CZ4797A3

CZ4797A3 - Use of muramylpeptide compounds and pharmaceutical composition

Info

Publication number: CZ4797A3
Application number: CZ9747A
Authority: CZ
Inventors: Philip Ledger
Original assignee: Peptech Uk Ltd
Priority date: 1994-07-11
Filing date: 1995-07-10
Publication date: 1997-07-16
Also published as: SK2697A3; GB9413935D0; AU2893595A; CN1155245A; ZA955763B; HUT77290A; HU9700071D0; CA2194678A1; WO1996001645A1; IL114542A0; BG101126A; JPH10505580A; EP0768888A1

Description

(57) Anotace:

Muramylpeptidové sloučeniny, zvláště N-acetyl-D-glukosaminyl-(b 1 -4)-N-acetymuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin(GMDP), jsou užitečné při ošetření a profylaxi zánětlivých dermatologických stavů, jako je psoriáza a při ošetření nebo profylaxi chorob kůže a sliznlc spojených s imunitou.

CZ 47-97 A3 «0co

Použití muramylpeptidových sloučenin a farmaceutický prostředek

Oblast techniky

Vynález se týká ošetření zánětlivých dermatologických stavů a zvláště ošetření psoriázy.

Dosavadní stav techniky

Psoriáza (lupenka) je neinfekční, obvykle chronické zánětlivé kožní onemocnění zhruba 2 % populace. Má mnoho klinických příznaků, z nichž nejobvyklejší je napuchlý červený drsný povlak pokrytý stříbřitými šupinkami. Nehty jsou zasaženy v asi 50 % případů a mohou se objevit i arthritické komplikace. Vnější změny na kůži jsou spojeny s histologickými změnami ve složení pokožky (epidermis) a vaskularizací subepidermálních tkání. Obvykle dochází k infiltraci lymfocytů. Výskyt psoriázy je důsledkem kombinace vnějších a genetických faktorů. Mnoho studií ukazuje řadu změn ve funkci pokožky a imunitního systému psoriatiků, ale dosud neexistuje žádná vyčerpávající teorie, která by postihovala všechny pozorované abnormality.

Stávající terapie psoriázy může být topická (zahrnující steroidy, uhelný dehet, dithranol, deriváty vitaminu D3), orální (zahrnující retinoidy, methotrexát, cyklosporin) nebo fototerapie (UVB samostatně, nebo UVA s psoralenem). Bohužel nej účinnější preparáty (například steroidy, methotrexát, cyklosporin) mohou způsobit řadu vedlejších účinků. Méně účinné zmírňující preparáty, které jsou v poslední době používány spíše topicky, jsou sice méně nebezpečné, vedou ale často ke znečištění a jejich použití je nepohodlné.

Je proto evidentní, že je velmi žádoucí najít účinné bezpečné orální léčení psoriázy.

Nyní bylo zjištěno, že různé deriváty muramylpeptidů jsou velmi vhodné pro léčbu psoriázy.

Už dlouho je známo, že nespecifické stimulace imunitního systému může být dosaženo vystavením systému přítomnosti bakterií, nebo složek získaných ze stěn bakteriálních buněk. Konkrétní sloučeniny odpovědné za tuto aktivitu byly identifikovány jako peptidy buněčné stěny, které obsahují cukry, a další biochemická analýza peptidu je určila jako peptidoglykanovou složku buněčné stěny. Bylo zjištěno, že nejmenší účinná syntetická molekula je N-acetylmuramyl-Lalanyl-D-isoglutamin (Merser a kol, Biochem. Biophys. Res. Comm. 66, 1316 (1975)). Schopnost této sloučeniny (nyní často označované jako prototyp muramyldipeptidu nebo prototyp MDP) chránit myši před bakteriální infekcí (Klebsiella pneumonia) byla popsána (Chedid a kol., Proč. Naťl. Acad.

Sci. USA, 74, 2089 (1977)).

Následně byla syntetizována široká škála analogů prototypu muramyldipeptidu, přičemž některé z nich byly navrženy k posilnění imunitních funkcí nebo k nespecifické stimulaci imunitního systému. Tyto analogy i sám prototyp MDP jsou muramylpeptidové sloučeniny.

Řada autorů se zabývala užitím muramylpeptidů a jejich analogů jako adjuvans, například Azuma a kol. (Adv. Exp. Med. Biol. 319, 253 až 263 (1992)), který uvádí, že sloučeniny MDP se hodí pro užití jako imunoadjuvans pro posílení antigenity rekombinantních nebo složkových vakcin.

Allison a kol. (Semin. Immunol. 2 (5), 369 až 374 (1990)) uvádí, že směsi adjuvans složené ze syntetických analogů MDP v emulzi s polymerem skvalen-Pluronic vyvolávají imunitu zprostředkovanou buňkami a protilátky ochranných isotypů a zvyšují odezvu na různé antigeny.

Burke (Rev. Infect. Dis., 13, Suppl. 11, 906 až 911, listopad - prosinec 1991) uvádí, že MTP-PE je zvláště vhodný jako adjuvans s vakcínou podjednotky viru Herpes simplex.

Allison a kol. (Mol. Immunol., 28 (3). 279 až 284 (1991)) se zabýval užitím analogů MDP s antigeny k vyvolání imunity zprostředkované buňkami ve vakcínách viru chřipky, viru hepatidy B, viru herpes simplex, lentiviru a tumoru.

Muramylpeptidy byly navrženy také k užití jako antivirová činidla (Ikeda a kol., Antiviral Res. 5: 207-15 (1985)) a k léčení rakoviny (Phillips NC a Tsao, M-S, Cancer Immunol Immunother. 33:85-90 (1991)).

