CZ291249B6 - Způsob výroby dihydroxyacetonu - Google Patents
Způsob výroby dihydroxyacetonu Download PDFInfo
- Publication number
- CZ291249B6 CZ291249B6 CZ19971009A CZ100997A CZ291249B6 CZ 291249 B6 CZ291249 B6 CZ 291249B6 CZ 19971009 A CZ19971009 A CZ 19971009A CZ 100997 A CZ100997 A CZ 100997A CZ 291249 B6 CZ291249 B6 CZ 291249B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- dihydroxyacetone
- electrodialysis
- solution
- dihydroxy acetone
- crystallization
- Prior art date
Links
- RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N dihydroxyacetone Chemical compound OCC(=O)CO RXKJFZQQPQGTFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 80
- 229940120503 dihydroxyacetone Drugs 0.000 title claims abstract description 40
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 claims abstract description 11
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 241000589232 Gluconobacter oxydans Species 0.000 claims abstract description 3
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 claims abstract description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 9
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 abstract description 29
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 abstract description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 11
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 5
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 5
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 5
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 description 4
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000003011 anion exchange membrane Substances 0.000 description 2
- AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L barium carbonate Chemical compound [Ba+2].[O-]C([O-])=O AYJRCSIUFZENHW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 2
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000002242 deionisation method Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000589236 Gluconobacter Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002327 cardiovascular agent Substances 0.000 description 1
- 229940125692 cardiovascular agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003518 caustics Substances 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Dihydroxyaceton se vyr b tak, e se vodn² roztok glycerinu podrob biologick oxidaci bu kami Gluconobacter oxydans, po skon en biokonverzi se odd l bu ky mikroorganismu a z skan² roztok obsahuj c dihydroxyaceton se odsol pomoc elektrodial²zy. Odsolen lze prov d t jak samotnou elektrodial²zou nebo lze s v²hodou elektrodial²zu kombinovat s pou it m m ni iont , zejm na siln kysel ho katexu v H.sup.+.n. cyklu.\
Description
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu výroby dihydroxyacetonu.
Dosavadní stav techniky
Dihydroxyaceton se nejčastěji vyrábí biotransformací (biologickou oxidací) glycerinu pomocí mikrobiálních buněk Gluconobacter oxydans. Přitom se postupuje tak, že se v médiu obsahujícím glycerin a další látky potřebné pro růst mikroorganismů napěstuje dostatečné množství buněk mikroorganismu, které obsahují enzymy katalyzující selektivní biologickou oxidaci glycerinu. Po skončení biotransformace se získá vodný roztok dihydroxyacetonu, který vedle žádané látky obsahuje zbytky dalších složek média, jako jsou soli, aminokyseliny, bílkoviny apod. Tyto látky brání krystalizaci a znečišťují produkt. Je proto třeba je z média odstranit. Nejstarší postupy jejich odstranění byly založeny na opakované extrakci nebo srážení dihydroxyacetonu organickými rozpouštědly.
První použitelný způsob izolace dihydroxyacetonu byl vypracován Neubergem a Hofmannem [Biochem. Z. 279, 318, (1935)]. Filtrát po separaci mikrobiálních buněk byl odpařen za sníženého tlaku na sirup. Ten byl extrahován ethanolem, zfiltrovaný extrakt byl znovu odpařen, sirupovitý zbytek extrahován acetonem a extrakt odpařen na sirup, který při stání v exikátoru ztuhl na krystalický produkt. S určitými modifikacemi byl postup využíván ještě v 50. letech. Zlepšení přineslo použití acetonu k extrakci již v prvním stupni resp. krystalizace surového dihydroxyacetonu z ethanolu při sníženém pH a poměrně nízké teplotě [E. D. Jermolajev, Pat. SSSR 694 533, (1979)]. V poslední době byl k izolaci dihydroxyacetonu úspěšně použit ízopropanol [M. Kawabe, jap. pat. (Japan Kokai Tokkyo Koho) 01, 203, 349 (89, 203, 349), (1989)].
