CZ30831U1 - Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku - Google Patents
Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku Download PDFInfo
- Publication number
- CZ30831U1 CZ30831U1 CZ2017-33695U CZ201733695U CZ30831U1 CZ 30831 U1 CZ30831 U1 CZ 30831U1 CZ 201733695 U CZ201733695 U CZ 201733695U CZ 30831 U1 CZ30831 U1 CZ 30831U1
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- activity
- strip
- zone
- concentration
- reaction zone
- Prior art date
Links
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 75
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 49
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 46
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 title claims description 34
- 229940043230 sarcosine Drugs 0.000 title claims description 34
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 title claims description 23
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 title claims description 12
- 229960002163 hydrogen peroxide Drugs 0.000 title description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 93
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 54
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 46
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 40
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 claims description 39
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 claims description 35
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 claims description 17
- 108010060059 Sarcosine Oxidase Proteins 0.000 claims description 16
- 102000008118 Sarcosine oxidase Human genes 0.000 claims description 16
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 11
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 claims description 10
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 claims description 10
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 10
- 108010077078 Creatinase Proteins 0.000 claims description 9
- 108010066906 Creatininase Proteins 0.000 claims description 9
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 108010024957 Ascorbate Oxidase Proteins 0.000 claims description 7
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 claims description 7
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 claims description 7
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 7
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 claims description 7
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 7
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 7
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 5
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 4
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 2
- 239000007769 metal material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000123 paper Substances 0.000 claims description 2
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 claims description 2
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 claims description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 24
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 13
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 102100037644 Kelch-like protein 41 Human genes 0.000 description 7
- 108050003242 Kelch-like protein 41 Proteins 0.000 description 7
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 7
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 7
- NPKKRSHVJIQBKU-UHFFFAOYSA-N ornogenin Natural products CC(OC(=O)C=Cc1ccccc1)C2(O)CCC3(O)C4(O)CC=C5CC(O)CCC5(C)C4CC(OC(=O)C=Cc6ccccc6)C23C NPKKRSHVJIQBKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 6
- CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N creatine Chemical compound NC(=[NH2+])N(C)CC([O-])=O CVSVTCORWBXHQV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 4
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 3
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 229960003624 creatine Drugs 0.000 description 3
- 239000006046 creatine Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000010146 3D printing Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 238000009535 clinical urine test Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 description 2
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- ZTQGWROHRVYSPW-UHFFFAOYSA-N 3-(n-ethyl-3-methylanilino)-2-hydroxypropane-1-sulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC(O)CN(CC)C1=CC=CC(C)=C1 ZTQGWROHRVYSPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000012440 Acetylcholinesterase Human genes 0.000 description 1
- 108010022752 Acetylcholinesterase Proteins 0.000 description 1
- SKAXQQHKXHSRMG-UHFFFAOYSA-N CCN(C(C=CC=C1)=C1S1)C1=NN=C1SC(C=CC=C2)=C2N1CC.N Chemical compound CCN(C(C=CC=C1)=C1S1)C1=NN=C1SC(C=CC=C2)=C2N1CC.N SKAXQQHKXHSRMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 229910018071 Li 2 O 2 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940022698 acetylcholinesterase Drugs 0.000 description 1
- 239000002390 adhesive tape Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002575 chemical warfare agent Substances 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- 239000000383 hazardous chemical Substances 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940075930 picrate Drugs 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M picrate anion Chemical compound [O-]C1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- -1 plasma Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- ZRHANBBTXQZFSP-UHFFFAOYSA-M potassium;4-amino-3,5,6-trichloropyridine-2-carboxylate Chemical compound [K+].NC1=C(Cl)C(Cl)=NC(C([O-])=O)=C1Cl ZRHANBBTXQZFSP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000012764 semi-quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011895 specific detection Methods 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000167 toxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Oblast techniky
Technické řešení se týká diagnostického proužku pro enzymatický test na stanovení množství sarkosinu a kreatininu na základě vzniklého peroxidu vodíku v biologickém vzorku nebo v environmentálním vzorku.
Dosavadní stav techniky
Rychlý rozvoj analytických metod umožnil vývoj přenosných způsobů identifikace vybraných analytů (látek) jak v prostředí, tak v biologickém vzorku [1-3]. Pro měření koncentrace jednotlivých analytů v biologických tekutinách byla vyvinuta celá řada testovacích zařízení. Taková zařízení byla navržena pro měření například hladiny glukosy, cholesterolu, proteinů, ketonů, fenylalaninu nebo enzymů v krvi, moči, spermatu, slinách. Suché reagenční proužky se používají v klinických laboratořích, ordinacích a domácnostech pro stanovení uvedených analytů ve vzorcích tělesných tekutin. Analýza pomocí enzymatických testů je jednoduchá, časově nenáročná, nevyžadující specializovanou obsluhu. Metodu kvantitativní detekce sarkosinu ve vzorku moči pomocí chromatografie a hmotnostní spektrometrie uvádí spis CN102662013 nebo CN 1026800599. Detekci sarkosinu pomocí zařízení na bázi elektroforézy- elektrochemiluminiscence popisuje například dokument CN 101718746. Kvantitativní rutinní stanovení sarkosinu je však stále náročné na přístrojové vybavení, často vyžaduje chemickou úpravu biologického vzorku a není dostatečně citlivé a přesné.
