DE19619505C2 - Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines - Google Patents

Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines

Info

Publication number
DE19619505C2
DE19619505C2 DE19619505A DE19619505A DE19619505C2 DE 19619505 C2 DE19619505 C2 DE 19619505C2 DE 19619505 A DE19619505 A DE 19619505A DE 19619505 A DE19619505 A DE 19619505A DE 19619505 C2 DE19619505 C2 DE 19619505C2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
milk
bacteria
lysate
medium
culture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
DE19619505A
Other languages
German (de)
Other versions
DE19619505A1 (en
Inventor
Eckhard Dr Lauer
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZYMA GmbH
Original Assignee
ZYMA GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZYMA GmbH filed Critical ZYMA GmbH
Priority to DE19619505A priority Critical patent/DE19619505C2/en
Publication of DE19619505A1 publication Critical patent/DE19619505A1/en
Application granted granted Critical
Publication of DE19619505C2 publication Critical patent/DE19619505C2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12PFERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/04Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using bacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/744Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A61K38/018Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from milk
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728Fungi, e.g. yeasts
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/981Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of mammals or bird
    • A61K8/986Milk; Derivatives thereof, e.g. butter
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/06Lysis of microorganisms
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205Bacterial isolates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/062Ascomycota
    • A61K36/064Saccharomycetales, e.g. baker's yeast
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/001Preparations for care of the lips
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/004Aftersun preparations
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12RINDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Birds (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

Die Erfindung betrifft neue Milch/Bakterienlysate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie Kosmetika und Arzneimittel, die die erfindungsgemäßen Bakterienlysate enthalten. Insbeson­ dere dienen die erfindungsgemäßen Milch/Bakterienlysate in den Kosmetika und Arzneimitteln der Erfindung als anti­ inflammatorischer Zusatz.The invention relates to new milk / bacteria lysates, methods for their manufacture, as well as cosmetics and medicines contain the bacterial lysates according to the invention. Insbeson The milk / bacteria lysates according to the invention are used in the cosmetics and medicaments of the invention as anti inflammatory additive.

Entzündung ist die vom aktiven Bindegewebe und den Blutge­ fäßen getragene, komplexe Reaktionskaskade des Organismus auf einen äußeren oder innerlich ausgelösten Entzündungsreiz (Adam, Med. Klin. Prax. 78 (1983), 12-21; Floh´, Giertz, Rev. Infect. Dis. 9 Suppl. 5 (1987), 553-561; Halliwell, Lancet 344 (1994), 721-724; Grisham, Lancet 344 (1994), 859-861; Cerutti, Lancet 344 (1994), 862-863) mit dem Zweck, diesen zu beseitigen, zu inaktivieren und die reizbedingte Gewebeschädigung zu reparieren. Dabei spielen chemische Ra­ dikalreaktionen, die unter dem Einfluß von katalytischen Faktoren, energiereicher Strahlung (UV-Licht), reaktions­ freudigen Molekülen (Radikale) und/oder Schwermetallen in Gang kommen, eine fundamentale Rolle bei der Zerstörung von Zellstrukturen, besonders der Zellmembranen, die die Zellen gegen die Umwelt abgrenzen.Inflammation is that of active connective tissue and blood vessel-borne, complex reaction cascade of the organism to an externally or internally triggered inflammatory stimulus (Adam, Med. Clin. Prax. 78 (1983), 12-21; Floh', Giertz, Rev. Infect. Dis. 9 Suppl. 5 (1987), 553-561; Halliwell, Lancet 344 (1994), 721-724; Grisham, Lancet 344 (1994), 859-861; Cerutti, Lancet 344 (1994), 862-863) with the purpose of to eliminate, inactivate and stimulate it Repair tissue damage. Here are playing chemical Ra dikalreaktionen under the influence of catalytic Factors, high-energy radiation (UV light), reactive  joyous molecules (radicals) and / or heavy metals in Come a fundamental role in the destruction of Cell structures, especially the cell membranes that make up the cells delimit against the environment.

Zur Behandlung solcher Entzündungserscheinungen sind zahl­ reiche Stoffe bekannt, so einfache Stoffe wie Vitamine, un­ gesättigte Fettsäuren, kurzkettige Fettsäuren wie Essig- oder Milchsäure, aber auch komplexe Stoffe tierischen und pflanzlichen Ursprungs wie Hormone (Cortison), Collagen, Elastin und Hyaluronsäure (Frese und Stahl, Parfümerie und Kosmetik 72. Jg. 9 (1991), 569-574). Auch Stoffe bakteriel­ len Ursprungs werden als anti-inflammatorische Wirkstoffe verwendet, wie Autolysate von Lactobacillus gasseri (Weirich-Schwaiger et al., Drug Research 45 (1995), 342-344), der Repair-Komplex aus Bifidobakterien (EP-A-0 043 128, US-Patent 4,646,362) oder Zellwand-Polysaccharide aus Bifidobakterien (EP-A-0 201 332). Die Verwendung von Bakte­ rien in Form von Probiotika (Lactic Acid Bacteria, Hrsg. Salminen, von Wright, New York, 1993) oder zur Aufforstung der natürlichen Schleimhautbesiedlung (Hughes et al., Obstet. Gynecol. 75 (1990), 244-248) beruht zum Teil eben­ falls auf anti-entzündlicher, anti-inflammatorischer bzw. Radikalketten-hemmender Wirksamkeit.For the treatment of such inflammatory phenomena are number rich substances known as simple substances such as vitamins, un saturated fatty acids, short-chain fatty acids such as vinegar or Lactic acid, but also complex substances animal and of plant origin such as hormones (cortisone), collagen, Elastin and hyaluronic acid (Frese and steel, perfumery and Cosmetics 72. Jg. 9 (1991), 569-574). Also substances bacterial len origin are used as anti-inflammatory agents used as autolysates of Lactobacillus gasseri (Weirich-Schwaiger et al., Drug Research 45 (1995), 342-344), the bifidobacteria repair complex (EP-A-0 043 128, U.S. Patent 4,646,362) or cell wall polysaccharides Bifidobacteria (EP-A-0 201 332). The use of Bakte in the form of probiotics (Lactic Acid Bacteria, ed. Salmins, by Wright, New York, 1993) or for reforestation natural mucosal colonization (Hughes et al., Obstet. Gynecol. 75 (1990), 244-248) is partially even if anti-inflammatory, anti-inflammatory or Radical chain inhibiting activity.

Die Gewinnung derartiger Wirkstoffe (Cortison, Hyaluron­ säure, Collagen, Elastin, Zellwandbestandteile etc.) aus komplexem pflanzlichem, tierischem oder bakteriellem Aus­ gangsmaterial oder unter Verwendung komplizierter Züchtungs­ techniken (Züchtung von Bakterien in komplex zusammengesetz­ ten Nährmedien) ist praktisch ausnahmslos mit aufwendigen Extraktions- und Fraktionierungsverfahren verbunden, da der wirksame Bestandteil nur in gereinigter Form wirksam ist. Dies ist ein wesentlicher Nachteil. Derartiges Ausgangsmate­ rial kann potentiell bedenkliche Verunreinigungen unter­ schiedlichster Art enthalten, z. B. Endotoxine, Polyamine, Fremdeiweiß etc. Solche Verunreinigungen, aber auch Reste von Extraktionsmitteln können irritative Nebenwirkungen her­ vorrufen (Pharmainform. (Innsbruck) 10. Jg. (4) (1995), 1-4; Maes et al., Cosmetics und Toiletries 105 (1990), 43).The production of such active ingredients (cortisone, hyaluron acid, collagen, elastin, cell wall components, etc.) complex plant, animal or bacterial material or using complicated breeding Techniques (breeding of bacteria in complex composite nutrient media) is practically invariably expensive Combined extraction and fractionation, since the effective ingredient is effective only in purified form. This is a significant disadvantage. Such starting material rial can potentially cause harmful contamination contain the most diverse kind, z. B. endotoxins, polyamines, Foreign protein etc. Such impurities, but also leftovers Extractants can cause irritative side effects  (Pharm. form. (Innsbruck) 10th ed. (4) (1995), 1-4; Maes et al., Cosmetics and Toiletries 105 (1990), 43).

