DE1003917B

DE1003917B - Process for the preparation of a complex concentrate produced by bacterial decomposition for the treatment of allergic diseases in general, asthma and rheumatism

Info

Publication number: DE1003917B
Application number: DEG18661A
Authority: DE
Inventors: Dr Miguel Liberio Gratacos
Original assignee: MIGUEL LIBERIO GRATACOS DR
Current assignee: MIGUEL LIBERIO GRATACOS DR
Priority date: 1955-12-23
Filing date: 1955-12-23
Publication date: 1957-03-07

Description

Verfahren zur Herstellung eines durch bakterielle Zersetzung erzeugten Komplexkonzentrats zur Behandlung von allergischen Krankheiten im allgemeinen, Asthma und Rheumatismus Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuer therapeutischer Mittel zur Behandlung allergischer Krankheiten, insbesondere ein Verfahren zur Züchtung ausgewählter Bakterien zwecks Herstellung einer durch bakterielle Zersetzung erzeugten Komplexsubstanz, deren Wirksamkeit bei der erfolgreichen Behandlung von allergischen Krankheiten im allgemeinen, insbesondere von Asthma und Rheumatismus, in unzähligen Fällen praktisch erprobt wurde.Process for the preparation of a produced by bacterial decomposition Complex concentrate for the treatment of allergic diseases in general, asthma and rheumatism. The invention relates to a process for the preparation of new therapeutic ones Preparations for the treatment of allergic diseases, in particular a method of breeding selected bacteria for the purpose of producing one produced by bacterial decomposition Complex substance, the effectiveness of which in the successful treatment of allergic Illnesses in general, especially asthma and rheumatism, in countless numbers Cases has been tested in practice.

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung eines durch bakterielle Zersetzung erzeugten Komplexkonzentrates zur Behandlung allergischer Krankheiten ist im wesentlichen dadurch gekennzeichnet, daß auf der Basis von Fleischbrühe, Menschenblut oder Plasma und Glukose ein Nährboden hergestellt, derselbe mit einer Mischung ausgewählter Bakterien, wie Staphylokokken, Streptokokken, Pneumokokken und Catarrhalis-Mikrokokken, geimpft und die Zersetzung des Nährbodens durch die Bakterien bis zur praktisch vollständigen Konsumtion der Nährmittel im Nährboden fortgesetzt wird. The inventive method for the preparation of a bacterial Decomposition produced complex concentrates for the treatment of allergic diseases is essentially characterized in that on the basis of meat broth, Human blood or plasma and glucose made a culture medium, the same with one Mixture of selected bacteria such as staphylococci, streptococci, pneumococci and catarrhal micrococci, inoculated and the decomposition of the nutrient medium by the Bacteria up to practically complete consumption of the nutrients in the nutrient medium is continued.

Das erfindungsgemäße Verfahren ist insbesondere dadurch gekennzeichnet, daß ein Nährboden aus Fleischbrühe mit einem Zusatz von Menschenblut in destilliertem Wasser und Glukose hergestellt und dessen p-Wert auf etwa 6,8 bis 7,4 eingestellt wird und daß dieser Nährboden mit einer Mischung ausgewählter Bakterien, wie Staphylokokken, Streptokokken, Pneumokokken, Catarrhalis-Mikrokokken, geimpft und die bakterielle Zersetzung des Nährbodens unter Aufrechterhaltung einer Temperatur von etwa 38 bis 38,50 etwa 3 bis 4 Tage bis zur praktisch vollständigen Konsumtion der im Nährboden enthaltenen Nährstoffe durchgeführt wird und dann die durch die bakterielle Zersetzung gebildete Flüssigkeit dekantiert, filtriert und sterilisiert wird. Das Präparat wird nach Ausführung der Sterilitätskontrolle steril in Ampullen gefüllt, gegebenenfalls einer Lyophilisation unterworfen und anderweitig verpackt. The method according to the invention is characterized in particular by that a culture medium made of meat broth with the addition of human blood in distilled Produced water and glucose and adjusted its p-value to about 6.8 to 7.4 and that this culture medium is filled with a mixture of selected bacteria, such as staphylococci, Streptococci, pneumococci, catarrhal micrococci, vaccinated and the bacterial The nutrient medium decomposes while maintaining a temperature of about 38 to 38.50 about 3 to 4 days until the practically complete consumption of the nutrient medium contained nutrients and then carried out by the bacterial decomposition formed liquid is decanted, filtered and sterilized. The preparation After the sterility control has been carried out, the ampoules are sterile filled, if necessary subjected to lyophilization and otherwise packaged.

