DE1119871B

DE1119871B - Process for the isolation of L-proline, L-oxyproline and L-arginine from gelatin hydrolyzate

Info

Publication number: DE1119871B
Application number: DEV18662A
Authority: DE
Inventors: Dr Hans Geipel
Original assignee: Berlin Chemie AG
Current assignee: Berlin Chemie AG
Priority date: 1960-05-20
Filing date: 1960-05-20
Publication date: 1961-12-21

Description

Verfahren zur Isolierung von L-Prolin, L-Oxyprolin und L-Arginin aus Gelatine-Hydrolysat Zusatz zur Patentanmeldung V 18663 IVb /12 q (Auslegeschrift 1 114 822) In der Patentanmeldung V 18663 IVb/12q wird ein Verfahren zur Isolierung von L-Prolin, L-Oxyprolin und L-Arginin aus Gelatine-Hydrolysat beschrieben, bei dem man ein durch Hydrolyse von Gelatine erhaltenes Aminosäuregemisch erst mit Methanol und dann den nach dem Abdestillieren des Methanols verbleibenden Rückstand mit Äthanol behandelt, wodurch die im ursprünglichen Gemisch vorhandenen Aminosäuren sich trennen lassen. Die Isolierung des L-Prolins und des L-Oxyprolins gelingt auf diese Weise bequem. Das L-Arginin jedoch ist nur zum Teil in der durch Methanol bewirkten Fällung enthalten, während der Rest des L-Arginins sich im Methanol löst und aus der das L-Oxyprolin enthaltenden Fraktion gesondert als Flavianat isoliert werden muß.Process for the isolation of L-proline, L-oxyproline and L-arginine from Gelatine hydrolyzate addendum to patent application V 18663 IVb / 12 q (Auslegeschrift 1 114 822) In the patent application V 18663 IVb / 12q a method for isolation of L-proline, L-oxyproline and L-arginine from gelatin hydrolyzate described in an amino acid mixture obtained by hydrolysis of gelatin is first mixed with methanol and then the residue remaining after the methanol has been distilled off with ethanol treated, causing the amino acids present in the original mixture to separate permit. L-proline and L-oxyproline are isolated in this way comfortable. The L-arginine, however, is only partly in the precipitation caused by methanol while the rest of the L-arginine dissolves in the methanol and from which the L-oxyproline-containing fraction must be isolated separately as flavianate.

Es wurde nun gefunden, daß es vorteilhafter ist, zuerst das L-Arginin in an sich bekannter Weise aus dem wäßrigen Hydrolysat als Flavianat vollständig auszufällen und dann, nach Einengen des Filtrats, die in der Patentanmeldung V 18663 IVb,12q bereits beschriebene Isolierung des L-Prolins und des L-Oxyprolins mit Methanol und Äthanol vorzunehmen. It has now been found that it is more advantageous to use the L-arginine first in a manner known per se from the aqueous hydrolyzate completely as flavianate to precipitate and then, after concentrating the filtrate, which is described in patent application V 18663 IVb, 12q already described isolation of L-proline and L-oxyproline with methanol and ethanol.

Wenn man in dieser Weise verfährt, wird das Verfahren nach der Patentanmeldung V 18663 IVb/12q noch weiter vereinfacht. If one proceeds in this way, the procedure according to the patent application becomes V 18663 IVb / 12q even further simplified.

Beispiel 3 kg Gelatine werden mit 2,25 1 konz. Schwefelsäure und 4,5 1 Wasser 24 Stunden gekocht. Dann verdünnt man die entstandene Lösung mit Wasser, entfernt die Schwefelsäure mit Bariumhydroxyd oder mit Calciumhydroxyd, behandelt mit Kohle und fällt aus dem Filtrat, eventuell nachdem man die Lösung eingeengt hat, das L-Arginin mit der gerade ausreichenden Menge Flaviansäure (= 2 4-Dinitro-naphthal-(l)-sulfon säure-(7)). Nach dem Absaugen des Flavianates engt man das Filtrat bis auf einen Rückstand von etwa 3,52kg ein und setzt 11,51 Methanol hinzu, wobei ein Niederschlag entsteht, der zum größten Teil aus Glykokoll besteht. Die methylalkoholische Lösung wird bis auf etwa 1,4 kg eingedampft und zu diesem Rückstand 101 Äthanol gegeben, kurze Zeit auf 60°C erhitzt und über Nacht bei Zimmertemperatur stehengelassen. Es wird so ein Niederschlag erhalten, der das L-Oxyprolin enthält, während das L-Prolin im Äthanol gelöst bleibt. Die äthylalkoholische Lösung wird vom Niederschlag getrennt, nach dem Abdestillieren des Äthanols der glasige Rückstand in Wasser gelöst und durch Zusatz der entsprechenden Menge Pikrinsäure das L-Prolin als Pikrat abgeschieden. Der Niederschlag, der das L-Oxyprolin enthält, wird in wenig Wasser gelöst, eventuell der anhaftende Alkohol durch Erhitzen entfernt und durch Zusatz von Pikrinsäure das L-Oxyprolin als Pikrat isoliert. Example 3 kg of gelatin are concentrated with 2.25 l. Sulfuric acid and 4.5 l of water boiled for 24 hours. Then the resulting solution is diluted with water, removes the sulfuric acid with barium hydroxide or with calcium hydroxide with charcoal and falls out of the filtrate, possibly after the solution has been concentrated has L-arginine with just enough flavic acid (= 2 4-dinitro-naphthal- (l) -sulfone acid- (7)). After the flavianate has been filtered off with suction, the filtrate is concentrated down to one A residue of about 3.52 kg and 11.5 l of methanol are added, with a precipitate which consists for the most part of glycocolla. The methyl alcoholic solution is evaporated to about 1.4 kg and 101 ethanol is added to this residue, briefly heated to 60 ° C and left to stand overnight at room temperature. A precipitate is thus obtained which contains the L-oxyproline while the L-proline Remains dissolved in the ethanol. The ethyl alcoholic solution is separated from the precipitate, after the ethanol has been distilled off, the glassy residue is dissolved in water and by adding the appropriate amount of picric acid, the L-proline is deposited as picrate. The precipitate, which contains the L-oxyproline, is dissolved in a little water, possibly the adhering alcohol is removed by heating and by adding picric acid the L-oxyproline isolated as a picrate.

Claims

PATENT CLAIM: Further embodiment of the method for isolating L-proline, L-oxyproline and L-arginine from gelatine hydrolyzate according to patent application V 18663 IVb / 12q, characterized in that from a gelatin by hydrolysis obtained solution removes all of the arginine in a manner known per se as flavianate, treated the residue obtained after evaporation of the filtrate with methanol, after removal of the insoluble precipitate that has formed, the methanol solution evaporates and the residue treated with ethanol, wherein L-proline dissolves in the ethanol, the in a known manner, e.g. B. as picrate, can be isolated while the in ethanol dissolves the insoluble part in water and isolates the L-oxyproline as a picrate from the solution.