Besonders bei tierischem Ausgangsmaterial bestehen aufgrund besonderer Risiken (Zoonosen-Risiken (BAnz 164 (1991), 6120; Pharm. Ind. 53 (1991), 206) und Risiken der Verbreitung der spongioformen Encephalopathie (BAnz 40 (1994), 1851; BAnz, 96 (1994), 5500) strenge Auflagen für pharmazeutisch und kosmetisch verwendete Wirkstoffe. Die Extraktions- und Reinigungsverfahren unterliegen daher anerkannten Abreiche­ rungsverfahren für bestimmte Erreger und zusätzlichen Ein­ schränkungen, die eine Isolierung wirtschaftlich oft nicht sinnvoll erscheinen lassen.Especially with animal source material exist due special risks (zoonotic risks (BAnz 164 (1991), 6120; Pharm. Ind. 53 (1991), 206) and risks of dissemination of the spongiform encephalopathy (BAnz 40 (1994), 1851; BAnz, 96 (1994), 5500) strict requirements for pharmaceutical and cosmetically used active ingredients. The extraction and Cleaning procedures are therefore subject to approved waste for certain pathogens and additional inputs Restrictions that often do not provide isolation economically make sense.

Dies trifft auch auf die Gewinnung von Bakterienzellen aus komplexen Nährmedien zu, soweit diese Materialien tierische Herkunft aufweisen (Pepton, Leberextrakt, etc.).This also applies to the recovery of bacterial cells complex nutrient media too, as far as these materials are animal Origin (peptone, liver extract, etc.).

Diese Risiken, aber auch eine in letzter Zeit stärker wer­ dende Nachfrage nach neuen, möglichst "naturbelassenen", einfachen und toxikologisch unbedenklichen Wirkstoffen bzw. Produkten zur Verwendung im Arzneimittelbereich und im Kos­ metikbereich haben zu einer intensiven Forschung im Bereich der "naturbelassenen" Produkte geführt.These risks, but also a lately stronger a growing demand for new, as far as possible "natural" simple and toxicologically harmless active substances or Products for use in the pharmaceutical sector and Kos have to do intensive research in the field led the "natural" products.

Das Ziel ist die Verwendung von möglichst "naturbelassenen" und einfach zu gewinnenden Wirkstoffen unter Verwendung von Stoffen definierter Qualität. Bekannt ist die Verwendung von Fraktionen aus Pflanzenextrakten (Tragni et al., Pharm. Res. Comm. 20 Suppl. 5 (1988), 87-90), von Extraktauszügen aus Pflanzen, z. B. Kamille, Fenchel, etc., von Gesichtsmasken aus frisch geschnittenen Kartoffelschalen, Gurken etc. als altbekanntes Hausmittel zumeist zur Unterstützung der Haut­ funktionen, von Rotwein, Schwarzem Tee und Grünem Tee (Serafini et al., Lancet 344 (1994), 626) und von entrahmter Milch (Taylor, Richardson, J. Dairy Res. 63 (1980), 1783-1795) als Antioxidantien.The goal is to use as natural as possible and easy-to-use agents using Substances of defined quality. The use of is known Fractions from plant extracts (Tragni et al., Pharm. Res. Comm. 20 Suppl. 5 (1988), 87-90), extract extracts from Plants, e.g. Chamomile, fennel, etc., of facial masks from freshly cut potato peels, cucumbers etc. as well-known home remedy mostly to support the skin functions of red wine, black tea and green tea (Serafini et al., Lancet 344 (1994), 626) and skimmed Milk (Taylor, Richardson, J. Dairy Res. 63 (1980), 1783-1795) as antioxidants.

Die Verwendung von Milch als Ausgangsstoff für "naturbelas­ sene" Wirkstoffe ist noch kaum erschlossen, obwohl ihre Be­ standteile gut bekannt sind (Niederauer, Parfümerie und Kos­ metik 75. Jg. 10 (1994), 666-670; Harnett et al., ZFL 45. Jg. 78 (1994), 14-16). Bisher beschriebene Verwendungen be­ ziehen sich vor allem auf aus der Milch gewonnene Bestand­ teile, wie auf aufbereitete Fraktionen des Caseins, das Was­ serbindungs-, Gel- und Schaumbildungsvermögen und Emulgator­ eigenschaften zeigt, auf Milch-Glykoproteine als neuartige Schutzstoffe als Alternative zu Hyaluronsäure oder zur Haut­ regeneration und auf Lactoperoxidase und Lactoferrin als anti-entzündlich wirksame Stoffe.The use of milk as a raw material for "naturbelas sene "active ingredients is still barely developed, although their Be  parts are well known (Niederauer, perfumery and Kos 75, Vol. 10 (1994), 666-670; Harnett et al., ZFL 45. Jg. 78 (1994), 14-16). Previous uses described be especially draw on stock obtained from the milk parts, such as on processed fractions of casein, the What Serbindungs-, gel and foaming power and emulsifier features on milk glycoproteins as novel Protective agents as an alternative to hyaluronic acid or to the skin regeneration and on lactoperoxidase and lactoferrin as anti-inflammatory substances.

Als "naturbelassenes" Milchprodukt kommen durch Bakterien gesäuerte Milchprodukte therapeutisch zur Anwendung. Ge­ wöhnliches Joghurt und ähnliche Sauermilch-Produkte werden therapeutisch in der gynäkologischen Praxis zur Wiederher­ stellung eines normal sauren Scheidenmilieus durch Milchsäu­ rebildner angewendet (Berger, Karovic, Arch. Gynäk. 195 (1961), 46-49; Gunston, Fairbrother, S. Afr. Med. J. 49 (1975), 675-676; Fredricsson et al., Lancet (1987), 276; Hughes et al., Obstet. Gynecol. 75 (1990), 244-248), so z. B. Acidophilus-Joghurt, das auch bei schwangeren Frauen ohne Nebenwirkungen und Komplikationen verwendet wurde (Neri et al., Acta Obstet. Gynecol. Scand. 72 (1993), 17-19). Anti­ oxidative Wirkungen von entrahmter Milch gegenüber ungesät­ tigten Fettsäuren, z. B. Linoleat (Taylor, Richardson, J. Dairy Sci. 63 (1980), 1783-1795) und anti-mutagene in vitro- Wirkungen von Milch und von durch Bifidobacterium oder Lactobacillus gesäuerter Milch (Pool-Zobel et al., Nutr. Cancer Res. 20 (1993), 261-270; Cassand et al., J. Dairy Res. 61 (1994), 545-552; Morishita, Shiromizu, Bifidobacteria Microflora 9 (1990), 135-138) sind beschrie­ ben. Dagegen sind anti-inflammatorische Wirkungen bisher we­ der bei Milch noch bei Milchprodukten beschrieben.As a "natural" dairy product come by bacteria acidified milk products therapeutically for use. Ge ordinary yogurt and similar sour milk products Therapeutic in gynecological practice to restore Position of a normal acid vaginal milieu through milk rebildner applied (Berger, Karovic, Arch. Gynäk. 195 (1961), 46-49; Gunston, Fairbrother, S. Afr. Med. J. 49 (1975), 675-676; Fredricsson et al., Lancet (1987), 276; Hughes et al., Obstet. Gynecol. 75 (1990), 244-248), such. B. Acidophilus yogurt, even in pregnant women without Side effects and complications were used (Neri et al., Acta Obstet. Gynecol. Scand. 72 (1993), 17-19). anti oxidative effects of skimmed milk versus unsat saturated fatty acids, eg. B. Linoleate (Taylor, Richardson, J. Dairy Sci. 63 (1980), 1783-1795) and anti-mutagenic in vitro Effects of Milk and Bifidobacterium or Lactobacillus acidified milk (Pool Zobel et al., Nutr. Cancer Res. 20 (1993), 261-270; Cassand et al., J. Dairy Res. 61 (1994), 545-552; Morishita, Shiromizu, Bifidobacteria Microflora 9 (1990), 135-138) are described ben. In contrast, anti-inflammatory effects so far we which in milk is still described for dairy products.

