CZ279897A3 - Varianty Subtilisinu DY se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy - Google Patents

Varianty Subtilisinu DY se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy Download PDF

Info

Publication number
CZ279897A3
CZ279897A3 CZ972798A CZ279897A CZ279897A3 CZ 279897 A3 CZ279897 A3 CZ 279897A3 CZ 972798 A CZ972798 A CZ 972798A CZ 279897 A CZ279897 A CZ 279897A CZ 279897 A3 CZ279897 A3 CZ 279897A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino acid
substitution occurs
ser
gln
asn
Prior art date
Application number
CZ972798A
Other languages
English (en)
Inventor
Philip Frederick Brode
Bobby Lee Barnett
Donn Nelton Rubingh
Original Assignee
The Procter & Gamble Company
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by The Procter & Gamble Company filed Critical The Procter & Gamble Company
Publication of CZ279897A3 publication Critical patent/CZ279897A3/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L12/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising contact lenses; Accessories therefor
    • A61L12/08—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising contact lenses; Accessories therefor using chemical substances
    • A61L12/12—Non-macromolecular oxygen-containing compounds, e.g. hydrogen peroxide or ozone
    • A61L12/124—Hydrogen peroxide; Peroxy compounds
    • A61L12/126—Hydrogen peroxide; Peroxy compounds neutralised with catalase or peroxidase
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0069—Laundry bars
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0073—Tablets
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D17/00—Detergent materials or soaps characterised by their shape or physical properties
    • C11D17/0047—Detergents in the form of bars or tablets
    • C11D17/0065—Solid detergents containing builders
    • C11D17/0073—Tablets
    • C11D17/0078—Multilayered tablets
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
    • C11D3/0052—Gas evolving or heat producing compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/0005—Other compounding ingredients characterised by their effect
    • C11D3/0078—Compositions for cleaning contact lenses, spectacles or lenses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Varianty Subtilisinu DY se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových enzymových variant použitelných v různých druzích čisticích prostředků a dále se týká sekvencí DNA, které takové enzymové varianty kódují.
Dosavadní stav techniky
Enzymy tvoří největší třídu přirozeně se vyskytujících proteinů- Každý druh enzymu obyčejně katalyžuje (urychluje reakci, aniž by byl spotřebován) odlišný druh chemické reakce- Jedna třída enzymů nazývaných proteázy je známa svou schopností hydrolyzovat jiné proteiny (rozložit sloučeninu do dvou nebo více jednodušších sloučenin s tím, že přijme části H a OH z molekuly vody na každé straně štěpené chemické vazby)- Tato schopnost hydrolyzovat proteiny byla využita tak, že přirozeně se vyskytující a proteiny ovlivňující proteázy byly zahrnuty jako přísada do detergentních prostředků na praní prádla. Mnohé nečistoty na šatech jsou proteinové povahy a proteázy se širokou specifičností mohou podstatně zlepšit odstranění těchto nečistot.
Bohužel úroveň účinnosti těchto proteinů v jejich přirozeném bakteriálním prostředí často neodpovídá účinnosti v relativně nepřirozeném prostředí při praní. Přesněji, vlastnosti proteáz jako jsou tepelná stabilita.
pH stabilita, oxidační stabilita a substrátová specifičnost nejsou nevyhnutelně co nejlépe rozvinuty při použití mimo přirozené prostředí enzymu.
Vlastnosti proteázy určuje její aminokyselinová sekvence. Změna aminokyselinové sekvence proteázy může do různého stupně pozměnit, vlastnosti enzymu nebo může dokonce inaktivovat enzym, což závisí na poloze, povaze a/nebo velikosti změny v aminokyselinové sekvenci- Pří pokusu zlepšit vlastnosti proteáz s cílem zvýšit jejich účinnost v pracím prostředí byly použity různé přístupy ke změně aminokyselinové sekvence proteáz divokého typu. Tyto přístupy zahrnují takovou změnu aminokyselinové sekvence, aby se zvýšila tepelná stabilita a zlepšila oxidační stabilita za zcela odlišných podmínek.
Navzdory rozmanitosti přístupů v oboru popsaných trvá potřeba nových účinných variant proteáz použitelných k čištění různých druhů povrchů.
Předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout varianty enzymu Subtilisínu DY, které ve srovnání s divokým typem enzymu zvýšeně hydrolyzují.
Předmětem předkládaného vynálezu je poskytnout také čisticí prostředky, které obsahují tyto varianty enzymu subti1isinu.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká variant Subtilisínu DY.
• · · které mají změněnou sekvenci aminokyselin proti aminokyselinové sekvenci Subtílisinu DY divokého typu, aminokyselinová sekvence divokého typu zahrnuje oblast první smyčky, oblast druhé smyčky, oblast třetí smyčky, oblast Čtvrté smyčky a oblast páté smyčky, kde změněná sekvence aminokyselin obsahuje jiné aminokyseliny, než které se vyskytují v divokém typu Subtílisinu DY (t j . substituce) ve specificky identifikovaných polohách v jedné nebo více oblastech smyček, čímž má varianta Subtílisinu DY sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyzuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem Subtílisinu DY. Předkládaný vynález se také týká sekvencí DNA, které kódují tyto varianty Subtílisinu DY. Předkládaný vynález se také týká prostředků pro čištění různých druhů povrchů, které obsahují tyto varianty Subtílisinu DYI. Varianty Subtílisinu DY
Tento vynález se týká enzymů subtilisinfl, zejména
Subtílisinu DY, které byly modifikovány změnou různých nukleotidových sekvencí kódujících enzym, a tím se měnila aminokyselinová sekvence enzymu. Modifikované enzymy subtilisiny (dále jen varianty Subtilisinu DY) předkládaného vynálezu mají sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyzují nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem subtilisinu. Předkládaný vynález se také týká sekvencí DNA kódujících takové varianty Subtílisinu DY.
Enzymy subtilisiny předkládaného vynálezu patří do třídy enzymů známých jako proteázy. Proteáza je katalyzátor štěpení peptidových vazeb. Jeden typ proteázy je serinová • · • · · ·
proteáza. Serinová proteáza se vyznačuje tím, že v aktivním místě je esenciální serinové reziduumPozorování, že se rychlost enzymové hydrolýzy rozpustných substrátů zvyšuje s koncentrací enzymu, je dobře doloženo- Proto by se zdálo možné, že pro povrchově vázané substráty, na jaké se naráží při mnoha způsobech čištění, se rychlost hydrolýzy bude zvyšovat se zvyšující povrchovou koncentrací- Což se prokázal být tento případ- (Brode, P.F. III a D-S- Rauch, LANGMUIR, Subtilisin BPN*: Activity on an Immobílized Substráte, Vol- 8, ss. 1325-1329 (1992)).
Vlastně byla pro nerozpustné substráty nalezena lineární závislost rychlosti na povrchové koncentraci při měnící se povrchové koncentraci enzymu. (Rubingh, D.N. a M-D. Bauer, “Catalysis of Hydrolysis by Proteases at the
Protein-Solution Interface, v POLYMER SOLUTIONS, BLENDS AND
INTERFACES, ed- I- Noda a D.N. Rubingh, Elsevier, s. 464 (1992))- Je překvapivé, že jsme nezjistili při snaze použít tuto základní myšlenku při hledání variant proteáz, které mají lepší čisticí výkon, že enzymy, které se více adsorbují, jsou výkonnější- Ve skutečnosti jsme překvapivě zjistili, že opak je pravdou: snížená adsorpce enzymu k substrátu vedla ke zvýšené hydrolýze substrátu (tj. lepší čisticí výkon).
Bez ohledu na teorii se má za to, že zvýšený výkon při srovnání jedné varianty s druhou, je výsledek faktu, že enzymy, které méně adsorbují, jsou také méně těsně vázány, a proto jsou mnohem více pohyblivé na povrchu, ze kterého má být odstraněn nerozpustný proteinový substrát.
Při srovnatelných koncentracích enzymu v roztoku je tato zvýšená mobilita dostatečná k tomu. aby převážila jakoukoli výhodu, které se dosáhne dodáním vyšší koncentrace enzymu k povrchu.
Mutace popsané v tomto textu jsou určeny k tomu. aby změnily (tj- snížily) adsorpci enzymu k povrchově vázaným nečistotám- V Subtilisinu DY tvoří určité aminokyseliny vnější smyčky enzymové molekuly. V diskusi budou tyto smyčky zmiňovány jako oblasti první, druhé, třetí, čtvrté a páté smyčky- Přesněji. polohy aminokyselin 58-65 tvoří oblast první smyčky, polohy 94-106 tvoří oblast druhé smyčky, polohy 125-132 tvoří oblast třetí smyčky, polohy 153-166 tvoří oblast čtvrté smyčky, polohy 186-190 tvoří oblast páté smyčky a polohy 199-219 tvoří oblast šesté smyčky (polohy jsou číslované analogicky k polohám v aminokyselinové sekvenci pro divoký typ subtilisinu Subtilisinu DY (sekvence identifikačního čísla 1)).
Má se za to, že tyto oblasti smyček hrají významnou roli v adsorpci molekuly enzymu k povrchově vázanému peptidu a specifické mutace v jedné nebo více těchto smyčkových oblastech mají významný efekt na tuto adsorpci- Bez ohledu na teorii se má za to, že smyčkové oblasti jsou pro adsorpci molekuly Subtilisinu DY důležité přinejmenším ze dvou důvodů. Za prvé, aminokyseliny. které jsou obsaženy v oblastech smyček, mohou vytvářet těsnější kontakty s každým povrchem, kterému je molekula vystavena. Za druhé, blízkost oblastí smyček k aktivnímu místu a vazebnému místu (kapse) molekuly Subtilisinu DY dává smyčkám roli v katalyticky produktivní adsorpci enzymu k povrchově • · · · vázaným substrátům (peptidové/proteinové nečistoty).
Termín varianta, lak se používá v tomto textu, znamená enzym, jehož sekvence aminokyselin se liší od sekvence divokého typu.
Termín mutovaná DNA Subtilisinu DY , jak se používá v tomto textu, znamená sekvenci DNA kódující variantu
Subtilisinu DY.
Termín divoký typ Subtilisinu DY”, jak se používá v tomto textu, se vztahuje na enzym znázorněný sekvencí identifikačního čísla 1. Aminokyselinová sekvence Subtilisinu DY je dále popsána autory Nedkov, Ρ. , Oberthur, W. a Braunitzer, G. , BIOL. CHEM., díl 366, ss. 421-430, (1985), zahrnuto v odkazech.
Termín aminokyselinová sekvence divokého typu
Subtilisinu DY, jak se používá v tomto textu, zahrnuje sekvenci identifikačního čísla 1 a také sekvenci identifikačního čísla 1 mající modifikace aminokyselinové
' některé z těchto poloh 58, 59, 60 , 61,
i, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103,
126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 153,
158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165,
189, 190, 199, 200, 201, 202, 203, 204,
209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216,
217, 218 nebo 219.
Termín hydrofilnější aminokyselina, jak se používá v tomto textu, se vztahuje na jakoukoli jinou aminokyselinu, která má vyšší hydrofilnost než předmětná aminokyselina, s odkazem na tabulku hydrofilnosti níže. Následující tabulka ···· hydrof11nosti (Tabulka 1) uvádí aminokyseliny v sestupném poradí zvyšující se hydrofilnosti (viz Hopp. T.P. a Voods,
K-R. , Prediction of Protein Antigenie Determinants from
Amino Acid Sequences”. PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY
OF SCIENCE USA, díl 78, ss. 3824-3828, 1981, zahrnuto v odkazech).
Tabulka 1
Aminokyselina Hodnota hydrof i 1nost i
Trp -3,4
Phe -2,5
Tyr -2,3
Leu, Ile -1,8
Val -1,5
Met -1.3
Cys -1,0
Ala, His -0.5
Thr -0,4
Pro, Gly -0,0
Gin, Asn 0,2
Ser 0,3
Arg*, Lys', Glu-, Asp- 3,0
Tabulka 1 také ukazuje, které aminokyseliny nesou náboj (tato vlastnost se vztahuje k pH 8 až 9). Pozitivně nabité aminokyseliny jsou Arg a Lys, negativně nabité aminokyseliny jsou Glu a Asp a zbývající aminokyseliny jsou neutrální. Ve ·· ···· výhodném provedení předkládaného vynálezu je substituující aminokyselina buď neutrální nebo negativně nabita, výhodněji negativně nabita (tj. Glu nebo Asp).
Proto, například, prohlášení substituovat Gin stejně nebo více hydrofilní aminokyselinou, která je neutrální nebo má negativní náboj“ znamená, že Gin by byl nahrazen Asn . (který je stejně hydrofilní jako Gin) nebo Ser, Glu nebo Asp (které jsou hydrofilnější než Gin), každá z nich je neutrální nebo má negativní náboj a má větší hodnotu hydrofilnosti ve srovnání s Gin. Podobně prohlášení substituovat Pro hydrofilnější aminokyselinou, která je neutrální nebo má negativní náboj znamená, že Pro by byl nahražen Gin, Asn, Ser, Glu nebo Asp.
V jednom provedení předkládaného vynálezu má varianta
Subtilisinu DY modifikovanou aminokyselinovou sekvenci proti sekvenci aminokyselin divokého typu Subtilisinu DY, kde aminokyselinová sekvence divokého typu obsahuje substituci v jedné nebo více polohách v jedné nebo více oblastech smyček, první, druhé, třetí, čtvrté, páté nebo šesté, čímž má varianta Subtilisinu DY sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyzuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem
Subtilisinu DY.
Ve výhodném provedení předkládaného vynálezu aminokyselina substituující jednu nebo více poloh v jedné nebo více oblastech smyček je, s odkazem na Tabulku 1, nebo negativně nabitá a stejně nebo více výhodně hydrofilnější, neutrální hydrof i lni, než am i nokyselína v příslušné poloze v aminokyselinové sekvenci divokého typu.
·· ····
A. Substituce v oblasti první smyčky
Když substituce nastane v oblasti první smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 58, 59, 60, 61, 62, 64 nebo 65.
Když substituce nastane v poloze 58, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 59, substituující aminokyselina je Glu.
Když substituce nastane v poloze 60, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu. Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 61, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 62, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 64, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 65, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
B- Substituce v oblasti druhé smyčky
Když substituce nastane v oblasti druhé smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 94, 95, 96,
97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105 nebo 106.
Když substituce nastane v poloze 94, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Met, Pro, Ser nebo ThrKdyž substituce nastane v poloze 95, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 96, substituující aminokyselina je ftsp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 97, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 98, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 99, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 100, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 101, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 102, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 103, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 104, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 105, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
Thr.
Když substituce nastane v poloze 106, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
C. Substituce v oblasti třetí smyčky
Když substituce nastane v oblastí třetí smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 125, 126, 127, ·· ····
128, 129, 130, 131 nebo 132.
Když substituce nastane v poloze 125, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 126, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 127, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 128, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 129, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 130, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 131, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 132, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
D. Substituce v oblasti čtvrté smyčky
Když substituce nastane v oblasti čtvrté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 153, 154, 155,
156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165 nebo 166.
Když substituce nastane v poloze 153, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 154, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 155, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
·· ···· • ·
Když substituce nastane v poloze 156, substituující
aminokyselina ie Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 157, substituující
aminokyselina ie Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 158, substituující
aminokyselina ie ftsp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 159, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 160, subst i tuu jící
aminokyselina ie Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 161, substituuj ící
aminokyselina je Asn, Asp, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 162, substituuj ící
aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebe i Šer-
Když substituce nastane v po 1 oze 163, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu i. Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 164, substituující
aminokyselina ie Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Leu, Met, Pro, Ser. Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 165, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu i, Pro nebo Šer-
Když substituce nastane v po loze 166, substituující
aminokyselina ie Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
E- Substituce v oblasti páté smyčky
Když substituce nastane v oblasti páté smyčky, substituce nastane v iedné nebo více z poloh 186, 187, 188,
189 nebo 190.
• · ···1 Β · 1 » · · « · · ·
Když substituce nastane v poloze 186, substituující aminokyselina je flsn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
Thr.
Když substituce nastane v poloze 187, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 188, substituující aminokyselina je Ala, Asn. Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Tyr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 189, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 190, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
F. Substituce v oblasti šesté smyčky
Když substituce nastane v oblasti šesté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213,
214, 215, 216, 217, 218 nebo 219.
Když substituce nastane v poloze 199, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
Thr.
Když substituce nastane v poloze 200, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 201, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 202, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Met, Pro, Ser nebo Thr.
Když substituce nastane v poloze 203, substituující
aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 204, substituující
aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Met, Pro, Ser nebo Thr-
Když substituce nastane v poloze 205, substituující
aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu. Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 206, substituující
arainokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 207, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 208, substituující
aminokyselina je Ala, , Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Phe, Pro, Ser, Thr nebo Val
Když substituce nastane v poloze 209, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser.
Když substituce nastane v po1oze 210, substituující
aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v po1oze 211, substituující
aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane V poloze 212, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v po1oze 213, substituující
aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val .
Když substituce nastane v poloze 214, substituující
aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser.
·· ··« » · ► · « • · · ·
Když substituce nastane v poloze 215, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu.
Když substituce nastane v poloze 216, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val.
Když substituce nastane v poloze 217, substituující aminokyselina je Asp, Gin, Glu nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 218, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser.
Když substituce nastane v poloze 219, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Sérii. Čisticí prostředky
V dalším provedení předkládaného vynálezu je účinné množství jedné nebo více enzymových variant zahrnuto do prostředků k čištění různých druhů povrchů při potřebě odstranit nečistoty bílkovinné povahy. Takové čisticí prostředky zahrnují detergentní prostředky na čištění pevných povrchů, neomezené formou (tj. tekuté a práškové), detergentní prostředky pro čištění prostředky, neomezené formou (tj.
a prostředky v pevné formě, např. kostkách), prostředky na mytí nádobí (neomezené formou), prostředky na čištění ústní dutiny, neomezené formou (tj. prostředek na čištění zubů, zubní pasta a ústní voda), prostředky na čištění umělého chrupu, neomezené formou (tj. tekuté, tablety) a prostředky na čištění kontaktních čoček, neomezené formou (tj. tekuté, tablety).
tkanin - prací práškové, tekuté
Čisticí prostředky také obsahují, kromě variant
·· <
<
• ·
Subtílisinu DY popsaných výše, jeden nebo více materiálů čisticích prostředků, které jsou kompatibilní s enzymem proteázou. Termín “materiál čisticího prostředku, jak se v tomto textu užívá, znamená jakýkoliv tekutý, pevný nebo plynný materiál vybraný pro konkrétní typ požadovaného čisticího prostředku a formu produktu (např. tekutina, prášek, kostka, sprej, tyčinka, pasta, gel), a tyto materiály jsou také kompatibilní s variantou Subtílisinu DY použitou v prostředku. Specifický výběr materiálů čisticího prostředku se snadno učiní tak, že se vezme do úvahy materiál povrchu, který má být čištěn, a požadovaná forma prostředku pro podmínky během použití (např. během použití mycího detergentu). Termín “kompatibilní“, jak je v tomto textu použit, znamená, že materiály čisticího prostředku nesnižují proteolytickou aktivitu varianty Subtílisinu DY do takové míry, že proteáza není účinná tak, jak se vyžaduje při normálním použití. Příklady specifických materiálů čisticích prostředků jsou detailně uvedeny níže.
Termín účinné množství varianty enzymu, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na množství enzymové varianty potřebné k dosažení potřebné enzymatické aktivity ve specifickém čisticím prostředku. Taková účinná množství jsou odborníkem snadno určena a jsou založena na mnoha faktorech, jako je použitá konkrétní varianta enzymu, čisticí použití, specifické složení čisticího prostředku a zdali se vyžaduje tekutý nebo suchý prostředek (např. prášek, kostka), a pod- Čisticí prostředky výhodně obsahují od 0,0001 % do 10 % jedné nebo více variant enzymu předkládaného vynálezu, výhodněji od 0,001 % do 1 ještě výhodněji od 0,01 % do 0,1 Několik příkladů různých Čisticích prostředků, kde jsou použity enzymové varianty, je detailně pojednáno níže- Všechny v tomto textu použité díly, procenta a poměry jsou hmotnostní, pokud není uvedeno jínak.
Termín “čisticí prostředky kromě použití na tkaniny, jak se v tomto textu používá, zahrnuje čisticí prostředky na pevné povrchy, prostředky na mytí nádobí, prostředky na Čištění ústní dutiny a umělého chrupu a prostředky na Čištění kontaktních čočekA. Čisticí prostředky na pevné povrchy, nádobí a tkaniny
Varianty enzymu předkládaného vynálezu mohou být použity v různých druzích detergentních prostředků, kde se vyžaduje silné pěnění a dobré odstranění nerozpustného substrátu. Tak mohou být enzymové varianty použity s různými obvyklými přísadami a poskytnou plně definované čističe pevných povrchů, prostředky na mytí nádobí, prací prostředky a pod. Takové prostředky mohou být ve formě tekutiny, prášku, v pevné formě (kostky) a pod- Tyto prostředky mohou být vyjádřeny jako moderní “koncentrované“ detergenty. které obsahují 30 % až 60 % (hmotnostních) povrchově aktivních látek (surfaktantů).
Čisticí prostředky vynálezu mohou volitelně a výhodně obsahovat různé aniontově, neionogenní. obojetně ionogenní a pod. surfaktanty. Tyto surfaktanty jsou typicky přítomné v množství od 5 % do 35 % prostředkuNeomezující příklady použitelných surfaktantů zahrnují obvyklé Cn-Cie alkylbenzensulfonáty a primární a náhodné alkylsulfáty. Cio-Cie sekundární (2,3) alkylsulfáty vzorců CH3 (CH2)x(CHOSO3 )~M+)CH3 a CHj (CHz )y (CHOSO3 M+)CH2CH3 , kde x a (y+1) jsou celá čísla nejméně 7, výhodně nejméně 9, a M je ve vodě rozpustný kation, především sodík, Cio-Cie alkylalkoxysulfáty (hlavně EO 1-5 ethoxysulfáty), Cio-Cis alky1a1koxykarboxy1áty (hlavně EO 1-5 ethoxykarboxy1áty), Cio-Cie alkylpolyglykosidy a jejich odpovídající sulfatované polyglykosidy, C12-C18 alfa sulfonatované estery mastných kyselin, C12-C18 alkyl a alkylfeno1a1koxy1áty (hlavně ethoxylaty a smíšené ethoxy/propoxy), C12-C18 betainy a sulfobetainy (”sultainy), Cio-Cie aminoxidy a pod. Preferované jsou alkylalkoxysulfáty (AES) a alkylalkoxy karboxyláty (AEC). (Také se preferuje použití těchto surfaktantů ve spojení se svrchu uvedenými aminooxidovými a/nebo betainovými či sultainovými surfaktanty, záleží na požadavcích tvůrce). Další běžně používané surfaktanty jsou vyjmenovány ve standardní literatuře. Obzvláště použitelné surfaktanty zahrnují Cio-Cie N-metylglukamidy vyjevené v patentu Spojených Států č. 5 194 639, Connor a kol., vydaném 16. března 1993, zahrnuto v odkazech.
V prostředcích může být obsažena celá řada dalších přísad používaných v detergentních čisticích prostředcích, včetně jiných aktivních složek, nosičů, hydrotropních látek, výrobních pomocných prostředků, barev nebo pigmentů, rozpouštědel pro tekuté směsi, atd. Jestliže se požaduje další zvýšení pěnění, mohou být do prostředků zahrnuty zesilovače pěnění, jako C10-C16 alkolamidy, typicky v množství od 1 do 10 %- Typickou třídu takových zesilovačů ·· ·»·· pěnění zastupují C10-C14 monoetanol a <3 i etano 1 am i dy. Je také výhodné použití těchto zesilovačů pěnění se surfaktanty, které vysoce pění samy od sebe, jako aminoxidy, betainy a sultainy zmíněné výše. Je-li vyžadováno další pěnění, je možno přidat rozpustné horečnaté soli jako MgCl2, MgSCU a pod., v množství typicky od 0,1 % do 2
Tekuté detergentní prostředky mohou jako nosiče obsahovat vodu a jiná rozpouštědla. Jsou vhodné primární nebo sekundární alkoholy o nízké molekulové hmotnosti, například metanol, etano1, propanol a isopropanol. Pro rozpouštěcí surfaktanty se preferují jednosytné alkoholy, ale mohou být také použity polyoly, které obsahují od 2 do 6 atomů uhlíku a od 2 do 6 hydroxy skupin (např.
1,3-propandiol, etylenglykol, glycerin a 1,2-propandiol).
Prostředky takové nosiče obsahují v množství od 5 % do typicky od 10 % do 50 %.
Detergentní prostředky jsou výhodně navrženy tak, že během použití při čisticích úkonech ve vodném prostředí bude mít mycí voda pH mezi 6,8 a 11,0- Konečné produkty jsou typicky navrženy pro toto rozmezí. Technologie upravování pH při doporučeném dávkování zahrnuje použití pufrů, zásad, kyselin, atd. a je odborníkům dobře známa.
Při návrhu složení čisticích prostředků předkládaného vynálezu na pevné povrchy a na tkaniny může navrhovatel použít různé základní složky v množstvích od 5 % do 50 % (hmotnostních). Typické základní složky zahrnují zeolity o velikosti částic 1-10 mikronů. polykarboxyláty jako citráty a oxydisukcináty, vrstvené silikáty, fosfáty a pod.
»· »··»
Další obvyklé základní složky jsou vyjmenovány ve standardních sbírkách vzorců.
Podobně může navrhovatel v těchto prostředcích použít různé prídatné enzymy, jako jsou celulázy, lipázy, amylázy a proteázy, typicky v množstvích od 0,001 % do 1 % (hmotnostního). V oboru pracích detergentů jsou velmi dobře známy různé čističi a tkaniny ošetřující enzymy.
V těchto prostředcích mohou být použity různé bělicí sloučeniny, jako peroxouh1 ičitaný, peroxoboritany a pod., typicky v množstvích od 1 % do 15 % (hmotnostních). Je-li vyžadováno, tyto prostředky mohou také obsahovat bělicí aktivátory, jako jsou tetraacetyletylendiamin, nonanoyloxybenzensulfonát a pod., které jsou v oboru také dobře známy. Použitá množství jsou typicky v rozmezí od 1 % do 10 % (hmotnostních).
V těchto prostředcích mohou být použity také různé odstraňovače skvrn, hlavně aniontového oligoesterového typu, různá chelatační činidla, hlavně aminofosfonáty a etylendiaminosukcináty, různé prostředky na odstranění skvrn od hlíny, hlavně ethoxylováný tetraety1enpentamin, různá dispergační činidla, hlavně polyakryláty a polyaspartáty, různé zjasňovače, hlavně aniontové, různé potlačovače pěnění, hlavně silikony a sekundární alkoholy, různé změkčovače tkanin, hlavně smektity (valchářské hlíny), a podobně, vše se v prostředcích používá v množstvích pohybujících se v rozmezí od 1 % do 35% (hmotnostních).
Standardní sbírky vzorců a publikované patenty obsahují četné detailní popisy těchto obvyklých materiálů21 ·· ···♦
• · 9 9 • · 99
9 9 9 • 9999 » • 9
• 9 9
99 · ··· 49
• · · • · · ··· · • · ·· ·
V čisticích prostředcích mohou být také použity stabilizátory enzymů. Tyto enzymové stabilizátory zahrnují propylenglykol (výhodně od 1 % do 10 formiát sodný (výhodně od 0,1 % do 1 a formiát vápenatý (výhodně od
0,1 % do 1
1. Čisticí prostředky na pevné povrchy
Termín čisticí prostředek na pevné povrchy, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na tekuté a práškové detergentní prostředky na čištění pevných povrchů jako jsou podlahy, zdi, koupelnové dlaždičky a pod- Čisticí prostředky na pevné povrchy předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 výhodněji od 0,01 % do %, ještě výhodněji od 0,05 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku. Kromě obsahu jedné nebo více enzymových variant tyto čisticí prostředky na pevné povrchy typicky obsahují surfaktant a ve vodě rozpustnou ochrannou základní složku. Avšak někdy se v určitých specializovaných produktech, jako jsou čističe oken ve spreji, surfaktanty nepoužívají, nebot mohou zanechávat na skleněném povrchu neprav i de1ně pruhovaný pov1ak.
Je-li surfaktant v prostředku přítomen, pak čisticí prostředek může obsahovat jenom 0,1 ale typicky obsahuje od 0,25 % do 10 %, výhodněji od 1 % do 5 % surfaktantu.
Typicky prostředek obsahuje od 0,5 % do 50 % detergentní základní složky, výhodně od 1 % do 10 %.
Výhodně by pH mělo být v rozmezí od 8 do 12. Je-li nezbytné, mohou být použity obvyklé prostředky na upravení
pH. jako jsou hydroxid sodný, uhličitan sodný nebo kyselina ch1orovodíkováV prostředku mohou být obsažena rozpouštědla.
Použitelná rozpouštědla zahrnují, ale nejen je, glykolétery jako je dietylenglykolmonohexyl éter, dietylenglykol monobutyl éter, etylenglykolmonobutyl éter, etylenglykol · monohexyl éter, propylenglykolmonobuty1 éter, dipropy1englýkolraonobutyl éter, a dioly jako je
2,2,4-trimetyl-l,3-pentandíol a 2-etyl-l,3-hexandiol.
Jsou-li použita, pak jsou tato rozpouštědla typicky přítomna v množstvích od 0,5 do 15 t, výhodně od 3 % do 11
Navíc v předkládaných prostředcích mohou být použita vysoce těkavá rozpouštědla jako je isopropanol nebo etanol, aby se usnadnilo vysychání prostředku z povrchů, když se povrch neopláchne po použití neředěného prostředku. Jsou-li použita, pak jsou těkavá rozpouštědla v prostředku typicky přítomna v množstvích od 2 % do 12 %.
Provedení čisticího prostředku na pevné povrchy je doloženo příklady.
2. Prostředky na mytí nádobí
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prostředky na mytí nádobí. Termín prostředky na mytí nádobí, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na všechny formy prostředků na mytí nádobí, včetně, ale neomezeno na, práškové a tekuté formy. Provedení prostředku na mytí nádobí předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
3. Čisticí prostředky na tkaniny - prací prostředky • · ·
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prací prostředky. Termín prací prostředky, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na všechny formy detergentních prostředků na praní tkanin, včetně, ale neomezeno na, práškové, tekuté a pevné formy (např. kostka). Preferované prací prostředky jsou v tekuté forměa. Práškové prací prostředky
Práškové prací prostředky předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 %, výhodněji od 0,005 % do 5 %, nejvýhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku- Kromě jedné nebo více enzymových variant práškové prací prostředky typicky obsahují alespoň jeden surfaktant, jednu nebo více základních složek a v některých případech bělicí prostředek.
Provedení práškového pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
b. Tekuté prací prostředky
Tekuté prací prostředky předkládaného vynálezu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,005 % do 5 výhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) aktivního enzymu v prostředku- Tyto tekuté prací prostředky navíc typicky obsahují aniontový surfaktant, mastnou kyselinu, ve vodě rozpustnou detergentní základní složku a vodu.
Provedení tekutého pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
····
c. Pevné prací prostředky
Pevné prací prostředky předkládaného vynálezu vhodné pro ruční praní zašpiněných tkanin obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodně od 0,001 % do 10 %, výhodněji od 0,01 % do 1 % (hmotnostního) prostředku.
Provedení pevného pracího prostředku předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
B. Přídatné čisticí prostředky
Kromě čisticích prostředků na pevné povrchy, na mytí nádobí a pracích prostředků pojednávaných výše může být jedna nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu začleněno do různých druhů dalších čisticích prostředků, kde se vyžaduje hydrolýza nerozpustného substrátu. Takové přídatné čisticí prostředky zahrnují, ale nejsou omezeny na, prostředky na čištění ústní dutiny, prostředky na čištění umělého chrupu a prostředky na čištění kontaktních čoček.
1. Prostředky na čištění ústní dutiny
V dalším provedení předkládaného vynálezu je obsaženo farmaceuticky přijatelné množství jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu v prostředcích použitelných na odstraňování nečistot bílkovinné povahy ze zubů a umělého chrupu. Termín prostředky na čištění ústní dutiny”, jak se v tomto textu používá, se vztahuje na prostředky na čištění zubů, zubní pasty, zubní gely, zubní prášky, ústní vody, ústní spreje, ústní gely, žvýkací gumy, zdravotní pastilky, váčky s práškem, tablety, biogely, preventivní pasty, zubní léčebné roztoky a pod. Výhodně prostředky na čištění ústní • · · · · · • * dutiny obsahují od 0.0001 % do 20 % jedné nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu, výhodněji od 0,001 % do 10 ještě výhodněji od 0,01 % do 5 % (hmotnostních) prostředku a farmaceuticky přijatelný nosič. Termín “farmaceuticky přijatelný, jak se v tomto textu používá, znamená, že léky, léčiva nebo inertní složky, které termín popisuje, jsou vhodné pro použití v kontaktu s lidskými tkáněmi a tkáněmi zvířat bez nepatřičné toxicity, nesnášenlivosti. nestability, podráždění, alergické reakce a pod-, s přiměřeně přijatelným poměrem účinek/riziko.
Typicky prostředky na čištění ústní dutiny obyčejně obsahují od 50 % do 99,99 %, výhodně od 65 % do 99,99 výhodněji od 65 % do 99 % (hmotnostních) farmaceuticky přijatelného nosiče v prostředku na čištění ústní dutiny.
Odborníkům jsou dobře známy farmaceuticky přijatelné nos i Če a vo1 i te1né s1ožky, které mohou být obsaženy v prostředcích na čištění ústní dutiny předkládaného vynálezu- Celá řada typů prostředků, nosičů a volitelných složek použitelných v prostředcích na čištění ústní dutiny je popsána v patentech Spojených Států: 5 096 700, Seibel, vydaný 17- března 1992, 5 028 414, Sampathkumar, vydaný 2července 1991. a 5 028 415, Benedict, Bush a Sunberg, vydaný 2- července 1991, všechny zahrnuty v odkazech.
Provedení prostředku na čištění ústní dutiny předkládaného vynálezu je doloženo příklady2- Prostředky na čištění umělého chrupu
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu • · · · prostředky na čištění umělého chrupu vně ústní dutiny. Tyto prostředky na čištění umělého chrupu obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant, výhodně od 0,0001 % do 50 % jedné nebo více enzymových variant, výhodněji od 0,001 % do 35%, ještě výhodněji od 0,01 % do 20 % (hmotnostních) prostředku a nosič čisticího prostředku. V oboru jsou dobře známy různé formy prostředků na čištění umělého chrupu, jako šumivé tablety a pod. (viz např. patent Spojených Států 5 055 305, Young, zahrnuto v odkazech) a jsou všeobecně vhodné ke spojení s jednou nebo více enzymovými variantami pro odstraňování nečistot bílkovinné povahy z umělého chrupu.
Provedení prostředku na čištění umělého chrupu předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
3. Prostředky na čištění kontaktních čoček
V dalším provedení předkládaného vynálezu obsahují jednu nebo více enzymových variant předkládaného vynálezu prostředky na čištění kontaktních čoček- Tyto prostředky na čištění kontaktních čoček obsahují účinné množství jedné nebo více enzymových variant, výhodně od 0,01 % do 50 % jedné nebo více enzymových variant, výhodněji od 0,01 % do ještě výhodněji od 1 % do 5 % (hmotnostních) prostředku a nosič čistícího prostředku. V oboru jsou dobře známy různé formy prostředků na čištění kontaktních čoček, jako tablety, tekutiny a pod. (viz např. patenty Spojených Států- 4 863 627, Davies, Meaken a Rees, vydaný 5. září 1989, patent Re. 32 672, Huth, Lam a Kirai, znovu vydaný
24. května 1988, patent 4 609 493, Schafer, vydaný 2. září • · · ·
1986, patent 4 690 793, Ogunbiyi a Smith, vydaný 1. září
1987, patent 4 614 549, Ogunbiyi, Riedhammer a Smith. vydaný 30. září 1986 a patent 4 285 738, Ogata, vydaný 25. srpna 1981, všechny zahrnuty v odkazech) a jsou všeobecně vhodné ke sloučení s jednou nebo více enzymovými variantami předkládaného vynálezu pro odstraňování nečistot bílkovinné povahy z kontaktních čoček.
Provedení prostředku na čištění kontaktních čoček předkládaného vynálezu je doloženo příklady.
Zatímco byla popisována konkrétní provedení předkládaného vynálezu, je odborníkfim zřejmé, že se mohou provádět různé změny a úpravy předkládaného vynálezu, aniž by se opustila základní myšlenka a oblast vynálezu. V připojených patentových nárocích je zamýšleno pokrýt všechny tyto úpravy, které jsou v oblasti vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příprava enzymových variant
Příklad 1
Mutovaná DNA Subtilisinu DY
Je zkonstruován fagemid (DYP) obsahující gen divokého typu Subtilisinu DY. Do restrikčního místa PiznII plasmidu pUBUO (Bacillus Genetic Stock Center, Columbus, OH 1E9) se zaklonuje fragment o délce 2,8 kb vyštěpený restrikčním enzymem PvuTI z plazmidu pUC119 (Vieira, J. a Messing, J.
Production of Single-Stranded Plasmíd DNA”, METHODS IN
EMZYMOLOGY, díl 153, ss- 3-11, (1989)). Hybridní plazmid pUC119-pUBllO je nazván pJMA601. Do restrikčního místa £?amHI plazmidu pJMA601 se zaklonuje polymerázovou řetězovou reakcí namnožený gen subtilisinu DY z chromozomové DNA za vzniku · fagemidu DYP. Fagemid DYP je transformován do kmene CJ236
Esch&richia coli Ung~ a vytvoří se jednovláknový templát DNA obsahující uráčil za použití pomocného fága VCSM13 (Kunkel, T-Α-, J.D. Roberts a R.A. Zakour, Rapid and efficient site-specific mutagenesis without phenotypic selection, METHODS IN ENZYMOLOGY, díl 154, ss. 367-382, (1987), jak modifikováno autory Yuckenberg, P.D., F. Witney, J. Geisselsoder a J. McClary, Site-directed in vitro mutagenesis using uraci1-containing DNA and phagemid vectors“, DIRECTED MUTAGENESIS - A PRACTICAL APPROACH, ed. M.J. McPherson, ss. 27-48, (1991), oba články jsou zahrnuty v odkazech). K tvorbě všech mutací (v podstatě jak prezentováno Yuckenbergem a kol., 1991, výše) je použita modifikace metody řízené mutageneze za použití jediného primeru dle Zollera a Smithe (Zoller, M.J. a M- Smith, “01igonucleotide-directed mutagenesis using M13-derived vectors; an efficient and generál proceduře for the production of point mutations in any fragment of DNA, NUCLEIC ACIDS RESEARCH, díl 10, ss. 6487-6500, (1982), zahrnuto v odkazech). Oligonukleotidy jsou tvořeny za použití syntetizátoru DNA Applied Biosystem lne. 380B. Reakční produkty mutageneze jsou transformovány do kmene • ··· · · · · ·· · · * · · · · • ··· ··· · · 9
MM294 Eschericbia coli (American Type Culture Collection
E. coli 33625). Správnost všech mutantů je potvrzena sekvenováním DNA a izolovaná DNA je transformována do expresního kmene BG2036 Bacillus subtilis (Yang, M.Y., E. Ferrari a D.J.Henner, (1984), Cloning of the Neutrál Protease Gene of Bacillus subtilis and the Use of the Cloned Gene to Create an In Vitro-derived Deletion Mutation, JOURNAL OF BACTERIOLOGY, díl 160, ss. 15-21). Pro některé mutanty smyček je použit k tvorbě uracilového templátu modifikovaný DYP s posunovou mutací ve stopovacím kodonu v odpovídající smyčce. Olígonukleotidy jsou navrženy tak,
aby obnovily správný čtecí rámec a kódovaly náhodné
substituce v polohách 58, 59, 60, 61, 62, 64 , 65, 94, 95,
96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 125,
126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 153, 154, 155, 156, 157,
158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 186, 187, 188,
189, 190, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208,
209, 210, 211 , 212, 213 , 214, 215 , 216 , 217, 218 nebo . 219
(ekviraolární a/nebo různé směsi všech čtyř nukleotidů pro všechny tří báze v těchto kodonech). Mutace, které opravují posunovou mutaci ve stopovacím kodonu a tvoři funkční enzym, jsou rozpoznávány podle schopnosti štěpit kasein. Náhodné substituce se zjistují sekvenováním DNA.
Příklad 2
Fermentace
Buňky Bacillus subtilis (BG2036) obsahující zkoumanou mutaci subtilisinu se pěstují do střední logaritmické fáze v jednom litru kultivačního bujónu LB s glukózou a očkují se do kvasné kádě (fermentoru) Biostat ED (B. Braun Biotech, lne., Allentown, Pennsylvania) do celkového objemu 10 litrů. Kultivační médium obsahuje kvasinkový výtažek, škrob, přípravek snižující pěnlvost, pufry a stopové minerály (viz
FERMENTATION: A PRACTICAL APPROACH, Ed- B- McNeil a L.MHarvey, 1990). Bujón je během fermentačního pochodu udržován na konstantním pH=7,0. Pro antibiotickou selekci mutovaného plazmidu se přidává chloramfenikol- Buňky se pěstují přes noc ve 37 °C až do hodnoty Αβοο=60 a pak se sklízí.
Příklad 3
Čištění
Aby se získal čistý enzym, fermentační bujón prochází následujícími kroky. Odstředěním se odstraní z bujónu buňky
Bacillus subtilis a bujón se přečistí odstraněním jemných částic pomocí molekulárního síta s limitem molekulové hmotnosti 100K. Pak následuje koncentrace na molekulárním sítě s limitem 10K, průtoková dialýza ke snížení iontové síly a nastavení pH na 5,5 za použití 0,025M pufru MES (2-(W-morfolin)ethansulfonová kyselina). Enzym se dále čistí navrstvením bud’ na chromatograf ickou kolonu s měničem kationtů nebo na afinitně adsorpční chromatografickou kolonu a vyluhuje se z kolon pomocí gradientu s NaCl nebo propylenglýkolem (viz Scopes, R.K. , PROTEIN PURIFICATION
PRINCIPLES AND PRACTICE, Springer-Verlag, New York, (1984),
V přípravku pro použití se vyluhuje zásobní roztok enzymu přes kolonu se Sephadexem-G25 (Pharmacia, Piscataway, New Jersey), aby se odstranil propylenglykol a vyměnil pufr. Pufr MES ze zásobního roztoku enzymu se vymění za pufr O,1M Tris (Tris(hydroxymetyl-aminometan)), který obsahuje 0.01M CaCl2 a pH má upraveno na 8,6 pomocí HC1. Všechny pokusy jsou prováděny v pufru Tris o pH 8,6 zahřátém na 25 °C.
Charakterizace enzymových variant
Příklad 4
Př í prava mode1ového povrchu
Jako podklad pro kovalentně navázaný substrát sAAPF-pNA zakoupený od Bachem, lne. (Torrence, California) je použito aminopropylově porézní sklo (CPG) zakoupené od CPG lne. (Fairfield, New Jersey). Reakce se uskutečňuje v dimetyl sulfoxidu a jako vazebné činidlo se používá 1-ety1-3-13-(d imetylamino)propy11karbod im i d hydroch1ori d (EDC). Po dokončení (monitorováno zkouškou pNA) je odstraněno přebytečné rozpouštědlo a CPG^sAAPF-pNA je opláchnut dimetyl sulfoxidem (DMSO) a dvojitě destilovanou vodou. Následuje sušení v sušárně s profukováním N2 při 70 °C. Reakční schéma a příprava immobi1izovaného substrátu se provádí dle popisu Brode, PF. III, a D-S. Rauch,
Subtilisin BPN’: Activity on an Immobilized Substráte,
LANGMUIR, díl 8, ss. 1325-1329, (1992), zahrnuto v odkazech.
Povrch CPG váže 62 000 ± 7 000 molekul pNA na jnm2 .
• · ··· ·
Povrchová plocha zůstane nezměněna od hodnoty 50,0 m2/g, jak udává CPG lne. pro použité sklo CPG. Toto naznačuje, že postup použitý k navázání sAAPF-pNA na CPG nezničí porézní strukturu (střední průměr je 486 A)Příklad 5
Test povrchové hydrolýzy
Za použití CPG-sAAPF-pNA mohou být měřeny v jediném pokuse jak adsorpce enzymové varianty tak i hydrolýza peptidů navázaného na CPG- Do baňky obsahující pufr Tris a CPG-sAAPF-pNA, který byl zbaven plynu, se přidá malý objem zásobního roztoku enzymové varianty. Baňka se protřepává na třepačce po dobu 90 minut, během kterých se třepačka zastavuje v různých časových intervalech (například, každé 2 minuty během časných stadií adsorpční hydrolýzy, např. prvních 20 minut, a každých 10 minut až do konce pokusu).
CPG;sAAPF-pNA je umožněno sedimentovat a roztok se odebírá na vzorky. Experimentální postup a kalkulace adsorpce a hydrolýzy se provádí dle popisu Brodyho a kol., 1992, výše
Všechny enzymy se monitorují na stabilitu proti autolýze a neměly by projevit znatelnou ztrátu způsobenou autolýzou v průběhu celého pokusu. Proto adsorpce enzymu může být určena měřením úbytku z roztoku. Rozdíl mezi původní koncentrací enzymové varianty a koncentrací měřenou v každém jednotlivém časovém bodu udává množství adsorbované enzymové varianty. Množství pNA hydrolyžovaného z povrchu se • · · · ·
měří odečtením absorbance při 410 nm poměrné části vzorku. Celkové množství hydrolyžovaného pNA se vypočítává sečtením množství odebraného na vzorky a množství zbylého v baňce. Tato hodnota se koriguje odečtením množství pNA, který je hydrolyzován pufrem Tris při pH 8,6 v nepřítomnosti enzymu. Tato bazická hydrolýza je v rozmezí 7-29 % celkové hydrolýzy závislé na účinnosti enzymu.
Příklad 6
Kinetická analýza rozpustného substrátu
Rychlosti hydrolýzy rozpustného substrátu sAAPF-pNA se monitorují měřením přírůstku adsorbance jako funkce času ve 410 nm na spektrofotometru DU-70- Koncentrace enzymu je udržována konstantní a pohybuje se v rozmezí 6-10 nanomolů, zatímco koncentrace substrátu se mění od 90 do 700 jiM sAAPF-pNA pro každé kinetické stanovení- Každou sekundu po dobu 900 sekund se odebírají údaje adsorbance a data jsou přenesena do kalkulační tabulky programu LOTUS™ (Lotus Development Corporation, Cambridge, Massachusetts). Analýza kinetických parametrů se provádí standardní Linewear
Burkovou analýzou, ve které data v počáteční části testu (obyčejně první minuta) jsou fitována lineární regresní křivkou a poskytnou tak hodnotu vo- Data vo a so jsou vynesena do grafu standardním inverzním způsobem a umožní určit hodnoty Km a kcat35 • · · · · · ··· · · · · ··· ·· 9
Tabulky variant. Subt.il isinu DY k příkladům 1 až 6
Příklady variant. Subt.il isinu DY předkládaného vynálezu, které mají sníženou adsorpci a zvýšené hydrolyzují povrchově vázané substráty, jsou uvedeny v tabulkách 2-36, viz níže.
V popisu specifických mutací je originální aminokyselina vyskytující se v divokém typu uvedena jako první, na druhém místě je číslo polohy a substituující aminokyselina je třet í.
Tabulka 2
Smyčka 1 - varianty s jedinou mutací
Thr58Asn Thr58Asp Thr58Gln Thr58Glu ThrSSGly Thr58Pro Thr58Ser Asp59Glu GlyfiOAsn GlyGOAsp G1y60G1n Gly60Glu G1y60Pro GlyóOSer AsnGlAsp Asn61Gln AsnGlGlu Asn61Ser Gly62Asn Gly62Asp G1y62Gln G1y62G1u Gly62Pro Gly62Ser G1y64Asn Gly64Asp G1y64G 1 n G1y64G1u Gly64Pro G1y64Ser Thr65Asn ThrGSAsp • · ·
Thr65Gln
Thr65Glu
Thr65Gly
Thr65Pro
Thr65Ser
Tabulka 3
Smyčka 1 - varianty s dvojitou mutací
Thr58Gln + Asn61Glu Thr58Asn + AsnGlAsp Asp59Glu + Gly64Pro Thr58Glu + Gly62Pro Asp59Glu + GlyóOSer Gly60Asn + Gly64Asn Asn61Asp + Thr65Gln Thr58Asp + AsnGlSer ThrSSAsp + Thr65Pro Gly64Glu ·+ Thr65Gly Gly64Asp ·+ Thr65Asn Thr58Glu + Gly62Gln GlyGOAsn + Asn61Glu Thr58Asn + Gly64Ser Thr58Pro + Asp59Glu Gly64Glu + Thr65Gln ThrSSPro + Gly62Ser Thr58Gly + Gly64Asn Asn61Gln + Gly64Gln Thr58Gly + AsnGlAsp GlyGOPro + Asn61Asp Gly62Asn + Gly64Pro Gly62Asp Thr65Asn Thr58Asn + Gly62Asn Thr58Pro Gly62Asn Gly64Glu +· Thr65Ser Gly60F‘ro + Gly62Glu Gly60Glu + Thr65Gln GlyGOPro + Gly62Ser Thr58Asp AsnGlGln GlyGOAsn + AsnGlAsp Thr58Ser + Gly62Glu GlyGOGlu + GlyG4Ser GlyGOPro + AsnGIGlu Thr58Gln + Asn61Ser Gly60Asp ThrGSPro AsnGlAsp + Thr65Ser AsnGISer ·+- Gly64Asp • · · ··
Tabulka 4
Smyčka 1 - varianty s trojitou mutací
Thr58Asn + GlyGOGln 4- Gly64Pro
Thr58Gly Asn61Ser 4- Thr65Ser
Asp5961u + Gly60Pro -h Thr65Ser
Asn61Glu + Gly62Pro 4- Gly64Asn
Thr58Asp Gly60Asn -»- Thr65Gln
Thr58Ser + Gly62Ser Thr65Gly
Thr58Pro Asp59Glu 4- Gly62Pro
Gly60Glu + Asn61Gln + Thr65Gln
Gly60Glu +· Gly64Asn 4- Thr65Pro
Gly60Asn + Gly62Asp 4- Thr65Ser
Thr58Asn + Asn61Glu 4- Thr65Gln
Thr58Asn + Asp59Glu 4- Gly62Pro
Gly60Gln + Gly62Gln -4- Gly64Glu
Asn61Gln -+- Gly62Pro 4- Thr65Ser
Asn61Gln + Gly62Asn 4- Thr65Gln
AsnGISer + Gly62Gln 4- Thr65Gly
Gly60Ser + Gly64Gln 4- Thr65Gly
Thr58Pro + Gly60Pro 4- Gly64Gln
Thr58Asn Gly60Asn 4- Thr65Pro
Asp59Glu + Gly62Gln 4* Thr65Asn
Thr58Ser + GlyóOGln 4- Gly62Asp
Thr58Asn + Gly64Ser 4- Thr65Asn
GlyóOPro Gly62Asp 4- Thr65Gln
Asn61Glu + Gly64Ser 4- Thr65Gly
Thr58Pro + Asn61Asp 4- Gly64Gln
Asp59Glu +· Asn61Ser 4- Gly62Ser
Thr58Asn ·+- GlyGOAsp 4- Thr65Asn
Asp59GJu + Asn61Gln 4- Gly62Asn
Thr58Asn + Gly6OAsp 4- AsnGlAsp
Thr58Asn + GlyóOGlu 4- AsnGIGlu
Tabulka 5
Smyčka 1 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Thr58Asn + Gly60Glu + Gly64Pro + Thr65Gln Asp59Glu + GlyGOSer + Gly64Pro +· Thr65Pro ThrSSSer +- GlyGOAsn +· Asn61Gln -+- Thr65Pro Asp59Glu +· Gly60Ser + Gly64Ser + Thr65Gly Asp59Glu -+ Gly60Asn + Asn61Ser + Gly62Ser Asp59Glu + Gly60Asn Asn61Ser +· Gly64Asn Thr58Gln + Asn61Gln + Gly62Glu -+- Gly64Asn Thr58Asn + Asp59Glu ·+ Gly60Gln + Thr65Pro Thr58Gly + GlySOGln + Gly62Pro 61y64Glu GlyGOAsp + Asn61Asp +· Gly62Pro -+- Gly64Gln Thr58Pro + Gly60Glu + Asn61Asp Gly64Asn Thr58Asp + Asp59Glu + Gly62Asn + Thr65Gln Thr58Asp +· Asp59Glu +· GlyGOSer + Gly€>4Asn Thr58Glu + Asp59Glu Gly62Asn + Thr€>5Ser Thr58Asp + Asp59Glu + GlyGOPro + AsnólSer
Thr58Asn +- GlyGOGln +- Asn61Glu +- Gly62Asp Asp59Glu +- Gly60Glu +- AsnGlGlu +- Gly62Ser Thr58Gln +- Asp59Glu +- GlyGOGlu +- Asn61Glu Thr58Pro +- Asp59Glu +- Gly60Glu +- AsnGlGlu Thr58Gln +- Asp59GIu +- GlyóOAsp +- AsnGlAsp Thr58Pro +- GlyGOGlu +- Asn61Asp +- Gly62GIu Gly60Glu +- AsnGlGlu + Gly62Glu + Thr65Gly Gly6OAsp +- AsnólAsp +- Gly62Asp +- Thr65Gln Thr58Asp +- Asp59Glu +- GlyGOGlu +- Thr65Ser Asp59Glu +- AsnGlAsp +- Gly62Asp +- Thr65Gln Asp59Glu +- AsnGlAsp +- Gly62Glu +- Thr65Gly Asp59Glu +- GlyGOAsp +- Gly62Asp +- Thr65Gln Thr58Ser +- Asp59Glu +- Gly60Asp +- Gly62Asp
Tabulka 6
Smyčka 2 - varianty s jedinou mutací
Val 94A1 a
Val 94Asn
Val 94Asp
Val 94Cys
Val 94Gln
Val 94Glu
Val 94Gly
Val 94His
Val 94Met
Val 94 Pro
Val 94Ser
Val 94Thr
Leu 95Ala
Leu 95Asn
Leu 95Asp
Leu 95Cys
Leu 95Gln
Leu 95Glu
Leu 95Gly
Leu 95His
Leu 9511e
Leu 95Met.
Leu 95 Pro
Leu 95Ser
Leu 95Thr
Leu 95 V a 1
Asn 96Asp
Asn 96Gln
Asn 9661u
Asn 96Ser
Ser 97 Asp
Ser 97G1 u
Ser 98 Asp
Ser 9861 u
Gly 99Asn
G í y 99 Asp
Gly 99Gln Gly 99Glu Gly 99Pro Gly 99Ser SerlOOAsp SerlOOGlu GlylOlAsn GlylOlAsp GlylOlGln GlylOlGlu GlylOlPro GlylOlSer ThrlO2Asn ThrlO2Asp ThrlO2Gln ThrlO2Glu ThrlO2Gly Thrl02Pro ThrlO2Ser TyrlO3Ala TyrlO3Asn TyrlO3Asp TyrlO3Cys TyrlO3Gln TyrlO3Glu TyrlO3Gly TyrlO3His TyrlO3Ile TyrlO3Leu TyrlO3Met. Tyrl03Pro TyrlO3Ser TyrlO3Thr TyrlO3Val SerlO4Asp SerlO4Glu AlalO5Asn AlalOSAsp AlalO5Gln AlalO5Glu AlalO5Gly AlalO5Hís AlalOSPro A1alOSSer AlalO5Thr 1lelOGAla I lelO6Asn IlelOĎAsp IlelOGCys IlelOGGln IlelOÓGlu IlelOGGly IlelOGHis llelO6Leu 1lelOÓMet
Ilel06Pro I1el06Ser IlelOéThr IlelO6Val
Tabulka 7
Smyčka 2 - varianty s dvojitou mutací
Val 94Gln 4-
Asn 96Ser 4-
Val 94Asp 4-
Val 94His 4-
Val 94Pro 4-
Asn 96Ser 4-
Ser 97Glu 4-
Leu 95Gly 4-
SerlOOGlu 4-
Asn 96Ser 4-
AlalO5Ser 4-
Asn 96Ser 4-
ThrlO2Asn 4-
Val 94His 4-
Leu 95 Cys 4-
Leu 95Gly 4-
Leu 95Cys 4-
ThrlO2Ser 4-
Asn 96Gln 4-
GlylOlSer 4-
Asn 96Ser 4-
Ser 98Asp 4*
Leu 95Ser 4-
Leu 95Met 4-
Leu 95His 4-
Asn 96Asp 4-
TyrlO3Gln 4-
SerlO4Asp 4-
ThrlO2Asn 4-
Val 94Asn 4-
Val 94Gly 4-
Leu 95Gln 4-
Asn 96Ser 4-
TyrlO3Glu 4-
ThrlO2Ser 4-
Val 94Cys 4-
Leu 95Gln 4-
Asn 9661 u 4-
Leu 95Glu 4-
Val 94Met 4*
Val 94Thr 4-
TyrlO3Gly 4-
ThrlO2Asn 4-
SerlO4Asp 4-
G1 y 99Ser 4-
SerlOOGlu Gly 99Gln ThrlO2Gln AlalOSPro Ser 97Glu IlelO6Asp GlylOlSer ThrlO2Glu IlelO6Thr Gly 99Ser Ilel06Pro GlylOlSer IlelOGGln Asn 96Gln AlalO5Asp Asn 96Asp Asn 96Asp IlelO6Cys ThrlO2Gln TyrlO3Gly IlelO6Thr Gly 99Gln SerlOOGlu ThrlO2Gly ThrlO2Glu TyrlO3His IlelO6Asp IlelOGGln TyrlO3Asp Ser 97Glu GlylOlSer IlelO6Asp SerlO4Asp IlelOGHis TyrlO3Glu SerlO4Asp ThrlO2Asp GlylOlSer AlalO5Ser Leu 95Pro GlylOlGln IlelO6His IlelOGGly IlelOGThr Ser100Asp • · ·
Val 94Glu + Gly 99Asn Gly 99Gln + GlylOlSer Val 94Thr + Asn 96Asp Ser 97Glu + IlelO6Leu ThrlO2Asp + TyrlO3Met Ser 97Asp + AlalO5His Asn 96Gln + SerlOOAsp GlylOlAsn + Ilel.06Gln Asn 966lu + TyrlO3Ser TyrlO3Thr + Ilel06Pro SerlOOAsp + TyrlO3Ile GlylOlGlu + TyrlO3Leu SerlOOAsp + ThrlO2Asn Val 94His + Leu 95Thr SerlO4Asp AlalO5Asn
Tabulka 8
Smyčka 2 - varianty s trojitou mutací
Val 94Gln 4“
Ser 98 Asp 4-
Val 94Gly 4-
Val 94Ser 4-
Val 94His 4-
Val 94Pro 4-
Val 94Thr 4-
Val 94Met 4-
Val 94Ala 4-
Leu 95Gly 4-
Val 94Cys 4~
GlylOlAsn 4-
Gly 99Ser 4-
Asn 96Gln 4-
Leu 95Met 4-
Asn 96Glu 4-
SerlOOGlu 4-
Ser 98Glu 4-
Asn 96Asp 4-
GlylOlAsp 4-
Val 94Ala 4-
ThrlO2Gly 4-
Ser 97Glu 4-
Val 94Pro 4-
Ser 97 Asp 4-
Val 94Cys 4-
SerlOOAsp 4-
ThrlO2Asp 4-
Val 94Cys 4~
Val 94Ser 4-
Ser 98Glu 4-
Leu 95Val 4-
Ser 9761 u 4-
Val 94Ser 4-
Leu 95Thr AlalO5Ser Gly 99Pro Leu 95Gln TyrlO3Glu Asn 96Gln Ser 98Asp SerlOOAsp Ser 97Asp Gly 99Pro SerlOOAsp ThrlO2Asp SerlO4Glu SerlOOGlu Thrl02Pro ThrlO2Ser ThrlO2Asn Gly 99Gln Gly 99Ser ThrlO2Asn Gly 99Gln TyrlO3Glu GlylOlSer G1y 99Ser Gly 99Ser Leu 95Val GlylOlAsn TyrlO3Leu SerlO4Glu ThrlO2Asn Gly 99Asn GlylOlGln Gly 99Pro GlylOlGlu + SerlOOGlu + IlelO6Asn + IlelO6Val + SerlO4Glu + IlelO6Gly + IlelO6Cys + IlelOÓCys + GlylOlSer + Gly 99Gln + fllalOSGly + TyrlO3Ala + IlelO6Ala + IlelO6Val ·+- TyrlO3Thr +· IlelO6Leu + AlalO5His + TyrlO3Val + IlelOÓMet + AlalOSThr + TyrlO3Thr + TyrlO3His + AlalO5Gly + ThrlO2Gln + GlylOlAsp + IlelOÓGly +· GlylOlGln + TyrlO3Gln + IlelOóVal + AlalOSAsn + AlalO5Thr + TyrlO3Val ·♦ AlalOSAsp
ThrlO2Ser + IlelOÓAla • · · · · · • · · · · · • · • · · · ·
Leul25Thr Leul25Val Glyl26Asn Glyl26Asp Glyl26Gln 61yl26Glu Glyl26Pro Glyl26Ser Glyl27Asn Glyl27Asp Glyl27Gln Glyl27Glu Glyl27Pro Glyl27Ser Prol28Asn Prol28Asp Prol28Gln Prol28Glu Prol28Gly Prol28Ser Serl29Asp Serl29Glu Glyl30Asn Glyl30Asp Glyl30Gln Glyl30Glu GlylSOPro Glyl30Ser Serl31Asp Serl31Glu Thrl32Asn Thrl32Asp Thrl32Gln Thrl32Glu Thrl32Gly Thrl32Pro Thrl32Ser
Tabulka 11
Smyčka 3 - varianty s dvojitou mutací
Leul25Gln + Serl29Glu Leu125Pro + Glyl26Ser Glyl27Gln + Serl31Asp Glyl30Ser + Thrl32Gly Leul25Met + Glyl30Asp Leul25Pro + Prol28Asp Ser129Asp ·+· Glyl30Asn Leul25Asp + Prol28Asn Glyl27Ser + Serl31Glu Leul25Ile ·+· Glyl30Ser Leul25Thr + Thri32Asp Leul25Thr + Thrl32Asn ·· ··· ·
Leul25Pro Leul25Glu Prol28Asn Leul25Thr Glyl27Pro Glyl27Asn Glyl26Gln Leul25Val Glyl26Gln Serl29Asp Glyl26Asp Leul25Cys Glyl27Gln Leul25His Leul25Val Glyl26Ser Leul25Val Glyl27Glu Leul25Asn Leul25Met Leul25Ser Leul25Ser Leul25Val Leul25Val Serl29Glu Prol28Gly Glyl26Pro Glyl26Asp Prol28Asp Glyl26Pro Glyl30Ser Glyl27Glu Glyl26Asn Pro128Asn Glyl30Asp Glyl26Gln Glyl27Glu Glyl26Asn Prol28Asp Prol28Asp Glyl26Gln Serl31Glu Glyl30Glu Leul25Val Leul25Ile Prol28Asn Glyl30Asn Glyl27Ser + Glyl27Glu + Thrl32Asn
Thrl32Pro
61yl30Asp + Thrl32Ser + Thrl32Asn + Serl31Asp + Thrl32Gly + Glyl30Ser + Thrl32Gly + GlylSOPro
Prol28Gln + Thrl32Gly +'Glyl26Asp + Serl29Glu + Prol28Asp + Glyl26Glu + Prol28Ser + Thrl32Pro + Glyl26Asp + Serl29Glu + Glyl26Asn + Thrl32Gln + Glyl30Asp + Thrl32Ser + Serl29Asp + Thrl32Asp + Thrl32Ser + Thrl32Gln
Serl29Asp + Thrl32Glu + Prol28Gln + Glyl30Pro + Serl29Glu + Thrl32Gly + Serl31Glu + Glyl30Ser + Serl29Glu + Glyl30Asn + Thrl32Gly + Prol28Asp + Thrl32Gly + Thrl32Asn + Prol28Gly + Glyl30Pro ·* Serl31Asp + Thrl32Asp + Prol28Glu • · · • ·
Tabulka 12
Smyčka 3 - varianty s trojitou mutací
Glyl27Asp + Glyl30Gln + Thrl32Ser Prol28Asp + Glyl30Pro + Thrl32Ser Glyl27Asn + Serl31Asp + Thrl32Pro Leul25Ser + Serl31Asp + Thrl32Pro Leul25Met + Prol28Glu + Thrl32Pro Leul25Asp + Glyl26Ser + Thrl32Gln Glyl27Asn + Prol28Glu + Glyl30Asn Glyl27Ser + Prol28Gln + Serl29Glu Glyl26Pro + Glyl27Pro + Serl31Glu Leul25Ile ·+- Glyl27Asp + Thrl32Gln Glyl26Asn + Glyl30Ser + Thrl32Pro Glyl26Pro + Glyl27Gln + Thrl32Asp Glyl26Asp +· Glyl30Asn + Thrl32Gln Leul25Ser + Prol28Gln -+- Thrl32Asn Glyl26Pro + Glyl27Pro + Prol2861u Leul25Met Glyl26Glu + Glyl30Gln Leul25Met + Serl29Asp + Thrl32Gln Leul25His + Serl29Asp + Glyl30Ser Glyl27Pro + Serl29Glu + Glyl30Ser Prol28Gln + Glyl30Asn + Thrl32Gln Glyl26Asn + Glyl27Pro + Glyl30Gln Leul25Pro + Glyl26Ser + Glyl27Gln Leul25His + Glyl27Ser Serl31Glu Leul25His + Glyl27Asn + Thrl32Glu Glyl26Glu + Glyl30Pro + Thrl32Gln Leul25His ·+- Glyl27Gln + Glyl30Glu Glyl27Pro + Prol28Gly + Thrl32Asn Leul25Gly Prol28Gly + Glyl30Asp Glyl26Asn + Prol28Asn + Serl2961u Glyl26Pro + Glyl30Ser + Thri32Gly Leul25Ser + Glyl26Pro Serl31Glu Leul25Val + Glyl26Glu -+ Thrl32Gly Prol28Asn ·* Serl31Asp Thrl32Pro Leul25Gly + Prol28Asn + Thrl32Pro Glyl27Glu ·+- Prol28Ser +- Thrl32Pro Glyl27Gln + Serl29Glu + Thrl32Gln Leul25Ile ·+· Glyl27Pro + Glyl30Asp Glyl26Ser + Glyl27Asp + Glyl30Asn Prol28Glu + GlylGOPro + Thrl32Gln Leul25Val + Glyl26Asp + 61yl27Asp Prol28Asn + Glyl30Asp + Serl31Asp Glyl30Glu + Serl31Asp + Thrl32Gln Glyl26Pro + Glyl30Glu +· Serl31Asp Glyl27Glu + Prol28Glu «- Thrl32Ser Glyl3061n + Serl31Glu + Thrl32Asp Leul25Gln + Serl31Asp + Thrl32Asp Glyl30Ser + Serl31Glu + Thrl32Glu Glyl30Pro + Serl31Asp + Thrl32Asp Glyl27Pro + Serl31Glu + Thrl32Asp Leul25Asn + Serl31Asp + Thrl32Asp Prnl28Gln + Serl31Asp + Thrl32Glu
Λ7
Prol28Gly + Serl31Asp + Thrl32Asp Glyl26Gln +· Serl29Asp + Glyl30Asp Leul25Ile ·+· Serl29Asp + Glyl30Glu Glyl27Glu Prol28Asp + Serl29Glu Serl29Asp + Glyl30Asp + Serl31Asp Serl29Glu + Glyl30Asp + Serl31Glu Serl29Glu -+ Glyl30Glu + Serl31Asp Glyl26Glu + Glyl27Glu + Prol28Glu Glyl30Glu + Serl31Asp + Thrl32Asp
Tabulka 13
Smyčka 3 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Glyl26Ser + Leul25Cys +· Leul25Gln + Leul25Thr + Glyl27Gln Glyl27Asn + Leul25Met + Leul25Met + Leul25Met + Leul25Asn + Leul25Gln + Leul25Ala + Leul25Met + Leul25Cys + Leul25Gly + Leul25Met + Leul25Val + Glyl26Asn + Leul25Gln Leul25Val + Leul25Asp -+· Leul25Glu + Leul25Gln + Leul25Cys + Glyl26Gln + Glyl26Ser + Leu125Thr ·+· Prol28Asn Leul25Met + Glyl26Gln + Glyl27Asn + Glyl27Ser + Glyl27Asp + Glyl27Asp + Leul25Gln + Leul25Cys + Glyl27Gln + Leul25Met. + Glyl27Glu + Leu125Pro +
Prol28Glu Glyl27Gln Glyl26Pro Serl29Glu Prol28Gln Prol28Asn Glyl27Glu Glyl27Asn Glyl26Ser Glyl26Asp 61yl27Gln Glyl30Asn Glyl26Pro 61yl26Pro Prol28Gly Gly130Asn Gly126Pro Glyl27Pro Glyl26Glu Gly126Asp Glyl26Glu Glyl26Glu Glyl27Pro Glyl30Glu Glyl27Glu Glyl27Asp Glyl27Ser Glyl30Asn Glyí26Ser Prol28Gln Prol28Asn Serl29Glu Prol28G)u Prol28Glu Serl29Glu Serl29Glu Prol28Glu Gly126Asp Prol28Gln Gly127Asp
Glyl30Ser + Serl29Glu + Prol28Ser + Glyl30Ser +· Serl29Glu + Serl31Glu
Glyl30Asn -* Prol28Asn + Glyl27Gln + Glyl27Gln + Glyl30Glu
Serl31Asp + Glyl27Ser + Serl29Glu + Serl31Asp + Serl31Asp + Glyl30Gln + Prol28Gln + Glyl27Glu
Glyl27Glu + Glyl27Pro + Glyl27Asn + Glyl30Glu + Serl31Asp + Prol28Glu + Prol28Asp + Serl31Glu +· Serl31Asp
Serl29Asp + Serl29Glu + Serl29Glu + 61yl30Asp +· Serl29Asp
Serl29Asp + Glyl30Asp + Glyl30Asp + Serl29Glu + Glyl27Glu + Serl29Glu -+ Prol28Ser ·+· Thrl32Ser + Thrl32Pro + Serl29Glu *· Thrl32Pro + Glyl30Pro + Thrl32Gly + Thrl32Gly + Serl29Glu +· Serl31Asp + Thrl32Ser + Thrl32Pro + Thrl32Pro -+- Serl31Asp + Thrl32Asn + Thrl32Gln + Thrl32Gln -+- Thrl32Asp ·+- Serl29Glu -*· Glyl30Asn + Glyl30Pro + Thrl32Pro +· Thrl32Ser + Serl31Asp + Thrl32Gln + 61yl30Asn *· Glyl30Ser + Thrl32Asp + Thrl32Glu + Glyl30Asp r Glyl30Glu + Glyl30Glu + Thrl32Gln ·«- Glyl30Asn
Thrl.32Ser +- Serl31Asp + Serl31Glu + Glyl30Asp ·+ Prol28Glu + Thrl32Ser + Serl29Asp
Glyl26Pro + Glyl27Glu + Prol28Gly + Serl29Asp Leul25Pro + Glyl27Asp + Serl29Glu + Glyl30Glu Glyl27Asp + Prol28Ser + Serl29Glu + Glyl30Asp Glyl27Asp + Serl29Glu + Glyl30Glu + Thrl32Pro Leul25Ile + Glyl27Glu + Serl29Asp + Glyl30Asp Glyl26Glu + Glyl27Asp + Serl29Glu + Glyl30Pro Glyl26Asp + Glyl27Glu + Serl29Asp + Thrl32Pro Leul25Met + Glyl26Asp + Glyl27Asp + Serl29Asp Glyl26Ser + Serl29Asp + Serl31Glu + Thrl32Gln Glyl27Gln ·+· Prol28Asn + Serl29Asp + Serl31Asp Prol28Gln + Serl29Glu + Serl31Asp + Thrl32Ser Glyl26Pro + Serl29Asp + Serl31Glu + Thrl32Ser Leul25Ala + Serl29Glu Glyl30Pro + Serl31Asp Glyl27Gln + Serl29Glu Glyl30Ser + Serl31Asp Glyl27Ser + Serl29Glu + Serl31Glu + Thrl32Gln Glyl27Gln + Prol28Gln * Serl29Glu + Serl31Asp Leul25Ala + Glyl26Ser + Serl29Asp + Serl31Glu Glyl26Pro + Prol28Gln + Serl29Asp + Serl31Asp 61yl26Ser + Prol28Ser ·+· Serl29Asp + Serl31Glu Glyl26Glu + Prol28Asp + Serl29Asp ·+ Thrl32Asn
Tabulka 14
Smyčka 4 - varianty s jedinou mutací
Glyl53Asn Glyl53Asp Glyl53Gln Glyl53Glu Glyl53Pro Glyl53Ser Asnl54Asp Asnl54Gln Asnl54Glu Asnl54Ser Serl55Asp Serl55Glu Gly156Asn Glyl56Asp GlylSGGln Glyl56Glu Glyl56Pro G1y156Ser Serl57Asp Serl57Glu Serl58Asp Serl58Glu Glylíj9Asn Gly159Asp Glyl59Gln Glyl59Glu Glyl59Pro Gly159Ser Ser160Asp ·· ··· ·
Serl60Glu
Glnl61Asn
Glnl61Asp
Glnl61Glu
Glnl61Ser
Asnl62Asp
Asnl62Gln
Asnl62Glu
Asnl62Ser
Thr163Asn
Thrl63Asp
Thrl63Gln
Thrl63Glu
Thrl63Gly
Thrl63Pro
Thrl63Ser
Ilel64Ala
Ilel64Asn
Ilel64Asp
Ilel64Cys
Ilel64Gln
Ilel64Glu
Ilel64Gly
Ilel64His
Ilel64Leu
Ilel64Met
Ilel64Pro
Ilel64Ser
Ilel64Thr
Ilel64Val
Glyl65Asn
Glyl65Asp
Glyl65Gln
Glyl65Glu
Glyl65Pro
Glyl65Ser
Tyrl66Ala
Tyrl66Asn
Tyrl66Asp
Tyrl66Cys
Tyrl66Gln
Tyr16661u
Tyrl66Gly
Tyrl66Hís
Tyrl66I1e
Tyrl66Leu
Tyrl66Met
Tyrl66Pro
Tyrl66Ser
Tyrl66Thr
Tyrl66Val ·· ····
Tabulka 15
Smyčka 4 - varianty s dvojitou mutací
Asnl54Ser + Serl55Glu Glyl65Glu + Tyrl66Cys Serl58Asp + Glyl65Pro Serl57Asp + Thrl63Asn Glyl56Pro + Thrl63Ser Asnl54Glu + Ilel64Cys Glyl53Asn + Thrl63Asn Thrl63Glu + Ilel64Gly Glyl56Gln + Ilel64Thr Serl57Asp + Ilel64His Serl58Glu + Tyrl66His Glyl53Pro + Tyrl66Asp Glyl53Pro + Glyl65Gln Serl57Glu +- Glyl59Asn Asnl54Ser + Glyl59Pro Glyl56Glu + Asnl62Gln Glnl61Asp + Ilel64Met. Serl57Asp + Thrl63Ser Serl57Glu + Tyrl66Ile Glnl61Glu Ilel64His Serl57Glu + Asnl62Gln Glyl59Pro + Tyrl66Asp Asnl62Asp + Ilel64Cys Glnl61Ser + Asnl62Asp Asnl54Asp + Asnl62Gln Serl58Glu + Gly165Asn Jlel64Met + Tyrl66Val 61nl61Asn + Glyl65Pro Serl55Asp + Glyl59Pro Serl60Asp + Asnl62Ser Glyl56Glu + Ilel64Cys Thrl63Asp + Glyl65Pro Glyl53Asn -+ Serl55Glu Serl58Asp + Thrl63Gly Ser 160Asp Ilel64Met Glyl59Asp + Thrl63Gln Serl55Glu ·♦- Tyrl66Cys Glnl61Ser + Tyrl66Gly Serl60Asp + Ilel64Ala Serl57Asp + Glnl61Ser Serl60Glu + Asnl62Gln Glyl53Asn + Glyl56Gln Serl57Asp + Ilel64Val Asnl62Gln + Thrl63Glu Serl55Asp + Glnl61Ser Glyl59Glu + Glyl65Gln Serl60Glu + Ilel64His Glyl53Ser + Serl60Asp Glyl59Gln + Glyl65Glu Glyl53Glu + Glyl59Gln Glyl56Glu + Thrl63Gly • · · · · ·
Glyl56Ser + Tyrl66Asn Glyl53Asp + Thrl63Asn Asnl54Ser + Serl57Glu Thrl63Ser + Ilel64Pro Serl55Glu + Asnl62Ser Glyl56Pro -+- Ilel64Gly Thrl63Glu + Glyl65Asn Glyl53Gln + Serl5561u Ilel64Ser + Tyrl66Cys
Tabulka 16
Smyčka 4 - varianty s trojitou mutací
Glyl53Gln + Serl55Asp Glyl56Gln + Glyl59Gln + Asnl54Gln ·+· Asnl54Gln + Asnl62Gln + Glyl53Asp + 61yl53Gln + Asnl54Gln + Glyl53Gln + Serl57Asp + Thrl63Gly + GlnlGlGlu + Glyl56Pro ·+ Serl58Glu -+Serl58Glu + Asnl54Glu + Glyl53Asn + Serl5761u + Serl55Asp +· Glyl5361u +· Glyl56Pro + Glyl56Asn + Asnl54Gln -*· Serl58Asp + Serl55Glu + Seri58Glu + Asnl54Asp -+61yl56Asp + 61yl59Asp + Serl58Asp + flsn 1546 lu +· Serl55flsp + Serl57Asp ·+· SerlGOAsp + Gly15961η ·*· Glyl56Asp + Glyl59Asp + Gly153Pro +
Asnl54Ser Thrl63Pro Thrl63Glu GlnlGlSer Thrl63Asp Glyl59Pro Ilel64Gln Glnl&lSer Asnl54Gln Glnl61Asn Serl58Glu Ilel64Val Glyl65Asp Asnl62Gln GlnlGlGlu Glyl59Pro Glnl61flsn GlnlólSer Asnl54Gln Ilel64Val G1nlGlAsn G1nl61Asn Asnl62Asp flsnl62flsp Thrl63Asn Glyl59Asn 61nl61Asn Asnl62Ser Thrl63Gln Ser157flsp Ser160G1u Glyl59Asp Serl55Glu Glyl56Asp Ser15861u G1η161Asp Ser160Asp Serl57Asp GlnlGlGlu Gly1596]u + Serl5561u + Tyrl66Gln + Ilel64Gly
Glyl65Ser + Tyrl66Gln + Ilel64Thr + Glyl6561u +· Thrl63Pro + Tyrl66Ile + Tyrl66Pro + Tyrl66Ser + Tyrl66Ala + Tyrl66Pro + Tyrl66Thr + Thrl63Ser + GlnlólAsn + Asnl62Ser +· Glyl65Asn + Serl58Asp + Tyrl66Val + Tyrl66Ile
Glyl65Ser -»· Glyl65Pro + Ilel64Leu + Glyl65Ser + G1nlGlAsn + Tyrl66Leu + Tyrl66His + Tlel64Met + 61yl59Ser + Thrl63Gln + Tyrl66Cys +· Glyl56Ser + Asnl62Ser + 61yl59Pro + IJel64Ala + GlnlGlAsp +· Serl58Asp + Glyl65Gln + GlnlGlGlu • · ·
Serl57Glu + Serl58Asp + Glnl61Glu Serl57Glu + Glyl59Glu Glyl65Ser Serl57Glu + Glyl59Glu + Serl60Glu Serl58Asp + Serl60Asp + Ilel64Thr Serl58Asp + SerlóOGlu + Tyrl66Val Asnl5461n + Serl58Asp + SerlóOAsp Serl58Glu + SerlóOAsp + Tyrl66His Glyl53Asp + Asnl54Glu + Glyl65Glu Serl55Asp + Serl57Asp + Tyrl66Ile Serl55Glu + Serl57Asp + Glyl59Pro Glyl53Asn + Serl57Glu + Thrl63Glu Serl55Asp ·* Serl57Asp + Serl58Glu Serl57Asp + Glyl59Asp + GlnlólGlu Serl55Asp + Glyl56Glu + Serl58Asp Asnl54Gln + SerlóOGlu + Asnl62Asp Serl5861u + SerlóOGlu + Asnl62Glu Serl57Glu + GlnlólAsp + Thrl63Asp Asnl54Glu + Serl55Glu + Serl57Glu Serl57Asp + SerlóOGlu + TyrlóóGly Glyl53Asn + Serl57Glu + SerlóOAsp
Tabulka 17
Smyčka 4 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Asnl54Ser + Glyl59Asp Serl55Glu + Glyl56Ser Glyl56Gln + Serl57Asp Ser 155Asp ·+· Glyl59Pro Asnl54Gln + Glyl56Asp Asnl54Gln + Serl55Asp GlnlólSer + Asnl62Gln Serl55Asp + Glyl59Pro Asnl54Ser -► Serl55Asp Glyl59Asp + GlnlólSer Glyl53Pro ·+· Serl58Asp Glyl53Pro + GlylSóAsp Glyl53Glu + Glyl56Pro Serl55Glu + Thrl63Ser Serl57Asp + Thrl63Gly Glyl53Ser + Serl55Asp Asnl54Ser + Glyl59Gln Asnl54Ser + SerlóOAsp Glyl59Asn Asnl62Glu Glyl56Pro + Glyl59Pro Glyl53Ser + GlylSóAsn Serl58Asp + Glyl59Glu Glyl53Gln + Asnl54Glu Glyl53Ser + Serl55Asp Asnl54Ser + Serl55Glu Serl55Glu + Glyl56Glu Serl57Glu + Serl58Asp SerlóOGlu + GlnlólAsp Serl57Asp + Serl58Glu + Tlel64Met + Glyl65Pro + Asnl62Gln + Thrl63Asn + Glyl59Ser + Asnl62Ser + GlnlólSer + Ilel64Cys + Thrl63Gly + TyrlóóMet + Thrl63Asn + GlylóSSer + Thrl63Gly + TyrlóóGly + Glyl65Pro + TyrlóóGln + Thrl63Gly + Ilel64Val + Thrló3Gln + Ileló4Thr +· Asnl62Gln + Ilel64Cys + Ilel64Ser + TyrlóóLeu + GlnlólSer TyrlóóMet + Glyl65Pro + TyrlóóLeu + Ilel64Gln + TyrlóóGly + Thrl63Pro + Ilel64Pro + GlnlólGlu + TyrlóóMet + Ilel64Gln + GlylóSSer +· Glyló5Gln + TyrlóóGys + Ilel64Gln + GlylóSGln + Asnl62Gln + Glyl65Asp + GlnlólSer + Ilel64Thr + Serl55Glu + Tyrl€<661y + GlylSóAsp + Ilel64Gln + Glyl56Asp + TyrlóóVal + Thrl63Asn + Tlel64Leu + GlnlólAsn + Ilel64Cys + Thrl63Gln + GlylóSPro + Glyl59Asp ·+- 1le!64Cys • · · · · ·
Asnl54Gln + SerlĎOGlu + Glyl53Glu + Glyl59Gln + Asnl54Ser + Serl58Asp + Asnl54Glu + Glyl56Asp -+Serl58Glu + SerlGOAsp + Asnl54Glu + Serl55Asp + Serl58Glu + Glnl61Glu + Serl55Glu + Serl57Asp + Serl55Asp ·+- Serl57Asp +· Glyl59Glu + SerlóOAsp + Serl57Glu + GlnlélAsp + Asnl54Glu + Serl55Glu + Asnl54Gln ·* Serl6OAsp + SerlĎOAsp ·*- Glnl61Asp + Serl55Asp + Thrl63Asp + Glyl56Ser + Serl58Asp +· Serl55Glu + Serl58Glu + Glyl53Glu + Glyl56Pro + Glyl56Ser + Serl57Asp ·+· Glyl53Asn + Serl57Gl.u *· Glyl53Glu + Serl55Glu + Glyl56Pro + Serl57Asp + Glyl53Pro + Serl55Glu + Serl55Asp +· Serl58Glu + Serl55Asp + Serl58Glu + Glyl53Asp + Serl57Glu + Serl55Asp ·+ Glyl56Pro + Glyl56Glu + Serl57Glu + Asnl54Ser + Glyl56Asp + Glyl53Gln + Serl55Asp + Asnl54Asp Glyl56Glu +
GlnlólGlu + Asnl62Asp GlnlólAsn + Glyl65Glu Glyl59Asn + Glnl61Glu Thrl63Ser + Tyrl66Asn GlnlólAsn + Thrl63Pro Glyl56Gln + Thrl63Asp Thrl63Asp + Ileló4His Asnl62Ser + Glyl65Pro 61yl59Pro + Ilel64Cys Asnl62Glu + Ilel64Asn Thrl63Asp + Glyl65Gln Serl57Asp + Glyl59Pro GlnlólAsp + Thrl63Asp Asnl62Gln + Thrl63Asp Ilel64Gly + GlylóSAsp Thrl63Asp + Ilel64Leu Thrl63Glu + Ilel64Met Thrl63Asp + TyrlóóHis SerlóOGlu + Asnl62Asp Asnl62Asp ·+· Ilel64Leu Serl57Asp + Ilel64Met Glyl59Gln + SerlóOGlu GlylSóGlu Glyl65Asp GlnlólAsn + Glyl65Pro Glyl59Gln + Ilel64Gly Glyl59Pro + Thrl63Glu GlnlólSer + GlylóSAsp SerlóOAsp + Ilel64Ser Serl58Asp + SerlóOAsp Serl58Asp + Glyl59Glu Serl58Glu + Ilel64Ala
Tabulka 18
Smyčka 5 - varianty s jedinou mutací
Alal86Asn AlalSóAsp Alal86Gln AlalSóGlu AlalSóGly AlalSÓHis Alal86Pro AlalSóSer Alal86Thr Serl87Asp Serl87Glu Phel88Ala Phel88Asn Phel88Asp Phel88Cys Phei88G1n Phel88Glu Phel88Gly ·· ····
Phel88His
Phel88Ile
Phel88Leu
Phel88Met
Phel88Pro
Phel88Ser
Phel88Thr
Phel88Tyr
Phel88Val
Serl89Asp •Serl8.9Glu
Serl90Asp
Serl90Glu
Tabulka 19
Smyčka 5 - varianty s dvojitou mutací
Phel88Met. + Alal36Ser + Phel88Ser + Alal86His + Serl87Asp + Alal86Ser + Alal86Pro + Phel88Ser + Alal86Gln + Phel88Asn + Alal86Glu ·+ Alal86Ser + Serl87Glu + Alal86Thr + Serl87Asp + AlalSGGly + Phel88Val + Alal86Asp Alal86Asn + Phel88Leu ·+ Serl87Asp + Alal86Ser + Phel88Ala + Alal86Gly + Alal86Glu + Alal86Gly + Serl87Glu + Alal86Glu + Serl87Glu +· Alal86Ser + Alal86Gly + Phel88Ile + Alal86Thr + Alal8661y + Phel88His + Phel88Leu +
Serl90Glu Serl87Glu Serl90Asp Serl87Glu Phel88Cys Serl90Glu Ser190Asp Serl90Glu Serl87Glu Serl90Asp PhelSSMet Phel88Ala Phel88Thr Phel88Asp Phel88Leu Phel88Cys Serl90Glu Phel88Pro Serl87Asp Serl90Glu Phel88Asn Serl87Asp Serl90Glu Serl87Glu Phel88His Phel88Glu PhelSSGly Phel88Asn Phel88His PhelBSAsp Serl87Asp Serl90Glu Serl90Glu Serl9061u Serl90Asp Serl90Asp
Alal86Ser Serl87Glu +Alal86Thr Phel88Gln + Alal86His + Phel88Tyr + Alal86Pro + Alal86Gln + Serl87Glu -+ Alal86Asp ·+· Alal86Ser + Alal86Asn + Phel88His + Alal86Glu + Alal86Ser + Phel88Pro + Serl87Asp ·+· Alal86His + Alal86Asn + Phel88Ile + Alal86Thr + Alal86Asp + Serl87Asp + Alal86Pro +
Serl90Asp Phel88Ile Phel88His Serl90Glu Serl87Asp Serl90Glu Phel88Thr Serl87Asp» Phel88Ala Phel88Ile Phel88Pro Serl87Glu Serl90Glu Phel88Ser Phel88Leu Serl90Glu Phel88Tbr Phel88Ala Phel88Asp Serl90Asp Phel88Met Phel88His Phel88Ala Serl90Glu
Tabulka 20
Smyčka 5 - varianty s trojitou mutací
Alal86His + Phel88Ala + Serl90Asp Alal86Asn Serl87Asp + Phel88Ala Alal86Gly + Phel88Asn + Serl90Asp Alal86Pro Phel88Met + Serl90Asp Alal86Gly +- Phel88Leu + Serl90Glu Alal86Gln + Serl87Asp + Phel88Ile Alal86Thr + Serl87Glu + Phel88Cys Alal86Ser + Phel88Ala + Serl90Glu Alal86Gln + Serl87Asp + Phel88Ser Alal86Gln + Serl87Glu + Phel88Ile Alal86Ser + Phel88Gly -+ Serl90Asp Alal86Ser + Serl87Asp + Phel88Met Alal86Gly + Serl87Glu + Phel88Gly Alal86Gln + Phel88Pro + Serl90Asp Alal86Asn + Phel88Ala + Serl90Glu Alal86Ser Phel88Pro + Serl90Glu Alal86Asn + Serl87Glu + Phel88Pro Alal86Gln + Phel88Gly + Serl90Glu Alal86Asn -+- Serl87Glu + Phel88Ile Alal86His + Serl87Glu + Phel88Gly Alal86His + Phel88Cys + Serl90Asp Alal86Thr + Serl87Glu + Phel88Val Alal86Gln + Serl87Glu + Phel88Met AlalSGHis + Phel88Ala + Serl90Glu Alal8661y + Phel88Met. + Serl90Glu ·· ···· • · ·
AlalS6Ser + Alal86Asn + Alal86Asn + Alal86Asn + Alal86Gly + Alal86His + Alal86Ser + Alal86Thr + Alal86Pro + Alal86Thr + Alal86Pro + Alal86Asp + Alal86Asp + Alal86Asp + Alal86Glu + Alal86Asp + Alal86Glu + Alal86Asp + Alal86Glu * Alal86Asp + Alal86Asp + Alal86His + Alal86Gly + Alal86Gln + AJal86Asn + Alal86Pro + Alal86Asp + Alal86Glu + Alal86Asp + Alal86Thr + AlalS6Ser + Alal86Thr + Alal86Pro + SerlS7Glu +· Serl87Asp +
Serl87Glu Phel88Gly Phel88Pro Phel88Tyr Phel88Thr Serl87Asp Phel88Pro Serl87Glu Phel88Pro Phel88Asn Serl87Glu Serl87Glu Serl87Glu Serl87Glu Serl87Asp Serl87Glu Serl87Asp Serl87Asp Serl87Glu Serl87Asp Serl87Glu Serl87Asp Serl87Asp Serl87Glu Serl87Asp Serl87Glu Ser18761u Serl87Glu Serl87Asp Phel88Asp Phel88Glu Phel88Glu Phel88Glu Phel88Glu PhelSSAsp ·* Phel88His + Serl90Glu + Serl90Asp + Serl90Asp + Serl90Glu + Phel88Leu + Serl90Asp + Phe188Pro + Serl90Glu + Ser190Asp + Phel88His + Phel88Met + Phel88Gln + Phel88Cys + Phel88Pro + Phel88Tyr + Phel88Thr + Phel88Val + Phel88Asn + Phel88His + Phel88Ala ·+ Phel88Asp + Phel88Asp + Phel88Glu -*· PhelSSGlu + PhelSSAsp + Phel88Asp + PhelSSGlu +· Phel88Glu + Serl90Glu + Serl90Glu
Serl90Asp + Serl90Glu -+· Serl90Glu + Serl90Glu
Tabulka 21
Smyčka 5 - varianty se čtyřnásobnou mutací
Alaí86Gly + Serl87Glu Alal86Gly + Serl87Asp Alal86Gln + Serl87Asp AlalSGGln + Serl8761u Alal86Ser + Serl87Asp Alal86Pro + Serl8761u Alal86Thr + Serl87Glu Alal86Thr + Serl87Glu Alal86His +· Serl87Asp Alal86Asn ·*· Serl87Glu Alal86Gly + Serl87Glu Alal86Gln Serl87Asp Alal86Gln + Serl87Asp Alal86Gly + Serl87Glu + PhelSSAsp + Serl90Glu + Phel88Asp ·*· Serl90Asp + Phel88Asp + Serl90Asp + PhelSSAsp + Serl90Glu + Phel88Glu + Serí90Glu + Phel88Asp + Serl90Asp + PhelSSAsp + Serl90Asp + PhelSSAsp +· Serl90Glu + Phel88Glu + Serl90Asp + PhelSSAsp + Serl90Asp + PhelSSGlu + Serl90Asp + PhelSSGlu + Serl90Glu + PhelSSGlu + Serl90Asp + PhelSSAsp + Serl90Asp • · · · · ·
Alal86Asp Alal86Asp Alal86Glu Alal86Asp Alal86Glu Alal86Glu Alal86Asp Alal86Glu Alal86Asp Alal86Glu Alal8661u Alal86Asp Alal86Asp Alal86Asp Alal86Glu Alal86Glu Alal86Asp Alal86Glu Alal86Glu Alal86Glu Alal86Asp Alal86Asp Alal86Asp Alal86Asp Alal86Asp Alal86Asp Alal86Glu Alal86Glu Aía!86Glu Alal86Glu Alaí86Glu Alal86G1u Alal86Glu Alal86Asp Alal86Asp Alal86Ser Alal86His Alal86Ser Alal86Ser Alal86Gln Alal86Gln Alal86Asn Alal86Thr Alal86Pro Alal86Pro Alal86Asn + Serl87Glu + Phel88Gly + ·+· Serl87Asp Phel88Gln + + Serl87Glu + Phel88Val + + Serl87Glu + Phel88Pro +· + Serl87Asp ·+ Phel88Meh + + Serl87Asp + Phel88Ala + + Serl87Asp + Phel88His + + Serl87Glu -»· Phel88Met.
+ Serl87Asp + Phel88Ala + + Serl87Glu + Phel88Cys + + Serl87Glu + Phel88Thr + + Serl87Asp + Phel88His + + Serl87Asp + Phel88Gln + Serl87Asp + Phel88Tyr + + Serl87Asp ·+· Phel88Ser + -+- Serl87Asp ·+ Phel88Gly + + Serl87Asp + Phel88Asn + + Serl87Glu + Phel88Cys + + Serl87Asp + Phel88Ile + + Serl87Glu + Phel88Val + ·«- Serl87Asp +· Phel88Cys + + Serl87Glu + Phel88Val + + Serl87Glu + Phel88Ser + + Serl87Asp +· Phel88Ala ·*+ Serl87Asp ·+ Phel88Gly + + Serl87Asp + Phel88Thr + + Serl87Glu + Phel88His + + Serl87Asp ·+ Phel88Pro + + Serl87Glu + Phel88Ile + + Serl87Glu -+ Phel88Pro +· + Serl87Glu + Phel88Gly + + Serl87Glu + Phel88Pro + + Serl87Asp + Phel88Ser + + Serl87Asp Phel88Tyr +· ·+ Serl87Glu + Phel88His +
Serl87Glu + Phel88Ser + + Serl87Glu + Phel88Ser + + Serl87Asp + Phel88Cys + + Serl87Glu + Phel88Asn + + Serl87Glu + Phel88Ala + + Serl87Asp + Phel88Met + + Serl87Glu + Phel88His + + Serl87Glu + Phel88Ala + + Serl87Asp ·+· Phel88Cys + + Serl87Asp + Phel88Leu + +· Serl87Asp +· Phel88Gln +
Serl90Asp Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu Serl90Glu Serl9061u Serl90Asp Serl90Glu Serl90Glu Serl90Asp Serl90Glu SerlOOGlu Serl90Glu Serl90Asp Ser190Asp Serl90Asp Serl90Asp Serl90Glu SerlOOGlu Serl90Glu Serl90Asp Serl90Glu Serl90Asp Serl90Asp SerlOOGlu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu Serl90Glu SerlOOAsp Ser190Asp SerlOOGlu Serl90Glu SerlOOGlu Serl90Glu SerlOOGlu Serl90Glu SerlOOGlu Serl90Asp SerlOOGlu Serl90Asp SerlOOGlu SerlOOGlu SerlOOAsp SerlOOG1u
Tabulka 22
Smyčka 6 - varianty s jedinou mutací
Alal99Asn
Alal99Asp
Alal99Gln
Alal99Glu
Alal99Gly
Alal99His
Alal99Pro
Alal99Ser
Alal99Thr
Pro200Asn
Pro200Asp
Pro200Gln
Pro200Glu
Pro200Gly
Pro200Ser
Gly201Asn
Gly201Asp
Gly201Gln
Gly201Glu
Gly201Pro
Gly201Ser
Val202Ala
Val202Asn
Val202Asp
Val202Cys
Val202Gln
Val202Glu
Val2026Jy
Val202Hís
Val202Met
Val202Pro
Val202Ser
Val202Thr
Ser203Asp
Ser203Glu
Val204Ala
Val204Asn
Val204Asp
Val204Cys
Val204Gln
Val204Glu
Val204Gly
Val204His
Val204Met
Val204Pro
Val204Ser
VaJ204Thr
Tyr205Ala
Tyr205Asn
Tyr205Asp
Tyr205Cys ·· ···· ♦ ·· • · · • ···· · • · ··· · • · · • · · • *·· · • · ·· ·
Tyr205Gln
Tyr205Glu
Tyr205Gly
Tyr205His
Tyr205Ile
Tyr205Leu
Tyr205Met
Tyr205Pro
Tyr205Ser
Tyr205Thr
Tyr205Val
Ser206Asp
Ser206Glu
Thr207Asn
Thr207Asp
Thr207Gln
Thr207Glu
Thr207Gly
Thr207Pro
Thr207Ser
Tyr2G8Ala
Tyr208Asn
Tyr208Asp
Tyr208Cys
Tyr208Gln
Tyr208Glu
Tyr208Gly
Tyr208His
Tyr208Ile
Tyr208Leu
Tyr208Met
Tyr208Pro
Tyr208Ser
Tyr208Thr
Tyr208Val
Pro209Asn
Pro209Asp
Pro209Gln
Pro209Glu
Pro209Gly
Pro209Ser
Ser210Asp
Ser210Glu
Asn211Asp
Asn211Gln
Asn211Glu
Asn211Ser
Thr212Asn
Thr212Asp
Thr212Gln
Thr212Glu
Thr212Gly
Thr212Pro
Thr212Ser
Tyr213Ala • · ·
Tyr213Asn
Tyr213Asp
Tyr213Cys
Tyr2l3Gln
Tyr213Glu
Tyr213Gly
Tyr213His
Tyr213Ile
Tyr213Leu
Tyr213Met
Tyr213Pro
Tyr213Ser
Tyr213Thr
Tyr213Val
Thr214Asn
Thr214Asp
Thr214Gln
Thr214Glu
Thr214Gly
Thr214Pro
Thr214Ser
Ser215Asp
Ser215Glu
Leu216Ala
Leu216Asn
Leu216Asp
Leu216Cys
Leu216Gln
Leu216Glu
Leu216Gly
Leu216His
Leu2i6Ile
Leu216Met
Leu216Pro
Leu216Ser
Leu216Thr
Leu216Val
Asn217Asp
Asn217Gln
Asn217Glu
Asn217Ser
Gly218Asn
Gly218Asp
Gly218Gln
Gly2í8Glu
Gly218Pro
Gly218Ser
Thr219Asn
Thr219Asp
Thr219Gln
Thr219Glu
Thr219Gly
Thr219Pro
Thr219Ser ·· ···· ·· · · · • · · · • 9 999 9
9 9
999 99 9
Tabulka 23
Smyčka 6 - varianty s dvojitou mutací
Val204Ser + Ser210Glu Pro200Gly + Thr214Gly Thr212Asn + Thr219Gly Thr207Ser + Asn211Glu Val204Asn + Tyr208Thr Ser215Asp + Asn217Gln Pro200Gly + Ser215Glu Tyr208Gln + Tyr213Glu Pro200Gln + Leu216Glu Thr207Gln + Ser215Asp Tyr205Gly + Thr219Gly Tyr208Gly +- Asn211Glu Val202Cys + Gly218Asn Tyr205Ser + Tyr213Leu Alal99Asn + Gly218Pro Thr207Gln + Thr214Glu Asn211Gln + Ser215Asp Alal99Gly + Gly218Glu Pro200Asn + Thr214Glu Val204Thr + Pro209Asp Pro209Gly +- Tyr213Cys Thr214Gln +- Asn217Gl.u Pro200Gln + Pro209Glu Asn211Asp + Thr219Gly Ser203Asp + Val204Gln Tyr205Val + Gly218Glu Tyr205Gln + Thr219Glu Ser203Asp + Leu216Ala Ser210Asp + Gly218Pro Val202Ala + Val204Ser Alal99Pro + Val204Ala Tyr205Gln +· Tyr213Gln Tyr205Leu + Pro209Asp Val204Ser ·* Tyr208Met Thr212Asp + Tyr213Met Val202Ser + Asn211Asp Val202Asp + Tyr213Ser Ser203Asp + Tyr205Ser Tyr213His + Thr219Glu Val202Pro + Asn217Glu Val202Ser + Ser210Asp Val202Thr ·+· Ser215Asp Tyr205Ser +- Tyr208Pro Val204Gly + Ser210Glu Thr212Glu + Thr219Gln Tyr208Ala Gly218Glu Pro200Gly + Tyr213Asp Thr207Pro +· Asn211Asp Pro209Gly + Tyr213Ala Val204Met -+- Ser210Asp • · · · · ·
Thr214Pro + Asn217Ser Val204Gln + Gly218Pro Tyr205Pro + Thr214Glu Alal99Gln + Ser215Asp Alal99Pro + Ser203Asp Gly201Pro + Thr212Ser Tyr205Pro + Tyr213His Val204Gln + Thr207Ser Thr207Gly + Thr219Asn Pro200Gln + Thr214Pro Val202Cys + Ser215Asp Gly201Pro + Thr214Ser Val204Ser + Pro209Glu Ser203Asp + Asn211Gln Val202Met + Thr212Pro Tyr205Gln + Thr207Asn Alal99Gln + Tyr213Met Gly201Ser + Ser210Asp Gly201Ser + Thr212Asn Tyr208His + Pro209Gly Pro209Gln + Ser215Glu Tyr208Pro + Leu216Thr Tyr213Asp + Thr219Gln Pro209Gln + Thr212Gly Tyr208Met + Pro209Gly Pro209Gly + Asn211Asp Asn211Asp + Tyr213Ser Val202Gln + Ser210Glu Ser203Glu + Thr207Gln Pro200Gln + Val204Thr Asn211Asp + Thr214Ser Ser210Asp + Thr212Gln Val20461η + Thr219Glu Val202Gln + Tyr205His Thr214Glu + Gly218Pro Pro209Asn + Asn211Ser Alal99Gln + Asn217Glu Pro200Gly + Asn211Ser Gly201Pro + Tyr208Val Val202Asn + Tyr208Cys Val202Gln + Ser215Asp Alal99Pro + Thr219Ser Gly218Pro + Thr219Glu Alal99Gln + Pro200Ser Thr207Pro + Asn217Asp Val204Ser + Asn217Gln Ser203Asp + Val2O4Met Ser203Asp + Thr219Pro Thr212Pro + Thr219Pro Tyr205Ser + Ser210Glu Alal99His + Gly201Gln Pro209Gly + Ser210Glu Tyr208Gln + Leu216Asn Gly201Ser + Tyr205Leu Val202Met + Thr2t4Glu • · · · · ·
Tyr205Ser + Pro209Asp Pro209Ser + Thr212Glu Tyr205Gly + Asn217Asp Pro200Ser + Leu216Ser Alal99His + Tyr208His Asn211Glu + Thr219Asn Alal99Asn +· Ser210Glu Tyr205Val + Tyr208His Thr207Ser + Asn211Asp Gly201Ser + Thr207Ser Thr207Asn + Tyr208Val Tyr205Glu + Asn217Gln Tyr208Pro + Thr212Glu Val204Thr + Asn211Glu Tyr205Cys + Asn217Asp Leu216Glu + Thr219Ser Tyr208Ala + Thr2í2Pro Alal99Ser + Ser203Glu Val204His + Thr212Ser Val204Gln + Gly218Ser Alal99Asn + Ser203Glu Pro200Gln + Val202Met Alal99Asn + Ser203Asp Tyr205Pro + Leu216Asp Tyr205Gln + Ser210Asp Ser21OAsp + Asn211Gln Alal99Pro + Asn217Asp Alal99Gly + Asn211Asp Tyr205Ile + Leu216Met Tyr205Gly Thr214Asn Pro209Glu + Thr219Ser Pro200Gln + Ser210Glu Alal99Gly + Pro200Asn Tyr205Asp + Tyr213Val Ser203Asp + Asn217Gln Val204Met + Thr219Ser Val202Thr + Gly218Ser Pro200Gly + Tyr205Cys Thr207Gly + Thr219Asp Ser215Glu + Gly218Pro Gly201Pro + Tyr205Met, Tyr205Ser + Asn217Asp Val202Ser + Pro209Gln Pro200Gly + Gly218Asn Tyr208Ser + Pro209Asp Pro209Gln + Ser215Asp Alal99Thr + Asn217Glu Thr214Asn + Leu216Asp Ser210Asp ·+· Tyr213Val Thr207Asn + Gly2í8Asp Thr212Pro + Thr219Glu Tyr213Asn + Leu216Glu Gly201Pro + Thr212Asp Gly201Gln + Asn211Ser Val202Met + Leu216Ala • · · ·
Ser215Asp + Leu216Gly Gly201Gln + Leu216Cys Leu216Gly + Thr219Ser Val204Gln + Thr214Gln Thr207Ser + Ser215Glu Thr207Gly + Asn217Glu Pro200Asn + Tyr213Ala Thr212Asp + Thr219Pro Tyr205Glu + Leu216Ile Val202Asp + Tyr208Gly Tyr208Cys + Pro209Asp Thr207Asn + Tyr208Ile Pro200Gly + Ser210Asp Asn211Glu + Thr212Pro Alal99His + Leu216Ser Val204Thr + Asn211Asp Gly218Ser + Thr219Gly Ser203Glu + Val204Ala Val202Thr -+· Thr219Gly Thr212Asp + Asn217Gln
Tabulka 24
Smyčka 6 - varianty s trojitou mutací
Thr207Ser + Thr212Asn + Thr219Gly Alal99Asn + Thr207Ser ·+- Asn211Glu Pro200Gln + Leu216Glu + Gly218Asn Tyr205Gly -+· Thr207Gln + Ser215Asp Tyr208Gly + Asn211Glu + Thr2í9Gly Val204Thr Pro209Asp + Tyr213C.ys Val204Asn + Thr212Gly + Asn217Glu Pro200Se?r + Tyr208Ser -»· Thr214Gly Alal99Ser -+- Gly201Ser -*· Thr214Ser Alal99Gly + Val202Met + Ser210Glu Gly201Asn + Tyr205His + Thr214Gln Alal99Thr +· Asn211Asp Gly218Ser Thr207Gln ·+ Tyr213Gln + Leu216Met Alal99Gly +· Val202Cys + Ser210Asp Val204Gln + Tyr213Ala + Thr214Pro Tyr213Leu + Asn217Ser + Thr219Glu Pro200Gly + Thr214Pro Asn217Asp Pro200Gly + Leu216Val + Thr219Gln Pro200Gly + Gly201Ser + Ser210Asp Gly20lGln + Val202His + Thr2í2Glu Tyr208His + Asn211Ser + Asn217Asp Thr207Ser + Ser210Asp + Gly218Ser Thr212Asn Leu216Asn +- Thr219Glu Val202Pro + Val204Met. + Pro209Asp Val202Asn + Thr212Pro ·+- Thr214Glu Tyr20811e + Thr212Asp +- Tyr213His Ser210Asp + Thr212Ser + Leu216Ala Pro200Gln + Thr214Pro + Leu216His Tyr208Met. + Pro209Asp + Leu2í6Ile • · · · · ·
Val202Met Pro200Ser Val204Thr Thr212Glu Val204Thr Thr207Gly Ser203Glu Alal99Ser Alal99Asn Pro200Gln Alal99Asn Pro200Gln Tyr205Ile Pro200Gln Alal99Gly Va1204Met Val202Thr Gly201Pro Val202Ser Pro200Gly Alal99Thr Thr207Asn Gly201Pro Gly201Gln Val204Gln Thr207Ser Pro200Asn Thr212Asp Thr207Asn Alal99His Val204Thr Ser203Glu Thr207Gly Gly201Asn Gly201Asn Thr207Gln Tyr205His Pro200Gly Alal99Ser Gly201Ser Alal99Gln Pro200Ser Pro200Gln Alal99Gly Thr207Asn Tyr205Pro Val204His Tyr205Pro Alal99Asn Tyr208Gln Val202Glu Val204Gln Thr214Gln Val204Thr VaI204Gly + Leu216Gly + Tyr205Val + Tyr205Glu + Leu216Ile + Tyr208Pro + Leu2l6Glu + Tyr208Ala + Val204His + Val204Gln + Thr214Pro + Val202Met + Ser210Asp + Thr214Asn + Pro209Glu + Pro200Asn + Asn2l7Gln + Thr214Asp + Tyr205Met + Tyr205Ser + Pro209Gln + Thr214Asn + Thr212Pro ·* Asn211Ser + Ser215Asp + Leu216Cys + Thr21461n + Thr207Gly + Tyr2l3Ala + Tyr208Ile + Asn211Glu + Asn211Asp + Val204Ala + Thr212Gly + Thr207Gly + Val202Glu + Leu216Glu + Ser210Asp + Tyr208Val + Ser203Asp + Asn211Glu + Tyr205His + Thr207Pro + Tyr205Met + Val204His + Thr212Ser + Thr207Gln + Gly218Glu + Tyr208Ile + Pro200Ser + Tyr213Met + Val204Thr + Pro209Gln + Ser215Asp + Tyr213Ue + Asn211Gln + Thr219Gly + Leu216Cys + Asn2l7Gln + Asn2l7Ser + Asn211Glu *· Thr219Ser + Thr212Pro + Thr212Ser + Gly218Ser + Gly218Asp + Ser203Asp + Asn211Gln + Leu216Met + Thr219Ser + Ser210Glu + Thr2l9Ser + Gly218Ser
Gly2l8Pro + Asn2l7Asp + Gly218Asn + Asn217Glu + Gly218Asp + Thr212Asp + Leu2l6Gly + Thr219Ser + Ser2l5Glu + Asn217Glu + Thr219Pro + Pro209Glu + Thr212Pro + Leu2l6Ser + Thr219Gly + Leu216His + Tyr208Gly + Thr207Ser + Gly218Ser *· Thr2l9Pro + Ser210Asp + Tyr208Gln + Tyr213Pro + Thr219Glu + Thr2l4Ser + Thr212Pro
Asn211Glu + Thr219Asn + Ser215Glu + Thr219Gly +· Ser215Glu + Ser203Glu + Thr219Glu + Asn217Ser + Thr214Gly + Leu216Gly + Ser215Glu + Ser215Glu
Pro200Gly + Tyr213Leu + Thr214Pro + Pro200Gly + Leu216Val + Asn217Asp + Alal99Thr + Val204Ala + Asn217Gln + Gly201Gln + Val204Gln + Thr207Gln + Pro200Asn + Val202Pro + Thr207Gly + Alal99Ser + Gly201Pro + Ser215Asp + Alal99Thr + Tyr205Gly + Ser215Glu + Alal99Gly + Thr207Gln + Tyr208Thr + Alal99His + Pro200Gly + Gly218Gln + Alal99Gly + Thr207Asn + Asn211Ser + Pro200Ser + Val202Gln + Tyr208Ile + Pro200Gln + Tyr208Met + Pro209Asp + Ser203Asp + Asn211Gln + Leu216Thr + Alal99Gly + Gly201Ser + Tyr205Asp + Alal99Gln + Gly201Asn + Tyr205Gln + Pro200Ser + Gly201Pro + VaI204Asn + Gly201Pro + Val202Gly + Ser210Asp + Pro200Gly + Val202Cys +· Ser203Asp + Tyr205Gly + Thr207Pro + Asn211Gln + Gly201Pro + Thr207Gln + Thr212Ser + Pro200Gln + Tyr208Leu + Tyr213Met. -*· Tyr205Met ·+ Asn211Gln + Tyr213Met + Val202Met + Tyr205Leu + Tyr208Thr + Ser203Asp + Val204Ser + Tyr213Gly + Gly201Gln + Val2O2Met + Ser215Asp ·+· Val204Gln + Thr214Gln + Leu216Cys + Pro200Asn + Thr212Asp + Tyr2i3Ala + Alal99His + Val204Thr + Asn211Asp + Val202Thr + Ser203Glu + Val204Ala + Thr207Gly + Tyr208Gly + Thr212Gly + Gly201Asn + Ser203Glu + Thr207Gly + Tyr205His + Thr2O7Gln + Leu216Gly -*· Alal99Gln + Tyr205His + Tyr213Pro + Alal99Gly + Tyr205Met + Asn211Glu + Gly201Pro + Thr207Asn + Thr212Gln + Pro200Gln + Leu216Thr + Asn217Glu + Gly201Ser + Tyr205Cys + Thr214Asn + Gly201Gln + Val204Pro + Asn211Asp + Ser203Asp + Tyr205Val + Thr207Ser + Val202His + Pro209Gln + Ser215Asp + Pro200Asn + Gly201Gln + Val202Pro + Pro200Ser + Gly201Gln + Val202Hís + F’ro200Asn + Gly201Asn + Leu216Ala + Alal99Pro + Val202Ser + Val204His + Gly201Gln -+- Ser203Glu + Tyr213Ile + Alal99His + Ser203Asp + Val204Gly + Pro200Gln + Val202Ala + Val204Pro + 61y201Asn + Thr212Ser -» Tyr213Ala + Gly201Gln + Tyr213Cys + Thr214Gly + Alal99Gln + Pro200Ser + Gly201Asn + Alal99Ser + Val204Gly + Leu216Val + Pro200Gly + Val202His + Thr207Gln + Alal99Thr + Tyr208Gln + Thr212Ser + Pro200Ser + Thr207Ser + Tyr2081le + Val204Pro + Tyr20GAsp Tbr214Pro +
Asn217Ser Thr219Gln Gly218Gln Leu216His Ser215Asp Leu216Ser Asn217Ser Pro209Gln Thr219Gln Thr212Ser Thr219Pro Leu216His Gly218Gln Leu216Gly Thr214Asp Tyr208Pro Leu216Met Leu216Pro Asn217Ser Asn217Asp Leu216Gln Thr219Asp Tyr213Gly Gly218Pro Leu216Ala Thr219Ser Thr219Pro Leu216Ser Thi219Asn Leu216His Asn211Gln Gly218Ser Thr219Glu Thr212Pro Thr219Asn Thr219Pro Leu216Thr Gly218Pro Leu216Cys Leu216Gly Ser203Glu Leu216Thr Gly218Pro Thr214Glu Gly218Asn Asn211 Gin Thr207Pro Gly218Asp Gly218Glu Thr214Asp Thr219Pro Asn217Asp Thr219Pro G1 y218Asp Asn2l7Ser • · · · · ·
Gly201Pro + Gly201Ser ·+ Gly201Pro + Val202Asn + Gly201Pro + Pro200Gln + Gly201Asn + Pro200Ser + Alal99Pro + Pro200Asn + Val204Cys + Val202Gln + Alal99Asn + Alal99Asn + Pro200Asn + Val204Gln + Pro209Asn + Pro200Gly + Val204Ser + Gly201Asn +Ser203Glu + Pro200Asn + Alal99Thr + Alal99Thr + Gly201Asn + Gly201Pro + Alal99Pro + Alal99Gly + Pro200Asn Pro200Gly + Alal99Ser + Val204Ala + Pro200Gln + Alal99His + Pro200Gln +· Val202Ala + Thr207Gln + Gly201Asn + Alal99Ser + Gly201Gln + Val202Cys + Alal99Gly + Alal99Gln + Pro200Gln + Gly201Gln Ser203Asp + Alal99Asn + Pro200Gly + Tyr205Ile + Pro200Gln + Alal99Ser + Gly201Pro +Val202Met. + Pro200Gln + Val204Thr +
Tyr205Met + Tyr213Val + Tyr208Ser + Asn211Glu + Tyr205Gln Tyr208Cys + Tyr208Asn + Gly201Pro + Pro200Ser + Ser203Asp + Pro209Ser + Va1204Ser + Pro209Gly + Val204Thr + Val204Met + Pro209Gly + Tyr213Ile + Ser203Asp +· Tyr208Ile + Tyr205Ile + Val204Gln + Ser210Asp + Pro200Asn + Val202Met + Thr212Gln + Tyr208Asn + Gly201Gln ·+· Pro200Gln + Val202Asp + Tbr207Asn + Pro200Gly + Thr207Asn + Gly201Ser + Gly201Asn + Val204Met + Tyr205Leu + Pro209Asn Ser203Asp + Pro200Gly + Asn211Gln + Thr2O7Asn + Val202His + Thr212Pro + Val202Gln + Thr207Pro + Val204Gln + Ser203Glu + Tyr213Met + Tyr213Ue + Thr207Gly + Tyr208Ala + Val204Ser + Thr207Pro + Gly201Pro + Thr212Gly +
Asn211Asp + Thr214Pro + Thr212Gly + Tyr213Leu ·+ Thr207Gly + Ser215Glu + Tyr213Pro + Tyr213Asp + Thr212Asp + Thr207Gln + Ser215Asp Thr212Asp + Asn211Glu + Ser210Asp + Thr207Gln + Thr2í2Gly + Thr214Gly + Leu216Cys +· Asn211Asp ·+Pro2Q9Gln + Tyr213Leu + Thr214Ser + Ser210Glu + Tyr205Leu + Thr214Glu + Pro209Asn + Thr207Gly + Tyr208Asn + Pro209Ser + Leu216Asn +· Val202Asp + Ser210Glu -+Tyr205Thr + Tyr208Ala Tyr205Ala + Thr214Glu + Ser210Glu + Tyr208Val + Leu216Val + Thr212Glu + Tyr213Pro + Val204Ala + Tyr213Glu + Thr214Gln -+Tyr208Met + Tyr208Ser + Val204Asn + Leu216Val + Thr214Asn + Ser215Glu + Asn211Gln +· Tyr205His + Thr212Gly + Tyr208Thr + Thr214Glu +
Thr214Pro Ser215Asp Tyr213Ala Thr219Pro Thr212Gly Thr219Gly Ser215Glu Gly218Pro Thr219Ser Thr212Gly Gly218Gln Asn2l7Gln Thr214Pro Tyr213Leu Tyr213Asp Tyr213Cys Leu216Met Asn217Ser Leu216MetLeu216Val Gly218Asn Leu216Cys Leu216Cys Thr214Asp Thr219Ser Tyr213Ser Ser210Asp Leu216Thr Gly218Pro Thr219Asp Thr207Ser Tyr213Met Ser215Glu Ser210Asp Pro209Glu Thr219Gln Thr214Pro Asn211Gln Gly218Pro Leu216Ala Leu216Asp Ser215Glu Leu216Ala G)y218Glu Thr219Pro Leu216Pro Tyr208Pro G1y218Asn Thr219Pro Leu216Met Thr219Asp Thr219Asp Asn217Glu Ser215Glu Gly218Ser
Pro200Gln Tyr213Met Thr207Ser Thr207Gln Tyr205Ala Tyr205Met. Thr207Asn Val202Thr Pro200Gln Asn211Glu Gly201Asn Thr212Asp Val204Ala Pro200Gly Pro209Gln Pro200Ser Alal99Pro Pro209Asp Val202Asp Ser203Asp Pro200Ser Ser203Asp Ser203Glu Gly201Asn Ser203Glu Alal99Gln Ser203Glu Ser203Asp Gly201Ser Asn211Glu Alal99Pro Alal99Asn Pro200Gln Ser203Asp Alal99Ser Pro200Ser Alal99Asn Pro200Gly Gly201Asn Alal99Asn Tyr205Glu Gly201Gln Alal99Ser Asn21lSer Ser203Asp Val202Glu Val202Asp Ser203Asp Val202Asp Tyr208Gly Pro200Gln Gly201Gln Ser203Asp G1y201G1 n Thr207Gln ·+ Tyr208Ala + Thr214Ser + Pro209Asp + Asn211Gln + Tyr213Met +· Thr214Asp + Thr214Gly + Val204His + Asn211Asp + Thr212Glu + Val202Glu + Tyr213Asp + Thr212Glu + Ser210Asp + Ser210Asp + Val204Met + Val202Ala +- Ser210Asp + Ser203Asp + Ser215Asp + Ser203Glu + Pro209Gly + Thr214Gln + Ser203Asp + Thr207Ser + Ser203Glu »- Val204Asn + Thr207Gln + Ser203Glu + Thr212Asp + Ser203Asp + Pro209Asp + Tyr205Leu + Tyr205Glu + Val202Glu + Thr212Pro + Val202Pro + Thr207Ser + Val202Glu + Ser20361u + Thr214Pro + Thr212Ser +- Tyr213Asp + Ser215Asp + Thr212Gln + Thr212Gly + Val204Cys + Pro209Gln + Tyr205Glu + Thr214Asp + Tyr208Gln -+- Tyr205Leu + Val2046ly + Val202Pro + Pro2G9Ser + Tyr213Glu + Ser215Asp -*· Thr212Gly + Thr214Glu + Thr214Glu + Ser215Glu + Leu216Glu + Asn211Glu +· Thr212Glu + Tyr213Ile + Ser203Glu + Gly218Ser + Tyr213Glu + Asn211Glu + Asn211Glu + Ser210Asp + Ser210Glu + Asn211Glu + Tyr213Gln + Leu216Glu + Leu216Glu + Ser215Glu + Ser215Glu + Tyr213Ala + Tyr213Gly + Thr214Pro + Thr212Gly + Tyr208Cys + Thr214Pro + Tyr213Glu + Val204Pro + Asn211Glu + Pro209Glu + Tyr208Gly
Leu216Cys + Thr214Glu + Ser215Glu + Ser215Glu +· Thr207Ser +· Tyr205Glu
Ser215Asp + Tyr213Glu + Thr214Pro + Asn217Glu + Ser215Asp + Ser215Asp -*· Tyr208Pro + Tyr213Thr + Tyr208Gly
Asn21761u +· Tyr213Glu + Thr214Glu + Thi'212Glu + Asn211Glu + Asn21lAsp +· Asn217Ser + Leu216Pro + Thr219Gln + Ser215Asp + Ser215Asp + Asn217Gln + Asn217Asp *· Thr212Asp + Thr214Ser ·+ Thr214Asn + Thr212Gly + Thr219Gly + Thr214Asn + Thr212Pro
Thr219Pro ·* Asn211Glu + Asn211Glu ·+ Thr212Pro + Asn217Glu + Thr219Asn + Asn217Glu + Leu216Ala + Gly218Ser + Ser215Glu + Ser215Asp + Asn217Asp + Asn217Glu + Asn2l7Glu +· Asn217Asp + Thr21961y + Leu216Glu + Tyr213Ile + Thr212Asp + Tyr213Leu + Gly218Asp + Leu216Glu + Asn217Asp + Asn217Glu + Leu216Glu + Asn217Gln + Asn217Glu + Ser215Glu + Ser2l5Glu + Gly218Asp -*· Gly218Asp + Leu216Gln + Thr219Glu + Thr214Asp + Leu216Ile +· Gly21.8Asp + Leu21GGlu + Asn217Asp -+· Ser215Asp + Thr214Glu + Thr214Glu • · · · · · • ·
Tyr205Ala + Ser210Glu Alal99Gln + Thr214Glu Thr212Asp + Thr214Glu Gly201Asn + Asn21161u Pro209Asp +· Ser215Asp Gly201Pro + Val202Cys Ser203Glu + Thr212Gln
Thr212Asp ·+· Ser215Asp Leu216Glu + Thr219Glu Leu216Asn + Asn217Glu Thr214Asp + Leu216Glu Leu216Asp + Gly218Gln Ser203Asp + Thr219Asp Gly218Gln + Thr2l9Glu
Tabulka 26
Smyčka 6 - varianty s pětinásobnou mutací
Gly201Asn + Thr207Gln + Ser210Glu + Tyr213Ile + Leu216Ile Val202Cys + Tyr205Ser + Thr212Pro + Tyr213Leu + Gly218Asn Alal99Ser + Pro200Ser + Tyr213His + Thr214Gln + Leu216Asn Alal99Ser + Gly201Ser + Tyr208Ser + Ser210Glu + Thr214Ser Alal99Gly + Gly201Asn + Val202Met + Tyr205His + Thr214Gln Pro200Gly * Tyr213Leu + Thr214Pro Asn217Ser + Thr219Glu Alal99Thr + Tyr205Gln + Thr207Gln + Thr212Asp + Gly218Gln Val204Gly + Tyr205Ala + Tyr208Gly + Asn211Gln + Gly218Asp Alal99Ser + Gly201Pro + Tyr205Gly + Ser21561u + Leu216Ser Alal99His + Thr207Gln + Tyr208Thr ·+· Gly218Gln ·* Thr219Gln Alal99Gly + Pro209Gly + Asn211Ser + Thr212Ser + Tyr213Ser Pro200Ser + Val202Gln + Thr207Asn + Tyr208Ile + Thr219Pro Pro200Ser + Gly201Ser -+ Tyr208Gln + Ser210Glu + Asn217Gln Alal99Gly + Gly201Ser + Val202Gly + Tyr205Asp + Leu216Gly Alal99Gln + Pro200Ser + Gly201Ser + Tyr205Gln + Thr214Asp Alal99Pro + Gly201Pro + Val204Asn + Tyr208Pro + Thr214Gly Pro200Gly ·+· Val202Gly + Ser203Asp ·*· Asn211Ser + Leu216Pro Tyr205Gly + Thr207Pro + Pro209Asp + Asn211Gln + Asn217Ser Pro200Gln + Val204Ala + Tyr208Leu + Thr212Glu + Tyr213Met Tyr205Mtet + Asn211Gln + Tyr213Met + Thr214Asn + Thr219Asp Ser203Asp + Val204Ser + Tyr213Gly + Thr214Asn + Gly218Pro Gly201Gln + Val204Gln + Ser215Asp + Leu216Ala + Thr219Ser Gly201Asn + Thr207Gly + Tyr208Gly + Thr21261y + Leu216His Gly201Asn Tyr205His + Thr207Ser + Leu216Glu + Gly218Ser Alal99Gln + Pro200Ser + Tyr205His + Thr214Ser + Thr219Glu Pro200Gln + Gly201Gln + Leu216His + Asn217Asp + Gly218Gln Alal99Gly + Val204His + Tyr205Met + Asn211Glu + Thr212Pro Val204His + Tyr205Pro + Tyr208Ile + Gly218Glu Thr219Gly Pro200Ser + Val202Gln + Val204Gly + Tyr213Ile + Ser215Glu AJal99Ser + Pro200Asn + Asn211Glu + Tyr213Thr + Leu216Pro Ser203Asp + Val204Gly + Asn211Gln + Tyr213Ile + Gly218Asn Alal99Asn + Pro200Gln + Val202Ala Val204Pro + Thr207Pro Alal99Thr + Gly201Gln + Val202Gly + Ser215Asp + Leu216Ala Thr212Gln + Tyr213Val + Leu216His + Gly218Glri + Thr219Glu Alal99Gln + Pro200Ser + Gly201Asn + Tyr205Ala + Thr214Gly Gly201Asn + Val204Gly + Thr212Gly + Leu216Val + Thr219Pro Pro200Gly -*· Val202His + Thr207Gln + Tyr208Gln + Asn217Asp Alal99Thr + Thr207Ser + Thr212Ser + Gly218Asp + Thr219Pro Pro200Ser + Val204Pro + Tyr208Ile + Thr214Pro +· Asn217Ser Pro200Gln + VaI202Ser + Tyr205Ser Asn211Ser + Ser215Asp Val202Thr + Thr212Gln + Ser215Asp + Asn217Ser + Thr219Asn Val204Pro + Thr212Gly + Tyr213Val + Thr214Pro + Ser215Asp • · · · · ·
Gly201Ser Ser203Asp Pro200Gln Pro200Ser Val204Gly Pro200Gly Tyr205Thr Gly201Asn Alal99Asn Alal99Thr Alal99Pro Alal99Ser Pro200Ser Gly201Ser Alal99Ser Thr207Pro Gly201Gln Pro200Asn Tyr205Ala Alal99Gln Pro200Ser Alal99Ser Pro200Gln Pro200Ser Alal99Asn Tyr205Ile Gly201Ser Alal99Ser Alal99Ser Alal99His Alal99Asn Ser203Glu Pro200Ser Gly201Ser Val202Asp Alal99Gly Gly201Pro Alal99Asn Gly201Asn Val202Thr Alal99Gln Gly201Pro Val204Gly Val202Gly A la!99Ser Alal99Asn Alal99Gln Tyr20*5Met Alal99Pro Pro200Asn Va1204Ser Tyr205Pro Pro200Gly Val202Thr Gly201G]n + Val204His + Tyr205Gln + Tyr208Cys + Gly201Pro + Ser210Asp + Ser203Asp + Thr207Ser + Tyr205Ile + Ser203Glu + Val202Met + 61y201Pro + Gly201Pro + Pro209Gly + Thr207Gly + Gly201Gln +· Tyr208Thr + Tyr205Asn + Tyr205Glu + Tyr213His +- Pro200Gly + Val204Ala + Pro200Ser + Val202Gln + Gly201Gln + Ser203Asp + Tyr213Ile + Val204His + Gly201Pro + Thr207Ser + Val204Cys + Val202His +· Tlir207Pro + Val202Asp + Thr207Asn + Val204Gln + Val202Thr + Val202Cys + Gly201Ser + Ser2O3Asp + Tyr205Gly + Val204Gly + Val202Asn + Pro209Asn + Val204Gly + Asn211Ser + Gly201Asn +· Pro200Asn + Thr214Asp + Val202His + Pro209Glu +· Tyr208Pro + Thr207Pro + Tyr205Asn + Val204His + Val202Asn + Tyr208Leu
Thr207Gly + Thr212Gly + Val202Ala + Thr212Asn + Pro209Asn + Tyr208Ser + Pro209Gln + Val204Gln + Tyr205Leu +· Pro209Asn + Pro209Gly + Thr212Pro + Ser210Asp + Val204Asn + Ser210Glu + Thr207Asn + Tyr208Met + Thr2i4Ser + Val202Met. + Ser210Glu + Val202Asn +- Tyr213Leu + Thr207Pro + Val204Asn + Thr214Asn + Asn211Gln
Asn211Glu + Thr214Gln + Asn211Ser + Tyr208Asn + Tyr208Leu + Val204Asn + Tyr208Leu + Tyr208Cys + Thr207Gln
Ser210Asp + Val204Met + Val204Thr + Thr207Gln + Thr207Pro + Tyr205Ser + Asn211Asp + Ser210Glu + Tyr213Met + Ser203Glu + Thr207Ser + Ser215Glu + Tyr208Met + Ser210Asp + Leu216Met ·+ Leu216Asn + Tyr208Gly
Pro209Gly + Thr207Asn
Thr212Ser + Thr212Gly + Ser215Glu +- Tyr213Asp + Thr214Pro + Leu216Cys + Pro209Ser + Thr214Asn + Tyr213Leu + Asn211Ser + Ser210Asp + Tyr213Pro + Thr214Pro + Asn211Ser + Tyr205Leu + Thr212Gly + Pro209Asp + Tyr213Val + Asn217Gln + Leu216Met. + Asn211Gln + Leu216Val + Thr214Pro + Gly218Pro + Tyr208Pro
Ser215Glu + Thr212Gln + Gly2i8Gln + Ser215Glu +· Thr214Gly + Leu216Thr + Thr212Ser + Tyr208Met + Ser210Asp + Pro209Gln + Thr212Glu + Thr212Pro
Pro209Asn + Thr207Ser + Asn211Asp + Asn211Asp + Asn211Glu + Asn217Gln + Gly218Ser + Thr214Asp + Tyr213His + Pro209Ser + Leu216Cys + Thr214Glu + Thr214Ser + Asn217Asp + Asn217Asp -+ Asn217Glu + Asn211Glu -+· Ser215Glu + Gly218Glu + Thr214Gln + Thr219Gly + Gly218Pro + Thr219Ser + Asn217Ser + Asn217Ser -+· Leu216Val + Gly218Asn + Asn217Glu + Tyr213Ser + 61y218Pro + Leu216Glu + Leu216Ile + Thr219Asp + Asn217Ser + Thr212Gly + Leu2í6Ile + Thr2l9Gln + Gly218Pro + Gly218Ser + Gly218Pro + Gly218Glu + Thr219Pro +· Leu216Pro + Thr219Pro + Leu216Met+ Thr219Ser + Leu216Asn + Thr219Glu + Thr219Gly -+ Asn217Gln + Thr2l2Gln + Asn217Ser + Tyr213Val + Thr214Gln + Tyr213Cys + Thr214Pro -+- Leu216Ala + Leu216Ala + Thr214Gly +· Gly218Asn + Thr219Gly +· Thr2l9Ser + Thr219Pro + Leu216Ue + Asn217Ser + Asn217Gln + Ser215Asp + Leu216Cys +- Gly218Asp + Gly218Asp + Gly218Glu + Thr212Asp + Leu216Asp • · · · · · • ··· · · · • · · ·«· · ··
Alal99His Pro209Gln Alal99Pro Alal99Asn Val204Ala Gly201Pro Thr207Ser Gly201Ser Ser203GIu Gly201Ser Gly201Pro Sěr203Glu Gly201Asn Alal99Asn A1al99Ser Ser203Glu Alal99Pro Alal99Thr Val202Cys Ser203Glu Gly201Asn Ser203Asp Val204Thr Val202Ala Ser203Glu Pro200Gln Pro209Glu Pro200Ser Alal99Asn Ser203Glu Val202Glu Alal99Ser Pro200Ser Pro20061y Pro200Gln Alal99Asn Gly201Pro Alal99Ser Thr207Asn Gly201Gln Ser203Asp Ser203Asp Pro200Ser Pro200Asn Val202Asp Va1202Glu Pro200Ser Gly201Asn Gly201Asn Gly201Asn Val202Cys Va1204Ser Alal99Hís Va1204Cys Alal99Asn + Pro200Gly Ser210Asp Asn211Glu Thr212Pro + Ser210Asp + Asn211Glu + Asn217Gln + Thr219Pro + Val202Ala + Ser210Glu + Asn211Asp + Gly218Asn + Thr207Asn + Ser210Asp + Asn211Asp + Thr212Gly + Tyr205Glu + Thr212Ser + Ser215Glu + Asn217Gln + Val202Asp + Thr207Gln + Thr212Ser + Asn217Asp + Pro209Asp + Ser21061u + Asn211Asp + Tyr213Asn + Val202Glu + Ser203Glu + Thr214Pro + Asn217Asp + Thr207Asn + Thr214Gly + Leu216Glu + Asn217Asp + Ser203Asp + Tyr208Ile + Leu216Asp + Asn217Asp + Tyr208Gly + Leu216Asp + Asn217Glu + 61y218Asp + Val204Pro + Thr207Gly + Tyr213Leu + Ser215Asp + Ser203Asp + Tyr208Val + Asn211Gln + Ser215Asp + Pro200Ser + Ser203Glu + Tyr213Met + Ser215Glu -+· Ser203Glu Asn211Gln + Ser215Glu + Leu216Cys + Val204Gln + Thr214Gln + Ser215Asp ·+ Leu216Gly + Gly201Pro ·*· Ser203Asp Tyr205Val + Ser215Glu + Ser203Asp + Val204Gln + Tyr213Gly + Ser215Asp + Ser203Asp + Tyr205Met + Tyr213Gln ·+- Asn217Glu + Val204Asn + Thr212Gly + Asn217Glu + Thr219Gln + Ser203Asp + Tyr208Val + Pro209Ser + Asn217Glu + Thr212Pro + Tyr213Gly + Asn217Glu + Gly218Ser + Asn211Asp Thr212Asp +- Tyr213Asp Leu216Ser + Ser203Asp + Val204Gln + Tyr205Met +· Leu216Glu ·+· Val204Ser + Thr207Gly + Tyr208Val Leu216Asp + Pro209Gln + Ser210Glu + Thr212Glu + Thr214Gly + Asn211Asp + Asn217Gln + Gly218Gln + Thr219Pro + Tyr205Pro + Pro209Asp + Asn211Glu + Tyr213Ile + Ser203Asp -*· Tyr205Glu -+ Thr207Asn + Leu216Glu + Tyr205Glu + Tyr213Met + Leu216Ile + Asn217Gln + Ser203Glu + Asn211Gln + Leu216Met + Gly218Glu + Val202Ser + Tyr205Asp + Tyr208Gly + Tyr213Asp + Thr207Pro + Thr212Asp + Thr214Asp + Thr219Ser + Thr207Ser + Thr214Gln + Ser215Glu + Asn217Glu + Thr207Gly + Ser215Asp + Leu216Gln + Asn217Asp + Tyr205Glu + Tyr208Ala + Ser215Glu + Asn217Glu + Val204Ser + Tyr205His + Asn217Glu + Thr219Asp + Tyr208Gln + Tyr213Asp + Thr214Pro + Ser215G)u + Tyr208Gln + Thr212Ser + Tyr213Glu + Ser215Glu + Tyr205Gly + Pro209Glu + Thr212Pro + Tyr213Glu + Pro209Ser Thr212Gln Ser215Asp + Gly218Asp + Pro209Gly + Ser215Glu + Leu216Ala + Gly218Asp
Ser203Asp + Thr207Gln + Leu216Gln + Gly218Glu + Gly201Pi'o + Ser203Glu + Thr207Gly + Gly218Glu + Val204Cys + Tyr208Ala + Gly218Gln + Thr21961u + Val204Thr + Tyr208Gln + Asn217Ser + Thr219Glu
Gly201Pro -+· Val202Asp + Asn211Gln + Thr219Glu + Ser203Glu + Thr212Gln + Thr214Asp + Thr219Ser + Ser203Asp -+- Thr214Glu + Leu216C.ys + Thr219Gly + Val202Cys + Ser203Asp + Thr2í4Asp ·+· Thr219Pro
Ser203Asp + Tyr208Thr Thr214Asp + Thr219Pro + Tyr208Leu + Ser210Asp + Tyr213Asp + Thr214Asp
Ser203Asp + Tyr208Ser + Tyr213Glu + Thr214Asp -+ Ser2lOAsp + Asn211Ser + Tyr213Asp Thr219Gln + Ser210Glu + Thr212Asn + Tyr213Glu + Thr214Gln
9 99 9
Ser203Asp + Tyr205Glu + Tyr208Gly + Tyr213Leu + Gly218Asp Val202Glu + Tyr205Glu + Pro209Asn + Leu216Thr + Gly218Glu Tyr208Val + Ser215Asp + Asn217Ser + Gly218Asp + Thr219Glu Tyr205Leu + Thr214Asp + Ser215Glu + Gly218Glu + Thr219Asn Alal99Pro + Pro209Asp + Thr212Asp + Ser215Asp + Gly218Ser Ser203Glu + Thr212Glu + Tyr213Ser + Thr214Glu + Leu216Cys Ser203Asp + Tyr208Cys + Thr212Asp + Tyr213Ile + Thr214Asp Val202Met + Val204Thr + Asn211Asp Thr214Asp + Ser215Asp Pro209Asn + Asn211Asp + Thr214Glu + Ser215Glu + Leu216Gly Pro200Asn + Tyr205Glu + Thr212Asp + Tyr213Ala + Thr219Pro Pro200Asn + Ser203Asp + Tyr205His + Thr212Asp + Ser215Asp Ser203Asp + Val204Thr + Thr212Glu + Tyr213Ile + Ser215Glu Tyr205Gly + Thr207Gln + Tyr208Ile Thr212Glu + Ser215Glu Alal99Asn + Tyr205Asp + Ser210Glu + Thr212Glu + Thr214Gly Val202Met + Tyr205Ala + Ser210Glu + Thr212Asp + Ser215Asp Thr207Gln + Tyr208Leu + Asn211Glu + Tyr213Glu + Leu216Glu Val204Met +· Pro209Ser + Asn211Asp + Thr214Glu + Leu216Asp Pro200Ser + Ser203Glu + Tyr213Glu + Leu216Gly + Asn217Glu Alal99Gly + Tyr213Pro + Thr214Asp + Asn217Asp + Thr219Asp Alal99Gln + Tyr208Ala + Thr214Glu + Asn217Glu + Thr219Asp Alal99His + Val202Hís + Ser203Glu + Thr207Gly + Thr2l9Asp Gly201Ser + Val202Gly + Ser203Glu + Tyr205Thr + Thr219Asp Gly201Pro Pro209Glu + Ser210Asp + Ser215Glu -v- Leu216Met Tyr205Glu + Ser215Glu + Leu216Cys + Gly218Gln + Thr219Glu Ser203Asp Pro209Ser + Asn211Glu Thr214Asp + Leu216Asn Alal99Thr + Ser203Glu + Thr207Gln + Asn211Asp + Thr214Glu Gly201Ser +· Ser203Asp + Tyr205Gly + Pro209Asp + Ser215Asp Pro209Glu + Thr214Asn + Leu2í6Glu + Asn217Asp + Thr219Asn
Tabulka 27
Smyčka 6 - varianty se šestínásobnou mutací
Gly201Asn + Tyr205Gly Thr219Gly 4- Thr207Gln 4- Ser210Glu 4- Tyr213Ile 4-
Pro200Asn + Gly201Ser Thr219Asn 4- Tyr208Gly 4- Asn211Asp 4- Thr212Ser 4-
Gly201Pro + Ser203Asp Tyr213His 4- Val204Gln 4- Tyr205Pro 4- Thr212Ser 4-
Pro200Gln + Val204His Thr219Asn 4- Thr207Ser 4- Thr214Pro 4- Ser215Asp 4-
A1al99Pro + Pro200Ser Thr214Gly 4- GJy201Pro 4- Val204Asn 4- Tyr208Pro 4-
Pro200Gln + Val204Ala Leu21661n 4- Tyr208Leu 4- Thr212Glu 4- Tyr213Met 4-
Alal99Pro + Val202Met Tyr213Gly 4- Ser203Glu 4- Tyr205Leu +* Asn211Gln 4-
Gly201Gln + Val204Gln Thr219Ser 4- Thr214Gln 4- Ser215Asp 4- Leu216Gly 4-
V a1204Thr + Tyr208Met Gly218Ser 4- Pro209G 1 u 4- Tyr213Gly 4- Thr214Pro 4-
Ser20'3Asp + Val204Met. Thr219Asn 4- Thr207Gln 4- Pro209Gln 4- Asn217Ser 4-
Pro200Ser + Val202Met 4- Val204Gly 4- Pro209Gln 4- Tyr213Ile 4-
• ·
Ser215Glu
Alal99His + Ser203Asp + Val204Gly + Thr207Gly + Asn211Gln +
Thr214Ser
Alal99Gln + Pro200Gln + Gly201Gln + Pro209Glu + Leu216Ile +
Asn217Ser
Pro20061n + Tyr208Ile + Pro209Gln + Thr212Gly + Ser215Glu +
T9hr2l961y
Pro200Asn + Ser203Asp + Val204Cys + Thr207Gln + Pro209Ser +
Thr214Asn
Alal99Asn + Val202Gln + Val204Ser + Pro209Gly + Thr212Asp +
Asn217Gln
Pro200Asn + Val204Met + Thr207Gln + Pro209Gly + Thr2l2Gly +
Tyr213Asp
Pro200Gly + Val204Gln + Pro209Asn + Tyr213Ile + Thr214Gly +
Leu216Met
Alal99Asn + Tyr2O5Thr + Tyr208Ser + Pro209Ser + Thr214Asp +
Asn217Ser
Tyr205Ser + Thr207Gln + Tyr208Cys + Pro209Asn + Thr212Asn +
Leu216Glu
Alal99Asn + Pro200Ser + Ser203Asp + Tyr205Cys + Tyr208Asn +
Thr214Gln
Thr207Pro ·*· Tyr213Ser + Thr214Asn + Asn217Ser + Gly218Ser +
Thr219Glu
Alal99Pro + Gly201Pro + Thr20761y + Pro209Asn + Ser210Asp +
Tyr213Ser
Alal99Gln + Pro200Gly + Val202Met + Thr212Asp + Leu216Met +
Gly218Pro
Alal99Ser + Pro200Gly + Val202Asn + Asn21lGln + Leu216Val +
Gly218Pro
Alal99His + Pro200Gln + Val202Gln + Thr214Gln + Leu216Thr +
Gly2t8Glu
Pro200Ser + Gly201Gln ·*· Thr207Pro + Tyr208Thr + Gly218Pro a-
Thr219Pro
Pro200Gln + Val204Met + Thr207Gly + Ser215Glu + Leu216Met +
Thr219Pro
Thr207Ser + Pro209Asp + Thr212Gly + Thr214Ser + Leu216Pro +
Thr219Gln
Pro200Asn + Gly201Ser + Thr207Asn + Tyr208Leu -*· Ser210Asp +
Asn217Ser
Alal99Asn + Val202Ser + Tyr205Cys + Thr207Gln + Tyr213Leu +
Asn217Ser
Val202Ser + Pro209Gln + Tyr2i3Asp + Leu216Met + Asn217Ser +
Thr219Gly
Gly201Gln + Val204Gly + Pro209Asn + Asn211Asp + Asn217Gln +
Thr219Gly
Val202Gly + Ser203Glu + Val204Gly + Tyr213Met + Gly218Ser +
Thr219Ser
Alal99Gln + Pro200Asn ·+· Tyr205Thr + Thr207Ser + Thr214Gln
Asn217Ser
Alal99Ser + Gly201Asn Val202Met -+ Val204Asn + Asn211Gln +
Gly218Glu
Pro200Asn + Val202Pro + Val204Gln + Tyr208Pro + Gly218Gln +
Thr219Glu
Thr207Gly + Tyr208Ile Pro209Gly + Tyr213Gly + Thr214Pro +
Leu216Asn
·· ····
Val202Met + Ser203Asp Leu216Gly + Val204Met 4 Thr212Asn 4 Thr214Asn 4
Alal99Ser + Val202Met Thr214Pro + Val204Ala 4 Thr212Gly 4 Tyr213Thr 4
Tyr208Val + Pro209Gln Thr219Asn + Thr214Ser 4 Leu216Cys 4 Asn217Glu 4
Pro200Gln + Gly201Gln Thr219Glu + Tyr205Ala 4 Pro209Gln 4 Leu216Pro 4
Alal99Gly + Pro200Gln Gly218Asn + Gly201Ser 4 Tyr208Gln 4 Ser215Asp 4
Alal99Asn + Pro200Asn Asn217Glu + Val202Asn 4 Val204Gln 4 Thr214Gly 4
Pro200Gly + Gly201Gln Thr219Ser + Tyr213Gly 4 Thr214Asn 4 Leu216Gln 4
G1y201G1 n + Val202Gly Ser215Asp + Thr207Gly 4 Asn211Gln 4 Thr214Gly 4
Alal99Thr + Pro200Ser Asn217Ser + Tyr208Ala 4 Thr212Ser 4 Ser215Asp 4
Alal99His + Val202Asn Asn217Gln + Ser203Glu 4 Val204His 4 Tyr213Ile 4
Gly201Asn + Val202Cys Asn217Asp -* Tyr205Cys 4 Tyr213Ile 4 Leu216Pro 4
Alal99Thr + Gly201Ser Gly218Glu + Val202Gly 4 Tyr205Pro 4 Leu216Thr 4
Alal99Ser + Val204Cys Leu216Asp + Tyr208Cys 4 Pro209Gly 4 Tyr213Ala 4
Alal99Gly Gly201Asn Leu216Met. + Val204Met. 4 Thr207Pro 4 Thr214Glu 4
Pro200Gly ·+ Tyr205Met. Leu216Val + Tyr208Val 4 Thr212Gly 4 Tyr213Ser 4
61y201Pro + Tyr208Val Thr219Gly + Pro209Glu 4- Asn211Gln 4- Tyr213Ala 4
Alal99Ser +9 Pro200Ser + Val202Thi Thr219Pro ' + Tyr205Gln + Gly218Asp
Alal99Gln + Ser203Glu Thr219Pro + Val 204 Pro 4 Thr214Ser 4 61y218Gln 4
Alal99Thr + Pro200Gly Gly218Ser + Gly201Gln 4 Thr212Ser 4 Leu216Val 4
Pro200Ser + Val204Gln Gly218Gln + Thr207Pro 4 Thr214Gly 4 Ser215Glu 4
Alal99Gly + Gly201Gln Thr212Ser + Val204His 4 Tyr205Asp 4 Pro209Gln 4
Pro200Gln + Tyr208Asn Leu216Asp + Asn211Ser 4 Thr212Ser 4 Tyr213Thr 4
Alal99His + Tyr208Leu Gly218Gln Thr212Pro 4 Ser21561u 4 Leu216Ser 4
Gly201Pro + Va1204Cys Thr214Gln + Pro209Gln 4 Thr212Ser 4 Tyr213Cys 4
Va1204Ser + Tyr205Ser Asn217Ser + Thr207Asn 4 Tyr208Cys 4 Ser215Asp 4
Pro200Asn + Tyr208Ala Thr219Gly + Tyr213Pro 4 Thr214Glu 4 Ser215Asp 4
Val202His + Tyr208Met. Ser215Asp + Pro209Asn 4 Thr212Asn 4 Thr214Glu 4
Pro200Gln + Gly201Ser + Val202Pro 4- Va1204Ser 4- Thr214Asp 4
·· ··· · • · · · ··· · ··· ···
Ser215Glu
Alal99Gln + Gly201Ser Ser215Glu 4- Val204Gly 4- Thr207Ser 4* Thr214Asp 4-
Val202Asn + Tyr205Gly Ser215Glu 4- Pro209Gln 4- Thr212Ser 4- Thr214Glu 4-
Pro200Asn +· Pro209Glu Leu216Cys +· Ser210Asp 4- Asn211Ser 4- Thr214Ser 4-
Pro200Ser + Val204Pro Gly218Asp 4- Tyr208Ile 4- Thr214Pro 4- Asn217Asp 4-
Gly201Gln +- Tyr205Asn Gly218Glu 4- Tyr208Gly 4- Thr212Gly 4- Asn217Glu 4-
Val202His + Thr207Asn Leu216Asp 4- Tyr208Gln 4- Tyr213Pro 4- Ser215Glu 4-
Alal99Asn + Gly201Ser Leu216Asp 4- Val202Pro 4_ Tyr205Thr 4- Ser215Asp 4-
Pro200Gly + Val202Ala Gly218Ser 4- Val204Ala 4- Ser210Glu 4- Asn211Glu 4-
Val204Asn -+ Pro209Ser Leu216Met 4· Ser210Asp 4- Asn211Asp 4- Tyr213Asn 4-
Alal99Asn + Val204Thr Thr214Pro 4- Ser210Asp 4- Asn211Glu 4- Tyr213Leu 4-
Va 1202-Cys + Val204Ala Asn217Gln -+· Tyr205Glu 4- Thr212Ser 4- Ser21561u 4-
Thr207Pro + Ser210Asp Thr219Ser 4- Asn211Glu 4- Thr212Glu 4- Asn217Ser 4-
Pro200Asn + Val202Asp Gl.y218Pro 4- Tyr205Ala 4- Pro209Ser 4- Asn217Asp 4-
Val'202Gln + Pro209Glu Asn217Gln 4- Ser210Glu 4- Asn211Glu 4- Thr212Gln 4-
Val202Asp + Ser203Asp Asn217Glu 4- Thr207Gln 4- Thr212Ser 4- Tyr213Gln 4-
Alal99Asn + Ser203Glu Asn217Asp 4- Val204Asn 4- Tyr208Pro 4- Leu216Glu 4-
Val204Thr +- Thr212Gly Gly218Ser 4- Thr214Glu 4- Ser215Asp 4- Leu216Glu 4-
Alal99Gln + Ser203Asp Leu216Gln 4- Val204Cys 4- Thr207Gly 4- Ser215Glu 4-
Alal99Pro + Pro200Gln Leu216Asn 4- Ser203Asp 4- Asn21lSer 4- Ser215Asp 4-
Ser203Glu + Tyr208Thr Gly218Ser 4- Tyr213Cys 4- Thr214Gln 4- Ser215Glu 4-
Alaí99Thr + Fro200Gln Gly218Ser 4- Gly201Gln 4- Ser203Asp 4- Ser215Asp 4-
Pro200Gly Val202Cys Leu216Pro 4- Ser203Asp 4- Asn211Ser 4- Ser215Glu 4-
Alal99Gln -+- Ser203Glu Asn217St?r 4- Tyr205Gly 4- Tyr213Met. 4- Ser215Glu 4-
Pro200Ser -+- Gly201Asn Asn217Glu 4- Ser203Asp 4- Tyr208Val 4- Pro209Ser 4-
Pro200Ser Gly201Ser Gly218Pro 4- Val202His 4- Ser203Asp 4- Asn217Glu 4-
Val202Asn + Tyr205Glu Gly218Pro 4- Thr207Gln 4- Tyr208Leu 4- Thr214Asp 4-
Ser203Asp + Val204Thr Ser215Glu 4- Tyr205Glu 4- Thr212Ser 4- Tyr2í3Tle 4-
• · · · · ·
Alal99Asn +- Pro200Ser Tyr213Ile 4- Tyr205Pro 4- Pro209Asp 4- Asn211Glu 4-
Gly201Pro + Val202Cys Thr214Ser 4- Val204Ser 4- Pro209Glu 4- Thr212Glu 4-
Alal99Asn + Val202Asp Leu216Asn 4- Ser203Asp 4- Tyr208Cys 4- Ser215Asp 4-
Alal99Asn + Ser203Glu Ser215Asp 4- Tyr205Cys 4- Thr212Gly 4- Thr214Glu 4-
Alal99Thr + Pro200Ser Asn217Asp 4- Tyr208Met 4- Thr214Ser 4- Ser2í5Glu +
Alal99Pro + Tyr208Gly Thr219Ser 4- Ser215Asp 4- Leu216Val 4- Asn217Asp 4-
Pro200Asn +· Pro209Gly Asn217Asp + Tyr213Pro 4- Ser215Asp 4- Leu216Gly 4-
Pro200Ser + Gly201Pro Gly218Pro 4- Val202Ala 4· Asn211Glu 4- Tyr213Asp 4-
Val202Met + Val204Ser Thr219Asp 4· Tyr205His 4- Thr212Gly 4- Asn217Glu 4-
Tyr205Val *· Tyr208Pro Gly218Asp 4- Ser215Glu 4- Leu216Met. 4- Asn217Asp 4-
Val202Ser + Tyr208A1a Asn217Asp 4- Asn211Ser 4- Thr214Glu 4- Leu216Asp 4~
Gly201Pro + Tyr20861n Asn217Ser 4- Thr212Asp 4- Tyr213Asp -b Ser215Asp 4-
Alal99Gln + Gly201Gln Tyr213Glu 4- Tyr205Gly 4- Pro209Glu 4- Thr212Pro 4-
Ser203Asp + Pro209Ser 61y218Asp 4- Asn211Gln 4- Thr212Gln 4- Ser215Asp 4-
Ser203Asp + Pro209Gly Gly218Asp 4- Tyr213Leu 4- Ser215Glu 4- Leu216Ala 4-
Val202Glu + Val204Cys Gly218Gln 4- Thr212Gly 4- Ser215Asp 4· Leu216Gln 4-
Pro200Gly + Gly201Gln Ser215Asp 4- Val202Glu 4- Val204Ala 4- Thr207Pro 4»
Alal99Gln + Pro200Ser Thr219Asp 4- Gly20J.Ser 4- Ser203Asp 4“ Gly218Glu 4-
Alal99Gln Gly201Ser Thr214Asp 4- Tyr205Gln 4- Ser210Asp 4- Thr212Glu 4-
Gly201Asn + Val202Pro Thr214Glu 4- Ser210Glu 4- Thr212Glu 4- Tyr213Thr 4-
Pro200Gln + Val202Met. 61y218Asp 4- Ser203Asp 4- Val204Gly 4- Tyr208Tle 4-
Pro200Ser + G1 y201 Pro Thr2í 9G1u 4- Val202Asp 4- Tyr208Cys 4- Asn211Gln 4-
Ser203Asp + Tyr208Pro Thr219Pro 4- Pro209Ser 4- Asn21ISer 4- Thr214Asp 4-
Alal99His + Gly201Asn Leu216Ile 4- Ser203Glu 4- Tyr213His 4- Thr214Glu 4-
Ser203Glu + Tyr208Pro Asn217Ser 4- Tyr213His 4- Thr214Asp 4- Leu216Cys 4-
Val202Asp + Tyr205Met. Asn217Gln 4- Thr214Asp 4“ Ser215Glu 4- Leu216Cys 4“
Val202Cys -·- Val204Ser Thr214Asp 4- Tyr208Leu 4- Ser210Asp 4- Tyr213Asp 4-
Gly20lAsn + Tyr205Gln 4- Pro209Asn 4- Ser210Glu 4- Tyr213Glu +
• · · · • · · · · · '·· · ·· · ··· ·· ·
Leu216Ala
Val202Cys Pro209Asp + Tyr213Asp + Thr214Asn + Ser215Glu ·*
Asn217Gln
Alal99Gly + Gly201Gln + Ser215Asp + Leu216Asp + Gly218Asn +
Thr219Glu
Alal99Hís + Thr207Asn + Asn211Ser + Leu216Glu + Asn217Gln +
Thr219Asp
Val202Met. + Thr20761n + Pro209Gly ·+ Thr214Glu Ser215Asp +
Gly218Asp
Pro200Gln + Val202Ala Val204Pro Thr207Gln + Pro209Glu +
Thr214Glu
Gly201Pro + Tyr208Gly + Thr214Asp + Leu216Cys ·+ Asn217Glu +
Gly218Asp
Alal99Gln + Thr207Pro + Tyr208Cys + Pro209Gln + Tyr213Asp +
Leu216Asp
Ser203Asp + Thr214Gly + Ser215Glu + Leu216Ala + Asn217Ser +
Thr219Glu
Pro200Gln + Ser203Glu + Val204His + Thr212Asp + Thr214Asp +
Gly218Gln
Alal99His + Gly201Ser + Ser203Glu + Tyr205Ser + Thr214Glu +
Gly218Glu
Gly201Pro + Ser203Glu + Thr207Gly + Tyr208Cys + Thr214Asp +
Gly218Glu
Ser203Glu + Tyr205Leu + Thr207Asn + Thr212Asp + Tyr213Met -+-
Ser215Glu
Alal99Pro + Ser203Asp + Pro209Ser + Thr2i2Glu Ser215Asp +·
Gly218Gln
Ser203Glu + Tyr205His + Thr212Asp + Tyr213Met. + Ser215Asp +
Thr219Ser
Seř203Asp + Val204Gly + Thr212Glu Thr214Pro + Ser215Asp +
Asn217Ser
Gly201Pro + Tyr205Gln + Thr207Gly + Asn211Glu ·+· Thr212Gly +
Thr214Glu
Pro200Asn + Val202Gln + Thr207Gln + Pro209Ser + Asn211Asp +·
Thr214Glu
Gly201Gln + Thr207Gly + Pro209Gln + Thr212Glu + Ser215Glu +
Gly218Gln
Val202Met Tyr205Ala + Ser210Glu + Thr212Asp + Ser215Asp +
Leu216Ala
Gly201Gln + Pro209Gly + Asn211Asp ·+ Tyr213Asp + Thr214Gly +
Leu216Asp
Alal-99Gly + Val202Glu + Ser203Glu + Tyr21361u + Thr214Pro +
Thr219Ser
Gly201Ser + Val202Cys + Ser203Asp + Tyr205Asp + Leu216Gly -+-
Thr2l9Asp
Pro200Ser + Ser203Glu + Tyr213Glu + Leu216Gly + Asn217Glu +
Thr21961y
Tyr205Asn + Pro209Asn + Thr21261u + Tyr213Met + Ser215Glu +
Asn217Asp
Alal99Gln + Tyr208Ala + Asn211Gln + Thr2í4Glu + Asn217Glu +
Thr219Asp
Gly201Pro +· Val202Gly + Ser203Glu + Tyr205Thr + Tyr208Ala +
Thr219Asp
Pro200Asn + Gly201Pi'o +· Ser203Asp + Thr207Gln + Gly218Ser +
Thr219G1u
Gly201Asn + Ser203Asp Thr219Asp 4- Val204Gly 4- Tyr208Val 4- Asn211Gln 4-
Alal99His +- Pro200Asn Thr214Glu 4- Ser203Asp 4- Tyr205Thr 4- Pro209Asp 4-
Gly201Pro + Val202Gly Leu216Met- 4- Pro209Glu 4- Ser210Asp 4- Ser215Glu 4-
Alal99Gly + Val202His Ser215Glu 4* Val204Ala 4- Pro209Asp 4- Ser210Glu 4-
Gly201Asn + Val204Gln Thr219Glu 4- Tyr208Leu 4- Thr214Glu 4- Ser215Glu 4-
Ser203Glu +- Tyr205Gln Thr219Ser 4- Tyr208Gly 4- Asn211Glu 4- Thr214Glu 4-
Gly201Ser +- Ser203Asp Ser215Asp 4- Tyr205Ala 4- Pro209Asp 4- Tyr213Met 4-
Val202Asn + Pro209Asp Ser215Glu 4- Asn211Glu 4- Thr212Ser 4- Tyr213Leu 4-
Alal99Pro + Val204Thr Tyr213Leu 4- Tyr205Glu 4- Ser210Glu 4- Asn211Asp 4-
Val202Ala + Ser203Asp Leu216Glu 4- Val204Gln 4- Tyr205Met 4- Thr212Glu 4-
Gly201Pro + Ser203Asp Thr219Asp 4- Tyr208Thr 4- Thr214Asp 4- Asn217Gln +
Pro200Gln + Gly201Asn Gly218Asp 4- Thr207Gln 4- Tyr213Glu 4- Asn217Asp 4-
Pro200Gln ·+· Thr207Gly Asn217Glu 4- Tyr208Ala 4- Thr212Glu 4- Tyr213Glu 4-
Thr207Ser + Tyr208Ser Thr219Asn 4- Pro209Glu 4- Thr214Glu 4- Asn217Glu 4-
Alal99Gly + Tyr205Pro Asn217Asp 4- Pro209Glu 4- Thr214Glu 4- Leu216Asn 4-
Alal99His + Gly201Asn Asn217Glu 4- Tyr205Pro 4“ Pro209Glu 4- Ser215Glu 4-
Pro200Gly + Pro209Asp Asn217Asp 4- Tyr213Gln 4- Ser215Glu 4- Leu216Ile 4-
Alal99His + Val204Ser Thr219Asp 4- Thr207Gln 4- Pro209Asp 4- Ser210Asp 4-
Alal99Thr + Thr207Pro Thr219Asp 4- Tyr208Val 4- Pro209Glu 4- Ser210Asp 4*
Tyr208His + Pro209Glu Thr219Asp 4- Ser21061u 4* Tyr213Val 4- Leu216Cys 4-
Tyr205Met. + Thr207Gly Gly218Asp 4- Ser210Asp 4“ Thr212Ser 4- Asn217Glu 4-
Ser210Glu +- Thr212Pro Thr219Ser 4- Thr214Gln 4- Asn217Asp 4- Gly218Glu 4-
Pro200Gln + Val204Thr Leu216Glu 4- Tyr208Asn 4- Asn21lAsp 4- Ser215Glu 4-
Gly201Pro + Tyr208Gln Thr219Ser 4- Asn211Glu + Thr212Asp 4- Asn217Glu 4-
Val202Asp + Ser203Asp Thr214Asn 4- Asn211G1u 4- Thr212Pro 4- Tyr2.13Leu 4-
Val202Glu +· Ser203Asp Thr219Ser 4- Tyr205Leu 4- Pro209Gly 4- Thr212Asp 4-
Alal99Gly +· Pro200Asn Asn217Asp 4- Tyr208Leu 4- Ser210Asp 4- Asn211Asp 4-
·· ··· · ··· · · · · · ···*·· · · · ···· • · · · · · ··· · 444 444 44 4
Pro200Ser + Gly201Ser + Val202Asp + Tyr208Gln + Ser210Glu + Asn211Asp
Val202Asp + Thr207Gln + Tyr208Thr + Ser210Glu + Thr214Gln + Asn217Glu
Thr207Gln + Asn211Asp + Thr214Glu + Leu216His + Asn217Asp + Gly218Gln
Ser20361u + Thr207Ser + Pro209Gly + Asn211Asp + Tyr21361y + Ser215Asp
Ser203Glu + Tyr205Val + Pro209Gly + Asn211Asp + Ser215Asp + Thr219Gly
Tabulka 28
Smyčka 6 - varianty se sedminásobnou mutací
Alal99Ser + Pro200Ser + Val204Met Thr214Gln + Leu216Ala + Tyr208Ser 4- Tyr213His 4-
Alal99Ser + Gly201Ser +· Val202Met. Thr214Ser + Asn217Gln 4~ Thr207Gln 4- Ser210Glu 4-
Gly201Gln + Val204Gly + Tyr205Ala Asn211Gln + Gly218Asp 4- Thr207Gln 4- Tyr208Gly 4-
Alal99Gly + Pro200Gly Thr207Gln Gly218Gln + Thr219Gln 4- Tyr208Thr 4- Pro209Gln 4-
Alal99Gly + Pro200Ser + Val202Gln Thr212Ser + Thr219Pro + Thr207Asn 4- Asn211Ser 4-
Pro200Gln + Val204Ala + Tyr208Leu Thr214Asn + Leu216Gln 4- Thr212Glu 4- Tyr213Met 4-
Ser203Asp + Val204Met. + Thr207Gln Asn217Ser + Thr219Asn 4- Tyr208Met 4- Pro209Gln 4-
Alal99Gln + Pro200Ser ·+· Gly201Gln Thr214Gly + Gly218Glu 4- Tyr205Ala 4- Tyr213Cys 4-
Alal99Thr + Pro200Ser + Thr207Gln Gly218Asp +· Thr219Pro 4- Tyr208Gln 4- Thr212Ser 4-
61y201Ser + Val204Pro + Tyr208Ser Thr214Pro + Ser215Asp 4- Thr212Gly 4- Tyr213Val 4-
Pro200Gln + Tyr208Cys + Pro209Gln Ser215Glu + Thr219Gly 4- Thr212Gly 4- Tyr213Pro +·
Val204Met + Thr207Gln + Pro209Gly Thr214Gly + Leu216Met 4- Thr212Gly 4- Tyr213Cys 4-
Pro200Gly + Ser203Asp + Thr207Asn Leu216Cys + Asn217Ser 4- Pro209Asn 4- Tyr213Ile 4-
Pro200Asn +· Gly201Asn + Tyr205Ile Thr214Asn + Leu216Val 4- Pro209Asp 4- Tyr213Met 4-
Alal99Asn + Ser203Glu + Val204Met Leu216Ala + Gly218Asn 4- Pro209Gly 4- Tyr213Leu 4-
Alal99His + Thr207Pro + Tyr213Ser Gly218Ser -+· Thr219Glu 4- Thr214Asn 4- Asn217Ser 4-
A 1al99Ser ·+· Gly201Pro +· Val204Gln Tyr213Prn ·+ Gly218Glu 4- Thr207Ser 4- Thr212Asn 4>
A 1al99Ser + Pro200Asn + Tyr205Met Thr214Gly - Leu216Met 4- Tyr208Met 4- Thr212Asn 4-
G1 y201G1 n + Tyr205Asn + Thr207Asn Tyr213Val + Leu216Ile 4- Pro209Asp 4- Thr212Gly 4-
Pro200Asn + Tyr205Glu + Tyr208Met 4- Tyr2l3His 4- Thr214Ser 4-
·· ···· ·· · ·· ·· ·· · • · · · · · · · • ···· · · · · ··· · • · ♦ · · · ··· · ··· ··· ·· ·
Asn217Gln + Thr219Gln
Alal99Gln + Pro200Gly + Val202Met + Tyr208Ile + Thr212Asp +
Leu2í6Met + Gly218Pro
Alal99Ser + Pro200Gly + Gly201Gln + Val202Asn + Asn211Gln +
Leu216Val + Gly218Pro
Alal99Asn + Val202Ser + Tyr205Cys + Thr207Gly + Tyr213Leu + Thr214Asp + Asn217Ser
Gly201Pro + Val202Asn + Val204Asn + Tyr205Ser + Asn211Glu + Thr212Ser + Gly218Asn
Alal99Ser + Val204Cys + Thr207Ser + Asn211Ser + Thr214Gln + Ser215Glu + Asn217Gln
Pro200Ser + Val202Met + Tyr205Gly + Tyr208Pro + Ser210Glu + Thr212Ser + Tyr213Gly
Pro200Ser + Val202Gln + Ser203Glu + Tyr205Cys + Thr207Gln + Tyr208Ile + Asn211Ser
Alal99Pro + Gly201Ser + Val204Ala + Thr207Ser + Pro209Gln + Tyr213Asp -+ Leu216His
Gly201Ser + Ser203Asp + Val204Gln + Tyr208Thr + Asn211Gln + Leu216Ser + Thr219Ser
Alal99Thr + Gly201Ser + Tyr205Pro + Tyr2l3Pro + Thr214Gly + Leu216Thr + Gly218Glu
Pro200Asn + Gly2QlGln + Tyr208Val + Thr214Gln + Ser215Asp + Gly218Ser Thr219Asn
Pro200Gln + Val202Met + Val204Gly + Tyr208Gly + Asn211Ser + Tyr213Pro + Gly218Asp
Alal99Asn + Pro200Gly + Tyr205Thr + Tyr208Val + Thr21261y + Tyr213Ser + Leu216Val
Alal99Ser + Gly201Ser + Val202Gly + Tyr205Leu + Thr214Asn + Leu216Ala + Gly218Glu
Alal99Ser + Gly201Gln + Val204Ser + Tyr208Asn + Pro209Ser + Thr214Asn + Ser215Glu
Alal99Pro ·*- Gly201Asn +· Tyr208Cys + Tyr213Gly + Thr214Glu + Asn217Ser + Gly218Gln
Alal99Pro + Val202His + Tyr208Met + Pro209Asn + Thr212Asn + Thr214Glu -* Ser215Asp
Alal99His + Val202Gly + Val204Ser + Thr207Gln + Pro209Asp + Ser210Asp -► Asn211Ser
Alal99Gly + Pro209Glu + Ser210Glu + Thr212Gln + Tyr213Ala + Leu216Pro +· Thr219Asn
Alal99Hís + Gly201Gln + Val202Met + Val204His + Thr207Gly + Pro209Glu + Ser210Asp
Alal99His + Val202Gln + Thr207Gly + Thr214Gln + Leu216Thr + Asn217Asp + Gly218Glu
Gly201Gln + Val204Thr + Tyr205Pro + Thr207Gly + Leu216Asn + Asn217Asp + Gly218Asp
Gly201Ser + Tyr208Thr + Pro209Gln + Tyr213Ser -+ Asn217Asp + Gly218Glu + Thr21961y
Gly201Ser +· Val202Cys + Tyr205Val + Thr207Gln +· Tyr213Ile + Leu216Asp + Asn217Asp
Gly201Asn + Val202Glu + Ser203Glu + Val204Gly + Thr212Gly + Leu216Val + Thr219Pro
Val202Asp + Ser203Glu + Val204Asn + Thr207Pro + Tyr208Leu + Thr212Ser + Asn217Gln
Gly201Gln + Tyr208Ser -+ Pro209Asn + Asri211Gln + Tyr213Asp + Thr214Asp + Asn217Gin
Alal99Asn +· Pro200Asn + Val204Thr Tyr213Leu + Thr214Pro 4- Ser210Asp 4- Asn211Glu 4-
Gly201Ser + Val202Ala + Tyr208Met Thr212Asp +· Asn217Ser 4- Ser210Asp 4- Asn211Asp 4-
Alal99Ser + Pro200Gly + Gly201Asn Asn217Asp + Gly218Asn 4- Val202Glu 4- Leu216Cys 4-
Alal99Asn + Pro200Ser + Ser203Asp Thr214Gln + Ser215Glu 4- Tyr205Cys 4- Tyr208Asn 4-
Alal99Gln + Val202Gly + Ser203Glu Ser215Glu + Asn217Ser 4- Tyr205Gly 4- Tyr213Met. 4-
Gly201Asn + Val202Gly + Ser203Asp Ser215Glu + Asn217Ser 4- Tyr208Ile 4- Tyr213Pro 4-
Val202Met + Ser203Glu + Thr207Asn Leu21661u + Asn217Asp 4- Thr214Gly 4- Ser215Asp 4-
Alal99Gln + Ser203Glu ·+· Val204Cys Asn217Glu + Thr219Pro 4- Asn211Ser 4- Thr214Gly 4-
Alal99Gln + Ser203Asp +· Tyr205Thr Asn217Asp + Gly218Asn 4- Thr207Ser 4- Thr212Asn 4-
Pro200Ser + Val202Ser + Ser203Asp Tyr213Met + Asn217Glu 4- Val204Gly 4- Thr212Asn 4-
Ser20361u + Tyr205Met. + Tyr208Thr Gly218Asn + Thr219Ser 4- Pro209Gly 4- Asn217Glu 4-
Alal9961n + Tyr205Leu +· Tyr208Pro Tyr213Asp + Thr214Gly 4- Asn211Glu 4- Thr212Asp 4-
Gly201Pro + Val202Thr + Val204His Thr212Asp + Tyr213Asp 4- Tyr205Met 4- Asn211Glu 4-
Gly201Pro + Ser203Glu + Tyr205Asp Leu216His + Thr219Ser 4- Thr207Ser 4- Ser215Asp 4-
Alal99Asn + Val202Gln + Val204Ser Thr212Asp + Asn217Gln 4- Pro209Gly 4- Ser210Glu 4-
Pro200Gly + Gly201Pro + Tyr208Val Thr212Gln + Thr219Ser 4- Pro209Glu 4- Asn211Asp 4-
Alal99Asn + Pro200Gln + Val202Ala Pro209Glu + Asn211Glu 4- Val204Pro 4- Thr207Asn 4-
Alal99Asn + Ser203Asp + Thr207Gly Asn217Asp + Gly218Gln 4- Asn211Ser 4- Ser215Glu 4-
Pro200Gln + Ser203Glu + Val204Gly Asn21761u + Thr219Gln 4- Tyr213Pro 4- Ser215Glu 4-
Pro200Gly + Val202Asp + Ser203Asp Ser215Glu + Gly218Ser 4- Thr207Ser 4- Thr212Gly 4-
Val202Glu +· Ser203Asp + Tyr208Ser Ser215Asp + Thr219Ser 4- Asn211Gln 4- Tyr213Ala 4-
Alal99Gln + Ser203Asp + Tyr205MetLeu216Cys + Asn217Gln 4- Thr214Asp 4- Ser215Glu 4-
Gly201Gln + Ser203Glu + Tyr205Glu Thr214Gln ·+ Leu216Glu 4- Pro209Gln 4- Asn21ISer 4-
Gly201Asn + Val202Cys + Ser203Asp Leu216Gly + Thr219Pro 4- Tyr205Asp 4- Thr214Asp 4-
Alal99Gly + Val202Met + Ser203Glu Thr207Ser + Thr214Asp 4- Val204Pro 4- Tyr205Glu 4-
Gly201 Ser + Val204Met. + Pro209Gly Thr214Glu + Leu216Asp 4- Asn21ISer 4- Tyr213Cys 4-
Gly201Pi i> + Val202Asp + Thr207Gln Gly2í8Asn + Thr219Asp 4- Thr212Ser 4- Asn217Asp 4-
Pro200Ser + Val204Gly + Tyr205Gly 4- Tyr208Cys 4- Thr214Ser 4-
84 • · • · · · • · · • · · · · · • · • · · · · •
Ser215Glu + Asn217Glu
Gly201Asn + Tyr205Ile + Tyr213Ile + Thr214Asn Asn217Asp + Thr219Pro + Ser215Glu 4-
Pro200Ser + Val202Gln + Tyr208His + Thr212Pro Ser215Glu + Asn217Glu ·+ Thr214Ser 4-
Pro200Gly + Val204Gln + Thr207Ser + Tyr213Leu Ser215Glu + Asn217Glu + Thr214Gln 4-
Thr207Gly + Ser210Asp + Asn211Asp + Thr212Gly Asn217Gln + Thr219Gln -*· Tyr213Asp 4-
Ser203Glu + Thr207Asn + Tyr208His + Asn211Gln Leu216Glu + Asn217Glu +· Thr214Asp 4-
Gly201Pro + Val202Met, + Val204Ser + Tyr205His Asn217Glu + Thr219Asp + Thr212Gly 4-
Alal99Asn + Val204Cys + Tyr208Cys ·+· Tyr213Ala Leu216Asp + Asn217Glu -+ Thr214Glu 4-
Pro200Gln + Thr20761y + Tyr208Cys + Thr214Asp Leu216Gln ·+· Asn217Asp + Ser215Asp 4-
Alal99Gln + Val204His +- Asn211Ser + Thr212Ser Ser2i5Glu + Asn217Glu + Thr214Glu 4-
Val202Asp + Ser203Asp + Tyr205Ala + Thr207Gln Thr214Glu -+ Ser215Asp + Tyr213Met 4-
Alal99Gly + Pro200Gln + Val204Cys + Thr212Glu Ser215Glu ·+ Leu216Gln + Thr214Glu 4~
Val204Ala + Thr207Gly + Ser210Asp + Asn211Asp Thr214Glu + Asn217Ser + Thr212Glu 4-
Gly201Pro + Pro209Ser + Ser215Glu + Leu216Glu Gly218Ser + Thr219Asp + Asn217Asp 4-
Pro200Asn + Gly201Pro + Ser203Asp + Thr207Gln Gly218Ser + Thr219Glu + Asn217Asp 4-
Alal99Pro + Val202Gly + Ser203Asp + Pro209Gln Ser215Glu + Gly218Asp + Thr212Asri 4-
Alal99Gln + Pro200Ser + Gly201Ser + Tyr205Gln Thr212Glu + Thr214Asp +· Ser210Asp 4-
Alal99Pro + Pro200Ser + Thr207Gln + Ser210Glu Thr214Asp +· Thr219Ser Thr212Asp 4-
Alal99Hís + Ser203Asp + Val204Gly + Thr207Gly Thr214Ser + Gly218Glu + Asn211Gln 4-
Gly201Asn + Val202Asp + Val204Gly + Tyr208Val Asn217Ser + Thr219Asp + Asn211Gln 4-
Val202Asn + Tyr205Glu + Thr207Gln + Tyr208Leu Asn217Asp + Gly218Pro + Thr214Asp 4-
Alal99Asn +- Gly201Asn + Ser203Asp + Tyr208Asn Leu216Cys + Thr219Gly + Thr214Glu 4-
Val202Cys + Ser203Asp + Val204Ser + Tyr208Thr Asn217Gln -v Thr219Pro +· Thr214Asp 4-
Ser203Asp + Tyr208Pro + Pro209Ser + Asn211Ser Thr214Asp + Thr219Pro +· Tyr213Met. 4-
Ala.l99Asn + Pro200Gln + Ser203Asp + Thr212Glu Ser2í5Glu + Asn217Ser + Thr214Asp 4-
Pro200Asn + Gly201Asn + Val202Glu + Ser203Asp Ser215Glu + Thr219Asp + Thr2.12GJy 4-
Alal99Gln + Gly201Gln + Pro209Gly + Ser210Glu Tyr213Glu + Leu216Ala + Thr212Pro 4-
Pro200Ser + Val204Ser + Thr207Asn + Tyr208I,eu Asn211Ser + Tyr213Asp + Ser210Asp +
• · · · · ·
Alal99Hís ·+ Ser203Asp ·+ Tyr205Asp Leu216Ser + Gly218Asp 4- Thr207Asn 4- Tyr208Ile 4-
Alal99Gln + Gly201Pro + Val202Glu Thr214Asp + Leu216Gln 4- Tyr205Glu 4- Pro209GJy 4-
Gly201Asn + Val204Pro + Tyr208Cys Thr212Pro + Thr214Asp 4- Ser210Glu 4- Asn211Glu 4-
Alal99His + Pro200Asn + Tyr208Val Leu216Glu + Thr219Asp 4- Thr214Glu 4- Ser215Glu 4-
Pro200Gly + Val202Glu + Tyr205Pro Asn217Asp ·+ Gly218Asn 4- Tyr208Ala 4- Thr214Glu 4-
Val202Glu + Tyr205His + Pro209Gln Asn217Ser + Gly218Asp 4- Thr214Glu 4- Ser215Asp 4-
Pro200Ser ·*- Tyr205Leu + Thr212Gln Gly218Glu + Thr219Asn 4- Thr2l4Asp 4- Ser2l5Glu 4-
Ser203Asp + Val204Gly + Tyr205Ser Ser215Asp + Asn217Glu 4- Thr212Glu 4- Thr214Pro 4-
Pro200Asn + Val204Gln + Pro209Glu Thr212Asn + Ser215Asp 4- Ser210Glu 4- Asn21lGlu 4-
Alal99Gln + Thr207Pro + Tyr208Cys Thr214Asn + Leu216Asp 4- Pro209Gln 4- Tyr213Asp 4-
Alal99Gly +· Pro209Glu + Ser210Asp Gly218Pro + Thr219Gly 4- Thr214Glu 4- Ser215Glu 4-
Alal99His + Thr207Ser + Tyr208Thr Asn217Gln + Gly218Glu 4- Pro209Gly 4- Ser215Asp 4~
Alal99Ser + Ser203Glu * Tyr208Ala Leu216Cys + Thr219Asp 4- Asn211Gln 4- Ser215Glu +
Gly201Pro + Val202Gly + Ser203Glu Ser215Asp + Thr219Asp 4- Tyr205Thr 4- Tyr208Ala 4-
Pro200Gln + Val202His + Ser203Glu Thr214Asp + Thr219Gly 4- Asn211Gln 4- Thr212Asp 4-
Gly2.01Pro Ser203Asp *· Thr207Gln Ser215Asp + Thr2l9Ser 4- Ser210Glu 4~ Thr214Glu 4-
Alal99Ser + Tyr205Gly + Thr207Ser Ser215Glu ·+· Leu216Glu 4- Ser210Asp 4- Tyr213Glu 4-
Val204Thr ·+· Thr207Pro Ser210Glu Gly218Asp + Thr219Ser 4- Asn211Glu 4- Thr212Glu 4-
Val202Asp + Ser203Asp + Thr207Gly Asn217Asp + Gly218Ser 4- Pro209Asn 4- Asn211Glu 4-
Pro200Ser + Ser203Asp + Val204Pro Asn217Ser + Gly218Asp 4- Tyr208Ile 4- Thr214Asp 4-
Pro200Ser + Gly201Pro + Val202Gly Pro209Asp + Tyr213Glu 4- Ser203Glu 4- Tyr205Glu 4-
Alal99Gly + Gly201Gln +· Val202Ser Leu216Asp +· Asn217Glu 4* Asn21lAsp 4- Ser215Glu 4-
Alal99Thr + Tyr205Gln + Thr207Gln Ser215Glu + Gly218Gln 4- Pro209Gln 4- Thr212Asp 4-
Alal99Gln + Val204Ser + Tyr205Glu Thr212Glu + Asn217Gln 4- Thr207Asn 4- Ser210Glu 4*
Tyr205Val + Tyr208Pro + Pro209Gln Ser215Glu + Leu216Gly 4- Ser210Asp 4- Thr212Glu 4-
Alal99Pro ·+· Gly201Ser + Thr214Glu Gly218Glu + Thr219Asp 4- Ser215Glu 4- Asn217Gln 4-
Ser203Glu + Ser210Asp Asn211Gln Thr214Glu + Leu216Cys 4- Thr212Glu 4- Tyr213Ser 4-
Alal99His + Pro200Gln +· Pro209Asn 4- Tyr213Gln 4- Thr214Asp 4-
• · · · * ··· ······ · · · ···· • · · · · · • · · · ··· ·· · · · ·
Leu216Glu + Thr219Asp
Alal99Asn + Ser203Asp + Tyr205Glu Asn211Glu + Leu216Glu 4- Thr207Asn 4- Pro209Asn 4-
Alal99Thr + Gly201Pro + Ser210Glu Asn217Ser + Thr2l9Ser 4- Thr214Asp 4- Ser215Asp 4-
Ser203Glu + Thr207Pro + Tyr208Ala Asn217Asp + Thr219Pro 4- Ser210Asp 4~ Ser215Glu 4-
Val202Asp + Val204Cys + Tyr205Asp Gly218Gln + Thr219Glu 4- Tyr208Ala 4- Pro209Gly 4-
Val202Ala + Val204Thr + Tyr208Leu Ser215Asp + Leu216Glu 4- Asn211Glu 4- Thr212Glu 4-
Pro200Asn + Val202Gln + Thr207Gln Thr214Glu + Leu216Asp 4- Pro209Ser 4- Asn211Ašp 4-
Alal99Asn + Val202Met + Thr207Asn Ser215Glu + Asn217Asp 4- Pro209Glu 4- Tyr213Glu 4-
Alal99Gly + Val202Cys + Val204Gln Asn211Gln + Thr214Glu 4- Tyr205Asp 4- Ser210Asp 4-
Alal99His Tyr208Thr + Pro209Asp Asn217Asp + 6íy218Asp 4- Ser215Asp 4- Leu216Met 4-
Alal99Asn + Pro200Asn + Gly201Gln Ser215Asp + Leu216Asp 4- Pro209Asp 4- Thr214Ser 4-
Alal99Asn + Pro200Gln + Gly201Ser Ser215Glu + Leu216Asp 4- Val202Asp 4- Asn211Asp 4-
Alal99Thr + Val202Asp + Val204Cys Ser215Asp + Leu216Asp 4- Ser210Asp 4- Tyr213Ile 4-
Gly201Ser + Val202Glu + Tyr205Gly Ser215Glu + Asn217Asp 4- Tyr208Leu 4- Ser210Asp 4-
Gly201Gln ·*- Thr207Ser + Tyr208His Tyr213Asp + Asn217Glu 4- Pro209Glu 4- Asn211Glu 4-
Pro200Gly + Gly201Asn + Ser203Glu Asn217Gln + Thr219Glu 4- Tyr208Cys 4- Thr212Asn 4-
Alal99Gly + Gly201Asn + Val202His Ser210Glu + Ser215Glu 4- Val204Ala 4- Pro209Asp 4-
Gly201Asn + Val202Glu + Pro209Gly Tyr213Thr + Thr214Glu 4- Ser210Glu 4- Thr212Glu 4-
Val202Cys + Val204Ala + Tyr205Glu Asn217Gln + Thr219Asp 4- Thr212Ser 4- Ser215Glu 4-
Gly201Ser + Ser203Glu + Ser210Glu Ser215Glu + Leu216Pro 4- Asn211Ser 4- Thr212Glu 4-
AJal99His + Ser203Glu + Thr207Gln Ser215Asp + Gly218Gln 4- Ser210Asp 4- Tlir212Asp 4-
Alal99Gln + Pro200Asn + Gly201Gln Ser215Glu + Thr219Glu 4- Val204Asn 4- Thr214Asp 4-
A 1al99Pro + Gly201Pro + Ser203Asp Ser215Glu + Thr219Pro 4- Tyr205Val 4- Pro209Glu 4-
Pro200Gly + Ser203Asp + Thr207Gln Leu216Thr + Asn217Gln 4- Asn211G1u 4- Tyr21361u 4-
Val202Asp + Tyr205Glu + Tyr208Gly Leu216Ile + Thr219Pro 4- Thr212Asp 4- Tyr213Ala 4-
Pro200Ser + Val202Glu + Tyr205Asp Tyr213Cys + Thr219Gly 4- Asn211Glu 4- Thr212Asp 4-
Val 204Pro + Tyr205Asp + Asn211Asp Asn217Ser + Thr219Pro 4- Thr214Pro 4- Ser215Asp 4-
Gly201Asn ·+ Ser203Asp + Pro20961n Gly218Asn + Thr219Glu 4- Tyr213Thr 4- Thr214Asp 4-
• ···· ·· · • · · · · · · • ···· · · · · ··· · • · · · · · • · · 9 ··· · 9 9 9 9 9
Pro200Gln + Val204Thr + Thr212Asn + Tyr213Glu + Thr214Pro + Asn217Asp + Gly218Asp
Alal99Gln + Gly201Gln + Val204Asn + Tyr208Met + Ser210Glu + Thr214Glu + Asn217Ser
Gly201Pro + Val204Thr + Tyr208Gly + Asn211Asp Thr214Asp + Asn217Glu + Gly218Asp
Pro200Asn + Pro209Glu + Ser210Asp + Asn211Ser -* Thr214Ser + Leu216Cys + Thr219Asp
Ser203Asp + Thr207Ser + Tyr208Asn + Pro209Asp + Ser210Asp + Thr214Gln + Asn217Gln
Val204Ser + Tyr208Pro + Pro209Ser + Asn211Asp + Leu216Met- + Asn217Asp + Gly218Asp
Tyr205Ser + Tyr208Cys + Pro209Asn + Asn211Asp -+· Thr212Asn + Leu216Glu + Asn217Asp
Pro200Gly + Ser210Asp Thr212Pro + Tyr213Val + Asn217Ser + Gly218Asp + Thr219Asp
Val202Cys + Tyr205Ala + Thr207Asn + Asn211Asp + Tyr213Val + Ser215Asp + Leu216Asp
Alal99Gln + Val202Glu + Ser203Asp + Val204Thr + Pro209Gln + Asn211Asp + Tyr213Pro
Gly201Pro + Val202Glu + Ser203Glu + Val204Gly + Pro209Gln + Thr2l2Glu + Leu216Ala
Pro200Gln + Val202Asp + Ser203Asp + Tyr208Ala + Thr212Glu + Leu216Val + Gly218Gln
Alal99Thr + Gly201Gln + Val202Gly + Ser210Glu + Asn211Asp + Ser215Asp + Leu216Ala
Alal99Gly + Gly201Gln + Val204Asn + Ser210Asp + Asn211Asp + Ser215Glu + Thr219Asn
Alal99Asn + Val202Ala + Ser203Asp + Val204Gln + Ser210Glu + Thr212Glu + Leu216Glu
Val202Asp + Val204Asn + Pro209Ser + Ser210Asp + Asn211Asp + Tyr213Asn +· Leu216Met
Val202Pro + Ser203Asp + Val204Ser + Thr212Glu + Tyr213Asp + Thr214Asn + Gly218Asp
Ser203Glu + Val204Pro + Tyr205Asp + Pro209Glu + Thr212Gln + Tyr213Asn + Gly218Asp
Pro200Ser Thr207Gly + Ser210Glu + Thr212Gly + Thr214Glu + Ser215Asp + Gly218Glu
Val202Met. + Val204His + Ser210Glu + Thr212Asp + Tyr213Ile + Leu216Asp + Gly218Glu
Ser203Glu ·*· Tyr208Ser + Asn211Asp Thr212Pro + Thr214Asn + Ser215Glu + Gly218Pro
Alal99Thr + Gly201Pro + Ser203Asp Tyr205Gly +· Asn211Asp -+Ser215Glu + Asn217Ser
Pro200Gln + Gly201Asn Ser203Glu + Pro209Asn + Asn211Asp -*· Thr212Gly + Ser215Glu
Tabulka 29
Vícesmyčkové varianty s dvojitou mutací
Leu 95Gly + Ser203Glu Thr 58Gln + Asp 59Glu TyrlO3(Jys + Leu216Gln
Val202Gln + Thr212Gly Glyl26Gln + Glyl56Glu Thr214Gly + Ser215Glu Asn 96Gln + Ilel06Ala GlylOlAsp + Tyr205Pro Asn 61Ser + Glyl65Gln Gly 64Gln + Thrl32Gly Asp 59Glu + Tyr205Asn SerlOOGlu + Tyr205His Glnl61Glu + Tyr205Pro Thr 58Asp Tyr205Ile Asn 61Asp + Asnl62Ser GlnlGlGlu + Pro209Gln Gly 62Asp + Pro209Asn IlelOGLeu *· Asn211Asp Tyrl66Pro + Ser215Glu IlelOGLeu + Pro209Glu ThrlG3Pro + Val202Cys Thr 65Pro + Leu216Ser Thrl32Gly + Phel88Val Glyl56Glu + AlalSGThr Prol28Ser + SerlGOAsp Gly 62Gln + Glyl65Asp Leu 95Gln ·+ Prol28Glu Ser 976lu + Asn211Ser Leu 95Asn + Phel88Leu Leul25Gln + Glyl59Glu Serl87Glu + Tyr213Ala Tyr205Cys Asn211Asp Asnl62Gln + Tyr213Pro Serl58Asp + Leu216Gln GlylSGAsp + Val202Ala SerlOOAsp + Tyr205Ile Gly 99Asn + Thr214Glu Thr 58Asp + Glyl30Gln Glyl56Glu + Tyr208Pro Alal05Pro +· Leu216Ile Serl87Asp + Tyr205Gln Leul25Asn + Serl87Glu Thr 65Gln + ThrlO2Glu TyrlO3Ile + Tyr205Glu Thrl32Asp + Gly218Gln Asn211Ser Thr212Asp Thr212Gln Ser215Glu Thrl32Pro +· Tyr205Gly TyrlOSGlu + Thrl32Ser Glyl65Gln + Ser203Glu Gly GOPro + Thr 65Pro Gly 99Asn + Glyl53Asn Prol28Asn + Val202His AlalOSGlu + Glyl30Ser Thr212Gly -+- Gly218Glu Phel88Val + Tyr205Ser Asn217Glu + Thr219Gly Len 95Gln + Ser215Asp • 9
Val 94Gln Asn 61Ser Serl29Glu Gly 62Glu Ser 97Glu Gly 99Asp GlylOlPro Thr 58Pro GlylOlGln Asn 61Gln Thr212Asp Asn211Glu Glyl53Glu Thrl32Asn Asn 61Ser Ser215Asp Gly 60Asp Serl58Glu Phel88Leu Glyl30Pro GlylOlAsp Alal0561y Asn 61Ser Asn 61Ser SerlOOGlu Thr 58Gly SerlOOGlu 01yl27Glu Asnl54Glu Ser 97Asp Ser203Glu Gly126Gln Gly 60Ser Thr 65Ser Prol28Ser Ser215Asp Serl29Glu Asn211Asp Val 94Ser Serl58Glu Gly 99Pro Val202Ser Tyr205Va1 Val 94Gly Tyr205Glu Asn 96Ser Tyr205Thr Gly 62Ser Thr 65Glu Ser215Asp Asp 59Glu Val 94Thr Ser 97Glu GlylOlAsp Serl29Asp + Thr212Glu + Ser203Asp + Asnl54Gln + Thr219Asn + Tyr213His + Ilel64Thr + Ser215Asp + Tyr205Gln + Tyr208Gln + Thr212Asp + Leu216Ile + Leu216His ·+· Thrl63Gln + Tyr205Asp + Ser203Glu + Leu216Ser + Metl98Gln + Tyr205Met. + Thr2l2Glu + Serl90Glu + Glyl26Ser + Serl57Asp + Serl31Asp -♦· Phel88Ser + Asnl62Gln + Prol28Asp + Tyr205Ala + Tyr213Thr + Leu216Gln
Alal99Pro + Leu216Ser + Ser215Glu + Asnl54Glu + Glyl56Asp + Thrl63Gln + Leu216Val + Leu216Ala + Tyr213Leu + Phel88Val + Thr212Gln + Asnl54Gln + Tyr205Glu
Asn217Glu + Ser215Asp + Tyr213Pro -+- Gly3 27Glu + Thr214Gly + Thr 65Ser + Pro128Asn + Leu216Gln + Gly 60Pro + Leu216Met. + Thr212Gln + Val202Asn + Val202Gly
Tyrl03Ala + Leu 95Met +· SerlOOAsp + SerlOOAsp + Val 94Asn + Glyl53Asn + Thr 58Glu + Thr 6561 u + Val 94Met + Ser210Glu + Leul25Pro + IlelO6Gly + Tyr205Ile + Glyl30Glu + Serl87Asp Thrl02Glu + Leul25Ser +· Glyl53Asn + Thrl63Glu + Serl29Glu + Glyl53Gln + Thr212Ser + Thrl63Asp + Asnl54Glu + Asn 96Ser + GlylOlSer + Glyl53Glu + SerlOOAsp + Glyl26Pro + Leul25Ser + Asp 59Glu -+· Glyl56Pro + Val202Cys + Leu 95Met Ser 97Asp + Asn 61Gln + Glyl26Asn + Glyl59Pro +· Leu 95Thr ·+ AlalO5Glu + ThrlO2Glu + Gly 64Gln + TyrlOSAsp + GlylOlGlu Thrl32Asn + Thr 58Pro + Ser203Glu + TyrlO3His + Ser 98Asp + Asp 59Glu + Gly 60Gln + Thrl32Asp + Gly218Ser + Serl90Asp -»· Asp 59Glu +Thrl32Ser Leu216Asp GlylOlPro Thr219Pro Ser215Asp Tyr205Asp Ilel06Cys Tyrl03Pro Ser 98Glu Gly218Ser Alal99His Thr212Glu Thr214Pro Tyr208His Leu216Val Thr219Gln Glyl53Glu Val202Asp Tyr205Gly Tyrl66Pro Pro209Gln Ser215Glu Tyr205His Tyrl66Thr AlalO5Gly PhelSSGly Gly218Asn Thr212Pro Glyl56Asp Ser215Glu Thr 65Gly Glyl59Asp Tyr213Ser Serl31Glu Gly 99Ser Leu 95Asp Tyr205Glu Gly218Asn Leu216Ala Leu216Thr Glyl30Pro Ser215Glu Gly126Asn Glyl27Gln Ser160Asp Glyl53Asn Thr214Ser Serl29Asp Pro209Ser Tyr205Ser Ser215Asp Val202Asn Thr219Gly Val202Thr Glnl61Asn • · · · · ·
Leu216Asn + Asn217Asp Val 94Asp + Tyr205Asn TyrlO3Ser + Ser203Asp Gly 99Pro + Phel88Gln Ser 97Asp + Leu216His Thrl63Asp + Leu216Asn Asn 61Asp + Thrl32Ser Leu 95Asn + Ser215Asp SerlOOAsp + Thrl32Gly Tyrl66Thr + Asn211Gln Thr207Pro + Leu216Thr IlelO6Ala +· Glyl65Asp Tyr205Asn + Ser215Glu Leu 95Asn + Val202Gln SerlóOAsp + Phel88Gly Gly 64Ser + Asn 96Gln GlylOlAsp + Asnl54Gln Gly 64Asn + Serl57Glu Phel88Asp + Tyr213Asn Ser215Glu + Leu216Ile TyrlO3His + Serl87Glu Asn 96Ser + Thr214Asn Gly 62Asn + Ser 98Asp IlelOeSer + Serl57Glu Thr 65Glu + Thr212Gly Glyl27Ser + Ser215Asp Glyl56Ser + Asn217Glu Ser 98Asp + TyrlO3Thr Glyl27Asn + Glyl65Pro Glyl53Glu + Leu216Met Serl29Asp + Glyl65Pro Asn 61Asp + Thrl63Gln Glyl26Asn + Tyr205MeL Glyl65Gln + Ser215Glu Thr 6561u + GlylOlPro Val 94Gln + Glyl65Glu TyrlO3Ile + Serl90Glu Asn217Gln + Gly218Ser Ser 9861u + Gly 99Asn ThrlO2Asp + Thr212Ser Thr212Ser + Ser215Asp Glyl30Glu + Pro209Asn Prol28Glu + Gly165Pro Thr 58Asn + Leul25Glu Leul25Hís + Thrl63Ser Thr212Asp + Tyr213Ala Thr 65Pro + Ser210Glu Val 94Thr + Thrl32Gly Tyr205.Cys + Thr214Gln Glyl27Gln + Alal8661n Glyl27Glu + Tyr205Cys Ser 98Glu + Glyl30Ser Glyl27Glu + Phel88Tyr Phel88Asp + Asn211Ser Gly 64Asn + Leu216Asp • · ♦
Ser203Glu + Thr212Ser Tyrl66Val ·+ Ser210Asp Glyl65Glu + Tyr205Met Asn 96Gln + Thrl32Glu Ser 98Glu + GlylOlPro Leul25Cys + Ser215Asp Leul25Cys + Glyl26Ser Gly 99Gln + Ser210Asp SerlGOAsp + Phel88Leu Val204Gln + Ser215Glu Asn GlGln + Leu216Asp Leul25Gly + Serl55Asp Alal86Pro + Val204Gln IlelO6Met + Serl60Asp Leul25Ile + Leu216Ser Gly GOSer + Ser 976lu Glyl65Asp + Tyr213Gln Prol28Glu + Asnl54Gln Gly GOAsp + Glyl26Pro Ser203Glu + Leu216Ala Glyl26Glu + Val202Gly Thrl32Asp + Tyr213Ser Serl57Asp + Thr212Ser Glyl30Ser + Ser203Glu Gly 99Asn + Glyl30Ser Asp 59Glu + 61yl59Asn Glyl53Asn + Thr212Asp Glyl53Asp + Tyr205Ser SerlOOGlu + Tyr205Thr Glyl26Asn + Asnl54Glu Serl90Asp + Tyr205Val ThrlO2Glu + TyrlGGThr Serl57Glu + Pro209Gly SerlOOAsp + Tyr205Leu Serl31Glu ·+· Thrl32Asn Glyl27Asp + Leu216Thr Ser210Glu + Asn21761n Asn 61Asp + IlelOGGln AlalOSPro + Tyr205Pro SerlOOAsp *· Leu216Cys Ser203Glu + Tyr205Thr Leu 95Asp + Asn 96Ser Tyr205Ala + Thr212Glu ThrlG3Gln + Phel88Glu TyrlO3Ala + Thr212Asp Serl55Glu + Gly218Asn Val 94Thr + Thrl63Ser ThrlO2Glu + Asn217Gln Glyl59Ser + Val202Glu Asnl54Ser + TyrlGGAla Asp 5961u + Phel88Gly Thrl63Gln + Gly218Ser Glyl53Asn + Tyr205Val Serl29Glu + Leu216Pro Glyl26Ser + Thr212Glu • ♦· ·
Ser203Asp + Glyl26Glu + Val 94Pro + Serl29Asp + Glyl65Ser + Gly 60Gln + Ser203Asp + GlylOlGlu + Val 94Glu + Val202Gly + Asp 59Glu + Val2O2Asn + Leu 951 le + Prol28Glu Ser 97 Asp ·*Serl87Glu + Asnl54Ser Leul25Gly ·*Asnl54Ser + Glyl26Asn + Asn 96Gln + Gly 64Ser -+· Serl60Asp + Ser210Glu + Tyr205Ala + Serl58Asp + Thr212Gly + Alal99Ser Serl29Glu + Asnl54Gln ·+ Serl9061u + Thr 58Pro + Glyl27Glu + Asnl54Glu + Glyl53Ser + Tyr205Thr + Leul25Gly + TyrlO3Val + Glyl26Asp + SerlOOGlu + Serl29Asp + Serl6OGlu + Thrl63Glu + Glyl59Ser + Asp 59Glu + GlylOlAsp + Thr 58Asn + Asn 61Glu + Glyl27Ser + Gly127Pro + Glyl27Glu + Phel88Met + Ser 976lu + Gly 6061u + Asnl62Glu ·+·
Leu216Asn Thr212Pro Alal86Glu Glyl53Asn Ser215Asp Serl87Glu Leu216His Ilel06Met Glyl27Gln Leu216His Thrl32Asn Tyr205Pro Ser215Glu Leu216Pro Tyr213Met Leu216Cys Glyl56Gln Glyl26Ser Leu216Asn Val202Asn Glyl27Ser Thr212Gly Asn211Ser Gly218Gln Thr212Asp Leu216Ser Ser215Glu Val202Ala Tyr205Asn Gly201Gln Thr212Ser Serl60Asp Glyl30Ser Thr212Gly Glnl61Asn Ser210Glu Pro200Gln Thrl32Gly Leu216Ala Glyl27Asn Alal86Ser Tyr205Ser Ilel64Hís Glnl61Glu Gly159Pro Tyrl66Cys Serl29Glu Thr214Ser Ser203Glu Glyl30Asp Val202Gly Ser203Glu Tyrl66Asn Gly 99Asn Asn217Ser
ThrlO2Asp Gly 99Gln Glyl53Ser Tyrl03Pro Serl87Glu Serl60Asp SerlOOAsp GlylOlAsn Asn 96Ser Thrl32Gly IlelOGPro Gly 62Ser Phel88Cys Leu 95Cys SerlO4Asp Tyr205Glu Glyl53Glu Val 94Thr Thr 65Asp Val202Gln Val 94Ser Thr 58Pro AlalO5Asn SerlO4Asp Glyl26Gln Glyl53Ser Pro200Gly + Leu216Gly + Alal05Thr -+- Ser203Glu + Serl58Glu + Tyr205Pro + Val204Thr + Leu216His + Ser203Asp + Tyr205Pro + Thr212Pro + Val202Cys + Pro209Glu + Leu216Asp + SerlO4Glu + Tyr205Met. + Thr214Gly + Leu216Asn + SerlOOGlu + Val202Hís + Ser215Asp + AlalOSGlu + Glyl53Asp + Ser20361u + AlalO5Gly + Ilel64Val + Ser215Glu + Ser215Glu
Tabulka 33
Vícesmyčkové varianty s trojitou mutací
Thr 58Gln + Asp 59Glu + Glyl56Glu +· Glyl26Gln + Asn 96Gln + Asn 61Ser + Gly 64Gln + Thr 65Pro + Thrl32Gly + Leu 95Asn +· Asnl62Gln + SerlOOAsp + Thr 58Asp + Glyl56Glu + Thr 65Gln + Asn211Ser + Tyr205Gly + Thr 58Glu + Asn 96Gln + Gly 99Asn + AlalO5Glu + Tyr205Ser +
Leu 95Gly TyrlO3Cys Val202Gln Thr214Gly Ilel06Ala GlylOlAsp Thrl32Gly Thrl63Pro Phel88Val Ser 97Glu Serl87Asp Val202Ala Gly 99Asn Tyr208Pro Leu125Asn Thr212Asp Thr212Gln Gly 60Pro Gly153Pro Gly153Asn Prol28Asn Thr212Gly +· Ser203Glu + Leu216Gln + Thr212Gly ·+ Ser215Glu + Glyl56Glu + Tyr205Pro + Glyl65Gln + Val202Cys + Leu216Ser
Asn211Ser + Tyr213Pro + Tyr205Ile + Glyl30Gln + Leu216Ile + Serl87Glu + Gly218Gln + Ser215Glu + Thr 65Pro + Leu216Val + Pro209Glu + Val202His + Gly218Glu »* ····
Gly 99Gln Leu 95Gln GlylOlPro Thr 58Pro GlylOlGln Asn 61Gln Asn GlSer Gly130Pro Asn 61Ser Asn 61Ser Glyl26Gln Thr 65Ser Prol28Ser Val 94Ser Gly 99Pro Tyrl66Asp Gly 62Ser Thr 65Glu Val 94Thr Serl29Asp Leu 95Met. Val 94Met Leul25Pro IlelOGGly Serl29Glu Pro209Gln Asnl54Glu Asn 96Ser Glyl53Glu Glyl26Pro Glyl56Pro Leu 95Met. Glyl26Asn Thr 65Gln TyrlO3Asp Thr 58Pro Gly GOGln Thrl32Asp TyrlO3Ser Ser 97Asp Asn GlAsp Leu 95Asn TyrlGGThr IlelO6Ala Leu 95Asn Gly 64Ser Thr 58Asn Gly 62Asn Glyl30Asp Gly 99Ser Val 94Ala Leu 95Thr Asp 59Glu Val202Gln Thr 58Ser + Asn217Glu + Val202Thr + Ilel64Thr ·*· Glyl30Asp + Serl90Glu + Thr212Asp + Thrl32Asn + Phel88Leu + AlalO5Gly + Asnl62Gln + Ser203Glu + Glyl56Asp + Ser215Asp + SerlOOAsp + Asnl54Gln + Tyr205Thr + Thr 65Ser + Prol28Asn + Thr212Gln + Thrl32Ser + TyrlO3Ala + Ser 98Glu + Alal99Hls + Tyr205Ile + TyrlGGPro + Thr212Ser
Tyrl66Thr + GlylOlSer + Phel88Gly
Glyl56Asp + Glyl59Asp + Ser 97Asp ·+ Glyl59Pro + Leu 95Thr + Glyl26Asn + AlalO5Glu +· Tyr205Ser + Gly218Ser + Phel88Gln + Gly 99Pro + Thrl32Ser + Thrl32Gly ·+· Asn211Gln + 61yl65Asp + Val202Gln + GlylOlAsp + Gly 64Asn + Asn 96Ser + Phel88Asn + Prol28Glu +· Pro209Ser + G1y126G1n + Glyl59Ser + Ser20361u + Serl90Glu + Thr2l9Gly -+- Ser215Asp
Ser215Asp + Tyr205Gln + Tyr208Gln + Leu216Ile + Tyr205Asp + Thr212Glu + Serl31Asp +· Phel88Ser -+· Leu216Ser + Thrl63Gln -»· Leu216Val + Phel88Val + Ser203Glu + Thr214Gly + Asn211Glu + Leu216Gln + Leu216Met + Val202Gly + Leu216Asp ·+· Tyrl03Pro + Ser203Glu + Thr214Pro + Tyr205Gly + Ser215Glu + Tyr205His + AlalO5Gly + Gly218Asn
Thr212Pro + Val202Cys ·+· Gly 99Ser + Gly218Asn + Leu216Ala + Glyl27Gln + Glyl53Asn + Ser215Asp + Thr219Gly + Ser203Asp + Leu216His
Leu216Asn -+- Ser215Asp + Leu216Thr -+· Thr207Pro + Ser215Glu
Asnl54Gln + Serl5761u -+· Thr214Asn + Gly218Pro + Leu216Gly -+- Ser215Asp -+ Leu216Gly + Tyr205Pro + Tyr205Asn + Tyr205Pro ·· ····
Leu 95Asn Thr 58Asn Serl31Glu Glyl27Ser Thr 65Gly Gly 60Asn Alal99Ser Thr 58Pro Glyl53Ser Leul25Gly TyrlO3Val SerlOOGlu Serl60Glu Glyl59Ser Phel88Met ThrlO2Asp Thr 58Asp Ser 97Asp Ilel06Pro Leu 95Cys Thr 65Asp Thr 58Pro SerlO4Asp Glyl26Gln Serl60Asp Gly 62Ser Thr 58Gly Ser 97Asp Thr 65Glu Phe 1881.le Thrl32Gln Serl29Asp Leul25Ile Thr 65Pro ThrlO2Asn Thr 65Gln Leul2SAsn Leul25Pro SerlOOGlu Glyl26Ser Val 94Thr Serl57Glu Tyr205MeL Prol28Gln Gly 60Ser Asnl62Asp Glyl65Ser SerlOOAsp AlalOSHis Asn162Gln 61y 99G1n Glyl26Asp G1y 62G1u Asnl54Asp Asn 61Asp + Tyr205Ala + Glyl53Pro + Thrl32Asn -+ Thr212Asn + ThrlO2Asp + Tyr205Thr + Val202Ala + Glyl30Ser + Asnl54Glu + Tyr205Thr + Thrl32Gly + Glyl27Asn + Alal86Ser + Thrl63Glu + Val202Gly + AlalO5Thr -*· Asn 96Ser + Thrl32Gly + Val202Cys + Phel88Cys + Val 94Thr + AlalOSAsn + AlalOSGly + Ser203Asp + Gly218Gln + Alal05Glu +· Ilel06Gly + Thrl63Gln + G1y126G1n + Ser20361u + Glyl65Asp + Asn211Ser + Asnl54Ser -+· GlylOIPro + Thr212Gly + Tyr205Gln + Pro209Gly + Val202Hls ·+- Glnl61Asn + Thr212Glu -+- Serl55Asp ·+· Tyr208Gln + Thr212Gln +· Thrl32Pro + Glyl56Asp +· Thrl63Asn + Tyr205Thr + Glyl56Pro -+· Serl57Glu -+- Serl90Glu + G1y126G1n + Glyl59Ser +· Asnl54Gln + Tyr205Ser + Leu 95Ser + Pro209Glu + Ser210Glu + Glyl65Asn + Ser215Asp + Glyl27Asn + Asn217Gln + Thr212Gly + Serl60Asp + Thr212Gly + Ser210Glu + Pro200Gln + Leu216Ala +· Tyr205Ser + Ilel64His + Ser203Glu + Leu216Gly + Tyr205Pro + Thr212Pro +· Ser215Asp -+- Leu216Asp + Val202His + Glyl53Asp + Ilel64Val -* Leu216His + Thr219Asn -+- Prol28Ser
Leu216Asp + Alal86Ser + Leu216His + Leu216Thr + Thr212Ser + Leu216Thr + Leu216Met + Thr212Asp -+ Leu216Asp -+· Leu216Met. +- Thr214Glu ·*· Ser215Asp + Tyr205Val +· Gly218Asn + Thr207Gly + Thr212Gln + Ser215Glu +- Tyr213Asn + Pro209Asn + Alal99Gly + Ser215Glu + Tyr20561n + Alal86Asn + Val202Ser
Glnl61Asp + Thr212Gly + Leu216Gln + Tyr213Met + Val204Gln • · · · · · ·· · ♦ ·
Thrl02Gln Prol28Asn Glyl59Ser Asn211Gln Gly 99Ser Thr 65Gly Val 94Met. Leu 95Ser Thr 58Gly Alal05Gly Serl58Asp Thr 58Gln Thr 65Pro Gly 62Asn Leu 95Met. Tyr1031le GlylOlGln Prol28Gly Pro200Ser Thr212Asp Thrl63Gln Thr 58Gln Thrl02Pro Gly 62Ser Leu 95Asp SerlOQGlu Thr 58Ser GlylOlSer SerlO4Glu Thr 65Asp Ser203Glu Thr 65Ser Thr 65Gly GlylOlPro Alal05Gly Glyl26Gln Glyl53Gln Gly 99Gln Thr 58Ser Asnl62Ser Val 94Ser Serl57Asp Gly165Asn Gly156Asn Pro128Ser Asn 96Gln Glyl59Asp Thr 58Gln Pro128Ser Glyl56Gln Gly 62Ser Leu125Pro Thr 58Gln ThrlO2Gln Gly 99G1u + Glyl59Gln + Glyl59Asn + Thrl63Gly + Tyr213Gln + Leul25Gly + Serl90Glu + Asnl62Ser +· TyrlO3His + Asn211Glu + Thr212Pro + Glyl59Ser -·- Serl58Glu * Leul25Met + Glyl26Pro + Thrl32Asp + Glyl59Asp + Tyrl66Pro + Thrl32Pro + Thr212Asp + Leu216Met + Tyr205Cys +- Ser 98Glu -+· Serl55Asp + Gly 99Glu + Ilel06Gln + GlylOlGln + SerlOOGlu + PhelSSAsp + Glyl56Gln + Val 94Gly -+· Thr212Ser + Leul25Glu + Tyr205Asp + SerlO4Asp + Asnl54Asp + Glnl61Ser
Tyrl66Cys + Val204Pro
Ser 97Asp + Metl98Gly ·* Leul25Asp
Tyr205Ser +- Ser215Glu + Thrl63Glu + Glyl56Glu + Glyl26Gln + Glyl65Pro + Glyl53Ser + Thrl32Glu
Tyr205Pro
Tyr205Ile + Glyl59Glu + Ser203Asp + Val 20211 i s + IlelOGGly + Serl90Glu + Asn211Ser + Alal99Thr + Ser215Glu + Ser215Glu +· Thr219Ser + Leu216Met + Glyl56Glu + Leu216Ala + Gly218Glu + Tyr205Pro + Thrl63Gly + Thrl63Gly + Ser210Glu + Asn211Ser + Val202Gly + Asn211Gln + Thr214Gln + Leu216Gly + Gly218Gln + Thr212Pro + Thr212Pro +· Tyr205Asn + Val202Ser + Glyl26Asn + Val202Ala + Ilel64Leu + Tyr213Gly + Thr212Gly + Tyr205Met + Tyr213Val + Glnl61Ser + Tyr213Thr + Thrl63Gln + Pro209Gly
Leu216Ala + Gly218Asp + Thr21961u + Thr212Pro + Val202Thr
Tyr205Thr + Leu216Thr + Leu216Pro
Alal99Ser + Thr219Gly + Ser203Glu + Tyr213Ile + Asn217Gln + Thr212Gly + Ser215Glu + Leu216Asp + Glyl65Pro + Thr212Ser + Thr214Ser -+- Gly218Asn • · · · · ·
Ser 97Asp IlelO6Leu Thr 58Pro Glyl27Ser Tyrl03Pro Thr 58Gln Val 94Cys Thrl02Pro Thr 58Glu Phel88Thr Gly 99Asn ThrlO2Gly Gly 60Asp ThrlO2Asn Gly 62Ser IlelO6Hls Glyl26Glu Asp 5961u Thrl63Pro Serl29Glu Glyl56Asn Val 94Ser Asn 96Glu TyrlO3Gln GlylOlSer SerlO4Glu Gly 62Asp GlylOlAsp Serl57Glu Pro209Glu Asnl54Glu Asn211Glu Tyr205Gly Val202Ser Thr 58Asp Tyr205Glu Glyl56Ser Gly 6061 u Serl55Glu Leu 95Asn Ser203Asp Gly 62Asn Ser203Glu Phel88Asn Gly 62Asn Ser203Glu Glyl56Gln Ser203Asp Tyr205Ala Ilel64Cys Serl58Asp Asp 59Glu Gly 64Gln Ser 97Glu Asnl54Gln + Leul25Val + Phel88Glu +· Glyl53Pro
Prol28Gln + Ser203Asp + Thrl63Ser + Ser215Glu + Glyl65Pro + TyrlO3Asn + Val202Asn + Tyr205Ser + Glyl65Asp + Alal86Pro
IlelOóAsn -+· Ser 97Glu + Serl29Glu + Prol28Asn + Gly 64Asn + Val204Thr
Asnl62Ser + Phel88Ala + GlylOlSer ·+· Tyrl66Ala + Phel88Met + Thr212Pro + Glyl59Gln + Glyl26Ser + Gly218Pro + Tyr205Pro + Ser210Glu + Serl55Glu + Thr212Asp + Ser215Glu + Ser215Asp + Asp 596lu -*· Tyr213Pro -+· Tyr205Asp ·* Ser 97Glu + Asnl62Ser + Ser203Asp + Ser215Asp + Ser203Glu + Tyr205Pro + Ser203Asp + Ser203Glu -+ Ser215Asp + Ser203Glu + Tyr205Ala + Ser210Glu + Ser210Glu + Glnl61Glu + Asn 61Glu + Ser 9861 u + Gly 99Asp
Serl57Glu + Tyr213Ile + Thr212Asn + Asnl62Gln + Thr212Pro + Tyr205Ile + Tyr205Ser + Gly218Pro + Val202Thr + Pro200Gln + Asn217Ser + Ser215Glu + Gly218Gln + Tyr205Asn +· Serl58Glu + Gly218Asn + Thr212Asn ·+ Val202Asn + Tyr213Ser + Tyr205Cys + Leu216Cys + Tyr205His + Leul25Asp + Leu216Cys + Ser210Glu + Thr219Pro + Thr212Pro + Leu216Pro + Thr219Asn
Thr212Ser + Gly218Ser + Gly218Pro + Leu216His + Leu216Asp +· Leu216Asp + Thr212Ser + Ser215Asp + Ser215Glu + Gly 99Asn + Serl90Glu + Ser215Asp + Thr219Gln + Ser215Glu + Ser215Asp + Ser215Asp + Ser215Asp -+ Leu216Ser »- Ser215Asp + Asn217Glu + Thr212Asp + Thr212Asp + Tyr205Pro + Glyl30Ser + SerlOOAsp + Tyr213His + Ser190Asp ·· ·· ·
Serl58Asp Gly201Pro Gly 99Gln Serl60Asp Serl29Asp Asp 59Glu Val 94Gly Val202Glu Glyl56Glu Asn 61Asp Glyl59Asn TyrlO3His Ser 97Asp Serl57Glu Glyl53Asp Serl57Glu Asp 59Glu Glyl53Ser Asnl54Glu Serl55Asp Ser21OAsp Asn 61Glu Asnl54Asp SerlOOGlu Gly 60Glu Gly 99Glu Thr 58Glu Ser 97Glu Gly 62Asp Asn 61Asp Glyl27Glu IlelO6Asn SerlOOGlu Gly 62Asp IlelOGGln TyrlO3His Alal86Glu Glyl27Glu Serl57Glu Gly 62Asp Thr 58Asp Serl55Glu Prol28Asp Glyl56Asp Serl58Glu ThrlO2Glu Ser 98Asp Gly 62Asp SerlGOGlu Glyl59Asp Prol28Glu Leu 95GIu Asp 59Glu Gly 60Ser Gly101 Ser
-+ Serl60Glu + Ser203Glu ·+ Serl29Asp + Asnl62Glu + Serl31Asp + Glyl65Asn + Ser215Asp + Tyr205Gln + Serl58Glu -+· Asn 96Glu + Phel88Asp + Asnl62Glu ·+· SerlOOGlu + SerlGOGlu + Val202Ser + Glyl59Glu + Asn 96Glu + Asnl54Asp + Glyl65Asp + Glyl56Asp + Tyr213Asp + Alal86Gly + Serl57Glu + Leul25Glu + Leu 95Glu + GlylOlGlu + Thr 65Glu + GlylOlAsp
Ser210Asp + SerlOOGlu ·+· Asnl62Glu + Glyl56Glu + Glyl26Glu + Phel88Leu + Ser215Glu + Serl55Glu + Val2O2Glu + Asnl54Glu + Serl60Asp +· Leu216Glu
Ser210Asp
Serl57Asp + Asnl62Glu + Glyl65Glu + Phel88Asp + SerlO4Asp + SerlOOAsp + Pro209Asn + Serl87Asp
Val202Asp + Thr212Asp + Tyr205Asp
Tyr205Glu + Thr 65Glu + Asnl54Glu + Tyr205Cys + Tyr205Asp + Tyrl66Glu + Phel88Gly + Gly218Asn + Pro209Glu + Asn217Glu + Leu216Glu +· Tyr205Met + Glyl27Ser + Gly218Asp + Serl90Asp + Gly201Asn + Tyr205Pro + Gly218Asp + Ser190Asp + Tyr205Ser + Glyl65Asp ·«- Asn211Ser + Thr219Asp + Thr214Glu + Pro209Asp + Thr214Ser + Tyr213His + IlelO6Leu + TyrlO3Glu + IlelOGCys + Val202Asn + Leu216Ala + Asnl62Ser +- Glyl65Glu + Glyl59Glu + AlalSGGln + Thr212Glu + Gly218Glu + 61y218Gl.u + Ser215Asp + Tyr213Thr
Serl87Asp + Thr219Gln + Thr212Glu + Gly218Asp + Asn217Ser + Tyr205Asn + Val202Met + Leul25Glu -+ SerlO4Glu ·+· Asn211Asp + Ser190Asp + Ser203Asp
Tyr213Asp + Ser215Asp + Ser215Glu + Leu216Asp + SerlSBGlu • · · · · ·
100
Prol28Asp Ser203Asp Serl04Glu Serl60Asp Ser203Glu Glyl27Glu Prol28Glu Asp 59Glu Ser 97Asp Asn 96Glu Thr 65Asp Ser 98Asp Thrl32Glu Serl29Glu Serl90Glu Asn 61Asp Serl29Asp SerlOOGlu Glyl27Glu Asp 59Glu GlnlólGlu Asp 59Glu Leul25Glu SerlO4Glu Asp 59Glu Serl29Asp Serl31Glu Glyl56Asp SerlóOGlu Thr 58Asn Asp 59Glu Serl04Asp Gly 62Asp Serl04Glu Gly óOAsp Ser 98Glu TyrlO3Asp SerlOOAsp Thr 65Asp Asp 59Glu Glyl53Glu Ser 98Glu Serl31Asp AlalO5Asp Serl58Glu Serl57Asp Gly 62Gln Ser 97Glu Serl55G1u Gly159G1u Prol28Asp Asp 59Glu Gly óOAsp Gly13061u ThrlO2Gln + Ser203Asp + Ser210Glu + Ser203Asp + Ser203Asp
Ser210Asp *· Serl29Glu + AlalSóGlu + Asn 61Glu ·* Gly 99Asp + SerlOOAsp + Thrl63Gln + Thrl02Glu + Serl57Asp + Serl57Asp + Ser203Glu + Ser 98Asp + Phel88Glu -·- SerlO4Glu + Serl90Asp + Ser203Glu + Ser215Glu -* Ser 97Glu + Glyl53Glu +· Serl57Asp
Asn 96Glu + Thrl32Glu + Ser203Glu + Ser203Asp + Thrl63Asp + Gly 99Glu + Phel88Leu + Serl31Glu + SerlO4Asp + Ser1316lu + GlylOlAsp + Ser215Glu +· Serl29Asp +· IlelOóAsp + SerlOOGlu + SerlOOAsp +· Asnl62Asp + Thr2l2Glu + Thr212Glu + Thr21261u + Thr212Asp + Ser203Glu + Thr212Glu + Serl87Glu + Asn217Asp
SerlOOGlu + Serl90Glu + Gly156Asp + SerlOOGlu + Glyl53Glu + Glyl53Glu + Ser215Asp + Ser215Glu + Asn217Glu + Leu216Asp + Leu216Asp + Ser215Glu + Phel88Asp + Ser203Asp + Ser210Asp + Thr212Glu + Ser215Asp + Leu216Gln + Serl90Glu + Serl90Glu + Tyr205Glu + Tyr205Asp + SerlOOAsp + Tyr205Met + Tyr205Leu + Pro209Asp + Asn217Asp + Serl57Asp + Ser203Glu + SerlóOAsp + Serl87Glu -»· Asnl62Glu + Gly218Glu + Thr214Asp + Ser215Asp + AlalO5Glu + Thr212Asp + Tyr205Glu ·+ Serl31Asp + 61yl56Glu + Metl98Gln + Gly218Asp + Tyr205Glu + Ser215Asp + AlalO5Glu + Tyr205Ile -* Ser203Glu + Ser215Glu +· Ser215Asp +· Ser215Asp + Ser215Asp + Thr219Asp + Leu216Asp
Asn217Asp + Gly218Asn
Asn211Glu + Ser215Asp ·+ SerlóOGlu + Ser215Glu + Tyr205flsn + Asn217Asp • * · · · ·
101
Serl29Glu + Serl55Glu + Glnl61Asn Tyr205Glu ·+· Asn211Glu + Leu216Cys Glyl53Glu + GlnlGlAsp + Alal99Asn Gly 62Asn + Glyl53Glu + Val202Asp Serl29Asp + AsnlG2Glu + Asn211Glu Glyl53Glu ·+· Serl58Asp + Leu216Asp Seri57Glu + Leu216Ile + Thr219Asp Serl58Glu + Ser215Asp Thr219Asp
Tabulka 34
Vícesmyčkové varianty s čtyřnásobnou mutací
TyrlO3Cys + Val202Gln + Thr212Gly + Leu216Gln Asn GlGln + GlylOlAsp ·+· IlelO6Ala + Tyr205Pro Asn GlSer + Gly 64Gln + Thrl32Gly + Glyl65Gln Leu 951le + Tyr205Glu + Tyr213Ala + Thr219Asn Glyl26Ser + Val202Ser + Tyr205Cys ·+· Asn217Glu Asn 9GSer + Asnl54Glu ·+ TyrlGGThr Tyr205His GlylOlSer + AlalO5Gly + Phel88Gly + Gly218Asn GlylG5Ser + Val202Gln + Tyr205Thr + Thr212Ser Glyl26Asn + Serl90Glu + Pro209Asn + Leu21GVal IlelOGGlu Glyl27Ser +· Asnl54Ser + Tyr205Leu Thr 58Pro + Ser203Asp + Tyr213Met + Leu216Val Gly 62Gln + Asn 96Glu + Uel64Asn + Leu2lGIle Ser 98Glu + TyrlGGGln + Thr212Asn + Leu216Val GlylSGAsp + TyrlGGAla + Tyr208Pro + Leu216Ile Thr 58Pro + Ser 98Asp -*· Glyl30Pro + Tyr205Val Glyl30Asp + Phel88Asn + Leu21GGly + Gly218Pro Leu 95Thr + Glyl26Gln + Pro209Ser + Leu216Gly Val20261η + Ser203Glu + Tyr205Asn + Gly218Asn Thr 58Asn + Leu 95Asn +· Glyl53Pro -* Ser210Glu Glyl27Ser +· Serl31Glu ·+· Thrl32Asn + GlylG5Asn Thr 65Gly +· Glyl27Asn + Thr212Gln + Thr214Glu Asn 96Gln + Glyl26Asn + Glyl27Ser + Val202Asn Gly 64Ser + SerlGOAsp + Asn211Ser +· Thr212Gly Asp 59Glu + ALt199Ser + Val202Ala + Tyr205Ser Leul25Gly + Thrl32Gly + Pro200Gln + Tyr205Thr Glyl59Ser + ThrlG3Glu ·+· IlelG4His + Tyr205Ser Glyl27Pro + Phel88Met + Val202Gly + Ser215Glu GlylOlGln + Asn211Gln + Thr212Pro + Ser215Asp Prol28Gly + Pro200Ser + Thr214Gln + Leu216Gly Tyr205Cys + Thr212Pro ·+ Leu21GMet + Gly218Gln Thrl02Pro + Val202Ser + Tyr205Asn + Gly218Asp Leu 95Asp Ilel06Gln + Glyl26Asn Val202Ala Tyrl03Gln + Ser203Asp + Thr212Asn + Leu216Asn Phel88Met + Ser210Glu + Thr212Pro + Thr219Pro SerlO4Glu + Glyl59Gln + Thr212Pro + Leu21GPro Gly GOGln Alal8GGly +· Thr212Gly + Ser215Asp ThrlO2Glu + Thrl32Pro + Leu216Pro + Asn217Gln Leu 95Ala + Phel88Thr + Tyr205Gln +· Ser215Asp Thr 58Gly Gly GOAsp + Val202Gys + Thr212Pro GlylSGAsn + Val202Asp + Thr212Ser + Thr214Gly Thr 58Pro + GlylG5Glu + Tyr205Ser + Tyr213Hís • · · · · ·
102 • · « • · · • · · · • · « · ·
Gly 99Asn Gly 62Glu IlelOÓGln SerlóOGlu Glyl30Gln Glyl56Glu Glyl65Gln Val 94Cys Leu 95Thr Gly 99Pro Gly 64Asn TyrlO3Gln Glyl26Gln Gly 64Ser Gly 99Asn GlylOlPro TyrlO3Asp Leul25Thr Gly 64Pro Asn 61Ser AlalOSThr Asn 61Gln Gly 60Gln Leu 95Pro ThrlO2Asp Val 94Thr SerlO4Asp G1y 64Ser GlylOlAsn Glyl59Pro Prol28Gln Gly 60Asn Ser 98G1u Thr 65Asn Val202Gln Thrl32Ser Leul25His G1y126Ser AlalSÓGly Thr 58Gly Asp 59Glu Serl55Glu Glyl27Asn Leu 95Cys Asp 59Glu Serl31Glu Leul25Val Val 946ly Asp 59Glu AlalBóGln Thr 65Ser TyrlóóAla Gly 99Asp Thr 65Pro Leu 95Ser + Tyrl66Asn + Leu 95Met +· Serl87Glu + Tyr205Ser + Serl31Glu + Thrl63Ser + Phel88Leu + Prol28Asp + Glyl56Ser + TyrlO3Glu + Thr 65Glu + 61yl56Pro + Prol28Gln + Val 94Met + Val202Pro + Asnl54Ser + Glyl53Pro + GlnlólAsn + Val 94His
Thr 65Gln + Glyl53Gln + Tyrl66Ile +- Tyrl03Gly
Tyr205Leu + Glyl26Gln + Glyl53Pro + Alal05Asn +- Val 94Asn + Leul25Asn + Glyl65Pro ·+ Ser129Asp + Glyl59Ser + Gly 99Asn + Gly 99G1n + Tyr205Thr + Glyl56Ser + Glyl56Ser +· Tyr205Asp + Ser215Glu -*· Gly 60Asn + Val 94Gly + Met.l98Thr + TyrlóóPro + Glyl30Gln + Thr 65Gly + Gly201Ser + Tyr205Gln
Thrl02Ser
Gly 60Gln + Gly201Gln + Ser 98Asp + Serl87Glu + Metl98Cys + IlelOóGly + ThrlO2Asn + Ser203Asp + AlalO5Ser + Tyr205Gly + Thr212Pro + Asnl62Gln + Asn211Ser + Val202His + Val202Thr + Thr214Glu + Glyl65Pro + TyrlóóAla + Tyrl66Asn + Val202Thr + Glyl30Asp + Thr212Asn + Leu216His
Alal86Asn + Thr212Gly + Ser210Asp + Serl90Asp + Glyl56Gln + Alal86Asn + Glyl30Asn -+ Asn211Gln + Val202Asn + Alal86Pro + Thrl63Ser + Glyl30Asp + Gly201Pro -♦· Alal86Thr + Alal86Ser + Phel88Val + ThrlO2Asn + Thr212Ser + Tyr213Val + PhelBBThr + Thr212Glu + Thr214Gln + 61y218Pro + Leul25His + Tyr205Gln + Val202Met + PhelBSLeu +· Thr212Ser + Leu 95Gly + Val202Gln + Ser215Asp + Ser203G1u + Thr212Gly
Val202Pro + GlnlólSer + Tyr205Gly + Pro209Gly + Tyr205Gln + Leu216Asp + Leu216His + Glyl26Ser + Thr219Pro + Leu216Thr + Leu216Asn + Thr212Asn + Thr212Glu + Tyr205Ala + Leu216Ala + Leu216Cys + Phel88Tyr + Ser215Glu + Thr212Glu + Tyr213Gly + Ser215Glu + Asn2l7Glu + Val202Ser ·+· Leu216Asn + Thr212Gly ·+· Val202Gly + Asn21161n + Ser215Asp + Asn217Asp + Ser215Glu
Thr21261y +· Tyr205Glu + Tyr205Ala -»· Leu216Cys + Leu216Ser + Thr212Pro + Asn217Ser + Ser203Glu + Alal86Pro + Leu216Asp + Ser215Glu + Asn211Glu + Leu216Asn + Leu216Asn + Thr219Gln +- Leu216Gly + Tyr213Ile + Tyr205Thr + Thr214Glu + Leu216Val + Leu216Asn
Tyr205Gly + Gly218Gln + Leu216Asn ·+· Leu216Cys -+ Ser203Glu + Tyr205Cys + Leu216Val + Thr212Asn +- Leu216Glu + Asn217Ser
103 ·· ···· ·
···· • · • · · · • · ·· · * • · · ··· ·· ·
Thr 58Gly Val 94Pro Ser 97Glu TyrlO3Met Leu 95Met. Ser 97Asp GlylOlSer IlelO6Met Glyl65Ser Gly 62Ser GlylOlGln Val 94Ala Asn 96Asp Glyl53Gln IlelOGCys Asn 96Asp AlalOSThr Thrl02Pro Gly 60Ser SerlOOAsp Prol28Gly Serl29Glu Val 94Pro Serl55Asp Gly 99Asp ThrlO2Gln Asp 59Glu GlylOlSer Serl29Asp Gly 60Pro Thr 65Gln Val 94Gln Asp 59Glu Ser 98Asp Ser160Asp AlalOSGly Pro200Asn Tyr205Asp Asn 61Asp Leul25His Thr 65Asn Gly 64Pro Prol28Ser Val202His Gly 99Asn Tyr205Ala Phel88Ala Asnl54Glu Gly 99G1n ThrlO2Gly Glyl27Pro GlylOlAsn Prol28Ser Ilel06Val Thr 58Gly + Glyl27Ser + Tyr213Thr + Glnl61Asn + Thrl32Gly + Glyl56Asn + Metl98Ala + Glyl53Pro + Thrl63Glu + Serl90Asp + Glyl53Asp + ThrlO2Ser + Leu 95Gly ·+· Tyr205Ala + Tyr205Ile + Asnl54Glu + Gly 99Pro + Leul25Thr + Glyl56Pro + Phel88Ile + Tyrl03Gln + Glyl65Gln + Thrl32Gln + Gly 99Asn + Glyl65Ser + Phel88Val + Glyl26Asn + Thrl32Pro + AlalO5Glu ·+· Glyl53Asn + Asn 96Asp + Gly 99Pro + Glnl61Asp + Gly 60Glu + Gly 99Glu + Glnl61Asp + IlelO6Cys + Tyr205Asp + Thr207Ser + Thr 65Gln + Ser203Glu + Ser203Glu + Alal86Ser + Ser203Asp + Tyr205Val + Glyl30Ser + Ser210Glu + Ser203Asp + Serl55Asp + Serl29Asp + AlalO5Thr +· Serl57Glu + Asnl54Asp ·+· Serl58Asp +· Thr214Asn + Asnl54Asp + Tyrl66Glu + Thr214Glu + Tyrl66Gly + Tyrl66Met. + Val202Glu + Val204Thr + Asn217Glu +· Tyrl66Ile r Pro200Ser
Thrl63Ser + Glyl53Ser + Leul25Thr + Thr212Pro + Thr212Gly + Tyr205Ala + Tyr205Val + Val204Ala + Tyr208Val + Thr212Ser + Glyl59Gln + Ser203Glu + Metl98Thr + Thrl32Gly + Tyr205His + Thr207Asn + Glyl59Asn -»- Thrl63Pro + Alal86Pro + Glyl59Pro + Glyl26Gln + Tyr205Ala + Tyr205Pro + Alal86Gly + Phel88Met + Tyr205Ser + Tyr205Asp ·+ Asn211Gln + Thr214Ser + Ser 97Asp + Ser215Glu + Tyr205Cys + Ser203Asp + Tyr213Ala
Ser210Glu + Ser210Glu + Thr212Asp + Tyr205Asp +· Thrl63Asp + Tyrl66Glu + Serl55Glu + Glyl59Asp + Thrl63Gly + Thrl63Asp + Ser215Asp + Serl57Asp + Val202Asn + Asn217Gln + Val202Ser
Ser210Asp + Leu216Gln + Tyr205Thr + Thr219Pro + Thr212Ser + Val202Met + Gly201Gln + Val202Asp + Glyl30Asp + Thr219Gly + Ser215Glu + Leu216Ala + Asn217Gln + Tyr205Met. + Thr212Asn + Leu216Asp ·«- Leu216Val + Leu216Ser + Thr219Gln + Glyl59Asp + Thr212Gly + Leu216Pro + Leu216Asp + Phel88Thr + Thr212Gly + Val202Met. + Tyrl66Ala
Ser215Asp + Leu216Met. + Gly218Asn + Tyr213Ala + Thr219Gln + Ser215Asp + Ser215Glu + Ser215Asp + Tyr205Ala + Leu216Asp -r Ser215Asp + Ser215Asp + Asn217Glu + Thr212Asp + Thr2l2Asp + Gly218Gln + Thr212Ser + Tyr213Thr + Leu216Thr + Serl57Asp + GlnlGlAsp + Gly218Glu + Asn217Ser + Asn217Asp
Serl90Glu
104
Leul25Asn Gly 64Pro SerlSSAsp Val 94Pro Glyl26Gln GlylSGSer Asnl54Asp Asnl62Asp SerlS5Glu Asn 96Glu Asnl54Ser Asn GlGlu Thr GSGly Tyr205Leu Asn GlGln Gly 62G1u Thr 65Glu AlalO5His Asp 59Glu Leu 95Gln Gly 60Asp Thr 58Gly Glyl56Asn Thr212Asp Thr 58Asp IlelOGGlu Asn GlSer Ser210Asp Glyl27Pro GlylOlGlu GJy 62Glu Asn GlAsp Ser203Glu Thr GSGlu GlnlGlAsp GlylS3Glu Asp 59Glu Gly GOAsn Glyl30Glu Glyl30Asp Serl29Asp Gly 99Glu Prol28Asp TyrlO3Asp Thr 65Pro Thr 58Asn SerlO4Asp SerlS7Asp G1nlGlSer Thr 58Pro ThrlO2Glu Asn GlGlu Tyr205Va1 Asp 59Glu Prd 28Asn + Glyl53Glu + Serl57Glu + Serl87Asp + Serl55Asp + Ser203Asp + Serl87Asp + Serl87Glu + Glyl65Asp + Serl87Asp + ThrlO2Asp + Glyl56Glu ·+ SerlOOAsp + Asnl54Glu + Thr212Glu + Gly 626lu + Ser 986lu + Tyr205Met -*· Phel88Asp ·+ Pro209Ser + Glyl26Gln + Val 94His ·*· Glyl26Glu + TyrlGGPro -+ Ser215Glu + GlylOlSer + Glyl26Asp + Gly 99Asp + Thr212Asp + Pro128Ser + ThrlO2Asp + Leu 95Asp + Ser 97Asp + Tyr205Pro + Tyrl03Pro + Thrl63Glu + TyrlGGGly + Glyl59Glu + Serl29Glu -+ Serl31Asp + Asnl54Glu + Glyl30Glu
SerlOOAsp + Serl29Asp + Serl04Glu -+- Serl57Glu
Asn 96Asp + Ilel64Gly + Ser215Asp + Serl87Asp + SerlO4Asp + SerlGOGlu + Gly G2G1u + Ser210Asp ·+- 61yl2GSer +- Serl29Asp + Thrl63Asp + GlnlGlGlu ·+· Serl90Glu + Serl57Asp + Ser215Glu + Serl90Glu + Val202Asn + Thr212Gln + Pro200Ser +· Alal05Pro +· Asnl62Asp + Tyr205Val + Serl57Asp + Ser215Glu -+· Ser 98Asp + Glyl30Ser + Thr212Asp + Val202Asp ·+ Asn211Asp + Glyl27Asp + Asnl54Ser + Serl55Asp + Thr212Glu + Leu216Ala ·* Ser210Asp + Glyl27Asn + Thrl02Asp -+· Tyr213Pro + Alal86Glu + Serl29Asp
Glyl59Asn + Ser210Glu + Thr212Ser -+- Ser215Asp + Serl87Glu + Serl87Glu +· SerlGOAsp + Serl58Asp ·+ Serl55Glu + Serl55Asp
Glyl56Glu ·+- Ser203Glu + Val202Asn + Thr212Pro + SerlSSAsp + Ser 9?Asp + Ser215Asp + Leu216Glu + Ser215Glu + Thr212Glu + GlnlGlAsp + Ser203Glu + Asn211Glu + Tyr205Glu + Tyr205Asp + Thr214Pro ·* Tyr205Cys + Thr212Gln + Serl87Glu + Gly218Asp + Thr212Ser + Leu216Ser + Leu21GCys + Tyr213Val + Tyr213Val + Thr212Ser + Leu216Gly + Asnl62Glu + Leu216Glu + Thr214Gln + Val202Pro + Thr214Gly + Asn211Ser + Thr212Glu + SerlSSAsp + Ser21061u + Gly201Pro + Ser215Glu +· Thr219Ser + Thr212Glu + Leu21GPro + SerlO4Asp + Ser215Glu + Ser203Asp + Leu216Asn + Leu216Gly + Thr212Gln + Thr219Glu + Asn217Asp + Asn211Gln + Leu216Met + Pro209Gln + Glyl59Asp + Thr212Asn + GlnlGlAsn + GlnlGlSer + Leu216Ser -+· Ser215Glu + Ser215Glu
Ser215Asp +· Serl87Asp + Leu216Asp + Gly218Gln + Leu216Glu + Tyr213Glu + Leu21GVal + Thr212Gly + Leu21GGlu + Ser215Glu + Ser215Asp
105
GlylOlGlu Serl55Glu TyrlO3Ala Gly 60Glu Serl87Glu Serl57Glu Ser 98Glu Glyl27Gln Val 94Glu SerlOOAsp Serl57Glu Val 94Gly Phel88Val Serl58Asp Serl57Asp Glyl26Pro Serl31Glu TyrlO3Glu Glyl59Glu SerlOOAsp ThrlO2Asp Asn 61Glu Asnl54Asp Thr 65Gly Asn 96Asp ThrlO2Asp Glyl27Glu ThrlO2Glu Ser 98Asp Glyl59Asp Serl55Glu Serl29Glu SerlOOGlu Glyl26Asp Asn 61Asp Gly 99Asp Serl90Glu Gly 60Pro Serl57Glu Gly 60Asn ThrlO2Glu Asn 61Glu Asp 59Glu Leul25His IlelO6Cys Ser 97Glu Serl31Asp Serl04Glu Serl57Asp Asn 61Asp Asn 6lAsp Thr 586ly SerlSSAsp Gly 99Ser Glyl59Gln + Tyr205Glu -+ Ilel64Ser + Tyrl66Glu + Ser 97Glu + Ser203Glu + Ser203Asp + Ser203Glu + Serl60Glu + Ser203Asp + Ser203Glu + Phel88Thr
Leu 95Glu + Serl90Asp + Ser203Asp
Ser2O3Asp + 61yl53Glu +· Glyl65Asn + Glyl53Asp + Ser203Glu + Glyl53Gln + Glyl27Glu + Asnl54Glu + Glnl61Ser + Glyl27Asp + Gly 99Glu + AlalOSGlu + Serl29Glu + SerlO4Glu + SerlOOGlu + Glnl61Asp + Phel88Glu
Thrl32Asn + Glyl53Asp + Serl31Glu + Gly 99Glu + Ser203Asp + Ser203Glu *· Serl57Asp + Thrl63Glu + Serl57Asp + Glyl27Asn + Glyl53Ser + Asn 61Gln -*· Serl29Asp +· Tyr205Asp -·- Glyl56Asp + Asnl54Gln + Thr2l2Ser + Serl87Asp + Asn 96Asp + Asn 96Glu +- Serl58Glu +- Asnl62Asp + Serl57Asp +· Asnl62Glu + Ser215Asp + Tyr205Asp + Tyr205Glu + Gly 99Asn + Tyr205Asp + Tyr208Pro + Tyr205Val + Ser203Asp + Ser215Asp + Ser215Glu -+ Ser203Asp + Ser203Glu + Ser203Asp + Ser215Asp
Ser215Asp + Ser203Glu + Ser203Glu ·*· Serl90Glu + Leu2l6Gln + Thrl63Asp ♦· Serl55Asp + SerlOOAsp + Serl90Asp + GlylGSAsp + GlylOlAsn +· Glnl61Ser + Glyl30Ser + Pro200ftsn + Prol28Gly + Val204Gly -+ Tyr205Asn + Glyl65Asp + Glyl65Gln + Thr207Gly + TyrlO3Thr + Tyr205Asp + Tyr205Asp + Ser203Glu + Pro209Ser + Thrl63Glu + Glyl30Glu + Pro209Asp
Leu216Asp + Serl31Asp + Ser210Glu + Thrl63Asp + Ser215Glu + Ser215Asp + Ser203Asp + AlalOSHis + 61yl27Ser -+- Asn211Asp + Thr212Asp + Asnl62Glu -+- Ser 190Asp + Leu216His +· Ser215Asp + Ser215Glu + Asnl62Glu + Tyr213Pro + Ser215Glu + Ser215Glu + Ser215Glu + Leu216Pro +· Leu216Thr ·* Ser215Asp +- Ser215Asp + Ser215Glu + Asn217Ser + Thr219Gln + Ser215Glu
Ser215Asp + Tyr205Val + Asn217Glu * Serl90Asp + Tyr213Pro + Val204Met ·*· Ser203Glu + Ser203Asp + Serl87Glu + Pro209Asp +· Serl60Asp + Thr212Glu + Glyl59Asp + Ser215Glu + Ser215Glu + Gly218Asp + Thr219Asp + Gly218Gln + Serl31Asp + Thr212Pro + Leu216His + Tyr205Asp + Ser215Glu + Asn211Asp + Tyr205Gln + Ser215Glu + Gly218Asp + Val202Glu + Leu216Asp + Thr212Gln + Asn217Asp + Asn217Glu + Thr212Gly + Asn162Asp + Glyl30Asp + Tyr213Asp + Leu216Thr + Leu216Asp + Ser215Glu • · · · · ·
106
Ser 97Asp + Gly 60Glu + Serl57Asp + Gly 62Pro + Serl90Asp + Asn 96Glu + TyrlO3Glu + Glyl30Glu + Asn 61Asp + Serl55Asp ·+Serl55Asp + Gly 60Gln ·*· Asp 59Glu -·Asp 59Glu + Gly 62Asp Leul25Asp + Leu 95Glu ·+GlylOlAsp + Gly 99Glu + Asp 59Glu + Asn 616.1'u + Thr 65Gly + Alal86Glu + Asn 61Gln + Gly 99Gln + Serl60Glu + Asn 96Asp + Gly 9961u + Asnl62Gln + Ser 97Glu + IlelO6Cys + SerlOOGlu + Thr 65Asp -+Ser 97Glu Asp 59Glu ·+ Asp 59Glu + Ser 160 Asp -+· Serl55Glu + Serl55Asp + Serl29Asp + Val 94Glu +GlylOlAsp + Ser 98Glu ·+ Gly 99Asp + Glyl59Asp + Serl58Glu + Va1 94Pro + G1 y 99G1n + Thr 58Asp ·+Asp 59Glu +Asp 59Glu + Asp 59Glu +Prol28Glu + Asn 96G1n + Ser 97Gln +
SerlOOAsp + Ser 98Glu + Serl60Asp + Serl31Glu + Val202Glu + Glyl53Asp + Serl31Asp + Serl57Asp + Thrl63Gln + Serl58Asp + Glyl56Ser + Thr 65Gln + Asn 96Glu + Asn 96Asp + Ser 97Glu -+Glyl65Asp + Tyrl66Asn + Asnl62Asp + TyrlO3Glu + Asn 96Ser + SerlOOAsp Ser 97Glu + Phel88Tyr + Glyl56Glu + Serl29Glu + Thrl63Asp ThrlO2Asp + AlalO5Asp + Alal86Asp + Glyl56Glu + Serl29Glu + Leul25Gly + Serl31Asp + ThrlO2Glu + Gly 99G1u ·+Gly 99Asp + Pro209Asn + Glyl59Asn + Asn211Asp + Thrl32Glu + Ser 97Asp + Glyl26Asp + Glyl27Glu +· GlylOlPro + Thr212Asp Asnl62Gln +· Serl55Asp + IlelOGAsp + Tyr205Pro + Ser 98Glu + SerlOOAsp + SerlOOAsp ·+ Asnl62Asp + Thr.lO2Asp + Gly130Asn +
Glyl26Asn + Glyl53Gln + Thr212Asn + Glyl65Glu + Ser215Glu + Glyl56Asp + Ser203Asp + Serl87Asp + Ser203Asp Ser203Asp -+Ser215Glu Asn 96Asp + Ser203Glu + Ser215Asp + AlalO5His + Ser203Asp + Ser203Glu + Glyl65Glu + Serl29Glu + Thr212Glu + Alal86Gly + GlylOlGlu + Thr212Asp + Ser215Glu + Serl55Glu -+Thr212Ser Serl57Glu + Thr214Asn + Tyr205Ser + Glyl59Asp + SerlSSGlu + Glyl27Glu + Ilel64Asn -+· GlnlGlSer + Ser203Asp + Glyl26Ser -+ Ser215Asp + Pro209Glu + Tyr213Met, + SerlGOGlu + GlylOlPro + Thrl32Asp + Thrl63Asp + ThrlO2Glu + Ser215Asp + Thr212Glu + Thr212Glu + Thr212Glu + Thr212Glu + Ser203Asp + SerlO4Asp + SerlO4Asp + Thr212Glu + Serl29Glu + Ser155Asp +
SerlGOAsp AlalSGAsp Ser215Glu Thr219Asp Leu216Ala Glnl61Asn Leu216Cys Tyr208His Thr214Glu Tyr205Thr Thr219Asp Leul25Glu Thr214Asn Leu216Ile Serl31Glu Tyr213Gln Thr214Glu Leu216Asn Tyr205Asn Ser215Asp Thr212Glu Glyl30Glu Asn217Asp Thr219Glu Gly218Glu Ser215Asp Alal86Hís Leu216Val Leu216Asp Val202Asn Alal86Glu Ser203Asp Thr212Asp Tyr205Leu Tyr205Asn Thr214Glu Gly218Glu Gly218Glu Gly218Asp Alal86Ser Ser203Glu Thr212Asn Thr212Asn Ser203Glu Asn217Ser Ser215Asp Ser2l5Glu Ser215G1u Ser215Asp Tyr205Gly AlalOSPro Tyr205Ile Leu216Cys Asn16261u Alal86Glu • · · ·
107
AlalO5Glu + Serl55Glu + Glnl61Asp + Tyr205Thr Gly 62Asp ·+· Serl58Asp + Ser215Asp + Leu216Asn Thrl02Asp ·+- Glyl26Asp + Serl58Asp ·+- Thr212Ser Thr 58Asn + Gly 64Pro + Thr 65Glu + Val 94Asp Serl90Glu + Ser203Glu + Tyr213Glu + Leu216His Glyl59Asp + Ser203Asp + Tyr205Cys + Tyr213Asp IlelO6Asp + Glyl30Asp + Ser215Asp + Asn217Gln Ser 98Glu + ThrlO2Asp + Ser203Asp + Thr214Gly Gly 99Gln + Serl04Asp + Glyl30Asp + Asnl54Glu Serl04Glu ·+ Glyl26Ser + Glyl30Asp + Asn21761u Asn 96Gln + SerlOOGlu + Serl04Glu + Tyr205Asp Asn 6161n + GlylOlAsp + Serl57Asp + Glyl65Glu Thrl02Ser + Val202Cys + Thr214Glu + Gly218Glu Asn 61Gln + Serl04Glu + Glyl27Glu + Glyl65Pro Thr 65Gly -+· Tyr205Glu Asn211Glu + Leu216Cys Gly 99Gln + Glyl59Ser + Pro209Asp + Leu216Asp Asp 59Glu ·+- Serl58Asp + Tyr205Pro + Thr212Glu Asp 5961u + Serl31Glu + Thr212Glu + Leu216Ile Alal05Asp + Leul25Glu + Asn211Glu + Leu216Ile Thr 58Asp + Glyl56Ser -+- Asn211Asp + Ser215Glu Serl57Glu + Glyl59Ser + Glyl65Pro + Thr219Glu Asnl62Asp + Tyr205Gln + Thr212Glu + Leu216Asp SerlOOGlu + Metl98Gln + Thr212Asp + Leu216Glu Gly 64Gln + Prol28Glu + Thrl32Asp + Thrl63Gly Gly 62Gln Prol28Asp + Thrl32Asp + Leu216Thr GlylOlAsp + IlelO6Met + Leul25Gly + Prol28Glu Thr 65Glu + Asn 96Glu + Glyl56Asp * Leu216Cys SerlO4Asp Leul25Gln + Serl29Asp + Asnl62Gln Asp 59Glu + Glyl30Glu + Glyl53Glu + Tyr205Asn Serl29Asp Serl55Asp ·+ Tyr205Val +· Leu216Asp Serl29Glu + Serl55Glu + GlnlGlAsn + Ser210Glu Gly 60Asp + Glyl27Asp + Asnl62Glu + Phel88Asn Gly G2Gln + Ser 98Glu +· Serl87Asp + Ser203Glu Serl04Asp ·+ Glyl80Gln + Serl87Asp +· Ser203Glu Asn 61Asp -+ TyrlO3Ser + Thr212Asp + Thr219Asp Asp 59Glu GlylOlAsp Glyl59Pro + Glnl61Glu Gly 60Glu + Leul25Ser + Glyl53Glu + Val202Asp Thrl32Glu + Serl57Glu +· Thr212Gly +· Thr219Asp GlylOlGlu + Leul25Cys + Glyl30Glu + Thr219Asp Gly 60Asp + Prol28Glu + Serl57Asp -+- Tyr205Cys Prol28Glu + Asnl54Gln +- Serl57Asp Ser203Asp Ser 97Asp +· AlalOSAsp + Ser203Asp + Thr212Gln SerlOOAsp Serl58Glu ·+ Tyrl66Asp Phel88Pro Tyr205Thr + Asn211Glu ·+· Ser215Glu +· Leu216Asn
Tabulka 35
Vícesmyčkové varianty s pětinásobnou mutací
TyrlO3Cys + Glyl26Gln + Glyl56Glu + Val202Gln + Thr212Gly Val 94Met + GlylOlAsn + Thrl02Asn + Tyr205Leu + Gly218Asp Ser 98Asp + TyrlOSHis + Leul25Cys + Glyl59Asn -+- Met.l98Cys L.eu 95Met + GlylOIPro + TyrlO3Ala + Glyl65Ser + Leu216Asp Thr 65Asp + Val 94Thr ·+ Thrl32Gly + Asnl54Ser + Thr219Gly Val 94Thr + Thrl32Gly + Alal86Gln + Tyr205Cys + Thr214Gln • · · · · · • · · · · · · ······ · · · ···· • · · · · · ··· · ··· ··· ·· ·
Thrl63Gln Leu 95Asp Gly 99Glu Gly 60Asn Alal86His Gly 99Gln Thr 58Gly Val 94Asp Glyl26Asn Asn 61Glu Va1 94Cys TyrlO3Gln Gly 99Asn GlylOlAsp Asn 61Ser Asn 61Gln AlalO5Gln Pro200Ser Val 94Asn Thrl63Asn Leu 95Met. Val 94His Gly 64Ser IlelOGAla Asp 59Glu Glyl30Pro TyrlOJGln Gly 60Pro Gly 60Gln Thrl32Gln Gly 62Asn Thr 58Pro Leu 95Met Ser 98Glu Gly 62Ser Gly 62Gln Gly 60Pro SerlOOAsp Leu 95Pro Asp 59Glu AlalOSAsn Leu 95Cys Leul25Cys Asn 96Ser GlytOlGln Thr 58Gly Tyr205Pro Glyl30Pro AlalO5Gly Thr 58Gln Serl58Glu Asn GlSer Gly 60G]n Leu125Asn GJy 64Gln + Tyr205Cys + Thr212Pro + Leu216Met + Gly218Gln + GlylOlGln + Ilel06Gln + Glyl26Asn + Val20'2Ala + Glyl26Ser Tyrl66Ala + Asn211Gln + Leu216Asn + Glyl59Glu + GlnlGlSer + Asnl62Gln + Leu216Ser + Val202His + Thr212Pro + Ser215Glu + Leu216Thr + Leul25Ile + Glyl27Ser + Tyr205Val + Thr212Asp + Val 94Gly + Tyrl66Cys + Ser203Asp + Tyr205His + Gly 99Asn + GlnlGlSer + Gly201Ser + Thr212Asn + Glyl27Pro + Glyl53Asp + Glyl59Pro + Uel64Ala + Thrl02Asn + Glyl65Gln + Phel88Leu + Val202His + Glyl56Ser + Val202Thr + Tyr205Ala + Leu216Ala + Glyl26Gln -+- Glyl56Pro + Tyrl66Asn +- Ser215Glu + Val202Pro + Thr212Asn + Tyr213Gly + Ser215Glu + Leul25Thr + GlnlGlAsn + Thr212Gly + Leu216Asn + Glyl53Gln + Glyl56Gln + Val202Gly + Asn211Gln + AlalO5Thr + Tyrl66Ile + Alal86Asn + Ser215Asp + Leul25Gly + Thrl63Ser + Val202Gln + Asn217Asp + Val202Ser + Ser203Glu + Thr207Gly + Thr214Gly + Glyl30Pro + Tyr205Ser + Ser215Asp + Thr219Pro + Alal99Gln + Tyr205Asn + Thr212Ser + Ser2l5Glu + Glyl56Asn + Val202Cys + Leu216Gln + Gly218Glu + Gly 996lu + Asn211Ser + Tyr213His + Leu216Met + Val 9461 n +· Serl57Asp + Tyr205Ser + Thr207Pro + Glyl65Asn + Serl90Glu + Alal99Asn + Tyr205Asn + Glyl59Ser + Glyl65Asn + Phel88Thr + Asn217Gln + Serl55Glu + Glyl59Asn + Tyr205Pro + Thr212Ser + Serl55Glu + Val202Asn + Thr2l2Ser + Thr219Asn + Val 94Ser -*· SerlOOGlu + TyrlO3Leu + Tyr205Ser + Leu 95Val + Prol28Gly + Serl58Asp ·* Tyr205Thr + Asnl62Ser + Glyl65Asp + Tyr205Gly +· Tyr208Cys + Val 94Thr + AlalOSHis + Prol28Glu + Tyr205Hís -+- Glyl56Pro + Val202Pro + Thr2l2Glu + Leu216Thr + Gly 99Gln + TyrlO3Cys + Asnl54Gln + Thr212Gln + Tyr205Asn + Pro209Gln + Tyr213Hís + Thr219Ser + Val 94His + Tyrl03Gln + Serl87Glu + Phel88Tyr + Asn 96Ser + Glyl65Glu + Val202Gly + Tyr205Thr + IlelOGThr + Serl60Glu + Thr214Gln + Leu216Ile ·+· AlalO5Thr + Tyr205Ile + Thr214Gly + Leu216Cys +· AlalO5Asn + Phel88Leu + Thr212Pro + Leu216Val ·+· Gly 60Ser + Glyl27Pro + Tyr205Thr + Leu216Ala + Serl31Asp + Thrl63Pro + Leu216His + Gly218Asn +- TyrlO3Met + Ilel06Cys + Alal86Asp + Tyr205Met
Tyr205His + Leu216Asn Asn217Ser + Thr219Asn + Glyl53Glu + Asnl54Gln + Alal86Gln + Thr212Asn + AlalOSPro + Glyl30Asp + Asnl54Gln + Glyl56Asn + Glyl59Pro + Thrl63Ser + Tyr205Gln + Thr212Asn + Thr212Asn + Tyr213Gln + Ser215Asp + Leu216Gln + Glyl53Pro + Glhl61Glu +· Tyr205Met. + Thr212Gln + Serl57Asp + Tyrl66Asn + Va120261η + Thr212Ser + Asn 96Ser + Ser203Asp + Thr207Gly + Leu216Ser + Val202Ser + Thr212Asn + Thr214Gln + Thr219Asn + SerlOOGlu + Tyr205Leu + Thr212Ser + Asn217Ser + Gly 99Glu + Thr212Ser + Tyr213Gln + Leu216Thr + Serl29Asp + Asnl62Ser + Alal86His ·+· Tyr205Gln + leu 95Glu + Alal99Asn + Val204His + Leu216Met • · • · · ·
109
Leu 95Hls + GlylOlPro + Val204His + Tyr205Asn + Leu216Gln Thrl63Ser + Glyl65Asn + Pro209Gly + Tyr213His +- Leu216Asp Glyl27Gln + Serl31Asp -·- Thrl32Pro + Tyr205Cys -+- Leu216Asn Asn 61Gln + GlylOlPro + Serl90Asp + Tyr205Pro + Thr214Gly Glyl26Asn + Pro200Gly + Val204Gly + Tyr205Asp + Thr212Asn Asn 6161n + Val 94Gln + Glyl26Asp + Tyr205Val * Thr212Gln Gly 60Gln + IlelOGPro + Serl31Glu + Ilel64Ala + Val202Pro GlylOlSer + Tyrl03Glu + SerlO4Asp + Glyl65Asn + Pro209Gln Thr 58Glu + Asp 59Glu + Tyrl66His + Val202Cys + Thr219Asn Glyl26Pro +- Alal86His +· Tyr205Asp + Tyr213Val +· Ser215Asp Gly GOAsp + Ser 97Glu ·+· AlalOSPro + Leul25Cys +- Glyl53Pro Asnl54Ser -*· Pro209Ser + Thr214Glu + Ser215Asp +- Leu216Glu Thrl63Pro + Ser203Glu + Val204Thr + Tyr205C.ys + Ser215Asp Gly 62Ser + Metl98Gln + Ser203Glu + Ser215Asp + Leu216His Glyl56Asn + Ser203Asp + Tyr205Met +- Ser215Asp + Gly218Pro Gly 60Gln + Prol28Ser + Ser203Glu + Ser215Glu + Leu216Pro Tyrl66Cys + Tyr205Glu + Pro209Asn + Ser215Glu + Leu216Asp TyrlO3Leu + Leul25Gly + Glyl53Glu + Serl90Glu + Leu216Ile Gly 99Pro + IlělOGThr + Glyl53Asp + Serl55Asp +- Serl90Asp Thr 65Pro + Leul25His -+· Ser210Glu + Thr212Asp + Tyr213Ala Gly 64Ser ·+ Thr 65Ser + Gly 99Asn + Pro209Glu + Asn211Glu Leu 95Asn + GlylOlAsn + Asnl54Asp + Glyl56Glu + Tyrl66Gln Serl55Glu + Thrl63Asp + Tyr205Cys + Thr212Pro + Leu216Val Glyl59Pro +- Thrl63Ser + Ser203Asp + Tyr205Asp + Thr212Ser ThrlO2Gln + Glyl26Asp + Glyl53Asp + Phel88Thr +- Tyr205His Asn 61Ser + Val202Glu + Ser203Glu + Tyr205Asp + Thr212Pro Thr 58Gln + Thrl02Pro + Tyr213Cys + Ser215Glu + Asn21?Asp Gly 60Asp +- Gly 62Glu + Thr 65Glu + Glyl26Asn +- Leu216Thr AlalO5Gly + Glyl26Pro + Glyl53Glu + Leu216Thr + Gly218Asp TyrlO3Gln + AlalOSThr + Val202Asp + Tyr2051Lis + Ser215Glu Val202Glu -* Tyr205Thr + Pro209Asn +- Ser215Asp +- Leu21GMet Val 94Asn + AlalO5Asn + IlelOGVal +· Ser203Glu + Gly218Asp Asn 96Ser + Ser203Asp + Tyr205Ile + Thr212Gln +- Gly218Asp Asn 61Asp + Gly 62Gln + Thr 65Asp + Glyl26Asn + Glyl59Pro Glyl53Gln + Alal86Glu + Tyr205Thr + Leu2l6Thr + Asn217Asp Leul25Asp + Glyl26Asp + Alal86Ser + Gly218Glu + Thr219Pro Thr 58Glu + Thr 65Glu ·+ Val 94Gln + GlylOlPro + Glyl65Gln Glyl53Glu +· Serl58Glu + Thrl63Glu + Glyl65Pro + Leu216Met. Glyl59Asp + Thrl63Glu + Tyrl66Thr + Alal86His + Pro200Ser Leul25Thr + Glyl30Ser + Asnl54Asp +- Serl57Asp + Alal86Glu Asp 59Glu +- Asn 96Glu + GlylOlGlu + Prol28Ser + Thr212Asn Asp 59Glu +- Asn 96Asp -+· GlylOlAsp + TyrlGGAsn +· Thr219Asn Gly 99Glu +· GlylOlGlu + Glyl2761u + TyrlGGLeu +- Asn217Gln Alal86Gln -+ Serl87Asp +- Leu216Pro + Gly218Glu +- Thr2l9Gln Thr 58Pro + Leu 95Ile + Glyl26Glu + Glyl53Glu + Phel88Asp Thr 53Glu + Asn 96Glu + Gly 99Asp +- Phel88Met. + Gly218Gln Gly 62Glu + Asnl62Ser + Val202Met + Thr212Asp +- Leu216Met Gly 62Pro + Gly 99Gln +- SerlO4Glu + Serl31Asp ·+ Tyr213Thr Gly 62Glu + Glyl30Ser + Tyr205Glu +- Ser215Glu + Leu216Asn Glyl26Gln +- Glyl27Glu + Asnl54Glu + Tyr213Pro + Leu216His Serl29Glu + Asnl54Glu + Asnl62Ser +- Glyl65Asp + Leu216Cys Thr 58Gly Leul25Asn +- Glyl56Asp + Glnl61Glu + Tyr205Gly Glyl26Ser + Glyl53Gln + Glyl56Glu + GlnlólAsp + Tyr205Pro Thrl63Gln + Val202His +- Tyr205Asp + Pro209Gly + Thr212Asp Gly G2Gln + Val202Met + Asn211Asp + Thr212Asn + Thr214Glu • · · ·
110
ThrlO2Gln + Glyl26Pro + GlylOlSer ·+· Glnl61Asn +Leul25Gln + Alal86Glu + Serl29Glu + Serl55Glu + Thr 58Asn + Leul25Glu + Asn 61Glu + Gly 62Asp + Thr 65Gln + Asnl54Asp + Asp 59Glu + Ser 97Glu + Glyl53Glu + Ilel64Thr + Val 94His +· Leul25Cys + Serl87Glu + Tyr205Thr + Gly 99Ser + Glyl30Glu + Prol28Gln + Glyl56Asp *Gly 62Asp + Glyl56Asn + Glyl26Ser ·+ Tyrl66Gly ·+TyrlO3Val + Prol28Asp Glyl30Pro + Glyl56Asn + Leul25Pro + Ser203Asp + Leu 95Asp ·* Glyl26Glu Gly 62Ser + Serl90Asp Gly 64Asn + Tyrl03Ile + Glyl26Ser + Glnl61Asp + IlelO6Leu + Glyl26Asp + Asp 59Glu + ThrlO2Ser + Leu 95Asp + Asn 96Asp + Glyl30Glu + Serl31Asp + Gly 60Glu + Asn 61Asp + Thr 65Asn + Gly 99Gln + Asnl54Glu -+· Serl55Asp + SerlOOAsp + Asnl54Glu +· Gly 62Asn + Glyl53Asp + TyrlO3His +· Serl29Glu + Serl29Asp + Asnl62Gln * SerlOOGlu + Glyl53Pro + Thr 58Asp + Thr 65Pro + Thr 65Pro + Glyl26Asn + GlylOlAsn +· Serl57Asp + Asn 96Glu + Ser 97Glu + Thr 65Asn + Ser 98Asp + Asn 96Glu + Prol28Ser + IlelO6Gly + Serl55Glu + Leul25Glu + Thr163Asn + GlylOlGln + Glyl30Glu + Prol28Gly + Ser210Asp + SerlO4Asp + AlalOSGlu + Ser 97Glu + Ser 98Glu + Glyl53Gln + Ser210Asp + Thr 65Glu +· Leul25Cys +· ThrlO2Gln + Glyl65Asn + Leu 95Glu + Asn 96Gln + Glyl26Asn + Tyr205Asp + Gly 62Gln +· Leu 95Pro + Asn 6IGI11 +- GlylOlGlu + Glyl56Asp + Alal86Gln + Gly 6OGI11 + Ser? 97Glu +
Thr212Asp + Ser215Glu + Thr212Glu + Ser215Asp + Val202Cys + Ser203Asp + Thrl63Asp ·+- Alal86Ser -+· Prol28Glu + Thrl63Ser + Glyl30Ser + Asn211Asp + Ser215Glu ·*- Leu216H.ls + Thrl02Gln + Ser210Asp + Val202Gln + Ser203Glu + Glyl26Ser + Serl55Glu + Thr212Asn + Tyr213Gly + Asnl62Asp + Thrl63Asp + Alal86Glu + Ser203Glu + Alal86Pro + Thr212Glu +· Ser203Asp + Pro209Asp -+Glyl53Asn + Asnl62Ser + GlnlólAsp + Thrl63Glu + Pro209Gln + Thr212Glu + Prol28Gly + Glyl59Gln + Thr214Gly + Ser215Asp + Leul25Asp + Ser203Asp + Asnl62Ser + Thr214Glu + Glyl27Glu + Glyl30Gln + AlalO5Gly + Glyl59Glu + Tyrl66Leu ·+· Val204Ala + Glyl53Gln + Serl58Glu ·+· GlnlólAsn -*· Pro209Gln + Asnl54Asp +· Pro209Asp + Tyr213Thr + Ser215Glu + Ser 155Asp +· Pro209Ser + Asn211Glu + Thr212Asp + Tyr205Pro + Asn211Asp ·+· Tyr205Leu + Asn211Asp + Thrl63Pro + Val202Glu + Val202Glu + Ser203Asp + Serl57Glu + Serl58Asp + Serl58Glu ·+· Ser215Glu +· Glyl59Asn + Phel88His + Glyl59Asn + Ser215Asp + Tyr205Cys -+ Ser215Glu + Thr212Asn Ser215Glu ·+ Val202Thr + Ser215Asp + Tyr205Ala + Ser215Glu + Thr212Ser + Ser215Glu Metl98Pro *· Ser203Glu + AlalO5Gly + Glyl53Asp + Asn211Asp + Thr212Ser + Glyl26Ser + Val202Glu Ser203Glu + Tyr205Glu + Tyr205Glu + Pro209Ser + Ser210Asp + Ser215Glu + Serl58Asp + Tyr205Asp + Glyl26Ser + Leu216Met + Serl90Glu + Ser203Glu + Gly 99Asn + Asnl62Glu +
Leu216Asn Leu216Gln Ser215Asp Tyr208Ser Glyl65Pro Thr212Gly Asn217Glu Leu216Thr Asn217Glu Glnl61Glu Asn217Glu Tyr205Asn Tyr213Gln Leu216Asp Ser215Asp Serl90Asp Serl87Glu Leu216Asp Alal86His Gly218Asp Asn217Glu Ser215Glu Val202Glu Serl60Glu Gly218Glu Alal99Pro Ser215Glu Ser210Glu Gly218Pro Thr214Gly Gly218Gln Thr212Glu Thr212Asp Ser203Glu Leu216Asn Ser215Asp Leu216Ile Ser210Glu Leu216Asp Leu216Glu Leu216Asp Leu216Glu Leu21661u Leu216Glu Leu216Ser Asn2l7Gln Ser2l5Asp Ser215Asp Pro209Asp Ser215Glu Leu216Met. Ser215Glu Thr219Ser Thr2l2Pro Asn217Ser
111
Thr 58Pro + Serl60Asp + Glnl61Asn + Ser203Asp + Prol28Glu Glyl65Gln + GlylOlPro + Thrl32Ser + Prol28Ser Alal86Gly + Asn 61Gln + Serl58Asp + Leu 95Val +· SerlOOAsp -+ Glyl53Glu + Alal86Gln + Serl60Asp Ser203Glu + Thr 58Pro + Leu 95His + Asnl54Gln ·+· Serl57Asp + Leu 95Gln + SerlOOAsp + Asnl54Asp + Tyrl66His + Ser 98Asp + Ser20361u + Asnl62Glu + Ser203Asp + GlnlGlAsp + Thrl63Gln + Leu 95Cys + Serl29Glu + Thrl32Asn + Asnl54Glu + Prol28Gln + Serl31Asp + Thr 58Glu + Asn 61Ser + SerlOOAsp + Glyl53Ser + AlalO5Glu + Ser203Asp + ThrlO2Asn SerlO4Asp Gly 62Asp + Leul25Thr + Glyl53Glu + Phel88His + Thr 58Asp + Phel88Asn + Thr 65Gly + ThrlO2Ser + Asp 59Glu +· Thrl63Glu + Tyrl66Val + Ser203Glu + 61yl59Asp + Ser203Glu +· Serl57Asp + Asnl62Gln + Leu 95Thr +· SerlSIGlu + SerlOOAsp + Glyl27Asn + ThrlO2Gly + Serl29Glu + Thr 65Gln + Ser 98Asp + Thr 65Asn + Glyl27Glu + Gly 60Asn + Ser203Glu Val 94Cys + Ser 98Glu + Gly 60Gln + TyrlO3Asn + Ser 98Glu + SerlOOAsp + Gly 60Glu + Thr 65Asp + Asn 96Asp + SerlOOAsp + ThrlO2Gly + Phel88His + Asnl54Gln + Serl55Asp + TyrlO3Val + Glyl53Asn + Thr 6561u + IlelO6Met. + Leul251íet + Glyl56Asp + Thr 58Glu +· Gly GOGlu + Thr 58Asp + Gly GOAsp + Serl57Glu + Ser203Asp Thr 58Asn + ThrlO2Gln + AlalOSGln + Serl55Asp + Thrl63Glu + Val202Asp + Thr 58Gln + Asn 61Glu + Gly 62Glu + Ser 97Glu +
Serl90Asp + Val202Asn + Asn211Glu + Tyr213Cys + Alal86His + Ser203Glu + Serl58Glu + Ser203Glu + Ser203Glu + Ser210Glu + Alal86Ser + Ser203Asp + Tyrl66Met + Ser203Glu + Ser203Glu + Ser215Asp Val204Gln + Thr212Pro + Serl55Asp + Ser203Asp + Ser203Glu + Thr212Ser + Ser203Glu + Tyr205His + Ser203Asp + Tyr205Ala + Asn211Ser + Ser215Asp + Tyr208Asn + Thr212Ser + Ser203Glu + Ser215Glu + Ser203Asp + Asn211Gln + Ser203Asp + Thr212Asn + Glyl56Asn + Ser203Glu + Gly 99Pro + Ser203Glu + Ser203Asp + Tyr205Val + Thr212Asn + Ser215Glu + Glyl27Asn + Ser203Asp + Glyl53Glu + Glyl65Ser + Serl90Glu + Ser203Glu Ser203Glu + Tyr205Leu + Glyl26Asp + Thr212Ser + Serl90Glu + Thr212Gln + Ser210Asp + Thr212Ser + Thr207Pro + Thr212Asn Glyl65Gln + Ser203Glu + Val202Ser + Ser203Asp + Ser203Asp + Tyr208Val + Ser203Asp + Tyr205Ala + Thrl02Pro + Glyl26Asp + Serl29Asp + Tyr205Ile + Tyr205Val + Ser210Asp + Pro209Ser Ser210Asp + Prol28Glu + Serl57Asp + Ser203Glu + Thr212Gln + Thrl32Gln + Asnl54Ser + Thrl02Pro + Tyr205Asp + Gly201Asn + Tyr205Glu -+ Tyr205Gln + Pro209Glu + Pro209Asp + Thr212Asp Leul25His Tyr205Leu * Tyrl66Ser + Serl87Glu + Serl31Glu + Tyr205Val + Asn 61Ser + Asnl62Gln + Tyr205Asp + Thr212Ser + Serl55Glu + Serl57Asp + Serl57Asp + Ser203Asp + Tyr205Cys +· Leu21GPro + IlelOGThr + Pro209Asp + Asnl54Ser + Tyr205Asp +
Thr212Asn Ser215Glu Ser215Glu Ser215Glu Ser215Asp Ser215Glu Ser215Asp Thr219Gly Ser215Glu Ser215Asp Ser215Glu Ser215Glu Ser215Glu Leu216Ser Ser215Asp Leu216Thr Ser215Asp Ser215Asp Ser215Asp Ser215Asp Ser215Glu Gly218Asn Ser215Asp Serl90Glu Leu216Gly Asn217Asp Gly218Asp Leu216Ser Leu216Asp Leu216Asp Leu216Asp Leu216Glu Leu216Asp Leu216Asp Glyl65Asp Ser215Glu Thr212Glu Thr212Glu Glyl59Asp Leu216Thr Leu216Asp Thr212Gln Gly218Asp Thr212Asp Gly218Glu Ser215Asp Ser215Asp Gly218Pro Ser203Asp Leu216Cys Thr212Glu Thr212Gly Gly218Glu Ser215Asp Tyr213Val • · · · · ·
112
Leul25Gln + Glyl30Asp + Glyl26Ser + Serl31Glu + IlelO6Ala + Serl6OGlu + Asp 59Glu + Thr 65Asp + Asn 96Gln + Thrl02Pro + Gly 99Asn + Leul25Thr + Val 94His + Glyl26Asn + Asp 59Glu + Asn 61Ser + Asp 59Glu + TyrlO3Ala + GlylOlGln + Glyl27Glu + Ser 97Glu + Thr212Ser ·+ Gly 99Gln + Serl57Glu + Serl31Glu + Glyl59Asn + Val 94Ala -»· GlylOlAsp + Asn 61Asp + Asn 96Glu + Asn 61Glu + Asn 96Glu + Gly 99Pro + SerlOOAsp + Serl55Glu + Alal86Pro + Phel88Asp + Ser203Asp + Serl29Asp + Thrl63Gly + SerlO4Asp + Serl58Glu + Ser 98Asp + Serl58Asp -*·
Prol28Gly 4- Serl58Asp 4-
ThrlO2Glu 4- Alal05Asn 4-
Thr 65 Asn 4- Serl57Asp 4-
AlalO5Gly 4- Serl57Asp 4*
Ser 98Glu 4- Gly153Asp 4-
Gly 62Asp 4- Gly 64Asn 4-
Thr 58Ser 4- Val 94Met 4·
Asn 61Asp 4- Thr 65Gly 4-
Glyl27Asn 4- Val202Asp 4-
Gly 62Asn 4- GlylOlAsp 4-
Glyl59Asp 4- Asnl62Glu 4-
Ser 98Asp 4- GlylOlGlu 4-
Leu 95Glu 4- Tyrl66Asn 4-
GlylOlPro 4- Serl29Glu 4-
Asn 96G1 n 4- Asnl62Glu 4-
Thr 65Gln 4- Val 94Asp 4*
Thrl02Pro 4- Serl55Asp 4-
Asn 96Glu 4- ThrlO2Gln 4*
Thr 58Glu 4- Asn 61Glu 4-
Val 94Ala 4- Glyl26Asp 4-
Thr 58Asn 4- Asn 61Ser 4-
Thr 58Asp 4- Ser 97Asp 4·
Thr 58Asp 4- Ser 97Glu 4_
Tyrl03Glu 4- Glyl27Glu 4-
Asn 96Gln 4- Prol28Glu 4-
Glyl27Glu 4- Glyl53Asn 4-
SerlOOAsp 4~ IlelO6Met 4-
Thr 5 8 Asp 4- Asn 96Asp 4-
Asn 96G1 u 4- Thrl63Pro 4-
Ser 98Glu 4- Glyl27Asp 4-
Gly 99Asn 4- Glyl27Glu 4·
Val 94Asp 4- Prol28Asp 4-
GlylOlGlu 4- Gly126Ser 4-
Leu216Glu + Gly218Asp + Tyr205Ala +· Leu216Asp + Asnl62Glu + Alal86Gly + Asnl62Asp + Leu216Ile + Glyl27Glu + Alal86Pro + Serl57Glu + Glyl65Glu + Serl57Glu + Glyl65Glu + Val202Asn + Thr207Pro + Serl55Glu -+· Pro209Glu + Glyl53Ser + Asnl54Glu + Ser215Asp + Leu216Cys + Ser215Asp + Leu216Ser -+Tyr205Met + Ser215Glu + Glyl56Gln + Ser215Asp + Pro209Ser + Ser215Glu + Glyl27Ser + Ser203Glu + ThrlO2Glu + AlalO5Gly + Tyr205Asp + Leu216Cys + Tyr2l3Ser + Thr214Glu + Glyl65Glu + Ser203Asp + Asnl62Glu + Val2O2Gln + Asnl6261u + Leu216Ile + Asnl62Glu + Val202Gln + Serl29Asp + Tyr208Thr +Asnl62Glu + Ser203Asp + SerlGOGlu + Alal86His + Val202Ser + Tyr205Asn + Gly 99Pro + Glyl27Asp + SerlO4Glu + Glyl53Asp + Alal86Gln + Ser210Asp + Ser210Glu + Ser215Glu + Tyrl03Met. + SerlO4Glu + Ilel64Ala + Thr212Asn + Asnl54Gln + Tyr205Gln + Phel88Met. + Ser203Glu + Ser203Asp + Thr214Glu + Glyl65Glu + Val202Asp + SerlO4Glu + Leul25Asn + Serl87Glu + Tyr205Val + Alal86Asp + Phel88Gln + Gly 64Asn ·+ Alal05Pro + Asnl54Glu + Tyrl66Pro +· Glyl30Glu + Phel88Glu + IlelO6Leu + Glyl53Gln + Thrl02Pro + AlalO5Ser + Asnl54Gln + Serl57Asp -+Glyl30Gln + Serl31Glu + Pro209Asp + Thr214Glu + Prol28Asn + SerlOOAsp + Glyl27Asp + Tyrl66Ala + PhelBSAsp + 61y201Gln + 5erl3161u + Val202Ala + Serl31Glu + Glyl56Gln + Serl31Asp + Tyr205Thr + Gly1.27Asp + Tyr205His +Thr219Gly
Gly218Glu
Ser203Asp
Asn217Ser
Serl90Asp
Thr212Gln
Tyr205Val
Asn211Asp
Thr212Asn
Serl58Asp
Asn217Glu
Asn217Asp
Asn217Glu
Asn217Asp
Leu216Ala
Thr214Ser
Asn21161u
Gly218Glu
Gly218Asn
Tyr205Ile
Leu216Val
Thr219Gly
Asn217Glu
Leu216Gln
Tyr20561y
Ser210Asp
Gly218Asp
Glyl53Glu
Tyrl66Asp
Thr214Asp
Asn217Ser
Ser203Glu
Ser215Asp
Ser210Asp
Thr214Glu
Gly218Gln
Tyr205Met
Thr212Asp
Ser215Glu
Serl90Asp
Asn217Glu
Thr2l2Glu
Asn217Asp
Glyl56Asp
Serl58Asp
Thrl63Ser
Serl57Asp
Thr219Ser
Gly218Glu
Alal86Ser
Val202Glu
Thr214Ser
Asn211Glu
Leu216Ser
Ser215Asp
113
SerlóOAsp + Tyr205Glu + Gly 62Asp + Glyl27Gln + Gly óOAsp + Glyl27Asp + Asn 61Ser + Gly 99Asp + Glyl26Pro + SerlóOAsp + Thr 65Ser ·* Glyl27Asp + Asnl54Ser + Serl87Glu + Serl29Asp + Glyl53Glu + IlelOóHis + Leul25Pro + Gly 60Pro + Gly 62Gln + Asp 59Glu + Val 94Pro + Glyl53Ser + Serl55Glu ♦ Serl55Asp + GlnlólGlu + SerlO4Asp + Glyl30Asn + AlalOSAsn + Ser203Glu + Leul25His + GlylóSGln + Asn 96Asp + SerlO4Asp + Gly 62Asp + TyrlO3Val + Gly 62Asp + Serl90Glu + SerlOOAsp + Prol28Asp + Thrl32Gly + Glyl56Asn + Asn 96Ser + Ser 98Asp + Val 94Asp + Ser 98Glu + GlylOlSer ·+ TyrlO3Glu + Gly 99Ser -* SerlóOAsp + Asn ólAsp + Gly 99Gln '· Alal86His + Phel88Gln + Asn ólSer + Thr 65Asp + Asn ólAsp + Gly 62Ser + ThrlO2Asn + Glyl30Asp + Asn ólGlu + Asnl54Gln + Gly 99Glu + Glyl27Asp + GlylOlGln + Glyl26Asp + ThrlO2Asp Glyl30Glu +
Thr 58Ser 4- SerlOOGlu 4-
Asp 596lu 4- IlelOóVal 4-
Gly 99Ser 4- Prol28Asp 4-
Thr 65Asp 4- Leu 95Glu 4-
Ser 97Asp 4- Alal05His 4-
Gly 62Asn 4- Thr 65Asp 4-
Glyl30Pro 4- Glyl53Glu 4-
Glyl59Ser 4- TyrlóóGlu 4-
Gly 62Asp 4- Leu 95Cys 4-
Thr 58Gly 4- Glyl59Glu 4-
Thr 5 8 Pro 4- TyrlóóAsp 4-
Leu 95Asp 4- Thrl02Pro 4-
Prol28Glu 4- GlnlólAsp 4-
Leul25Pro 4- Prol28Glu 4-
Ser 97Glu 4- ThrlO2Asp +
Asp 59Glu 4- SerlOOAsp 4-
GlylOlGln 4- ThrlO2Asn 4-
Asn ólGlu 4- GlylOlAsn 4-
Leu 95Glu 4- Ileló4Val 4-
Thr 58Gln 4- Glyl26Glu 4-
Leul25Met. 4- Glyl26Ser 4-
Asn211Gln + Thr212Asp + Glyl53Pro + Serl87Glu + Glyl59Pro + Ser210Asp + ThrlO2Asp + Ser203Asp + Tyr205Met + Thr212Glu + Thrl32Ser + Thr212Asp + Thr212Glu + Tyr213Gln + Serl58Glu + Glyl65Asn + Serl29Glu + AlalSóGlu + Tyr205Thr + Ser215Glu + Glyl30Gln + Serl87Asp + SerlóOAsp + Asnl62Ser + Alal86Thr + Thr214Gly + Serl87Glu + Thr212Gln + Thr212Glu + Asn217Ser + Phel88Asp + Ser203Glu + Gly201Pro + Val202His + Serl90Glu + Asn211Glu + Val202Ser + Asn211Glu + Tyr205Ile + Thr212Gln + Glyl59Glu + Serl90Asp + Glyl59Asp + Serl90Asp + Thrl32Asn + Phel88Cys + Glyl53Glu + TyrlóóHis + Serl90Glu + Val202Glu + Alal86Glu + Thr212Gln + Serl90Glu + Pro200Ser + Serl29Glu + Tyr205Glu + Ser203Asp + Asn211Gln -»· TyrlóóSer + Tyr205Asp -+ GlnlólAsn + Tyr205Asp + Thrl63Pro + Tyr213Ile + Serl31Asp + 61yl56Asn + Pro209Asn + Thr212Ser + SerlO4Glu + Ilel64Leu + Glyl27Glu + TyrlóóAsn + Glyl56Asp + Tyr205Cys + Gly 99Pro + Serl58Asp + Serl55Glu + Tyr205Asn + Ser 97Glu + Serl31Glu + Asnl54Gln + GlnlólAsp + Tyr205Asp + Thr212Pro + SerlOOGlu + Thrl63Pro + Serl87Asp + Ser203Glu + Val202Met + Pro209Asp + AlalO5Gly + Glyl27Glu + Phel88Gln + Ser203Glu + Thrl32Asn + GlnlólGlu + Val202Thr + Ser215Glu + Phel88Gln + Thr212Ser + Glyl30Glu Thrl63Glu +· Serl29Glu + Tyr205Thr ·+Thr212Glu + Tyr213Gly + Glyl56Gln + Thr212Asp + Serl31Asp + Thr212Asp +
Thr219Gly Leu216Glu Gly218Asn Thr212Gln Ser215Asp Ser215Asp Ser215Glu Leu216Thr Ser203Glu Thr219Glu Thr219Asp Thr212Pro Ser215Glu Asn217Glu Thr219Asp Tyr205Leu Leu216Ser Thr219Ser Thr214Gln Leu216Hís Ser203Glu Leu216Met Thr219Asp Serl87Asp Tyr205Ser Leu216Asp Asn217Asp Tyr213Gly Tyr213Glu Gly218Asp Gly218Glu Asn21761u Ser203Glu Ser215Asp Ser215Glu Serl90Glu Asn217Asp Tyr205Gln Pro209Glu Leu216Gly Pro209Asn Thr219Glu Ser187Asp Thr219Asn Ser215Asp Leu216Glu Asn217Gln Leu216Asp Gly218Ser Ser215Glu Ser210Asp Leu216Glu Leu216Asp Leu216Asp Leu216Asp
114
Gly 60Asn + Thr 65Asp Serl58Asp +· GlylOlAsp + Thr 65Glu Thr 65Asp + Asn 61Ser + SerlO4Glu + Gly 99Asp + ThrlO2Asp -+GlylOlGlu + Asp 59Glu + Gly 60Asn + Thr 58Asn + SerlOOAsp + Ser 97Asp + Ser 97Glu + SerlOOGlu + ThrlO2Asn + Glyl27Gln + Serl29Glu + Leul25Pro + Thr 65Gln + Val 94Met +
Asn 96Gln + Glyl26Gln + Glyl65Glu + Leul25Gly -+Asn 966lu + Asn 96Glu + SerlOOAsp + Glyl56Gln + Tyr205Asp + Asnl54Ser + Serl29Asp + GlylOlAsp + Glyl27Asp + Gly 60Asp ·+ Tyrl66Asp + GlylOlSer + Alal05Glu + IlelO6Hís + Glyl30Ser + Serl31Glu + Serl58Glu + Prol28Ser -+Glnl61Glu + GlylOlGlu +
SerlO4Glu + Serl58Asp + Ser203Asp + Prol28Glu + TyrlO3Val + Leul25His +· Phel88Asp + Phel88Asp + Pro209Asp -+Tyrl66Glu + Serl57Asp + Glyl27Ser + Thrl32Asp + Glyl30Glu + Alal86His + AlalO5Glu + Leul25Ala + Glyl27Ser + Ser131Asp + Asn211Asp + Val202Gly + Serl57Glu + Ser210Glu + AlalOSAsn -+·
Thr212Asp + Glyl65Asp + Leu216Ser + Alaí86Gly + Serl55Glu + Asnl62Glu + Ser203Glu + Ser203Glu + Thr212Pro + Ser203Asp + Thr214Ser +· Glyl59Pro + Asnl62Gln + Val202Ser + Tyr205His + Tyr205Met + Serl58Asp ·+ Serl58Glu + Asn211Asp + Tyr213His + Ser215Asp + Ser203Glu + Thr212Gln + Alal86Hls +
Leu216Glu
Leu216Val
Gly218Gln
Thr219Gln
Metl98Ala
Tyrl66His
Gly218Ser
Thr212Gly
Tyr213Met
Gly218Ser
Leu216Asn
Glnl61Glu
Ser203Glu
Thr21261u
Leu216Thr
Ser215Glu
Tyr205Cys
Tyrl66Glu
Ser215Glu
Ser215Glu
Leu216Gln
Gly218Ser
Ser215Glu
Thr212Asp
Tabulka 36
Vícesmyčkové varianty se šestinásobnou mutací
Asn 61 Ser + Gly 64Gln Tyr205Pro 4- GlylOlAsp 4- Thrl32Gly 4- Glyl65Gln 4-
Asn 96Ser + GlylOlSer Tyr205His 4- AlalO5Gly + Asnl54Glu 4- Tyrl66Thr 4-
Val 94Ala Leu 95Thr Leu216Gly 4- Glyl26Gln 4- Pro209Ser 4- Ser215Asp 4-
Thr 65Gln +· Leul25Asn Leu216Met 4- Asnl62Asp 4- Tyr205Gln 4- Pro209Gly 4-
Thrl63Gln + Tyr205Cys Gly218Gln 4- Thr212Pro 4- Leu216Met. 4- Asn217Gln 4-
Gly 60Gln + Val 94Cys Asnl62Ser 4- Asn 96Ser 4- Glyl27PiO 4- Gly159Asp 4-
Gly 99Ser Glyl26Asn Ilel64Ala 4- Glyl27Pro 4- Glyl53Asp 4- Glyl59Pro 4-
Val 94Cys + Prol28Asp Leu216Ala 4- Glyl56Ser 4- Val202Thr 4- Tyr205Ala 4-
Asn 61Gln + AlalOSThr Asn211Gln 4- Glyl53Gln 4- Glyl56Gln 4- Tyrl66Ile 4-
Gly 60 Asn + SerlO4Asp Tyr205Ala 4- A1alO5Asn 4- Glnl61Ser 4- Thrl63Ser 4-
Gly 64Ser + Val 94Asn Leu216Cys 4- GlylOlAsn 4- Leul25Asn 4- Glyl30Asp 4-
Gly 1 .59Pro + Glyi65Pro Leu216Ser 4- Alal86Thr 4- Gly201Pro 4- Thr212Pro 4-
Gly 99Asn + Glyl59Prc» 4- Ser203Glu 4- Tyr205Leu 4- Asn21lGln 4-
115 • · · · ··· · ··· ···
Thr212Ser
Thr 58Gln +· Leul25Pro Leu216Gly 4- Thrl32Asp 4- Glyl53Asn 4- Tyr213Ala 4-
IlelOGAla + Asnl54Glu Tyr205Asn 4- Asnl62Gln 4- Metl98Thr 4- Alal99Asn 4-
Asp 59Glu + Glyl59Ser Asn217Gln 4- Glyl65Asn 4- Phel88Thr 4- Pro200Gln 4-
Gly 99Ser + Glyl26Asn Tyr205His 4- Thrl32Gly 4~ Serl87Asp 4- Val202Ser 4-
TyrlO3Gln + Glyl30Pro Thr212Ser 4- Serl55Glu 4- Glyl59Asn 4- Tyr205Pro 4-
Gly GOPro + Val 94Ser Thr219Pro 4- SerlOOGlu 4- TyrlO3Leu 4- Tyr205Ser 4-
Thr 58Gly + Leul25Ala Leu216Ala 4- Val202Cys 4- Tyr205Asn 4- Ser215Asp 4-
Val 94Thr ·+ SerlO4Glu Gly2i8Ser 4- Glyl30Pro 4- Thr212Pro 4- Leu216Asn 4-
Ser 97Glu + Thrl32Gly Tyr213Gln 4- Pro200Gly 4* Tyr205Ala 4- Asn211Ser 4-
Gly 62Asn + Leu 95Asp Leu216Val 4- Tyrl66Val 4- Tyr205Cys 4- Asn21lSer 4-
Glyl56Asn + Glyl65Pro Asn217Glu 4- Gly201Asn 4- Tyr213Ala 4- Thr214Gln 4-
Gly 62Ser + Ser 98Asp Tyr213Thr 4- Glyl26Ser 4- Tyr205Pro 4- Thr2l2Ser 4-
AlalO5Gln + Glyl27Ser Leu216Pro 4- 61nl61Asp 4- Thrl63Gly 4- Tyr205Cys 4-
Val 94Ala + Glyl30Gln Thr214Gln 4- Alal86His 4- Ser203Asp 4- Tyr205Cys 4-
Thr 65Gln + Leul25Gly Thr212Asn 4- Serl87Asp 4- Phel88Gln 4- Val202Asn 4-
Thr 58Ser + IleloePro Thr212Asp 4- Thrl3261y 4“ Glnl61Asn 4- Tyr205Asn 4-
SerlOOAsp + AlalO5Thr Leu216Cys 4- Leu125Pro 4- Tyr205Ile 4- Thr214Gly 4“
ThrlO2Ser + Glyl27Pro Tyr213Thr 4- Prol28Gly 4- Ser203Glu + Tyr208His 4-
ThrlO2Ser + GlnlólGlu Phel88Ile 4- Asnl62Asp 4- Thrl63Gln 4- Alal86His 4-
Gly 62Pro Prol28Asp Gly218Asn 4- Serl29Asp 4- Glyl56Asn + Tyr213Cys 4-
Thr 58Gln + Glyl27Pro Leu216Val 4- Alal86Gln 4- Val202Asp 4- Ser203Asp 4-
Glyl56Ser + Phel88Gly Leu216Asp 4- Ser203Glu 4- Tyr213Gln 4- Ser215Asp 4-
GlylOlGln + AlalO5His Ser215Glu 4- Asnl62Gln 4- Alal86Gly 4- Ser203Glu 4-
Thr 58Pro + Thr163Asn Leu216Gln 4- Ser203Glu 4- Tyr205Ile 4- Ser215Glu 4-
Thr 65Asn + Glyl27Glu Thr212Pro 4- Glyl56Asn 4- Tyrl66Glu 4~ Phel88Met 4-
Leu 95Asp + SerlOOGlu Val202Ala 4- GlylOlGln 4- IlelOř.Gln 4- Ilel64Leu 4-
Tyrl03Pro + Glyl27Glu Leu216His 4- Serl29Asp 4- Gly13061u 4- Asnl62Gln +
116
Gly 60Gln + Glyl65Ser Ser215Asp 4- Ser203Glu 4- Tyr205Asp 4- Thr214Glu 4-
Leu 95Asn + Leu125Pro Ser215Asp 4- Ser203Asp 4- Tyr205Thr 4- Thr214Glu 4-
Gly 62Asn + TyrlO3Ile Tyrl66Cys 4“ Leul25Cys 4- Glyl26Glu 4- Glyí53Asp 4-
Gly 99Ser ·*· Prol28Glu Gly218Pro 4- Glyl30Asp 4- Phel88Asn 4- Leu216Gly 4-
Asp 59Glu + Gly 60Asp Tyrl66Gln 4- Thr 65Asp 4- Asnl62Ser 4- Thrl63Gln 4-
Phel88Glu + Tyr205Thr Gly218Asp 4- Thr212Asn 4- Tyr213Gly 4- Asn217Glu 4-
Gly 62Gln + Ser203Glu Gly218Asp 4- Tyr205Ser 4- Thr212Ser 4- Ser215Asp 4-
Serl87Glu +· Serl90Asp Thr219Ser 4- Tyr205Val 4- Pro209Ser 4- Thr214Ser 4-
Thr 58Ser + Asp 59Glu Leu216Ser 4- Asn 96Asp 4- Asnl54Ser 4- Alal86His 4-
Thr 65Gly + ThrlO2Gly Val202Thr 4- Leu125Asp 4- Glyl65Asp 4- Alal99Ser 4-
Leul25Asn + Serl58Glu Leu216Val 4- Glyl59Asp 4- Serl90Glu 4- Thr212Gly 4-
Thr 58Pro +· Asn 61Asp Glyl65Pro 4- Val 94Glu 4- Asn 96Asp 4- Glyl26Ser 4-
Alal86Glu + Val202Glu Asn217Glu 4- Tyr205Ala 4- Tyr213Val 4- Ser215Asp 4-
Tyrl03Val + Ser203Glu Leu216Ile 4- Tyr205Asp 4- Thr212Glu 4- Ser215Asp 4-
Gly 62Ser + IlelO6Leu Thr214Ser 4- Pro128Ser 4- Asnl54Asp 4- Serl57Glu 4-
Val 94Asp + Gly 99Asp Leu216Ile 4- Prol28Gln 4- Alal99Gln 4- Tyr205Gln 4-
Asn 61Gln + ThrlO2Gln Val202Ser 4- Glyl26Asp 4- Serl55Glu 4* Ser190Asp 4-
Leul25Asp +· Glyl26Asp Thr219Pro 4- Alal86Ser 4- Tyr205Gln 4- Gly218Glu 4-
Asn 61Glu -+- SerlOOAsp Val202His 4- ThrlO2Asn 4- Glyl65Gln 4- Phel88Leu 4-
TyrlO3Gly + Tyr205Leu Asn217Asp 4- Thr212Glu 4- Ser215Glu 4- Leu216Glu 4-
Gly 99Pro + SerlO4Glu Thr214Ser 4- IlelO6Thr 4- Serl31Asp 4- Gly201Gln 4-
Leu 951le + Glyl26Glu Asn211Gln 4- Glyl53Glu 4- Serl87Asp 4- Phel88Asp 4-
Gly 62Asn + Leu 95Ser Leu216Asp 4- Gly153Ser 4- Tyr205Asp 4- Thr212Glu 4-
AlalO5Gly + IlelOGCys Leu216Asp 4- Serl55Asp 4- Tyr205Asp 4- Ser215Asp 4-
TyrlOSAla + Serl55Glu Ser215Glu 4- Tyr166Pro 4- Ser203Glu 4- Tyr205Glu 4“
Prol28Gly + Asnl62Glu Ser215Glu 4- Glyl65Asn 4- Ser203Glu 4- Tyr20561u 4-
Gly 99Pro + Leul25Gln Ser203Glu 4- Glyl30Asn 4- Alal86Asp 4- Phel88Ser 4-
I1elO6Asn Glyl56Glu 4· G1yl59Asn 4- Phel88Asp 4- Ser215Glu 4-
Gly218Asp
117 • · * • · · · · · • · ♦ · · · ·
Glyl56Pro + Asnl62Asp Asn217Glu 4- Ser203Glu 4- Tyr205Gln 4- Ser215Asp 4-
Glyl53Asn + Serl55Glu Leu216Ile 4* Serl57Asp 4- Serl90Glu 4~ Thr212Asp 4-
Leu 95Glu + Gly 99G1u Thr219Gly 4- Leul25Glu 4- Prol28Gly 4~ Asnl54Glu 4-
Gly GOAsp + IlelO6Met Leu216Asp 4- Asnl62Ser 4- Ser203Glu 4- Tyr205Asp +
Ser 97Asp + AsnlG2Ser Leu216Asp 4- Thrl63Gln 4- Ser203Glu 4- Tyr205Asp 4-
Leu1251le + Glyl59Glu Leu216Gln 4- Ser203Glu 4- Thr214Glu 4- Ser215Glu 4-
Glyl56Ser ·*· Serl58Glu Leu216Cys 4- Tyr205Asp 4- Tyr213Glu 4- Ser215Asp 4-
Gly 62Gln + Asnl54Asp Tyr205Met 4- Serl55Asp 4- SerlGOAsp 4- Glyl65Glu -h
Gly 64Pro + AlalSGGlu Ser2l5Glu 4- Serl87Asp 4- Ser203Glu 4- Tyr205His 4-
TyrlO3Asp +· Tyrl66Ser Tyr205Glu 4- A1alSGAsn 4- Val202Glu 4- Ser203Asp 4-
Leu 95Gln + Glyl26Gln Serl58Glu 4- Gly127Asp 4- Prol28Ser 4- Serl55Asp 4-
Asp 59Glu + IlelOGHis Leu216Asp 4- Tyr205Ala 4- Tyr21361u 4- Ser215Glu 4-
Serl58Asp + SerlGOGlu Ser215Glu 4- Thrl63Asp 4- Pro209Gln 4- Thr212Ser 4-
Gly 62Asp + TyrlO3Met Leu21GAla 4- Val202Ser 4- Asn211Glu 4- Thr214Gln 4>
Asp 59Glu +· Ser 97Asp Ser203Glu 4- Ser 98Asp 4- Glyl53Ser 4- Glnl61Asn 4-
Leul25Asn + Glyl53Glu Thr214Pro 4- Serl57Asp 4- ThrlG3Glu 4- Val202Asp 4-
Leu 95Glu + SerlOOAsp Tyr205Gly 4- Leul25Asp 4- Pro128Asn 4- Serl31Asp 4*
Glyl26Gln +· Serl58Glu Gly218Asp 4- Ser203Asp 4- Ser215Glu 4- Leu216Thr 4-
GlylOlSer + Prol28Asp Phel88Val 4- Serl58Glu 4- 61yl59Asp 4- Alal86Gly 4-
Serl87Glu *· Ser203Asp Leu216Ser 4- Tyr205Cys 4- Pro209Gln 4- Ser215Asp 4-
Gly 62Ser + Serl87Glu Leu216His 4- Met.l98Gln 4- Ser203Glu 4- Ser215Asp 4-
Thrl32Asn + GlylGSPro Leu216Asp 4- Serl87Glu 4- Ser203Glu 4~ Tyr205His 4-
Asn 96Ser + Serl31Glu Leu216Gly 4- Glyl59Asp 4- Serl60Asp 4- Thr214Gln 4-
Glyl30Glu + Serl58Asp Thr207Asn 4- Glyl59Glu 4- Thrl63Gln 4- Tyr205Thr 4-
Glyl30Asp Serl31Glu Asn217Ser 4- Gly165Pro 4- Serl90Glu 4- Val202Gly 4-
Leu 95Thr + GIyl30Glu Gly218Gln 4- Serl31Glu 4- Tyr205Ala 4- Ser210Glu 4-
Thr 58Gly + AlalOSGlu 4- IlelOGGly 4- Tyr205Val 4- Ser215Glu 4-
Leu216Asp ·· ····
118 • · · • ···· · • · ··· · · • · • · · · · * • · · ··· ·· ·
Thr 58Asp
Thr 58Glu
Thr 65Ser
Ser 97Glu
GlylOlAsp
Gly 60Pro
Gly 62Asp
Thr 58Gly
Glyl59Asp
Gly 62Glu
Asn 96Asp
Asp 59Glu
Serl55Asp
Val 94Met
GlnlólSer
Glyl56Glu
Ser 98Glu
Asn 61Gln
Ilel06Val
Val 94Thr
Val 94Met
Serl55Asp
Asn 61Glu
AlalO5Glu
Thr 58Gly
Asn 96Asp
Asn 96Glu
Asp 59Glu + Asp 59Glu + Leul25Asn + Ser203Glu + Tyr205Cys + Thr212Ser + Asp 59Glu + TyrlO3Asn + Pro209Gln + Thr212Asn + Ser215Glu + Ser 97Asp + Ser 9861u + SerlO4Glu + Thrl63Gln + Leu216Ser + Ser 98Glu + GlylOlGln + Thr212Asn + Leu216His + Gly218Glu + ThrlO2Glu + IlelO6Val ·+· Thri63Pro ·+· Tyr205Glu + Ser215Asp * Serl29Glu + Val202Glu + Thr214Asp + Ser215Asp + Leu216Ile + Gly 99Glu +· Tyr205Asn + Asn211Asp ·+ Tyr213Met + Thr214Asp + Glyl27Glu + Serl31Glu -+ Serl55Asp + Glyl65Pro + Tyr205Cys + Tyrl66Gly + Tyr205Asp + Tyr213Asn Ser215Asp + Leu216Thr + GlylOlSer + Thrl32Gly + Ser203Glu + Asn211Asp + Tyr213Glu + Ser 97Asp + Leul25Pro + Glyl27Gln ·+· Ser203Asp + Ser215Asp + Val 94Glu + Ser 98Asp -+ Serl04Glu + Leul25Asn Tyr213Gly + Glyl56Gln + Serl90Asp + Tyr205Glu + Thr212Ser + Leu216Ala + Gly 99Pro + IlelO6Thr + Serl55Asp + Serl90Asp + Thr212Glu + Thrl63Glu + Val202Ala +- Ser203Glu + Asn211Ser + Ser215Asp + Alal86Asn + Ser203Asp Thr212Gln + Ser215Glu + Leu216Gln + Ser203Asp + Val204Cys + Ser215Asp + Asn217Ser + Thr219Gln ·+ Thr 65Ser + Serl31Asp ·*· Ser203Asp + Ser215Glu +· Leu216Cys + Thrl32Ser + Serl58Glu + Ser203Glu + Thr214Ser + Ser215Glu ·+· Glyl5361u + Alal86Gln + Ser203Glu + Ser215Asp + Thr219Gly + ThrlO2Asp + Prol28Glu + Serl31Asp + Glyl65Asn +Thr219Ser + Glnl61Asp + Serl90Glu + Ser203Glu + Thr212Ser + Leu216Cys + SerlOOAsp + Thrl32Pro + Alal86Gly + Ser210Glu + Thr212Glu + Thrl32Ser + Gly201Ser + Ser203Glu + Thr212Pro ·+Asn217Asp + Gly 62Pro + AlalO5Asp + Ser203Asp + Tyr208Ile + Leu216Glu + Gly 99Asp IlelOSGly + Asnl54Gln -+- Glnl61Asn -+Thr214Glu + Gly 99Glu + ThrlO2Asn + Glyl27Ser + Ser203Glu + Asn217Gln + Glyl27Asp + Serl29Asp + Tyr213His + Leu216Val + • »
Thr219Gly
119
Thr 65Gln + Tyr205Ser Thr219Asp 4- Pro209Gln 4~ Ser210Glu 4- Thr212Glu 4-
Thr 58Asp + Asn 96Ser Tyr205Val 4- Serl58Glu 4- 61nlólAsp 4- Gly201Gln 4-
Asp 59Glu Asn 61Glu Ser215Asp 4- Tyrl66His 4- Phel88Val 4- Thr212Gly 4-
ThrlO2Glu + Glyl26Pro Asn211Glu 4- Glyl27Asn 4- Val202Asn 4- Pro209Asp 4-
Asn ólGln + Glyl59Gln Gly218Ser 4- Serl87Asp 4- Pro209Asp 4- Asn211Asp 4-
Ser 97Asp + Ser 98Glu Pro209Gln 4~ Glyl56Asp 4- SerlSSGlu 4- Thrl63Gln 4-
Gly óOGln + Glyl30Asn Ser215Glu 4- Serl55Glu 4- Phel88Glu 4- Tyr205Asn 4-
Val 94Asp + IlelOÓGlu Leu216Ser 4- Prol28Asp 4~ Serl31Asp 4- Tyr205Thr 4-
Gly 60Pro + Ser 98Asp Glyl59Asp 4- SerlOOGlu 4- Prol28Gly 4- Serl57Asp 4-
Thr 58Asn +· Gly 99Asp Tyr213Met 4- ThrlO2Gln 4- Pro209Asp 4- Thr212Glu 4-
Thr 65Glu + TyrlO3Gln Ser215Glu 4- GlylSóPro 4- Tyrl66Asn 4- Phel88Tyr 4-
Val 94Asp + GlylOlGlu Leu216Pro 4- Ilel64Gly 4- Alal86Pro 4- Ser203Asp 4-
Gly 60Asn + Asn 61Glu Ser215Glu 4- Glyl53Ser 4- Pro209Asp 4- Asn211Asp 4-
Thrl32Gly + Serl57Glu Ser215Glu + Serl87Asp 4- Ser203Asp 4- Tyr205Met 4-
Asn 61Asp ·*- Asn 96Glu Ser215Glu 4- Gly156Asn 4- Ser203Glu 4- Thr212Gln 4-
Gly 99Pro + Serl58Glu Ser215Glu 4- SerlOOGlu 4- Tyr205His 4- Thr212Ser 4-
GlylOlPro + Serl57Glu Leu216Cys 4- Ser203Asp 4- Tyr205Asp 4- Thr212Ser 4-
Val 94Ala + Prol28Ser Tyr205Glu 4- Glyl56Gln 4- Serl90Asp 4- Ser203Asp 4-
IlelOóMet + Leul25Ile Leu216Ser 4- SerlóOAsp 4- Ser203Asp 4- Tyr205Glu 4-
Leu 9561 u + Ser 97Glu Leu216Ala 4- Thrl02Glu 4- Glyl59Asp 4- Tyr205Leu 4-
Leul25Cys Glyl26Ser Asn217Glu 4- Glyl59Asp 4- GlnlólGlu + Ser215Glu 4-
SerlOOGlu + ThrlO2Gly Asnl62Ser 4- AlalO5Thr 4- Serl55Glu 4- Serl57Asp 4~
Ser 98Glu + Glyl27Asn Glyl65Glu 4- Serl57Asp 4- GlnlólAsn 4- AsnlG2Asp 4-
Asn ólGln + SerlOOAsp Leu216Ala 4- SerlO4Glu 4- IlelOóAsp 4- Ser215Asp 4-
Serl31Glu + Glyl59Asn Thr219Glu 4~ Val202Cys 4- Ser215Asp 4- Leu216Asp 4-
Leuí25Cys + GlnlólAsp Gly218Glu 4- Asnl62Glu 4- Ser203Glu 4- Leu216Thr 4-
GlylOlAsp + AlalOSAsp Thr214Glu 4- Glyl26Asn 4- GlnlólSer 4- AlalSóPro 4-
120
SerlOOGlu + ThrlO2Glu Leu216Met 4- Tyrl03Thr 4- Glyl26Asp 4- Serl60Glu 4-
Glyl27Gln + Asnl54Ser Asn217Glu 4- Serl57Glu 4- Thrl63Glu 4- Ser215Glu 4-
Leu 951le + Asn 96Glu Glyl65Glu 4- ThrlO2Gly + Tyrl0361u 4- Glyl26Glu 4-
Serl29Asp *· Serl31Asp Thr214Glu 4- Thrl32Asn 4- Gly159Ser 4- Tyr213Gln 4-
GlylOIPro + Glyl26Glu Leu216Gly 4- Serl29Asp 4- Tyr205Glu 4- Ser215Glu 4-
Leu 95Met. + Prol28Gly Leu216Ser 4- Serl29Glu 4- Glyl53Glu 4- Thrl63Gly 4-
Gly 60Glu + Val202Met Leu216Asp 4- Tyr205Ile 4~ Thr212Glu 4- Ser215Glu 4-
Thr 58Ser + Serl58Asp Gly218Asp 4- Glnl61Asn 4- Thrl63Asp 4- Leu216Asp 4-
IlelO6Ser + Seri58Asp Ser215Asp + Serl87Asp 4- Ser190Asp 4- Tyr205Met 4-
Serl87Glu + Val202Gln Gly218Ser 4- Tyr205Asn 4* Thr214Glu + Leu216Glu 4-
Asp 59Glu + SerlOOAsp Thr2l2Asn 4- Glyl26Pro 4- Glyl27Asp 4- Tyrl66Glu 4-
Asp 59Glu + Gly 62Pro Pro209Asp 4- Gly127Asn 4- Alal86Pro 4- Val202Glu 4-
Asp 59Glu + Asn 96Glu Leu216Glu 4- GlylOlGlu 4- ThrlO2Gln 4- Prol28Ser 4-
Glyl59Asp + Asnl62Asp Ser215Asp 4- Alal86Gln 4- Val202Gln 4- Ser203Glu 4-
Glyl59Ser Alal86Asn Asn217Asp 4- Ser210Asp 4- Tyr213Pro 4- Ser215Asp 4-
SerlO4Glu + Serl31Asp Tyr208Cys 4- Thrl32Gln 4- Asnl62Ser 4- Glyl65Asp 4-
Glyl56Glu + Serl58Asp Leu216Ser 4- Thrl63Gly 4- Ser203Asp 4- Thr212Asn 4-
Gly 64Pro + Thr 65Glu Leu216Glu 4- AlalO5Asp 4- Val202Thr 4- Ser215Asp 4-
Thr 58Pro + Gly 99Ser Asn211Glu 4- SerlOOAsp 4- GlylOlSer 4- Thrl02Asp 4-
Gly 62Glu + Asn 96Ser Tyr213Ala 4- SerlOOAsp 4- GlylOlSer 4- Ser210Asp 4-
Gly 60Pro +· Glnl61Asp Ser210Glu 4- Glyl65Asp 4- PhelSSVal 4- Serl90Glu 4-
Glyl53Gln -+- Serl55Asp Ser215Asp 4- Glyl59Asn 4- Pro209Glu 4- Thr212Asp 4-
Thr 58Gln + Thrl02Glu Ser215Asp + Serl29Glu 4» Glyl30Asp 4- Tyr205Ala 4-
TyrlO3Ser +- Asnl54Asp Leu216Ser 4- Serl87Glu 4- Va1202Asn 4- Ser203Glu 4-
Leu125Pro + Prol28Ser G1y218Ser 4- Serl57Glu 4- Glnl61Glu 4- Ser203Glu 4-
Ser 97Glu + Gly 99Asp Tyr205Asp 4- AlalO5Ser 4- Leu125Asp 4- Glyl65Gln 4-
Thr 65Asp + Leu 95Cys Ser215Asp 4- Ser 97Asp 4- Asnl62.Ser 4- Thr212Glu 4-
Ser 97Glu + SerlOOGlu Glyl56Asn 4- Serl57Glu 4- Serl60Glu 4-
• · · ·
Leu 95Asp
Leu 95His
SerlOOGlu
Asnl54Ser
Thr 58Gln
Asn 61Gln
Val 94Glu
Val 94Glu
Glyl30Gln
Asn 61Gln
Thrl02Glu
Thr 58Pro
Asp 59Glu
Thrl32Ser
Val 94Asp
Prol28Glu
Asn GlGln
AlalO5Hís
Asn 96Ser
Asp 59Glu
Asnl62Asp
GlylOlPro
G1yl26Glu
Gly 60Asp
G1y 62G1u
Asp 59Glu
SerlO4Glu
• · · • · · · · · ·
Tyr205Pro + AlalO5Asp -b Serl57Glu 4 Val202His 4 Tyr205Ile 4
Leu216Met +· Glyl56Pro 4 Serl57Asp 4 Asnl62Glu 4 Serl87Glu 4
Leu216Asp + Leul25Gly 4 Glyl27Glu 4 Ser203Asp 4 Tyr208Val 4
Leu216Asp + Glyl65Asp 4 Serl90Glu 4 Thr212Gly 4 Ser215Asp 4
Gly218Pro + Ser 98G1u 4 Glyl53Asp 4 Val202Ser 4 Tyr205Asn 4
Gly218Asp Thrl32Gly 4 Glyl56Glu 4- Serl58Glu 4 Ser215Asp 4
Thr2l9Glu + Ser 97Glu 4 AlalO5Asp 4 Glyl65Pro 4 Leu216Met 4
Thr219Asp +· Ser 97Glu 4 AlalO5Asp 4 Asnl54Gln 4 GlnlGlAsp 4
Alal86Asn -*· Serl55Glu 4 Serl58Glu 4 Alal86Gln 4 Ser203Asp 4
Leu216Cys + Serl60Asp 4 Ser203Glu 4 Val204Gln 4 Thr212Glu 4
Ser215Glu + AlalO5Asp 4 Serl31Glu 4 Ser203Glu 4 Tyr205Ala 4
Thr214Asn + SerlSSGlu 4 Glyl59Asn 4 Pro209Glu 4 Thr212Glu 4
Gly218Glu + Gly 99Asp 4 Glyl26Ser 4 Metl98Thr 4 Thr212Asp 4
Gly218Pro + Asnl54Ser 4 Serl57Asp 4 Val202Glu 4 Ser215Glu 4
Leu216Gly ·*· Gly 99Asn 4 SerlOOAsp 4 Glyl30Ser 4 Asnl54Gln 4
Ser215Asp Glyl56Ser 4 SerlGOGlu 4 Serl87Asp 4 SerlOOGlu 4
Thr212Ser + Ser 98Glu 4 IlelOGCys 4 Ser203Asp 4 Tyr205Gly 4
Gly218Asp + Serl58Glu 4 Serl87Glu 4 Ser203Glu 4 Tyr205Leu 4
Ser215Glu + Gly 99Gln 4 Glyl53Glu 4 Alal86Glu 4 Tyr205Glu 4
Ser2l5Glu + Ser 98Glu 4 Glyl53Glu 4 Serl55Glu 4 Phe188Pro 4
Leu216His + Glyl65Asp 4 Val204Gln 4 Tyr205Thr 4 Ser210Asp 4
Thr212Pro ·+ GlylSGAsp 4 Tyrl66Asp 4 SerlOOGlu 4 Tyr205Asp 4
Thr212Asn + Thrl32Asp 4 Serl55Asp 4 Serl57Asp 4 Val202Gly 4
Tyr213Ser +· Asn 61Asp 4 Asnl54Glu 4 SerlSSGlu 4 Gly165Gln 4
Tyr213Gln +- Leul25His 4 Serl31Asp 4 Tyrl66Leu 4 Ser203Glu 4
Ser215Asp + Val 94Asp 4 ThrlO2Gly 4 Ser203Glu 4 Tyr205Asp 4
Thr219Gly +· Tyrl66Cys 4 Val202Thr 4 Thr212Asp 4 Ser215Asp 4
Asn217G1u »« ····
122
SerlOOAsp + Glyl26Pro + Asnl54Asp 4- Gly201Ser 4- Ser203Glu 4-
Thr219Asp
GlylOlAsp + Prol28Asp -*· Thr212Gln Serl55Asp 4- Serl87Asp 4- Thr207Gly 4-
IlelO6Ser + SerlóOGlu + Leu216Val Ser190Asp 4- Ser203Asp 4- Ser215Glu 4-
Gly 99G1n + Glyl53Asp + Ser210Asp Serl60Asp 4- Phel88Leu 4- Ser190Asp 4-
Serl58Asp + Glyl65Asn + Tyr213Leu Serl90Glu 4- Val202His 4- Tyr205Asp 4-
Thr 65Asp + Leu 95Thr + Leu216Glu Serl31Glu 4~ Val202Ser 4- Ser203Asp 4-
Asn 61Glu + Glyl65Ser + Leu216Asn Met19861η 4- Val202Glu 4- Tyr205Glu 4-
Val 94Ala + Glyt26Asp + Thr212Glu Asnl54Glu 4- Tyrl66Pro 4- Val202Gln 4*
Ser 97Glu + Leul25Glu + Leu216Val Serl55Glu 4- Gly159Asn 4- Tyrl66Asp 4-
Asn 96Glu ·*· Ser 97Asp ·+ Thr219Gln Thrl02Gln 4* Leul25Asp 4- Leu2l6Glu 4-
TyrlO3Cys + Serl6OGlu -+ Gly218Glu Thrl63Asp 4- Tyr208Ser 4- Leu216Met 4-
Val 94Cys + Leul25Glu + Ser215Glu Ser155Asp 4- Glyl56Asp 4- Gly201Gln 4~
Asn 61Ser * Thr 65Glu + Asn217Asp Val 94Asp 4- TyrlOSPro 4- Ser215Asp 4-
Gly 99Gln ·*· Glyl27Asp + Ser203Asp Thrl32Pro 4- Serl55Glu 4- Serl87Glu 4-
Ser 98G1u + Serl29Glu -+Thr214Pro Glyl53Glu 4- Serl90Asp 4- Tyr213Val 4-
Asn 61Ser + Glyl30Glu + Asn217Asp Phel88Glu 4- Tyr205Asp 4- Thr212Pro 4-
SerlSSGlu + Glyl59Glu + Ser215Glu Val202Ser 4- Tyr205Met 4- Pro209Glu 4-
Asn 61Asp Gly 99Asn + Thr212Pro GlylOlAsp 4- Ser203Asp 4- Tyr205Asp 4-
Ser 98Asp + SerlOOAsp + Gly218Asn Serl04Glu 4- Glyl53Glu 4- Phel88Gly 4-
Leu 95Val + Gly 99Asp + Ser215Asp Tyrl03Val 4- AlalOSAsp 4- Tyr205Asp 4-
Asp 59Glu + Asn 61Asp + Thr212Asp Serl60Glu 4“ F*ro200Asn 4- Asn211Ser 4-
Gly 62G1u + Thr 656ly + Leu216Asp Ser 97Asp 4- Thrl02Pro 4- Serl31Glu 4-
Glyl26Pro + Prol28Glu + Asn217Asp Glyl56Glu 4- Serl58Asp 4- Tyr205Asn 4-
Asp 59Glu + Glyl30Asn + Gly218Asn Serl55Asp 4- Ser210Asp 4- Tyr213Gly 4-
Asn 96Gln + Gly 99Glu + Asri217Glu SerlOOAsp 4- Prol28Asp 4- Tyr205Cys 4-
Prol28Gly + Serl29Asp + Ser215Asp Asnl62Glu 4- Gly165Asn 4~ Ser203Asp 4-
Asn 96Ser + SerlOOGlu + Leu216Pro TyrlO3Glu 4- Tyr205His 4- Ser215Glu 4-
Asn 96Glu + Ser 98Glu + Alal86Asp 4- Val202Asn 4- Tyr213Met 4-
• · · · · · • ·
123
Leu216Glu
Gly 99Asp Serl58Asp + Asnl62Asp + Thrl63Asn + Serl87Glu +·
Alal99Gly
Leu 95Ser + Ser 97Asp + Ser 98Glu + Glyl65Glu + Leu216Ile +
Gly218Glu
GlylOlAsp + Leul25Asp + GlnlólAsn + Tyr205Asp + Thr212Gly +
Leu216Asn
SerlóOAsp + Val202His + Ser203Asp + Thr212Asp + Tyr213Val +
Leu216Asp
Leu 95Val + TyrlO3Glu + AlalO5Glu + Thrl63Ser + Thr212Asp +
Leu216Glu
Serl29Asp + Glyl30Ser + Serl57Asp + Glyl65Asp + Tyr205Glu +
Leu216Gln
Thrl32Asn + Glyl56Glu + TyrlóóThr + Ser203Glu + Thr212Glu +
Asn217Glu
Asn ÓlGln + Ser 97Glu + Serl87Glu + Ser203Glu + Pro209Gln +
Ser215Glu
GlylOlGln + AlalO5Asp + Serl87Glu + Ser203Asp + Ser215Glu +
Leu216His
Gly 99Asn + SerlO4Asp + Thrl32Gly + Serl87Asp + Ser203Glu +
Ser215Asp
Gly 62Asp + Asn 96Gln + SerlO4Glu + Tyr205Gln + Thr212Asp +
Tyr213Val
Val 94Gly + Asn 96Asp + AlalO5Glu + Asnl62Asp + Asn211Gln ·*·
Thr212Gln
Ser 97Glu + Serl87Asp + Ser203Glu + Tyr213Gln + Leu216Glu +
Asn217Gln
Gly 64Pro + Serl04Glu + Glyl26Glu TyrlóóSer + Tyr205Glu +
Ser215Glu
Glyl30Asn + Thrl32Asp + Serl87Glu + Pro209Gln + Thr214Glu +
Ser215Glu
Glyl26Glu + SerlóOAsp + TyrlóóMet + VaI2O2Thr + Thr214Asp +
Ser215Glu
Ser 98Asp + GlylOlSer + Glyl30Asp + Serl58Glu + Glyl59Asp +
Leu216Ala
Thr 58Glu Tyrl03Pro + Glyl30Glu +· Serl31Asp ·* Serl58Glu +
A lal99Pro
Gly 60Asp + Asn ólAsp + Serl31Asp ·*· Glyl53Ser + Thrl63Glu +
Val202Cys
Gly 99Asp + Prol28Asn + Asnl62Glu + Thr212Ser + Leu216Glu +
Asn217Glu
Gly óOSer + Ser 98Asp +· Asnl54Asp Serl55Glu -+ Glyl59Pro
Asn211Glu
Tyrl03Pro + SerlO4Glu Leul25Cys + Val202Glu + Ser203Glu +
Pro209Glu
GlylOlGln + SerlO4Asp + Leul25Val + Val202Asp + Ser203Asp +
Thr212Asp
Thr 65Asn + Ser 98Asp + Glyl59Asn + Glyl65Asp + Ser215Asp +
Leu21óAsp
Glyl27Glu + Glyl65Pro Tyr205Cys + Ser210Asp * Ser215Glu +
Leu216Glu
Val 94Ser + Ser 98Glu + Gly 99Asp + GlylSóAsp + PhelSBLeu
Ser203Glu
Gly 62Asp + GlylOlGlu + SerlóOGlu + GlnlólAsp + Tyr205MeL ·+-
Thr212Pro
Φ · · · · ·
124 ···(. · · · ·· • · · • · · · · · · · ·
Ser 97Asp ·+ Ser 98Glu Ser215Asp 4- Alal05His 4- Serl57Glu 4- Thr212Ser 4-
Gly 62Gln + Ser 97Glu Thr212Glu 4* Ser 98Asp 4- Glyl2GGlu 4- Glyl30Pro 4-
Val 94Glu + Ser 97Asp Leu216Ile 4“ Leul25Asn 4- ThrlG3Ser 4- Ser210Asp 4-
Leu 95Glu ·+ Asn 96G1n Ser2l5Glu 4- GlylS9Glu 4- Tyr205Glu 4- Pro209Ser 4-
Serl29Glu +· Asnl54Ser Thr2l9Ser 4- Thr212Glu 4~ Ser215Asp 4- Gly218Asp 4-
Asp 59Glu + Glyl27Gln Ser215Asp + Val202Glu 4- Asn211Glu 4- Thr212Ser 4-
SerlO4Asp + Alal05Pro Tyr213Pro 4- Serl87Glu 4- Ser203Glu 4- Tyr205Asp 4-
Thr 58Pro + Asn 96Asp Thr212Ser 4- Glyl27Glu 4- Serl55Glu 4- Asnl62Ser 4-
Thr 58Gly + Leu125Asn Ser215Asp 4- GlylSGAsp 4- GlnlGlGlu 4- Tyr205Gly 4-
Gly 60Ser + Glyl56Asp Thr219Asp 4- Pro209Ser 4- Thr214Asp 4“ Leu216Thr 4-
Leul25His + Glyl27Gln Ser215Glu 4- Serl31Glu 4- Ser203Asp 4“ Asn211Asp 4-
Thr 58Glu + Prol28Glu Ser2l5Glu 4- Glyl65Gln 4- Alal86His 4- Ser203Glu 4-
Serl31Asp + Serl58Glu Leu216Gln 4- Ser203Asp 4- Tyr205His 4- Ser215Asp 4-
Thr 65Asn + Glyl30Asp Ser2l5Glu 4- Serl58Asp 4- Ser203Asp 4- Pro209Ser 4-
Gly GOGln + Thrl02Glu Thr219Gln 4- SerlS7Asp 4- Ser203Asp 4- Ser215Asp 4-
Gly 64Gln + Glyl27Asp Gly218Gln 4- Serl60Glu 4- Ser203Asp 4- Ser215Glu 4-
IlelOÓLeu + Tlirl32Asp Leu216Ile 4- Thr163Asp 4- Ser203Glu 4- Ser215Asp 4-
Glyl26Ser + SerlGOAsp Thr219Ser 4- Thr21261u 4~ Ser215Glu 4- Leu216Val 4-
Gly 60Pro + GlylOlAsn Ser215Glu 4- Serl58Glu 4- Tyr205Ile 4- Thr212Asp 4-
Gly 62Glu -+- Gly 99Ser Thr214Ser 4- Val202Ser 4- Tyr205Asp 4- Thr212Asn 4-
Val 94His + Thrl32Glu Leu216Glu 4- Glyl65Asp 4- TyrlGGCys 4- Ser203Asp 4-
Gly 62Asn +- Serl31Asp Leu216Glu 4- Serl57Glu 4- G1 nlGlAsn 4- Ser203Glu 4-
Gly 60Pro + Val 94Asp Ser210Asp 4- AlalO5Glu 4- Gly127Pro 4- GlnlGlAsp 4-
G1y 62G1n + Ser 97Asp Thr212Ser 4- Asnl54Asp 4- Serl90Asp 4- Ser203Glu 4-
Ser 97Glu + Asnl54Glu Asn211G1u 4- Glyl59Asn 4* Ser190Asp 4- Tyr205Thr 4-
Thr GSGlu + Ser 98Asp Gly218Gln 4- Thrl02Pro 4- Glyl.26Asp 4- G1 y165Asp 4-
Asn 96Glu + TyrlO3Asp Thr212Pro 4- Gly159Asp 4- Asnl62Asp 4- Tyr208Leu 4-
Gly 62Asp + SerlO4Glu 4- IlelOGAsp 4- Serl57Asp 4- Gly218Ser 4-
125
Thr219Pro
Asn 96Glu + Gly 99Asp Ser215Glu 4- SerlóOAsp 4- Gly201Ser 4- Asn211Gln 4-
I1elOGPro + Glyl53AsP Thr212Asp 4* Glyl65Glu 4- TyrlóóSer 4- Ser203Asp 4*
Ser 97Asp + Gly 99Asn Leu216Thr 4- Serl58Asp 4- Ser210Glu 4- Thr212Glu 4-
Asp 59Glu + Ser 98Asp Tyr213Asn 4- SerlóOGlu 4- Gly201Ser 4- Thr212Gly 4-
Val 94Ser +- Ser 97Asp Leu216Asn 4* Serl87Glu 4- Serl90Asp 4- Pro209Asp 4-
GlylOlGln + Glyl26Asp Ser203Asp 4- Serl31Asp 4- Asnl54Glu 4- Glyl5óAsn 4-
Gly 64Ser + Ser 98Glu Leu216Pro 4- SerlOOGlu 4- AlalSÓGlu 4- Thr212Glu 4-
Ser 97Asp + Gly 99Asp Leu216Met. 4- Val202Asp 4- Thr207Asn 4- Asn211Glu 4-
Thr 65Pro + Thrl32Gly Thr212Asp 4- Alal86Asp 4- Val202Ala 4- Ser203Glu 4-
IlelO6Asp *- 61yl27Ser Ser215Glu 4- Asnl54Glu 4- GlylSóGlu 4- Thr214Pro 4-
Thr 58Asp + Serl29Glu Gly218Asp 4- Thrl32Asn 4~ Glyl65Asp 4- Leu216Val 4-
Thr 58Pro + Gly GOGlu Leu216Ala 4- Gly 62Glu 4- ThrlO2Asp 4- Serl58Glu 4-
Prol28Asp Asnl54Glu Tyr205Asn 4- Phel88Val 4- Val202Cys 4- Ser203Asp 4-
GlylOlGln + AlalO5His Pro209Glu 4- Serl55Asp 4- TyrlóóVal 4- Alal86Asp 4-
Leu 95Val + Serl55Glu Leu216Met 4- TyrlóóAla 4- AlalSóGlu 4- Ser210Asp 4-
Asn 96Asp + GlylOlGlu Leu216Asn 4- Asnl62Glu 4- Val202Thr 4- Ser210Asp 4-
Serl29Glu + Serl57Asp Tyr205Glu 4- Phel88Ala 4- Serl90Glu 4- Val202Ser 4-
Serl31Asp + Serl58Asp Leu216Met 4- SerlóOAsp 4- Tyr205Ile 4- Ser215Asp 4-
G1y 62G1u + Leu 95Glu Thr207Gly -h Tyrl03Pro 4- Alal86His 4- Ser203G1u 4-
SerlOOGlu + Leul25Ala Leu216Cys 4- Serl57Glu 4- Ser203Asp 4- Tyr205Asp 4-
ThrlO2Gln +- SerlO4Asp Tyr205Asp 4- Glyl53Pro 4- Serl58Glu 4- Ser203Glu 4-
Asn 61Glu + Asn 96Gln Thr2.19Asp 4* Ser 98Asp 4- Serl58Asp 4- Thr212Asn 4-
Val 94Thr + Thrl32Asp Ser215Asp 4- Serl55Asp 4- Serl5?Glu 4- Thr207Gly 4~
Prol28Gly + Glyl30Pro Ser203Asp 4- Serl58Glu 4~ Serl87Glu 4- Phel88Cys 4-
Thr 65Glu + Glyl30Pro Pro209Asp 4- Glyl59Glu 4- Glyl65Asp 4- Phel88Met. 4-
Thrl63Glu + Val202Asp Gly218Glu 4- Tyr205Cys 4- Thr212Asp 4- Leu216Pro 4-
Ser 97Glu + GlylOlAsn Gly218Glu 4- Glyl30Glu 4- Asnl54Asp 4- Thrl63Gly 4-
• · ·
126
Thr 65Gly
Thr 65Gln
Thrl32Glu
Gly 60Glu
GlylOlPro
Val 94Glu
Ser 97Glu
Ser 98Asp
Glyl30Ser
SerlOOGlu
Asn 96Glu
Prol28Glu
Thr 6561u
Leul25Gly
Thr 58Glu
Thr 65Asn
Asp 59Glu
Thr 5861 u
Asp 59Glu
Serl57Glu
Serl57Glu
Gly 60Pro
Asn 61Asp
Thr 65Asp
G1y 62G1u
Val 9461u
Gly 60Glu
Ser155Asp + AlalO5Glu +- Serl55Asp + Glnl61Glu +· Phel88Val + Asn217Gln + TyrlO3Asp Prol28Glu + Serl55Asp + Ser215Asp + Leu216Ser + Alal86Gln + Serl87Glu + Val202Pro + Thr207Gly + Asn217Asp + Serl29Glu + SerlSlGlu + Glyl65Asn + Ser203Glu + Pro209Gln + Prol28Asp + Glyl30Asp + Ser203Glu + Tyr205Ile + Thr212Asp + Asn 96Glu + Asnl54Asp + Tyr205Ala + Thr212Glu + Leu216Cys + ThrlO2Ser + Serl57Asp + Ser215Asp + Leu216Ser + Asn217Glu ·+· Glyl56Glu + Serl58Glu + Glnl61Ser +- Ser203Asp Gly218Asn + Glyl56Asp + Serl58Glu + Ser210Asp + Thr212Gln + Ser215Asp + Thrl02Asp + Glyl26Pro + Glyl27Ser + Serl87Glu + Ser215Glu + Glyl27Ser + Prol28Gln + Serl90Asp + Tyr213Asp + Ser215Glu + Glyl53Ser + Serl58Glu + Glyl65Ser + AlalSóGly + Serl87Glu + Glyl53Asp + Thrl63Asp + Glyl65Asn + Metl98His + Ser203Glu + Serl29Glu + Thrl63Glu + Alal86His + Ser203Glu + Tyr205Leu + Asn 61Ser + Thr 65Gly + Serl58Asp + Asnl62Asp +Ser203Glu + Val 94Thr + Glyl26Glu + Serl57Asp + Asnl62Glu + Leu216Asp + Ser 97Glu + Prol28Asn + Thrl32Glu + Serl57Asp + Tyr205Gly + Gly 60Gln + Leu 95Glu + Val202Gln + Tyr205Gln + Ser215Asp + Serl57Asp + Asnl62Asp + Tyrl66Asn + Leu216Ile + Asn217Glu + Asnl62Glu + PhelSSGly + Ser203Asp + Asn211Asp + Thr212Ser + Asnl62Asp +· Ser210Asp + Thr212Ser + Tyr213Leu + Leu216Asp + Ser 97Glu + SerlOOAsp +· AlalOSHis + Ser203Glu + Asn211Asp + Leul25His + Glyl56Asn + