DE1058054B

DE1058054B - Process for the preparation of 6-fluoro-1-dehydrohydrocortisone 6-fluoro-1-dehydrocortisone and their 21-esters

Info

Publication number: DE1058054B
Application number: DEU4991A
Authority: DE
Inventors: John Alexander Hogg; George Basil Spero
Original assignee: Upjohn Co
Current assignee: Pharmacia and Upjohn Co
Priority date: 1957-01-18
Filing date: 1957-12-17
Publication date: 1959-05-27

Description

Verfahren zur Herstellung von 6-Fluor-l-dehydrohydrocortison 6-Fluor- 1-dehydrocortison und deren 21-Estern Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von 6-Fluor-l-dehydrohydrocortison 6-Fluor-1-dehydrocortison und deren 21-Estern.Process for the preparation of 6-fluoro-l-dehydrohydrocortisone 6-fluoro 1-dehydrocortisone and its 21-esters The invention relates to a method for the production of 6-fluoro-1-dehydrohydrocortisone and 6-fluoro-1-dehydrocortisone their 21-esters.

Die neuen Verbindungen gemäß der Erfindung besitzen wertvolleantirheumatische,antiarthritische, entzündungswidrige und glucocorticoide Wirkung. Wie aus der nachfolgenden Tabelle hervorgeht, in der die angegebenen Werte auf die mit 1 angenommene Wirkung des Hydrocortisons bezogen sind, ist ihre glucocorticoide und entzündungshemmende Wirkung der des Hydrocortisons weit überlegen. Dabei weisen sie nur eine geringe Salzretention auf. Ent- Gluco- zündungs- galz- corticoide hem- retention Wirkung tuende Wirkung 6a-Fluor-41-hydrocortison 81 814 gering 6a-Fluor-41-hydrocortison- acetat ........ ...... 100 25 gering 6a-Fluor-41-cortison ..... 22 - sehr gering 6a-Fluor-41-cortisonacetat 54 34 sehr gering Die neuen Verbindungen der Erfindung eignen sich daher ausgezeichnet zur Behandlung von entzündlichen Zuständen der Haut, Augen und Ohren von Menschen und wertvollen Haustieren, Kontaktdermatitis und anderen allergischen Erscheinungen. Sie können in den üblichen Dosierungsformen verabreicht werden, z. B. oral als Pillen, Tabletten und Kapseln oder in der für NebennierenrindenhormoneüblichenflüssigenFormzuInjektionszwecken. Zur topischen Anwendung kann man sie in Form. von Salben, Cremes, Lotionen u. dgl., mit oder ohne Antibiotika, Germicide u. dgl., benutzen.The new compounds according to the invention have valuable anti-inflammatory, anti-arthritic, anti-inflammatory and glucocorticoid effects. As can be seen from the table below, in which the values given are based on the effect of hydrocortisone assumed with 1, its glucocorticoid and anti-inflammatory effect is far superior to that of hydrocortisone. They only show a low level of salt retention. Development Gluco ignition Galz corticoid hem retention Having an effect effect 6a-fluoro-41-hydrocortisone 81 814 low 6a-fluoro-41-hydrocortisone- acetate ........ ...... 100 25 low 6a-fluoro-41-cortisone ..... 22 - very small amount 6a-fluoro-41-cortisone acetate 54 34 very small amount The new compounds of the invention are therefore eminently suitable for the treatment of inflammatory conditions of the skin, eyes and ears of humans and valuable domestic animals, contact dermatitis and other allergic phenomena. They can be administered in the usual dosage forms, e.g. Orally in the form of pills, tablets and capsules or in the liquid form conventional for adrenal cortex hormones for injection purposes. For topical use, they can be given in the form. of ointments, creams, lotions and the like, with or without antibiotics, germicides and the like.

Die Verbindungen gemäß der Erfindung können nach folgendem Formelschema hergestellt werden: in dem R eine ß-ständige Oxygruppe oder Ketosauerstoff, Ac den Acylrest einer Carbonsäure mit 1 bis 12 C-_4tomen und R' Wasserstoff oder einen Acylrest der angegebenen Art darstellt.The compounds according to the invention can be prepared according to the following equation: in which R is a β-oxy group or keto oxygen, Ac is the acyl radical of a carboxylic acid with 1 to 12 carbon atoms and R 'is hydrogen or an acyl radical of the type specified.

Bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens wird 6-Fluor-5,1 lß,17a-trioxy-21-acyloxy-pregnan 3,20-dion unter Verwendung von Chlorwasserstoff oder Girards Reagens T in 4(5)-Stellung in bekannter Weise dehydratisiert. Für die Dehydratisierung eignen sich ferner Essigsäureanhydrid, p-Toluolsulfonsäure und Essigsäure oder Thionylchlorid und Pyridin. Dabei sind Reaktionsbedingungen, die die llß-ständige Oxygruppe angreifen könnten, zu vermeiden.When carrying out the process according to the invention, 6-fluoro-5.1 lβ, 17a-trioxy-21-acyloxy-pregnane 3,20-dione using hydrogen chloride or Girard's reagent T in the 4 (5) position is dehydrated in a known manner. For the Also suitable for dehydration are acetic anhydride, p-toluenesulfonic acid and Acetic acid or thionyl chloride and pyridine. There are reaction conditions that could attack the llß-position oxy group, to avoid.

Das für das erfindungsgemäße Verfahren als Ausgangsstoff verwendete 6-Fluor-5,11ß,17a-trioxy-21-acyloxypregnen-3,20-dion kann in der Weise hergestellt werden, daß man ein 3-Ketal eines llß-Oxy (bzw. Keto)-4,17(20)-pregnadien-3-on-21-carbonsäureesters, das nach dem Verfahren der USA.-Patentschrift 2 707184 erhältlich ist, in das entsprechende 5(6)-Epoxyd überführt, den Epoxydring mit Fluorwasserstoff spaltet, den erhaltenen 6-Fluor-5,11ß-dioxy-17(20)-pregnen-3-on-21-carbonsäureester bzw. sein 11-KetoAnaloges ketalisiert, darauf die 21ständige Carbonsäureestergruppe zur Oxygruppe reduziert, diese anschließend v erestert und danach die 17(20)-Stellungunter Bildungdesge«-ünschten6-Fluor-5,1lß,17a-trioxy-21-acyloxy-pregnen-3,20-dion oxydativ hydrolysiert.That used as starting material for the process according to the invention 6-fluoro-5,11β, 17a-trioxy-21-acyloxypregnen-3,20-dione can be prepared in the manner be that a 3-ketal of a llß-oxy (or keto) -4,17 (20) -pregnadien-3-one-21-carboxylic acid ester, obtainable by the method of U.S. Pat. No. 2,707,184 to the corresponding 5 (6) epoxy transferred, cleaves the epoxy ring with hydrogen fluoride, the obtained 6-Fluoro-5,11ß-dioxy-17 (20) -pregnen-3-one-21-carboxylic acid ester or its 11-keto analog ketalized, then the 21 carboxylic acid ester group is reduced to the oxy group, this is then esterified and then the 17 (20) position with the formation of the desired 6-fluoro-5,11ß, 17a-trioxy-21-acyloxy-pregnen-3,20-dione oxidatively hydrolyzed.

Die Dehy drierung der 1(2)-Stellung des 6-Fluor-l 1ß, 17a-dioxy-21-acyloxy-4-pregnen-3,20-dions kann in bekannter Weise mikrobiologisch unter Verwendung von Organismen der Gattung Septomyxa oder Fusarium erfolgen. Wird während der Fermentation etwas 21-Oxyverbindung gebildet, so kann man diese nach bekannten Verfahren wieder verestern. Die Dehydrierung kann auch chemisch unter Verwendung von Selendioxyd durchgeführt werden, das als Dehydrierungsmittel bekannt ist. Vor der Dehydrierung der 1(2)-Stellung kann das 6-Fluor-11ß,17a-dioxy-21-acyloxy-4-pregnen-3,20-dion nach dem Verfahren der USA.-Patentschrift 2 751402 zum entsprechenden 11-Ketoderivat oxydiert werden.The dehydration of the 1 (2) position of 6-fluoro-l 1ß, 17a-dioxy-21-acyloxy-4-pregnen-3,20-dione can be microbiologically processed in a known manner using organisms of the genus Septomyxa or Fusarium can be done. Becomes some 21-oxy compound during fermentation formed, they can be re-esterified by known methods. The dehydration can also be carried out chemically using selenium dioxide, which as Dehydrating agent is known. Before dehydration of the 1 (2) position, that can 6-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acyloxy-4-pregnen-3,20-dione according to the method of the USA patent 2 751402 to be oxidized to the corresponding 11-keto derivative.