Všechny zmíněné postupy byly velmi pracné a výsledek krystalizace byl nejistý, protože produkt mohl stále ještě obsahovat nečistoty bránící krystalizaci dihydroxyacetonu. Proto bylo se střídavými úspěchy zkoušeno jejich odstranění sorpcí na aktivním uhlí, bentonitu, popř. jejich vysrážení polyakrylamidem [V. A. Janson, Masložimaja promyšlenosť, 1978, (3), 41; Chem. Abstr., 88, 30 578, (1978)]. Jako vhodné sorbenty pro odstranění nežádoucích příměsí se ukázaly měniče iontů, na nichž bylo možné roztok surového dihydroxyacetonu současně odsolit i zbavit aminokyselin a dalších ionizovatelných látek bránících krystalizaci nebo zbarvujících produkt. Postup deionizace fermentačního média obsahujícího surový dihydroxyaceton na měničích iontů byl poprvé popsán českými autory [J. Liebster a kol., Chem. listy, 50, 395, (1956)]. Po průchodu média kolonami se silně kyselým katexem a slabě bazickým anexem byl získán roztok, který byl zahuštěn na sirup, z něhož po přidání methanolu vykrystaloval dihydroxyaceton. Podle podobného postupu se místo středně bazického anexu používá silně bazický anex vcitrátovém cyklu [N. V. Pomorceva kol., pat. SSSR 427 050, (1974)]. Deionizaci v tomto případě předchází snížení kyselosti směsi rozmícháním s uhličitanem bamatým. Využití ionexů přineslo zjednodušení postupu izolace dihydroxyacetonu. Vzhledem k limitované kapacitě ionexů je však v průmyslovém měřítku třeba pracovat s velkými kolonami naplněnými desítkami a stovkami kg ionexů, což přináší vysoké náklady výroby. Odsolení je poměrně zdlouhavé a ionexy je třeba pracně regenerovat poměrně koncentrovanými a tedy i silně žíravými roztoky kyselin a zásad, což má nepříznivé dopady na bezpečnost práce a životní prostředí.
Podstata vynálezu
Tyto a některé další nevýhody použití ionexů v kolonách k odsolení dihydroxyacetonu odstraňuje postup podle vynálezu, který je založen na využití principu elektrodialýzy. Zařízení pro elektrodialýzu je tvořeno vanou s elektrodami. Prostor mezi elektrodami je oddělen několika membránami s iontoměničovými vlastnostmi - střídavě anexovou a katexovou membránou, přičemž blíže k anodě je vždy anexová a ke katodě katexová membrána. Do prostorů mezi katexovou a anexovou membránou je zaveden zasolený roztok dihydroxyacetonu. Po zapnutí 10 proudu putují kationty přes katexovou membránu směrem ke katodě, anionty směrem k anodě. Pokud se jim postaví do cesty membrána se stejným nábojem (kationtům anexová a aniontům katexová membrána), jejich pohyb se tím zastaví. Při vhodné konstrukci zařízení se tak v určitém prostoru hromadí soli, zatímco v ostatních prostorách odsolený roztok. Princip elektrodialyzéru a procesu elektrodialýzy je schematicky znázorněn na obrázku 1.
Využití elektrodialýzy umožňuje rychlé, jednoduché a spolehlivé odsolení fermentačních médií obsahujících surový dihydroxyaceton. Efekt je podobný jako při použití iontoměničů v kolonách, odpadá však spotřeba velkého množství regeneračních roztoků a proces odsolení se významně zrychluje. Při elektrodialýze probíhá odsolení až do rovnovážného stavu. Chceme-li dosáhnout 20 dokonalého odsolení je třeba tuto rovnováhu porušovat, což může být spojeno s určitými ztrátami. Zrychlení a zlepšení výsledku odsolení lze proto dosáhnout při kombinaci elektrodialýzy s použitím ionexů v kolonách. V tomto případě se výchozí roztok rychle částečně odsolí na určitou předem experimentálně určenou hodnotu solnosti a pak aplikuje na soustavu malých kolon s katexem a anexem. Ze soustavy kolon pak vytéká dokonale odsolený roztok dihydroxy25 acetonu. K regeneraci malých kolon je třeba relativně malé množství regeneračních roztoků.
