장치 |
KR100829585B1 (ko) * | 2006-04-07 | 2008-05-14 | 삼성전자주식회사 | 표적 세포 분리 및 신속한 핵산 분리 방법 및 장치 |
EP2108699B1 (de) | 2008-04-08 | 2014-06-25 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Vorrichtung zur analytischen Verarbeitung und Detektion |
US8404347B2 (en) | 2009-01-26 | 2013-03-26 | Hong Kong Polytechnic University | Method of synthesis of amphiphilic magnetic composite particles |
CN102363624B (zh) | 2010-06-18 | 2016-03-30 | 香港理工大学 | 使用两亲核-壳型纳米吸附剂对内毒素的去除 |
CN107112105A (zh) | 2014-10-23 | 2017-08-29 | 康宁股份有限公司 | 聚合物包封的磁性纳米颗粒 |
EP3250690A4 (de) * | 2015-01-27 | 2018-08-29 | Circulomics Inc. | Hierarchische kieselsäurelamelle zur magnetischen nukleinsäureextraktion |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4280918A (en) * | 1980-03-10 | 1981-07-28 | International Business Machines Corporation | Magnetic particle dispersions |
DE2810995C2 (de) * | 1977-03-15 | 1985-02-14 | Hitachi, Ltd., Tokio/Tokyo | Magnetisches Adsorbens und Verfahren zu seiner Herstellung |
EP0343934A2 (de) * | 1988-05-24 | 1989-11-29 | Anagen (U.K.) Limited | Magnetisch anziehbare Teilchen und Herstellungsverfahren |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4124735A (en) * | 1976-12-02 | 1978-11-07 | Xerox Corporation | Magnetic glass carrier materials |
GB2125018B (en) * | 1982-08-05 | 1985-10-09 | Uop Inc | Magnetic support matrix |
DE3616133A1 (de) * | 1985-09-25 | 1987-11-19 | Merck Patent Gmbh | Kugelfoermige sio(pfeil abwaerts)2(pfeil abwaerts)-partikel |
DE4233396A1 (de) * | 1992-10-05 | 1994-04-07 | Merck Patent Gmbh | Oberflächenmodifizierte Oxidpartikel und ihre Anwendung als Füll- und Modifizierungsmittel in Polymermaterialien |
DE4309333A1 (de) * | 1993-03-17 | 1994-09-22 | Silica Gel Gmbh | Superparamagnetische Teilchen, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung derselben |
DE4307262A1 (de) * | 1993-03-02 | 1994-09-08 | Christian Bergemann | Magnetisches polymeres Siliciumdioxid |
-
1996
- 1996-09-20 DE DE1996138591 patent/DE19638591A1/de not_active Withdrawn
-
1997
- 1997-09-05 WO PCT/EP1997/004828 patent/WO1998012717A1/de active Application Filing
- 1997-09-05 AU AU45532/97A patent/AU4553297A/en not_active Abandoned
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2810995C2 (de) * | 1977-03-15 | 1985-02-14 | Hitachi, Ltd., Tokio/Tokyo | Magnetisches Adsorbens und Verfahren zu seiner Herstellung |
US4280918A (en) * | 1980-03-10 | 1981-07-28 | International Business Machines Corporation | Magnetic particle dispersions |
EP0343934A2 (de) * | 1988-05-24 | 1989-11-29 | Anagen (U.K.) Limited | Magnetisch anziehbare Teilchen und Herstellungsverfahren |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10065761A1 (de) * | 2000-12-30 | 2002-07-11 | Merck Patent Gmbh | Plättchenförmige magnetische Partikel |
DE10065761B4 (de) * | 2000-12-30 | 2005-01-20 | Merck Patent Gmbh | Plättchenförmige magnetische Partikel, ihre Herstellung und Verwendung |
GB2408504B (en) * | 2002-08-29 | 2007-01-24 | Nippon Sheet Glass Co Ltd | Exothermic elements for hyperthermic treatment, and method of manufacturing same |
WO2007036682A1 (en) * | 2005-06-17 | 2007-04-05 | Nanosphere Limited | Coated microspheres |
WO2020064430A1 (de) | 2018-09-24 | 2020-04-02 | RTI Rauschendorf Tittel Ingenieure GmbH | Mahlkörper, vorrichtung und verfahren zur herstellung der mahlkörper sowie verwendung |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO1998012717A1 (de) | 1998-03-26 |
AU4553297A (en) | 1998-04-14 |
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