V závěrech vyplývajících z těchto dokumentů je pouze málo zmínek týkajících se užití muramylpeptidových sloučenin při nemocech kůže, přičemž žádná z nich se nezmiňuje o psoriáze nebo jiných zánětlivých stavech. Většina aplikací na kůži počítala s potenciálními protirakovinými účinky této skupiny sloučenin. Například Talmadge, JE a kol. (Cancer Res. 46: 1160-3 (1986)) zjistil, že analog MTP-PE muramylpeptidu byl schopen zbrzdit růst primárních rakovinových nádorů kůže.

V jiné studii (Greenhalgh D. a Gamelli, RL, Journal of Trauma 27: 510-4 (1987)), bylo zkoumáno užití MDP při hojení ran.

V tomto případě však nebyly pozorovány žádné blahodárné ani škodlivé účinky. Jinde bylo ukázáno, že lokální injekce MDP s antigenem zvyšuje následnou kožní odezvu na antigen zpožděný typ hypersensitivity (delayed type hypertensitivity) (Tsujimoto, M. a kol. Microbiol Immunol.

23: 933 až 936 (1979)).

Patentový spis US-A-4 357 322 popisuje užití různých muramyl a desmethylmuramyl dipeptidů při léčeni zánětů. Není tu však zmínka o GMDP nebo psoriáze.

Azneimittel Forschung Drug Research, 38, 7A: 1002 až 1009 (1988) uvádí zprávu o farmakologických vlastnostech Muroctasinu.

Patentový spis EP-A-0 406 175 popisuje sloučeninu, 3-0[N-acetyl-muramyl-L-threonyl-D-isoglutaminyl]-1,2-di-Opalmitoyl-sn-glycerol, u které byla zjištěna imunopodpůrná aktivita.

Patentový spis DE-A-3 129 759 popisuje užiti určitých muramylpeptidových sloučenin jako protizánětlivých činidel.

Patentový spis WO-A-93/10148 popisuje užiti muramylpeptidových sloučenin při léčbě septického šoku.

Podstata vynálezu

Jako první aspekt tohoto vynálezu je předkládáno užití muramylpeptidové sloučeniny při přípravě prostředku pro léčbu nebo profylaxi zánětlivých dermatologických stavů.

Mnoho muramylpeptidových sloučenin vhodných pro tento vynález spadá do obecného vzorce I:

(I) kde:

R¹ představuje atom vodíku nebo acylovou skupinu obsahující 1 až 22 uhlíkových atomů;

R² představuje atom vodíku nebo acylovou skupinu obsahující 1 až 22 uhlíkových atomů;

R³ představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku;

R⁴ představuje alkylovou skupinu obsahující 1 až 21 atomů uhlíku nebo arylovou skupinu obsahující 6 nebo 10 atomů uhlíku;

R³ představuje atom vodíku; a

R představuje zbytek aminokyseliny nebo lineárního peptidu tvořeného ze 2 až 6 aminokyselinových zbytků, přičemž alespoň jeden ze zbytků je případně substituovaný lipofilní skupinou;

jiného než prototyp muramyldipeptidu a desmethylmuramyldipeptid.

Výhodné acylové skupiny pro R¹ a R² jsou acylové skupiny obsahující 1 až 5 uhlíkových atomů, jako je acetyl; přičemž je žádoucí, aby počet uhlíků v acylové skupině nezahrnoval karbonylovou část. Výhodné alkylové skupiny pro R^J jsou alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, jako je methyl a ethyl. Výhodné alkylové skupiny jsou pro R⁴ jsou alkylové skupiny obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, výhodně alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, jako je methyl nebo ethyl, zatímco výhodnou arylovou skupinu představuje fenyl.

Substituent R přestavuje výhodně mono-, di- nebo tripeptid. Proximální peptidový zbytek (nebo jediný peptidový zbytek, pokud je samotný) je výhodně tvořen L-aminokyšelinami. Jako příklad lze uvést:

L-alanyl

L-valyl

L-leucyl

L-isoleucyl

L-a-aminobutyryl

L-seryl

L-threonyl

L-methionyl

L-cysteinyl

L-fenylalanyl

L-tyrosyl

L-tryptofanyl

L-lysyl

L-ornithyl

L-arginyl

L-histidyl

L-glutamyl

L-glutaminyl

L-aspartyl

L-asparaginyl

L-prolyl

L-hydroxyprolyl

Výhodný je L-alanyl a L-threonyl.

Další aminokyselina z proximálního konce peptidů má’ výhodně D-konfiguraci. Je výhodně kyselá a může to být kyselina D-glutamová nebo D-aspartová nebo mono-, di- nebo směsné alkylestery obsahující 1 až 22 uhlíkových atomů (výhodně 1 až 6 uhlíkových atomů), amidy nebo jejich alkylamidy obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy (výraz směsný je použit pokud jedna karboxylová skupina je amidována a druhá esterifikována). S výhodnou se používají D-isoglutamin a Dglutamát.

Třetí aminokyselinový zbytek z proximálního konce řetězce, pokud je přítomen, je výhodně v konfiguraci L, jak je uvedeno výše v souvislosti s proximálním aminokyselinovým zbytkem. Výhodnými jsou L-alanyl a L-lysyl.

Aminokyselinový zbytek nebo lineární peptid je případně substituovaný alespoň jednou lipofilní skupinou. Lipofilní skupinou může být acylová skupina obsahující 10 až 22 atomů uhlíku jako je stearoyl nebo di-acyl-sn-glycero-3'hydroxyfosferyloxyskupina obsahující v acylu 20 až 22 atomů uhlíku, kde například každá z acylových skupin obsahujících 10 až 22 atomů uhlíku může být palmitoylová skupina. Lipofilní skupina může být alternativně (nebo navíc, neboť může být přítomna více než jedna substituce) esterová skupina obsahující 1 až 10 atomů uhlíku, jako je esterová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku: přičemž jako příklad lze uvést butylesterovou skupinu.

Jako příklady muramyldipeptidu v rámci obecného vzorce I lze uvést:

muroctasin, jinak známý jako MDP-Lys (L18) (Ν²-(Nacetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl) -N⁶-stearoyi-L-lysin) ;

MTP-PE (N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanyl-2(1', 2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3'-hydroxyfosforyloxy)ethylamid, monosodný);

murabutid (N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamin-a-Nbutylester); a t-MDP (N-acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin).

Příprava muroctasinu je popsána v patentovém spisu EP-A-0 021 367 a US-A-4 317 771. Příprava MTP-PE je popsána v EP-A-0 025 495. Příprava murabutidu je popsána v Lefrancier a kol., J. Med. Chem., 25, 87 (1982). Příprava t-MDP může být provedena metodami známými ze stavu techniky. Jako příklady patentových přihlášek, které uvádějí detaily přípravy muramylpeptidových sloučenin lze v zásadě uvést

BE-A-0	834	753,	BE-A-0	834	754,	BE-A-0	847	103,
BE-A-0	849	214,	DE-A-2	710	455,	DE-A-2	922	533,
DE-A-2	747	379,	DE-A-2	912	865,	FR-A-2	355	505,
FR-A-2	358	159,	FR-A-2	375	249,	EP-A-0	004	512,
EP-A-0	002	677,	JP-A-54	063	- 016	, JP-A-	54 073 729,

JP-A-55 019 236, US-A-4 082 735 a US-A-4 082 736. (Příprava prototypu muramyldipeptidu je popsána v DE-A-2 450 355 a US-A-4 235 771). Všechny dokumenty zmiňované v této specifikaci jsou zde použity jako odkaz.

Ne všechny muramyldipeptidy vhodné pro tento vynález spadají do obecného vzorce I. Mnoho spadá do obecného vzorce II, který představuje velmi výhodnou skupinu sloučenin pro použití podle tohoto vynálezu:

HOCH,

NHAc

I !

t !

OH (II) kde:

R představuje zbytek aminokyseliny nebo lineárního peptidu tvořeného 2 až 6 aminokyselinovými zbytky, přičemž alespoň jeden ze zbytků je případně substituovaný lipofilní skupinou; a n je 1 nebo 2.

Výhodné hodnoty R jsou uvedeny výše ve vztahu k obecnému vzorci I. Zvláště výhodné je, pokud peptid R odpovídá peptidu v prototypu MDP (L-Ala-D-isoGln) . Alternativně, v jiném výhodném provedení, může R představovat L-Ala-D-Glu.

Výhodná hodnota n je 1.

Sloučeniny obecného vzorce II jsou popsány v patentovém spisu US-A-4 395 399 a výhodná provedení uvedená v tomto dokumentu představují výhodná provedení také v tomto vynálezu Navíc v tomto vynálezu může být skupina R lipofilně substituována, jak je popsáno výše.

Jedna z nejvýhodnějších sloučenin pro užití podle vynálezu spadá do obecného vzorce II a představuje N-acetyl-D glukosaminyl- (βΐ-4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutamin (GMDP), který má strukturu:

HOCH,

NHAc

GMDP

Tato sloučenina (sloučenina II v US-A-4 395 399), také známá jako glycopin, už prošla předklinickými testy toxicity a farmakokinetickými pozorováními požadovanými pro povolení pro klinické použití v SSSR (bývalém). Akutní toxicita u myší, měřena testem LD₅₀ je 7 g/kg. Toto číslo ukazuje, že sloučenina je téměř řádově méně toxická než muroctasin, který má hodnotu LD₅₀ u myší 625 mg/kg.

Zatímco pyrogenicita GMDP je dostatečně nízká proto, aby byl vhodný pro použití podle tohoto vynálezu a nebrání jeho klinickému využití pro jiné účely, může být za určitých okolností výhodné použití dokonce ještě méně pyrogenního ' analogu. Takový analog je dostupný a je jím N-acetyl-Dglukosaminyi-(βΐ-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamová kyselina (GMDP-A), který odpovídá sloučenině III z patentového spisu US-A-4 395 399, a který má následující strukturu:

HOCH,

NHAc

GMDP-A

Jiné výhodné sloučeniny v rámci obecného vzorce II zahrnuji:

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4) -N acetylmuramyl-L-alanyl-Lisoglutamin (GMDP-LL), který má strukturu:

NHAc

CHCO-L—Ala-L-isoGIn I

CH₃

NHAc

GMDP-LL n-butylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(β!-4)-N acetylmuramyl-L alanyl-D-glutaminu (GMDP-OBu), který má strukturu:

HOCH, i/¹ OH

V

NHAc

HOCH

HO'

CHCO—L—Ala—D—Gin—OBu

I

CH,

NHAc

GMDP-OBU

N-acetyl-D-glukosaminyl-(β1-4)-N acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-L-lysin (GMDP-Lys), který má strukturu:

NHAc

GMDP-Lys

N“-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4)-N-acetylmuramyl-L-alanvl-D isoglutaminyl]-N⁸-stearoyl-L-lysin (GMDP-Lys(St)), kterýma strukturu:

hoch₂ hoP^h

NHAc

CHCO-L-Ala-D-isoGIn-L-Lys-COC^7H35 Na ch₃

NHAc

GMDP-Lys(St)

Jiné vhodné sloučeniny jsou:

(^-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ— 4)-N-acetyl-muramyl-L-alanyly-D-glutamyl]-N®-stearoyl-L-lysin (GMDPA-Lys (St) ) , kterýma strukturu:

HOCH,

HO.