Die 21ständige Acyloxygruppe des nach der Dehydrierung der 1(2)-Stellung erhaltenen 6-Fluor-llß,17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dions bzw. seines 11-Ketoanalogen kann dann in den freien 21-Alkohol umgewandelt werden. Vorzugsweise führt man die Hydrolyse mit mindestens einem Moläquivalent eines Alkalimetallbikarbonats in einer praktisch sauerstofffreien Lösung aus einem niedrigen Alkanol und Wasser bei Temperaturen zwischen 10 und 30°C durch, wobei man vor Zutritt von Luftsauerstoff schützt. Nach Beendigung der Hydrolyse wird mit einer Säure neutralisiert, z. B. mit Essigsäure, und das hydrolvsierte Produkt durch Abdampfen des Lösungsmittels und Kristallisation, Extraktion mit Methylenchlorid od. dgl. ,gewonnen. Das erfindungsgemäß hergestellte 6-Fluor-11ß,17a-di oxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dionundseinl l-Ketoanaloges sowie diediesen Verbindungen zugrunde liegenden 21-Alkohole können in Form der 6a- oder 6ß-Epimeren vorliegen. Das beschriebene Verfahren führt vorwiegend zur Bildung der 6ß-Epimeren. Das 6a-Epimere kann aus dem erhaltenen Gemisch chromatographisch oder durch fraktionierte Kristallisation abgetrennt werden. Obgleich auch die Gemische aus 6a- und 6ß-Epimerem therapeutische Wirksamkeit besitzen, ist es manchmal erwünscht, durch Trennung oder Epimerisierung der Gemische das 6a-Epimere herzustellen, das noch stärker wirksam ist als das 6ß-Epimere. Die Epimerisierung des 6ß-Epimeren kann in bekannter Weise dadurch erfolgen, daß man dieses oder Mischungen, in denen es vorwiegend enthalten ist, bei Temperaturen von O' C oder darunter in einem praktisch wasserfreien Medium mit einer wasserfreien Mineralsäure, wie Chlorwasserstoffsäure, behandelt. Während der Zugabe der Säure sollte die Mischung unter O' C oder mindestens unter Zimmertemperatur gehalten werden. Darauf wird mit verdünntem Alkali und dann mit Wasser gewaschen, anschließend getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Das 6a-Fluorprodukt kann aus dem rohen Reaktionsprodukt gewonnen und durch Umkristallisieren gereinigt werden. Die Epimerisierung der 6ß-Stellung kann gegebenenfalls auch vor der Dehydrierung der 1(2)-Stellung durchgeführt werden. Sie ist in gleicher Weise auf den freien Alkohol nie auf das 21Acylat anwendbar.The 21-position acyloxy group of the 6-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione or its 11-keto analog obtained after the dehydrogenation of the 1 (2) position can then be converted into the free 21-alcohol can be converted. The hydrolysis is preferably carried out with at least one molar equivalent of an alkali metal bicarbonate in a practically oxygen-free solution of a lower alkanol and water at temperatures between 10 and 30 ° C., protection against ingress of atmospheric oxygen. After the hydrolysis has ended, it is neutralized with an acid, e.g. B. with acetic acid, and the hydrolyzed product by evaporation of the solvent and crystallization, extraction with methylene chloride or the like. Obtained. The 6-fluoro-11β, 17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione and its 1-keto analog, as well as the 21-alcohols on which these compounds are based, can be in the form of the 6a- or 6β-epimers are present. The process described leads predominantly to the formation of the 6 [beta] epimers. The 6a-epimer can be separated from the mixture obtained by chromatography or by fractional crystallization. Although the mixtures of 6α and 6β-epimers also have therapeutic activity, it is sometimes desirable to separate or epimerize the mixtures to produce the 6α-epimer, which is even more potent than the 6β-epimer. The epimerization of the 6β-epimer can be carried out in a known manner by treating it or mixtures in which it is predominantly contained at temperatures of 0 ° C. or below in a practically anhydrous medium with an anhydrous mineral acid, such as hydrochloric acid. During the addition of the acid, the mixture should be kept below O 'C or at least below room temperature. It is then washed with dilute alkali and then with water, then dried and concentrated under reduced pressure. The 6a-fluorine product can be recovered from the crude reaction product and purified by recrystallization. The epimerization of the 6ß-position can optionally also be carried out before the dehydrogenation of the 1 (2) position. It is equally applicable to the free alcohol, never to the acylate.

Dieerfindungsgemäßherstellbaren Verbindungenkönnen in weitere therapeutisch wertvolle Substanzen übergeführt werden. Ihre 9a-Halogenderivate z. B. besitzen bei geringer minerälcorticoider Wirkung ebenfalls hohe entzündungswidrige und glucocorticoide Wirksamkeit, die der in 9a-Stellung nicht halogenierten Verbindungen oftmals sogar überlegen ist. Sie können dadurch hergestellt werden, daß man das 6-Fluor-11ß-17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dion mit N-Bromacetamid und wasserfreiem Schwefeldioxyd behandelt, darauf unter Ausfällung von 6-Fluor-17a-oxy-21-acyloxy-1,4,9(11)-pregnatrien-3,20-dion mit Eiswasser verdünnt, die erhaltene Verbindung in Methylenchlorid und tert.-Butylalkohol mit Perchlorsäure und h-Bromacetamid oder N-Jodsuccinimid umsetzt und aus der erhaltenen Mischung mit Eiswasser 9a-Brom (bzw. Jod)-6-fluor-11ß,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion ausfällt. Dieses wird in Acetonlösung bei Rückflußtemperatur mit wasserfreiem Kaliumacetat zum 6-Fluor-9ß,11ß-oxido-17a-oxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dion umgesetzt, das in Methylenchloridlösung mit wäßrigem Fluorwasserstoff bei Zimmertemperatur 9a, 6-Difluor-1 lß,17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dion ergibt. Mit wäßriger Salzsäure bei z. B. -5°C erhält man 6-Fluor-9a-chlor-llß,17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadien-3,20-dion. Die genannten Dihalogenverbindungen können in bekannterWeise zu den entsprechenden11-Ketoanalogen oxydiert werden. Ferner kann vor oder nach der Oxydation der 11ß-ständigen Oxygruppe die 21ständige Acyloxygruppe in üblicher Weise hydrolysiert werden.The compounds which can be prepared according to the invention can also be used therapeutically valuable substances are transferred. Your 9a-halogen derivatives z. B. own with a low mineral corticoid effect also high anti-inflammatory and glucocorticoid effects Effectiveness that of the compounds not halogenated in the 9a-position often even is superior. They can be prepared by using the 6-fluoro-11ß-17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione treated with N-bromoacetamide and anhydrous sulfur dioxide, then with precipitation of 6-fluoro-17a-oxy-21-acyloxy-1,4,9 (11) -pregnatriene-3,20-dione diluted with ice water, the compound obtained in methylene chloride and tert-butyl alcohol with perchloric acid and converts h-bromoacetamide or N-iodosuccinimide and from the mixture obtained with ice water 9a-bromine (or iodine) -6-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione fails. This is in acetone solution at reflux temperature with anhydrous potassium acetate converted to 6-fluoro-9ß, 11ß-oxido-17a-oxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione, that in methylene chloride solution with aqueous hydrogen fluoride at room temperature 9a, 6-difluoro-11, 17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione. With watery Hydrochloric acid at z. B. -5 ° C gives 6-fluoro-9a-chloro-11ß, 17a-dioxy-21-acyloxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione. The dihalogen compounds mentioned can in a known manner the corresponding 11-keto analogs are oxidized. Furthermore, before or after the Oxidation of the 11ß-position oxy group the 21-position acyloxy group in the usual way be hydrolyzed.

Das folgende Beispiel erläutert das erfindungsgemäße Verfahren.The following example explains the method according to the invention.

Beispiel a 6ß-Fluor-llß,17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dion (6ß-Fluor-hydrocortison-acetat) Eine Lösung von 100 mg 6ß-Fluor-5a,llß,17a-trioxy-21-acetoxy-allopregnan-3,20-dion in 4,9 ccm Essigsäure und 0,1 ccm Wasser wird 1 Stunde unter Rückfluß erhitzt, gekühlt, mit 50 ccm Wasser verdünnt und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird über synthetisches Magnesiumsilikat, bekannt unter der Handelsbezeichnung >>Florisil..., chromatographiert, wobei die mit Methylenchlorid plus 10°/o Aceton erhaltene Fraktion (77 mg) bei der Umkristallisation aus Aceton-Hexankohlenwasserstoffen 38 mg 6ß-Fluor-llß, 17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dion (6ß-Fluorhy drocortisonacetat) vom Smp. 210 bis 218°C ergibt. Die Infrarot- und Ultraviolettspektralanalyse bestätigen die angenommene Struktur.Example a 6ß-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dione (6ß-fluoro-hydrocortisone-acetate) A solution of 100 mg 6ß-fluoro-5a, 11ß, 17a-trioxy-21-acetoxy-allopregnan-3,20-dione in 4.9 cc acetic acid and 0.1 cc water is refluxed for 1 hour, cooled, diluted with 50 ccm of water and evaporated to dryness under reduced pressure. The residue is made over synthetic magnesium silicate, known under the trade name >> Florisil ..., chromatographed, with methylene chloride plus 10% acetone fraction obtained (77 mg) on recrystallization from acetone-hexane hydrocarbons 38 mg 6ß-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dione (6ß-fluorohydrocortisone acetate) of m.p. 210 to 218 ° C. Confirm the infrared and ultraviolet spectral analysis the adopted structure.

Beispiel b 6ß-Fluor-11ß,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion Ein Nährmedium, das 1 % Dextrosehydrat, 2 % Maisquellwasser mit einem Feststoffgehalt von 600/, und Leitungswasser enthielt, wurde mit Natriumhydroxyd auf den p11-Wert 4,9 eingestellt, dann 30 Minuten bei einem Druck von etwa 1 Atmosphäre mit Dampf sterilisiert, gekühlt und mit einer 24 Stunden alten Sporenkultur von Septomyxa affinis, ATCC 6737 geimpft. Das Medium wurde unter Durchblasen steriler Luft ('/"Volumen Luft/ Volumen Medium) gerührt. Nach 24stündiger Fermentation bei Zimmertemperatur betrug der pH-Wert etwa 7,4. Dieser Kultur gab man eine Lösung von 6ß-Fluorllß,17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dion (6ß-Fluorhydrocortison-21-acetat) in Diäthylformamid zu. Die Herstellung der Lösung erfolgte durch Auflösen von 5 Teilen Steroid in 100 Teilen Lösungsmittel. Dem Gärmedium wurden pro Liter etwa 10 ccm Lösung zugesetzt. Die Fermentation wurde weitere 48 Stunden fortgesetzt und dann das Mycel und die Flüssigkeit gründlich mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte wurden mit Natriumbikarbonatlösung, darauf mit Wasser gewaschen, getrocknet und im Vakuum zu einem schwach viskosen Rückstand konzentriert. Nach der Veresterung der während der Fermentation gebildeten freien 21 ständigen HydroxylgruppemitEssigsäureanhydrid und das 6ß-Fluorllß,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion als schwach gefärbtes kristallines Produkt isoliert.Example b 6β-Fluoro-11β, 17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione A nutrient medium containing 1 % dextrose hydrate, 2 % corn steeple with a solids content of 600 % and tap water became adjusted to a p11 value of 4.9 with sodium hydroxide, then sterilized with steam for 30 minutes at a pressure of about 1 atmosphere, cooled and inoculated with a 24 hour old spore culture of Septomyxa affinis, ATCC 6737. The medium was stirred while sterile air was bubbled through it ('/ "volume air / volume medium). After fermentation for 24 hours at room temperature, the pH was about 7.4. This culture was given a solution of 6β-Fluorlβ, 17a-dioxy-21 -acetoxy-4-pregnen-3,20-dione (6β-fluorohydrocortisone-21-acetate) in diethylformamide. The solution was prepared by dissolving 5 parts of steroid in 100 parts of solvent. The fermentation medium was about 10 ccm of solution per liter The fermentation was continued for an additional 48 hours and then the mycelium and liquid were extracted thoroughly with methylene chloride, the extracts were washed with sodium bicarbonate solution, then with water, dried and concentrated in vacuo to a slightly viscous residue formed free 21 hydroxyl groups with acetic anhydride and the 6ß-Fluorlß, 17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione as a weakly colored crystalline product isol iert.