Das erfindungsgemäße Verfahren besteht demnach aus der Kombination von drei Stufen, nämlich der Herstellung eines Spezialnährbodens, der Züchtung ausgewählter Bakterien in diesem Nährboden bis zum praktisch vollständigen Verbrauch der darin enthaltenen Nährstoffe sowie der Abtrennung und Aufarbeitung des durch die bakterielle Zersetzung gebildeten Komplexkonzentrats zu einer subcutanen Injektionsflüssigkeit. The method according to the invention therefore consists of the combination of three stages, namely the production of a special nutrient medium, the cultivation of selected ones Bacteria in this culture medium until they are practically completely consumed contained nutrients as well as the separation and processing of the bacterial Decomposition of the complex concentrate formed into a subcutaneous injection liquid.

Die Herstellung des Nährhodens als erste Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens besteht in der Zubereitung einer Fleischbrühe, der Natriumchlorid und bakteriologisches Pepton sowie vorteilhafterweise die Bakterienentwicklung fördernde Mittel zugesetzt werden und in der Neutralisierung dieses Gemisches mit einer n-Natriumcarbonatlösung, in der Sterilisierung bei einer 1250 nicht übersteigenden Temperatur, wodurch gleichzeitig eine Fällung der koagulationsfähigen Komponenten, fremder Proteine und der durch die Neutralisierung bei der angewandten Sterilisierungstemperatur gebildeten unlöslichen Salze verursacht wird. Weiterhin besteht sie in der Abkühlung des so vorbereiteten Nährbodens und der Zugabe von Glukose und gegebenenfalls von Vitaminen und anorganischen Salzen, die als die Bakterienentwicklung fördernde Mittel bekannt sind, in der Einstellung des p-Wertes des Nährbodens auf etwa 6,8 bis 7,2, in einer weiteren Sterilisierung des letzteren bei einer Temperatur von 110 bis 1150 und schließlich nach Abkühlung auf etwa 380 in dem Zusatz von Menschenblut in sterilem destilliertem Wasser. The production of the nutrient testicle as the first stage of the invention Method consists in preparing a meat broth that contains sodium chloride and bacteriological peptone as well as advantageously promoting bacterial development Agents are added and in the neutralization of this mixture with an n-sodium carbonate solution, in the sterilization at a temperature not exceeding 1250, whereby at the same time a precipitation of the components capable of coagulation, foreign proteins and the through the neutralization insoluble formed at the applied sterilization temperature Salts is caused. Furthermore, it consists in cooling the prepared in this way Nutrient medium and the addition of glucose and possibly vitamins and inorganic Salts known as bacteria promoting agents in the setting the p-value of the nutrient medium to about 6.8 to 7.2, in a further sterilization the latter at a temperature of 110 to 1150 and finally after cooling to about 380 in the addition of human blood in sterile distilled water.

Die zweite Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens besteht darin, daß der so vorbereitete Nährboden bei der angegebenen Temperatur mit einer Mischung ausgewählter Bakterien, wie Staphylokokken, Streptokokken, Pneumokokken, Catarrhalis-Mikrokokken, und zwar aus geographischen Zonen, in denen das erfindungsgemäße Produkt verwendet werden soll, geimpft, der mit den Bakterien geimpfte Nährboden auf etwa 38 bis 38,50 gehalten und in gewissen Zeitabständen leicht gerührt wird, gegebenenfalls unter wiederholter Bakterienimpfung, bis nach etwa 3 bis 4 Tagen praktisch alle im Nährboden enthaltenen Nährstoffe aufgezehrt sind. The second stage of the process according to the invention consists in that the so prepared nutrient medium at the specified temperature with a mixture selected bacteria, such as staphylococci, streptococci, pneumococci, catarrhalis micrococci, namely from geographical areas in which the product according to the invention is used is to be vaccinated, the culture medium inoculated with the bacteria to about 38 to 38.50 is held and gently stirred at certain time intervals, if necessary under repeated bacterial inoculation, until after about 3 to 4 days practically all in the culture medium nutrients contained are depleted.

