DE1418549B1

DE1418549B1 - Methyl hesperidines and process for their preparation

Info

Publication number: DE1418549B1
Application number: DE19581418549
Authority: DE
Inventors: Hiroaki Nomura; Ikuo Sakieki
Original assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1957-08-27
Filing date: 1958-08-27
Publication date: 1970-03-05
Also published as: DE1443341B1; CH376934A

Description

Es sind bereits verschiedene Stoffe mit Vitamin-P-artiger Wirkung oder der Wirkung von Bioflavonoiden bekannt und dargestellt worden. So wurde von C. W. Wilson methyliertes Hesperidinochalkon aus Hesperidin durch Behandlung mit einer konzentrierten Alkalilösung und anschließende Methylierung mit Dimethylsulfat hergestellt (US&-Patentschrift 2425 291 und 2 615 015). Das methylierte Hesperidinchalkon ist innerhalb eines weiten pH-Bereiches stabil. Die ausgezeichnete medizinische Wirkung dieses Produktes wurde von B oh r und Mitarbeitern, »Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics«, Bd. 92, S. 243 (1949), erkannt, es besitzt jedoch den Nachteil einer verhältnismäßig starken Toxizität. There are already various substances with a vitamin P-like effect or the effects of bioflavonoids have been known and demonstrated. So was from C. W. Wilson methylated hesperidinochalcone from hesperidin by treatment with a concentrated alkali solution and subsequent methylation with dimethyl sulfate (U.S. & Patents 2,425,291 and 2,615,015). The methylated hesperidin chalcone is stable within a wide pH range. The excellent medical Effect of this product has been reviewed by Bohr et al., Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics ", Vol. 92, p. 243 (1949), but it has the disadvantage of a relatively high toxicity.

Ferner ist es bekannt, Hesperidin in stark alkalischem-Medium zu methylieren (Journal of the Chemical Society [London], 1931, S. 1704 bis 1707, und Berichte der Deutschen Chemischen Gesellschaft, Bd. 71 [1938], S. 2511 bis 2518). Hierbei tritt jedoch eine weitgehende Bildung von Verbindungen des Chalkontyps auf Es wurde nun gefunden, daß man Methylhesperidine der allgemeinen Formel in der Rh den Rhamnosyl- oder Methylrhamnosylrest und Gl den Glucosyl- oder Methylglucosylrest bedeuten, durch Umsetzung von Hesperidin mit einem Methylierungsmittel unter Verwendung von höchstens 5 Mol eines wäßrigen Alkalihydroxys pro Mol Hesperidin unter weitgehender Vermeidung der Chalkonbildung und der Nachteile der bekannten Verfahren dadurch erhält, daß man die Umsetzung in Gegenwart einer 8% eigen wäßrigen Lösung eines Alkalihydroxyds bei einer Temperatur unterhalb 15° C durchführt und gegebenenfalls anschließend aus dem erhaltenen Reaktionsgemisch etwa gebildete Hesperidinchalkone durch Behandlung mit mehr als 2 Mol eines Alkalibisulfits pro Mol Hesperidinchalkon bei einem pH-Wert von 5 bis 7 und einer Temperatur von nicht mehr als 80"C entfernt, Die Menge des bei der Methylierung verwendeten alkalischen Mittels beträgt höchstens 5 Mol pro Mol Hesperidin, wobei das alkalische Mittel in einer 8%igen wäßrigen Lösung angewendet wird. Die Ausbeute an den wasserlöslichen Methylhesperidinen kann sich verringern, wenn weniger als 2 Mol des alkalischen Mittels je Mol Hesperidin verwendet werden.It is also known to methylate hesperidin in a strongly alkaline medium (Journal of the Chemical Society [London], 1931, pp. 1704 to 1707, and reports of the German Chemical Society, Vol. 71 [1938], pp. 2511 to 2518 ). In this case, however, extensive formation of compounds of the chalcone type occurs. It has now been found that methyl hesperidines of the general formula can be used in which Rh denotes the rhamnosyl or methylrhamnosyl radical and Gl denotes the glucosyl or methylglucosyl radical, obtained by reacting hesperidin with a methylating agent using a maximum of 5 moles of an aqueous alkali hydroxide per mole of hesperidin while largely avoiding the formation of chalcones and the disadvantages of the known processes, that the reaction is carried out in the presence of an 8% own aqueous solution of an alkali metal hydroxide at a temperature below 15 ° C and optionally then any hesperidinchalcones formed from the resulting reaction mixture by treatment with more than 2 moles of an alkali metal bisulfite per mole of hesperidinchalcone at a pH of 5 to 7 and a temperature of not more than 80 "C. The amount of the alkaline agent used in the methylation is at most 5 moles per mole of hesperidin, the alkaline agent being used in an 8% aqueous solution. The yield of the water-soluble methyl hesp eridines can decrease if less than 2 moles of the alkaline agent are used per mole of hesperidin.