Beispiel c Isomerisierung von 6ß- zu 6a-Fluor-11ß,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion (6ß-Fluor-1-dehydro-hydrocortison-21-acetat) Eine Lösung von 0,132 g 6ß-Fluor-l-dehydrohydrocortison-21-acetat in 12 ccm Chloroform und 0,1 ccm absolutem Alkohol wird in einem Eis-Salz-Bad auf -10°C gekühlt und durch die Lösung langsam 21/2 Stunden lang wasserfreier Chlorwasserstoff hindurchgeleitet. Dabei wird die Temperatur zwischen -5 und -15°C gehalten. Die Lösung wird dann mit 25 ccm Chloroform verdünnt, mit verdünntem Natriumbikarbonat und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck bei 60°C oder darunter zur Trockne eingedampft. Die Umkristallisation des Rückstandes aus Aceton-Hexankohlenwasserstoffen ergibt reines 6a-Fluor-l-dehydrohydrocortison-21-acetat.Example c Isomerization of 6β- to 6α-fluoro-11β, 17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione (6ß-fluoro-1-dehydro-hydrocortisone-21-acetate) A solution of 0.132 g of 6ß-fluoro-1-dehydrohydrocortisone-21-acetate in 12 cc of chloroform and 0.1 cc of absolute alcohol is placed in an ice-salt bath -10 ° C and slowly anhydrous hydrogen chloride through the solution for 21/2 hours passed through. The temperature is kept between -5 and -15 ° C. the Solution is then diluted with 25 cc of chloroform, with dilute sodium bicarbonate and water, dried over anhydrous sodium sulfate and reduced under reduced pressure Pressure evaporated to dryness at 60 ° C or below. The recrystallization of the The residue from acetone-hexane hydrocarbons gives pure 6a-fluoro-1-dehydrohydrocortisone-21-acetate.

Beispiel d 6a-Fluor-11ß,17a,21-trioxy-1,4-pregnadien-3,20-dion (6a-Fluor-l-dehydrohydrocortison) Das erhaltene 6a-Fluor-l-dehydrohydrocortison-21-acetat wird unter vorzugsweise sauerstofffreien Bedingungen und Verwendung eines Überschusses an Alkalimetallbikarbonat, wie Kaliumbikarbonat, hydrolysiert. Die Temperatur beträgt dabei vorteilhaft zwischen 10 und etwa 30°C. Anschließend wird die hydrolysierte Lösung mit einer Säure, wie Essigsäure, neutralisiert, wobei 6a-Fluor-1 -dehydrohydrocortison vom Smp. 202 bis 204'C erhalten wird.Example d 6a-fluoro-11ß, 17a, 21-trioxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione (6a-fluoro-1-dehydrohydrocortisone) The 6a-fluoro-1-dehydrohydrocortisone-21-acetate obtained is preferably below oxygen-free conditions and use of an excess of alkali metal bicarbonate, such as potassium bicarbonate, hydrolyzed. The temperature is advantageously between 10 and about 30 ° C. The hydrolyzed solution is then treated with an acid such as Acetic acid, neutralized, with 6a-fluoro-1 -dehydrohydrocortisone from m.p. 202 to 204'C is obtained.