Zkoušky kombinovaného postupu přitom ukázaly, že k tomu, aby byl částečně odsolený roztok zbaven všech látek narušujících krystalizaci a/nebo ovlivňujících čistotu finálního produktu, není třeba použít kombinace katexu a anexu, ale stačí, aby byl roztok rezultující po neúplné elektro30 dialýze prolit pouze přes kolonu se silně kyselým katexem, která odstraní všechny zbytkové kationoidní látky.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Po ukončení laboratorní fermentace, kde proběhla biokonverze 10% glycerinu na dihydroxy40 aceton pomocí buněk mikroorganismu Gluconobacter oxidans, byla z roztoku o objemu 101 odstředěna biomasa na laboratorní kyvetové odstředivce. Do supematantu obsahujícího dihydroxyaceton bylo přidáno 6,2 g aktivního uhlí, roztok byl míchán po dobu 2 hodin a zfiltrován pomocí vakua přes filtrační papír. Následovala ultrafiltrace přes membránu s limitní propustností (cut off') 10 000 daltonů. Ultrafiltrovaný roztok byl postupně rozdělen na dvě části a každá 45 odsolena pomocí laboratorního elektrodialyzéru ED-0 Mega Stráž pod Ralskem. Konečná vodivost roztoku po odsolení činila 0,01 mS/cm. Doba odsolení každého podílu byla asi 3,5 hodiny. Roztok byl dále zahuštěn na laboratorní vakuové odparce. Po kiystalizaci v prostředí ethanolu byly vzniklé krystaly dihydroxyacetonu odseparovány a vysušeny. Byl získán čistý bílý dihydroxyaceton s obsahem účinné látky 99,2 %. Výtěžek krystalizace činil 66,7 % vztaženo na 50 obsah dihydroxyacetonu v zahušťovaném roztoku.
-2CZ 291249 B6
Příklad 2
Roztok dihydroxyacetonu získaný po biokonverzi glycerinu byl zpracován stejně jako v příkladu 1, s tím rozdílem, že odsolení bylo prováděno tak, aby konečná vodivost činila 0,1 mS/cm (2 hodiny pro každý podíl po 5 1). Oba podíly byly spojeny a odsoleny na iontoměničové koloně naplněné 400 g katexu Ostion KS v H+ cyklu. Vodivost roztoku po průchodu kolonou byla 0,012 mS/cm. Roztok byl dále zahuštěn na laboratorní vakuové odparce. Po krystalizaci v prostředí ethanolu byly vzniklé krystaly dihydroxyacetonu odseparovány a vysušeny. >
Byl získán čistý bílý dihydroxyaceton s obsahem účinné látky 99,3 %. Výtěžek krystalizace činil
66,4 % vztaženo na obsah dihydroxyacetonu v zahušťovaném roztoku.
Příklad 3
Po ukončení provozní fermentace, kde proběhla biokonverze glycerinu na dihydroxyaceton, byla z roztoku o objemu 6220 1 odstředěna biomasa. Roztok byl míchán s aktivním uhlím (poměr aktivního uhlí k celkovému objemu roztoku dihydroxyacetonu byl shodný s příklady 1 a 2), zfiltrován a následně ultrafiltrován. Roztok byl odsolen v dávkách 4 x 1555 1 pomocí provozního elektrodialyzéru ED-II Mega Stráž pod Ralskem na vodivost 0,09 mS/cm. Doba odsolení každého podílu vodného roztoku dihydroxyacetonu činila 9 hodin. Pak byly odsolené roztoky postupně prolity iontoměničovou kolonou s 270 kg katexu Ostion KS v H+ cyklu. Vodivost roztoku po průchodu kolonou byla 0,03 mS/cm. Následovalo zahuštění na vakuové odparce na sirup. Po krystalizaci v prostředí ethanolu byly vzniklé krystaly dihydroxyacetonu odseparovány na rotační bubnové odstředivce a vysušeny ve vakuové sušárně.
Získaný čistý bílý dihydroxyaceton obsahoval 99,2 % účinné látky. Výtěžek krystalizace činil
65,8 % vztaženo na obsah dihydroxyacetonu v zahušťovaném roztoku.
Průmyslová využitelnost
Dihydroxyaceton se široce používá v kosmetickém průmyslu k přípravě samoopalovacích krémů. Mechanismus účinku spočívá v reakci monomemího dihydroxyacetonu s aminokyselinami a volnými aminoskupinami bílkovin v pokožce za vzniku hnědě zbarvených produktů. Při použití kosmetických formulací obsahujících 2 až 5 % dihydroxyacetonu dochází ke stálému zhnědnutí pokožky po cca 2 hodinách. Vzniklé zbarvení je stejně stálé jako opálení na slunci.
