CZ308104B6 - Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití - Google Patents

Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití Download PDF

Info

Publication number
CZ308104B6
CZ308104B6 CZ2018-121A CZ2018121A CZ308104B6 CZ 308104 B6 CZ308104 B6 CZ 308104B6 CZ 2018121 A CZ2018121 A CZ 2018121A CZ 308104 B6 CZ308104 B6 CZ 308104B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino
pyrrolo
pyrido
pyrimidine
ribofuranosyl
Prior art date
Application number
CZ2018-121A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2018121A3 (cs
Inventor
Lucia Veselovská
Michal Hocek
Marián HAJDÚCH
Petr Džubák
Original Assignee
Ústav organické chemie a biochemie AV ČR, v. v. i.
Univerzita Palackého v Olomouci
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ústav organické chemie a biochemie AV ČR, v. v. i., Univerzita Palackého v Olomouci filed Critical Ústav organické chemie a biochemie AV ČR, v. v. i.
Priority to CZ2018-121A priority Critical patent/CZ308104B6/cs
Priority to JP2020548736A priority patent/JP6973761B2/ja
Priority to US16/978,093 priority patent/US11299510B2/en
Priority to ES19710587T priority patent/ES2898344T3/es
Priority to EP19710587.7A priority patent/EP3765475B1/en
Priority to AU2019235042A priority patent/AU2019235042B2/en
Priority to PL19710587T priority patent/PL3765475T3/pl
Priority to CA3090343A priority patent/CA3090343C/en
Priority to PCT/CZ2019/050008 priority patent/WO2019174657A1/en
Publication of CZ2018121A3 publication Critical patent/CZ2018121A3/cs
Publication of CZ308104B6 publication Critical patent/CZ308104B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
    • C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
    • C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
    • C07H19/23—Heterocyclic radicals containing two or more heterocyclic rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, not provided for in groups C07H19/14 - C07H19/22

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I, kde R je thiofen-3-yl, furan-2-yl, furan-3-yl, benzofuran-2-yl, methyl, amino, methylsulfanyl, methoxy-, nebo dimethylamino- skupina; nebo farmaceuticky přijatelné soli takových sloučenin, jejich optické izomery či směsi takových optických izomerů. Sloučeniny podle tohoto vynálezu vykazují silné cytostatické a cytotoxické účinky na buněčných liniích preferenčně nádorového původu a to u širokého spektra nemocí, zahrnujících nádory různého histogenetického původu.