Als Methylierungsmittel eignen sich z. B. Dimethylsulfat, Methylhalogenide und Diazomethan. Vorzugsweise wird 1 Mol Methylierungsmittel auf 1 Mol Hesperidin verwendet. Werden mehrere Mole an Methylierungsmittel, z. B. 4 bis 5 Mol, verwendet, so erhöht sich die Bildung von Verbindungen vom Chalkontyp, die aber dadurch wirksam unterdrückt wird, daß bei entsprechend niedrigeren Temperaturen gearbeitet wird. Dieser Sachverhalt ergibt sich aus den in der nachstehenden Tabelle zusammengestellten Versuchsergebnissen bei der Methylierung von Hesperidin, wobei jeweils. die 8070ige Natriumhydroxydlösung in einer solchen Menge zugegeben wurde, daß äquimolare Mengen Alkalihydroxyd und Methylierungsmittel zur Anwendung kamen: Methyíie-Wasserlösliches Mk-aes wasse@os@@@@@ @@@@@@y@@@@es rungsmittel Methyl- Hesperidin- Temperatur (Dimethyl- sulfat) hesperidin chalkon Mol 12 bis 150C 1 65,1 34,7 12 bis 15°C 2,2 46,0 53,8 12bis 15°C 4 44,6 55,0 12 bis 15"C 5 34, 64,7 3 bis 5°C 2,2 49,2 50,8 3 bis 5°C 4 62,7 37,3 3 bis 5"C 5 61,1 38,9 Das erfindungsgemäße Verfahren kann in Gegenwart eines Lösungsmittels durchgeführt werden. Als Lösungsmittel eignet sich Wasser oder ein inertes, mit Wasser mischbares Lösungsmittel, wie Aceton und Dioxan. Organische Lösungsmittel, wie Äther und Benzol, können eine Zersetzung des Hesperidins durch das Alkali und somit die Bildung von Chalkonderivaten verhindern.Suitable methylating agents are, for. B. dimethyl sulfate, methyl halides and diazomethane. Preferably 1 mole of methylating agent is used for 1 mole of hesperidin. If several moles of methylating agent, e.g. B. 4 to 5 mol, is used, the formation of compounds of the chalcone type increases, but this is effectively suppressed that it is carried out at correspondingly lower temperatures. This situation arises from the test results compiled in the table below for the methylation of hesperidin, in each case. the 8070 sodium hydroxide solution was added in such an amount that equimolar amounts of alkali hydroxide and methylating agent were used: Methyíie-water-soluble Mk-aes wasse @ os @@@@@ @@@@@@ y @@@@ es funds Methyl hesperidin temperature (Dimethyl sulfate) hesperidin chalcone Mole 12 to 150C 1 65.1 34.7 12 to 15 ° C 2.2 46.0 53.8 12-15 ° C 4 44.6 55.0 12 to 15 "C5 34,64.7 3 to 5 ° C 2.2 49.2 50.8 3 to 5 ° C 4 62.7 37.3 3 to 5 "C 5 61.1 38.9 The process according to the invention can be carried out in the presence of a solvent. Suitable solvents are water or an inert, water-miscible solvent, such as acetone and dioxane. Organic solvents such as ether and benzene can prevent the alkali from decomposing hesperidin and thus prevent the formation of chalcone derivatives.