Byly popsány detekční proužky z plastického materiálu, které obsahují více zón (část s mobilizovaným enzymem, chromogenní substrát, srovnávací etalon). Významné postavení mají detektory inhibice acetylcholinesterázy pro zachycení bojové chemické látky, pesticidů, organofosfátů. Diagnostické testovací proužky slouží pro rychlou semikvantitativní analýzu moči, séra, krve. Uvedená technologie je široce využívána pro stanovení především glukózy [4]. Umožňují snadno a rychle testovat klinicky významné analyty v moči, séru, krvi a vyvodit tak určité závěry o přítomnosti různých onemocnění [5]. Navržené testy mají zpravidla dlouhou dobu trvanlivosti a nevyžadují další technické vybavení.
Dosud však chybí proužkový test k rychlé a snadné diagnostice látek, majících vztah k nádorovým onemocněním (sarkosin, hemoglobin), infekčním chorobám (sarkosin a peroxid) nebo funkci ledvin (kreatinin) nebo test využitelný v detekci nebezpečných látek z prostředí.
Podstata technického řešení
Výše uvedený nedostatek řeší proužkový enzymatický test na vybrané markéry pro posouzení zdravotního stavu (funkce ledvin, infekce, nádorová onemocnění) nebo přítomnosti nebezpečné látky v prostředí, umožňující provedení s plnou krví, sérem, plazmou, močí, spermatem, případně vodou. Technické řešení se týká proužkového testu k in vitro detekci hemoglobinu, sarkosinu, kreatininu, peroxidu vodíku v biologickém vzorku nebo environmentálním vzorku s vizuálním vyhodnocením intenzity barevného produktu reakce, ale též s možností elektronického vyhodnocení jak pomocí počítače, tak pomocí chytrého telefonu.
Předmětem technického řešení je diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu. Proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužkuje aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje první reakční zóna délky 1,0 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1 až 20 KU/1, sodnou sůl 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) o koncentraci 0,1 až 2,0 mM a fenol o koncentraci 1 až 20 mM. Na první reakční zónu navazuje druhá reakční zóna délky 0,7 cm obsahující peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) o koncentraci 0,1 až 2,0 mM. Druhá reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm a detekční zóna pak přechází v zónu včelího vosku délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku.
Předmětem technického řešení je také diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu stejného provedení, jak je uvedeno výše, kde proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužku je aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1 až 20 KU/1, 3,3 diamínobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM, peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 20 mM. Reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm, která pak přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 0,7 cm, která tvoří druhy konec diagnostického proužku.
Předmětem technického řešení je i diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu stejného provedení, jak je uvedeno výše, kde proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužkuje aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1 až 20 KU/1, o-fenyldiamin (OPD) o koncentraci 5 až 25 mM, peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 20 mM. Reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm, která pak přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 0,7 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku.
Předmětem technického řešení je navíc diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu stejného provedení, jak je uvedeno výše, kde proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužku je aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1 až 20 KU/1, amonnou sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny o koncentraci 1 až 6 mM, peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 20 mM. Reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm, která pak přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 0,7 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku.
Předmětem technického řešení je dále diagnostický proužek pro stanovení množství kreatininu v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu. Proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužkuje aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje první reakční zóna délky 1,0 cm, obsahující kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidázu o aktivitě 5 až 12 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1, sodnou sůl 3-(N-elhyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) o koncentraci 0,3 až 1,2 mM a fenol o koncentraci 1 až 15 mM. Na první reakční zónu navazuje druhá reakční zóna délky 0,7 cm obsahující kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidázu o aktivitě 20 až 100 KU/1 a 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) o koncentraci 0,5 až 4,0 mM. Druhá reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm a detekční zóna přechází v zónu včelího vosku délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku.
První reakční zóna diagnostického proužku pro stanovení kreatininu podle jiného výhodného provedení obsahuje kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidázu o aktivitě 5 až 12 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 15 mM a druhá reakční zóna obsahuje kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidázu o aktivitě 20 až 100 KU/1 a 3,3 diamínobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM.
První reakční zóna diagnostického proužku pro stanovení kreatininu podle dalšího výhodného provedení obsahuje kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidázu o aktivitě 5 až 12 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 15 mM a druhá reakční zóna obsahuje kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidázu o aktivitě 20 až 100 KU/1 peroxidázu o aktivitě 20 až 100 KU/1 a o-fenyldiamin (OPD) o koncentraci 5 až 25 mM.
Předmětem technického řešení je také diagnostický proužek pro stanovení množství peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu. Proužek má šířku 0,4 cm a délku 4,0 cm. Na jednom konci proužku je aplikována vzorková zóna délky 0,5 cm, na kterou navazuje první reakční zóna délky 1,0 cm, obsahující sodnou sůl 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové
CZ 30831 Ul kyseliny (TOPS) o koncentraci 0,1 až 2,0 mM a druhá reakční zóna o délce 0,7 cm obsahuje 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) o koncentraci 0,1 až 2,0 mM a peroxidázu o aktivitě 3 až 10 KU/1. Druhá reakční zóna přechází v detekční zónu délky 0,3 cm a detekční zóna přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku.
Diagnostický proužek pro stanovení množství peroxidu vodíku stejného provedení, jak je uvedeno výše, může obsahovat jednu reakční zónu délky 2,5 cm, která obsahuje peroxidázu o aktivitě 3 až 100 KU/1, 3,3 diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM.