Horu

o \^NH

NHAc

Cy r—ř 'CHCO—L-Ala-D-Glu—L—Lys-COC, ₇H₃₅ Na⁴

I

CH,

NHAc

GMDPA-Lys(St) dibenzylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl L-alanyl-D-glutamové kyseliny (GMDPA(OBzl) _Σ) , kterýma strukturu:

HOCHΛ°0H w

NHAc

HOCH^

HOý*^-

CHCO-L-Alo-0-Glu-(OB2l)₂ ch₃

NHAc

GMDPA(OBzl)z

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-N-methyl-Lalanyl-D-isoglutamin (Me-GMDP), kterýma strukturu:

Me-GMDP

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D isoglutamin) ((GMDP)?), kterýma strukturu:

HO CH,

CHCO-L-Ala-D-isoGIn

CHCO-L-Ala-O-isoGIn

I ch₃

NHAc (GMDP) 2

- i;

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D glutamová kyselina) ((GMDPA)₂), který má strukturu:

HOCH.,

J”°oh sO λ 5 \ NHAc

CHCO-L-Ala-D-Glu

HOCH,

HOCH

NHAc

CHCO—L—Ala—D—Glu I

CH₃

NHAc

I

CH(GMDPA)₂

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-D isoglutaminyl-L-lysin) ((GMDP Lys)?), který má strukturu:

HOCH,

HOCH

NHAc

CHCO-L-Alo-O-isoGIn-L-Lys

I ch₃

CHCO-L-Ala —D-isoGIn-L-Lys

NHAc (GMDP Lys)2

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ— 4) -N-acetylmuramyl- (βΐ— 4) -Nacetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetylmuramyl-bis-[L-alanyl-D isoglutaminyl-N^e-stearoyl-L-lysin] ([GMDP-Lys (St) ]z), kterýma strukturu:

HOCH

HOCH,

HO,

HOCH,

Λ°οη sO k

W \ NHAc ^,0™2 j ξ / J CHC0-L-Alo-D-isoGln-L-LysC0C,₇H.- Na⁺

- NHAc \0

NHAc / °\ CHCO-L-Ala-O-isoGIn-L-LysCOC, ₇H,=^_Na⁺

40H ý ^{1 17 35} i

CH,

NHAc [GMDP-Lys (St) ]

1-adamantylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4) -Nacetylmuramyl-L-alanyi-D-isoglutaminu (GMDP-Ad), který má strukturu:

_HCru

_Q \ NHAc hoch₉ p-0 \ nu

CHCO-L-Ala-D-isoGIn-OAd

HO°^H

CHNHAc

GMDP-Ad

L-threonyl-M^e-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (β 1--4) -N-acetylmuramylL-alanyl-y-D-isoglutaminyl]-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin (GMDPtuftsin Ε), který má strukturu:

CHCO-L-Ala-D-isoGln-Lys(Thr)-Pro-Arg

GMDP-tuftsin E

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetyl-muramyl-L-alanyl-y-Disoglutaminyl-L-threonyl-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin (GMDPtuftsin A) , který má strukturu:

H0^ru

HOCH,

NHAc

CHCO-L-Ala-D-isoGIn-Thr-Lys-Pro-Arg

HO'

NHAc

GMDP-tuftsin A

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-a-D glutamyl-L-lysyl-L-threonyl-N^e-stearoyl-L-lysyl-L-prolyl-Larginin (lipofilní GMDPA-tuftsin), který má strukturu;

HOCH,

J“°OH ω λ

HOCH.

HO¹.?¹

NHAc ,OH A w

CHCO—L—Ala—D-Glu—Thr-Lys(COC _{1 ?}H^g)—Pro—Arg CH,

NHAc lipofilní GMDPA-tuftsin ^-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetyl-muramyl-L-alanyl y-D-isoglutaminyl]-L-lysyl-L-histidyl-L-glycinamid (GMDPAbursin), který má strukturu:

NHAc

HOCH₂

HO.

CHCO-L-Ala-D-isoGln-Lys-His-Gly-NH2

CH

NHAc

GMDPA-bursin

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-L-glutamyl-L-tryptofan (GMDP-thymogen I) , který má strukturu:

hoch₂

NHAc

CHCO-L-Ala-D-isoGIn-Glu-Trp

GMDP-thymogen I

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-s-aminohexanoyl-L-glutamyl-L-tryptofan (GMDPthymogen II), který má strukturu:

Horu

HOCH,

NHAc

CHCO-L-Alo-O-isoGin-Ahx-Glu-Trp

HO·

NHAc

GMDP-thymogen II ^-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetyl-muramyl-L-alanyl L-alanyl-D-isoglutaminyl]-N^E-stearoyl-L-lysyl-L-glutamyl-Ltryptofan (GMDP-thymogen III), který má strukturu:

HOCH,

OH w

NHAc

HOCH

HO.

CHCO-L-Ala-D-isoGln-Lys(COC₁₇H₃₅)-Glu-Trp

CH, i i

NHAc

GMDP-thvmogen III

N-acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin (THR-MDP), který má strukturu:

Thr-MDP

-91 _ n-butylester N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutaminu (Murabutid), který má strukturu:

OH \ NHAc

CHC0-L-Ala-D-Gln-0C₄H_g ch₃

Murabutid

Ve výše uvedených strukturách je užito následujících zkratek:

Bzl - benzyl;

Me - methyl;

Ahx - ε-aminohexanoyl.

Nejvýhodnější sloučenina je GMDP následována GMDP-A a murabutidem.