In gleicher Weise, wie oben beschrieben, kann 6ß-Fluor-17a-oxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,11,20-trion (6ß-Fluorcortison-21-acetat), das nach dem Verfahren der USA.-Patentschrift 2 751402 erhältlich ist, in 6a-Fluor-17a,21-dioxy-1,4-pregnadien-3,11,20-trion (6a-Fluor-l-dehydrocortison) vom Smp. 216 bis 220°C (unter Zersetzung) übergeführt werden.In the same way, as described above, 6ß-fluoro-17a-oxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,11,20-trione can be used (6β-fluorocortisone-21-acetate) obtained by the method of U.S. Pat. No. 2,751,402 is available in 6a-fluoro-17a, 21-dioxy-1,4-pregnadiene-3,11,20-trione (6a-fluoro-l-dehydrocortisone) from melting point 216 to 220 ° C (with decomposition) are transferred.

Das nach Beispiel a erhältliche 6ß-Fluor-11ß,17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dion kann auch vor der Dehydrierung in die entsprechende 6a-Fluorverbindung übergeführt werden.The 6ß-fluoro-11ß, 17a-dioxy-21-acetoxy-4-pregnen-3,20-dione obtainable according to Example a can also be converted into the corresponding 6a-fluorine compound before the dehydrogenation will.

Beispiel e 6a-Fluor-1 lß,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion In fünf 250 ccm fassende Erlenmeyerkolben wurden jeweils 100 ccm eines Nährmediums aus 10/, Glukose, 20/, Maisquellwasser (600/, Feststoffe) und Leitungswasser gegeben und auf einen pH-Wert von 4,9 gebracht. Das Medium wurde 45 Minuten bei einem Druck von 1,05 kg/cm2 sterilisiert und mit einer 1 bis 2 Tage alten Kultur von Septomyxa affinis ATCC 6737 geimpft. Die Erlenmeyerkolben wurden bei Zimmertemperatur (etwa 26 bis 28°C) 3 Tage geschüttelt. Nach Ablauf dieser Zeit wurden die gesamten 500 ccm als Impfstoff für 101 des gleichen Glukose-Maisquellwasser-Mediums verwendet, die zusätzlich 10 ccm eines Antischaummittels (ein Gemisch aus Specköl und Oktadekanol) enthielten. Das Gärgefäß wurde in ein Wasserbad gestellt, auf eine Temperatur von 28°C gebracht, gerührt (300 Umdrehungen j e Minute) und belüftet (0,31 Luft auf 51 Lösung). Nach 24stündiger Inkubation, nachdem sich ein gutes Wachstum entwickelt hatte, wurden 5 g 6a-Fluorhydrocortison-21-acetat sowie 0,5 g 3-Keto-bisnor-4-cholen-22-al, gelöst in 25 ccm Dimethylformamid, zugegeben und die Inkubation bei der gleichen Temperatur (28°C) und Belüftung 72 Stunden fortgeführt (End-pH-Wert 8,3). Das Mycel wurde abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das Waschwasser wurde mit dem Filtrat vereinigt und das Ganze 3mal mit j e 21 eines Methylenchlorid-Äthylacetat-Gemisches (3: 1) extrahiert. Die Entfernung des Lösungsmittels durch Verdampfung ergab 5,25 g rohen Feststoff, der 2mal mit je 4 ccm Methylenchlorid verrieben wurde, worauf 2,4g 6a-Fluor-11ß,17a,21-trioxy-1,4-pregnadien-3,20-dion mit einem Schmelzpunkt von 198 bis 203'C erhalten wurden. Die aus Aceton umkristallisierte Analysenprobe schmolz bei 202 bis 204°C. Die Analyse ergab eine Drehung von [a]D = -I- 73° (Dioxan) sowie die folgenden Werte: Analyse: C"H2705F.Example e 6a-fluoro-11, 17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione In five 250 cc Erlenmeyer flasks each 100 cc of a nutrient medium from 10 /, glucose, 20 /, corn steep water (600 /, solids) and tap water and brought to a pH of 4.9. The medium was sterilized for 45 minutes at a pressure of 1.05 kg / cm 2 and inoculated with a 1 to 2 day old culture of Septomyxa affinis ATCC 6737. The Erlenmeyer flasks were shaken at room temperature (about 26 to 28 ° C) for 3 days. At the end of this time, the entire 500 cc was used as a vaccine for 101 of the same glucose-corn steep liquor medium, which additionally contained 10 cc of an antifoam (a mixture of lard oil and octadecanol). The fermentation vessel was placed in a water bath, brought to a temperature of 28 ° C., stirred (300 revolutions per minute) and aerated (0.31 air to 51 solution). After incubation for 24 hours, after good growth had developed, 5 g of 6a-fluorohydrocortisone-21-acetate and 0.5 g of 3-keto-bisnor-4-cholen-22-al, dissolved in 25 cc of dimethylformamide, were added and the Incubation at the same temperature (28 ° C) and aeration continued for 72 hours (final pH 8.3). The mycelium was filtered off and washed with water. The washing water was combined with the filtrate and the whole thing was extracted 3 times with 21 of a methylene chloride-ethyl acetate mixture (3: 1) each time. Removal of the solvent by evaporation gave 5.25 g of crude solid, which was triturated twice with 4 cc of methylene chloride each time, whereupon 2.4 g of 6a-fluoro-11ß, 17a, 21-trioxy-1,4-pregnadiene-3.20- dione with a melting point of 198 to 203'C were obtained. The analytical sample recrystallized from acetone melted at 202 to 204 ° C. The analysis showed a rotation of [a] D = -I- 73 ° (dioxane) and the following values: Analysis: C "H2705F.