Das bei dem erfindungsgemäßen Verfahren anfallende Reaktionsgemisch enthält neben den verschiedenen wasserlöslichen Methylhesperidinen der oben angegebenen allgemeinen Formel eine geringe Menge methyliertes Hesperidinchalkon sowie zahlreiche Verunreinigungen, die beispielsweise nach bekannten Methoden, wie durch Aussalzen, Dialyse, Extraktion mit organischen Lösungsmittelm, Absorption, Elution von einem Absorptionsmittel, Abtrennung mittels lonenaustauschern und/oder durch Verteilung in zwei Lösungsmitteln entfernt werden können. Um aus dem- erhaltenen Rohprodukt die Anteile an methyliertem Hesperidinchalkon zu entfernen, eignet sich im vorliegenden Fall dle Behandlung mit einem Alkalibisulfit. Hierbei wird zweckmäßigerweise das Rohprodukt in einer wäßrigen Alkalibicarbonatlösung gelöst und Schwefeldioxyd durch die Lösung geleitet, wobei Alkalibisulfit im Reaktionssystem gebildet wird. Aus der so erhaltenen Reaktionsmischung können die wasserlöslichen Methylhesperidine, die keine Chalkonderivate enthalten, abgetrennt werden. The reaction mixture obtained in the process according to the invention contains, in addition to the various water-soluble methyl hesperidines, the above general formula a small amount of methylated hesperidin chalcone as well as numerous Impurities, for example, by known methods, such as by salting out, Dialysis, extraction with organic solvents, absorption, elution of one Absorbent, separation by means of ion exchangers and / or by distribution can be removed in two solvents. To from the crude product obtained Removing the proportions of methylated hesperidin chalcone is suitable in the present case Case dle treatment with an alkali bisulfite. This is expediently the Crude product dissolved in an aqueous alkali carbonate solution and sulfur dioxide through passed the solution, whereby alkali bisulfite is formed in the reaction system. the end the reaction mixture obtained in this way can contain the water-soluble methyl hesperidines, which do not contain any chalcone derivatives are separated.

Es wird angenommen, daß sich bei dieser Reaktion Additionsprodukte aus methyliertem Hesperidinchalkon und dem Bisulfit bilden, während die wasserlöslichen Methylhesperidine davon kaum betroffen werden. Das Additionsprodukt ist in Wasser leicht, in organischen Lösungsmitteln dagegen im allgemeinen kaum löslich. Das Alkalibisulfit wird in einer Menge von mehr als 2 Mol pro Mol des in dem Rohprodukt enthaltenen Hesperidinchalkons, vorzugsweise in einer Menge von 5 bis 10 Mol verwendet, und es wird bei einem pH-Wert von 5 bis 7 und bei Temperaturen von nicht mehr als 80°C gearbeitet.It is believed that addition products are formed in this reaction from methylated hesperidin chalcone and bisulfite, while the water-soluble ones Methylhesperidines are hardly affected by it. The addition product is in water easily, but generally hardly soluble in organic solvents. The alkali bisulfite is in an amount of more than 2 moles per mole of that contained in the crude product Hesperidin chalcons, preferably used in an amount of 5 to 10 moles, and it will be at a pH of 5 to 7 and at temperatures not exceeding 80 ° C worked.

Die Reaktion ist dann meist in 2 bis 3 Stunden beendet, was daran zu erkennen ist, daß die gelbliche Farbe der Lösung verschwindet.The reaction is then usually over in 2 to 3 hours, which is because of it it can be seen that the yellowish color of the solution disappears.

Die Abtrennung der gereinigten wasserlöslichen Methylhesperidine kann durch Extraktion der Reaktionsmischung mit einem organischen Lösungsmittel erfolgen. Als Extraktionsmittel kann n-Butanol verwendet werden, es eignen sich aber auch solche Losungsmittel, die mit Wasser nicht leicht mischbar sind, wie Isobutanol, sekundäres oder tertiäres Butanol und Methyläthylketon. Aus dem Extrakt wird das Lösungsmittel, vorzugsweise unter verringertem Druck, abdestilliert und der Rückstand z B. aus Athanol oder Isopropanol umkristallisiert. The separation of the purified water-soluble methyl hesperidines can by extracting the reaction mixture with an organic Solvent take place. As an extractant, n-butanol can be used, es However, solvents that are not easily miscible with water are also suitable are, such as isobutanol, secondary or tertiary butanol and methyl ethyl ketone. the end the solvent is distilled off from the extract, preferably under reduced pressure and the residue is recrystallized from, for example, ethanol or isopropanol.

