DE102008036934B4 - Bioreaktor mit Fenster - Google Patents
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Abstract
Bioreaktor mit mindestens einem transparenten Fenster (5, 12, 13), dessen Innenseite (6) von einem in einem Reaktorinnenraum (3) anordenbaren Medium (15) berührbar ist, dadurch gekennzeichnet, dass das Fenster (5, 12, 13) auf seiner dem Reaktorinnenraum (3) zugewandten Innenseite (6) eine photokatalytische Beschichtung (7) aufweist, die von der der Innenseite (6) abgewandten Außenseite her mit mindestens einer Lichtquelle aktivierbar ist, dass eine in den Reaktorinnenraum (3) durch dessen Wandung (2) hineinragende Sondenaufnahme (4) zur Aufnahme einer Messsonde (9) vorgesehen ist, dass die Sondenaufnahme (4) von dem Fenster (5) verschlossen ist oder dass die Messsonde (9) als eine Transmissionssonde (10) ausgebildet ist, die mit ihrem freien Ende (11) in den Reaktorinnenraum (3) des Bioreaktors (1') hineinragt und die zwei einander beabstandete Fenster (12, 13) aufweist, die einen Küvettenspalt (14) begrenzen, der von dem umgebenden Medium (15) des Reaktorinnenraumes (3) ausgefüllt ist.
Description
- Gebiet der Erfindung
- Die Erfindung betrifft einen Bioreaktor mit mindestens einem transparenten Fenster, dessen Innenseite von einem in einem Reaktorinnenraum anordenbaren Medium berührbar ist.
- Stand der Technik
- Nicht-invasive optische Messverfahren erlangen zunehmend an Bedeutung für das online Monitoring von Bioprozessen. Der besondere Vorteil dieser Messverfahren beruht darauf, dass geeignete Sensorsysteme über optische Fenster an beispielsweise Bioreaktoren bzw. Fermenter angekoppelt werden können, wodurch jegliche durch off-line Probenahme entstehende Kontaminationsgefahr ausgeschlossen wird. Ein weiterer Vorteil besteht darin, dass optische Messverfahren im Allgemeinen sehr schnell und kontinuierlich und aufgrund der schwachen Wechselwirkungen zwischen elektromagnetischer Strahlung und Materie zerstörungsfrei arbeiten.
- An die, für diese Messverfahren nötigen optischen Fenster werden besondere Anforderungen gestellt. Sie müssen erstens für den verwendeten Wellenlängenbereich transparent sein und dürfen zweitens während des Messbetriebes nicht durch Strahlung absorbierende Verschmutzungen wie z. B. eukaryotische bzw. prokaryotische Zellen oder Kulturmediumsbestandteile verblockt werden.
- Aus der
EP 1 269 243 B1 ist eine in einen Anschlussport eines Fermenters (Bioreaktors) einsetzbare Mikroskopsonde bekannt, die eine Überwachung bzw. Steuerung des Bioprozesses direkt in der Kulturbrühe bzw. dem im Reaktorinnenraum befindlichen Medium ermöglicht. - Nachteilig bei der bekannten Vorrichtung, die sich grundsätzlich bewährt hat, ist, dass die mit dem zu untersuchenden Medium in Kontakt kommende Probezone der Mikroskopsonde relativ umständlich durch von außen zugeführte Reinigungsflüssigkeit gereinigt werden muss.
- Aus der
DE 10 2004 019 234 B3 ist ein Bioreaktor zur Kultivierung von phototropen Mikroorganismen bekannt, der über eine Beleuchtungseinrichtung mit einer Mehrzahl von als Leuchtstoffröhren ausgebildeten Lichtquellen verfügt, welche lichtdurchlässige Begasungsrohre und ein lichtdurchlässiges Standrohr zur Durchführung der phototropen Reaktionen der Mikroorganismen belichten. - Nachteilig bei der bekannten Vorrichtung, die sich grundsätzlich bewährt hat, ist, dass die Lichtdurchlässigkeit der mit dem Kulturmedium in Kontakt kommenden Begasungs- und Standrohre durch Ablagerungen an den Reaktorinnenräumen zugewandten Innenseiten im Laufe der Betriebszeit herabgesetzt wird und aufwendige Reinigungsprozeduren erforderlich machen.