Description

Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití
Oblast techniky
Vynález se týká nového typu látek s protinádorovou aktivitou a jejich terapeutického použití.
Dosavadní stav techniky
Přestože existují a jsou schváleny desítky antiproliferačních léčiv, léčba řady typů leukémií a nádorů má stále nízkou úspěšnost. Současná léčiva mají navíc často výrazné nežádoucí účinky. Proto je třeba vyvíjet další nové typy protinádorových látek pro terapeutické použití.
V nedávné době bylo námi objeveno, patentováno a publikováno několik tříd silných cytostatik, jedná se o 7-aryl a 7-hetaryl-substituované 7-deazaadenosinové nukleosidy (viz níže obecný vzorec A), (Bourderioux, A.; Nauš, P.; Hocek, M.: WO 2010121576; Bourderioux, A. a kol. J. Med. Chem. 2011, 54, 5498-5507), nebo o 6-hetaryl-7-deazapurinové ribonukleosidy nesoucí v poloze 7 vodík nebo fluor (viz níže obecný vzorec B) (Hocek, M.; Nauš, P.: WO 2009089804; Nauš, P. a kol. J. Med. Chem. 2010, 53, 460-70). Uvedené látky vykazovaly nanomolámí cytostatický a cytotoxický efekt proti širokému spektru leukémii a solidních nádorů.
První z anelovaných deazapurinových ribonukleosidů, které jsme připravili, jako například pyrimidoindolové ribonukleosidy, nebyly cytotoxické buď vůbec, nebo jen velmi málo (viz níže obecný vzorec C) (Tichý, M. a kol. Bioorg. Med. Chem. 2012, 20, 6123-6133; Tichý, M. a kol. Bioorg. Med. Chem. 2013, 21, 5362-5372). Proto byly připraveny 4-substituované heteropentadieno-pyrrolopyrimidinové ribonukleosidy, konkrétně thienopyrrolopyrimidinové (viz níže obecné vzorec E), (Hocek, M.; Tichý, M.; Džubák, P.; Hajduch, M.: WO 2018001383; Tichý, M. a kol., J. Med. Chem. 2017, 60, 2411-2424), fůropyrrolopyrimidinové a 5methylpyrrolo-pyrrolo-pyrimidinové ribonukleosidy (Hocek, M.; Smolen, S. B.; Tokarenko, A.; Džubák, P.; Hajduch, M.: PV 2016-465) substituované v poloze 4 (viz níže obecné vzorec D), které vykazují silné cytostatické a cytotoxické účinky na buněčných liniích preferenčně nádorového původu a to u širokého spektra nemocí, zahrnujících nádory různého histogenetického původu.
Podstata vynálezu
Tento vynález popisuje nové pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy substituované v poloze 4 obecného vzorce I, které vykazují cytostatické a cytotoxické účinky na buněčných liniích preferenčně nádorového původu, a to u širokého spektra nemocí, zahrnujících nádory různého histogenetického původu.
Od všech předchozích typů 7-deazapurinových derivátů obecných vzorců A a B, od pyrimidoindolových ribonukleosidů obecného vzorce C a také od anelovaných heteropentadienopyrrolopyrimidinových ribonukleosidů obecného vzorce D a E se zásadně liší přítomností anelovaného šestičlenného pyridinového kruhu v polohách 7 a 8 deazapurinového skeletu. Předkládané pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy samotné jsou dosud nepopsané sloučeniny, které se nevyskytují v přírodě a ani nebyly nikdy syntetizovány, tudíž nebyla studována jejich biologická aktivita. Pyridinopyrrolopyrimidinové nukleosidy jsou zcela unikátním a novým typem nukleosidů s tricyklickou strukturou obsahující šestičlennou bázi, která je na rozdíl od všech 7-substituovaných 7-deazapurinových nukleosidů rigidní, což vede k jinému typu interakce s cílovým biologickým systémem, a tedy k jinému mechanizmu účinku. Je třeba zmínit, že obdobné sloučeniny s šestičlenným aromatickým kruhem bez heteroatomu nevykázaly žádnou podobnou aktivitu.
Překvapivě bylo zjištěno, že cytostatické a cytotoxické účinky byly závislé na poloze 5 nebo 7, zatímco sloučeniny s dusíkovým atomem v poloze 6 nebo 8 biologickou aktivitu nevykazují. Naproti tomu dříve testované furopyrrolopyrimidinové a thienopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy nebyly připravitelné ve všech variantách, nebo nevykázaly zásadně rozdílnou aktivitu v závislosti na postavení heteroatomu.
Předmětem vynálezu jsou substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce
(I),
-2CZ 308104 B6 kde
X je dusíkový atom a současně Y je atom uhlíku, nebo X je atom uhlíku a současně Y je atom dusíku;
R je zvolen ze skupiny zahrnující
- C1-C5 alkyl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
- C2-C6 alkenyl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
- C6-C12 aryl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
- C4-C12 heteroaryl, dále obsahující alespoň jeden heteroatom zvolený z O a S; volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyl) aminoskupiny;
aminoskupinu;
C1-C5 alkylaminoskupinu;
di(Cl-C5 alkyl)aminoskupinu;
C1-C5 alkoxy skupinu;
C1-C5 alkylsulfanyl;
nebo farmaceuticky přijatelné soli takových sloučenin, jejich optické izomery či směsi takových optických izomerů, včetně racemické směsi.
Ve výhodném provedení je R zvolen ze skupiny, sestávající z C1-C5 alkylu, fenylu, naftylu, furan-2-ylu, furan-3-ylu, thiofen-2-ylu, thiofen-3-ylu, benzofuran-2-ylu, C1-C5 alkylsulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di (Cl-C5alkyl)aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny a aminoskupiny.
Ještě výhodněji je R zvolen ze skupiny, sestávající z thiofen-3-ylu, furan-2-ylu, furan-3-ylu, benzofuran-2-ylu, aminoskupiny, methylsulfanylu, methylu, methoxyskupiny, dimethylaminoskupiny.
Tak, jak jsou zde popsány a pokud není uvedeno jinak, mají jednotlivé substituenty následující významy:
- „alkyl“ je rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec, obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu;
- „alkenyl“ je rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec obsahující jednu nebo více dvojných vazeb a obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu;
- „aryl“ je uhlovodíkový řetězec zahrnující nejméně jeden aromatický kruh a obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu. Aryl také může obsahovat více než jeden aromatický kruh, potom mohou být tyto kruhy kondenzované nebo nekondenzované;
- „heteroaryl“ je uhlovodíková skupina obsahující alespoň jeden heteroatom a alespoň jeden aromatický kruh; přičemž počet uhlíků a počet a typ heteroatomu jsou uvedeny v místě použití tohoto termínu. Heteroaryl může rovněž obsahovat více než jeden aromatický kruh, potom mohou být tyto kruhy kondenzované nebo nekondenzované;
- „hydroxy“ označuje skupinu -OH;
- „sulfanyl“ označuje skupinu -SH;
-3CZ 308104 B6
- „amino“ označuje skupinu -NH2;
- „alkylamino“ je skupina, vytvořená substituováním jednoho nebo dvou vodíkových atomů aminoskupiny výše definovaným alkylem;
- „dialkylamino“ je skupina, vytvořená substituováním obou vodíkových atomů aminoskupiny dvěma výše definovanými alkyly, stejnými nebo rozdílnými;
- „alkoxy“ označuje skupinu -OR', kde R' odpovídá definici alkylu;
- „alkylsulfanyl“ označuje skupinu -SR, kde R odpovídá definici alkylu.
Tak, jak je zde použit, zahrnuje výraz „farmaceuticky přijatelná sůl takové soli, které vykazují srovnatelnou biologickou účinnost a srovnatelné vlastnosti jako nárokované sloučeniny obecného vzorce I, jsou v rámci rozumného lékařského úsudku vhodné pro použití v kontaktu s tkáněmi lidí a nižších živočichů bez nežádoucí toxicity, podráždění, alergické reakce a podobně a vykazují přijatelný poměr prospěchu a rizika. V mnoha případech jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu schopné vytvářet kyselé a/nebo bazické soli na základě přítomnosti aminových a/nebo karboxylových skupin či skupin jim podobných (příkladem jsou fenol nebo hydroxamová kyselina). Farmaceuticky přijatelné kyselé adiční soli mohou být vytvářeny s anorganickými i organickými kyselinami. Anorganické kyseliny, od nichž mohou být soli odvozeny, zahrnují například kyselinu chlorovodíkovou, bromovodíkovou, sírovou, dusičnou, fosforečnou a podobně. Organické kyseliny, od nichž mohou být soli odvozeny, zahrnují například kyselinu octovou, propionovou, glykolovou, pyrohroznovou, šťavelovou, maleinovou, malonovou, jantarovou, filmařovou, vinnou, citrónovou, benzoovou, skořicovou, mandlovou, methansulfonovou, ethansulfonovou, p-tolucn sulfono voli, salicylovou a podobně. Farmaceuticky přijatelné bazické adiční soli mohou být vytvářeny s anorganickými i organickými bázemi. Anorganické báze, od nichž mohou být soli odvozeny, zahrnují například sodík, draslík, lithium, amonium, vápník, hořčík, železo, zinek, měď, mangan, hliník a podobně; zvláště upřednostňovány jsou amonné, draselné, sodné, vápenaté a hořečnaté soli. Organické báze, od nichž mohou být soli odvozeny, zahrnují například primární, sekundární a terciární aminy, substituované aminy včetně přírodně se vyskytujících substituovaných aminů, cyklické aminy, bazické iontově výměnné pryskyřice a podobně, konkrétními příklady jsou isopropylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, tripropylamin a ethanolamin. Farmaceuticky přijatelné soli podle předkládaného vynálezu mohou být syntetizovány z mateřské bazické nebo kyselé sloučeniny běžnými chemickými metodami. Obecně mohou být takové soli připraveny reakcí volných kyselých forem těchto sloučenin se stechiometrickým množstvím příslušné báze (jako jsou hydroxid sodný, vápenatý, horečnatý nebo draselný, uhličitan, hydrogenuhličitan a podobně), nebo reakcí volných bazických forem takových sloučenin se stechiometrickým množstvím vhodné kyseliny. Takové reakce se typicky provádějí v organickém rozpouštědle, ve vodě, nebo v jejich směsi. Pokud jsou použitelná, obecně se upřednostňují nevodná media, jako jsou ether, ethyl-acetát, ethanol, isopropanol nebo acetonitril. Seznam vhodných adičních solí lze nalézt např. v publikaci Remington's Pharmaceutical Sciences, 20. vydání, Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985), která je zde uvedenajako odkaz.
Ve výhodném provedení jsou předmětem vynálezu následující substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I:
4-(furan-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-(furan-2-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-(thiofen-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin
4-(benzofuran-2-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-methyl-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-(dimethylamino)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-amino-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-methoxy-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-(methylsulfanyl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-(furan-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin
-4CZ 308104 B6
4-(furan-2-yl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-(thiofen-3-yl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-(benzofuran-2-yl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-methyl-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-(dimethylamino)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin 4-amino-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-methoxy-9-(j8-D-ribofiiranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin 4-(methylsulfanyl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9//-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin
Předmětem předkládaného vynálezu jsou dále substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I pro použití jako léčiva.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou také substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo k léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění, spojeného s buněčnou hyperproliferací.
Předmětem vynálezu jsou i substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I pro použití k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících např. nádory epiteliálního, mesenchymálního a neuroektodermálního původu.
Předmětem vynálezu jsou i substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I pro výrobu léčiva k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících např. nádory epiteliálního, mesenchymálního a neuroektodermálního původu.
Předmětem vynálezu je rovněž farmaceutický prostředek obsahující terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I a případně také alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
Význakem vynálezu je použití zmíněného farmaceutického prostředku pro inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu, k léčbě nádorového nebo nenádorového onemocnění spojeného s buněčnou hyperproliferací.
Termín terapeuticky účinné množství, jak se zde používá, se týká takového množství sloučeniny nebo léčiva, které je účinné při léčení onemocnění nebo poruchy u člověka, popřípadě savce. V případě léčby rakoviny může terapeuticky účinné množství léčiva snížit počet rakovinných buněk; snížit velikost nádoru; inhibovat (tj. do určité míry zpomalit a s výhodou zastavit) infiltraci rakovinných buněk do periferních orgánů; inhibovat (tj. zpomalit do určité míry a s výhodou zastavit) tvorbu metastází nádoru, inhibovat, do určité míry, růst nádoru a/nebo zmírnit do určité míry jeden nebo více symptomů spojených s rakovinou. Vzhledem k tomu, léčivo může zabránit růstu a/nebo zabíjet existující rakovinné buňky, může být cytostatické a/nebo cytotoxické.
Výraz farmaceutický prostředek označuje formulaci sloučeniny a média obecně uznávanou v oboru pro dodání biologicky účinné látky savci, např. člověku. Takové médium zahrnuje všechny farmaceuticky přijatelné nosiče, ředidla nebo pomocné látky.
Výraz farmaceuticky přijatelný nosič, ředidlo nebo plnivo, jak se zde používá, zahrnuje bez omezení jakoukoliv pomocnou látku, nosič, kluznou látku, sladidlo, konzervant, barvivo, látku zvýrazňující chuť, povrchově aktivní činidlo, dispergační činidlo, suspendační činidlo, stabilizátor, izotonický prostředek, rozpouštědlo nebo emulgátor, které byly schválené pro použití u lidí nebo domácích zvířat.
Vynález dále zahrnuje sloučeniny vzorce I pro podání ve formě jediné účinné látky farmaceuticky přijatelného prostředku, který může být vyroben pomocí obvyklých postupů,
-5CZ 308104 B6 známých v oboru, například tak, že se účinná látka naváže na farmaceuticky přijatelný, terapeuticky inertní organický a/nebo anorganický nosič či excipient nebo se s ním smíchá. Další možností je použití sloučeniny vzorce I jako druhé či další aktivní složky, mající synergický účinek s jinými účinnými látkami ve známých léčivech či podávání sloučenin vzorce I společně s takovými léčivy.
Sloučeniny vzorce I podle tohoto vynálezu lze rovněž používat ve formě prekurzoru (proléčiva) nebo v jiné vhodně upravené formě, která uvolňuje aktivní látku in vivo.
Detailní popis vynálezu
Číslování sloučenin
Dále je použito následující číslování uváděných sloučenin:
Syntetický postup
Klíčové výchozí benzoylované 4-chlorpyridopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy byly připraveny 5 krokovou syntézou, která vycházela z odpovídajících chlomitropyridinů 3 a 4. Syntéza zahrnuje klíčovou nukleofilní substituci atomu chloru ethyl kyanoacetátem (Finch, N.; Robinson, Μ. M.; Valerio, Μ. P. A Synthesis of 4-Azaoxindole J. Org. Chem. 1972, 37, 51-53), takto připravené sloučeniny byly následně redukovány zinkem za současné cyklizace, poté následovala cyklizace s formamidem (Reader, J. C. a kol. J. Med. Chem. 2011, 54, 8328-8342). Následující krok chlorace byl proveden dle podmínek dříve optimalizovaných v naší skupině (Naus, P. a kol. J. Med. Chem. 2014, 57, 1097-110). Takto připravené tricyklické nukleobáze byly následně převedeny Vorbruggenovou glykosylací na benzoylované 4chlorpyridopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy 13 nebo 14 (Schéma 1).
-6CZ 308104 B6
Schéma 1: Syntéza benzoylovaných 4-chlorpyridopyrrolopyrimidinových nukleosidů
Cílové nukleosidy substituované v poloze 4 (Schéma 2 a 3) byly připraveny palladiem katalyzovanými reakcemi nebo nukleofilními substitucemi. 2-fůrylová skupina byla do polohy 4 zavedena Stilleho reakcí s 2-furyltributylstannanem, 3-furylová, 3-thienylová a 2-benzofůrylová skupina Suzukiho reakcí s příslušnými boronovými kyselinami, methyl derivát byl připraven palladiem katalyzovanou alkylací trimethylhliníkem a dimethylaminoderivát nukleofilní substitucí s dimethylaminem. Všechny tyto reakce poskytly 4-substituované deriváty benzoylované na cukerné části. Benzoylové chránící skupiny byly odstraněny methoxidem sodným v methanolu, tato reakce vedla k cílovým volným nukleosidům. Methoxy, amino a methylsulfanylové skupiny byly do molekuly zavedeny nukleofilními substitucemi; za podmínek reakcí došlo zároveň k odstranění benzoylových skupin.
Schéma 2: Syntéza 4-substituovaných pyridopyrrolopyrimidinových nukleosidů 15,1
-7CZ 308104 B6
Tabulka 1: Syntéza 4-substituovaných pyridopyrrolopyrimidinových nukleosidů 15,1
Vstup Podmínky R Chráněný nukleosid Výtěžek [% hm.] Volný nukleosid Výtěžek [% hm.]
1 a OMe - - la 62
2 b SMe 15b 52 1b 50
3 c nh2 - - 1c 52
4 e Me 15d 69 Id 87
5 d NMe2 15e 82 le 81
6 f 2-furyl 15f 90 If 75
7 g 3-furyl 15g 73 ig 78
8 g 3-tienyl 15h 70 Ih 70
9 h 2-benzofuryl 15i 56 li 69
í> Ϊ5
st: SSsQfca, tnv h: fer Ktšisbfe, S&OL ů;«: hřHjtsq.ý tt2ů ’C. §4 b;ů: MsjřtH v' THF.. k s, f-tn,, W h;«: LMF, *0,li.) b; f: PsCk/FRijty
D^f < Ks) N). 4 h: g: R-'te-»ňě’,'Ss kysefes. P<.$;PPhj).<, ŘtyXh, tsWn. KXi ·'€.. <M§ h: K: W0Ms< WGHTW', *C,. ů
Schéma 3: Syntéza 4-substituovaných pyridopyrrolopyrimidinových nukleosidů 16, 2
-8CZ 308104 B6
Tabulka 2: Syntéza 4-substituovaných pyridopyrrolopyrimidinových nukleosidů 16, 2
Vstup Podmínky R Chráněný nukleosid Výtěžek [% hm.] Volný nukleosid Výtěžek [% hm.]
1 a OMe - - 2a
2 b SMe - - 2b
3 c nh2 - - 2c
4 e Me 16d 55 2d 63
5 d NMe2 16c 67 2e 91
6 f 2-furyl 16f 66 2f 71
7 g 3-furyl 16g 84 2g 90
8 g 3-tienyl 16h 57 2h 72
9 g 2 benzofuryl 16i 64 2i 79
Pokud testované látky vykázaly v in vitro cytotoxickém testu aktivitu), byla téměř vždy 5 preferenční vůči širokému spektru nádorových linií různého histogenetického původu (mesenchymální i epiteliální nádory), s významně menší aktivitou vůči liniím normálních lidských fibroblastů (BJ a MRC-5) a tudíž dobrým in vitro terapeutickým indexem.
Lepší terapeutický index, tedy nízká toxicita vůči nerakovinovým buněčným liniím, v porovnání to s fúropyrrolopyrimidinovými, 5-methylpyrrolo-pyrrolo-pyrimidinovými a thienopyrrolopyrimidinovými ribonukleosidy společně s odlišným mechanismem účinku favorizuje zde předkládané látky pro použití jako případná nová cytostatika.
Seznam použitých zkratek a symbolů:
ATR aq. bd bq bs
t.t.
bt btd
BSA
Bz
C-18 d dd ddd dm
DMF metoda zeslabeného vnitřního odrazu vodný široký dublet široký kvartet široký singlet teplota tání široký triplet široký triplet dubletu bis(trimethylsilyl) acetamid benzoyl chemicky vázaná C-18 stacionární chromatografická fáze (reverzní fáze) dublet dublet dubletu dublet dubletu dubletu dublet multipletů
N, N-á i meth y 1formamid
-9CZ 308104 B6
DCM dichlormethan
DMSO dimethylsulfoxid
dt dublet triplet
El elektronová ionizace
eq. ekvivalent
EtOH ethanol
ESI elektrosprejová ionizace
gem geminální
HPFC vysokoúčinná flash chromatografíe
HPLC vysokoúčinná kapalinová chromatografíe
HR vysoké rozlišení
IR infračervená spektroskopie
m multiplet
m meta
Me methyl
MS hmotnostní spektrometrie
v vlnočet
NMR jaderná magnetická rezonance
o ortho
P para
Ph fenyl
PPh3 trifenylfosfin
q kvartet
RP-HPFC vysokoúčinná flash chromatografíe s obrácenými fázemi
s singlet
t.m. teplota místnosti
t triplet
td triplet dubletů
TMSOTf trimethylsilyl trifluormethansulfonát
Příklady uskutečnění vynálezu
NMR spektra naměřena na spektrometrech Bruker AVANCE o pracovních frekvencích 400 MHz (Ή při 400 MHz, 13C při 100,6 MHz), nebo 500 MHz (Ή při 500 MHz, 13C při 125,7 MHz), nebo 600 MHz (Ή při 600 MHz, 13C při 150,9 MHz). Hmotnostní spektra s vysokým rozlišením (HR MS) byla získána pomocí elektrosprejové ionizace (ESI), elektronové ionizace (El) nebo chemické ionizace za atmosférického tlaku (APCI). Separace vysokoúčinnou flash chromatografri (HPFC) na reverzní fázi byly provedeny na přístroji ISCO CombiFlash Rf, na kolonách Reverse Phase (Cl8) RediSep Rf column. Složení mobilní fáze pro HPFC a kolonovou chromatografri je uvedeno v objemových procentech. Čistota látek k biologickému testování byla ověřena pomocí HPLC a byla větší než 95 %.
- 10CZ 308104 B6
Tabulka 3: Přehled sloučenin připravených v následujících příkladech
tetete LáSks Štrukte» “ % S . <k \ >. <
ht ftšíc site Λ, <. >'··' ·\ .: >.y S.....L ·, / 4 * ^lethsxy-ú tete>ri.te 1 itĚašiščisylj AkřL psr T> T te $|pmol. pte-tep'testers
kVkitej3te:ϊΤ5^pyrmtdsfí teansj > síjAí £4$.. r Ífeoúsratísssy hAte “ ' 'Τ' h'X”'^ T’ : -pu &« ? jlVHp^swjí» i 4 <ϋ shiáíh v ím í.íx>>- 4 í/s-p rite itewsyi jAte i ^íteteiStete ,.y^:¥;wte[Xte^terišteš» i
4-í i i jvyx^^rihófisííiííftsyri'^^’
-p\r-k' ;te í .4 ite teh^wí.fe « < Lja ' ‘ »>' >te a;j, ,-d ’V*
... pyrite^:? 'T !;4,5 |pynte«i terirf^jy s iňSšdšs
- 11 CZ 308104 B6
- py «<fep\3
4· (feřSZíii;ΓΛ:: 2-VÚ-P-í/LfUS’íN-01:4-8¾ ♦ pyridoP’J* ;4. J | pyms 1« [23 - 4[ pyrmňdh i v ' x u Ί b<u h
-pyrí&>|4*J *:4 ,S jpyřro 1« [2 3 ~4[py ri w 14 in i VVVi^xNuUnnyh sA'-sviWlar.mow!}-'>/*- py :dd<4 □ 24-3 ] $y b[2,3 -í/jpy riwfe
-pyndeH '>3243 jpywM 2,3
4-wfet'3'(34>'ri -tofu way U 33Λ
- pwí3?[4s,3:; 4 3 |pym>k?P 3-4] pyrw
4'(disť^«hy[^ř5n«)--443-»-rib4Ústssoy3)*^3'
- pyrido R33'':: 4 3 jpy rrohšpJ “41 py ri .m í dm
- 12 CZ 308104 B6
Obecný postup pro Stilleho reakci (Postup A):
Benzoylovaný nukleosid 13 nebo 14, příslušný tributylstannan (1,5 ekv.) a PdCkíPPhsh (0,1 ekv.) byly rozpuštěny v DMF a reakční směs byla zahřívána na 100 °C po dobu 4 až 24 hodin. Po zreagování bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová směs byla přečištěna pomocí HPFC (petrolether/ethyl acetát 0 —> 100). Produkt byl získán jako narůžovělá pevná látka.
Příklad 1 (Z)-3-Ethoxy-3-hydroxy-2-(3-nitropyridin-2-yl)akrylonitril (5A) a ethyl 2-kyano-2-(3nitropyridin-2-yl)acetát (5B)
Sloučenina 5 byla připravena podle modifikovaných podmínek známých z literatury (Finch, N. a kol. J. Org. Chem. 1972, 37, 51-53). K roztoku terc>butanolátu draselného (4,4 g, 38,0 mmol) v terc-butyl alkoholu (40 ml) byl přidán ethyl kyanoacetát (4 ml, 37,8 mmol). K výsledné suspenzi byl přidán horký roztok 2-chlor-3-nitropyridinu 3 (3 g, 18,9 mmol) v terc-butanolu (40 ml) a směs byla dále zahřívána na 95 °C po dobu 6 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti bylo pH roztoku upraveno na hodnotu 1 pomocí IM HC1 a směs byla extrahována ethyl acetátem. Organická vrstva byla vysušena Na?SO4 a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (petrolether/ethyl acetát 0 —> 60 %), byla získána směs tautomerů 5 A a B (3,8 g, 87 %) ve formě červených krystalů.
R/=0,52 (S1O2; petrolether/ethyl acetát 3:1), Hlavní produkt 5A: 'H NMR (500,0 MHz, DMSO
- 13 CZ 308104 B6 de)' 1,25 (t, 3H, JVIC = 7,1, CH3CH2O); 4,20 (q, 2H, JVIC = 7,1, CH3CH2O); 7,02 (dd, 1H, J5,4 = 7,8, J5,6 = 6,1, H-5); 8,37 (dd, 1H, J6,5 = 6,1, J6,4 = 1,6, H-6); 8,45 (dd, 1H, J4,5 = 7,8, J4,6 = 1,6, H-4); 14,47 (bs, 1H, OH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-J6).· 14,56 (CH3CH2O); 60,34 (CH3CH2O); 61,20 (C-CN); 112,43 (CH-5); 116,48 (CN); 138,97 (CH-4); 140,19 (C-3); 142,24 (CH-6); 146,40 (C-2); 168,40 (OCOEt).
Vedlejší produkt 5B: Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-d6): 1,19 (t, 3H, JVIC = 7,1, CH3CH2O); 4,23 (q, 2H, Jvic = 7,1, CH3CH2O); 6,39 (bs, 1H, CHCN); 7,86 (bdd, 1H, J5,4 = 7,9, J5,6 = 4,2, H-5); 8,68 (bd, 1H, J4,5 = 7,9, H-4); 8,98 (dd, 1H, J6,5 = 4,2, H-6); 14,47 (bs, 1H, OH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-dfi).· 13,92 (CH3CH2O); 45,15 (CHCN); 66,34 (CH3CH2O); 114,79 (CN); 126,10 (CH-5); 134,70 (CH-4); 144,79 (C-2); 154,00 (CH-6); 163,78 (OCOEt); C-3 nenalezen. HR-ESIMS: nalezeno: 236,0672 (100, [M + H]+, vypočteno pro CwHio04N3+: 236,0671).
Příklad 2 (Z)-3-Ethoxy-3-hydroxy-2-(3-nitropyridin-4-yl)akrylonitril (6)
Sloučenina 6 byla připravena stejnou reakcí jako 5, z navážky 4-chlor-3-nitropyridinu 4 (500 mg, 3,15 mmol). Surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (petrolether/ethyl acetát 0 —> 90 %) a byl získán produkt 6 (705 mg, 95 %) ve formě oranžové pěny.