Glukosaminyl-muramyldipeptidy v rozsahu obecného vzorce II mohou být připraveny relativně levně a v dostatečně velkém množství způsobem popsaným v patentovém spise US-A-4 395 399. Uvedený způsob přípravy je založen na extrakci a purifikaci disacharidové složky z bakterie Micrococcus lysodecticus a jejím následném chemickém navázáni na dipeptid syntetizovaný například způsobem běžným v oboru syntézy peptidů. Disacharid může být také stejně dobře syntetizován za užití standardní metody chemie cukrů.

Zánětlivá dermatologická onemocněni, která se daji léčit nebo se jim dá předcházet diky tomuto vynálezu, zahrnuji všechny typy psoriáz, včetně diskoidní nebo plakální psoriázy, flexulárni psoriázy, skalpální psoriázy, palmární/plantárni psoriázy, kapkové psoriázy, erythrodermální psoriázy a pustulárni psoriázy, psoriatické arthritidy a změn na nehtech následkem psoriázy.

Účinek GMDP na psoriázu byl studován v klinických testech, které jsou popsány do větších detailů v níže uvedeném příkladu 1. Index PAŠI (psoriasis area and severity index index rozšíření a rozsahu psoriázy) měl tendenci u léčených během aplikace klesat, a množství léčených dokonce vykazovalo úplné vymizení zasažení. Artikulární symptomy psoriatické arthritidy se užitím GMDP také zlepšily. Léčení požívající tablety placeba vykazovali minimální zlepšení, někteří zhoršení nebo žádné změny.

Jak je tomu u mnohých léčení psoriázy, přesný mechanismus, kterým sloučeniny užité při vynálezu způsobují zlepšeni, není znám. Ve skutečnosti je velmi překvapivé, že muramylpeptidové sloučeniny mohou mít tento příznivý vliv, neboť muramylpeptidy jsou obecně považovány za prozánětlivé imunostimulanty, kdežto regrese zanícených ran by obecně měla vyžadovat léčbu protizánětlivými prostředky. V literatuře bylo dokonce popsáno, že léčba interferonem, jiným imunostimulátorem” může ve skutečnosti exacerbovat (znovu vyvolat) psoriázu (Funk J; Langeland T; Schrumpf E; Hanssen LE Br J Dermatology 125: 463-5 (1991), Pauluzzi P, Kokelj, F, Perkan, V, Pozzato, G, Moretti, M. Acta Dermatol Venereol 73: 395 (1993)) .

Bylo provedeno několik studií, které poskytují náhled na možný mechanismus působení muramylpeptidových sloučenin, zvláště GMDP, na kůži, a také určují potenciální záběr vynálezu. Avšak účinnost tohoto vynálezu není ovlivněna ani relevancí těchto experimentů ani přesností jejich interpretace.

Jak je detailně popsáno v níže uvedeném příkladu 2, muramylpeptidová sloučenina GMDP byla aplikována na kůži myši ve formě roztoku v ethanolu. Jako kontrolní pokus byl aplikován samotný ethanol. Některé skupiny zvířat byly vystaveny ozáření ultrafialovým světlem (UVB) nebo na nich byla aplikována kyselina cis urokanová (cUCA) , přičemž je známo, že obě tyto metody způsobují změny v imunitním systému kůže.

Obdobně jako u UVB a cUCA, způsobovalo ošetření GMDP snížení výskytu ATPasových skvrn a zrušení dendritických procesů epidermálních dendritických buněk, což je obecně spojeno se ztrátou imunologických funkcí, to znamená, že GMDP snížil potenciální imunoreaktivitu kůže. V této souvislosti bylo zjištěno, že samotná fototerapie UVB zářením představuje léčení psoriázy, čímž podporuje účinek muramylpeptidových sloučenin podle vynálezu.

Při jiných experimentech bylo zjištěno, že na rozdíl od UVB, nezpůsobuje GMDP migraci dendritických buněk z pokožky do odvodních lymfatických uzlin.

Z těchto experimentů vyplynul závěr, že GMDP má zásadní vliv na dendritické Langerhansovy buňky, které jsou primární imunitní složkou epidermis. Protože jsou důkazy podporující roli Langerhansových buněk v pathogenesi psoriázy (Placek a kol., Acta Derm Venereol (Stockh) 68: 369-77 (1988)), je možné, že regulace aktivity těchto buněk je schopna snížit rozsah onemocnění. Experimenty na myších byly provedeny formou topické aplikace GMDP, ale je známo, že GMDP je možno přijímat i orálně, a tak se očekává, že GMDP podávaný orálně, jako u klinických testů, může vykazovat účinek na kůži.

Díky dokázaným účinkům na kožní imunitní systém na jedné straně a na nemoci spojené s imunitním systémem lidské kůže (psoriáza) na straně druhé se může očekávat, že muramylpeptidy budou vhodné pro léčení v oblasti kožních zánětlivých nemocí na imunologickém základě, pro kteréžto použití dosud nebyly navrženy. Navíc z toho důvodu, že Langerhansovy buňky se nachází také ve sliznicích vroubících ústní dutinu, vagínu a děložní krček, představují tyto orgány také cílové orgány léčení muramylpeptidem.

Jako druhý aspekt tohoto vynálezu je předkládáno užití muramylpeptidové sloučeniny při přípravě prostředku k léčení nebo profylaxi nemocí kůže a sliznic spojených s imunitním systémem. Ty zahrnují, aniž jsou na následující výčet omezeny, nemoci jako endogenní ekzém (jinak známý jako atopický ekzém nebo atopická dermatitis), seborrhoeický ekzém, pomfolyx, kontaktní dermatitis, urticaria, erythroderma, lichen planus, vitiligo a alopoecia areata.