Jiný výhodný diagnostický proužek pro stanovení množství peroxidu vodíku stejného provedení, jak je uvedeno výše, může obsahovat jednu reakční zónu délky 2,5 cm, která obsahuje peroxidázu o aktivitě 3 až 100 KU/1, o-fenyldiamin (OPD) o koncentraci 5 až 25 mM.
Další výhodný diagnostický proužek pro stanovení množství peroxidu vodíku stejného provedení, jak je uvedeno výše, může obsahovat jednu reakční zónu, která obsahuje peroxidázu o aktivitě 3 až 100 KU/1, amonnou sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny (ABTS) o koncentraci 1 až 6 mM.
Podložka diagnostického proužkuje výhodně provedena z plastové fólie, papírového nebo kovového materiálu. Savým materiálem je nejčastěji filtrační papír, celulózový nebo plastový materiál. Savý nosič se napouští známým způsobem napouštěcími roztoky. Napuštěné a usušené savé nosiče se upraví na čtvercová nebo obdélníková pole, která se upevní na podložku proužku [7].
Biologickým vzorkem vhodným pro detekci diagnostickým proužkem podle technického řešení je například lidská moč, sérum, plazma nebo sperma; environmentálním vzorkem muže být například přírodní nebo bazénová voda.
Ke každému typu diagnostického proužku přísluší stupnice intenzity barvy určující intenzitu proběhlé reakce a množství analytu (Obr. 4 až 6). Při vizuálním hodnocení kvantitativního množství analytu se porovnává intenzita vzniklého produktu barevné reakce v detekční zóně s intenzitou zbarvení jednotlivých detekčních zón s kontrolní stupnicí intenzit dané barvy určující množství zkoumané látky ve vzorku. Typický proužkový test zahrnuje negativní a pozitivní kontrolu (Obr. 2) [6]. Kromě kontrolních stupnic intenzit dané barvy pro určitý analyt obsahuje testovací systém zpravidla dále testovací zkumavky, testovací stojánek, pipety pro jedno použití a vhodné detekční substráty, jako je 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazol (AAP), sodná sůl 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS), 3,3 diaminobenzidin (DAB) a o-fenylidiamin (OPD) a amonná sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyselin (ABTS).
Technické řešení umožňuje snadnou detekci analytů využití určení množství sarkosinu, kreatininu, hemoglobinu, peroxidu vodíku v biologickém vzorku u hospitalizovaných pacientů nebo domácí testování určení přítomnosti dané látky v analyzovaném vzorku nebo toxické látky v environmentálním vzorku.
Objasnění výkresů
Obr. 1: (A) Metodou 3D tisku připravené šablony pro přípravu a zpracování jednotlivých zón papírových detekčních proužků. (B) Návrh jednoduchého 3D tiskem připraveného držáku pro jednotlivé proužky; zleva: spodní díl·, vrchní díl; a - celková délka; b vnitřní část, c - šířka, d - prostor pro nasátí vzorku, e - detekční okénko, f - délka nad detekčním okénkem, g - délka pod detekčním okénkem, h - šířka k nasávací části.
Obr. 2: (A) Konstrukční schéma proužkového detekčního testu s jednotlivými zónami. Možnosti použití materiálu pro jednotlivé zóny. (B) Uspořádání vlastního testovacího systému do podoby KDN, kde K je kontrolní diagnostický proužek, D je detekční proužek, N je negativní proužek.
Obr. 3: Detekční proužek s uspořádáním jednotlivých zón, (A) obsahující dvě reakční zóny; (B) obsahující jednu reakční zónu; A = 0,4 cm; B = 4,0 cm, V = 0,5 cm; R1 = 1,0 cm; R2 = 0,7 cm; D = 0,3 cm; Z = 1,5 cm.
CZ 30831 Ul
Obr. 4: Srovnávací proužek pro stanovení množství vzniklého peroxidu vodíku ve vzorku pro určení množství sarkosinu. (A) detekční škála intenzity barvy použitá pro vyhodnocení množství sarkosinu ve vzorku; (B) Závislost denzity barevné reakce na množství sarkosinu; v insetu lineární část závislosti (R2 = 0,99); (C) Známé množství v testovacích vzorcích artificiální moči šrafovaný graf, v porovnání se stanovením koncentrace sarkosinu v těchto vzorcích pomocí detekčního proužku, jako aplikované koncentrace sarkosinu. Průměrná chyba stanovení 10%.
Obr. 5: Detekční proužek pro stanovení množství vzniklého peroxidu vodíku ve vzorku. (A) barevná detekční škála použitá pro vyhodnocení množství peroxidu vodíku ve vzorku; (B) Závislost denzity barevné reakce na množství peroxidu vodíku; v insetu lineární část závislosti (R2 = 0,99); (C) Známé množství v testovacích vzorcích artificiální moči - šrafovaný graf, v porovnání se stanovením koncentrace peroxidu vodíku v těchto vzorcích pomocí detekčního proužku, jako aplikované koncentrace peroxidu vodíku. Průměrná chyba stanovení 8%.
Obr. 6: Detekční proužek pro stanovení množství vzniklého peroxidu vodíku ve vzorku pro určení hladiny kreatininu. (A) Barevná detekční škála použitá pro vyhodnocení množství kreatininu ve vzorku; (B) Závislost denzity barevné reakce na množství kreatininu; v insetu lineární část závislosti (R2 = 0,95); (C) Aplikace detekčního proužku pro určení množství kreatininu v biologickém vzorku (moči), šrafovaný graf, v porovnání s fotometrickou detekcí (pikrát). Průměrná chyba stanovení 15%.