Berechnet: ....... C66,65, H7,10, F5,02; gefunden: . . . . . . . . C66,68, H7,19, F5,49.Calculated: ....... C66.65, H7.10, F5.02; found: . . . . . . . . C66.68, H7.19, F5.49.

Eine Lösung von 2 g 6a-Fluor-11ß,17a,21-trioxy-1,4-pregnadien-3,20-dion in 10 ccm Pyridin und 10 ccm Essigsäureanhydrid wurde bei Zimmertemperatur 17 Stunden stehengelassen und dann in ein Gemisch aus Eis und Wasser gegossen. Das ausgefallene kristalline Produkt wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Die Ausbeute an 6a-Fluor-I1f3,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadien-3,20-dion betrug 1,32g; Schmelzpunkt 232 bis 237°C. Die Analysenprobe schmolz bei 238 bis 242°C; [aIn = + 102° (Aceton).A solution of 2 g of 6a-fluoro-11ß, 17a, 21-trioxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione in 10 cc of pyridine and 10 cc of acetic anhydride was left to stand at room temperature for 17 hours and then in a mixture of ice and Poured water. The precipitated crystalline product was filtered off, washed with water and dried. The yield of 6a-fluoro-I1f3,17a-dioxy-21-acetoxy-1,4-pregnadiene-3,20-dione was 1.32 g; Melting point 232 to 237 ° C. The analysis sample melted at 238 to 242 ° C; [aIn = + 102 ° (acetone).

Analyse: C"H"08F.Analysis: C "H" 08F.

Berechnet: ....... C 65,70, H 6,95, F 4,52; gefunden: . ....... C 65,58, H 7,16, F 4,39.Calculated: ....... C 65.70, H 6.95, F 4.52; found: . ....... C 65.58, H 7.16, F 4.39.

An Stelle des Essigsäureanhydrids können im obigen Verfahren auch andere Acylierungsmittel verwendet werden.Instead of acetic anhydride, in the above process other acylating agents can be used.

Claims

PATENT CLAIMS: 1. Process for the preparation of 6-fluoro-l-dehydrohydrocortisone, 6-fluoro-l-dehydrocortisone and their 21-esters of the general formula in which R denotes a hydroxyl group or keto oxygen and R 'denotes hydrogen or the acyl radical of a carboxylic acid having 1 to 12 carbon atoms, characterized in that a compound of the formula is used in a manner known per se in which Ac is an acyl radical of the type mentioned, dehydrated in the 4 (5) position, optionally the hydroxyl group oxidized, the 11-oxy or 11-keto compound dehydrogenated in the 1 (2) position, optionally the 6β-halogen compound obtained epimerized before or after the dehydrogenation to the 6α-halogen compound and optionally the 21-position ester group is saponified or the 21-position ester group saponified in microbiological dehydrogenation is acylated again.

2. The method according to claim 1, characterized in that that the dehydration in the 1 (2) position is carried out microbiologically.

3. The method according to claim 2, characterized in that one introduces the Double bond in 1 (2) position a microorganism of the genus Septomyxa is used.