Die Verarbeitung von Milch in der Pharma- und Kosmetikindu­ strie ist zum Teil allerdings mit erheblichen Problemen be­ haftet. Solche Probleme beruhen unter anderem auf der Empfindlichkeit von Milch gegenüber Hitze (Bulletin of the Intern. Dairy Federation No. 238/1989, Heat-induced changes in milk, Hsg. P. F. Fox). In der Milch verarbeitenden Indu­ strie stellt die sehr schonend durchgeführte Hitzeeinwirkung kein Problem dar. Bei weiterer Verarbeitung der Milch im Pharma- oder Kosmetik-Bereich führen jedoch erneute Hitze-Be­ handlungen zu unansehnlich braunen Verfärbungen (Maillard-Re­ aktionen) und unangenehm riechenden Abbauprodukten (Ledl et al., Z. Lebensm. Unters. Forsch. 182 (1986), 19-24; Freimuth, Ludwig, Nahrung 26 (1982), 97-102; Ludwig, Nahrung 23 (1979), 531-536).The processing of milk in the pharmaceutical and Kosmetikindu However, strie is partly with considerable problems be liable. Such problems are based inter alia on the  Sensitivity of milk to heat (Bulletin of the Intern. Dairy Federation No. 238/1989, Heat-induced changes in milk, Hsg. P.F. Fox). In the milk processing indu Strie provides the very gentle heat treatment no problem. With further processing of the milk in the Pharmaceutical or cosmetics sector, however, lead to renewed heat-Be to unsightly brown discolorations (Maillard-Re actions) and unpleasant-smelling degradation products (Ledl et al., Z. Lebensm. Unters. Forsch. 182 (1986), 19-24; Freimuth, Ludwig, Food 26 (1982), 97-102; Ludwig, food 23 (1979), 531-536).

Des weiteren können bei Verwendung von durch Bakterien ge­ säuerten Milchprodukten bakterielle Aktivitäten zu optisch unansehnlich geronnener, inhomogener und schlecht riechender Milch führen, z. B. bei zu saurem Joghurt zu Abscheidung von Molke und geronnenem Eiweiß oder zur Zerstörung der milch­ weißen kolloidalen Suspension, was der Milch ein glasig­ flockiges Aussehen verleiht ("Peptonisierung"). Weitere un­ erwünschte Aktivitäten von Bakterien sind Proteolyse, Lipo­ lyse oder Aminosäure-Dissimilation, die ebenfalls eine schlechte Geruchsbildung aufgrund der Bildung von Aminen, Ammoniak, Sulfhydrylverbindungen und Aldehyden mit sich bringen. Die Qualität derartiger Produkt ist auch toxikolo­ gisch bedenklich. Ein derartig verändertes Produkt eignet sich auch nicht für eine Weiterverarbeitung zu einem Wirk­ stoff für die kosmetische oder pharmazeutische Anwendung.Furthermore ge when using bacteria acidified milk products to bacterial activities too optically unsightly clotted, inhomogeneous and bad-smelling Lead milk, z. B. in too sour yogurt to deposition of Whey and curdled egg whites or destroying the milk white colloidal suspension, giving the milk a glassy gives a flaky appearance ("peptonization"). Further un desirable activities of bacteria are proteolysis, lipo lysis or amino acid dissimilation, which is also a bad odor due to the formation of amines, Ammonia, sulfhydryl compounds and aldehydes with it bring. The quality of such product is also toxicological worried. Such a modified product is suitable not synonymous for further processing into a knit fabric for cosmetic or pharmaceutical use.

Die vorstehend beschriebenen Nachteile können bei Verwendung mild gesäuerter Milch/Bakterienprodukte vermieden werden. Allerdings sind bei all diesen Milch/Bakterienprodukten die wirksamen Bestandteile in den Zellen eingeschlossen. Lyse der Zellen zur Verbesserung der Wirksamkeit des bakterien­ haltigen Produkts, z. B. durch mechanische Behandlung (EP-A- 0 043 128), durch proteolytische Behandlung (EP-A-0 201 332) oder durch Lysozym-Einwirkung auf die Zellwand (Chassy, Giuffrida, Appl. Environm. Microbiol. 39 (1980), 153-158; US-Patent 3,929,994) ist erforderlich. Zum Erhalt einer effizienten Lyse werden dabei vor der Lyse die Zellen vom Medium abgetrennt. Zuzätzlich werden im Anschluß daran Extraktions- und Reinigungsverfahren angewendet, so daß ein natürlich aussehendes "naturbelassenes" Produkt im eigent­ lichen Sinne nicht mehr vorliegt.The above-described disadvantages can be found in use mildly acidified milk / bacteria products are avoided. However, in all these milk / bacteria products the effective ingredients included in the cells. Lyse the cells to improve the effectiveness of the bacteria containing product, eg. B. by mechanical treatment (EP-A 0 043 128), by proteolytic treatment (EP-A-0 201 332) or by lysozyme action on the cell wall (Chassy, Giuffrida, Appl. Environm. Microbiol. 39 (1980), 153-158; U.S. Patent 3,929,994) is required. To receive a Efficient lysis thereby become the cells of the  Medium separated. In addition, following that Extraction and cleaning method applied so that a natural-looking "natural" product in the real meaning is no longer present.

Besonders vorteilhaft für ein "naturbelassen" hergestelltes Produkt wäre deshalb die Anwendung der zelleigenen Autolyse, also die Lyse durch bakterieneigene Enzymsysteme, sog. Auto­ lysine (Shockman, Barrett, Ann. Rev. Microbiol. 37 (1983), 501-527). Allerdings sind solche Verfahren noch zu wenig be­ kannt. Ungünstig auf die Aktivierung der Autolyse wirken sich hohe Kohlenhydratkonzentrationen aus (Dirar und Collins, J. Gen. Microbiol. 73 (1972), 233-238), und Lactose hemmt die Autolyse (Moustafa et Collins, J. Bac. 95 (1968), 592-602). Somit ist die hohe Lactose-Konzentration in Milch ein natürlicher Hemmfaktor, der die Anwendung der zelleige­ nen Autolyse verhindert. Auch die Verwendung von Lysozym er­ weist sich als problematisch, da in der Milch reichlich vor­ handene N-Acetyl-glucosamin-haltige Glycoproteine die Akti­ vität des Lysozyms hemmen (Chipman et al., J. Biol. Chem. 242 (1967), 4388-4394; Nicolai et al. Hoppe-Seyler′s Z. Physiol. Chem. 362 (1981), 153-162).Particularly advantageous for a "natural" produced Product would therefore be the application of cell autolysis, so the lysis of bacteria's own enzyme systems, so-called. Auto lysines (Shockman, Barrett, Ann. Rev. Microbiol. 37 (1983), 501-527). However, such methods are still too little known. Unfavorable act on the activation of autolysis high carbohydrate concentrations (Dirar and Collins, J.Gen. Microbiol. 73 (1972), 233-238), and lactose inhibits autolysis (Moustafa et Collins, J. Bac. 95 (1968), 592-602). Thus, the high lactose concentration is in milk a natural inhibitor of the application of the cell prevents autolysis. Also, the use of lysozyme he turns out to be problematic, as abundant in the milk existing N-acetyl-glucosamine-containing glycoproteins Akti inhibit the activity of the lysozyme (Chipman et al., J. Biol. Chem. 242 (1967), 4388-4394; Nicolai et al. Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. 362 (1981), 153-162).

So ist z. B. bei der Lysozym-empfindlichen Bakterienart Lactococcus lactis sowohl die zelleigene Autolyse als auch die Lysozym-abhängige Lyse in Milch stark gehemmt. Das ist nicht überraschend, da das an Milch als bevorzugten Standort angepaßte Bakterium einer Lyse in Milch zu widerstehen "ge­ lernt" hat. Einer Lyse der Zellwand von gram-positiven Bak­ terien in Milch stellen sich somit große Hindernisse in den Weg. So z. B. in the lysozyme-sensitive bacterial species Lactococcus lactis both cell autolysis and the lysozyme-dependent lysis in milk strongly inhibited. This is Not surprisingly, because of milk as the preferred location adapted bacterium to resist lysis in milk "ge learns a lysis of the cell wall of gram-positive bak Milk is a major obstacle to milk production Path.  

EP-A2-0 432 490 beschreibt zwar ein Bakterienlysat, das durch die Kultivierung von Lactobacillus bulgarius in Kuh­ milch und durch Zugabe von Lysozym zur Bakterienkultur her­ gestellt wird, allerdings wird keine Hemmung der Mureinbio­ synthese nach Erreichen der log-Phase durchgeführt. DE-OS 22 55 744 offenbart ein immunisierendes und die Darmflora wie­ derherstellendes Arzneimittel, das aus zwei Komponenten be­ steht. Dabei stellt die zweite Komponente eine Lactobacil­ lus-acidophilus-Kultur dar, die auf einem Milch-Hefeextrakt-Me­ dium erhalten wird. Es erfolgt jedoch keine Lyse der Bak­ terien durch eine Mureinhydrolyse. Beide Dokumente geben somit keinen Aufschluß darüber, wie eine effiziente Lyse der Zellwand von Bakterien, wie beispielsweise Lactobacillus, in einem Milchmedium erreicht werden kann.Although EP-A2-0 432 490 describes a bacterial lysate, the by cultivating Lactobacillus bulgarius in cow milk and by adding lysozyme to the bacterial culture However, there is no inhibition of Mureinbio Synthesis performed after reaching the log phase. DE-OS 22nd 55,744 discloses an immunizing and intestinal flora such as the manufacturing drug consisting of two components stands. The second component is a lactobacil lus acidophilus culture on a milk-yeast extract-Me dium is obtained. However, there is no lysis of Bak Mureine hydrolysis. Both documents give Thus, no information about how efficient lysis of Cell wall of bacteria, such as Lactobacillus, in a milk medium can be achieved.

Somit liegt der Erfindung die Aufgabe zugrunde, ein neuarti­ ges Milch/Bakterienlysat bereitzustellen, das ein attrakti­ ves äußeres Erscheinungsbild aufweist und qualitativ als Be­ standteil für Kosmetika und Arzneimittel geeignet ist. Des weiteren liegt der Erfindung die Aufgabe zugrunde, ein Milch/Bakterienlysat bereitzustellen, das als anti-inflamma­ torischer Wirkstoff in Kosmetika und Arzneimitteln geeignet ist.Thus, the invention has the object, a neuarti to provide milk / bacteria lysate that attracts Has outer appearance and qualitatively as Be Part is suitable for cosmetics and pharmaceuticals. Of Another object of the invention is to provide a To provide milk / bacteria lysate that acts as an anti-inflamma  toric agent suitable in cosmetics and medicines is.

Die Lösung dieser Aufgabe wird erzielt durch die Bereitstel­ lung der in den Patentansprüchen gekennzeichneten Ausfüh­ rungsformen.The solution to this problem is achieved by the Bereitstel Development of the characterized in the claims Ausfüh insurance forms.

Die Erfindung betrifft also ein Milch/Bakterienlysat, das erhältlich ist durchThe invention thus relates to a milk / bacteria lysate, the is available through

  • (a) Ansetzen einer Kultur von Bakterien in einem Milch-Hefe­ extrakt-Medium;(a) preparing a culture of bacteria in a milk yeast extract medium;
  • (b) Versetzen des Mediums mit einem Hemmstoff der Mureinbio­ synthese nach Erreichen der log-Phase;(b) Placing the medium with an inhibitor of Mureinbio synthesis after reaching the log phase;
  • (c) Zugabe einer Mureinhydrolase zur Lyse der in der Kultur enthaltenen Bakterien; und(c) adding a murein hydrolase for lysis of the culture contained bacteria; and
  • (d) Pasteurisieren des so erhaltenen Milch/Bakterienlysates.(d) pasteurizing the milk / bacteria lysate thus obtained.

Erfindungsgemäß lassen sich für die Herstellung dieses Milch/Bakterienlysates gram-positive Milchsäure-bildende Bakterien verwenden, die sich unter den erfindungsgemäßen Kulturbedingungen in einem Medium auf Milchbasis gut vermeh­ ren lassen, ohne die Milch in ihrem äußeren Erscheinungsbild allzu deutlich zu verändern, umfassend Milchsäurebakterien, Kokken oder Stäbchen mit einem DNA-Guanosin-Cytosin-Gehalt zwischen 30 und 50 Mol-%, mit den Gattungen Aerococcus, Carnobacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Staphylococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus und Weissella. In allen genann­ ten Gattungen sind geeignete Kandidaten mit geringem Risiko­ potential enthalten.According to the invention can be for the production of this Milk / bacterial lysates gram-positive lactic acid-forming Use bacteria that are among the inventive Culture conditions well in a milk-based medium without the milk in its external appearance to change too much, including lactic acid bacteria, Cocci or rods with a DNA guanosine cytosine content between 30 and 50 mol%, with the genera Aerococcus, Carnobacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Pediococcus, Staphylococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus and Weissella. In all called genera are suitable candidates with low risk potential included.

Als Milch-Hefeextrakt-Medium wird erfindungsgemäß vorzugs­ weise ein in hoher Schicht schonend zubereitetes und sterilisiertes Lösungsgemisch von 10% (G/V) Magermilch­ pulver und 0,5% (G/V) Hefeextraktpulver in destilliertem Wasser verwendet.As a milk-yeast extract medium is preferred according to the invention wise a gently prepared in a high layer and sterilized mixed solution of 10% (w / v) skimmed milk powder and 0.5% (w / v) yeast extract powder in distilled Water used.

Üblicherweise wird die log-Phase in Abhängigkeit von der Bakterienart, deren Zellteilungsgeschwindigkeit und der Tem­ peratur zu unterschiedlichen Zeitpunkten erreicht, bei er­ findungsgemäßer Verwendung von Lactococcus lactis ist dies nach einer Züchtungsdauer von 3 Stunden bei 30°C der Fall. Als erfindungsgemäß verwendbare Hemmstoffe der Mureinbiosyn­ these werden vorzugsweise Glycin und Aminosäuren der D-Kon­ figuration, z. B. D-Serin, D-Threonin, D-Alanin und D-Methionin, aber auch Aminosäuren der L-Konfiguration in Ver­ bindung mit einer Racemase verwendet. Diese Hemmstoffe hem­ men in hohen Konzentrationen durch Wirkung auf die D-Ala-D- Ala-Ligase die Quervernetzung des Mureins. Sie werden in Ab­ hängigkeit von der Bakterienspezies und dem Bakterienstamm in einer Konzentration von 0,1 bis 10 Gew.-% verwendet. Als Mureinhydrolasen sind erfindungsgemäß N-Acetylmuramida­ sen, umfassend Lysozym und Mutanolysin, N-Acetylmuramyl-L- Alanin-Amidasen und N-Acetylglucosaminidasen verwendbar. Sie werden je nach Spezifität in einer Konzentration von 10³ bis 10⁹ Enzymeinheiten pro Gramm Bakterienzellen verwendet. Das Pasteurisieren des erfindungsgemäß hergestellten Milch/Bakterienlysates erfolgt in üblicher Weise, beispiels­ weise durch Hitzebehandlung der Kultur bei mindestens 70°C für 30 Minuten.Usually, the log phase is dependent on the Bacterial species, their cell division rate and the Tem reached at different times, at he  This is the use according to the invention of Lactococcus lactis after a breeding period of 3 hours at 30 ° C the case. As Mureinbiosyn inhibitors usable according to the invention These are preferably glycine and amino acids of D-Kon figuration, z. D-serine, D-threonine, D-alanine and D-methionine, but also L-configuration amino acids in Ver used with a racemase. These inhibitors hem in high concentrations by acting on the D-Ala-D Ala ligase, the cross-linking of murein. They will be in Ab dependence on bacterial species and bacterial strain used in a concentration of 0.1 to 10 wt .-%. Murein hydrolases according to the invention are N-acetylmuramides containing lysozyme and mutanolysin, N-acetylmuramyl-L- Alanine amidases and N-acetylglucosaminidases. you depending on specificity in a concentration of 10³ to 10⁹ enzyme units per gram of bacterial cells used. The pasteurization of the invention produced Milk / Bacteria lysates in the usual way, for example by heat treatment of the culture at least 70 ° C. for 30 minutes.

In einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Milch/Bakterienlysates gehören die verwendeten Bakterien zur Gattung Lactococcus. Besonders bevorzugt wird der Stamm Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605. Dieser Stamm wurde gemäß dem Budapester Vertrag am 25. März 1996 bei der DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, Mascheroder Weg 1b, D-38124 Braunschweig, unter der Hinterlegungs-Nr. DSM 10605, hinterlegt. Die toxikologische Unbedenklichkeit dieses Stammes stützt sich auf die jahr­ zehntelange Erfahrung in der nutritiven Anwendung von Lactococcen als mesophile Starterkultur in der Sauermilchfa­ brikation und auf die organoleptisch angenehmen Eigenschaf­ ten des Milch/Bakterienlysates. Bedenkliche Abbau- oder Fäulnisprodukte konnten nicht festgestellt werden. Hinzu kommt, daß die Bakterien in nicht lebensfähiger Form ange­ wendet werden und toxische Folgereaktionen aufgrund physiologischer Aktivitäten nicht auftreten. In a preferred embodiment of the invention Milk / Bacteria lysates are the bacteria used Genus Lactococcus. Particularly preferred is the strain Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605. This strain was under the Budapest Treaty on 25 March 1996 at the DSMZ-German Collection of Microorganisms and Cell Cultures GmbH, Mascheroder Weg 1b, D-38124 Braunschweig, under the Deposit no. DSM 10605, deposited. The toxicological Safety of this strain is based on the year Tenth experience in nutritive use of Lactococci as Mesophilic Starter Culture in Sour Milkfa brikation and on the organoleptisch pleasant property of the milk / bacteria lysate. Dangerous mining or Decay products could not be detected. in addition comes that the bacteria in non-viable form are applied and toxic follow-up reactions due physiological activities do not occur.  

Ferner ist es eine bevorzugte Ausführung des erfindungsge­ mäßen Milch/Bakterienlysates, bei seiner Herstellung als Hemmstoff der Mureinbiosynthese Glycin zu verwenden. Es wird in einer Konzentration von 0,1 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise 1 Gew.-% verwendet.Furthermore, it is a preferred embodiment of the erfindungsge milk / bacteria lysates, in its production as Inhibitor of murein biosynthesis to use glycine. It will in a concentration of 0.1 to 10% by weight, preferably 1 % By weight used.

Ferner wird es erfindungsgemäß bevorzugt, als Mureinhydro­ lase das Enzym Lysozym in einer Konzentration von 10⁶ bis 10⁸ Einheiten pro Liter Kultur zu verwenden.Furthermore, it is preferred according to the invention, as Mureinhydro lase the enzyme lysozyme in a concentration of 10⁶ to 10⁸ units per liter of culture to use.

In einer anderen bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird die Vollständigkeit der Lyse der in der Kultur enthal­ tenen Bakterien vor der Pasteurisierung gemäß Schritt (d) geprüft. Üblicherweise wird dies durchgeführt durch Bestim­ mung der Lebendkeimzahl (KBE/ml) durch herkömmliche Verfah­ ren vor und nach der Lyse der Bakterien. Die Qualität der Lyse kann ferner anhand der Zellsedimentbildung durch Zen­ trifugation eines Aliquots der Kultur bei maximal 5000 × g, jeweils vor und nach der Lyse bestimmt werden, wobei sich nach der Lyse kein Sediment mehr bildet.In another preferred embodiment of the invention the completeness of the lysis of the in culture bacteria before pasteurisation according to step (d) checked. This is usually done by Bestim the number of live germs (CFU / ml) by conventional methods before and after the lysis of the bacteria. The quality of Lysis may also be determined by cell sedimentation by Zen trifugation of an aliquot of the culture at a maximum of 5000 × g, are determined before and after lysis, respectively after lysis no sediment forms.

In einer weiteren erfindungsgemäß bevorzugten Ausführungs­ form wird der pH-Wert des Mediums während der gesamten Kul­ tur bei einem Wert zwischen 6 und 7 gehalten. Gegebenenfalls erfolgt eine Neutralisierung durch Zugabe üblicher alkali­ scher Zusätze, wie 1 N Natronlauge, Kalilauge, Binatriumcar­ bonatlösung oder Lösungen organischer Puffersubstanzen, etwa Trishydroxymethylaminomethan-Hydrochloridpuffer. Die verwen­ deten Mengen müssen zur Vermeidung der Maillard-Reaktion und des Präzipitierens des Milcheiweiß und der Bakterien gering gehalten werden. Sedimentation von partikulärem Material und zunehmende Ionen-Konzentration sind für die weitere Verar­ beitung problematisch.In a further preferred embodiment according to the invention form the pH of the medium throughout the Kul held at a value between 6 and 7. Possibly Neutralization by addition of conventional alkali shear additives, such as 1 N sodium hydroxide solution, potassium hydroxide solution, disodium car- carbonate solution or solutions of organic buffer substances, for example Trishydroxymethylaminomethane hydrochloride buffer. The verwen Quantities must be avoided to avoid the Maillard reaction and precipitation of milk protein and bacteria low being held. Sedimentation of particulate matter and Increasing ion concentration are for the further verar problematic.

In einer weiteren Ausführungsform betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung der vorstehend erläuterten Milch/Bakterienlysate. Dieses Herstellungsverfahren weist die vorstehend erläuterten Merkmale auf.In a further embodiment, the invention relates to a Process for the preparation of the above-explained  Milk / bacterial lysates. This manufacturing method has the features explained above.

Weiterhin betrifft die Erfindung Kosmetika, enthaltend ein erfindungsgemäßes Milch/Bakterienlysat. Typischerweise han­ delt es sich bei diesen Kosmetika um Produkte, die das Milch/Bakterienlysat entweder als Salbengrundlage oder Lip­ penstiftmasse oder in flüssiger Suspension enthalten. Die Anwendung erfolgt durch Auftragen auf die Haut und dient allgemein der Pflege der Haut nach einem Sonnenbad oder nach täglicher Lichteinwirkung, dem Schutz vor entzündlichen Re­ aktionen der Lippen mit Begünstigung einer viralen Herpes-Ent­ wicklung und der Anwendung auf fettender Kopfhaut mit Neigung zur Entwicklung von Akne oder dermatologischen Ekze­ men. Die erfindungsgemäß einzusetzende Menge an Milch/Bakterienlysat in den Kosmetika hängt von der Formu­ lierung und dem Verwendungszweck des Kosmetikums ab.Furthermore, the invention relates to cosmetics containing a Milk / bacterial lysate according to the invention. Typically han These cosmetics are products containing the Milk / bacterial lysate either as ointment base or lip pen stock or in liquid suspension. The Application is by applying to the skin and serving generally the care of the skin after sunbathing or after daily light exposure, protection against inflammatory re actions of the lips with the benefit of a viral herpes Ent development and application on oily scalp Tendency to develop acne or dermatological eczema men. The amount to be used according to the invention Milk / Bacteria lysate in cosmetics depends on the formu lation and the intended use of the cosmetic.

In einer weiteren Ausführungsform betrifft die Erfindung Arzneimittel, die ein erfindungsgemäßes Milch/Bakterienlysat enthalten. Bevorzugte Ausführungsformen solcher Arzneimittel sind topisch anzuwendende Sonnenschutzmittel zur Pflege von Haut und Lippen nach Sonneneinstrahlung, anhaltender UV-Ein­ wirkung oder allgemein Lichteinwirkung; Mittel zur Regenera­ tion der Haut nach Sonnenbrand und zur prophylaktischen The­ rapie von durch Strahlen bedingter Degeneration der Haut; Mittel zur Vorbeugung von malignen Veränderungen, zur Be­ schleunigung des Epidermiswachstums nach Wundbehandlung, insbesondere bei Brandwunden.In a further embodiment, the invention relates Medicaments containing a milk / bacterial lysate according to the invention contain. Preferred embodiments of such drugs are topically applied sunscreens for the care of Skin and lips after sun exposure, lasting UV-Ein effect or general exposure to light; Means for Regenera tion of the skin after sunburn and prophylactic The treatment of radiation-induced degeneration of the skin; Means for the prevention of malignant changes, Be acceleration of epidermal growth after wound treatment, especially with burns.

Ferner eingeschlossen sind Schutzmittel zum Auftragen auf Schleimhäute (Mund, Rachen, Vagina) zur Behandlung von auf­ gesprungenen Lippen, erythematischer, juckender Stellen auf der Haut, im Intim- oder Afterbereich und zur Nachbehandlung von Gewebeschädigungen unterschiedlichster Formen. Die An­ wendung erfolgt je nach den Erfordernissen äußerlich durch Auftragen auf die Haut oder durch orale Verabreichung in Form von Ölemulsionen in Weichgelatinekapseln, als Supposi­ torien auf Fettgrundlage oder in gefriergetrockneter Trockenmilch-ähnlicher Art, z. B. dosiert in Hartgelatine-Steck­ kapseln, Lutschtabletten oder in Kaugummimasse. Die er­ findungsgemäß einzusetzende Menge an Milch/Bakterienlysat in den Arzneimitteln hängt von der Formulierung und dem Verwen­ dungszweck des Arzneimittels ab.Also included are protective agents for application to Mucous membranes (mouth, throat, vagina) for the treatment of cracked lips, erythematous, itching spots the skin, in the intimate or anal area and for aftercare tissue damage of various shapes. The An externally, depending on the requirements Apply to the skin or by oral administration in Form of oil emulsions in soft gelatin capsules, as supposi  on a fat basis or in freeze-dried Dry milk-like type, z. B. dosed in hard gelatin plug capsules, lozenges or in chewing gum mass. He according to the invention to be used amount of milk / bacteria lysate in The drugs depend on the formulation and the use intended purpose of the medicinal product.

Vorzugsweise werden die erfindungsgemäßen Milch/Bakterien­ lysate in den erfindungsgemäßen Kosmetika bzw. Arzneimitteln als anti-inflammatorische Zusätze verwendet.Preferably, the milk / bacteria of the invention lysates in the cosmetics or medicaments according to the invention used as anti-inflammatory additives.

Die Anwendung eines erfindungsgemäß hergestellten Milch/Bakterienlysates auf der Haut bewirkt einen Schutz ge­ gen inflammatorische Reizzustände- und -symptome der Haut oder Schleimhaut, wie Erythem, Ödem oder Juckreiz. Der Wirk­ stoff kann darüber hinaus auch prophylaktisch angewendet werden.The application of a product according to the invention Milk / Bacteria lysates on the skin causes a protection ge inflammatory irritation symptoms and symptoms of the skin or mucous membrane, such as erythema, edema or itching. The knit In addition, substance can also be used prophylactically become.

Der Kosmetik-Wirkstoff bewirkt durch den inflammatorischen Schutz eine Stärkung der Epidermis-Zellen und eine verbes­ serte DNA-Reparaturaktivität, eine Kräftigung gegenüber be­ schleunigter Hautalterung und teratogenen Hautveränderungen. Der pharmakologisch angewendete Wirkstoff bewirkt eine ver­ besserte Heilung der inflammatorisch geschwächten oder ge­ schädigten Haut.The cosmetic ingredient causes by the inflammatory Protecting a strengthening of the epidermis cells and a verbes DNA repair activity, an asset to be accelerated skin aging and teratogenic skin changes. The pharmacologically applied active ingredient causes a ver improved healing of the inflammatory weakened or ge damaged skin.

Zur Testung der anti-inflammatorischen Wirksamkeit bedient man sich des Endotoxin-Tests als exogenem Stimulus an Makrophagen-Zellkulturen oder direkt auf der Haut unter Verwendung von UV-Licht, Allergenen oder Reizstoffen chemischer, pflanzlicher oder bakterieller Herkunft.Served for testing anti-inflammatory efficacy consider the endotoxin test as an exogenous stimulus Macrophage cell cultures or directly on the skin below Use of UV light, allergens or irritants chemical, plant or bacterial origin.

Im Makrophagentest wird die Ausschüttung pro-inflammatori­ scher Substanzen (endogene Mediatoren, wie Zytokine, Leuko­ triene, Sauerstoffradikale, etc.) gemessen. Es wird die Hemmwirkung des Wirkstoffs Milch/Bakterienlysat gegen Milch als Kontrolle gemessen.In the macrophage test, the distribution pro-inflammatori substances (endogenous mediators such as cytokines, Leuko triene, oxygen radicals, etc.). It will be the Inhibitory effect of the active ingredient milk / bacterial lysate against milk measured as a control.

Die Wirksamkeitstests auf der Haut werden in vitro auf der Mäusehaut haarloser Mäuse durchgeführt. Es wird die Dermis von frisch getöteten Mäusen abpräpariert und in Gewebekultur bei 37°C inkubiert. Von der Dermis wird die Epidermis abge­ trennt und einem Test auf Bildung von wasserunlöslichem Formazan aus löslichem Methyltetrazoliumsalz als Maß der Vi­ talität unterworfen (Kietzmann et al., Naunyn Schmiedeberger′s Arch. Pharmacol. (Suppl.) R108 (1994), 349). Durch unterschiedlich lange UV-Bestrahlung wird eine kinetisch direkt korrelierte Schwächung der Aktivität gemes­ sen. Die Wirksamkeit des Milch/Bakterienlysates wird im Ver­ gleich zu Milch als Kontrolle gemessen.The efficacy tests on the skin are performed in vitro at the Mouse skin hairless mice performed. It will be the dermis of freshly killed mice and tissue culture incubated at 37 ° C. From the dermis the epidermis is abge  separates and a test for formation of water-insoluble Formazan from soluble methyltetrazolium salt as a measure of Vi tality (Kietzmann et al., Naunyn Schmiedeberger's Arch. Pharmacol. (Suppl.) R108 (1994), 349). By differently long UV irradiation becomes a kinetically directly correlated weakening of activity gemes sen. The effectiveness of the milk / bacteria lysate is in Ver equal to milk as a control.

Ein besonderer Vorteil der erfindungsgemäßen Milch/Bak­ terienlysate besteht darin, daß sie sich unproblematisch weiterverarbeiten lassen, beispielsweise zu den erfindungs­ gemäßen Kosmetika und Arzneimitteln, weil sie praktisch partikelfrei und pH-neutral sind und sich äußerlich kaum von Magermilch unterscheiden. Das gesamte Herstellungsverfahren läßt sich bis zur fertigen Darreichungsform vollautomatisch und computergesteuert durchführen.A particular advantage of the milk / Bak according to the invention terienlysate is that they are unproblematic can be further processed, for example, to the invention appropriate cosmetics and medicines because they are practical particle-free and pH-neutral and are hardly externally from Skim milk differ. The entire manufacturing process can be fully automatic up to the finished dosage form and computer-controlled.

Die Beispiele erläutern die Erfindung.The examples illustrate the invention.

Beispiel 1example 1 Herstellung eines Milch/BakterienlysatesPreparation of a milk / bacteria lysate a) Herstellung des Milchkulturmediumsa) Preparation of the milk culture medium

Zusammensetzung (% G/V): Magermilchpulver (Reformhaus), ca. 10%; Hefe-Extrakt-Puder (Yeast Extract USP), 0,5%; dest. Wasser, ad 100% (G/V), pH-Wert: ca. 6.5
Milchpulver und Hefe-Extrakt (z. B. voll löslicher Hefe- Extrakt-Puder Oxoid L 21) werden jeweils als getrennte, wäßrige Lösungen, 10%ig bzw. 20%ig, unter leichtem Er­ wärmen hergestellt und autoklaviert (15 min/121°C). Von den auf ca. 30°C abgekühlten Lösungen werden 1000 ml bzw. 25 ml in einem Erlenmeyer-Glaskolben (2 Liter) aseptisch zu einer Lösung vereinigt.
Composition (% w / v): Skimmed milk powder (health food store), approx. 10%; Yeast extract powder (Yeast Extract USP), 0.5%; least. Water, ad 100% (w / v), pH: ca. 6.5
Milk powder and yeast extract (eg, fully soluble yeast extract powder Oxoid L 21) are each prepared as separate aqueous solutions, 10% and 20% strength, with gentle warming and autoclaved (15 min / 121 ° C). Of the cooled to about 30 ° C solutions 1000 ml or 25 ml are combined in an Erlenmeyer flask (2 liters) aseptically to a solution.

b) Kulturbedingungenb) culture conditions

Kolonien einer Reinkultur von Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605 werden zur Herstellung einer Vorkultur in 10 ml des Milchkulturmediums bei 30°C über Nacht bis zur frühstationären Wachstumsphase inkubiert (pH ca. 4,5; max. 5 g/l L-Milchsäure; ca. 1 × 10⁹ KBE/ml). 1 ml dieser Vorkultur wird dann zur Herstellung der Hauptkultur in ca. 1000 ml Milchkulturmedium überimpft.Colonies of a pure culture of Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605 are used to prepare a preculture in 10 ml of the milk culture medium at 30 ° C overnight incubated to early stationary growth phase (pH ca. 4.5; Max. 5 g / L L-lactic acid; about 1 × 10⁹ cfu / ml). 1 ml This preculture is then used to produce the Main culture in about 1000 ml of milk culture medium inoculated.

Die Hauptkultur wird 3 Stunden bei 30°C unter gelegent­ licher leichter Schwenkbewegung inkubiert; der pH-Wert liegt danach bei 6,35, die Keimzahl beträgt ca. 3 bis 4 × 10⁶ KBE/ml. Die gebildete Milchsäure liegt bei 1 g/l.The main culture is kept at 30 ° C for 3 hours a slight pivoting movement is incubated; the pH is then at 6.35, the germ count is about 3 to 4 × 10⁶ cfu / ml. The formed lactic acid is 1 g / l.

c) Lysec) lysis

100 ml 10%ige Glycinlösung werden aseptisch der Haupt­ kultur zugesetzt. Nach 20minütiger Einwirkung bei 30°C werden 50 ml 1%ige Lysozym-Lösung (Lysozym Serva 28262 mit einer spezifischen Aktivität von 146500 U/mg) zuge­ setzt, gut vermischt und das Kulturmedium 2 Stunden bei gelegentlicher Schwenkbewegung inkubiert. Dann wird die Lebendkeimzahl gemessen und die Reinheit und Identität koloniemorphologisch nach Ausstrich auf Blutagar ge­ prüft.100 ml of 10% glycine solution becomes aseptically the main Culture added. After 20 minutes exposure to 30 ° C 50 ml of 1% lysozyme solution (Lysozym Serva 28262 with a specific activity of 146500 U / mg) mix well and add culture medium for 2 hours occasional pivoting movement. Then the Living germ count and purity and identity colony-morphologically after smear on blood agar reviewed.

Der Sollwert für die Keimzahl vor dem Pasteurisieren sollte < 100 KBE/ml betragen.The setpoint for the germ count before pasteurization should be <100 CFU / ml.

d) Pasteurisierungd) pasteurization

Die Kultur wird im Wasserbad bei 70°C 30 min inkubiert.The culture is incubated in a water bath at 70 ° C for 30 min.

e) Endkontrolle am Milch/Bakterienlysate) Final check on the milk / bacteria lysate

Das Milch/Bakterienlysat weist folgende Eigenschaften auf:The milk / bacteria lysate has the following properties on:

  • 1. Gärungsprodukt L-Milchsäure (enzymatisch): 1 bis 2 g/l.1. fermentation product L-lactic acid (enzymatic): 1 to 2 g / l.
  • 2. Identität (organoleptisch): milchähnlich weißlich­ homogene Flüssigkeit ohne Sediment.2. Identity (organoleptic): milk-like whitish homogeneous liquid without sediment.
  • 3. Reinheit (mikrobiologisch): steril3. Purity (microbiological): sterile
f) Lagerungf) Storage

Das pasteurisierte Produkt wird gekühlt in desinfizierte Behälter gefüllt und im Kühlschrank bis zur weiteren Verwendung gelagert. Falls erforderlich, kann das milchähnliche, weißlich homogen aussehende Produkt mit einem Konservierungsmittel konserviert werden.The pasteurized product is refrigerated in disinfected Container filled and in the refrigerator until further Use stored. If necessary, this can Milk-like, whitish homogeneous-looking product with Preserved a preservative.

Beispiel 2Example 2

Herstellung eines KosmetikumsProduction of a cosmetic Rohstoffraw material % (G/G)% (G / G) 1. Cetylstearylalkohol|12,5001. Cetylstearyl alcohol | 12,500 2. Vaseline, weiß2. Vaseline, white 19,50019,500 3. Sorbitlösung (70%)3. Sorbitol solution (70%) 8 bis 138 to 13 4. Tween 80 (Polysorbat 80)4. Tween 80 (Polysorbate 80) 5,0005,000 5. dest. Wasser und Milch/Bakterienlysat5. least. Water and milk / bacteria lysate ad 100ad 100

oderor

Rohstoffraw material % (G/G)% (G / G) 1. Emulgator E 21551. Emulsifier E 2155 6,0006,000 2. Paraffinöl, dickflüssig2. Paraffin oil, viscous 10,00010,000 3. Mikrowachs3. Microwax 3,0003,000 4. Isopropylmyristat4. isopropyl myristate 3,0003,000 5. Glycerin5. Glycerin 5,0005,000 6. dest. Wasser und Milch/Bakterienlysat6. least. Water and milk / bacteria lysate ad 100ad 100

Beispiel 3Example 3 Herstellung eines Arzneimittels auf Salben- und Creme-BasisPreparation of an ointment and cream based medicament

Die oben für ein Kosmetikum angegebene Rezeptur bzw. Techno­ logie ist weiter für ein Arzneimittel einsetzbar.The recipe or techno given above for a cosmetic logie can continue to be used for a drug.

Rohstoffraw material % (G/G)% (G / G) 1. Lanette N (Gemisch aus Lanette O und Lanette E aus Wollwachs)1. Lanette N (mixture of Lanette O and Lanette E of wool wax) 10,00010,000 2. 2-Octyldodecanol2. 2-octyldodecanol 8,0008,000 3. Paraffinöl, dickflüssig3. Paraffin oil, viscous 4,0004,000 4. Glycerol4. Glycerol 4,5004,500 5. dest. Wasser und Milch/Bakterienlysat5. least. Water and milk / bacteria lysate ad 100ad 100

oder:or:

Rohstoffraw material % (G/G)% (G / G) 1. Glycerolmonostearat|4,0001. Glycerol monostearate | 4,000 2. Cetylalkohol2. cetyl alcohol 6,0006,000 3. Spreitendes Öl (mittelkettige Triglyceride)3. Spreading oil (medium chain triglycerides) 7,5007,500 4. Vaseline, weiß4. Vaseline, white 20 bis 2520 to 25 5. POE-Glycerolmonostearat (Tagat S2)5. POE glycerol monostearate (Tagat S2) 7,0007,000 6. 1,2-Propylenglykol6. 1,2-propylene glycol 10,00010,000 7. dest. Wasser und Milch/Bakterienlysat7. least. Water and milk / bacteria lysate ad 100.ad 100.

Claims (17)