R/ =0,21 (SiO2; ethyl acetát); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-d6): 1,18 (t, 3H, JV1C = 7,1, CH3CH2O); 4,05 (q, 2H, JV1C= 7,1, CH3CH2O); 7,60 (bm, 1H, H-5); 7,89 (dd, 1H, J6,5 = 7,1, J6,2 =
1.1, H-6); 8,69 (d, 1H, Λ,β = 1,1, H-2); 13,31 (bs, 1H, OH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 14,65 (CH3CH2O); 59,60 (CH3CH2O); 70,30 (b-CN); 117,89 (CH-5); 119,41 (CN); 136,57 (CH6); 137,03 (C-3); 138,61 (CH-2); 145,58 (C-4); 165,14 (OCOEt); HR-ESI- MS: nalezeno: 236,0664 (100, [M+H]+ vypočteno pro CwHio04N3+: 236,0665); HR-ESI- MS: nalezeno: 258,0484 (100, [M+Na]+, vypočteno pro CwHgO^Na4: 258,0485).
Příklad 3
Ethyl 2-amino-l H-pyiTolo|3.2-/?|pyi idin-3-karboxylát (7)
Sloučenina 7 byla připravena podle popsaného postupu (Reader, J. C. a kol. J. Med. Chem. 2011, 54, 8328-8342). Sloučenina 5 (4,3 g, 18,3 mmol) v AcOH (50 ml) byla pod argonem zahřívaná na 95 °C. Byl přidán práškový zinek (5,9 g, 91,5 mmol) a reakční směs byla dále zahřívána na 95 °C po dobu 75 min. Po ochlazení na teplotu místnosti byl nerozpuštěný materiál odfiltrován přes fritu a promyt AcOH. Rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a pH reakční směsi bylo upraveno pomocí NaHCOs na 7, přičemž vznikla světlehnědá sraženina, která po filtraci, promytí vodou a vysušení poskytla 7 (3,5 g, 94 %) jako nahnědlou pevnou látku.
R/= 0,32 (SiO2; ethyl acetát/MeOH 1:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-ífe): 1,27 (t, 3H, Jwc =
7.1, CH3CH2O); 4,23 (q, 2H, Jvic = 7,1, CH3CH2O); 6,83 (dd, 1H, Jvic = 7,8, J6.5 = 4,9, H-6); 7,06 (bs, 2H, NH2); 7,35 (dd, 1H, J7>6 = 7,8, J7,5 = 1,5, H-7); 8,07 (dd, 1H, J5,6 = 4,9, J5.7 = 1,5, H-5); 10,80 (bs, 1H, NH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 15,13 (CH3CH2O); 58,27 (CH3CH2O); 84,32 (C-3); 114,54 (CH-6); 115,43 (CH-7); 126,57 (C-7a); 141,62 (CH-5); 145,49 (C-3a); 155,79 (C-2); 165,62 (COOEt); HR-ESI-MS: nalezeno: 206,0924 (100, [M+H]+, vypočteno pro CioHi202N3+ : 206,0924).
Příklad 4
Ethyl 2-ammo-lř/-pyrrolo[2,3-c]pyridin-3-karboxyIát (8)
Sloučenina 8 byla připravena stejnou reakcí jako 7, z navážky 6 (2,9 g, 12,3 mmol). Po odfiltrování hnědé tuhé látky byl získán produkt 8 (1.8 g, 73%).
- 14CZ 308104 B6
R/= 0,26 (SiO2; ethyl acetát/MeOH 1:1); Ή NMR(500,0 MHz, DMSO-ri6): 1,32 (t, 3H, Jvic = CH3CH2O); 4,23 (q, 2H, JV1C = 7,1, CH3CH2O); 7,04 (s, 2H, NH2); 7,42 (dd, 1H, J4,5 = 5,2, J4,7 = 1,0, H-4); 8,03 (d, 1H, J5,4 = 5,2, H-5); 8,30 (t, 1H, J4,7 = J4,nh = 1,0, H-7), 10,92 (bs, 1H, NH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 14,88 (CH3CH2O); 58,65 (CH3CH2O); 83,91 (C-3); 112,71 (CH-4); 130,44 (C-7a); 130,90 (CH-7); 132,78 (C-3a); 140,65 (CH-5); 155,01 (C-2); 165,67 (COOEt); HR-ESI-MS: nalezeno: 206,0922 (100, [M+H]+, vypočteno pro CwHi2O2N3 +: 206,0924).
Příklad 5
3.9- Dihydro-4H-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin-4-on (9)
Sloučenina 9 byla připravena podle popsaného postupu (Reader, J. C. a kol. J. Med. Chem. 2011, 54, 8328-8342). Směs 7 (3,2 g, 15,6 mmol) a mravenčanu amonného (1,1 g, 17,5 mmol) byla zahřívána ve formamidu (25 ml, 624 mmol) na teplotu 170 °C po dobu 16 h. Po ochlazení na teplotu místnosti bylo pH reakční směsi upraveno na hodnotu 1 za pomoci 1 M HC1 a nerozpustný podíl byl ze suspenze odfiltrován. Hodnota pH filtrátu byla následně upravena na 7 pomocí nasyceného roztoku NaHCO3. Výsledná sraženina byla odfiltrována, promyta vodou a vysušena, čímž byla získána sloučenina 9 (2,5 g, 86 %) ve formě hnědého prášku.
R/= 0,67 (SiO2; ethyl acetát/MeOH 1:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-ri6,): 7,31 (dd, 1H, J7,8 =
8.2, J7,6 = 4,7, H-7); 7,83 (dd, 1H, = 8,2, J8,6= 1,5, H-8); 8,18 (s, 1H, H-2); 8,47 (dd, 1H, J6,i = 4,7, J6,8= 1,5, H-6); 12,27, 12,39 (2 x bs, 2 x 1H, NH-3,9); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 99,94 (C-4a); 119,07 (CH-8); 119,31 (CH-7); 129,26 (C-8a); 141,10 (C-4b); 144,11 (CH-6); 149,37 (CH-2); 155,30 (C-9a); 157,58 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 187,0612 (100, [M+H]+, vypočteno pro C9H7ON43·: 187,0614).
Příklad 6
3.9- Dihydro-4H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin-4-on (10)
Sloučenina 10 byla připravena stejnou reakcí jako 9, z navážky 8 (2,1 g, 10,2 mmol). Po odfiltrování byla získána sloučenina 10 (1,5 g, 79%) ve formě hnědého prášku.
R/= 0,69 (SiO2; ethyl acetát /MeOH 1:1); Ή NMR (400,0 MHz, DMSO-ri6): 7,89 (d, 1H, J5,6 =
5.2, H-5); 8,26 (s, 1H, H-2); 8,38 (d, 1H, J6,5 = 5,2, H-6); 8,83 (s, 1H, H-8); 12,44, 12,58 (2 x s, 2 x 1H, NH-3,9); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 99,62 (C-4a); 115,08 (CH-5); 127,64 (C-4b); 132,35 (C-8a); 134,39 (CH-8); 140,66 (CH-6); 150,19 (CH-2); 155,41 (C-9a); 158,54 (C-4); HRESI-MS: nalezeno: 187,0613 (100, [M + H]+, vypočteno pro C9H7ONC: 187,0614).
Příklad 7
4-Chlor-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (11)
POC13 (0,2 ml, 2,4 mmol) byl dodán do míchající se směsi 9 (80 mg, 0,4 mmol), benzyltriethylamonium chloridu (196 mg, 0,8 mmol) a /V,/V-dimcthylanilinu (62 pL, 0,5 mmol) v MeCN (1 ml). Reakční směs byla míchána po dobu 1 h při teplotě 90 °C. Rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku, byla přidána studená voda a pH bylo upraveno na hodnotu 4 až 5 pomocí 35% vodného roztoku amoniaku. Reakční směs byla extrahována ethyl acetátem, organická vrstva byla vysušena Na2SO4 a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. K zůstatku byl přidán petrolether a míchán přes noc (na odstranění zbytku /V,/V-dimcthylanilinu). Suspenze byla odfiltrována a promyta petroletherem, čímž byl získán produkt 11 (57 mg, 65 %) jako nažloutlá tuhá látka.
- 15 CZ 308104 B6
R/= 0,42 (SiO2; ethyl acetát); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-zfc): 7,61 (dd, 1H, J7.8 = 8,3, Λ,β = 4,7, H-7); 8,04 (dd, 1H, J8,7 = 8,3, J8,6 = 1,4, H-8); 8,69 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 8,87 (s, 1H, H-2); 12,97 (s, 1H, NH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-zfc): 110,29 (C-4a); 120,08 (CH8); 122,97 (CH-7); 132,81 (C-8a); 136,88 (C-4b); 144,66 (CH-6); 152,13 (C-4); 155,49 (CH-2); 156,30 (C-9a); HR-ESI-MS: nalezeno: 205,0275 (100, [M+H]+, vypočteno pro C9H6N4C1+: 205,0275).
Příklad 8
4-Chlor-9-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (12)
Tricyklická báze 12 byla připravena stejnou reakcí jako 11, z navážky 10 (572 mg, 3,1 mmol). Po upravení pH pomocí 35% vodného roztoku amoniaku na hodnotu 4-5 bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (CHCE/MeOH 0 —> 10 %). Byl získán produkt 12 (330 mg, 52 %) ve formě žluté tuhé látky.
R/= 0,17 (SiO2; ethyl acetát); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-í/6): 8,18 (dd, 1H, J5,6 = 5,3, J5,8 =
1,2, H-5); 8,60 (d, 1H, J6,5 = 5,3, H-6); 8,92 (s, 1H, H-2); 9,03 (d, 1H, J8,5 = 1.2, H-8); 13,15 (s, 1H, NH); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 110,17 (C-4a); 116,35 (CH-5); 123,62 (C-4b); 134,60 (CH-8); 135,44 (C-8a); 141,49 (CH-6); 153,93 (C-4); 156,44 (CH-2); 156,54 (C-9a); HRESI-MS: nalezeno: 205,0274 (100, [M+H]+, vypočteno pro C9H6N4C1+: 205,0275).
Příklad 9
4-Chlor-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5|pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (13)
K roztoku tricyklické báze 11 (234 mg, 1,1 mmol) v MeCN (20 ml) byl přidán BSA (281 μΐ, 1,1 mmol). Reakční směs byla zahřívána na 60 °C po dobu 30 minut, pak byly přidány TMSOTf (397 μΐ, 2,2 mmol) a l-O-acetyl-2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosa (1,1 g, 2,2 mmol) a směs byla dále zahřívána na 60 °C po dalších 16 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byla směs extrahována dichlormethanem, organická vrstva byla promyta NaHCO; a poté vysušena Na2SC>4 a rozpouštědla byla odpařena za sníženého tlaku. Surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (petrolether/ethyl acetát 0 —> 45 %). Požadovaný nukleosid 13 (535 mg, 75 %) byl získán ve formě bílé stéblovité pěny.
R/ = 0,37 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 3:2); ’H NMR (400,0 MHz, DMSO-z/á): 4,73 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5-b,4· = 4,4, H-5'b); 4,87 (dd, 1H, Jgem = 12,3, Λ a,4 = 3,2, H-5'a); 4,93 (ddd, 1H, J4',3' = 6,6, Λ.5’ = 4,4, 3,2, H-4’); 6,37 (t, 1H, Jy,2· = Jy,4· = 6,5, H-3 ); 6,55 (dd, 1H, Jy,3· = 6,5, Jy.r = 4,6, H-2’); 7,06 (d, 1H, Jr,2· = 4,6, Η-Γ); 7,43, 7,51 (2 x m, 6H, H-m-Bz); 7,58 (dd, 1H, J7,8 = 8,5, J7,6 = 4,7, H-7); 7,62, 7,67, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83, 7,92, 7,99 (3 x m, 3 x 2H, H-oBz); 8,54 (dd, 1H, J8,7 = 8,5, J8,6 = 1,3, H-8); 8,78 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,3, H-6); 8,87 (s, 1H, H-2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO- z/6): 63,22 (CH2-5'); 70,29 (CH-3’); 72,63 (CH-2’); 79,03 (CH-4’); 86,26 (CH-Γ); 111,45 (C-4a); 119,92 (CH-8); 123,08 (CH-7); 128,64, 128,81 (C-z-Bz); 128,94, 128,98, 129,01 (CH-m-Bz); 129,36 (C-z-Bz); 129,37, 129,54, 129,66 (CH-o-Bz); 132,85 (C-8a); 133,83, 134,15 (CH-p-Bz); 136,92 (C-4b); 145,75 (CH-6); 152,71 (C-4); 155,31 (CH-2); 155,50 (C-9a); 164,81, 165,00, 165,57 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 649,1486 (100, [M+H]+, vypočteno pro C35HMO7N4CF: 649,1484); HR-ESI-MS: nalezeno: 671,1306 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C35H25C>7N4ClNa+: 671,1304).
Příklad 10
4-Chlor-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (14)
- 16CZ 308104 B6
Nukleosid 14 byl připraven stejnou reakcí jako nukleosid 13, z navážky tricyklické báze 12 (100 mg, 0,5 mmol). Surová reakční směs byla čištěna pomocí sloupcové chromatografie (cyklohexan/ethyl acetát 0 —> 50 %). Požadovaný nukleosid 14 (185 mg, 57 %) byl získán ve formě stéblovité pěny.
R/= 0,63 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:2); 'H NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 4,74 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4 = 4,6, H-5'b); 4,85 (dd, 1H, Jgem = 12,3, = 3,2, H-5'a); 4,94 (ddd, 1H, Λ,3· =
6,5, J4’,5’ = 4,6, 3,2, H-4'); 6,35 (t, 1H, J3',2· = Jw = 6,5, H-3 ); 6,58 (dd, 1H, J2',3· = 6,5, h’.r = 4,6, H-2'); 7,13 (d, 1H, Jr,2' = 4,6, Η-Γ); 7,40-7,44, 7,46-7,52 (2 x m, 6H, H-m-Bz); 7,62, 7,66, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83-7,86, 7,89-7,92, 7,99-8,02 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,27 (dd, 1H, J5,6 = 5,2, J5,8 = 0,9, H-5); 8,71 (d, 1H, J6,s = 5,2, H-6); 8,92 (s, 1H, H-2); 9,53 (d, 1H, J8,5 = 0,9, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 63,25 (CH2-5'); 70,33 (CH-3’); 72,61 (CH-2’); 79,17 (CH-4’); 86,41 (CH-Γ); 111,36 (C-4a); 116,34 (CH-5); 124,05 (C-4b); 128,62, 128,79 (C-z-Bz); 128,90, 128,97 (CH-m-Bz); 129,28 (C-z-Bz); 129,30, 129,51, 129,62 (CH-o-Bz); 133,75, 134,10 (CH-p-Bz); 134,25 (C-8a); 135,16 (CH-8); 142,91 (CH-6); 154,43 (C-4); 155,52 (C-9a); 156,24 (CH-2); 164,79, 165,96, 165,52 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 649,1486 (100, [M+H]+ vypočteno pro CvlUOvNXV: 649,1484).
Příklad 11
4-Methoxy-9-(3-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (la)
Do roztoku nukleosidu 13 (135 mg, 0,2 mmol) ve směsi MeOH (14 ml) a DMF (14 ml) byl přidán methoxid sodný (190 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,84 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě 90 °C, poté bylo rozpouštědlo odpařeno a surová reakční směs byla krystalizována ze směsi DMF/aceton. Požadovaný nukleosid la (41 mg, 65%) byl získán ve formě bílé tuhé látky.
R/= 0,62 (SiO2; CHCE/MeOH 5:1); [a]D 20 = -27,0 (c = 0,204 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-í/6): 3,68 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, J5'b,0H = 5,4, J5'b,4· = 3,6, H-5'a); 3,71 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, J5'a,0H = 5,1, J5'a,4' = 3,3, H-5'b); 3,99 (ddd, 1H, J4'5· = 3,6, 3,3, = 2,5, H-4’); 4,19 (s, 3H,
CH3O); 4,20 (ddd, 1H, J3’2· = 5,4, J3',oh = 4,7, J3’4· = 2,5, H-3’); 4,69 (ddd, 1H, Λ;/· = 7,5, J2’0H =
6,2, J2',3' = 5,4, H-2’); 5,24 (bd, 1H, JOh,3· = 4,7, OH-3’); 5,29 (bdd, 1H, Joh.s· = 5,4, 5,1, OH-5’); 5,31 (bd, 1H, Joh,2' = 6,2, OH-2’); 6,49 (d, 1H, Jr,2' = 7,5, H-F); 7,48 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 8,48 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,61 (dd, 1H, J6,7= 4,7, J6,s = 1,4, H-6); 8,74 (s, 1H, H-2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 54,38 (CH3O); 61,80 (CH2-5'); 70,37 (CH-3’); 71,18 (CH-2’); 85,85 (CH-4’); 86,98 (CH-Γ); 98,62 (C-4a); 120,52 (CH-8); 120,84 (CH-7); 130,61 (C-8a); 138,39 (C-4b); 144,55 (CH-6); 155,80 (CH-2); 157,10 (C-9a); 164,01 (C-4); HRESI-MS: nalezeno: 333,1194 (100, [M + H]+, vypočteno pro C1.5H17O5N/: 333,1193); HR-ESIMS: nalezeno: 355,1013 (100, [M + Na]+ vypočteno pro CisHieO.s^Naú 355,1012).
Příklad 12
4-Methoxy-9-(3-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (2a)
Do roztoku nukleosidu 14 (210 mg, 0,32 mmol) v methanolu (21 ml) byl přidán methoxid sodný (296 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 1,28 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna sloupcovou chromatografri (C-18, voda/MeOH 0 —> 100 %). Požadovaný produkt 2a (42 mg, 42 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,57 (SiO2; CHCE/MeOH 5:1); [a]D 20 = -54,9 (c = 0,122 v DMSO); Ή NMR (400,0 MHz, DMSO-í/6): 3,70 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, JS'b,oH = 5,2, J5b,4· = 3,4, H-5'b); 3,74 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, JS'b,oH = 5,0, J5'a,4' = 3,2, H-5'a); 4,02 (ddd, 1H, J4'5· = 3,4, 3,2, J4'3· = 2,6, H-4’); 4,23 (s, 3H, CH3O); 4,23 (ddd, 1H, J3',2· = 5,7, J3',Oh = 4,6, J3'4· = 2,6, H-3’); 4,73 (ddd, 1H, Λ;/· = 7,7, J2',OH =
- 17 CZ 308104 B6
6,5, J2',3' = 5,7, H-2'); 5,26 (d, 1H, JOh,3' = 4,6, OH-3’); 5,29 (dd, 1H, JOh,5' = 5,2, 5,0, OH-5’); 5,33 (bd, 1H, J0H,2' = 6,6, OH-2’); 6,51 (d, 1H, J7;2' = 7,6, H-F); 7,99 (dd, 1H, J5,6 = 5,2, J5,8= 1,1, H-5); 8,56 (d, 1H, J6,5 = 5,2, H-6); 8,80 (s, 1H, H-2); 9,43 (d, 1H, J8,5 = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/ď): 54,73 (CH3O); 61,73 (CH2-5'); 70,29 (CH-3’); 71,49 (CH-2’); 85,96 (CH-4’); 86.99 (CH-Γ); 98,06 (C-4a); 116,26 (CH-5); 124,91 (C-4b); 132,87 (C-8a); 135,95 (CH8); 141,71 (CH-6); 156,88 (CH-2); 157,07 (C-9a); 165,02 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 333,1194 (100, [M+H]+ vypočteno pro C1.5H17O5N/: 333,1 193).
Příklad 13
4-(Methylsulfanyl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5] pyrrolo[2,3ď|pyrimidin (15b)
Do roztoku nukleosidu 13 (350 mg, 0,54 mmol) v DMF (80 ml) byl jednorázově přidán thiomethoxid sodný (113 mg, 1,62 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna sloupcovou chromatografh (petrolether/ethyl acetát 0 —> 80 %). Chráněný nukleosid 15b (186 mg, 52 %) byl získán ve formě bílého prášku.
Rz = 0,77 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-zŘ): 2,71 (s, 3H, SCH3); 4,71 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5W' = 4,3, H-5'b); 4,83 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4' = 3,2, H-5'a);
4,89 (ddd, 1H, 14·3· = 6,5, 14·5· = 4,3, 3,2,H-4’); 6,36 (t, 1H, J3',2' = J3’,4’ = 6,5, H-3 ); 6,58(dd, 1H, J2',3' = 6,5, J2',r = 4,7, H-2’); 7,00 (d, 1H, Jr,2· = 4,7, Η-Γ); 7,41 (m, 2H, H-m-Bz); 7,46 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,48-7,52 (m, 4H, H-m-Bz); 7,61, 7,67, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83,7,93, 8,00 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,43 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,70 (dd, 1H, J67 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 8,83 (s, 1H, H-2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 11,79 (SCH3); 63,27 (CH2-5’); 70,38 (CH-3’); 72,47 (CH-2'); 78,86 (CH-4'); 86,06 (CH-Γ); 109,79 (C-4a); 119,12 (CH-8); 121,47 (CH-7); 128,60, 128,82 (C-z-Bz); 128,89, 128,93,128,96 (CH-m-Bz); 129,35 (CH-o-Bz); 129,38 (C-z-Bz); 129,48, 129,61 (CH-o-Bz); 131,60 (C-8a); 133,76, 134,09 (CH-p-Bz); 138,54 (C-4b); 145,04 (CH-6); 153,18 (C- 9a); 154,89 (CH-2); 164,20 (C-4); 164.76, 164,98, 165,56 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 661,1753 (100, [M+H]+, vypočteno pro C36H29O7N4S+: 661,1751); HR-ESI-MS: nalezeno: 683,1571 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C36H28O7N4NaS+: 683,1570).
Příklad 14
4-(Methylsulfanyl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (1b)
Chráněný nukleosid 15b (180 mg, 0,3 mmol) byl rozpuštěn ve směsi MeOH (6 ml) a DMF (10 ml) a byl dodán methoxid sodný (14 pl, 25 % hm. v methanolu, 0,06 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě 90 °C po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a produkt byl krystalizován z methanolu. Nukleosid 1b (79 mg, 76%) byl získán jako bílý prášek.
R/= 0,62 (SiO2; CHCE/MeOH 5:1); [a]D 20 = -26,7 (c = 0,135 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-oý): 2,72 (s, 3H, SCH3); 3,69 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5'b,oH = 5,3, J5'b,4'= 3,5, H-5'b); 3,73 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5'a,oH = 5,1, J5'a,4'= 3,3, H-5'a); 4,00 (ddd, 1H, Λ;5'= 3,5, 3,3, 2,7, H4’); 4,22 (ddd, 1H, J3',2' = 5,6, J3',oh = 4,6, J3,4’ = 2,7, H-3’); 4,70 (ddd, 1H, J2',r = 7,5, J2',oh= 6,3, J2',3' = 5,6, H-2’); 5,21 (d, 1H, JOh,3'= 4,6, OH-3’); 5,25 (dd, 1H, JOh,5'= 5,3, 5,1, OH-5’); 5,29 (d, 1H, J oh,2'= 6,3, OH-2’); 6,49 (d, 1H, Jť,2· = 7,5, Η-Γ); 7,52 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 8,51 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,69 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 8,91 (s, 1H, H2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-zŘ): 11,75 (SCH3); 61,74 (CH2-5'); 70,31 (CH-3’); 71,18 (CH2’); 85,85 (CH-4’); 86,87 (CH-Γ); 109,29 (C-4a); 120,56 (CH-8); 121,26 (CH-7); 131,12 (C-8a); 138,78 (C-4b); 144.56 (CH-6); 153,75 (C-9a); 154,88 (CH-2); 163,76 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 349,0965 (100, [M+H]+vypočteno pro CisHi7O4N4S+: 349,0965).
- 18 CZ 308104 B6
Příklad 15
4-(Methylsulfanyl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9řř-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin (2b)
Do suspense nukleosidu 14 (221 mg, 0,34 mmol) v methanolu (55 ml) byl jednorázově přidán thiomethoxid sodný (36 mg, 0,51 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna sloupcovou chromatografií (HzO/McOH 0 —> 100%). Nukleosid 2b (56 mg, 47%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,57 (SiO2; CHCWMeOH 5:1); [a]D 20 = -64,7 (c = 0,221 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-ri6): 2,82 (s, 3H, SCH3); 3,71 (ddd. 1H, Jgem = 11,9, JS'b,OH = 5,2, J5'b,4· = 3,5, H- 5'b); 3,74 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J^oh - 5,2, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,03 (ddd, 1H, J4',5· = 3,5, 3,2, Λ',3·= 2,7, H4’); 4,24 (ddd, 1H, J3',2'= 5,7, J3',oh = 4,6, J3',4· = 2,7, H-3 ); 4,72 (ddd, 1H, J2',r = 7,6, J2'.0H = 6,4, J2',3' = 5,7, H-2); 5,23 (d, 1H, J0H,3’ = 4,6, OH-3’); 5,26 (t, 1H, J0H,S' = 5,2, OH-5’); 5,29 (bd, 1H, Joh,2' = 6,4, OH-2'); 6,53 (d, 1H, Jr,2' = 7,6, Η-Γ); 8,05 (dd, 1H, J5,6 = 5,2, J5,8 = 1,1, H-5); 8,63 (d, 1H, J6,5 = 5,2, H-6); 8,96 (s, 1H, H-2); 9,49 (d, 1H, J8,5 = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 11,89 (SCH3); 61,65 (CH2-5'); 70,21 (CH-3'); 71,42 (CH-2’); 85,98 (CH-4’); 86,85 (CH-Γ); 108,84 (C-4a); 116,31 (CH-5); 124,92 (C-4b); 132,93 (C-8a); 136,08 (CH-8); 141,86 (CH-6); 153,85 (C-9a); 155,72 (CH-2); 164,97 (C-4); HR-ESI- MS: nalezeno: 349,0965 (100, [M+H]+vypočteno pro C15H17O4N4S4·: 349,0965).
Příklad 16
4-Amino-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (1c)
K roztoku nukleosidu 13 (300 mg, 0,46 mmol) ve vysušeném 1,4-dioxanu (2,2 ml) byl přidán 35% vodný roztok amoniaku (6,5 ml). Poté byla reakční směs zahřívána v tlakové zkumavce 24 hodin na teplotu 120 °C a po následném odpaření rozpouštědel byla surová reakční směs čištěna sloupcovou chromatografií (fEO/McOH 0 —> 100 %). Nukleosid 1c (77 mg, 53 %) byl získán ve formě tmavě žlutého prášku.
R/ = 0,13 (SiO2; CHCl3/MeOH 10:1); [a]D 20 = -20,7 (c = 0,140 v methanolu); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-ri6): 3,65 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, JS'b,oH = 6,4, J5'b,4· = 3.5, H-5'b); 3.70 (ddd, 1H, Jgem = 12.0, J5’a,oH = 4,8, J5’a,4’= 3,2, H-5'a); 4,02 (ddd, 1H, Λ,5 = 3,5, 3,2, J4·,3· = 2,9, H-4’); 4,19 (ddd, 1H, 5,2, Λ;2' = 4,5, 33·,4·= 2,9, H-3’); 4,72 (ddd, 1H, J2',r= 7,5, J2'0H= 6,6, J2’,3· =
5,2, H-2’); 5,20 (d, 1H, J0H,3'= 4,5, OH-3’); 5,28 (bd, 1H, JOh,2'= 6,6, OH-2’); 5,44 (dd, 1H, Joh.s· = 6,4, 4,8, OH-5’); 6,35 (d, 1H, Jr,2' = 7,5, Η-Γ); 6,84 (bs, 1H, NHaHb); 7,40 (dd, 1H, J7,8 = 8,3, J7,6 = 4,8, H-7); 7,98 (bs, 1H, NHaHb); 8,32 (dd, 1H, J8,7 = 8,3, J8,6 = 1,3, H-8); 8,38 (s, 1H, H-2); 8,54 (dd, 1H, J6,7 = 4,8, J6,8 = 1,3, H-6); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 62,00 (CH2-5'); 70,58 (CH-3’); 71,29 (CH-2’); 85,86 (CH-4’); 86,93 (CH-Γ); 94,99 (C-4a); 119,50 (CH-8); 119,55 (CH7); 130,09 (C-8a); 140,38 (C-4b); 143,52 (CH-6); 155,81 (C-9a); 156,64 (CH-2); 158,26 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 318,1197 (100, [M+H]+ vypočteno pro CwH^Ns4: 318,1196); HRESI-MS: nalezeno: 340,1016 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci4Hi5O4NsNa+: 340,1016).
Příklad 17
4-Amino-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (2c)
Sloučenina 2c byla připravena stejným postupem jako 1c, z navážky chráněného nukleosidu 14 (300 mg, 0,46 mmol). Po odpaření rozpouštědla byl produkt vykrystalizován z methanolu. Nukleosid 2c (75 mg, 51%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,35 (C-18; MeOH/H2O 1:1); [a]D 20 = -58,8 (c = 0,265 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-ri6): 3,67 (ddd, 1H, Jgem =11,9, Jsk.oh = 5,9, J5w= 3,5, H-5'b); 3,72 (ddd, 1H, Jgem =11,9,
- 19CZ 308104 B6
J5'a.0H = 4,8, J5'a,4'= 3,1, H-5'a); 3,98 (ddd, 1H, J4',5' = 3,5, 3,1, J4'3· = 2,7, H-4'); 4,20 (ddd, 1H, J3',2'= 5,8, J3',oh = 4,6, J3',4'= 2,7, H-3'); 4,72 (ddd, 1H, J2',r = 7,5, J2',oh = 6,8, J2',3· = 5,7, H-2’);
5.17 (d, 1H, Joh,3'— 4,6, OH-3’); 5,22 (bd, 1H, JOh,2'= 6,8, OH-2’); 5,37 (dd, 1H, J0H,5’ = 5,9,4,8, OH-5’); 6,42 (d, 1H, Jr,2'= 7,5, H-F); 7,64 (bs, 2H, NH2); 8,36 (dd, 1H, J5,6 = 5,3, J5,8 =1,1, H-5); 8,38 (s, 1H, H-2); 8,45 (d, 1H, J6,5 = 5,3, H-6); 9,22 (d, 1H, J8,s = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-rffi): 61,85 (CH2-5'); 70,33 (CH-3’); 71,25 (CH-2’); 85,76 (CH-4’); 86,85 (CH-Γ); 94,54 (C-4a); 115,40 (CH-5); 126.10 (C-4b); 132,28 (C-8a); 134,54 (CH-8); 140,91 (CH-6);
156.17 (C-9a); 156,91 (CH-2); 158,81 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 318,1197 (100, [M+H]+ vypočteno pro C14H16O4N54·: 318,1196); HR-ESI-MS: nalezeno: 340,1016 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci4Hi5O4NsNa+: 340,1016).
Příklad 18
4-Methyl-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ri]pyrimidin (15d) (Me);Al (1,25 ml, 2 mold1 v toluenu) a Pd(PPh3)4 (97 mg, 0,08 mmol) byly přidány k roztoku nukleosidu 13 (542 mg, 0,84 mmol) v THF (25 ml); reakční směs byla poté míchána přes noc při 70 °C. Rozpouštědlo bylo následně odpařeno a surová reakční směs byla čištěna sloupcovou chromatografri (Η2Ο/ΜοΟΗ 0 —> 100 %). Benzoylovaný nukleosid 15d (362 mg, 69 %) byl získán ve formě nažloutlé pěny.
R/ = 0,58 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:3); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 3,06 (s, 3H, CH3); 4,70 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'h,4'= 4,3, H-5'b); 4,84 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'a);
4,90 (ddd, 1H, = 6,6, J4·,5· = 4,3, 3,2, H-4’); 6,37 (t, 1H, J3',2· = J3-,4· = 6,6, H-3’); 6,60 (dd, 1H,
J2',3' = 6,6, J2',r = 4,6, H-2’); 7,01 (d, 1H, Jr,2· = 4,6, Η-Γ); 7,41 (m, 2H, H-m-Bz); 7,47-7,52 (m, 5H, H-7, H-m-Bz); 7,61, 7,67, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83, 7,93, 8,00 (3 x m, 3 x 2H, Ho-Bz); 8,45 (dd, 1H, J8>7 = 8,5, J8,6 = 1,4, H-8); 8,70 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 8,87 (s, 1H, H-2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 22,15 (CH3); 63,24 (CH2- 5’); 70,37 (CH-3’); 72,44 (CH-2’); 78,80 (CH-4’); 85,98 (CH-Γ); 111,78 (C-4a); 119,31 (CH- 8); 121,95 (CH-7); 128,63, 128,84 (C-z-Bz); 128,94, 128,97, 129,01 (CH-m-Bz); 129,40, 129,52, 129,66 (C-z-Bz, CH-o-Bz); 132,29 (C-8a); 133,80, 134,14 (CH-p-Bz); 139,17 (C-4b); 144,95 (CH-6); 154,70 (C-9a); 155,33 (CH-2); 162,34 (C-4); 164,81, 165,03, 165,59 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 629,2032 (100, [M+H]+ vypočteno pro CmH^CENÚ: 629,2030); HR-ESI-MS: nalezeno: 651,1851 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C36H2sC>7N4Na+: 651,1850).
Příklad 19
4-Methyl-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3- d]pyrimidin (16d)
Nukleosid 16d byl připraven stejným postupem jako 15d, z navážky chlorovaného intermediátu 14 (400 mg, 0,62 mmol). Po odpaření rozpouštědel byla surová reakční směs čištěna sloupcovou chromatografri (cyklohexan/ethyl acetát 0 —> 100 %). Chráněný nukleosid 16d (215 mg, 55 %) byl získán ve formě žlutého prášku.
R/ =0,18 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:2); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 2,97 (s, 3H, CH3); 4,73 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4'= 4,5, H-5'b); 4,83 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,92 (ddd, 1H, = 6,5, J4',5· = 4,5, 3,2, H-4’); 6,36 (t, 1H, }3·,2·= 13·4· = 6,5, H-3’); 6,63 (dd, 1H,
J2',3'= 6,5, J2',r= 4,7, H-2’); 7,09 (d, 1H, Jr,2'= 4,7, Η-Γ); 7,41, 7,48, 7,50 (3 x m, 3 x 2H, H-mBz); 7,61, 7,66, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83, 7,92, 8,01 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,20 (dd, 1H, J5,6 = 5,2, J5,8 = 0,9, H-5); 8,64 (d, 1H, J6,5 = 5,2, H-6); 8,90 (s, 1H, H-2); 9,45 (d, 1H, J8,5 = 0,9, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 22,99 (CH3); 63,29 (CH2-5’) 70,40 (CH-3’); 72,42 (CH-2’); 78,89 (CH-4’); 86,12 (CH-Γ); 111,54 (C-4a); 117,15 (CH-5) 125,62 (C-4b); 128,62, 128,83 (C-z-Bz); 128,90, 128,91, 128,99 (CH-zn-Bz); 129,34 (C-z-Bz) 129,36, 129,50, 129,64
-20CZ 308104 B6 (CH-o-Bz); 133,74 (CH-p-Bz); 134,04 (C-8a); 134,11 (CH-p-Bz) 134,52 (CH-8); 142,32 (CH-6); 154,65 (C-9a); 156,10 (CH-2); 163,40 (C-4); 164,80, 165,03, 165,58 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 629,2032 (100, [M+H]+ vypočteno pro C36H29O7N44: 629,2030); HR-ESI-MS: nalezeno: 651,1850 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C3eH28O7N4Na+: 651,1850).
Příklad 20
4-Methyl-9-(*D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-*pyrimidin (Id)
K suspenzi nukleosidu 15d (340 mg, 0,54 mmol) ve směsi MeOH (12 ml) a DMF (10 ml) byl přidán methoxid sodný (37 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,16 mmol). Reakční směs byla zahřívána na teplotu 90 °C po dobu 16 hodin, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a produkt byl krystalizován ze směsi McOHCHCE. Nukleosid Id (149 mg, 87 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,60 (SiO2; CHCWMeOH 5:1); [a]D 20 = -33,3 (c = 0,117 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-*): 3,08 (s, 3H, CH3); 3,69 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, J^.oh = 5,5, Jsw = 3,5, H-5'b); 3,73 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, J5’a,0H = 5,2, J5'a,4' = 3,2, H-5'a); 4,01 (ddd, 1H, 14·5·= 3,5,14·,3· = 2,7, H-4’); 4,22 (ddd, 1H, 13·,2· = 5,7, J3'Oh = 4,5, J3'4· = 2,7, H-3'); 4,72 (ddd, 1H, J2·!· = 7,5, J2',0H = 6,3, J2’,3· = 5,7, H-2’); 5,21 (d, 1H, J0H,3'= 4,5, OH-3'); 5,26 (dd, 1H, JOh,5'= 5,5, 5,2, OH-5'); 5,28 (bd, 1H, Joh,2' = 6,3, OH-2'); 6,52 (d, 1H, Jr,2' = 7,5, Η-Γ); 7,55 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 8,52 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,69 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 8,94 (s, 1H, H-2); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-*): 22,06 (CH3); 61,75 (CH2-5'); 70,32 (CH-3’); 71,05 (CH-2’); 85,82 (CH-4’); 86,72 (CH-Γ); 111,25 (C-4a); 120,71 (CH-8); 121,69 (CH-7); 131,77 (C-8a); 139,41 (C4b); 144,43 (CH-6); 155,26 (C-9a); 155,27 (CH-2); 161,91 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 317,1244 (100, [M+H]+, vypočteno pro Ci5Hi7C>4N4+: 317,1244); HR-ESI-MS: nalezeno: 339,1064 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci5Hi6C>4N4Na+: 339,1063).
Příklad 21
4-Methyl-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (2d)
Do suspense nukleosidu 16d (218 mg, 0,35 mmol) v methanolu (7,7 ml) byl přidán methoxid sodný (24 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,11 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při teplotě místnosti, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí RP-HPFC (C-18, voda/MeOH 0 —> 100 %). Nukleosid 2d (69 mg, 63 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,20 (SiO2; CHCh/MeOH 10:1); [a]D 20 = -49,5 (c = 0,196 v DMSO-*); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-*).· 2,99 (s, 3H, CH3); 3,71, 3,74 (2 x ddd, 2 x 1H, Jgem = 11,9, J5'.oh = 5,1, J5',4' =
3,4, H-5'); 4,02 (td, 1H, 14·5· = 3,4,14·,3· = 2,7, H-4’); 4,24 (ddd, 1H, J3'2· = 5,8, J3',oh = 4,2,13·4· = 2,7, H-3’); 4,73 (dt, 1H, J2',r= 7,5, J2',3'= J2',oh = 5,8, H-2’); 5,24 (d, 1H, J0H,3’= 4,2, OH-3’); 5,26 (t, 1H, Joh,5' = 5,1, OH-5’); 5,29 (d, 1H, JOh,2' = 5,8, OH-2’); 6,55 (d, 1H, Jr,2· = 7,5, Η-Γ); 8,21 (dd, 1H, J5,6 = 5,3, J5,8 = 1,1, H-5); 8,61 (d, 1H, J6,5 = 5,3, H-6); 8,98 (s, 1H, H-2); 9,48 (d, 1H, J8,5 = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-*): 22,93 (CH3); 61,67 (CH2-5'); 70,20 (CH-3’); 71,25 (CH-2’); 85,90 (CH-4’); 86,70 (CH-Γ); 110,94 (C-4a); 116,95 (CH-5); 125,75 (C-4b); 133,52 (C-8a); 136,04 (CH-8); 141,65 (CH-6); 155,27 (C-9a); 156,11 (CH-2); 162,92 (C-4); HRESI-MS: nalezeno: 317,1246 (100, [M+H]+, vypočteno pro Ci5Hi7O4N4 +: 317,1244); HR-ESIMS: nalezeno: 339,1063 (100, [M+Na]+vypočteno pro Ci5HieO4N4Na+: 339,1063).
Příklad 22
4-(Dimethylamino)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[2',3':4,5] pyrrolo[2,3d]pyrimidin (15e)
-21 CZ 308104 B6
K roztoku nukleosidu 13 (593 mg, 0,91 mmol) ve směsi isopropanol (20 ml) a dichlormethan (7 ml) byl jednorázově přidán dimethylamin (1,36 ml, 2M v THF, 2,73 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti, poté bylo rozpouštědlo odpařeno a surová reakční směs byla čištěna sloupcovou chromatografn (petrolether/ethyl acetát 0 —> 50 %). Chráněný nukleosid 15e (495 mg, 82 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,68 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 3:2); 'H NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 3,60 (bs, 6H, (CH3)2N); 4,70 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5’b,4’= 4,4, H-5'b); 4,82 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H5'b); 4,87 (ddd, 1H, J4',3’= 6,6, = 4,4, 3,2, H-4’); 6,35 (t, 1H, Λ;2· = Js·,4·= 6,6, H-3 ); 6,55 (dd,
1H, J2',3'= 6,6, J2',r= 4,7, H-2'); 6,97 (d, 1H, Jr,2'= 4,7, Η-Γ); 7,27 (dd, 1H, J7,8 = 8,3, J7,6 = 4,7, H-7); 7,42, 7,49, 7,51 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,62, 7,68, 7,69 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,84, 7,97, 7,99 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,30 (dd, 1H, J8,7 = 8.4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,39 (s, 1H, H-2); 8,55 (dd, 1H, J6,/ = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 40,12 ((CH3)2N); 63,40 (CH2-5'); 70,46 (CH-3’); 72,37 (CH-2’); 78,62 (CH-4’); 85,91 (CH-F); 96,39 (C-4a); 118,16 (CH-8); 119,26 (CH-7); 128,66, 128,85 (C-z-Bz); 128,90, 128,97 (CH-m-Bz); 129,43 (Cz-Bz); 129,43, 129,49, 129,60 (CH-o-Bz); 130,08 (C-8a); 133,77, 134,08 (CH-p-Bz); 139,40 (C4b); 143,24 (CH-6); 154,87 (CH-2); 156,79 (C-9a); 158,76 (C-4); 164,80, 165,02, 165,62 (COBz); HR-ESI-MS: nalezeno: 658,2300 (100, [M+H]+, vypočteno pro C37H32O7Ns+: 658,2296); HR-ESI-MS: nalezeno: 680,2118 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C37H3iC>7N5Na+ : 680,2115).
Příklad 23
4-(Dimethylamino)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3d]pyrimidin (16e)
Chráněný nukleosid 16e byl připraven podle stejného postupu jako 15e, z navážky intermediátu 14 (500 mg, 0,77 mmol). Po odpaření rozpouštědla byla surová reakční směs čištěna sloupcovou chromatografn (cyklohexan/ethyl acetát 0 —> 80 %). Chráněný nukleosid 16e (339 mg, 67 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/ = 0,16 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:2); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-zř): 3,33 (s, 3H, CH3N, překrývá se se signálem H2O); 4,72 (dd, 1H, Jgem= 12,3, Js'b,4'= 4,7, H-5'b); 4,80 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,88 (ddd, 1H, = 6,6, J4·,5· = 4,7, 3,2, H-4’); 6,35 (t, 1H, J3',2' =
J3',4'= 6,6, H-3’); 6,61 (dd, 1H, J2',3' = 6,6, = 4,7, H-2’); 7,04 (d, 1H, J7;2· = 4,7, Η-Γ); 7,41,
7,48, 7,49 (3 x m, 3 x 2H, H-zzr-Bz); 7,61, 7,66, 7,67 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,84 (m, 2H, H-oBz); 7,93 (dd, 1H, J5,6 = 5,5, J5,8 = 1,0, H-5); 7,95, 7,99 (2 x m, 2 x 2H, H-o-Bz); 8,43 (s, 1H, H2); 8,47 (d, 1H, J6,5 = 5,5, H-6); 9,30 (d, 1H, J8,5 = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 40,04 (CH3N); 63,44 (CH2-5’); 70,46 (CH-3’); 72,41 (CH-2’); 78,69 (CH-4’); 86,03 (CH-Γ); 96,26 (C-4a); 117,08 (CH-5); 126,15 (C-4b); 128,67, 128,83 (C-z-Bz); 128,88, 128,91, 128,95 (CH-zzrBz); 129,36 (C-z-Bz); 129,39, 129,49, 129,59 (CH-o-Bz); 132,75 (C-8a); 133,67 (CH-8); 133,70, 134,05 (CH-p-Bz); 141,59 (CH-6); 155,41 (CH-2); 156,71 (C-9a); 160,16 (C-4); 164,79, 164,99, 165,60 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 658,2298 (100, [M+H]+, vypočteno pro C37H32O7Ns+: 658,2296); HR-ESI-MS: nalezeno: 680,2117 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C37H3iO7NsNa+: 680,2115).
Příklad 24
4-(Dimethylamino)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9ř7-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (le)
Do suspense nukleosidu 15e (320 mg, 0,49 mmol) v methanolu (12 ml) byl přidán methoxid sodný (34 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,15 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při teplotě místnosti, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí RP-HPFC (C-18, voda/MeOH 0 —> 100%). Nukleosid le (136 mg, 81 %) byl získán ve formě bílého prášku.
-22 CZ 308104 B6
R/= 0,72 (SiO2; CHCh/MeOH 5:1); [a]D 20 = +10,8 (c = 0,259 vDMSO-ά); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-&): 3,62 (bs, 6H, (CH3)2N); 3,65-3,74 (m, 2H, H-5’); 3,98 (td, 1H, J4',5' = 3,3, = 2,8, H-4’); 4,20 (dd, 1H, J3',2'= 5,8, J3',4· = 2,8, H-3'); 4,71 (dd, 1H, J2',r= 7,5, J2',3'= 5,5, H-2’); 5,22 (bs, 2H, OH-2’,3’); 5,36 (bs, 1H, OH-5’); 6,50 (d, 1H, Jr,2' = 7,5, H-F); 7,37 (dd, 1H, J7,8 =
8,3, J7,6 = 4,7, H-7); 8,35 (dd, 1H, J8,7 = 8,3, J8,6 = 1,4, H-8); 8,41 (s, 1H, H-2); 8,54 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 40,13 ((CH3)2N); (CH2-5'); 70,34 (CH3’); 70,94 (CH-2’); 85,66 (CH-4’); 86,86 (CH-Γ); 96,06 (C-4a); 119,11 (CH-7); 119,43 (CH-8); 129,82 (C-8a); 139,44 (C-4b); 142,72 (CH-6); 154,66 (CH-2); 157,17 (C-9a); 158,86 (C-4); HRESI-MS: nalezeno: 346,1510 (100, [M+H]+vypočteno pro Ci6H20O4N5 +: 346,1509); HR-ESI-MS: nalezeno: 368,1329 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci6Hi9O4NsNa+: 368,1329).
Příklad 25
4-(Dimethylamino)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (2e)
Nukleosid 2e byl připraven stejným postupem jako le, z navážky chráněného intermediátu 16e (292 mg, 0,44 mmol). Po odpaření rozpouštědla za sníženého tlaku byla surová reakční směs čištěna pomocí RP- HPFC (C-18, voda/MeOH 0 —> 100 %). Nukleosid 2e (140 mg, 91 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,14 (SiO2; CHCE/MeOH 10:1); [a]D 20 = -13,8 (c = 0,246 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 3,33 (s, 6H, CH3N, překrývá se se signálem H2O); 3,68,3,72 (2 x bddd, 2 x 1H, Jgem = 11,9, J5',oh = 5,1, J5',4' = 3,4, H-5’); 3,99 (td, 1H, J4',5· = 3,4, J4',3· = 2,8, H-4’); 4,22 (dd, 1H, J3',2· = 5,8, J3',4· = 2,8, H-3’); 4,73 (dd, 1H, J2·,,· = 7,6, J2',3'= 5,8, H-2’); 5,21, 5,24 (2x bs, 2 x 1H, OH2’,3’); 5,32 (bt, 1H, JOh,5'= 5,1, OH-5’); 6,51 (d, 1H, Jr,2'= 7,6, H-l’);7,92 (dd, 1H, J5,6 = 5,5, J5,8 = 1,0, H-5); 8,44 (d, 1H, J6,5 = 5.5, H-6); 8,47 (s, 1H, H-2); 9,28 (d. IM, J8,5 = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 39,96 (CH3N); 61,78 (CH2-5'); 70,21 (CH-3'); 71,20 (CH-2'); 85,74 (CH-4'); 86,88 (CH-Γ); 95,92 (C-4a); 116,92 (CH-5); 126,11 (C-4b); 132,40 (C-8a); 135,05 (CH8); 140,93 (CH-6); 155,33 (CH-2); 157,19 (C-9a); 160,32 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 346,1510 (100, [M+H]+, vypočteno pro CieH2o04N5+; 346,1509); HR-ESI-MS: nalezeno: 368,1329 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci6Hi9O4NsNa+: 368,1329).
Příklad 26
4-(Furan-2-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3ďlpyrimidin (15f)
Nukleosid 15f byl připraven podle obecného postupu A z chráněného nukleosidů 13 (400 mg, 0,62 mmol) a 2-(tributylstannyl)furanu (292 μΐ, 0,93 mmol). Požadovaný produkt 15f (378 mg, 90 %) byl získán ve formě narůžovělého prášku.
R/ = 0,32 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 2:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO- de) 4,73 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4· = 4,4, H-5'b); 4,86 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'b); 4,92 (ddd, 1H, J4',3· = 6,6, Λ,5'= 4,4, 3,2, H-4’); 6,40 (t, 1H, 13·,2·= J3',4· = 6,6, H-3’); 6,58 (dd, 1H, J2 ,3 = 6,6, Jj ,2 = 4,6, H-2’); 6,91 (dd, 2H, J4,3 = 3,6, J4,5 = 1,7, H-4-furyl); 7,08 (d, 1H, Jť,2· = 4,6, Η-Γ); 7,41, 7,49, 7,50 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,56 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,62, 7,66, 7,69 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,83, 7,95, 8,00 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,12 (dd, 1H, J5,4 = 1,7, J5,3 = 0.8, H-5furyl); 8,53 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,81 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8= 1,4, H-6); 9,00 (s, 1H, H-2); 9,41 (dd, 1H, J3,4 = 3,6, J3,s = 0,8, H-3-furyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ů6): 63,25 (CH2-5’); 70,33 (CH-3’); 72,51 (CH-2’); 78,80 (CH-4’); 86,03 (CH-Γ); 106,95 (C-4a); 113,14 (CH-4-furyl); 119,36 (CH-8); 120,59 (CH-3-furyl); 122,23 (CH-7); 128,63, 128,83 (C-z-Bz); 128,88, 128,94, 128,97 (CH-m-Bz); 129,37 (CH-o-Bz); 129,39 (C-z-Bz); 129,48, 129,61 (CH-oBz); 132,44 (C-8a); 133,75, 134,08 (CH-p-Bz); 137,68 (C-4b); 144,45 (CH-6); 147,06 (CH-5furyl); 148,91 (C-4); 150,38 (C-2-furyl); 155,31 (CH-2); 155,92 (C-9a); 164,80, 165,00, 165,58 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 681,1982 (100, [M+H]+, vypočteno pro C39H290sN4 +:
-23 CZ 308104 B6
681,1979); HR-ESI-MS: nalezeno: 703,1800 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C39H280sN4Na+: 703,1799).
Příklad 27
4-(Furan-2-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-P-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (16f)
Nukleosid 16f byl připraven podle obecného postupu A z chráněného nukleosidů 14 (400 mg, 0,62 mmol) a 2-(tributylstannyl)furanu (292 pl, 0,93 mmol). Požadovaný produkt 16f (274 mg, 66 %) byl získán ve formě narůžovělého prášku.
R/= 0,41 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:2); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-te): 4,75 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4' = 4,7, H-5'b); 4,85 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,93 (ddd, 1H, J4',3· = 6,6, J4’,5’ = 4,7, 3,2, H-4'); 6,38 (t, 1H, Λ;2 = J3,4· = 6,6, H-3'); 6,62 (dd, 1H, J2',3'= 6,6, }2·Γ= 4,6, H-2'); 6,93 (dd, 1H, J4,3 = 3,5, J4>5 = 1,7, H-4-furyl); 7,15 (d, 1H, Jr,2· = 4,6, Η-Γ); 7,41, 7,47, 7,51 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,62, 7,63 (2 x m, 2 x 1H, H-p-Bz); 7,68 (dd, 1H, J3,4 = 3,5, J3,5 = 0,9, H-3-furyl); 7,69 (m, 1H, H-p-Bz); 7,84, 7,93, 8,01 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,37 (dd, 1H, J5,4 = 1,7, J5,3 = 0,9, H-5-furyl); 8,66 (d, 1H, J6,s = 5,4, H-6); 8,80 (dd, 1H, Js,6 = 5,4, J5,s = 1,0, H-
5); 9,00 (s, 1H, H-2); 9.48 (d, 1H, Js>5 = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-te): 63,34 (CH2-5'); 70,37 (CH-3'); 72,45 (CH-2’); 78,89 (CH-4’); 86,11 (CH-Γ); 106,75 (C-4a); 113,41 (CH-4-furyl); 116,28 (CH-3-furyl); 118,43 (CH-5); 125,05 (C-4b); 128,65, 128,82 (C-z-Bz); 128,87, 128,88, 128,96 (CH-m-Bz); 129,32 (C-z-Bz); 129,34, 129,49 129,61 (CH-o-Bz); 133,69, 134,07 (CH-p-Bz); 134,44 (C-8a); 134,61 (CH-8); 142,60 (CH-6); 147,70 (CH-5-furyl); 149,82 (C-4); 151,89 (C-2-furyl); 155,95 (CH-2); 156,31 (C-9a); 164,81, 164,99, 165,57 (CO-Bz); HRESI-MS: nalezeno: 681,1982 (100, [M+H]+vypočteno pro C39H29O8N4 +: 681,1979); HR-ESI-MS: nalezeno: 703,1800 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C39H2sOsN4Na+: 703,1799).
Příklad 28
4-(Furan-2-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (If)
Do roztoku nukleosidů 15f (300 mg, 0,44 mmol) v methanolu (14 ml) byl přidán methoxid sodný (30 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,13 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě 70 °C po dobu 16 hodin, pak bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí RP-HPFC (C-18, voda/MeOH 0 —> 100 %). Nukleosid If (122 mg, 75 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,39 (SiO2; CHCE/McOH 10:1); [a]D 20 = -27,8 (c = 0,212 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-te): 3,72 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, JS'b,OH = 5,3, J5'b,4'= 3,5, H-5'b); 3,75 (ddd, 1H, Jgem = 12,0, J5'a,oH = 5,0, Λν=3,1, H-5'b); 4,03 (ddd, 1H, J4',5' = 3,5, 3,1 J4',3· = Ί,Ί, H-4’); 4,24 (ddd, 1H, Jy,2· = 5,6, J3',0H = 4,5, J3',4· = 2,7, H-3’); 4,72 (ddd, 1H, J2',r = 7,5, J2',oh = 6,3, J2’,3’ = 5,6, H-2’); 5,23 (d, 1H, Joh,3'= 4,6, OH-3’); 5,28 (dd, 1H, JOh,5'= 5,3, 5,0, OH-5’); 5,31 (d, 1H, JOh.2'=6,3, OH-2'); 6,63 (d, 1H, Ji',2'= 7,5, Η-Γ); 6,91 (dd. 1H, J4,3 = 3,5, J4,5 = 1,7, H-4-furyl); 7,63 (dd, 1H, J7,8 =
8.4, J7,6 = 4,7, H-7); 8,11 (dd, 1H, J5,4 = 1,7, J5,3 = 0,8, H-5-furyl); 8,63 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 =
1.4, H-8); 8,80 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 9,07 (s, 1H, H-2); 9,44 (dd, 1H, J3,4 = 3,5, J3,5 = 0,8, H-3-furyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-te).· 61,71 (CH2-5'); 70,26 (CH-3’); 71,02 (CH2’); 85,87 (CH-4’); 86,74 (CH-Γ); 106,48 (C- 4a); 113,07 (CH-4-furyl); 120,33 (CH-3-furyl);
120,90 (CH-8); 122,02 (CH-7); 131,95 (C-8a); 137,88 (C-4b); 143,98 (CH-6); 146,86 (CH-5furyl); 148,71 (C-4); 150,54 (C-2-furyl); 155,31 (CH-2); 156,51 (C-9a); HR-ESI-MS: nalezeno: 369,1194 (100, [M+H]+, vypočteno pro CisHnOsNA: 369,1193); HR-ESI-MS: nalezeno: 391,1014 (100, [M+Na]+, vypočteno pro CisHieOsteNak 391,1012).
-24CZ 308104 B6
Příklad 29
4-(Furan-2-yl)-9-(jS-D-ribofuranosyl)-9řř-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-í/]pyrimidin (2f)
Do roztoku nukleosidu 16f (230 mg, 0,34 mmol) ve směsi methanolu (9 ml) a DMF (4,5 ml) byl přidán methoxid sodný (22 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,10 mmol). Reakční směs byla míchána při 60 °C po dobu 16 hodin, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (CHCF/MeOH 0 —> 10%). Nukleosid 2f (88 mg, 71 %) byl získán ve formě růžového prášku.
R/= 0,19 (SiO2; CHCE/MeOH 10:1); [a]D 20 = - 43,3 (c = 0,247 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-í/ď): 3,73 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5'a,oH= 5,1, J5'b,4'= 3,5, H-5'b); 3,76 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5'a,0H= 5,1, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,04 (ddd, 1H, J4',5' = 3,5, 3,2, J4',3· = 2,8, H-4'); 4,26 (ddd, 1H, J3',2'= 5,8, J3',OH = 4,6, J3',4' = 2,8, H-3 ); 4,75 (ddd, 1H, J2',r= 7,6, J2',oh = 6,3, J2',3· = 5,8, H-2’); 5,24 (d, 1H, Joh,3’= 4,6, OH-3’); 5,27 (t, 1H, JOh,5’= 5,1, OH-5’); 5,31 (d, 1H, J0H,2’ = 6,3, OH-2’); 6,64 (d, 1H, Jr,2' = 7,6, Η-Γ); 6,92 (dd, 1H, J4,3 = 3,5, J4,5 = 1,8, H-4-furyl); 7,67 (dd, 1H, J3,4 =
3.5, J3,5 = 0,9, H-3-furyl); 8,36 (dd, 1H, J5,4 = 1,8, Js,3 = 0,9, H-5-furyl); 8,63 (d, 1H, J6,s = 5,4, H-
6); 8,80 (dd, 1H, Js,6 = 5,4, Js,8 = 1,1, H-5); 9,07 (s, 1H, H-2); 9,52 (d, 1H, J8,s = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 61,62 (CH2-5'); 70,12 (CH- 3’); 71,12 (CH-2’); 85,92 (CH-4’); 86,73 (CH-F); 106,25 (C-4a); 113,35 (CH-4-furyl); 116,01 (CH-3-furyl); 118,27 (CH-5); 125,16 (C-4b); 133,96 (C-8a); 136,21 (CH-8); 141,96 (CH-6); 147,49 (CH-5-furyl); 149,60 (C-4); 152,06 (C-2-furyl); 156,03 (CH-2); 156,95 (C-9a); HR- ESI-MS: nalezeno: 369,1194 (100, [M+H]+, vypočteno pro CisHnOsNA: 369,1193); HR- ESI-MS: nalezeno: 391,1013 (100, [M+Na]+, vypočteno pro ί’ιχΗκ,ΟχΝχΝαύ 391,1012).
Příklad 30
4-(Furan-3-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (15g)
Chráněný nukleosid 13 (400 mg, 0,62 mmol), furan-3-boronová kyselina (105 mg, 0,93 mmol), K2CO3 (171 mg, 1,24 mmol) a Pd(PPh3)4 (35 mg, 0,03 mmol) byly rozpuštěny v toluenu a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 24 hodin. Po zreagování byla reakční směs naředěná s nasyceným roztokem NaHCO3 a extrahována s ethyl acetátem. Organické vrstvy byly sušeny pomocí Na2SO4, rozpouštědlo bylo odpařeno a surový produkt byl přečištěn pomocí HPFC (SiO2, petrolether/ethyl acetát 0 —> 100%). Chráněný nukleosid 15g (308 mg, 73%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,74 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 2:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 4,73 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4'= 4,4, H-5'b); 4,86 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'b); 4,92 (ddd, 1H, J4',3· =
6.6, J4',5' = 4,4, 3,2, H-4’); 6,39 (t, 1H, J3',2· = J3',4'= 6,6, H-3’); 6,60 (dd, 1H, J2',3· = 6,6, J2',r = 4,7, H-2’); 7,08 (d, 1H, Jr,2'= 4,7, Η-Γ); 7,41, 7,49, 7,50 (3 x m,3 x 2H, H-m-Bz); 7,55 (dd, 1H, J7,8 =
8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,61,7,66(2 x m, 2 x 1H, H-p-Bz); 7,67 (dd, 1H, J4,5 = 2,3, J4,2 = 0,8, H-4furyl); 7,68 (m, 1H, H-p-Bz); 7,83 (m, 2H, H-o-Bz); 7,94 (dd, 1H, J5,4 =2,3, J5,2 = 1,5, H-5furyl); 7,95, 8,00 (2 x m,2 x 2H, H-o-Bz); 8,53 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 4,4, H-8); 8,80 (dd, 1H, J67 = 4,7, J6,8 = 1,4. H-6); 9,01 (s, 1H, H-2); 10,01 (dd, 1H, J2,5 = 1,5, J2,4 = 0,8, H-2-furyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 63,30 (CH2-5’); 70,38 (CH-3’); 72,46 (CH-2’); 78,82 (CH-4’); 86,05 (CH-Γ); 108,97 (C-4a); 110,43 (CH-4-furyl); 119,43 (CH-8); 122,11 (CH-7); 125,30 (C-3furyl); 128,63, 128,83 (C-z-Bz); 128,89, 128,94, 128,97 (CH-m-Bz); 129,37 (CH-o-Bz); 129,39 (C-z-Bz); 129,48, 129,62 (CH-o-Bz); 132,38 (C-8a); 133,76, 134,09 (CH-p-Bz); 138,07 (C-4b); 144,29 (CH-5-furyl); 144,45 (CH-6); 149,52 (CH-2-furyl); 152,83 (C-4); 155,45 (CH-2); 155,88 (C-9a); 164,81, 165,01, 165,59 (CO-Bz); HR- ESI-MS: nalezeno: 703,1802 (100, [M+Na]+ vypočteno pro C39H2sOsNa+: 703,1799).
-25 CZ 308104 B6
Příklad 31
4-(Furan-3-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (16g)
Chráněný nukleosid 14 (500 mg. 0,77 mmol), furan-3-boronová kyselina (259 mg, 2,31 mmol), K2CO3 (213 mg, 1,54 mmol) a Pd(PPh3)4 (46 mg, 0,04 mmol) byly rozpuštěny v toluenu a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 4 hodin. Po zreagování byla reakční směs naředěna nasyceným roztokem NaHCO; a extrahována ethyl acetátem. Organické vrstvy byly sušeny pomocí Na2SO4, rozpouštědlo bylo odpařeno a surový produkt byl přečištěn pomocí HPFC (S1O2, petrolether/ethyl acetát 0 —> 100%). Chráněný nukleosid 16g (443 mg, 84%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,48 (S1O2; petrolether/ethyl acetát 1:2); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-</>): 4,75 (dd, 1H Jgem = 12,3, J5'h,4· = 4,6, H-5'b); 4,85 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,94 (ddd, 1H J4-,3· = 6,5, J4’,5’ = 4,5, 3,2, H-4’); 6,39 (t, 1H, J3',2· = J3,4· = 6,5, H-3'); 6,65 (dd, 1H, J2-,3- = 6,5 /2,7 = 4,7, H2'); 7,15 (d, 1H, /7,2· = 4,7, H-Γ); 7,17(dd, 1H, J4,5 = 1,9, J4,2 = 0,9, H-4-furyl); 7,42, 7,48, 7,51 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,62, 7,65, 7,69 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,85 7,94, 8,01 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,02 (dd, 1H, J5,4 = 1,9, J5,2 = 1,5, H-5-furyl); 8,15 (dd, 1H, J5,6 - 5,4, J5,8 = 1,0, H-5); 8,59 (d, 1H, J6,5 = 5,4, H-6); 8,62 (dd, 1H, J2,5 = 1,5, J2,4 = 0,9 H-2-furyl); 9,03 (s, 1H, H-2); 9,49 (d, 1H, J8,5 = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-A) 63,32 (CH2-5'); 70.40 (CH-3'); 72,43 (CH-2’); 78,91 (CH-4’); 86,15 (CH-F); 109,84 (C-4a); 110,67 (CH-4-furyl); 116,47 (CH-5); 124,23 (C-3-furyl); 124,98 (C-4b); 128,63, 128,82 (C-z-Bz); 128,89, 128,91, 128,97 (CH-m-Bz); 129,34 (C-z-Bz); 129,36, 129,50, 129,63 (CH-o-Bz) 133,73, 134,09 (CH-p-Bz); 134,16 (C-8a); 134,76 (CH-8); 142,37 (CH-6); 145,01 (CH-5-furyl); 145,34 (CH-2-furyl); 155,16 (C-4); 155,69 (C-9a); 156,16 (CH-2); 164,82, 165,02, 165,58 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 681,1981 (100, [M+H]+, vypočteno pro C39H29O8NČ: 681,1979); HR-ESI-MS: nalezeno: 703,1800 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C39H2sOsN4Na+: 703,1799).
Příklad 32
4-(Furan-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (Ig)
Do směsi nukleosidu 15g (283 mg, 0,42 mmol) v methanolu (13 ml) byl přidán methoxid sodný (30 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,13 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při teplotě 70 °C. Rozpouštědlo bylo následně odpařeno za sníženého tlaku a čistý produkt byl vykrystalizován z methanolu. Nukleosid Ig (120 mg, 78 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,25 (SiO2;ethyl acetát); [a]D 20 = -18,1 (c = 0,182 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSOd6): 3,68-3,78 (m, 2H, H-5’); 4,03 (td, 1H, J4'5· = 3,5, J4',3' = 2,5, H-4’); 4,24 (dd, 1H, Λ;2 = 5,6, J3',4'= 2,5, H-3’); 4,73 (dd, 1H, J2',r = 7,5, /2,3 = 5,6, H-2’); 5,20-5,34 (bm, 3H, OH-2',3',5'); 6,62 (d, 1H, Ji',2'= 7,5, H-Γ); 7,62 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,68 (dd, 1H, J4,5 = 1,9, J4,2 = 0,8, H-4-furyl); 7,94 (dd, 1H, J5,4 = 1,9, J5,2 = 1,6, H-5-furyl); 8,62 (dd, 1H, Js>7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,80 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 9,08 (s, 1H, H-2); 10,05 (dd, 1H, J2,5 = 1,6, J2,4 = 0,8, H-2-furyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 61,72 (CH2-5'); 70,28 (CH-3’); 71,02 (CH-2’); 85,86 (CH-4’); 86,79 (CH-Γ); 108,49 (C-4a); 110,49 (CH-4-furyl); 120,95 (CH-8); 121,91 (CH-
7); 125,42 (C-3-furyl); 131,91 (C-8a); 138,28 (C-4b); 143,98 (CH-6); 144,21 (CH-5-furyl); 149,40 (CH-2-furyl); 152,52 (C-4); 155,47 (CH-2); 156,48 (C-9a); HR-ESI-MS: nalezeno: 391,1013 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci8Hi60sN4Na+: 391,1012).
Příklad 33
4-(Furan-3-yl)-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (2g)
Nukleosid 2g byl připraven stejným postupem jako Ig, z navážky chráněného nukleosidu 16g
-26CZ 308104 B6 (396 mg, 0,58 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 16 hodin, rozpouštědlo bylo následně odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí RP-HPFC (C-18, voda/MeOH 0 —> 60%). Nukleosid 2g (192 mg, 90%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,20 (SiO2; CHCE/MeOH 10:1); [a]D 20 = -31,9 (c = 0,254 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-í/á): 3,73, 3,76 (2 x ddd, 2 x 1H, Jgem = 11,9, JS',oh = 5,1, J5'4· = 3,3, H-5’); 4,04 (td, 1H, J4’,5’ = 3,3, J4’,3'= 2,7, H-4’); 4,26 (ddd, 1H, Λ;2· = 5,8, J3’,oh = 4,6, J3’,4’= 2,7, H-3’); 4,74 (dd, 1H, J2.r= J2.OH = 6,4, J2',3'= 5,8, H-2’); 5,25 (d, 1H, JOh,3'= 4,6, OH-3’); 5,28 (t, 1H JOh,5'= 5,1, OH-5’); 5,31 (d, 1H, JOh,2' = 6,4, OH-2’); 6,62 (d, 1H, J7;2· = 7,7, Η-Γ); 7,17 (dd, 1H, J4,5 = 1,9, J4,2 = 0,9, H-4-furyl); 8,03 (dd, 1H, J5,4 = 1,9, J5,2 = 1,5, H-5-furyl); 8,15 (dd, 1H, J5,6 = 5,4, J5,8 =1,1, H-5); 8,56 (d, 1H, J6,5 = 5,4, H-6); 8,61 (dd, 1H, J2,5 = 1,5, J2,4 = 0,9, H-2-furyl); 9,11 (s, 1H, H-2); 9,53 (d, 1H, J8,5 = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 61,64 (CH2-5’); 70,18 (CH-3’); 71,25 (CH-2’); 85,97 (CH-4’); 86,74 (CH-Γ); 109,30 (C-4a); 110,72 (CH-4-furyl); 116,31 (CH-5); 124,34 (C-3-furyl); 125,12 (C-4b); 133,65 (C-8a); 136,41 (CH-8); 141,74 (CH6); 144,97 (CH-5-furyl); 145,16 (CH-2-furyl); 154,84 (C-4); 156,25 (CH-2); 156,35 (C-9a); HRESI-MS: nalezeno: 369,1194 (100, [M+H]+, vypočteno pro CisHnOsNÚ: 369,1193); HR-ESIMS: nalezeno: 391,1013 (100, [M+Na]+, vypočteno pro Ci8Hi60sN4Na+: 391,1012).
Příklad 34
4-(Thiofen-3-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo(2,3-ď|pyrimidin (15h)
Chráněný nukleosid 13 (150 mg, 0,23 mmol), thienyl-3-boronová kyselina (25 mg, 0,35 mmol), K2CC>3 (64 mg, 0,46 mmol) a Pd(PPh3)4 (13 mg, 0,01 mmol) byly rozpuštěny v toluenu a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 22 hodin. Po zreagování byla reakční směs naředěna nasyceným roztokem NaHCO; a extrahována ethyl acetátem. Organické vrstvy byly sušeny pomocí Na2SO4, rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a surový produkt byl přečištěn pomocí HPFC (SiO2, petrolether/ethyl acetát 0 —> 100%). Nukleosid 15h (443 mg, 84%) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,54 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 2:1); ’H NMR (500,0 MHz, DMSO-cE): 4,73 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4' = 4,4, H-5'b); 4,86 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'b); 4,92 (ddd, 1H, J4',3· =
6,6, J4',5'= 4,4, 3,2, H-4’); 6,40 (t, 1H, Λ,2 = }3·,4· = 6,6, H-3’); 6,60 (dd, 1H, J2;5 = 6,6, J2',r= 4,7, H-2’); 7,09 (d, 1H, Jr,2· = 4,7, H-F); 7,41, 7,49, 7,50 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,55 (dd, 1H, J7,8 =
8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,61, 7,65, 7,68 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,74 (dd, 1H, J5,4 = 5,1, J5,2 = 3,0, H-5-thienyl); 7,83, 7,95, 8,00 (3 x m, 3 x 2H, H-o-Bz); 8,46 (dd, 1H, J4,5 = 5,1, J4,2 = 1,3, H-4thienyl); 8,53 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,78 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 9,02 (s, 1H, H-2); 10,20 (dd, 1H, J2,5 = 3,0, J2,4 = 1,3, H-2-thienyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 63,32 (CH2-5’); 70,40 (CH-3’); 72,51 (CH-2’); 78,85 (CH-4’); 86,10 (CH-Γ); 109,06 (C-4a); 119,48 (CH-8); 122,40 (CH-7); 122,40 (CH-5-thienyl); 128,66, 128,86 (C-z-Bz); 128,94, 128,99, 129,02 (CH-zzr-Bz); 129,11 (CH-4-thienyl); 129,42 (C-z-Bz); 129,42, 129,53, 129,66 (CH-o-Bz); 132,39 (C-8a); 133,66 (CH-2-thienyl); 133,82, 134,15 (CH-p-Bz); 138,10 (C-4b); 139,76 (C-3thienyl); 144,25 (CH-6); 154,91 (C-4); 155,30 (CH-2); 156,30 (C-9a); 164,87, 165,07, 165,65 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 697,1752 (100, [M+H]+ vypočteno pro C39H29O7N4S+: 697,1751); HR-ESI-MS: nalezeno: 719,1572 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C39H28O?N4NaS+: 719,1570).
Příklad 35
4-(Thiofen-3-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo(2,3-ď|pyrimidin (16h)
Chráněný nukleosid 14 (120 mg, 0,19 mmol), thienyl-3-boronová kyselina (41 mg, 0,57 mmol),
-27 CZ 308104 B6
K2CO3 (52 mg, 0,38 mmol) a Pd(PPh3)4 (12 mg, 0,01 mmol) byly rozpuštěny v toluenu (4 ml) a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 24 hodin. Po zreagování byla reakční směs naředěná nasyceným roztokem NaHCCh a extrahována ethyl acetátem. Organické vrstvy byly sušeny pomocí Na2SO4, rozpouštědlo bylo odpařeno za sníženého tlaku a surový produkt byl přečištěn pomocí HPFC (SiO2, petrolether/ethyl acetát 0 —> 100 %). Nukleosid 16h (73 mg, 57 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,51 (SiO2; petrolether/ethyl acetát 1:2); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-ifc): 4,76 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4· = 4,6, H-5'b); 4,85 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4· = 3,2, H-5'a); 4,94 (ddd, 1H, J4',3'=
6,5, J4',5'= 4,6, 3,2, H-4’); 6,40 (t, 1H, Λ;2 = J3\4' = 6,5, H-3’); 6,66 (dd, 1H, J2',3'= 6,5, 12·Γ = 4,7, H-2’); 7,16 (d, 1H, Jr,2· = 4,7, Η-Γ); 7,42, 7,48, 7,51 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,62, 7,65, 7,69 (3 x m, 3 x 1H, H-p-Bz); 7,72 (dd, 1H, J4,5 = 5,0, J4,2 = 1,3, H-4-thienyl); 7,85 (m, 2H, H-o-Bz); 7,88 (dd, 1H, J5,4 = 5,0, J5,2 = 2,9, H-5-thienyl); 7,95 (m, 2H, H-o-Bz); 8,00 - 8,03 (m, 3H, H-5, H-o-Bz); 8,41 (dd, 1H, J2,5 = 2,9, J2,4 = 1,3, H-2-thienyl); 8,56 (d, 1H, J6,5 = 5,3, H-6); 9,05 (s, 1H, H-2); 9,49 (d, 1H, Js>5 = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 63,33 (CH,-5’); 70,39 (CH-3’); 72,45 (CH-2’); 78,91 (CH-4’); 86,15 (CH-H); 109,87 (C-4a); 116,28 (CH-5); 125,11 (C4b); 127,98 (CH-5-thienyl); 128,17 (CH-4-thienyl); 128,64, 128,82 (C-z-Bz); 128,89, 128,92, 128,97 (CH-zzr-Bz); 129,34 (C-z-Bz); 129,37, 129,50, 129,63 (CH-o-Bz); 129,69 (CH-2-thienyl); 133,74, 134,10 (CH-p-Bz); 134,26 (C-8a); 134,81 (CH-8); 138,84 (C-3-thienyl); 142,27 (CH-6); 155,83 (C-9a); 156,18 (CH-2); 157,42 (C-4); 164,83, 165,02, 165,58 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 697,1753 (100, [M+H]+, vypočteno C39HMO7N4S4·: 697,1751); HR-ESI-MS: nalezeno: 719,1573 (100, [M+Na]+, vypočteno C39H28O7N4NaS+: 719,1570).
Příklad 36
4-(Thiofen-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9ř7-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-<7]pyrimidin (Ih)
Do roztoku nukleosidu 15h (160 mg, 0,23 mmol) v methanolu (7 ml) byl přidán methoxid sodný (16 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,07 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při teplotě 50 °C, poté bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (SiO2, CHCE/MeOH 0 —> 10%). Nukleosid Ih (62 mg, 70 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,44 (SiO2; ethyl acetát); [a]D 20 = -17,6 (c = 0,199 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSOde)·. 3/n (ddd, IH, Jgem = 12,0, J5'a,0H = 5,2, J5’b,4· = 3,3,H-5’b); 3,75 (ddd, IH, Jgem = 12,0, J5o,oh = 5,2, J5'a,4· = 3,3, H-5'b); 4,03 (td, IH, J4',5· = 3,3, J4',3· = 2,9, H-4’); 4,25 (ddd, IH, Jy,2· = 6,2, J3',oh = 4,2, J3\4' = 2,9, H-3’); 4,73 (dt, IH, J2',r = 7,5, J2',3· = J2',0H = 5,4, H-2’); 5,23 (d, IH, JOh,3' = 4,2, OH-3’); 5,28 (t, IH, J0H,5’ = 5,2, OH-5’); 5,31 (d, IH, JOh,2'= 5,4, OH-2’); 6,65 (d, IH, Jr,2· = 7,5, Η-Γ); 7,64 (dd, IH, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,75 (dd, IH, J5,4 = 5,1, J5,2 = 3,0, H-5thienyl); 8,48 (dd, IH, J45 = 5,1, J4,2 = 1,2, H-4-thienyl); 8,64 (dd, IH, J8.7 = 8,4, J8,e = 1,4, H-8); 8,78 (dd, IH, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 9,10 (s, IH, H-2); 10,25 (dd, IH, J2,5 = 3,0, J2,4 = 1,2, H2-thienyl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-í/6): 61,71 (CH2-5’); 70,26 (CH-3’); 70,98 (CH-2’); 85,85 (CH-4’); 86,77 (CH-Γ); 108,52 (C-4a); 121,00 (CH-8); 122,14 (CH-7); 126,13 (CH-5thienyl); 129,13 (CH-4-thienyl); 131,88 (C-8a); 133,39 (CH-2-thienyl); 138,26 (C-4b); 139,93 (C-3-thienyl); 143,71 (CH-6); 154,61 (C-4); 155,27 (CH-2); 156,87 (C-9a); HR-ESI-MS: nalezeno: 385,0966 (100, [M+H]+ vypočteno Ci8Hi7O4N4S+: 385,0965); HR-ESI-MS: nalezeno: 407,0786 (100, [M+Na]+, vypočteno Ci8Hi6O4N4NaS+: 407,0784).
Příklad 37
4-(Thiofen-3-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9ř7-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-<7]pyrimidin (2h)
Nukleosid 2h byl připraven stejným postupem jako Ih, z navážky nukleosidu 16h (268 mg, 0,39 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při teplotě 60 °C, poté bylo rozpouštědlo odpařeno a surová reakční směs byla čištěna za pomoci HPFC (SiO2, CHCE/MeOH 0^10 %).
-28 CZ 308104 B6
Nukleosid 2h (106 mg, 72 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/= 0,20 (SiO2; CHCE/McOH 10:1); [a]D 20 = -32,5 (c = 0,283 vDMSO-ri6); Ή NMR (600,1 MHz, DMSO-ífc): 3,73 (ddd, 1H, Jgem =11,9, J5o,oh = 5,1, Jsw = 3,5, H-5'b); 3,76 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5’a,0H = 5,1, J5’a,4’ = 3,2, H-5'a); 4,05 (ddd, 1H, = 3,5, 3,2, 14·3· = 2,7, H-4’); 4,26 (ddd, 1H, J3',2'= 5,8, J3',0H = 4,6, J3',4· = 2,7, H-3’); 4,76 (ddd, 1H, J2',r= 7,6, J2',Oh = 6,4, J2',3· = 5,8, H-2’); 5,25 (d, 1H, J0H,3’= 4,6, OH-3’); 5,27 (t, 1H, J0H,5’= 5,1, OH-5’); 5,31 (d, 1H, JOh,2' = 6,4, OH-2’); 6,64 (d, 1H, Jr,2'= 7,6, H-F); 7,73 (dd, 1H, J4,5 = 5,0, J4,2 = 1,3, H-4-thienyl); 7,88 (dd, 1H, J5,4 = 5,0, J5,2 = 2,9, H-5-thienyl); 8,01 (dd, 1H, Js,6 = 5,3, Js,8 = 1,1, H-5); 8,39 (dd, 1H, J2,5 = 2,9, J2,4 = 1,3, H-2-thienyl); 8,53 (d, 1H, J6,5 = 5,3, H-6); 9,13 (s, 1H, H-2); 9,53 (d, 1H, J8,5 = 1,1, H-8); 13C NMR (150,9 MHz, DMSO-ri6): 61,64 (CH2-5’); 70,18 (CH-3’); 71,25 (CH-2’); 85,97 (CH-4’); 86,76 (CH-Γ); 109,30 (C-4a); 116,11 (CH-5); 125,24 (C-4b); 127,93 (CH-5thienyl); 128,19 (CH-4-thienyl); 129,40 (CH-2-thienyl); 133,74 (C-8a); 136,45 (CH-8); 139,02 (C-3-thienyl); 141,62 (CH-6); 156,24 (CH-2); 156,47 (C-9a); 157,15 (C-4); HR-ESI-MS: nalezeno: 385,0965 (100, [M+H]+, vypočteno Ci8Hi7O4N4S+: 385,0965).
Příklad 38
4-(Benzofuran-2-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9ř7-pyrido[2'3':4,5] pyrrolo[2,3ďlpyrimidin (15i)
Chráněný nukleosid 13 (100 mg, 0,15 mmol), benzofuran-2-boronová kyselina (38 mg, 0,23 mmol), K2CO3 (43 mg, 0,3 mmol), Pd(PPh3)2Cl2 (11 mg, 0,01 mmol) a Et3N (33 μΐ, 0,23 mmol) byly rozpuštěny v toluenu (4 ml) a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 24 hodin. Po zreagování bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna HPFC (SiO2, petrolether/DCM/ethyl acetát 1:1:0 —> 1:1:2). Chráněný nukleosid 15i (63 mg, 56%) byl získán ve formě nažloutlého prášku.
R/ = 0,52 (SiO2; petrolether/DCM/ethyl acetát 4:1:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-riá): 4,74 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4'= 4.4, H-5'b); 4,88 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4'= 3,2, H-5'b); 4,93 (ddd, 1H, J4',3' = 6,7, J4',5' = 4,4, 3,2, H-4’); 6,43 (t, 1H, J3',2'= J3',4· = 6,7, H-3’); 6,61 (dd, 1H, J2',3· = 6,7, J2',i' = 4,6, H-2'); 7,12 (d, 1H, J7;2· = 4,6, Η-Γ); 7,39 (ddd, 1H, J5,4 = 8.0, Js,6 = 7,2, Λ.7 =1,0, H-5benzofuryl); 7,42, 7,50, 7,51 (3 x m, 3 x 2H, H-m-Bz); 7,53 (ddd, 1H, Je,7 = 8,4, Js,s = 7,2, Je,4 =1,3, H-6-benzofuryl); 7,60-7,71 (m, 4H, H-7, H-p-Bz); 7,80 (dq, 1H, J7,6= 8,4, J7,3 = J7,4 = J7,5 = 1,0, H-7-benzofuryl); 7,83 (m, 2H, H-o-Bz); 7,95-7,98 (m, 3H, H-4-benzofuryl, H-o-Bz); 8,01 (m, 2H, H-o-Bz); 8,58 (dd, 1H, J8,7 = 8,5, J8,6 = 1,4, H-8); 8,90 (dd, 1H, J6,7 = 4,7, J6,8 = 1,4, H6); 9,11 (s, 1H, H-2); 9,91 (d, 1H, J3,7 = 1,0, H-3-benzofuryl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-ri6): 63,23 (CH2-5’); 70,33 (CH-3’); 72,62 (CH-2’); 78,85 (CH-4’); 86,12 (CH-Γ); 108,57 (C-4a); 111,99 (CH-7-benzofuryl); 115,96 (CH-3-benzofuryl); 119,58 (CH-8); 122,64 (CH-7); 123,22 (CH-4-benzofuryl); 123,90 (CH-5-benzofuryl); 127,62 (CH- 6-benzofuryl); 128,24 (C-3abenzofuryl); 128,66, 128,83 (C-z-Bz); 128,89, 128,95, 128,97 (CH-zzr-Bz); 129,38 (CH-o-Bz); 129,39 (C-z-Bz); 129,50, 129,62 (CH-o-Bz); 132,79 (C-8a); 133,76, 134,10 (CH-p-Bz); 137,43 (C-4b); 144,65 (CH-6); 149,21 (C-4); 151,93 (C-2-benzofuryl); 155,12 (C-7a-benzofuryl); 155,24 (CH-2); 155,89 (C-9a); 164,84, 165,02, 165,58 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 731,2139 (100, [M+H]+ vypočteno C43H3iO8N4 +: 731,2136); HR-ESI-MS: nalezeno: 753,1958 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C43H3o08N4Na+: 753,1955).
Příklad 39
4-(Benzofuran-2-yl)-9-(2,3,5-tri-O-benzoyl-/?-D-ribofuranosyl)-9ř7-pyrido[4',3':4,5] pyrrolo[2,3ďlpyrimidin (16i)
Chráněný nukleosid 14 (400 mg, 0,62 mmol), benzofuran-2-boronová kyselina (301 mg, 1,86 mmol), K2CO3 (171 mg, 1,24 mmol) nad Pd(PPh3)4 (71 mg, 0,06 mmol) byly rozpuštěny v toluenu (16 ml) a reakční směs byla zahřívána pod argonovou atmosférou na 100 °C po dobu 18
-29CZ 308104 B6 hodin. Po zreagování bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna za pomocí HPFC (SiCE. cyklohexan/ethyl acetát 0 —> 100%). Chráněný nukleosid 16i (288 mg, 64 %) byl získán ve formě bílého prášku.
R/=0,50 (SiCh; cyklohexan/ethyl acetát 1:1); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-íř): 4,76 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'b,4' = 4,7, H-5'b); 4,86 (dd, 1H, Jgem = 12,3, J5'a,4' = 3,2, H-5'a); 4,95 (ddd, 1H, J4',3· = 6,6, J4',5' = 4,7, 3,2, H-4'); 6,40 (t, 1H, J3',2· = J3',4· = 6,6, H-3’); 6,64 (dd, 1H, J2-,3· = 6,6, J2',r =
4,6, H-2’); 7,19 (d, 1H, Jr,2' = 4,6, Η-Γ); 7,40 - 7,53 (m, 7H, H-5-benzofuryl, H-m-Bz); 7,58 (ddd, 1H, Je,7 = 8,4, Je,5 = 7,2, Je,4 = 1,3, H-6-benzofuryl); 7,62, 7,63, 7,69 (3 x m, 3x 1H, H-p-Bz); 7,85 (m, 2H, H-o-Bz); 7,90 (ddd, 1H, J4,5 = 7,8, J4,e = 1,3, J4,7 = 1,0, H-4-benzofuryl); 7,94, 8,02 (2 x m, 2 x 2H, H-o-Bz); 8,07 (dq, 1H, J7,e = 8,4, J7,3 = J7,4 - J7,s = 1,0, H-7-benzofuryl); 8,11 (d,
IH, J3,7 = 1,0, H-3-benzofuryl); 8,75 (d, 1H, J6,s = 5,4, H-6); 8,93 (dd, 1H, Js,e = 5,4, Js,8 = 1,0, H5); 9,09 (s, 1H, H-2); 9,52 (d, 1H, J8,s = 1,0, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-d6): 63,36 (CH2-5'); 70,40 (CH-3’); 72,50 (CH-2’); 78,95 (CH-4’); 86,18 (CH-Γ); 108,22 (C-4a); 111,80 (CH-3-benzofuryl); 112,36 (CH-7-benzofuryl); 118,85 (CH-5); 123,07 (CH-4-benzofuryl); 124,48 (CH-5-benzofuryl); 124,91 (C-4b); 127,48 (CH-6-benzofuryl); 127,55 (C-3a-benzofuryl); 128,67, 128,84 (C-z-Bz); 128,91, 128,92, 128,99 (CH-m-Bz); 129,34 (C-z-Bz); 129,37, 129,52, 129,65 (CH-o-Ph); 133,73, 134,11, 134,12 (CH-p-Bz); 134,67 (C-8a); 134,76 (CH-8); 142,98 (CH-6); 150,07 (C-4); 153,32 (C-2-benzofuryl); 155,79 (C-7a-benzofuryl); 155,94 (CH-2); 156,43 (C-9a); 164,85, 165,03, 165,60 (CO-Bz); HR-ESI-MS: nalezeno: 731,2139 (100, [M+H]+, vypočteno pro C43H31O8N44·: 731,2136).
Příklad 40
4-(Benzofuran-2-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (li)
Do roztoku nukleosidu 15i (180 mg, 0,25 mmol) v methanolu (8 ml) byl přidán methoxid sodný (17 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,08 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě 70 °C po dobu 16 hodin. Po zreagování bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a produkt byl krystalizován z methanolu. Nukleosid li (71 mg, 69%) byl získán ve formě nažloutlého prášku.
R/= 0,48 (SiO2; CHCE/MeOH 10:1); [a]D 20 = -27,7 (c = 0,271 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-oý): 3,72 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, JS'b,oH = 5,2, J5'b,4· = 3,6, H-5'b); 3,77 (ddd, 1H, Jgem =
II, 9, J5'a,0H = 5,2, J5'a,4'= 3,2, H-5'b); 4,05 (ddd, 1H, J4'5· = 3,6, 3,2 J4'3· = 2,7, H-4’); 4,26 (ddd, 1H, J3',2' = 5,6, J3',oh = 4,5, J3',4' = 2,1, H-3’); 4,74 (ddd, 1H, J2',r= 7,5, J2',Oh = 6,2, J2-,3- = 5,6, H2’); 5,25 (d, 1H, J0H,3’= 4,5, OH-3’); 5,30 (t, 1H, J0H,3’= 5,2, 5,0, OH-5’); 5,33 (d, 1H, J0H,2'= 6,2, OH-2’); 6,68 (d, 1H, Jr,2' = 7,5, H-F); 7,39 (ddd, 1H, J5,4 = 8,0, J5,e = 7,2, J5,7 =1,0, H-5benzofuryl); 7,53 (ddd, 1H, Je,7 = 8,4, Je,5 = 7,2, Je,4 =1,3, H-6-benzofuryl); 7,63 (dd, 1H, J7,8 = 8,4, J7,6 = 4,7, H-7); 7,80 (dq, 1H, J7,6 = 8,4, J7,3 = J7,4 = J7,5 = 1,0, H-7-benzofuryl); 7,96 (ddd, 1H, J4,5 = 8,0, J4,6 = 1,3, J4,7 = 1,0, H-4-benzofuryl); 8,69 (dd, 1H, J8,7 = 8,4, J8,6 = 1,4, H-8); 8,89 (dd, 1H, J6,7= 4,7, J6,8 = 1,4, H-6); 9,19 (s, 1H, H-2); 9,94 (d, 1H, J3,7= 1,0, H-3-benzofuryl); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-zŘ): 61,71 (CH2-5'); 70,29 (CH- 3’); 71,10 (CH-2’); 85,95 (CH-4’); 86,82 (CH-Γ); 108,57 (C-4a); 111,98 (CH-7-benzofuryl); 115,73 (CH-3-benzofuryl); 121,20 (CH-8); 122,44 (CH-7); 123,18 (CH-4-benzofuryl); 123,89 (CH-5-benzofuryl); 127,53 (CH-6benzofuryl); 128,29 (C-3a-benzofuryl); 132,27 (C-8a); 137,65 (C-4b); 144,20 (CH-6); 148,97 (C4); 152,12 (C-2-benzofuryl); 155,09 (C-7a-benzofuryl); 155,29 (CH-2); 156,54 (C-9a); HR-ESIMS: nalezeno: 419,1350 (100, [M+H]+ vypočteno pro C22H19O5N44·: 419,1350); HR-ESI-MS: nalezeno: 441,1170 (100, [M+Na]+, vypočteno pro C22Hi80sN4Na+: 441,1169).
Příklad 41
4-(Benzofuran-2-yl)-9-(/?-D-ribofuranosyl)-9#-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-ď|pyrimidin (2i)
Do roztoku nukleosidu 16i (249 mg, 0,25 mmol) v methanolu (10 ml) byl přidán methoxid sodný (23 μΐ, 25 % hm. v methanolu, 0,10 mmol). Reakční směs byla míchána po dobu 16 hodin při
-30CZ 308104 B6 teplotě 60 °C. Po zreagování bylo rozpouštědlo odpařeno za sníženého tlaku a surová reakční směs byla čištěna pomocí HPFC (S1O2, CHCE/MeOH 0 —> 10 %). Nukleosid 2i (112 mg, 79 %) byl získán ve formě nažloutlého prášku.
R/= 0,26 (SiO2; CHCE/McOH 10:1); [a]D 20 = -50,5 (c = 0,263 v DMSO); Ή NMR (500,0 MHz, DMSO-*): 3,75 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, Js'b,oa= 5,0, J3'b,4·= 3,5, H-5'b); 3,78 (ddd, 1H, Jgem = 11,9, J5'a,0H = 5,0, J5'a,4'= 3,2, H-5'a); 4,06 (ddd. 1H, *,5' = 3,5, 3,2, J4',3· = 2,8, H-4’); 4,28 (ddd, 1H, J3',2'= 5,7, J3',oh = 4,7, J3',4’= 2,8, H-3’); 4,77 (ddd, 1H, J2',r= 7,6, J2',Oh = 6,3, J2',3· = 5,7, H-2’); 5,26 (d, 1H, Joh,3’= 4,6, OH-3’); 5,29 (t, 1H, J0H,5’= 5,0, OH-5’); 5,33 (d, 1H, JOh,2' = 6,3, OH-2’); 6,68 (d, 1H, Ji',2' = 7,6, Η-Γ); 7,44 (ddd, 1H, J5,4 = 7,8, *,6 = 7,2, *7= 1,0, H-5-benzofuryl); 7,58 (ddd, 1H, *7 = 8,4, *,5 = 7,2, J6,4 = 1,3, H-6-benzofuryl); 7,90 (ddd, 1H, J4,5 = 7,8, J4,6 = 1,3, *,7 = 1,0, H-4-benzofuryl); 8,05 (dq, 1H, J7,e = 8,4, J73 = J7,4 = J7,s = 1,0, H-7-benzofuryl); 8,09 (d, 1H, *,7 = 1,0, H-3-benzofuryl); 8,72 (d, 1H, *,5 = 5,4, H-6); 8,93 (dd, 1H, *6 = 5,4, *,s = 1,1, H-5); 9,16 (s, 1H, H-2); 9,57 (d, 1H, *,5 = 1,1, H-8); 13C NMR (125,7 MHz, DMSO-*): 61,61 (CH2-5'); 70,12 (CH-3’); 71,17 (CH-2'); 85,97 (CH-4’); 86,80 (CH-Γ); 107,70 (C-4a); 111,51 (CH-3-benzofuryl); 112,30 (CH-7-benzofuryl); 118,64 (CH-5); 123,00 (CH-4-benzofuryl); 124,43 (CH-5-benzofuryl); 125,00 (C-4b); 127,34 (CH-6-benzofuryl); 127,57 (C-3a-benzofuryl); 134,16 (C-8a); 136,38 (CH-8); 142,31 (CH-6); 149,79 (C-4); 153,49 (C-2-benzofuryl); 155,71 (C-7a-benzofuryl); 156,02 (CH-2); 157,07 (C-9a); HR-ESI-MS: nalezeno: 419,1350 (100, [M+H]+, vypočteno pro C22H19O5N44·: 419,1350).
In vitro protinádorová aktivita
K hodnocení protinádorové účinnosti nově připravených látek v in vitro podmínkách jsme použili cytotoxického MTS (M. Tichý, a kol. Cancer Res. 1988, 48, 4827-4833) na buněčných liniích, derivovaných z normálních tkání i nádorů. Konkrétně testy zahrnovaly linie K562 (lidská myeloidní leukémie), K562-Tax (lidská myeloidní leukémie rezistentní na taxol a overexprimující protein mnohočetné lékové rezistence PgP), CEM (T-lymfoblastická leukémie), CEM-DNR-bulk (T-lymfoblastická leukémie rezistentní na doxorubicin, postrádající expresi cílového genu pro inhibitory topoizomerázy II alfa), linie A549 (lidský adenokarcinom plic), HCT116p53 wt (lidská rakovina tlustého střeva, wild-type), HCT116p53-/-(lidská rakovina tlustého střeva, mutant p53) a U20S (lidský kostní osteosarkom). Expresní charakteristiky, profily vnímavosti na klasická protinádorová léčiva i metodologie cytotoxického MTS testu byly opakovaně publikovány (např. Nosková viz výše, Šarek J. et al., J, Med. Chem2003, 46, 54025415).
-31 CZ 308104 B6
Pokud testované látky vykázaly v in vitro cytotoxickém testu aktivitu (viz Tabulka 4), byla téměř vždy preferenční vůči širokému spektru nádorových linií různého histogenetického původu (mesenchymální i epiteliální nádory), s významně menší aktivitou vůči liniím normálních lidských fibroblastů (BJ a MRC-5) a tudíž dobrým in vitro terapeutickým indexem (15-2500). Cytotoxická aktivita vůči nádorovým buňkám nebyla závislá na statusu genu p53, jelikož podobné aktivity byly nalezeny jak u linií HCT116 (p53 wild type), tak u mutantní linie s deletováným genem HCT116 (p53 -/-).
Průmyslová využitelnost
Látky uvedené v tomto patentu jsou použitelné jako léčiva nebo složky léčiv proti rakovině a leukémiím.

Claims (10)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I
    -32CZ 308104 B6
    HQ QH (I), kde
    X je atom dusíku a potom Y je atom uhlíku, nebo X je atom uhlíku a potom Y je atom dusíku;
    R je zvolen ze skupiny zahrnující
    C1-C5 alkyl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
    C2-C6 alkenyl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
    C6-C12 aryl, volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny;
    C4-C12 heteroaryl, dále obsahující alespoň jeden heteroatom zvolený z O a S; volitelně substituovaný alespoň jedním substituentem vybraným z hydroxyskupiny, sulfanylu, aminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny, C1-C5 sulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(ClC5 alkyljaminoskupiny;
    aminoskupinu;
    C1-C5 alkylaminoskupinu;
    di(Cl-C5 alkyl)aminoskupinu;
    C1-C5 alkoxy skupinu;
    C1-C5 alkylsulfanyl;
    nebo farmaceuticky přijatelné soli takových sloučenin, jejich optické isomery či směsi takových optických isomerů, včetně racemických směsí.
  2. 2. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I podle nároku 1, kde Rje zvolen ze skupiny, sestávající z C1-C5 alkylu, fenylu, naftylu, furan-2-ylu, furan-3ylu, thiofen-2-ylu, thiofen-3-ylu, benzofuran-2-ylu, C1-C5 alkylsulfanylu, C1-C5 alkylaminoskupiny, di(Cl-C5 alkyljaminoskupiny, C1-C5 alkoxyskupiny a aminoskupiny.
  3. 3. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2, kde Rje zvolen ze skupiny, sestávající z thiofen-3-ylu, furan-2-ylu, furan-3-ylu, benzofuran-2-ylu, methylsulfanylu, methylu, methoxyskupiny, aminoskupiny, dimethylaminoskupiny.
  4. 4. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy obecného vzorce I podle nároku 1, kterými jsou:
    4-methyl-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin, 4-amino-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[2',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin, 4-(benzofuran-2-yl)-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin,
    -33 CZ 308104 B6
    4-methyl-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin, 4-amino-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrirnidin, 4-methoxy-9-(3-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin, 4-(methylsulfanyl)-9-(P-D-ribofuranosyl)-9H-pyrido[4',3':4,5]pyrrolo[2,3-d]pyrimidin.
  5. 5. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy podle nároků 1 až 4 pro použití jako léčiva.
  6. 6. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy podle nároků 1 až 4 pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo k léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění spojeného s buněčnou hyperproliferací.
  7. 7. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy podle nároků 1 až 4 pro použití k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících nádory epiteliálního, mesenchymálního i neuroektodermálního původu.
  8. 8. Substituované pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy podle nároků 1 až 4 pro výrobu léčiva k léčení nádorových onemocnění, zahrnujících nádory epiteliálního, mesenchymálního i neuroektodermálního původu.
  9. 9. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I podle nároků 1 až 4 a případně alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo a/nebo ředidlo.
  10. 10. Farmaceutický prostředek podle nároku 9 pro použití k inhibici patologické buněčné proliferace nádorového i nenádorového původu a/nebo k léčení nádorového nebo nenádorového onemocnění spojeného s buněčnou hyperproliferací.
CZ2018-121A 2018-03-12 2018-03-12 Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití CZ308104B6 (cs)

Priority Applications (9)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2018-121A CZ308104B6 (cs) 2018-03-12 2018-03-12 Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití
JP2020548736A JP6973761B2 (ja) 2018-03-12 2019-03-04 治療的使用のための置換ピリドピロロピリミジンリボヌクレオシド
US16/978,093 US11299510B2 (en) 2018-03-12 2019-03-04 Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses
ES19710587T ES2898344T3 (es) 2018-03-12 2019-03-04 Ribonucleósidos de piridopirrolopirimidina sustituidos para usos terapéuticos
EP19710587.7A EP3765475B1 (en) 2018-03-12 2019-03-04 Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses
AU2019235042A AU2019235042B2 (en) 2018-03-12 2019-03-04 Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses
PL19710587T PL3765475T3 (pl) 2018-03-12 2019-03-04 Podstawione rybonukleozydy pirydopirolopirymidynowe do zastosowań terapeutycznych
CA3090343A CA3090343C (en) 2018-03-12 2019-03-04 Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses
PCT/CZ2019/050008 WO2019174657A1 (en) 2018-03-12 2019-03-04 Substituted pyridopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic uses

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2018-121A CZ308104B6 (cs) 2018-03-12 2018-03-12 Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2018121A3 CZ2018121A3 (cs) 2019-09-25
CZ308104B6 true CZ308104B6 (cs) 2020-01-08

Family

ID=65763222

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2018-121A CZ308104B6 (cs) 2018-03-12 2018-03-12 Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití

Country Status (9)

Country Link
US (1) US11299510B2 (cs)
EP (1) EP3765475B1 (cs)
JP (1) JP6973761B2 (cs)
AU (1) AU2019235042B2 (cs)
CA (1) CA3090343C (cs)
CZ (1) CZ308104B6 (cs)
ES (1) ES2898344T3 (cs)
PL (1) PL3765475T3 (cs)
WO (1) WO2019174657A1 (cs)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2024166131A1 (en) * 2023-02-09 2024-08-15 Satyarx Pharma Innovations Private Limited Heteroaryl compounds as pkmyt1 inhibitors

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004035580A1 (en) * 2002-10-21 2004-04-29 Aprea Ab Reactivation of wild type p53 in human tumour cells by a low molecular weight compound
WO2005025515A2 (en) * 2003-09-12 2005-03-24 California Institute Of Technology Proteasome pathway inhibitors and related methods
WO2018024265A1 (en) * 2016-08-02 2018-02-08 Ustav Organicke Chemie A Biochemie Av Cr, V.V.I. Substituted heteropentadieno-pyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TR201815961T4 (tr) 2008-01-18 2018-11-21 Inst Of Organic Chemistry And Biochemistry Of The Academy Of Sciences Of The Czech Republic Yeni sitostatik 7-deazapürin nükleozidleri.
PL2421879T3 (pl) 2009-04-22 2014-02-28 Inst Of Organic Chemistry And Biochemistry As Cr V V I Nowe nukleozydy 7-deazapurynowe do zastosowań terapeutycznych
CA3029170C (en) * 2016-06-29 2021-02-16 Ustav Organicke Chemie A Biochemie Av Cr, V.V.I. Substituted thienopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use
CN113813231B (zh) 2016-07-01 2022-06-21 四川大学 抗菌肽衍生物在制备核酸载体中的用途及核酸载体

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2004035580A1 (en) * 2002-10-21 2004-04-29 Aprea Ab Reactivation of wild type p53 in human tumour cells by a low molecular weight compound
WO2005025515A2 (en) * 2003-09-12 2005-03-24 California Institute Of Technology Proteasome pathway inhibitors and related methods
WO2018024265A1 (en) * 2016-08-02 2018-02-08 Ustav Organicke Chemie A Biochemie Av Cr, V.V.I. Substituted heteropentadieno-pyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use

Also Published As

Publication number Publication date
EP3765475A1 (en) 2021-01-20
US20210002321A1 (en) 2021-01-07
US11299510B2 (en) 2022-04-12
AU2019235042A1 (en) 2020-09-10
CA3090343C (en) 2022-10-04
JP6973761B2 (ja) 2021-12-01
EP3765475B1 (en) 2021-09-15
ES2898344T3 (es) 2022-03-07
AU2019235042B2 (en) 2021-03-04
WO2019174657A1 (en) 2019-09-19
CZ2018121A3 (cs) 2019-09-25
PL3765475T3 (pl) 2022-01-31
JP2021516687A (ja) 2021-07-08
CA3090343A1 (en) 2019-09-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3724190A1 (en) Substituted bicyclic heterocyclic compounds as prmt5 inhibitors
CN111393404B (zh) 一类苯并噻吩类化合物及其药物组合物及应用
KR102274755B1 (ko) Ｐｅｒｋ 저해제로서의 신규한 ｎ―（２，３―디히드로―１ｈ―피롤로［２，３―ｂ］피리딘―５―일）―４―퀴나졸린아민 및 ｎ―（２，３―디히드로―１ｈ―인돌―５―일）―４―퀴나졸린아민 유도체
CZ308104B6 (cs) Pyridinopyrrolopyrimidinové ribonukleosidy pro terapeutické použití
CN111393405B (zh) 一类含氟取代的苯并噻吩类化合物及其药物组合物及应用
CN111514144A (zh) 具抑制细菌葡萄糖醛酸酶活性的吡唑并[4，3-c]喹啉衍生物
US10730905B2 (en) Substituted heteropentadieno-pyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use
US10414788B2 (en) Substituted thienopyrrolopyrimidine ribonucleosides for therapeutic use
US9586986B2 (en) Substituted 7-deazapurine ribonucleosides for therapeutic uses
CZ2013845A3 (cs) Substituované 7-deazapurinové ribonukleosidy pro terapeutické použití
CN116891462A (zh) 一种山荷叶素衍生物及其制备方法和应用
Tichý Synthesis of novel types of annulated deazapurine nucleosides with potential biological activity
OA19533A (en) Substituted bicyclic heterocyclic compounds as PRMT5 inhibitors.
AU2014277740B1 (en) Novel substituted 7-deazapurine ribonucleosides for therapeutic uses