Die Verfahrensprodukte besitzen im Vergleich zu den bekannten methylierten Hesperidinchalkonen eine ausgezeichnete medizinische Wirksamkeit. außerdem besitzen sie eine größere Wasserlöslichkeit und sind weniger toxisch. The process products have in comparison to the known methylated Hesperidinchalcones have excellent medicinal properties. also own they have greater water solubility and are less toxic.

Es wurden Versuche nach der von A. M. A m b r o s e und F. D e e d in »Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics«, Bd. 90, S. 359 ft (1947), beschriebenen Methode durchgefuhrt, die darauf beruht, daß sich die Vitamin-P-Wirksamkeit zur Verbesserung der Durchlässigkeit von Kapillargefäßen dadurch bestimmen läßt, daß man die Zeitdauer ermittelt, die erforderlich ist, bis ein Farbstoff aus den Gefäßen der Versuchstiere (Kaninchen) austritt. Der Wert für die Zeitverlängerung stellt die sogenannte »medizinische Wirksamkeit« dar und wird als prozentualer Anstieg der Zeit ausgedrückt, die erforderlich ist, um den unter der Bezeichnung »Evans-Blau« bekannten Farbstoff (4,4'-Bis-7-(1-amino-8-hydroxy-2,4- disulfo)-methylazo- 3,3'-ditolyl-tetranatriumsalz) bei der behandelten Gruppe von Tieren durchsickern zu lassen, verglichen mit der bei einer Kontrollgruppe von Tieren erforderlichen Zeit. Die erhaltenen Ergebnisse sind aus der nachstehenden Tabelle ersichtlich: Toxizität Medizini- LD50 Verbindung sche Wirk- (mg kg) samkeit i. v. bei Mäuses 1 3'-Methyl-7-(rhamnosyl- 2"-methylglucosyl)- hesperetin... . .. 116,7 750 2 3'-Methyl-742'-methyl- rhamnosyl-2"-methyl- glucosyl)-hesperetin n . .. ... 32,9 900 3 3'-Methylhesperidin. . . .. | 38,6 800 4 Nach dem erfindungsge- mäßen Verfahren herge- stelltes wasserlösliches Rohprodukt des Beispiels 2............. 95,8 850 5 3'6'-Dimethylhesperidin- chalkon (bekannt) (Rf = 0,06).......... 19,8 150 6 3,6'-Dimethyl-4'-(rham- nosyl-2-methylglucosylF hesperetinchalkon (bekannt) (Rf =0,35) .. 19,4 450 Beispiel I Zu einer Lösung von 6,1 g Hesperidin (0,01 Mol) in 25 ccm einer 8%igen Natriumhydroxydlösung (0,05 Mol) werden tropfenweise unter Rühren und unter Abkühlung auf unter 10°C 6,3 g Dimethylsulfat (0,05 Mol) hinzugegeben. Dann wird die Reaktion mischung über Nacht stehengelassen, anschließend durch Zugabe von Natriumhydroxyd auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und filtriert. Das Filtrat wird mit Natriumchlorid gesättigt, wobei eine harzartige Substanz ausfällt, die abgetrennt, in 20 ccm destilliertem Wasser gelöst und mit Natriumchlorid nochmals ausgesalzen wird. Anschließend wird die ausgefallene Substanz abgetrennt. unter verringertem Druck bei Temperaturen unter 60 C zur Trockene gebracht und der-Rückstand in Mccm Isopropylalkohol gelöst Die Lösung wird dann mit 1 g aktivierter Holzkohle entfarbt und mit Eis gekühlt. Das hierbei ausfallende kristalline Produkt wird mehrmals mit Ather in Mengen von jeweils 20 ccm gewaschen.Tests were carried out according to the method described by AM Ambrose and F. Deed in "Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics", Vol. 90, p. 359 ft (1947), which is based on the fact that the vitamin P-effectiveness for improving the permeability of capillary vessels can be determined by determining the time required for a dye to escape from the vessels of the test animals (rabbits). The value for the time extension represents the so-called »medical effectiveness« and is expressed as the percentage increase in the time required to produce the dye known as »Evans blue« (4,4'-Bis-7- (1 -amino-8-hydroxy-2,4-disulfo) -methylazo-3,3'-ditolyl-tetrasodium salt) in the treated group of animals compared to the time required in a control group of animals. The results obtained can be seen in the table below: toxicity Medical LD50 Compound active (mg kg) integrity iv Mice 1 3'-methyl-7- (rhamnosyl- 2 "-methylglucosyl) - hesperetin .... .. 116.7 750 2 3'-methyl-742'-methyl- rhamnosyl-2 "-methyl- glucosyl) hesperetin n. .. ... 32.9 900 3 3'-methyl hesperidin. . . .. | 38.6 800 4 According to the invention according to procedures made water soluble Crude product of Example 2 ............. 95.8 850 5 3'6'-dimethyl hesperidin balcony (known) (Rf = 0.06) .......... 19.8 150 6 3,6'-dimethyl-4 '- (rham- nosyl-2-methylglucosylF hesperetinchalkon (known) (Rf = 0.35) .. 19.4 450 EXAMPLE I To a solution of 6.1 g of hesperidin (0.01 mol) in 25 cc of an 8% sodium hydroxide solution (0.05 mol), 6.3 g of dimethyl sulfate (0 , 05 mol) was added. The reaction mixture is then left to stand overnight, then adjusted to a pH of 5 by adding sodium hydroxide and filtered. The filtrate is saturated with sodium chloride, a resinous substance precipitating which is separated off, dissolved in 20 cc of distilled water and salted out again with sodium chloride. The precipitated substance is then separated off. brought to dryness under reduced pressure at temperatures below 60 ° C. and the residue dissolved in mccm isopropyl alcohol. The solution is then decolorized with 1 g of activated charcoal and cooled with ice. The crystalline product which precipitates out is washed several times with ether in amounts of 20 cc each time.

Das Produkt schmilzt bei etwa 95tC Die Ausbeute beträgt 45 g.The product melts at about 95 ° C. The yield is 45 g.

10 g des obigen methylierten Produktes, das einen Reinheitsgrad an wasserlöslichen Methylhesperidinen von 65% aufweist, werden zusammen mit 147 g Natriumbisulfit in 75 ccm Wasser gelöst, und die Lösung wird 2 Stunden bei einer Temperatur von 70 C gehalten. Die zuerst hellgelbe Lösung entfärbt sich allmahlich mit fortschreitender Umsetzung. Dann werden dem Reaktionsgemisch 10 g Natriumchlorid zugegeben, wobei eine weiße harzartige Substanz ausgesalzen wird. Die Substanz wird aus Isopropanol umkristallisiert, wobei 5,8 g eines farblosen kristallinen Pulvers mit einem Reinheitsgrad von 98,6% (spektrometrische Prüfung) erhalten werden. Dieses Produkt enthält keine Methylhesperidinchalkone. Es stellt ein Gemisch verschiedener Methylhesperidine der angegebenen allgemeinen Formel dar. Durch Trennung auf chromatographischem Wege nach der im Beispiel 2 beschriebenen Methode werden hieraus 3'- Methyl - 7 --(rhanmosyl - 2" - methylglucosyl)- hesperetin, 3'-Methyl-7-(2'-methylrhamnosyl-2'-methylglucosyl)-hesperetin, 3',5-Dimethylhesperidin und das 3'-Methylhespendin (als hauptprodukt) erhalten. 10 g of the above methylated product, which has a degree of purity 65% water-soluble methyl hesperidines are added together with 147 g of sodium bisulfite dissolved in 75 cc of water, and the solution is 2 hours at a temperature of 70 C held. The initially light yellow solution gradually discolors as it progresses Implementation. Then 10 g of sodium chloride are added to the reaction mixture, wherein a white resinous substance is salted out. The substance is made from isopropanol recrystallized, leaving 5.8 g of a colorless crystalline powder with a degree of purity of 98.6% (spectrometric test) can be obtained. This product does not contain any Methyl hesperidin chalcones. It is a mixture of different methyl hesperidines of the general formula given. By separation by chromatography using the method described in Example 2, 3'-methyl - 7 - (rhanmosyl - 2 "- methylglucosyl) - hesperetin, 3'-methyl-7- (2'-methylrhamnosyl-2'-methylglucosyl) -hesperetin, 3 ', 5-dimethyl hesperidin and 3'-methyl hespendin (as the main product) were obtained.

Beispiel 2 Zu einer Lösung von 6,1 g Hesperidin (0,01 Mol) in 100 ccm 50%igem wäßrigem Dioxan werden abwechselnd unter Rühren und Abkühlen auf unter 15°C tropfenweise 25 ccm einer 8%igen wäßrigen Natronlauge (0,05 Mol) und 6,3 g Dimethylsulfat (0,05 Mol) hinzugegeben. Die Mischung wird über Nacht stehengelassen, mittels Natriumhydroxyd auf einen pH-Wert von 5 eingestellt und unter verringertem Druck bei Temperaturen unter 60°C zur Trockene eingedampft. Der erhaltene Rückstand wird in 50 ccm Wasser gelöst, die Lösung mit 1 g aktivierter Holzkohle entfärbt und mit Natriumchlorid gesättigt, worauf sich eine harzartige Substanz abscheidet. Die Substanz wird abgetrennt, in 20 ccm destilliertem Wasser gelöst und mit Natriumchlorid nochmals ausgesalzen. Anschließend wird die ausgefallene Substanz abgetrennt, unter verringertem Druck bei Temperaturen unter 60C zur Trockene gebracht und der Rückstand in 30 ccm Isopropylalkohol gelöst Die Lösung wird dann mit 1 g aktivierter Holzkohle entfärbt und mit Eis gekühlt Das hierbei ausfallende gelblich weiße kristalline Pulver wird mehrmals mit Äther in Mengen von jeweils 20 ccm gewaschen. Das Produkt schmilzt bei 95°C. Example 2 To a solution of 6.1 g of hesperidin (0.01 mol) in 100 ccm of 50% aqueous dioxane are alternately stirred and cooled to under 15 ° C dropwise 25 ccm of an 8% aqueous sodium hydroxide solution (0.05 mol) and 6.3 g Dimethyl sulfate (0.05 mol) added. The mixture is left to stand overnight, adjusted to a pH value of 5 by means of sodium hydroxide and reduced Pressure evaporated to dryness at temperatures below 60 ° C. The residue obtained is dissolved in 50 ccm of water, the solution is decolorized with 1 g of activated charcoal and saturated with sodium chloride, whereupon a resinous substance is deposited. The substance is separated off, dissolved in 20 cc of distilled water and washed with sodium chloride salted out again. The precipitated substance is then separated off, under reduced pressure at temperatures below 60C to dryness and the residue Dissolved in 30 cc of isopropyl alcohol. The solution is then mixed with 1 g of activated charcoal decolorized and cooled with ice The yellowish white crystalline precipitated here Powder is washed several times with ether in quantities of 20 cc each time. The product melts at 95 ° C.

Die Ausbeute beträgt 4,1 g. Das Rohprodukt ist sehr leicht löslich in Wasser (1:1), löslich in Methanol und Äthanol, schwach löslich m isopropylalkohol, Chloroform und Äthylacetat, unlöslich in Äther.The yield is 4.1 g. The crude product is very easily soluble in water (1: 1), soluble in methanol and ethanol, slightly soluble in isopropyl alcohol, chloroform and ethyl acetate, insoluble in ether.

Benzol und Petroläther, die FeCl3-Reaktion ist positiv (dunkelbraun) und die HCl-Mg-Reaktion ist ebenfalls positiv (gelblichrot). Es enthält die unten näher charakterisierten Methylhesperidine.Benzene and petroleum ether, the FeCl3 reaction is positive (dark brown) and the HCl-Mg reaction is also positive (yellowish red). It includes the below more closely characterized methyl hesperidines.

5 g des obigen methylierten Produktes wurden in 50 ccm Aceton (nötigenfalls kann eine kleine Wassermenge anwesend sein) gelöst. Diese Lösung wurde auf eine Kolonne gegeben, die aus einem Glasrohr von 7,5 cm Durchmesser unjd 30 cm Länge bestand, das mit einer Suspension aus 150 g Magnesiumsilikat und 500 ccm Aceton gefüllt, das Aceton nach einigen Stunden vom Boden des Rohres abgelassen und dann mit weiteren 100 ccm Aceton gewaschen worden war. Die in der Kolonne absorbierten Komponenten wurden mit einem Lösungsmittelgemisch. bestehend aus Äthylacetat, Benzol, Äthanol und Wasser in einem Verhältnis von 86 : 14 : 2 : 50 bei einer Fließgeschwindigkeit des Lösungsmittelgemisches von etwa 0,5 bis 1 ccm pro Minute entwickelt. Die ausfließende Flüssigkeit wurde in Fraktionen von je 10 ccm gesammelt. Diejenigen Fraktionen, die eine positive HCl-Mg-Reaktion zeigen, wurden nach ihrem Rf-Wert auf einem Papierchromatogramm (Papiersorte Whatmann No. 1 der W. and R. Balston Ltd., Großbritannien) registriert und die Fraktionen mit gleichem Rf-Wert vereinigt. Die Rf-Werte der Verbindungen wurden in der Weise bestimmt, daß eine Probe der Substanz nach dem aufsteigenden Verfahren unter Verwendung eines Lösungsmittelsystems aus Äthylacetat zu Benzol zu Äthanol zu Wasser (86:14:2:50) der Papierchromatographie unterworfen wird. dann wird Magnesiumacetat-Äthanol als Reaktionsmittel auf das Chromatogramm gesprüht und dieses anschließend mit ultraviolettem Licht bestrahlt. Die vercinigten Fraktionen wurden dann unter vermindertem Druck konzentriert. wobei die in ihnen enthaltene Komponente ausgeschieden wurde. 5 g of the above methylated product were dissolved in 50 cc of acetone (if necessary a small amount of water may be present). This solution was based on a Given a column consisting of a glass tube 7.5 cm in diameter and 30 cm in length consisted of a suspension of 150 g of magnesium silicate and 500 ccm of acetone filled, the acetone drained from the bottom of the tube after a few hours and then washed with a further 100 cc of acetone. Those absorbed in the column Components were mixed with a solvent. consisting of ethyl acetate, benzene, Ethanol and water in a ratio of 86: 14: 2: 50 at a flow rate of the solvent mixture developed from about 0.5 to 1 cc per minute. The outflowing Liquid was collected in fractions of 10 cc each. Those factions showing a positive HCl-Mg reaction were determined by their Rf value on a paper chromatogram (Paper type Whatmann No. 1 from W. and R. Balston Ltd., Great Britain) and the fractions with the same Rf value are combined. The Rf values of the compounds were determined in such a way that a sample of the substance after the ascending Method using a solvent system of ethyl acetate to benzene to ethanol to water (86: 14: 2: 50) is subjected to paper chromatography. then magnesium acetate-ethanol is sprayed onto the chromatogram as a reactant and then irradiated it with ultraviolet light. The united factions were then concentrated under reduced pressure. being the contained in them Component has been excreted.

Aus der 14, bis 23. Fraktion wurden 150 mg an 3'-Methyl-7-(2'-methylrhammosyl-2"-methylglucosyl)-hesperetin (C31H40O45) als farblose pulverförmige Kristalle vom F. etwa 80 C. Rf = 0,82. löslich in heißem Äther und heißem Benzol (FeCl3-Reaktion und HCl-Mg-Reaktion positiv), erhalten. Die HCl-Mg-Reaktion ist ein für Flavone und Flavanone übliches qualitatives analytisches Verfahren, bei dem pulverförmiges Magnesium und konzentrierte Salzsäure zu einer äthanolischen Lösung einer Probe der zu untere suchenden Verbindung gegeben wird. Färbt sich die Lösung hierbei rot bis rotviolett, so ist ein Flavon oder Flavanon in der Lösung enthalten. 150 mg of 3'-methyl-7- (2'-methylrhammosyl-2 "-methylglucosyl) hesperetin were obtained from the 14th to 23rd fractions (C31H40O45) as colorless powdery crystals with a temperature of about 80 C. Rf = 0.82. soluble in hot ether and hot benzene (FeCl3 reaction and HCl-Mg reaction positive), obtain. The HCl-Mg reaction is a common qualitative one for flavones and flavanones analytical process in which powdered magnesium and concentrated hydrochloric acid added to an ethanolic solution of a sample of the compound to be searched for will. If the solution turns red to red-violet, it is a flavone or flavanone included in the solution.

Aus der 24, bis 40. Fraktion wurden 600 mg an 3'-Methyl-7-(rhamnosyl-2"-methylglucosyl)-hesperetin (C30H38O15) als feine farblose nadeln vom F. etwa 80 C, Rf = 0,45, löslich in Wasser. Methanol, Äthanol, Aceton, Äthylacetat und Chloroform, unlöslich in Äther, Petroläther. Benzol und Schwefelkohlenstoff (FeCl3-Reaktion und HCl-Mg-Reaktion positiv), und aus der 90, bis 127. Fraktion wurden 1500 mg an 3'-Methylbesperidin (C29H36O15) als farblose Nadeln vom F. 149 bis 150 C, Rf = 0.18, löslich in Wasser, schwach löslich in Methanol, Äthanol, Aceton und Äthylacetat, unlöslich in Äther, Petroläther, Benzol, Chloroform und Schwefelkohlenstoff (FeCl3-Reaktion und HCl-Mg-Reaktion positiv), erbalten. The 24th to 40th fractions gave 600 mg of 3'-methyl-7- (rhamnosyl-2 "-methylglucosyl) hesperetin (C30H38O15) as fine, colorless needles with a temperature of around 80 C, Rf = 0.45, soluble in water. Methanol, ethanol, acetone, ethyl acetate and chloroform, insoluble in ether, petroleum ether. Benzene and carbon disulfide (FeCl3 reaction and HCl-Mg reaction positive), and from the 90 to 127th parliamentary group 1500 mg of 3'-methylbesperidin (C29H36O15) as colorless needles with a melting point of 149 to 150 ° C, Rf = 0.18, soluble in water, slightly soluble in methanol, ethanol, acetone and ethyl acetate, insoluble in ether, petroleum ether, benzene, Chloroform and carbon disulfide (FeCl3 reaction and HCl-Mg reaction positive), inherited

Die verbleibenden Fraktionen enthalten ebenfalls eine kleine Menge an entsprechenden wirksamen Methylhesperidinen, die durch eine nochmalige Chromatographie erhalten werden können, wie insbesonderc das 3',5-Dimethylhesperidin (C30H38O15) als farblose Nadeln vom F. 145 bis 146 C. und die aber nicht zum Gegenstand der Erfindung gehören. The remaining fractions also contain a small amount of corresponding effective methyl hesperidines, which by repeated chromatography can be obtained, such as in particular 3 ', 5-dimethyl hesperidin (C30H38O15) as colorless needles from F. 145 to 146 C. and which, however, are not the subject of Invention belong.

Claims

Claims: 1. Methyl hesperidines of the general formula in Rh denotes the rhamnosyl or methylrhamnosyl radical and Gl denotes the glucosyl or methylglucosyl radical.

2. Process for the preparation of methyl hesperidines of the general formula in which Rh denotes the rhammosyl or methylrhamnosyl radical and Gl denotes the glucosyl or methylglucosyl radical, by reacting hesperidin with a methylating agent using. Not more than 5 moles of an aqueous alkali metal hydroxide per mole of hesperidin, characterized in that the reaction is carried out in the presence of an 8% strength aqueous solution of an alkali metal hydroxide at a temperature below 15 ° C. @ 2 moles of an alkali bisulfite per mole of Hcspcridinchalkon at a pH of r to 7 and a temperature of not more than 80 C removed.