- Aus der
DE 38 22 451 C2 ist eine Vorrichtung zur Verhinderung des Bewuchses von Messflächen von Sensoren in Bioreaktoren bekannt. Dabei soll vor der Messfläche des Sensors eine auf lebende Zellen toxisch wirkende Zone aufgebaut werden, in die durch eine vor und/oder seitlich der Messfläche des Sensors angeordnete Membran ein Gas, Gasgemisch oder eine Flüssigkeit in toxisch wirksamer Konzentration eindringt - Aus der
WO 97/07 069 A1 - Weiterhin sind Verfahren zur Herstellung von Titandioxidbeschichtungen beispielsweise aus der
DE 19 25 606 B2 und derDE 10 2006 044 076 A1 bekannt. - Aufgabenstellung
- Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, die Standzeit von optischen Fenstern in Bioreaktoren zu verlängern und möglichst ohne Unterbrechung des Betriebsvorganges für eine zeitraubende Reinigung der medienberührten Seite des Fensters auszukommen.
- Darstellung der Erfindung
- Die Aufgabe wird in Verbindung mit dem Oberbegriff des Anspruches 1 dadurch gelöst, dass das Fenster auf seiner dem Reaktorinnenraum zugewandten Innenseite eine photokatalytische Beschichtung aufweist, die von der der Innenseite abgewandten Außenseite her mit mindestens einer Lichtquelle aktivierbar ist, dass eine in den Reaktorinnenraum durch dessen Wandung hineinragende Sondenaufnahme zur Aufnahme einer Messsonde vorgesehen ist, dass die Sondenaufnahme von dem Fenster verschlossen ist oder dass die Messsonde als eine Transmissionssonde ausgebildet ist, die mit ihrem freien Ende in den Reaktorinnenraum des Bioreaktors hineinragt und die zwei einander beabstandete Fenster aufweist, die einen Küvettenspalt begrenzen, der von dem umgebenden Medium des Reaktorinnenraumes ausgefüllt ist.
- Dadurch, dass die photokatalytische Beschichtung des medienberührten Fensters von einer Lichtquelle aktivierbar ist, wird das Anhaften von Medienpartikeln verhindert bzw. bereits an der Beschichtung des Fensters anhaftende Partikel oder Substanzen werden durch eine Licht initiierte photokatalytische Oxidation wieder entfernt. Damit wird eine wesentlich verbesserte Standzeit des Fensters und damit eine wesentlich verbesserte Langzeit-Performance der optischen Sensorsysteme erreicht.
- Vorzugsweise handelt es sich bei der Lichtquelle um eine UV-Lichtquelle.
- In einer bevorzugten Ausführungsform ist die Erfindung anwendbar auf Bioreaktoren zur Kultivierung phototroper Mikroorganismen, so genannten Photobioreaktoren. Hierbei ist zumindest ein Teil der Wände des Reaktorraumes mit dem transparenten Fenster ausgestattet, wobei das Fenster auf seiner dem Reaktorinnenraum zugewandten Innenseite eine photokatalytische Beschichtung aufweist, die von der der Innenseite abgewandten Außenseite her mit mindestens einer Lichtquelle aktivierbar ist. Unter einem erfindungsgemäßen Fenster soll hier ganz allgemein auch ein transparenter Bereich in der Wandung des Reaktorinnenraumes verstanden werden.
- Überraschenderweise hat sich gezeigt, dass beim Betrieb derartig ausgerüsteter Photobioreaktoren über einen Zeitraum von 20 Tagen die Strahlungsintensität unverändert bleibt und kein sichtbarer Bewuchs des Fensters festzustellen war.
- In die Sondenaufnahme kann ohne jede Kontaminationsgefahr eine Messsonde eingeführt werden, die bei Bedarf zur Selbstreinigung des Fensters gegen eine einführbare UV-LED ausgetauscht werden kann. Besonders günstig ist es jedoch, die UV-LED direkt in der Messsonde anzuordnen, wodurch auf einen wechselseitigen Austausch verzichtet werden kann. Auch können dadurch problemlos die UV-Beleuchtungsintervalle erhöht werden.
- Bei einer Transmissionssonde ist beispielsweise jedem der Fenster eine UV-LED zugeordnet. Dabei kann ein optisches Signal über ein Umlenkprisma dem ersten Fenster und weiter über den vom umgebenden Medium gefüllten Küvettenspalt über das zweite Fenster einer optischen Auswerteeinheit zugeführt werden. Besonders vorteilhaft kann das erste Fenster von einem beschichteten Teilbereich des Umlenkprismas gebildet werden. Dies ist insbesondere platzsparend.
- Das optische Signal wird über eine erste Lichtleitfaser zu dem Umlenkprisma und über eine dem zweiten Fenster vorgelagerte zweite Lichtleitfaser zur optischen Auswerteeinheit geleitet, die beispielsweise als ein Spektrometer ausgebildet ist.
- Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist die Beschichtung als eine nanokristalline Titandioxidbeschichtung ausgebildet. Dabei ist die Beschichtung auf einem Fenster aus einem alkaliarmen Glas angeordnet. Geeignete Gläser stellen zum Beispiel Quarz-, Saphir-, natriumarmes Float- und Borosilikatglas dar.
- Das Fenster als optisches Element kann beispielsweise in Form eines Prismas oder Kristalls mit gedämpfter Totalreflexion (ATR-Kristall) vorliegen.
- Wegen ihrer chemischen Beständigkeit und ihrer guten Temperaturbeständigkeit sind die oben genannten Gläser für eine Beschichtung im Tauchbad (Dip-Coating) mit anschließender Calcination bei einer maximalen Temperatur von 500°C besonders geeignet.
- Nach einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist das UV-Licht von mindestens einer UV-LED erzeugbar, die ein Emissionsmaximum zwischen 200 und 400 nm, beispielsweise 360 nm, aufweist.
- Das für die Initiierung der photokatalytischen Oxidation notwendige UV-Licht lässt sich durch eine dem Fenster benachbarte UV-LED platzsparend und relativ einfach ohne große Verluste der aktiven Beschichtung zuführen. Die verwendete Wellenlänge ist für die gewählte Beschichtung mit TiO2-Nanopartikeln besonders geeignet.
- Weitere Ausführungsformen sind beispielsweise Fenster für 90° und 180° Streulichtsensoren zur Trübungsmessung, mit der Biomassebestimmungen erfolgen.
- Gemäß einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist mindestens der den Reaktorinnenraum aufweisende Reaktorbehälter als Einmalbehälter ausgebildet.
- Besonders bei der Verwendung von Bioreaktoren als Einwegbioreaktoren, wie sie häufig mit flexibler Wandung als Beutel (Bags) verwendet werden, ist der Einsatz eines erfindungsgemäß beschichteten Fensters von großer Bedeutung, da sich die Standzeit des gesamten Bioreaktors erheblich erhöht.
- Weitere Merkmale der Erfindung ergeben sich aus der nachfolgenden ausführlichen Beschreibung und den beigefügten Zeichnungen, in denen bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung beispielhaft veranschaulicht sind.
- Kurzbeschreibungen der Zeichnungen
- In den Zeichnungen zeigen:
-
1 : eine Seitenansicht eines Bioreaktors mit einer in den Reaktorinnenraum hineinragenden Sondenaufnahme mit einem optischen Fenster und eingeführter UV-LED, -
2 : eine Seitenansicht eines Bioreaktors mit einer in den Reaktorinnenraum hineinragenden Sondenaufnahme mit einem optischen Fenster und eingeführter Messsonde, -
3 : eine vergrößerte Darstellung einer als Transmissionssonde ausgebildeten Messsonde und -
4 : eine Seitenansicht eines Bioreaktors im Ausriss mit der in den Reaktorinnenraum hineinragenden Transmissionssonde von3 . - Beschreibung der Ausführungsbeispiele
- Ein Bioreaktor
1 besteht im Wesentlichen aus einem von einer flexiblen Wandung2 umgrenzten Reaktorinnenraum3 und einer Sondenaufnahme4 mit einem optischen Fenster5 . - Die Sondenaufnahme
4 der Ausführungsform nach1 und2 wird zu dem Reaktorinnenraum3 hin von dem optischen Fenster5 verschlossen, das auf seiner dem Reaktorinnenraum3 zugewandten Innenseite6 eine fotokatalytische Beschichtung7 aufweist. Die Beschichtung ist als eine nanokristalline Titandioxidbeschichtung (TiO2) ausgebildet. Das optische Fenster5 besteht aus einem Borosilikatglas. - In die Sondenaufnahme
4 kann zur Aktivierung der fotokatalytischen Beschichtung7 eine UV-LED8 eingeführt und zur Durchführung des Messvorganges kann eine Messsonde9 eingeführt werden. Die UV-LED8 kann aber auch in die Messsonde9 integriert sein. - Entsprechend dem Ausführungsbeispiel der
3 und4 ist die Messsonde9 als eine Transmissionssonde10 ausgebildet, die mit ihrem freien Ende11 in den Reaktorinnenraum3 des Bioreaktors1' hineinragt und ein erstes optisches Fenster12 und beabstandet ein zweites optisches Fenster13 aufweist, die einen Küvettenspalt14 begrenzen, der von dem umgebenden Medium15 des Reaktorinnenraumes3 ausgefüllt ist. - Dabei ist ein optisches Signal
16 über eine erste Lichtleitfaser17 zu einem dem ersten Fenster12 benachbarten Umlenkprisma18 den Küvettenspalt14 überbrückend zu einer dem zweiten Fenster13 vorgelagerten zweiten Lichtleitfaser19 und weiter zu einer nicht dargestellten optischen Auswerteeinheit, die beispielsweise als Spektrometer ausgebildet ist, zuführbar. Das erste Fenster12 im Ausführungsbeispiel nach3 und4 wird von einem beschichteten Teilbereich des Umlenkprismas18 gebildet. - Der Bioreaktor
1 ,1' bzw. sein Reaktorbehälter20 ist als Einmalbehälter mit flexibler Wandung2 ausgebildet. - Zur Herstellung des beschichteten Fensters
5 ,12 ,13 kann wie folgt vorgegangen werden: - 1. Katalysatorsynthese:
- Si-Binder wird vorgelegt und unter Zusatz von 65%iger HNO3 gerührt. Eine pH-Einstellung des Binders erfolgt im sauren Bereich unter langsamer Zugabe von Ti-Precursor im Eisbad mit nachfolgendem Rühren wobei ein organisches Lösemittel gemischt langsam über Tropftrichter im Eisbad zugegeben wird. Nach Rühren über Nacht erfolgt zur Kontrolle eine Messung der Viskosität.
- 2. Beschichtungsvorgang:
- Ziel des Beschichtungsvorganges ist es, eine transparente, photokatalytisch aktive, stabile Filmschicht zu erreichen. Die Beschichtung erfolgt durch Eintauchen (Dip-Coating). Als Material des Fensters
5 ,12 ,13 bzw. Substrats wird ein alkaliarmes Glas, beispielsweise Borosilikatglas, verwendet. Eine Vorbehandlung des Substrats erfolgt durch Auskochen in konzentrierter Schwefelsäure und anschließendem Auskochen in Natronlauge. - Dabei werden im Ausführungsbeispiel folgende Beschichtungsparameter verwendet:
Eintauchgeschwindigkeit: 10–30 mm/s
Haltezeit: 10 bis 20 s
Ziehgeschwindigkeit: 1 bis 3 mm/s
Relative Luftfeuchte: 20 bis 40% - 3. Kalzination
- Zur Kalzination wurden folgende Parameter verwendet:
Maximale Temperatur: 500°C
Aufheizen: innerhalb von 30 bis 60 min
Halten der maximalen Temperatur: 60 min
Abkühlen: über mehrere Stunden
Claims (11)
- Bioreaktor mit mindestens einem transparenten Fenster (
5 ,12 ,13 ), dessen Innenseite (6 ) von einem in einem Reaktorinnenraum (3 ) anordenbaren Medium (15 ) berührbar ist, dadurch gekennzeichnet, dass das Fenster (5 ,12 ,13 ) auf seiner dem Reaktorinnenraum (3 ) zugewandten Innenseite (6 ) eine photokatalytische Beschichtung (7 ) aufweist, die von der der Innenseite (6 ) abgewandten Außenseite her mit mindestens einer Lichtquelle aktivierbar ist, dass eine in den Reaktorinnenraum (3 ) durch dessen Wandung (2 ) hineinragende Sondenaufnahme (4 ) zur Aufnahme einer Messsonde (9 ) vorgesehen ist, dass die Sondenaufnahme (4 ) von dem Fenster (5 ) verschlossen ist oder dass die Messsonde (9 ) als eine Transmissionssonde (10 ) ausgebildet ist, die mit ihrem freien Ende (11 ) in den Reaktorinnenraum (3 ) des Bioreaktors (1' ) hineinragt und die zwei einander beabstandete Fenster (12 ,13 ) aufweist, die einen Küvettenspalt (14 ) begrenzen, der von dem umgebenden Medium (15 ) des Reaktorinnenraumes (3 ) ausgefüllt ist. - Bioreaktor nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Fenster (
5 ,12 ,13 ) Teil des Reaktorinnenraumes (3 ) eines Photobioreaktors ist. - Bioreaktor nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Beschichtung (
7 ) als eine nanokristalline Titandioxidbeschichtung ausgebildet ist. - Bioreaktor nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Fenster (
5 ,12 ,13 ) aus einem alkaliarmen Glas ausgebildet ist. - Bioreaktor nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass die Lichtquelle UV-Licht abgibt, das von mindestens einer UV-LED (
8 ) erzeugbar ist. - Bioreaktor nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass die UV-LED (
8 ) ein Emissionsmaximum zwischen 200 und 400 nm aufweist. - Bioreaktor nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass in die Sondenaufnahme (
4 ) eine Messsonde (9 ) und/oder die mindestens eine UV-LED (8 ) einführbar ist. - Bioreaktor nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass jedem der Fenster (
12 ,13 ) eine UV-LED (8 ) zugeordnet ist. - Bioreaktor nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, dass ein optisches Signal (
16 ) über ein Umlenkprisma dem ersten Fenster (12 ) und weiter über den vom umgebenden Medium (15 ) gefüllten Küvettenspalt (14 ) über das zweite Fenster (13 ) einer optischen Auswerteeinheit zuführbar ist. - Bioreaktor nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass das optische Signal (
16 ) über eine erste Lichtleitfaser (17 ) zu dem Umlenkprisma (18 ) und über eine dem zweiten Fenster (13 ) vorgelagerte zweite Lichtleitfaser (19 ) zur optischen Auswerteeinheit leitbar ist. - Bioreaktor nach einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens der den Reaktorinnenraum (
3 ) aufweisende Reaktorbehälter (20 ) als Einmalbehälter mit flexibler Wandung (2 ) ausgebildet ist.
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