Příklady uskutečnění technického řešení
Příprava diagnostického proužku pro enzymatické stanovení sarkosinu, kreatininu nebo peroxidu vodíku ve vzorku
Sestavení testu probíhalo následovně. Připravil se diagnostický proužek 1 z oboustranně lepicí podložky odstřihnutím z lepicí pásky (Tesá, Budapešť, Maďarsko) o délce 4,0 cm a šířce 1,9 cm. Na straně, kde je ochranná fólie, se vyřezal nožem pruh o délce 2,5 cm a šířce 0,4 cm. Takto připravená podložka se vložila do plastové šablony na výrobu proužků (Obr. 1A). Po odstranění ochranné fólie mimo vymezený pruh se nanesla tenká vrstva včelího vosku. Po zaschnutí vosku se odstranila i zbylá ochranná fólie z vymezeného pruhu. Poté se připravily obdélníky jednotlivých zón z filtračního papíru Whatman 1 (Whatman, GE Healthcare Life Sciences, Spojené království) o šířce 0,4 cm; pro vzorkovou zónu V o délce 0,5 cm a pro detekční zónu D o délce 0,3 cm. Dále se připravil obdélník z filtračního papíru o šířce 0,4 cm a délce 1,0 cm pro první reakční zónu Rl, obdélník z filtračního papíru o šířce 0,4 cm a délce 0,7 cm pro druhou reakční zónu R2 nebo případně obdélník z filtračního papíru o šířce 0,4 cm a délce 2,5 cm pro první reakční zónu Rl pro typ detekčního proužku pouze s jednou reakční zónou (Obr. 3B).
Na reakční zóny pro určený typ testu se nanesla příslušná reakční činidla dle složení a postupu uvedeného v jednotlivých příkladech. Reakční činidla se nechala zaschnout. Poté se všechny obdélníky z filtračního papíru postupně nalepily na lepicí podložku v pořadí dle Obr. 3 (A) nebo Obr. 3 (B). Pro větší stálost a delší trvanlivost je lépe obdélníková pole po nanesení reakčního činidla lyofilizovat. Před samotným testováním vzorku se připravené diagnostické proužky i vložily vzorkovou zónou V do nádobek nejprve s několika standardy sarkosinu, kreatininu nebo peroxidu vodíku o známém množství a v nádobce se ponechaly 5 až 10 minut. Alternativně lze použít držák na test (Obr. 1B). Během této doby došlo ke vzlínání vzorku, reakcím v reakčních zónách a barevné reakci v detekční zóně D. Reakce se zastavila včelím voskem na konci proužku v zóně Z. Za 15 minut se vyhodnotil výsledek změřením intenzity zbarvení detekční zóny metodou Qinslab (Color test) (Obr. 4 až 6).
Příklad 1
Stanoveni sarkosinu ve vzorku moče
Pro testování se použije vzorek čerstvé, nejlépe ranní moče, která musí být promíchána a diagnostický proužek i se dvěma reakčními zónami Rl a R2 (Obr. 3A) připravený dle postupu uvedeného výše.
CZ 30831 Ul
Připraví se také reakční činidlo (10 μΐ) pro reakční zónu Rl dle složení a koncentrací uvedených v tabulce 1:
Tabulka 1
| Složka | Koncentrace |
| Sarkosin oxidáza | 1-20 KU/1 |
| Sodná sůl 3-(N-ethyl-3methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) | 0,1-2,0 mM |
| Fenol | 1-20 mM |
Dále se připraví reakční činidlo (5 μΐ) pro reakční zónu R2 dle složení a koncentrací uvedených v tabulce 2:
Tabulka 2
| Složka | Koncentrace |
| Peroxidáza | 1-100 KU/1 |
| 4-amino-2,3-dimethyl-lfenyl-3-pyrazol (AAP) | 0,1-2,0 mM |
Připravené obdélníky z filtračního papíru dle postupu uvedeného výše pro reakční zónu Rl a reakční zónu R2 se vloží do petriho misky. Na obdélník pro reakční zónu Rl se napipetuje 10 μΐ reakčního činidla pro zónu Rl a na obdélník pro reakční zónu R2 se napipetuje 5 μΐ činidla pro reakční zónu R2. Reakční činidla se nechají zaschnout. Poté se všechny obdélníky z filtračního papíru postupně nalepí na lepicí podložku v pořadí dle Obr. 3 (A). Pro větší stálost a delší trvanlivost je lépe obdélníková pole po nanesení reakčního činidla lyofilizovat.
Připravený diagnostický proužek s nanesenými reakčními činidly se vloží vzorkovou zónou V do nádobky se vzorkem, kde dojde k rychlému vzlínání. Doba vzlínání je 5 až 10 minut. Během této doby dochází k enzymatickým reakcím v reakčních zónách Rl a R2 a barevné reakci v detekční zóně. Enzymatická reakce se zastaví v zóně Z včelího vosku na druhém konci proužku. V reakčních zónách Rl a R2 probíhají následující enzymatické reakce:
Sarkosin oxidáza
Sarkosin + O2 + H2O <-> Glycin + HCHO + H2O2 Peroxidáza
H2O2 + AAP + TOPS + Fenol <-> Chinonimin + 4 H2O
Enzym sarkosin oxidáza rozloží sarkosin na glycin, HCHO a H2O2. Vzniklý H2O2 reaguje se substrátem 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazol(AAP), sodnou solí 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) a enzymem peroxidáza. Vytvoří se fialově zbarvený produkt chinonimin, jehož intenzita zbarvení je přímo úměmá koncentraci sarkosinu ve vzorku. Množství sarkosinu je úměrné množství vznikajícího H2O2. Následně se zbarvení detekční zóny naskenuje a po té vyhodnotí pomocí programu Qinslab (color test).
