DE102007025423A1 - Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung - Google Patents

Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung Download PDF

Info

Publication number
DE102007025423A1
DE102007025423A1 DE200710025423 DE102007025423A DE102007025423A1 DE 102007025423 A1 DE102007025423 A1 DE 102007025423A1 DE 200710025423 DE200710025423 DE 200710025423 DE 102007025423 A DE102007025423 A DE 102007025423A DE 102007025423 A1 DE102007025423 A1 DE 102007025423A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
triphenylphosphonium
mitochondria
general formula
derivatives
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
DE200710025423
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Prof. Dr. med. Ristow
Marc Dr. Birringer
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BIRRINGER, MARC, PROF.DR., DE
Original Assignee
Friedrich Schiller Universtaet Jena FSU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Friedrich Schiller Universtaet Jena FSU filed Critical Friedrich Schiller Universtaet Jena FSU
Priority to DE200710025423 priority Critical patent/DE102007025423A1/de
Priority to PCT/DE2008/000910 priority patent/WO2008145116A2/de
Publication of DE102007025423A1 publication Critical patent/DE102007025423A1/de
Withdrawn legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6552—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a six-membered ring
    • C07F9/65522—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a six-membered ring condensed with carbocyclic rings or carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5407—Acyclic saturated phosphonium compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/54—Quaternary phosphonium compounds
    • C07F9/5442—Aromatic phosphonium compounds (P-C aromatic linkage)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having sulfur atoms, with or without selenium or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
    • C07F9/655345—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having sulfur atoms, with or without selenium or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the sulfur atom being part of a five-membered ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Aufgabe war es, pharmakologische Wirkstoffe in weit größerer Vielfalt definiert in Mitochondrien zu akkumulieren und dort gezielt sowie mit hoher Spezifität und Effektivität wie auch ohne störende Nebeneffekte dieser Wirkstoffe freizusetzen. Erfindungsgemäß sind Triphenylphosphonium-Derivate der allgemeinen Verbindung I $F1 vorgesehen, welche mit der jeweils gebundenen biologisch aktiven Substanz in Mitochondrien transportiert werden. In diesen wird die biologisch aktive Substanz durch mitochondriale Enzyme freigesetzt. Anwendung finden diese Derivate beispielsweise bei der Induktion der Apoptose in Krebszellen (Chemotherapie), zur Steigerung der mitochondrialen Aktivität (z. B. oxidative Phosphorylierung) und damit zur Verzögerung altersassoziierter Erkrankungen, wie z. B. Diabetes mellitus Typ 2.

Description

  • Die Erfindung betrifft Triphenylphosphonium-Derivate sowie ihre Verwendung zur gezielten Anreicherung und Freisetzung von Substanzen in Mitochondrien, insbesondere um biologisch bzw. pharmakologisch wirksame Substanzen in die Mitochondrien einzubringen sowie dort zur Entfaltung ihrer Wirkung definiert anzureichern.
  • Anwendung finden diese Derivate beispielsweise bei der Induktion der Apoptose in Krebszellen (Chemotherapie), zur Steigerung der mitochondrialen Aktivität (z. B. oxidative Phosphorylierung) und damit zur Verzögerung altersassoziierter Erkrankungen, wie z. B. Diabetes mellitus Typ 2.
  • Der Prozess des Alterns ist im gesamten Tierreich mit einem Verfall physiologischer Funktionen begleitet. Der Verlust von körperlicher Ausdauer, Fitness sowie Regenerationsfähigkeit lässt sich praktisch in allen Tierspezies feststellen und ist vermutlich auf die Beeinträchtigung des mitochondrialen Energiestoffwechsels zurückzuführen.
  • Allgemeine Alterungsprozesse, aber auch spezifische altersassoziierte Erkrankungen, wie Krebs, Diabetes mellitus Typ 2, Übergewicht/Adipositas sowie neurodegenerative Erkrankungen, stehen im engen Zusammenhang mit einer verminderten Mitochondrienaktivität.
  • Mitochondrien sind faden- bis kugelförmige Zellorganellen. Sie bestehen aus einer äußeren Hüllmembran und einer inneren Membran. Ihre wichtigste Funktion ist Energiegewinnung durch oxidative Phosphorylierung bei der Zellatmung. Mitochondrien kommen verteilt im Cytosol (Zellplasma) einer eukaryotischen Zelle vor. Ihre Größe beträgt etwa 0,5 μm bis 10 μm in der Länge. Besonders viele Mitochondrien finden sich in Zellen, die viel Energie verbrauchen (z. B. Muskelzellen, Nervenzellen, Sinneszellen, Eizellen).
  • Seit Jahrzehnten kennt man aus Untersuchungen an verschiedenen Tierspezies den Zusammenhang einer erhöhten Lebenserwartung mit einer Kalorierestriktion (calorie restriction, CR). Als Ursache dieser Lebensverlängerung vermutet man eine Reduktion von reaktiven Sauerstoffspezies (reactive oxygen species, ROS).
  • Diese entstehen in der Atmungskette am Komplex I und III durch die so genannten „electron leaks", Elektronen, die sich mit Sauerstoff zu Radikalen verbinden. Sie können u. a. die mitochondriale DNA schädigen und somit einen weiteren Verlust der Mitochondrienaktivität verursachen. Die Kalorierestriktion, so die Hypothese, vermindert die Atmungsketten-Aktivität durch den Mangel an Substrat und führt so zu einer Verminderung von reaktiven Sauerstoffspezies.
  • Andere Modelle zeigen hingegen, dass eine Kalorierestriktion zu einer Aktivierung der Mitochondrien führt. Dies kann durch hormonelle Faktoren, durch so genannte „uncoupling" Proteine, bzw. durch eine gesteigerte Aktivität und Effektivität der Atmungskette-Enzymkomplexe verursacht werden. In diesem Fall geht man von einer Reduktion der reaktiven Sauerstoffspezies aus.
  • In diesen gegensätzlichen Hypothesen stehen in beiden Fällen neben der Atmungskette und dem Krebs-Zyklus alternative Wege zur zellulären Energieproduktion im Zentrum der aktuellen Forschung.
  • Als Konsequenz wird zur Verminderung von reaktiven Sauerstoffspezies vor allem die Einnahme von Antioxidantien empfohlen. Antioxidantien wurden in einer Vielzahl von prospektiven Studien mit den oben genannten Krankheiten assoziiert, positive Resultate waren jedoch die Ausnahme (Halliwell, B.: Lancet 355, 2000, 1179–1180) und neuere Analysen zeigen sogar eine Reduktion der Lebenserwartung durch den übermäßigen Konsum von Antioxidantien und Supplementen (Bjelakovic, JAMA 297, 2007, 842–57).
  • Aus pharmazeutischer Sicht bieten die Mitochondrien ein interessantes Ziel für Medikamente. Mitochondrien führen eine Vielzahl physiologischer Prozesse durch. Sie produzieren Adenosintriphosphat (ATP), regulieren den intrazellulären Ca2+-Haushalt und leiten den programmierten Zelltod (Apoptose) ein. Mitochondrien benutzen ca. 90 % des aufgenommenen Sauerstoffs zur oxidativen Phosphorylierung (OXPHOS) bzw. ATP-Synthese.
  • Hierbei werden Elektronen zum Sauerstoff transportiert. Dieser Elektronentransport generiert einen Protonengradient, die treibende Kraft für die Produktion von Adenosintriphosphat (ATP) aus Adenosindiphosphat (ADP). So entsteht eine negative Potentialdifferenz von 150–180 mV in der inneren Membran, das so genannte mitochondriale Membranpotential. Hieraus folgt, dass im Besonderen lipophile Kationen in der Lage sind, sich im Inneren der Mitochondrien anzureichern.
  • Die Bemühungen, biologisch wirksame Substanzen wie z. B. Antioxidantien, DNA oder Proteine in Mitochondrien einzuschleusen, werden unter dem Begriff der mitochondrialen Medizin, bzw. des mitochondrialen Targeting zusammengefasst (Weissig, V.: Expert Opin Drug Deliv 2, 2005, 89–102 oder Sheu, S. S., Nauduri, D. and Anders, M. W.: Biochim Biophys Acta 1762, 2006, 256–265). Hierbei wurden natürliche Antioxidantien kovalent an einen positiv geladenen Triphenylphosphonium(TPP)-Rest gebunden. Neben Vitamin E (MitoVit E) (Smith, R. A., Porteous, C. M., Coulter, C. V. and Murphy, M. P.: Eur J Biochem 263, 1999, 709–716) und einem Ubiquinonderivat (MitoQ) (Kelso, G. F., Porteous, C. M., Coulter, C. V., Hughes, G., Porteous, W. K., Ledgerwood, E. C., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 276, 2001, 4588–4596) wurden auch nichtnatürliche Antioxidantien an den TPP-Tag gebunden, wie z. B. Ebselen (MitoPeroxidase) (Filipovska, A., Kelso, G. F., Brown, S. E., Beer, S. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 24113–24126), ein Glutathion-Peroxidase-Mimetikum oder der Spin-Trap MitoPBN (Murphy, M. P., Echtay, K. S., Blaikie, F. H., Asin-Cayuela, J., Cocheme, H. M., Green, K., Buckingham, J. A., Taylor, E. R., Hurrell, F., Hughes, G., Miwa, S., Cooper, C. E., Svistunenko, D. A., Smith, R. A. and Brand, M. D.: J Biol Chem 278, 2003, 48534-48545), vgl. auch 1.
  • Es konnte eine bis zu 1000fache Anreicherung dieser Verbindungen in den Mitochondrien erzielt werden.
  • In all den genannten Studien wurde die aktive Verbindung kovalent und damit dauerhaft an den Triphenylphosphonium-Tag (TPP-Tag) gebunden, was zur Folge hat, dass die Verbindungen als Antioxidanz bzw. Kofaktor wirken, jedoch nicht oder nur teilweise in ihrer natürlichen Umgebung, wie zum Beispiel im Intermembranraum (James, A. M., Cocheme, H. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 21295–21312). Daneben ist der Transport mitochondrialer Stoffwechselprodukte streng reguliert, und eine Anreicherung dieser Moleküle in den Mitochondrien ist kaum möglich, ohne den Gesamtorganismus zu belasten.
  • Darüber hinaus ist bekannt, dass bestimmte pharmakologisch interessante Wirkstoffe durch die äußere Hüllmembran in Mitochondrien diffundieren und auf diese Weise dort aufgenommen werden können (Galluzzi L. et al.: Oncogene 25, 2006, 4812–4830).
  • Von gravierendem Nachteil ist, dass alle diese Diffusionsprozesse "ungerichtet" verlaufen und sowohl bezüglich der Einbringung der Wirkstoffe als auch deren Freisetzung in den Mitochondrien so gut wie nicht beeinflusst werden können und somit nicht steuerbar sind.
  • Der Erfindung liegt deshalb die Aufgabe zu Grunde, Substanzen, insbesondere pharmakologische Wirkstoffe, in weit größerer Vielfalt definiert in Mitochondrien zu akkumulieren und dort gezielt sowie mit hoher Spezifität und Effektivität, wie auch ohne störende Nebeneffekte dieser Wirkstoffe, freizusetzen.
  • Erfindungsgemäß werden zur gezielten Anreicherung und Freisetzung von Substanzen in Mitochondrien Triphenylphosphonium-Derivate gemäß der allgemeinen Formel I
    Figure 00040001
    vorgeschlagen, wobei
    P = Phosphonium-Ion
    n (1, 2, 3, ...) = Laufzahl der Methylengruppe
    R1 = O-X
    R2 = CO-Y
    R3 = NH-X
    X = Säurefunktion und
    Y = Alkohol, Amin, Thiol
    sind.
  • Solche Derivate sind beispielweise Triphenylphosphonium-Ester der Formel II
    Figure 00050001
    oder der Formel III
  • Figure 00050002
  • Die genannten Triphenylphosphonium-Derivate erlauben es, gebundene biologisch aktive Substanzen in die Mitochondrien einzuschleusen und über eine Aldehyd-Dehydrogenase-2(ALDH-2)-vermittelte Spaltung wieder freizusetzen. Unter biologisch aktiven Substanzen werden Nährstoffe, Antioxidantien, Protein-Agonisten und Protein-Antagonisten verstanden. Die Nährstoffe werden unterteilt in die endogenen Metabolite des mitochondrialen Stoffwechsels wie z. B. Verbindungen des Krebs-Zyklus (alpha-Ketosäuren, Dikarbonsäuren) sowie in exogene Verbindungen, die nicht ohne Transportsystem in die Mitochondrien eindringen können, wie z. B. Oxalat und Palmitat.
  • Mitochondrien werden im Körper als Hauptquelle der reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) angesehen, daher scheint es sinnvoll, Radikalfänger bzw. Antioxidantien dort gezielt anzureichern. Antioxidantien, wie z. B. Tocopherole oder Liponsäure, können in den Mitochondrien endogen nicht akkumuliert werden und sollen über das hier beschriebene Transportsystem in die Mitochondrien gelangen.
  • Triphenylphosphonium-Derivate gemäß der allgemeinen Formel I sind somit in der Lage, beliebige Moleküle in die Mitochondrien einzuschleusen. Die Verbindungen können insbesondere Vorteile für folgende Indikation bieten:
    • a) Verwendung bei genetischen Defekten im mitochondrialen Stoffwechsel: Mitochondriopathien zeichnen sich dadurch aus, dass es meist zu genetischen Defekten in mitochondrialen Enzymen kommt, die zur Energiegewinnung essentiell sind. Üblicherweise akkumulieren die Stoffwechselprodukte Laktat oder Pyruvat im Plasma, was zu Azidosen fuhrt. Gleichzeitig fehlen Stoffwechselprodukte, die durch den Mangel bzw. durch verminderte Aktivität von Enzymen nicht produziert werden. Mit den erfindungsgemäß vorgeschlagenen Verbindungen können diese Stoffwechselprodukte aufgefüllt werden, was die Bereitstellung von Energie über die Mitochondrien gewährleisten kann.
    • b) Verwendung zur metabolischen Aktivierung der Mitochondrien: Kofaktoren dienen zur Aufrechterhaltung der mitochondrialen Enzymaktivität. Hierzu zählen Thiamin, alpha-Liponsäure, Q10, Vitamin E und andere. Der Transport dieser Verbindungen ist jedoch streng reguliert, bzw. die Synthese erfolgt direkt in den Mitochondrein (alpha-Liponsäure, Q10). Der Einsatz der Triphenyiphosphonium-Derivate gemäß der allgemeinen Formel I kann den Mangel an diesen Faktoren beheben und damit die volle Funktion dieser Enzyme gewährleisten. Zu diesen Enzymen gehören unter anderen die Pyruvatdehydrogenase (alpha-Liponsäure und Thiamin), das 2-Ketoglutaratdehydrogenasesystem (alpha-Liponsäure) sowie die Enzyme der Atmungskette (Q10).
    • c) Verwendung zur Induktion der Apoptose von Krebszellen: Der programmierte Zelltod (Apoptose) hat oftmals seinen Ursprung in den Mitochondrien. Der Organismus kann so kranke oder mutierte Zellen eliminieren. In Krebszellen hingegen ist dieser Mechanismus unterbunden, so dass es zu einer gesteigerten Proliferation und letztendlich zu einem manifesten Tumor kommt. Durch den Einsatz der besagten Verbindungen können Apoptose induzierende Chemotherapeutika in die Mitochondrien eingeschleust werden und über die Generierung von reaktiven Sauerstoffspezies die Zelle in den Zelltod treiben. Durch die Kopplung an den Triphenylphosphonium-Anker ist es möglich, Chemotherapeutika in einer deutlich verminderten Konzentration zu verabreichen und den Organismus dadurch weniger zu stressen.
  • Die Erfindung soll nachstehend anhand von Ausführungsbeispielen näher erläutert werden.
  • In der Zeichnung zeigen:
  • 1: Dünnschichtchromatographische Aufnahme der Inkubation von Mitochondrien mit einem Triphenylphosphonium-Ester der Formel II bei unterschiedlichen Inkubationszeiten (vgl. Ausführungsbeispiel 3)
  • 2: Dünnschichtchromatographische Aufnahme der Inkubation von Mitochondrien mit einem Triphenylphosphonium-Ester der Formel II sowie Benomyl bei unterschiedlichen Inkubationszeiten (vgl. ebenfalls Ausführungsbeispiel 3)
  • Ausführungsbeispiel 1:
  • Herstellung von Triphenylphosphonium-Ester der Formel II
    Figure 00070001
  • Der Triphenylphosphonium-Ester wird nach folgendem allgemeinen Reaktionsschema A hergestellt: Reaktionsschema A
    Figure 00080001
  • Verbindungen der allgemeinen Formel V, in welcher X jeweils unabhängig voneinander Chlor oder Brom ist, sind kommerziell erhältlich (n = 1, X = Chlor) oder werden gemäß Schritt 1. des vorstehenden Reaktionsschemas A (siehe auch Schmidt, U. et al.: Angew. Chem. 96, 1984, 310-311) aus der Verbindung der Allgemeinen Formel IV mit vorzugsweise einem Äquivalent eines zyklischen Ethers (z. B. Oxetan; n = 2, Tetrahydrofuran; n = 3) umgesetzt, um das Phosphoniumsalz zu erhalten. Die Reaktion wird in einem aromatischen Lösungsmittel, wie z. B. Toluol, Xylol oder Benzol, vorzugsweise Toluol (bei einer Temperatur zwischen ca. 80°C und ca. 140°C), durchgeführt.
  • In einem zweiten Schritt des Reaktionsschemas A wird die Verbindung der Formel V bei Raumtemperatur in einem polaren aprotischen Lösungsmittel, wie z. B. Acetonitril (CH3CN), Dimthylsulfoxid (DMSO) oder N,N-Dimethylformamid (DMF), gelöst, mit Carbonsäure versetzt und in Gegenwart von 1,5 Äquivalenten einer Base, wie beispielsweise Triethylamin, Diisopropyl-ethylamin (DIPEA) oder Dimethyl-aminopyridin (DMAP), vorzugsweise DMAP und 1,2 Äquivalenten eines Kondensationsreagenz, wie z. B. Dicyclohexylcarbodiimid (DCC), Diisopropylcarbodiimid (DIC), 18 bis 24 Stunden gerührt.
  • Der Ausdruck "Carbonsäure", wie er hier verwendet wird, bezeichnet eine natürlich oder nichtnatürlich vorkommende aliphatische oder aromatische organische Säure, wie z. B. alpha-Liponsäure, Palmitinsäure, 5-Aminolävulinsäure, Lonidamine, Triiodthyronin, Thyroxin, Benzoesäure, Acetylsalicylsäure und andere.
  • Ausführungsbeispiel 2:
  • Herstellung von Triphenylphosphonium-Ester der Formel III
    Figure 00090001
  • Der Triphenylphosphonium-Ester wird nach folgendem allgemeinen Reaktionsschema B hergestellt: Reaktionsschema B
    Figure 00090002
  • Eine Verbindung der allgemeinen Formel VIII, in welcher X jeweils unabhängig voneinander Chlor oder Brom ist, wird in einem ersten Schritt aus einer Verbindung der allgemeinen Formel VII mit vorzugsweise einem Äquivalent einer omega-bromierten Carbonsäure (z. B. 3-Bromopropionsäure; n = 1,4-Bromobuttersäure; n = 2) umgesetzt, um das Phosphoniumsalz zu erhalten (siehe auch JP 2002338587 ). Die Reaktion wird in einem aromatischen Lösungsmittel, wie z. B. Toluol, Xylol oder Benzol, vorzugsweise Toluol (bei einer Temperatur zwischen ca. 80°C und ca. 140°C), durchgeführt.
  • In einem zweiten Schritt des Reaktionsschemas B wird die Verbindung der Formel VIII bei Raumtemperatur in einem polaren aprotischen Lösungsmittel, wie z. B. Acetonitril (CH3CN), Dimthylsulfoxid (DMSO) oder N,N-Dimethylformamid (DMF), gelöst, mit Alkohol (Thiol/Amin) versetzt und in Gegenwart von 1,5 Äquivalenten einer Base, wie z. B. Triethylamin, Diisopropyl-ethylamin (DIPEA) oder Dimethyl-aminopyridin (DMAP), vorzugsweise DMAP und 1,2 Äquivalenten eines Kondensationsreagenz, wie z. B. Dicyclohexylcarbodiimid (DCC), Diisopropylcarbodiimid (DIC), 18 bis 24 Stunden gerührt.
  • Der Ausdruck "Alkohol (Thiol/Amin)", wie er hier verwendet wird, bezeichnet natürlich oder nichtnatürlich vorkommende aliphatische oder aromatische organische Alkohole, Thiole oder Amine, wie beispielsweise alpha-Tocopherol, Tocotrienol, und andere.
  • Ausführungsbeispiel 3:
  • Gezielte Freisetzung von biologisch aktiven Substanzen mittels mitochondrialer Enzymsysteme am Beispiel des Triphenylphosphonium-Esters der Formel II
    Figure 00100001
  • Zur Demonstration der Wirkungsweise wurden Mitochondrien isoliert, indem frische Schweineleber klein geschnitten und in einem 15 ml Dounce-Potter zerkleinert wurde. Nachdem die Stücke homogenisiert worden sind, wurde 10 min. zentrifugiert, und der Überstand verworfen. Das Pellet (Mitochondrien-Fraktion) wurde mit 5 ml (2 × 2.5 ml) Puffer suspendiert, aliquotiert und für die Versuche verwendet.
  • Der Triphenylphosphonium-Ester gemäß Formel II wurde als Stocklösungen (ca. 10 mM) vorzugsweise in Dimethylsulfoxid (DMSO) gelöst. In je einem 1 ml Probengefäß wurden 200 μl Succrose Puffer vorgelegt und je 10 μl isolierte Mitochondrien hinzugegeben. 10 μl der Stocklösung wurden dazu pipettiert und im Thermoschüttler bei 37 C für 1, 5, 10, 15, 20, 30 und 60 Minuten inkubiert.
  • Nach der entsprechenden Zeit wurden jeweils 90 μl CH3Cl/MeOH dazugeben, 30 Sekunden geschüttelt und 1 Minute bei 10 000 U/min zentrifugiert. Die obere Phase wurde abpipettiert und verworfen. Ein Aliquot der organischen Phase ist auf eine Dünnschichtfolie aufgetüpfelt und mit CH3Cl/MeOH entwickelt. Die Folie wurde getrocknet und mit Jod-Dampf angefärbt sowie digital gespeichert.
  • 1 zeigt als dünnschichtchromatographische Aufnahme die Umsetzung des Substrats (Verbindung der Formel II) durch mitochondriale Enzyme. Die Inkubation der Mitochondrien mit dem Triphenylphosphonium-Ester der Formel II ist zu unterschiedlichen Zeiten (in Minuten) dargestellt (K1 = Positiv-Kontrolle, K2 = Negativ-Kontrolle, -OH = Triphenylphosphoniumbutanol mit organischer Phase). Nach 60 Minuten ist das Substrat vollständig umgesetzt.
  • Der Ursprung der mitochondrialen Esteraseaktivität konnte durch die Wiederholung des Versuchs mit gleichzeitiger Inkubation mit Benomyl (10 μM) geklärt werden. Benomyl ist ein selektiver Inhibitor der ALDH-2.
  • 2 zeigt diese Inkubation (und vergleichsweise zu 1) ebenfalls als dünnschichtchromatographische Aufnahme wiederum in Darstellung zu unterschiedlichen Zeiten (K1 = Positiv-Kontrolle, K2 = Negativ-Kontrolle, -OH = Triphenylphosphoniumbutanol mit organischer Phase).
  • Aus 2 ist ersichtlich, dass hier der Triphenylphosphonium-Ester der Formel II nicht umgesetzt wurde, was in diesem Fall auf eine Inhibierung des Enzyms schließen lässt.
  • ZITATE ENTHALTEN IN DER BESCHREIBUNG
  • Diese Liste der vom Anmelder aufgeführten Dokumente wurde automatisiert erzeugt und ist ausschließlich zur besseren Information des Lesers aufgenommen. Die Liste ist nicht Bestandteil der deutschen Patent- bzw. Gebrauchsmusteranmeldung. Das DPMA übernimmt keinerlei Haftung für etwaige Fehler oder Auslassungen.
  • Zitierte Patentliteratur
    • - JP 2002338587 [0033]
  • Zitierte Nicht-Patentliteratur
    • - Halliwell, B.: Lancet 355, 2000, 1179–1180 [0010]
    • - Bjelakovic, JAMA 297, 2007, 842–57 [0010]
    • - Weissig, V.: Expert Opin Drug Deliv 2, 2005, 89–102 oder Sheu, S. S., Nauduri, D. and Anders, M. W.: Biochim Biophys Acta 1762, 2006, 256–265 [0013]
    • - Smith, R. A., Porteous, C. M., Coulter, C. V. and Murphy, M. P.: Eur J Biochem 263, 1999, 709–716 [0013]
    • - Kelso, G. F., Porteous, C. M., Coulter, C. V., Hughes, G., Porteous, W. K., Ledgerwood, E. C., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 276, 2001, 4588–4596 [0013]
    • - Filipovska, A., Kelso, G. F., Brown, S. E., Beer, S. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 24113–24126 [0013]
    • - Murphy, M. P., Echtay, K. S., Blaikie, F. H., Asin-Cayuela, J., Cocheme, H. M., Green, K., Buckingham, J. A., Taylor, E. R., Hurrell, F., Hughes, G., Miwa, S., Cooper, C. E., Svistunenko, D. A., Smith, R. A. and Brand, M. D.: J Biol Chem 278, 2003, 48534-48545 [0013]
    • - James, A. M., Cocheme, H. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 21295–21312 [0015]
    • - Galluzzi L. et al.: Oncogene 25, 2006, 4812–4830 [0016]
    • - Schmidt, U. et al.: Angew. Chem. 96, 1984, 310-311 [0029]