Další využití má dihydroxyaceton např. jako antioxidační přísada v kosmetickém a potravinářském průmyslu. Díky své vysoké reaktivitě je dihydroxyaceton důležitým meziproduktem pro řadu chemických syntéz zejména při výrobě léčiv (kardiovaskulární léky, cytostatika, rtg kontrastní látky).
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (3)
1. Způsob výroby dihydroxyacetonu biologickou oxidací glycerinu buňkami Gluconobacter oxydans, vyznačený tím, že při izolaci produktu z média po oddělení buněk se roztok obsahující dihydroxyaceton odsolí pomocí elektrodialýzy.
-3 CZ 291249 B6
2. Způsob podle nároku 1, vyznačený tím, že se při odsolení roztoku obsahujícího dihydroxyaceton kombinuje elektrodialýza s použitím měničů iontů.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačený tím, že se jako měnič iontů použije silně kyselý 5 katex v FT cyklu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ19971009A CZ291249B6 (cs) | 1997-04-03 | 1997-04-03 | Způsob výroby dihydroxyacetonu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ19971009A CZ291249B6 (cs) | 1997-04-03 | 1997-04-03 | Způsob výroby dihydroxyacetonu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ100997A3 CZ100997A3 (cs) | 1998-10-14 |
| CZ291249B6 true CZ291249B6 (cs) | 2003-01-15 |
Family
ID=5462609
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19971009A CZ291249B6 (cs) | 1997-04-03 | 1997-04-03 | Způsob výroby dihydroxyacetonu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ291249B6 (cs) |
-
1997
- 1997-04-03 CZ CZ19971009A patent/CZ291249B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ100997A3 (cs) | 1998-10-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5338420A (en) | Process for preparing high α-glycosyl-L-ascorbic acid, and separation system for the process | |
| ES2933616T3 (es) | Separación de 2'-FL de un caldo de fermentación | |
| EP2896628B1 (en) | Process for efficient purification of neutral human milk oligosaccharides (HMOs) from microbial fermentation | |
| Hábová et al. | Electrodialysis as a useful technique for lactic acid separation from a model solution and a fermentation broth | |
| EP3154995B1 (en) | Separation of 2'-o-fucosyllactose from fermentation broth | |
| US9926578B2 (en) | Process for manufacturing butanediol | |
| KR20180065784A (ko) | 재순환을 이용한 사이코스의 제조방법 및 장치 | |
| EP3821717A1 (en) | A method for drying human milk oligosaccharides | |
| KR100828706B1 (ko) | 결정화 공정을 이용한 5'-이노신산 발효액의 정제방법 | |
| US20220324786A1 (en) | Methods for recovering organic acids or salts or lactones thereof from aqueous solutions using water solvent crystallization and compositions thereof | |
| US20040262161A1 (en) | Method for the isolation of salts of organic acids from a fermentation broth and for releasing the organic acid | |
| WO2025045720A1 (en) | Process for manufacturing a powder blend of oligosaccharides | |
| EP0458389A1 (en) | Method for separating organic substances | |
| CZ291249B6 (cs) | Způsob výroby dihydroxyacetonu | |
| CN115260007B (zh) | 一种从发酵液中提取3,4-二羟基苯乙醇的方法 | |
| WO2023117673A1 (en) | CRYSTALLIZATION OF LNnT | |
| Habova et al. | Application of electrodialysis for lactic acid recovery | |
| CN106883286B (zh) | 一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法 | |
| EP0674717A1 (en) | METHOD OF PRODUCING $g(a),$g(a)-TREHALOSE | |
| RU2658426C1 (ru) | Способ получения никотинамидадениндинуклеотида (над) | |
| EP4357331A1 (en) | Method for obtaining desired compound from fermentation broth | |
| RU2191828C2 (ru) | Способ получения лимонной кислоты из растворов щелочных цитратов | |
| CZ290334B6 (cs) | Způsob přípravy a výroby dihydroxyacetonu | |
| CZ281152B6 (cs) | Spđsob úpravy polyetylénglykolu pre kapilárne elektroforetické techniky |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20040403 |