In einer dritten Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens, nämlich in der Abscheidung und Aufbereitung des durch die bakterielle Zersetzung erzeugten Komplexkonzentrats, dessen chemische Zusammen setzung bisher nicht bestimmt werden konnte, wird mit in Kampfer gelöstem Phenol sterilisiert und dann vorsichtig dekantiert und filtriert und/oder anderweitig gereinigt. Die Sterilität des Filtrats wird während mehrerer Tage kontrolliert, worauf das gebrauchsfertige Produkt unter strenger Sterilitätskontrolle in Ampullen gefüllt wird. Um eine Haltbarkeit des Produktes auf unbestimmte Zeit zu gewährleisten, kann das sterilisierte Filtrat einer Lyophilisation unterworfen werden. In a third stage of the method according to the invention, namely in the separation and processing of that produced by bacterial decomposition Complex concentrate, the chemical composition of which has not yet been determined is sterilized with phenol dissolved in camphor and then carefully decanted and filtered and / or otherwise cleaned. The sterility of the filtrate is maintained during controlled for several days, after which the ready-to-use product is under strict sterility control is filled in ampoules. To give the product an indefinite shelf life To ensure, the sterilized filtrate can be subjected to a lyophilization will.

Das nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellte Produkt ist ein durch bakterielle Zersetzung erzeugtes Komplexkonzentrat, dessen p-Wert etwa 5,5 beträgt und dessen chemische Zusammensetzung, avie erwähnt, noch nicht genau bestimmt werden konnte. Die Wirksamkeit dieses durch subcutane Injektion verabreichten Präparates konnte in der erfolgreichen Behandlung von mehr als 1000 Fällen von Allergie praktisch erprobt werden. Die Wirkung besteht darin, daß die Patienten gegen die meisten Allergene unempfindlich gemacht werden, und zwar im Gegensatz zu dem bekannten Burkyphänomen bei absoluter Abwesenheit solcher Allergene in dem erfindungsgemäßen Präparat. Die Wirksamkeit dieses Produktes konnte ebenfalls bei Behandlungen von Asthma und Rheumatismus einwandfrei festgestellt werden. The product produced by the process of the invention is a complex concentrate produced by bacterial decomposition, the p-value of which is about 5.5 and its chemical composition, as mentioned above, is not yet precise could be determined. Effectiveness of this administered by subcutaneous injection The preparation was able to successfully treat more than 1000 cases of allergy be tested in practice. The effect is that the patient against the most allergens are made insensitive, in contrast to the known Burky phenomenon in the absolute absence of such allergens in the inventive Preparation. The effectiveness of this product could also be used in treatments of Asthma and rheumatism can be clearly identified.

Verfahren zur Herstellung von Seren bzw. Impfstoffen zur Immunisierung der Menschen sind bereits bekannt. Diese Verfahren unterscheiden sich jedoch von dem erfindungsgemäßen grundlegend, bei welchem weder ein Serum noch ein Impfstoft, sondern ein Präparat zur Heilung allergischer Krankheiten hergestellt wird, wobei keine Immunisierung erfolgt. Es sei erwähnt, daß es bisher kein wirksames Mittel zur Heilung allergischer Krankheiten einschließlich Asthma und Rheuma gab. Process for the production of sera or vaccines for immunization of people are already known. However, these procedures are different from the fundamental according to the invention, in which neither a serum nor a vaccine, but a preparation for curing allergic diseases is produced, whereby no immunization occurred. It should be noted that so far there has been no effective remedy used to cure allergic diseases including asthma and rheumatism.

Ferner ist bekannt, Autovakzine herzustellen und sie bei der Behandlung allergischer Krankheiten anzuwenden. Die damit erzielten Erfolge sind bekanntlich jedoch derart, daß von einer Heilung der Patienten in den meisten Fällen nicht gesprochen werden kann. Diese antiallergischen Autovakzine beruhen auf dem bekannten Burkyprinzip und sollen die Allergene enthalten, gegen die der Patient unempfindlich gemacht werden soll. Außerdem stellen die Autovakzinepräparate nie ein für allergische Krankheiten allgemein zu verwendendes und industriell herstellbares Produkt dar. Somit bilden die bekannten Autovakzine keine Grundlage oder auch nur Ausgangspunkte für die vorliegende Erfindung. Vielmehr steht das dem erfindungsgemäß en Verfahren zugrunde liegende Prinzip dem Burkyprinzip direkt entgegen, da das erfindungsgemäße Präparat keine Allergene irgendwelcher Art enthält und in seiner Heilvvirkung nicht auf bestimmte allergische Krankheiten beschränkt ist. It is also known to produce car vaccines and to use them in the treatment to apply allergic diseases. The successes achieved with it are well known but in such a way that in most cases there is no mention of a cure for the patient can be. These anti-allergic car vaccines are based on the well-known burky principle and should contain the allergens to which the patient is made insensitive shall be. Also, the auto vaccine supplements never set for allergic diseases product that can be used in general and can be manufactured industrially the well-known auto vaccine no basis or even starting point for the present Invention. Rather, the method according to the invention is based on that Principle directly contrary to the Burky principle, since the preparation according to the invention does not Contains allergens of any kind and does not have any specific medicinal properties allergic diseases is restricted.