Alternativně lze místo 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) a sodné soli 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) použít:
CZ 30831 Ul
a) 3,3 diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM, který tvoří hnědě zbarvený produkt. K testování se pak použije diagnostický proužek 1 jen s první reakční zónou R1 délky 2,5 cm, kde probíhají následující enzymatické reakce:
Sarkosin oxidáza
Sarkosin + O2 + H2O Glycin + HCHO + H2O2 Peroxidáza
H2O2 + Fenol + DAB ♦-> ox. DAB + 4 H2O
b) o-fenyldiamin (OPD), o koncentraci 5 až 25 mM, který tvoří žlutě zbarvený produkt. K testování se pak použije diagnostický proužek 1 jen s první reakční zónou R1 délky 2,5 cm, kde probíhají následující enzymatické reakce:
Sarkosin oxidáza
Sarkosin + O2 + H2O <* Glycin + HCHO + H2O2 Peroxidáza
H2O2 + Fenol + OPD θ ox. OPD + 4 H2O
c) amonná sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny (ABTS) o koncentraci 1 až 6 mM, která tvoří zeleně zbarvený produkt. K testování se pak použije diagnostický proužek jen s první reakční zónou Rl, délky 2,5 cm, kde probíhají následující enzymatické reakce:
Sarkosin oxidáza
Sarkosin + O2 + H2O Glycin + HCHO + H2O2 Peroxidáza
H2O2 + Fenol + ABTS <-»· ox. ABTS + 4 H2O
Příklad 2
Stanovení peroxidu vodíku ve vzorku bazénové vody
Pro testování se použije vzorek bazénové vody a detekční proužek 1 s jednou reakční zónou Rl připravený dle postupu uvedeného výše.
Připraví se také reakční činidlo (10 μΐ) pro reakční zónu Rl dle složení a koncentrací uvedených v tabulce 1:
Tabulka 1:
| Složka | Koncentrace |
| Peroxidáza | 3-100 KU/I |
| 4-amino-2,3-dimethyl-1-íenyl-3pyrazol (AAP) | 0.1-2.0 mM |
| Sodná sůl 3-(N-ethyl-3-methylanílin) propansul tónové kyseliny (TOPS) | UJ-2.U mM |
Připravený obdélník z filtračního papíru, dle postupu uvedeného výše, pro reakční zónu Rl se vloží do petriho misky. Na obdélník pro reakční zónu Rl se napipetuje 10 μΐ reakčního činidla Rl. Reakční činidlo se nechá zaschnout. Všechny obdélníky z filtračního papíru se postupně nalepí na lepicí podložku v pořadí dle Obr. 3 (B).
Připravený diagnostický proužek I s naneseným reakčním činidlem se vloží vzorkovou zónou V do nádobky se vzorkem, kde dojde k rychlému vzlínání. Doba vzlínání je 5 až 10 minut. Během této doby dochází k enzymatickým reakcím v reakčních zónách Rl a R2 a barevné reakci v deCZ 30831 Ul tekční zóně D. V reakční zóně Rl probíhá následující enzymatická reakce:
Peroxidáza
Η2Ο2 + AAP + TOPS *-* Chinonimin + 4 H2O
V této reakci je důležitý enzym peroxidáza, který rozkládá peroxid vodíků za přítomnosti substrátu 4-amino-2,3-dimetbyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) a sodné soli 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS). Po reakci enzymu peroxidázy a substrátu se vytvoří fialově zbarvený chinonimin, jehož intenzita zbarvení je přímo úměrná koncentraci H2O2. Enzymatická reakce se zastaví v zóně Z včelího vosku na druhém konci proužku i. Následně se zbarvení detekční zóny naskenuje a po té vyhodnotí pomocí programu Qinslab (color test).
Alternativně lze místo 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) a sodné soli 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) použít:
a) 3,3-diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM, který tvoří hnědě zbarvený produkt.
V reakční zóně Rl proužku pak kde probíhá následující enzymatická reakce:
Peroxidáza
H2O2 + DAB <-► ox. DAB + 4 H2O
b) o-fenyldiamin (OPD), o koncentraci 5 až 25 mM. který tvoří žlutě zbarvený produkt.
V reakční zóně Rl, kde probíhá následující enzymatické reakce:
Peroxidáza
H2O2 + OPD θ ox. OPD + 4 H2O
c) amonná sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny (ABTS) o koncentraci 1 až 6 mM, která tvoří zeleně zbarvený produkt. V reakční zóně Rl, kde probíhá následující enzymatické reakce:
Peroxidáza
H2O2 + ABTS <-> ox. ABTS + 4 H2O
Příklad 3
Stanovení kreatininu ve vzorku plazmy
Pro testování se použije vzorek čerstvé plazmy a diagnostický proužek I se dvěma reakčními zónami Rl a R2 připravený dle postupu uvedeného výše.