1. Milch/Bakterienlysat erhältlich durch:
  • (a) Ansetzen einer Kultur von Bakterien in einem Milch- Hefeextrakt-Medium;
  • (b) Versetzen des Mediums mit einem Hemmstoff der Mureinbiosynthese nach Erreichen der log-Phase;
  • (c) Zugabe einer Mureinhydrolase zur Lyse der in der Kultur enthaltenen Bakterien; und
  • (d) Pasteurisieren des so erhaltenen Milch/Bakterienly­ sates.
1. Milk / Bacteria Lysate available through:
  • (a) preparing a culture of bacteria in a milk-yeast extract medium;
  • (b) placing the medium with an inhibitor of murein biosynthesis after reaching the log phase;
  • (c) adding a murein hydrolase to lyse the bacteria contained in the culture; and
  • (D) pasteurizing the milk / bacteria lysate thus obtained.
2. Milch/Bakterienlysat nach Anspruch 1, bei dem die Bakte­ rien zur Gattung Lactococcus gehören.2. milk / bacterial lysate according to claim 1, wherein the Bakte belong to the genus Lactococcus. 3. Milch/Bakterienlysat nach Anspruch 2, bei dem das Bakte­ rium der Gattung Lactococcus Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605 ist.3. milk / bacteria lysate according to claim 2, wherein the Bakte of the genus Lactococcus Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605. 4. Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 3, bei dem der Hemmstoff der Mureinbiosynthese Glycin ist.4. milk / bacteria lysate according to one of claims 1 to 3, where the inhibitor of murein biosynthesis is glycine. 5. Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 4, bei dem die Mureinhydrolase Lysozym ist.5. milk / bacteria lysate according to one of claims 1 to 4, where the murein hydrolase is lysozyme. 6. Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei vor der Pasteurisierung in Schritt (d) die Voll­ ständigkeit der Lyse kontrolliert wird.6. milk / bacteria lysate according to one of claims 1 to 5, wherein before the pasteurisation in step (d) the full lysis is controlled. 7. Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei während der Kultivierung der Bakterien der pH-Wert des Mediums kontrolliert und gegebenenfalls das Medium neutralisiert wird.7. milk / bacterial lysate according to one of claims 1 to 6, wherein during the cultivation of the bacteria the pH the medium controlled and optionally the medium is neutralized. 8. Verfahren zur Herstellung eines Milch/Bakterienlysates, bei dem man die folgenden Schritte durchführt:
  • (a) Ansetzen einer Kultur von Bakterien in einem Milch- Hefeextrakt-Medium;
  • (b) Versetzen des Mediums mit einem Hemmstoff der Mureinbiosynthese nach Erreichen der log-Phase;
  • (c) Zugabe einer Mureinhydrolase zur Lyse der in der Kultur enthaltenen Bakterien; und
  • (d) Pasteurisieren des so erhaltenen Milch/Bakterienly­ sates.
8. A method for producing a milk / bacteria lysate, comprising the steps of:
  • (a) preparing a culture of bacteria in a milk-yeast extract medium;
  • (b) placing the medium with an inhibitor of murein biosynthesis after reaching the log phase;
  • (c) adding a murein hydrolase to lyse the bacteria contained in the culture; and
  • (D) pasteurizing the milk / bacteria lysate thus obtained.
9. Verfahren nach Anspruch 8, bei dem die Bakterien zur Gattung Lactococcus gehören.9. The method of claim 8, wherein the bacteria for Genus Lactococcus belong. 10. Verfahren nach Anspruch 9, bei dem das Bakterium der Gattung Lactococcus Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605 ist.10. The method of claim 9, wherein the bacterium of the Genus Lactococcus Lactococcus lactis ssp. lactis DSM 10605 is. 11. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 10, bei dem der Hemmstoff der Mureinbiosynthese Glycin ist.11. The method according to any one of claims 8 to 10, wherein the Inhibitor of murein biosynthesis is glycine. 12. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 11, bei dem die Mureinhydrolase Lysozym ist.12. The method according to any one of claims 8 to 11, wherein the Murein hydrolase is lysozyme. 13. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 12, wobei vor der Pasteurisierung in Schritt (d) die Vollständigkeit der Lyse kontrolliert wird.13. The method according to any one of claims 8 to 12, wherein before the pasteurization in step (d) the completeness the lysis is controlled. 14. Verfahren nach einem der Ansprüche 8 bis 13, wobei wäh­ rend der Kultivierung der Bakterien der pH-Wert des Me­ diums kontrolliert und gegebenenfalls das Medium neutra­ lisiert wird.14. The method according to any one of claims 8 to 13, wherein currency During the cultivation of the bacteria, the pH of the Me controlled medium and, where appropriate, the medium neutra is lisiert. 15. Kosmetikum, enthaltend ein Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 7.15. Cosmetic containing a milk / bacterial lysate one of claims 1 to 7. 16. Arzneimittel, enthaltend ein Milch/Bakterienlysat nach einem der Ansprüche 1 bis 7. 16. Medicament containing a milk / bacterial lysate one of claims 1 to 7.   17. Kosmetikum nach Anspruch 15 oder Arzneimittel nach An­ spruch 16, wobei das darin enthaltene Produkt nach einem der Ansprüche 1 bis 7 als anti-inflammatorischer Zusatz dient.17. Cosmetic according to claim 15 or medicaments according to An claim 16, wherein the product contained therein after a of claims 1 to 7 as an anti-inflammatory additive serves.
DE19619505A 1996-05-14 1996-05-14 Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines Expired - Fee Related DE19619505C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19619505A DE19619505C2 (en) 1996-05-14 1996-05-14 Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19619505A DE19619505C2 (en) 1996-05-14 1996-05-14 Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE19619505A1 DE19619505A1 (en) 1997-12-11
DE19619505C2 true DE19619505C2 (en) 1998-03-26

Family

ID=7794337

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19619505A Expired - Fee Related DE19619505C2 (en) 1996-05-14 1996-05-14 Milk / Bacteria lysate for the manufacture of cosmetics and medicines

Country Status (1)

Country Link
DE (1) DE19619505C2 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2255744A1 (en) * 1971-11-15 1973-05-24 Inst Rech Scient Irs IMMUNIZING AND INTESTINAL FLORA RESTORING MEDICINAL PRODUCT
EP0432490A2 (en) * 1989-12-13 1991-06-19 Societe Des Produits Nestle S.A. Immunostimulant agent

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2255744A1 (en) * 1971-11-15 1973-05-24 Inst Rech Scient Irs IMMUNIZING AND INTESTINAL FLORA RESTORING MEDICINAL PRODUCT
EP0432490A2 (en) * 1989-12-13 1991-06-19 Societe Des Produits Nestle S.A. Immunostimulant agent

Also Published As

Publication number Publication date
DE19619505A1 (en) 1997-12-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6270811B1 (en) Pharmaceutical, cosmetic composition with base of microbial culture mixed with an essential oil and an acid
US7510734B2 (en) Skin treatment method with Lactobacillus extract
EP1185244B1 (en) Cosmetic product containing enzymes
WO2001045721A1 (en) Agent which is anti-adhesive in relation to the pathogenic flora of the skin
DE69500016T2 (en) Cosmetic composition containing an associate of superoxide dismutase and porphyrins
JPH0940523A (en) Fibroblast proliferation promoter containing water extract form chlorella
JPH1045615A (en) Plant extract-containing fibroblast growth promoter
US20180325969A1 (en) Cosmetic and pharmaceutical applications of lactobacillus pentosus
KR102391657B1 (en) Cosmetic composition for skin improvement comprising seaweed extract
KR102294818B1 (en) Composition for skin regeneration and moisturing comprising starfish extracts
KR20110134151A (en) Agent for treating or preventing skin inflammatory disease comprising cultures of mixed bacteria, cosmetic composition, and pharmaceutical composition
DE69818939T2 (en) Rosaceae extract as bradykinin antagonist
DE69916695T2 (en) Use of at least one hydroxystilbene as an agent for reducing the adhesion of microorganisms
JPH0987189A (en) Antiallergic agent containing isodon japonicus hara, paeonia suffruticosa andrews, perilla frutescens britton var. acuta kudo, and/or arunica montana linne
JP2019513810A (en) Harungana madagascariensis leaf extract for use in the treatment and / or prevention of acne
EP0357162A2 (en) Process for modifying whey
DE69318724T2 (en) USE OF A SIMAROUBA EXTRACT TO REDUCE SPOTY SKIN PIGMENTATION
DE60114272T2 (en) Use of special fatty substances with which the physico-chemical properties of the skin and / or the mucous membranes can be changed, as active ingredients that prevent or reduce the adhesion of microorganisms
KR20210093662A (en) Cosmetic composition comprising seaweed extracts
KR101354412B1 (en) Cosmetic composition for improving atopic dermatitis and skin whitening comprising ferment filtrate of Ledum palustre var. diversipilosum and manufacturing method thereof
EP2498627A1 (en) Health-beneficial preparation and production method
EP1296692B1 (en) Use of a formulation made of or containing at least one dissimilated milk serum
EP2055307B1 (en) Active agent combinations made from anise fruit extract and white tea extract
KR102269842B1 (en) Cosmetic composition comprising bifida ferment lysate and natural herbal extract
EP1726296B1 (en) Cosmetic or therapeutic combination preparation comprising theanine

Legal Events

Date Code Title Description
OP8 Request for examination as to paragraph 44 patent law
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
R119 Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee
R119 Application deemed withdrawn, or ip right lapsed, due to non-payment of renewal fee

Effective date: 20141202