Die Maßnahmen des erfindungsgemäßen Verfahrens sind somit auch andere als die der bekannten Verfahren. So werden beispielsweise zur Gewinnung von Serum gemäß der deutschen Patentschrift 191 752 virulente Streptokokken auf defibriniertem Menschenblut gezüchtet, die Kulturen mehrere Male durch Tiere gesendet und dann größere Tiere behandelt, während bei dem erfindungsgemäßen Verfahren die Virulenz der Bakterien überhaupt keine Rolle spielt und das Blut nicht defibriniert sein soll, da das Fibrin für die bakterielle Zersetzung des Nährbodens wichtig ist. Ferner werden auch keine Kulturen durch Tiere gesendet. The measures of the method according to the invention are therefore also different than that of the known methods. For example, to obtain serum according to the German patent 191 752 virulent streptococci on defibrinated Grown human blood, and then sent the cultures through animals several times treated larger animals, while the virulence in the method according to the invention the bacteria play no role at all and the blood must not be defibrinated should as the fibrin is important for the bacterial decomposition of the culture medium. Further cultures are also not sent by animals.

Auch die in Vorschlag gebrachte Züchtung von Bakterien auf Tierblut (vgl. deutsche Patentschriften 424 197 und 499 580) kann auf das erfindungsgemäße Verfahren nicht angewandt werden, da Tierblut Allergie hervorruft. Also the proposed breeding of bacteria on animal blood (See. German Patents 424 197 and 499 580) can refer to the inventive Procedures are not used as animal blood causes allergy.

Ferner werden die Bakterien bei den bekannten Verfahren im Nährboden getötet, was bei dem erfindungsgemäßen Verfahren nicht der Fall ist. Hier wird im Gegenteil ihre Zersetzungsarbeit so lange begünstigt, bis alle zersetzbaren Komponenten des Nährbodens verarbeitet sind und man zu einem konzentrierten Substrat gelangt. Dieses wird aufgearbeitet, und die Bakterien selbst und die unzersetzten Bestandteile werden verworfen. Furthermore, in the known methods, the bacteria are in the nutrient medium killed, which is not the case with the method according to the invention. Here in the On the contrary, their work of decomposition favors until all decomposable components of the nutrient medium are processed and one arrives at a concentrated substrate. This is processed, and the bacteria themselves and the undecomposed components are discarded.

Das folgende Beispiel erläutert die Erfindung, ohne sie zu beschränken. The following example explains the invention without restricting it.

Beispiel In üblicher Weise wird eine Fleischbrühe gekocht und dieser Natriumchlorid und bakteriologisches Pepton zugesetzt. Dann wird mit einer n-Natriumcarbonatlösung neutralisiert und bei einer 1250 nicht übersteigenden Temperatur etwa 15 Minuten in Behältern von etwa 1 1 sterilisiert, wobei gleichzeitig koagulationsfähige Komponenten, fremde Proteine und die durch die Neutralisierung bei der angegebenen Temperatur gebildeten unlöslichen Salze ausgefällt werden. Example In the usual way, a meat broth is cooked and this Sodium chloride and bacteriological peptone added. Then with an n-sodium carbonate solution neutralized and at a temperature not exceeding 1250 for about 15 minutes sterilized in containers of about 1 liter, with components capable of coagulation at the same time, foreign proteins and those caused by neutralization at the specified temperature formed insoluble salts are precipitated.

Man läßt die Brühe bis auf Zimmertemperatur abkühlen und setzt zu 100 Volumteilen 2 Volumteile Glukose. Diesem Nährboden werden dann vorteilhafterweise folgende, die Bakterienentwicklung fördernde Substanzen in den angegebenen Mengen zugefügt: Streptogenin ...... 1 bis 5°/o der Menge des Nährbodens Biotin ........... Spuren Pantothensäure. 100 Fg°/o Pyridoxin ........ 20 µg% Nicotinsäureamid . . 5 µg% Aneurin . . . . . . . . . . 0,1 llg °/° Mangansulfat Spuren Ferrosulfat Spuren Kobaltsulfat ...... Spuren Magnesiumsulfat Spuren Zinksulfat Spuren Kupfersulfat Spuren Natriummolybdat . Spuren Kaliumjodid Spuren Der p-Wert des Nährbodens wird in an sich bekannter Weise auf 7 bis 7,2 eingestellt, dann wird bei 1150 sterilisiert, und zum Schluß werden nach Abkühlung des Nährbodens auf etwa 38 bis 38,50 2 Volumteile hämolysiertes menschliches Blut in sterilem destilliertem Wasser eingerührt. The broth is allowed to cool to room temperature and is added 100 parts by volume 2 parts by volume of glucose. This breeding ground will then be advantageous the following substances that promote bacterial development in the specified amounts added: streptogenin ...... 1 to 5% of the amount of the nutrient medium biotin ........... Traces of pantothenic acid. 100 fg% pyridoxine ........ 20 µg% nicotinic acid amide. . 5 µg% aneurine. . . . . . . . . . 0.1 μg ° / ° Manganese sulphate traces Ferrous sulphate traces Cobalt sulphate ...... traces of magnesium sulphate, traces of zinc sulphate, traces of copper sulphate Traces of sodium molybdate. Traces Potassium iodide traces The p-value of the medium becomes adjusted in a known manner to 7 to 7.2, then sterilized at 1150, and finally after cooling the nutrient medium to about 38 to 38.50 2 parts by volume hemolyzed human blood stirred into sterile distilled water.

Der so vorbereitete Nährboden wird bei der angegebenen Temperatur, die etwa der Normaltemperatur des menschlichen Blutes entspricht, mit einer Mischung ausgewählter Bakterien, wie Staphylokokken, Streptokokken, Pneumokokken und Catarrhalis-Mikrokokken, geimpft. Die Zersetzung des Nährbodens durch diese Bakterien erfolgt unter Aufrechterhaltung der genannten Temperatur in geeigneten Behältern mit verhältnismäßig großer Oberfläche innerhalb 3 bis 4 Tagen gegebenenfalls unter periodischem Umrühren und Erneuerung der Bakterienimpfung bis zur praktisch vollständigen Konsumtion der im Nährboden enthaltenen Nährstoffe, so daß sich ein durch bakterielle Zersetzung erzeugtes Komplexkonzentrat bildet. The culture medium prepared in this way is heated at the specified temperature, which corresponds approximately to the normal temperature of human blood, with a mixture selected bacteria such as staphylococci, streptococci, pneumococci and catarrhal micrococci, vaccinated. The decomposition of the nutrient medium by these bacteria takes place under maintenance the stated temperature in suitable containers with a relatively large surface area within 3 to 4 days, if necessary with periodic stirring and renewal bacterial vaccination until practically complete consumption the nutrients contained in the nutrient medium, so that a bacterial decomposition generated complex concentrate forms.

Die Masse wird nun mit einer 650/oigen Phenol-Kampfer-Lösung sterilisiert, deren Menge so berechnet wird, daß der Nährbodenmenge 50/ovo Phenol entsprechen. Nach durchgeführter Sterilisierung wird dekantiert und das so abgetrennte Komplexkonzentrat filtriert und/oder anderweitig in an sich bekannter Weise gereinigt. Das Filtrat wird während mehrerer Tage einer Sterilitätskontrolle unterworfen und schließlich steril in Ampullen gefüllt oder lyophilisiert, um dem Produkt eine Haltbarkeit auf unbestimmte Zeit zu geben. The mass is now sterilized with a 650% phenol-camphor solution, the amount of which is calculated in such a way that the amount of nutrient medium corresponds to 50 / ovo phenol. After the sterilization has been carried out, it is decanted and the complex concentrate separated in this way filtered and / or otherwise purified in a manner known per se. The filtrate is subjected to a sterility control for several days and finally sterile in ampoules or lyophilized to give the product a shelf life to give indefinitely.

Claims

PATENT CLAIMS: 1. Process for the preparation of a by bacterial Decomposition produced complex concentrate for the treatment of allergic diseases in general, asthma and rheumatism in particular, characterized in that based on meat broth, human blood or plasma and Glucose is a breeding ground made with a mixture of selected bacteria, such as staphylococci, Streptococci, pneumococci and catarrhal micrococci, if necessary repeated vaccinated, the decomposition of the nutrient medium by the bacteria to practically complete Consumption of nutrients in the nutrient medium continued and after bacterial cessation The decomposition of the nutrient medium and its sterilization is the result of this decomposition The complex concentrate is separated off by decanting, cleaned and sterilized again will.

2. The method according to claim 1, characterized in that the nutrient medium Streptogenin, vitamins and inorganic salts as promoting bacterial development Means are added.

3. The method according to claim 1, characterized in that the complex concentrate is subjected to lyophilization.

Considered publications: German Patent Specifications No. 191 752, 424 197, 499 580.