Připraví se také reakční činidlo (10 μΐ) pro reakční zónu Rl dle složení a koncentrací uvedených v tabulce 1:
Tabulka 1
| Složka | Koncentrace |
| Kreatináza | 6-15 KU/1 |
| Sarkosin oxidáza | 5-12 KU/1 |
| Askorbát oxidáza | 1-5 KU/1 |
| Kataláza | 100-400 KU/1 |
| Sodná sůl kyseliny 3-(N-ethyl-3- methylanilino)-2-hydroxypropansulfonové (TOPS) | 0,3-1,2 mM |
| Fenol | l-15mM |
CZ 30831 Ul
Připraví se dále reakční činidlo (5 μΐ) pro reakční zónu R2 dle složení a koncentrací uvedených v tabulce 2:
Tabulka 2
| Složka | Koncentrace |
| Kreatinináza | 50-300 KU/1 |
| Peroxidáza | 20-100 KU/1 |
| 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazol (AAP) | 0,5-4,0 mM |
Připraví se reakční zóny Rl a R2 s reakčními činidly a kompletní diagnostický proužek I tak, jak je uvedeno v příkladu 1.
Připravený diagnostický proužek I s nanesenými reakčními činidly se vloží vzorkovou zónou V do nádobky se vzorkem. Během vzlínání v reakčních zónách Rl a R2 probíhají následující enzy-
| matické reakce: | Kreatinináza | |
| Kreatinin + H2O | Kreatináza | Kreatin |
| Kreatin + H2O | Sarkosin oxidáza | * Sarkosin + Močovina |
| Sarkosin -t- O2 + lí2O 2 H2O2 + AAP + TOPS · | Peroxidáza | * Ulycin + HCHO + H2t -► Chinonimin +4 H2O |
Pro stanovení kreatininu ve vzorku moči a plazmě jsou důležité enzymy kreatinináza, který je potřebný pro rozklad kreatininu, dále enzym kreatináza, který rozloží vzniklý kreatin na sarkosin a močovinu. Sarkosin rozštěpí přítomný enzym sarkosin oxidáza za vzniku peroxidu, glycinu a formaldehydu. Množství kreatininu je úměrné množství vznikajícího H2O2. Η2Ο2 se substrátem 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazol (AAP), sodnou solí 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) a enzymem peroxidáza, vytvoří fialově zbarvený produkt chinonimin, jehož intenzita zbarvení je přímo úměrná koncentraci kreatininu ve vzorku. Enzymatická reakce se zastaví včelím voskem na druhém konci proužku. Alternativně lze použít i substrát DAB (3,3 diaminobenzidin) nebo OPD (o-fenyldiamin), který se přidá do reakčního činidla pro reakční zónu R2 jak je uvedeno v předchozích příkladech.
Průmyslová využitelnost
Test je vhodný pro stanovení sarkosinu, kreatininu, peroxidu vodíku v biologickém vzorku, plazmě, vodě a především v moči. Oproti běžným postupům (spektrofotometrickému stanovení) je doba stanovení výrazně zkrácena bez požadavků na nákladné přístrojové vybavení s minimální úpravou. Výsledek testu se projeví za 10 až 15 minut. Informace získaná tímto testem umožní normalizování dalších klinických testů a stanovení diagnóz.
Literatura:
1. Wang, W., et al., Enzymatic hydrolysis device for zero-trans fatty acid, has liquid feeding mechanism whose liquid outlet is connected with liquid inlet of coil pipe, and tank chassis provided with water outlet connected with liquid outlet of coil pipe, GUANGZHOU AOJIAN FENGZE BIOTECHNOLOGY CO (GUAN-Non-standard).
2. Cao, C., et al., Method for qualitative and quantitative detection of protein in dairy product for detecting protein content in food, involves testing pure milk sample and testing electrophoresis fingerprints followed by performing enzymatic hydrolysis, Univ Shanghai Jiaotong (Usjt-C).
CZ 30831 Ul
3. Ehrenkranz, J.R.L., System for performing enzyme-based diagnostic test to sample e.g. human, has interpretive algorithm to convert detectable signál from detectable label to numerical value for quantification of amount oř activity of enzyme in sample, EHRENKRANZ J R L (EHRE-Individual) EHRENKRANZ J R L (EHRE-lndividual).
4. Douglas, J., et al., Multilayer reacting testing strip and method for measuring concentration of analyte in sample. 1. LIFESCAN, Milpitas, CA, US Editor 1997: USA.
5. Apparatus for testing biological sample e.g. saliva sample for detection of cancer, has test pads arranged side by side, so thal outer surface of housing defmes window through which portions of front surface of test areas are visible, VIGILANT BIOSCIENCES INC (VIGINon-standard).
6. Burg, B., et al., Computer-implemented method for quantifying color change of test medium on diagnostic instrument involves identifying reference samples for medium in the instrument, determining dominant camera-captured color of reference sample/test medium, SCANADU INC (SCAN-Non-standard) SCANADU INC (SCAN-Non- standard) BURG B (BURG-Individual) ZIZI M (ΖΙΖΙ-Individual) ROWE A A (ROWE- Individual) SMART A (SMAR-Individual) DE BROUWER W (DBRO-Individual) SCANADU INC (SCAN-Nonstandard).
7. Wahl, R., O. Cromwell, and H. Fiebig, esting strip for diagnosis of allergies in vitro and use thereof D. MERCK PATENT GMBH, DE, Editor 1997: Německo.
8. TALALAK, Kwanrutai, Julaluk NOIPHUNG, Temsiri SONGJAROEN, Orawon CHAELAPAKUL a Wanida LAIWATTANAPAISAL. A facile low-cost enzymatic paper-based assay for the determination of urine creatinine. Talanta. 2015,144, 915-921.
Claims (15)
- NÁROKY NA OCHRANU1. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství sarkosinu v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4cm, délku (B) 4,0 cm, přičemž na jednom konci proužku je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) délky 1,0 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1 až 20 KU/1, sodnou sůl 3-(N-ethyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny (TOPS) o koncentraci 0,1 až 2,0 mM a fenol o koncentraci 1,0 až 20,0 mM, na reakční zónu (Rl) navazuje reakční zóna (R2) délky 0,7 cm, obsahující peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu o koncentraci 0,1 až 2,0 mM, reakční zóna (R2) přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 2. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství sarkosinu podle nároku 1, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4 cm, délku (B) 4,0 cm, přičemž na jednom konci proužku (1) je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1,0 až 20,0 KU/1, 3,3-diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1,0 až 15,0 mM, peroxidázu o aktivitě 1 až 100 KU/1 a fenol o koncentraci 1,0 až 20,0 mM, reakční zóna (Rl) přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu (Z) včelího vosku délky 0,7 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 3. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství sarkosinu podle nároku 1, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4 cm, délku (B) 4,0 cm, přičemž na jednom konci proužku (1) je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1,0 až 20,0 KU/1, o-fenyldiaminCZ 30831 Ul (OPD) o koncentraci 5,0 až 25,0 mM, peroxidázu o aktivitě 1,0 až 100,0 KU/1 a fenol o koncentraci 1,0 až 20,0 mM, reakční zóna (Rl) přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu (Z) včelího vosku délky 0,7 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 4. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství sarkosinu podle nároku 1, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4 cm, délku (B) 4 cm, přičemž na jednom konci proužku (1) je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) délky 2,5 cm, obsahující sarkosin oxidázu o aktivitě 1,0 až 20,0 KU/1, amonnou sůl 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny o koncentraci 1,0 až 6,0 mM, peroxidáza o aktivitě 1 až 100 KU/1 a fenol o koncentraci 1,0 až 20,0 mM, reakční zóna (Rl) přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu (Z) včelího vosku délky 0,7 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 5. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství kreatininu v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4cm, délku (B) 4,0 cm, přičemž na jednom konci proužku (1) je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) délky 1,0 cm, obsahující kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidáza o aktivitě 5 až 12 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1, sodnou sůl 3-(N-elhyl-3-methylanilin) propansulfonové kyseliny o koncentraci 0,3 až 1,2 mM a fenol o koncentraci 1 až 15 mM, na reakční zónu (Rl) navazuje reakční zóna (R2) délky 0,7 cm obsahující kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidáza o aktivitě 20 až 100 KU/1 a 4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu (AAP) o koncentraci 0,5 až 4,0 mM, reakční zóna (R2) přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu včelího vosku (Z) délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 6. Diagnostický proužek (1) podle nároku 5, vyznačující se tím, že reakční zóna (Rl) obsahuje kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidázu o aktivitě 5,0 až 12,0 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 15 mM a reakční zóna (R2) obsahuje kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidázu o aktivitě 20 až 100 KU/1 a 3,3 diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM.
- 7. Diagnostický proužek (1) podle nároku 5, vyznačující se tím, že reakční zóna (Rl) obsahuje kreatinázu o aktivitě 6 až 15 KU/1, sarkosin oxidázu o aktivitě 5 až 12 KU/1, askorbát oxidázu o aktivitě 1 až 5 KU/1, katalázu o aktivitě 100 až 400 KU/1 a fenol o koncentraci 1 až 15 mM, na reakční zónu (Rl) navazuje reakční zóna (R2) obsahující kreatininázu o aktivitě 50 až 300 KU/1, peroxidázu o aklivitě 20 až 100 KU/1 a o-fenyldiamin (OPD) o koncentraci 5 až 25 mM.
- 8. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku, který sestává z podložky, na které jsou aplikovány zóny ze savé matrice pro provedení testu, vyznačující se tím, že proužek (1) má šířku (A) 0,4cm, délku (B) 4,0 cm, přičemž na jednom konci proužku (1) je aplikována vzorková zóna (V) délky 0,5 cm, na kterou navazuje reakční zóna (Rl) o délce 1,0 cm obsahující sodnou sůl 3-(N-ethyl-3methylanilin) propansulfonové kyseliny o koncentraci 0,1 až 2,0 mM, reakční zóna (Rl) přechází v druhou reakční zónu (R2), která je dlouhá 0,7 cm a obsahuje peroxidázu o aktivitě 3 až 100 KU/1 a4-amino-2,3-dimethyl-l-fenyl-3-pyrazolu o koncentraci 0,1 až 2,0 mM (R2), dále přechází v detekční zónu (D) délky 0,3 cm a detekční zóna (D) přechází v zónu (Z) včelího vosku délky 1,5 cm, která tvoří druhý konec diagnostického proužku (1).
- 9. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství peroxidu vodíku, vyznačující se tím, že reakční zóna (Rl) obsahuje peroxidázu o aktivitě 3,0 až 100,0 KU/1 a 3,3-diaminobenzidin (DAB) o koncentraci 1 až 15 mM.
- 10. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství peroxidu vodíku, vyznačující seCZ 30831 Ul tím, že reakční zóna (Rl) obsahuje peroxidázu o aktivitě 3,0 až 100,0 KU/1 a o-fenyldiamin (OPD) o koncentraci 5 až 25 mM.
- 11. Diagnostický proužek (1) pro stanovení množství peroxidu vodíku, vyznačující se tím, že reakční zóna (Rl) obsahuje peroxidázu o aklivitě 3 až 100KU/1 a amonnou sůl5 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazolin-6) sulfonové kyseliny o koncentraci 1 až 6 mM.
- 12. Diagnostický proužek (1) podle nároků 1 až 11, vyznačující se t í m , že podložkou diagnostického proužkuje plastová fólie, papírový nebo kovový materiál.
- 13. Diagnostický proužek (1) podle nároků lažl2, vyznačující se tím, že savým materiálem je filtrační papír, celulózový nebo plastový materiál.ío
- 14. Diagnostický proužek (1) podle nároků lažl3, vyznačující se tím, že biologickým vzorkem je lidská moč, sérum, plazma nebo sperma.
- 15. Diagnostický proužek (1) podle nároku 1 až 13, vyznačující se tím, že environmentálním vzorkem je bazénová voda.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2017-33695U CZ30831U1 (cs) | 2017-05-16 | 2017-05-16 | Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ2017-33695U CZ30831U1 (cs) | 2017-05-16 | 2017-05-16 | Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ30831U1 true CZ30831U1 (cs) | 2017-07-11 |
Family
ID=59519915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ2017-33695U CZ30831U1 (cs) | 2017-05-16 | 2017-05-16 | Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ30831U1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ307785B6 (cs) * | 2017-12-18 | 2019-05-02 | Prevention Medicals s.r.o. | Nanočástice Fe2O3/Au s navázanými enzymy sarkosin oxidázy a křenové peroxidázy pomocí chitosanu a jejich použití pro kvalitativní a kvantitativní stanovení sarkosinu v biologickém nebo environmentálním vzorku |
-
2017
- 2017-05-16 CZ CZ2017-33695U patent/CZ30831U1/cs not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CZ307785B6 (cs) * | 2017-12-18 | 2019-05-02 | Prevention Medicals s.r.o. | Nanočástice Fe2O3/Au s navázanými enzymy sarkosin oxidázy a křenové peroxidázy pomocí chitosanu a jejich použití pro kvalitativní a kvantitativní stanovení sarkosinu v biologickém nebo environmentálním vzorku |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0654659B1 (en) | Defined volume test device | |
| JP5925026B2 (ja) | クレアチニン測定用乾式試験片及びクレアチニン測定法 | |
| US20050227370A1 (en) | Body fluid analyte meter & cartridge system for performing combined general chemical and specific binding assays | |
| US20050214161A1 (en) | Test device for simultaneous measurement of multiple analytes in a single sample | |
| ES2383765T3 (es) | Nueva configuración de un dispositivo de tira reactiva seca y procedimiento para determinar un analitico en una muestra utilizando dicho dispositivo de tira reactiva seca | |
| ZA200607521B (en) | Body fluid analyte meter & cartridge system for performing combined general chemical and specific binding assays | |
| JPH04212060A (ja) | 全血の分離及び検定のための装置及び方法 | |
| US20160245811A1 (en) | Systems and methods for monitoring biological fluids | |
| JP2611890B2 (ja) | 乾式分析要素を用いた測定方法及び乾式分析要素 | |
| US20110053192A1 (en) | Method Of Rapid Detection Of An Analyte In Bodily Fluids Using A Fluorescent Dry Test Strip Biosensor | |
| CN109900689A (zh) | 抗干扰膜及肝功能联合测试条 | |
| US20180355402A1 (en) | Diagnostic strip for determining the amount of sarcosine, creatinine and hydrogen peroxide in a biological or environmental sample | |
| US8703101B2 (en) | Methods of determining NOx in a wound sample | |
| US20110287461A1 (en) | Enzymatic analytical membrane, test device and method | |
| JPS61170400A (ja) | 酵素阻害によるテオフイリンの分析用分析素子，組成物および方法 | |
| US20180321202A1 (en) | Methods and devices for detecting methanol poisoning using formate oxidase | |
| CZ30831U1 (cs) | Diagnostický proužek pro stanovení množství sarkosinu, kreatininu a peroxidu vodíku v biologickém nebo environmentálním vzorku | |
| EP3404418A2 (en) | A diagnostic strip for determining the amount of sarcosine, creatinine and hydrogen peroxide in a biological or environmental sample | |
| JP2021535380A (ja) | 糖尿病におけるマイクロサンプリング検出 | |
| US20100297601A1 (en) | Small volume and ultra speed colorimetric sensor | |
| CN119355252B (zh) | 检测试纸 | |
| WO2018203145A1 (en) | Systems and methods for monitoring biological fluids | |
| CN119335172A (zh) | 一种用于检测多种生物标志物的全血视觉比色试纸条 | |
| HK40048617A (en) | Microsampling detection in diabetes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG1K | Utility model registered |
Effective date: 20170711 |
|
| MK1K | Utility model expired |
Effective date: 20210516 |