Claims (10)

  1. Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien gemäß der allgemeinen Formel I
    Figure 00120001
    wobei P = Phosphonium-Ion n (1, 2, 3, ...) = Laufzahl der Methylengruppe R1 = O-X R2 = CO-Y R3 = NH-X X = Carboxylfunktion und Y = Alkohol, Amin, Thiol sind.
  2. Triphenylphosphonium-Derivat gemäß Anspruch 1, gekennzeichnet durch einen Triphenylphosphonium-Ester der Formel II
    Figure 00120002
  3. Triphenylphosphonium-Derivat gemäß Anspruch 1, gekennzeichnet durch einen Triphenylphosphonium-Ester der Formel III
    Figure 00130001
  4. Verfahren zur Herstellung des Triphenylphosphonium-Esters gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass eine Verbindung der allgemeinen Formel V
    Figure 00130002
    in welcher X ein Halogen wie Chlor oder Brom ist, bei Raumtemperatur in einem polaren aprotischen Lösungsmittel, wie z. B. Acetonitril (CH3CN), Dimthylsulfoxid (DMSO) oder N,N-Dimethylformamid (DMF) gelöst, mit Carbonsäure versetzt und in Gegenwart von 1,5 Äquivalenten einer Base, wie beispielweise Triethylam in, Diisopropyl-ethylamin (DIPEA) oder Dimethyl-aminopyridin (DMAP), vorzugsweise DMAP, sowie 1,2 Äquivalenten eines Kondensationsreagenz wie z. B. Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder Diisopropylcarbodiimid (DIC) 18 bis 24 Stunden gerührt wird.
  5. Verfahren gemäß Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass zur Herstellung der Verbindung der allgemeine Formel V
    Figure 00140001
    eine Verbindung der allgemeinen Formel IV
    Figure 00140002
    in welcher X ein Halogen wie Chlor oder Brom ist, mit einem zyklischen Ether (z. B. Oxetan: n = 2, oder Tertrahydrofuran: n = 3) umgesetzt wird.
  6. Verfahren zur Herstellung des Triphenylphosphonium-Esters gemäß Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass in einem ersten Schritt eine Verbindung der allgemeinen Formel VII
    Figure 00140003
    mit einer halogenierten Carbonsäure zur Reaktion gebracht wird und dass in einem zweiten Schritt die daraus entstehende Verbindung der allgemeinen Formel VIII
    Figure 00150001
    in welcher in welcher X ein Halogen wie z. B. Chlor oder Brom ist, mit Alkohol, beispielsweise Thiol/Amin, zur Verbindung der allgemeinen Formel IX
    Figure 00150002
    umgesetzt wird.
  7. Verfahren zur Verwendung der Triphenylphosphonium-Derivate gemäß den Ansprüchen 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass die Triphenylphosphonium-Derivate mit der jeweils gebundenen biologisch aktiven Substanz in die Mitochondrien transportiert werden, in welchen die jeweils gebundene biologisch aktive Substanz durch mitochondriale Enzyme freigesetzt wird.
  8. Verfahren gemäß Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Triphenylphosphonium-Derivate bei genetischen Defekten im mitochondrialen Stoffwechsel eingesetzt werden, indem mangelnde Stoffwechselprodukte, wie beispielsweise Citrat, Succinat oder 2-Ketoglutarat, in die Mitochondrien eingeschleust werden.
  9. Verfahren gemäß Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Triphenylphosphonium-Derivate zur metabolischen Aktivierung der Mitochondrien Verwendung finden, indem Kofaktoren oder Antioxidantien, wie beispielsweise Thiamin, alpha-Liponsäure, Q10 und Vitamin E, zur Aufrechterhaltung der mitochondrialen Enzymaktivität in die Mitochondrien eingeschleust werden und damit das Auftreten altersassoziierter Erkrankungen, wie Diabetes Typ II und Krebs, reduziert werden können.
  10. Verfahren gemäß Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Triphenylphosphonium-Derivate zur Induktion der Apoptose von Krebszellen zum Einsatz kommen, indem Apoptose induzierende Chemotherapeutika in die Mitochondrien eingeschleust werden.
DE200710025423 2007-05-30 2007-05-30 Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung Withdrawn DE102007025423A1 (de)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE200710025423 DE102007025423A1 (de) 2007-05-30 2007-05-30 Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung
PCT/DE2008/000910 WO2008145116A2 (de) 2007-05-30 2008-05-29 Triphenylphosphonium-derivate zum gezielten transport und freisetzen von substanzen in mitochondrien sowie verfahren zu deren verwendung

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE200710025423 DE102007025423A1 (de) 2007-05-30 2007-05-30 Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DE102007025423A1 true DE102007025423A1 (de) 2008-12-04

Family

ID=39731640

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE200710025423 Withdrawn DE102007025423A1 (de) 2007-05-30 2007-05-30 Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung

Country Status (2)

Country Link
DE (1) DE102007025423A1 (de)
WO (1) WO2008145116A2 (de)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ307146B6 (cs) * 2015-03-31 2018-02-07 Kkcg Se Trifenylfosfoniové analogy biguanidu, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiva

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2265623B1 (de) 2008-03-14 2016-07-13 Cancure Limited Mitochondrialverabreichte antikrebsverbindungen
GB2585171B (en) 2015-02-19 2021-03-24 Council Scient Ind Res An antioxidant compound having anti atherosclerotic effect and preparation thereof
EP3612177A4 (de) 2017-04-21 2021-01-13 Lunella Biotech, Inc. Targeting von hypoxischen krebsstammzellen (cscs) mit doxycyclin: implikationen zur verbesserung der anti-angiogenesetherapie
US11197872B2 (en) 2017-04-21 2021-12-14 Lunella Biotech, Inc. Vitamin C and doxycycline: a synthetic lethal combination therapy for eradicating cancer stem cells (CSCs)
KR20200010343A (ko) 2017-05-19 2020-01-30 루넬라 바이오테크 인코포레이티드 안티미토신: 암 줄기 세포를 근절하기 위한 미토콘드리아 생물발생의 표적화 억제제
CN111565715A (zh) 2017-10-24 2020-08-21 卢内拉生物技术有限公司 Mitoflavoscin：含靶向黄素的酶通过抑制线粒体呼吸作用消除癌症干细胞(CSCS)
CA3083023A1 (en) 2017-11-24 2019-05-31 Lunella Biotech, Inc. Triphenylphosphonium-derivative compounds for eradicating cancer stem cells
WO2019108729A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Lunella Biotech, Inc. Repurposcins: targeted inhibitors of mitochondrial biogenesis for eradicating cancer stem cells
US11559527B2 (en) 2017-12-20 2023-01-24 Lunella Biotech, Inc. Targeting mitochondrial fission through mDIVI-1 derivatives
CN111836622A (zh) 2018-01-03 2020-10-27 威斯康星州医药大学股份有限公司 线粒体-氯尼达明、组合物和使用方法
CN112341493B (zh) * 2020-10-21 2023-08-15 重庆医药高等专科学校附属第一医院(重庆市职业病防治院重庆市第六人民医院重庆市中毒控制中心) 一种基于三苯基膦修饰的线粒体靶向褪黑素及其制备方法和应用
CN114716475A (zh) * 2022-03-04 2022-07-08 厦门大学 一种三苯基膦修饰舍曲林衍生物及其制备方法和应用
CN114748420B (zh) * 2022-04-12 2024-03-08 武汉科技大学 一种电荷自翻转激活线粒体靶向功效的两亲性聚合物胶束的制备方法
CN115417898B (zh) * 2022-08-02 2024-03-26 浙江工业大学 一种三苯基鏻单体化合物及其制备方法与在制备核酸递送纳米载体中的应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002338587A (ja) 2001-05-21 2002-11-27 Hokko Chem Ind Co Ltd カルボキシル基を含むホスホニウム塩の製造方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002338587A (ja) 2001-05-21 2002-11-27 Hokko Chem Ind Co Ltd カルボキシル基を含むホスホニウム塩の製造方法

Non-Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Bjelakovic, JAMA 297, 2007, 842-57
Filipovska, A., Kelso, G. F., Brown, S. E., Beer, S. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 24113-24126
Galluzzi L. et al.: Oncogene 25, 2006, 4812-4830
Halliwell, B.: Lancet 355, 2000, 1179-1180
James, A. M., Cocheme, H. M., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 280, 2005, 21295-21312
Kelso, G. F., Porteous, C. M., Coulter, C. V., Hughes, G., Porteous, W. K., Ledgerwood, E. C., Smith, R. A., and Murphy, M. P.: J Biol Chem 276, 2001, 4588-4596
Murphy, M. P., Echtay, K. S., Blaikie, F. H., Asin-Cayuela, J., Cocheme, H. M., Green, K., Buckingham, J. A., Taylor, E. R., Hurrell, F., Hughes, G., Miwa, S., Cooper, C. E., Svistunenko, D. A., Smith, R. A. and Brand, M. D.: J Biol Chem 278, 2003, 48534-48545
Schmidt, U. et al.: Angew. Chem. 96, 1984, 310-311
Smith, R. A., Porteous, C. M., Coulter, C. V. and Murphy, M. P.: Eur J Biochem 263, 1999, 709-716
Weissig, V.: Expert Opin Drug Deliv 2, 2005, 89-102 oder Sheu, S. S., Nauduri, D. and Anders, M. W.: Biochim Biophys Acta 1762, 2006, 256-265

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ307146B6 (cs) * 2015-03-31 2018-02-07 Kkcg Se Trifenylfosfoniové analogy biguanidu, způsob jejich přípravy a jejich použití jako léčiva

Also Published As

Publication number Publication date
WO2008145116A3 (de) 2009-09-03
WO2008145116A2 (de) 2008-12-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE102007025423A1 (de) Triphenylphosphonium-Derivate zum gezielten Transport und Freisetzen von Substanzen in Mitochondrien sowie Verfahren zu deren Verwendung
Yu et al. Insights into oxidized lipid modification in barley roots as an adaptation mechanism to salinity stress
Olszewska et al. Mitochondria as a pharmacological target: magnum overview
Fraenkel et al. Carnitine
Schapira Complex I: inhibitors, inhibition and neurodegeneration
Bracker et al. Continuity between cytoplasmic endomembranes and outer mitochondrial membranes in fungi
Murphy Development of lipophilic cations as therapies for disorders due to mitochondrial dysfunction
Sanz et al. Copper uptake mechanism of Arabidopsis thaliana high-affinity COPT transporters
Niehoff et al. Imaging by elemental and molecular mass spectrometry reveals the uptake of an arsenolipid in the brain of Drosophila melanogaster
Stahl et al. Phosphatidylcholines from Pieris brassicae eggs activate an immune response in Arabidopsis
Gruzman et al. Synthesis and characterization of new and potent α-lipoic acid derivatives
Corcelli et al. Mitochondria isolated in nearly isotonic KCl buffer: Focus on cardiolipin and organelle morphology
Teixeira et al. Development of hydroxybenzoic-based platforms as a solution to deliver dietary antioxidants to mitochondria
Yang et al. Detection of characteristic distributions of phospholipid head groups and fatty acids on neurite surface by time-of-flight secondary ion mass spectrometry
Gangolf et al. Thiamine triphosphate synthesis in rat brain occurs in mitochondria and is coupled to the respiratory chain
Grancara et al. Pathophysiological implications of mitochondrial oxidative stress mediated by mitochondriotropic agents and polyamines: the role of tyrosine phosphorylation
DE60121804T2 (de) Pharmazeutische zusammensetzung eines biguanin (metformin) und arginin
Marsching et al. Renal sulfatides: sphingoid base-dependent localization and region-specific compensation of CerS2-dysfunction1 [S]
Buitink et al. Dehydration-induced redistribution of amphiphilic molecules between cytoplasm and lipids is associated with desiccation tolerance in seeds
Novoselov et al. Spodoptera littoralis detoxifies neurotoxic 3-nitropropanoic acid by conjugation with amino acids
DE3110559C2 (de) Vollsynthetisches Zellkulturmedium
Baur et al. Steroidal saponins─ new sources to develop potato (Solanum tuberosum L.) Genotypes Resistant against Certain Phytophthora infestans Strains
Huang et al. Effects of coenzyme Q10 on growth performance and heart mitochondrial function of broilers under high altitude induced hypoxia
Chiu et al. Analysis of chlorogenic acid in sweet potato leaf extracts
Suzuki et al. Weight loss by Ppc-1, a novel small molecule mitochondrial uncoupler derived from slime mold

Legal Events

Date Code Title Description
R081 Change of applicant/patentee

Owner name: BIRRINGER, MARC, PROF.DR., DE

Free format text: FORMER OWNER: FRIEDRICH-SCHILLER-UNIVERSITAET JENA, 07743 JENA, DE

Effective date: 20130717

R005 Application deemed withdrawn due to failure to request examination

Effective date: 20140531