Účinnost muramylpeptidových sloučenin podle vynálezu byla demonstrována užitím orální aplikace. Složení tablet přípravku v tomto případě zahrnuje farmaceuticky přijatelný excipient, konkrétně laktosu, škrob, polyvidon, stearát hořečnatý a mastek. Muramylpeptidové sloučeniny mohou být uzpůsobeny podle požadavků pro trvalé nebo zpožděné uvolňování. Jinou možnost představuje gastrický povlak.

Přesné orální dávkování pro podávání bude vždy záviset na klinickém nebo ošetřujícím lékaři. V závislosti na tom může být shledána přijatelnou denní orální dávka v rozsahu od 0,1 do 100 mg na den (nebo na dávkovou jednotku), přičemž výhodná dávka může být 0,5 až 50 mg. V tomto výhodném rozmezí může být optimální denní dávka v rozsahu od 2 do 30 mg nebo samozřejmě od 2 do 20 mg.

Navíc se může lišit doba podávání. Doba podávání bude samozřejmě záviset v určitém rozsahu na úrovni dávkování, to znamená, že nižší dávka vede k delší požadované době podávání. Obecně platí, že doba podáváni bude v rozmezí 1 až 60 dnů, výhodně 1 až 30 dnů a zvláště výhodně 1 až 14 dnů.

Bylo dokázáno, že muramylpeptidové sloučeniny mají vliv na imunitní systém kůže po topické aplikaci. Tak i přes výhody tkvící ve formě orálního dávkování, může se zjistit, že pro určité specifické případy je výhodnější topický prostředek muramylpeptidových sloučenin, například v případě, že funkce gastrointestinálního traktu pacienta je omezena v důsledku nemoci nebo chirurgického zákroku, nebo v případě zvláště úporných kožních chorob, kde je požadována zvláště vysoká lokální koncentrace muramylpeptidové sloučeniny.

Podle třetího aspektu vynálezu je předkládán topický přípravek muramylpeptidové sloučeniny.

Přípravek, který může být předkládán jako mast, pleťová voda nebo krém, může obsahovat farmaceuticky vhodné excipienty nebo nosiče, přičemž je třeba brát v úvahu schopnost prostředku účinně uvolňovat muramylpeptid do kůže. Složení přípravku může dokonce zvyšovat přechod uvedených muramylových sloučenin zahrnutím tak zvaných permeačních urychlovačů.

Muramylpeptidové sloučeniny mohou být podle vynálezu užity buď samostatně nebo ve vzájemné kombinaci. Také mohou být muramylpeptidové sloučeniny užity v kombinaci s jinými sloučeninami, ať už ve formulaci společné či samostatně;

například muramylpeptidové sloučenina může být podávána orálně a jiná sloučenina může být podávána topicky. Pokud je užito kombinaci, buď vzájemných nebo s jinými sloučeninami, může být podávání současné, oddělené nebo postupné.

Konečně tento vynález se týká metody profylaxe nebo ošetření zánětlivých dermatologických onemocnění, zahrnující podávání muramylpeptidové sloučeniny pacientovi.

Výhodné znaky každého aspektu vynálezu jsou, stejně jako u jiných aspektů, mutatis mutandis.

Vynález bude dále doložen v následujících neomezujících příkladech a obrázcích, ve kterých:

Obrázek 1: ukazuje změny v rozsahu psoriázy a plošného indexu (PAŠI) v průběhu léčení pomocí GMDP nebo placebem.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Použití GMDP při léčení psoriázy

A. Předběžná zkouška

Předběžná zkouška použití GMDP pro ošetření psoriázy byla provedena u 8 pacientů, kteří dostávali dávky 10 nebo 20 mg po dobu 9 až 18 dnů. Obecně došlo k podstatné redukci kožních symptomů psoriázy. Jeden z pacientů trpěl druhem psoriázy známým jako psoriatická arthritida a u tohoto pacienta bylo pozorováno snížení bolestivosti a ranní ztuhlosti kloubů.

B. Kontrolní zkouška s placetem

Metody

Devatenáct osob s psoriázou (plakální psoriáza, pustulární psoriáza nebo erythrodermální psoriáza) bylo namátkově podrobeno léčbě buď orální pomocí tablet GMDP (o dávce 20 mg za den po dobu 10 dnů, následovanou 20 mg každý druhý den po dobu dalších 10 dnů, to znamená léčení ve dnech 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18 a 20) nebo identickými tabletami placeba. Zkouška byla dvojnásobně slepá, neboť ani pacienti, ani vynálezci nevěděli, který preparát (GMDP nebo placebo) byl podán tomu kterému pacientovi. Obecná praxe v moderních klinických testech ukazuje, že tato dvojnásobná slepota je zvláště důležitá u zkoušek psoriázy, kde silný psychologický moment může působit u pacientů, kteří vědí, že se jim dostává potenciálního léčení.

Rozsah a plocha psoriázy u všech pacientů byla měřena a zaznamenána na počátku pokusu a v několika intervalech až do asi 20 dnů podle mezinárodně užívaného systému PAŠI (psoriasis area and severity index) (Frederiksson a Pettersson, Dermatologica 157: 238-244 (1978)). Změny u jednotlivých pacientů jsou uvedeny na obrázku 1. Na tomto grafu jsou výchozí podmínky u pacientů ujednoceny na 100 % a potom u následného zjišťování hodnoty PAŠI je uvedeno procento výchozí hodnoty. Je zřejmé, že hodnota PAŠI léčených jedinců má tendenci během léčení klesat a mnoho jedinců dokonce vykazuje úplné zhojení ran. Jedinci dostávající tablety placeba vykazují minimální zlepšení, někteří zhoršení nebo žádné změny. V době posledního zjišťování byla průměrná hodnota léčených pacientů 6,0 a průměrná hodnota kontrolních pacientů téměř dvojnásobná, a to 11,7.

Příklad 2

Užití GMDP při léčbě psoriázy v kombinaci s následným použitím jiných léčiv pro psoriázu

V dvojnásobně slepé klinické zkoušce GMDP s kontrolou placebem se dostávalo 14 pacientům aktivní léčby (GMDP). Z nich všichni až na jednoho vykazovali zlepšení při měření snížení jejich hodnoty PAŠI.

Po úvodním zlepšení během 10 dnů léčení GMDP byli někteří z pacientů vybráni pro další terapii psoriázy jinými způsoby, než GMDP. Ty zahrnovaly UV záření, topické užití salicylové kyseliny, orální užití síranu hořečnatého a derivátů vitaminu A. Pokračující zlepšování stavu pacientů jasně ukazuje, že léčení GMDP může být bezpečně a účinně následováno dalším léčením, pokud je ošetřujícím lékařem považováno za vhodné.

Příklad 3

Účinek GMDP na expresi ATPasy epidermálních dendritických buněk u myší

Metoda

Metoda užitá v tomto pokusu byla detailně popsaná Norvalem a kol. (Norval, M. Gilmour, J W, a Simpson T J, Photodermatol Photoimmunol Photomed 7: 243-8 (1990)).

GMDP byl rozpuštěn v ethanolu v koncentraci 1 mg/ml a 0,1 mg/ml. Dvaceti mikrolitry tohoto roztoku, nebo vehikula (ethanol) pro kontrolu, byly natřeny dorsální strany myších uší, které byly předtím zbaveny povrchových bariérních vrstev pomocí lepicí pásky. Jiné myši byly ozářeny dávkou UVB (144 mJ/cm²) , o němž je známo, že ovlivňuje expresi ATPasy Langerhansových buněk (LC). V jiném experimentu tohoto typu byla pozitivní kontrolou cis-urokanová kyselina (cUCA), látka, která se tvoří v pokožce vlivem UVB, a o které se předpokládá, že se podílí na zprostředkování změn funkcí LC způsobených UVB.

Po 24 hodinách byly myši usmrceny, pokožka byla odstraněna z dorsálního povrchu uší a byla obarvena za účelem odhalení ATPasové aktivity. Buňky, které vykazovaly zabarvení byly spočteny a vyjádřeny jako buňky/mm². Byla rovněž zaznamenána morfologie buněk.

Výsledky a diskuse

Výsledky jsou shrnuty v tabulce 2 a 3. GMDP ve dvou užitých dávkách podstatně snižuje počet ATPasově pozitivních buněk ve srovnání s kontrolním vehikulárním vzorkem. Kontrola pozitivním ošetřením (UVB záření a cUCA) počet buněk také snižuje, jak se předpokládalo.

Tabulka 2

Ošetření Počet ATPasově pozitivních buněk/mm² (průměrtSD)

ethanol	420 (30)
GMDP 1 mg/ml	350 (20)
GMDP 0,1 mg/ml	325 (20)
UVB	160 (25)

Tabulka 3

Ošetření Počet ATPasově pozitivních buněk/mm² (průměrtSD)

ethanol	445	(30)
GMDP 1 mg/ml	350	(30)
GMDP 0,1 mg/ml	280	(20)
c-UCA	325	(30)

Příklad 4

Vliv GMDP na migraci epidermálních dendritických buněk do odvodních lymfatických uzlin

V tomto příkladu byla sledována schopnost GMDP vyvolávat migraci dendritických epidermálních buněk.

Myši byly ošetřeny ethanolem, GMDP a 1 mg/ml v ethanolu, nebo UVB při 96 mJ/cm². O čtyřicet osm hodin později byly myši usmrceny, aurikulární (odvodní) lymfatické uzliny byly vyňaty a dendritické buňky přečištěny a spočítány.

Výsledky a diskuse

Výsledky jsou shrnuty v tabulce 4.

Tabulka 4

Ošetření Počet dendritických buněk na lymfatickou uzlinu (průměriSD)

ethanol	1750	(400)
GMDP 1 mg/ml	2200	(250)
UVB	8000	(1800)

UVB podstatně zvyšuje počet dendritických buněk v lymfatických uzlinách. GMDP nevykazuje žádný významný účinek.

Mi*. MJÍ»4 VáSTEgjtfc str/sxkát *20 CO FfiAHA 2, HáGcovit 2

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Použití muramylpeptidové sloučeniny jiné než 3-0-(Nacetylmuramyl-L-lysyl-D-isoglutaminyl) -1,2-di-O-palmitoyl-snglycerol, pro přípravu prostředku pro léčení nebo profylaxi zánětlivých dermatologických stavů.
2. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je sloučenina obecného vzorce I:

(I) kde:

R¹ představuje atom vodíku nebo acylovou skupinu obsahující 1 až 22 uhlíkových atomů;

R² představuje atom vodíku nebo acylovou skupinu obsahující 1 až 22 uhlíkových atomů;

R³ představuje atom vodíku nebo alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku;

R⁴ představuje alkylovou skupinu obsahující 1 až 21 atomů uhlíku nebo arylovou skupinu obsahující 6 nebo 10 atomů uhlíku;

R⁵ představuje atom vodíku; a

R představuje zbytek aminokyseliny nebo lineárního peptidu tvořeného ze 2 až 6 aminokyselinových zbytků, přičemž alespoň jeden ze zbytků je případně substituovaný lipofilní skupinou.
3. Použití podle nároku 2, kde muramylpeptidová sloučenina je:

muroctasin, jinak známý jako MDP-Lys (L18) (Ν²- (Nacetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl) -N^s-stearoyl-L-lysin) ;

MTP-PE (N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-isoglutaminyl-L-alanyl-2(1',2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3'-hydroxyfosforyloxy)ethylamid monosodný);

murabutid (N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutamin-a-Nbutylester); a t-MDP (N-acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin).
4. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je:

hoch₂

NHAc

II kde:

R představuje zbytek aminokyseliny nebo lineárního peptidu tvořeného 2 až 6 aminokyselinovými zbytky, přičemž alespoň jeden ze zbytků je případně substituovaný lipofilní skupinou;

n j e 1 nebo 2.
5. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutamin (GMDP).
6. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-Dglutamová kyselina (GMDP-A).
7. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N acetylmuramyl-L-alanyl-Lisoglutamin (GMDP-LL);

n-butylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(β1-4)-N acetylmuramyl-L· alanyl-D-glutaminu (GMDP-OBu);

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-L-lysin (GMDP-Lys); nebo

N“-[N-acetyl-D-glukosaminyl-(β1-4)-N-acetylmuramyl-L-alanyl-DisoglutaminylJ-lT-stearoyl-L-lysin (GMDP-Lys(St)).
8. Použití podle nároku 1, kde muramylpeptidová sloučenina je:

N“-[N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetyl-muramyl-L-alanyly-D-glutamyl]-N*-stearoyl-L-lysin (GMDPA-Lys (St) ) / dibenzylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramylL-alanyl-D-glutamové kyseliny (GMDPA(OBzl)₂) ;

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-N-methyl-Lalanyl-D-isoglutamin (Me-GMDP);

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetylmuramyl- (βΐ— 4) -Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-Disoglutamin) ( (GMDP)₂)

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bís-(L-alanyl-Dglutamová kyselina) ((GMDPA)₂);

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-bis-(L-alanyl-Disoglutaminyl-L-lysin) ((GMDP Lys)₂);

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramyl-(βΐ—4)-Nacetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetylmuramyl-bis-[L-alanyl-Disoglutaminyl-^-stearoyl-L-lysin] ([GMDP-Lys (St) ]₂) ;

1-adamantylester N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-Nacetylmuramyl-L-alanyl-D-isoglutaminu (GMDP-Ad);

L-threonyl-N®-[N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetylmuramylL-alanyl-y-D-isoglutaminylJ-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin (GMDPtuftsin E);

N-acetyl-D-glukosaminyl-(βΐ—4)-N-acetyl-muramyl-L-alanyl-y-Disoglutaminyl-L-threonyl-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin (GMDPtuftsin A);

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ— 4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-a-Dglutamyl-L-lysyl-L-threonyl-N®-stearoyl-L-lysyl-L-prolyl-Larginin (lipofilní GMDPA-tuftsin);

^-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ — 4) -N-acetyl-muramyl-L-alanylY-D-isoglutaminyl]-L-lysyl-L-histidyl-L-glycinamid (GMDPAbursin);

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ— 4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-L-glutamyl-L-tryptofan (GMDP-thymogen I);

N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ — 4) -N-acetylmuramyl-L-alanyl-Disoglutaminyl-e-aminohexanoyl-L-glutamyl-L-tryptofan (GMDPthymogen II);

^-[N-acetyl-D-glukosaminyl- (βΐ—4) -N-acetyl-muramyl-L-alanylL-alanyl-D- isoglut aminy l]-N®-st earoyl-L-lys yl-L-glutamyl-Ltryptofan (GMDP-thymogen III);

N-acetylmuramyl-L-threonyl-D-isoglutamin (THR-MDP); nebo n-butylester N-acetylmuramyl-L-alanyl-D-glutaminu (Murabutid).
9. Použití podle některého z nároků 1 až 8, kde zánětlivý dermatologický stav je psoriáza.
10. Použití podle nároku 9, kde psoriáza je diskoidní nebo plakální psoriáza, flexulární psoriáza, skalpální psoriáza, palmární/plantární psoriáza, kapková psoriáza, erythrodermální psoriáza nebo pustulární psoriáza, psoriatická arthritida nebo zahrnuje změny na nehtech následkem psoriázy.
11. Použití muramylpeptidové sloučeniny, jiné než 3-O-[Nacetylmuramyl-L-lysyl-D-isogluraminyl]-l, 2-di-0-palmitoyl-snglycerol, při výrobě prostředku pro léčení nebo profylaxi chorob kůže a sliznic spojených s imunitou.
12. Použití podle nároku 11, kde muramylpeptidová sloučenina je sloučeninou definovanou v některém z nároků 2 až 8.
13. Použití podle nároku 11, kde choroba spojená s imunitou je endogenní ekzém (jinak známý jako atopický ekzém nebo atopická dermatitis), seborrhoeický ekzém, pompholyx, kontaktní dermatitis, urticaria, erythroderma, lichen planus, vitiligo nebo alopoecia areata.
14. Použití podle některého z nároků 1 až 13, kde prostředek je pro topické podávání.
15. Použití podle nároku 14, kde prostředek je mast, lotion nebo krém.
16. Farmaceutická kompozice obsahující muramylpeptidovou sloučeninu, jinou než 3-0-[N-acetylmuramyl-L-lysyl-Disogluraminyl]-l, 2-di-0-palmitoyl-sn-glycerol, spolu s alespoň jedním jiným therapeutickým prostředkem používaným k ošetření nebo profylaxi zánětlivých dermatologických stavů pro současné, oddělené nebo následné použití při ošetření nebo profylaxi zánětlivých stavů.
17. Farmaceutická kompozice podle nároku 16, modifikovaná jedním nebo více znaky z nároků 2 až 10.
18. Farmaceutický prostředek podle nároků 16 nebo 17, druhým therapeutickým činidlem je kyselina salicylová, hořečnatý nebo derivát vitaminu A.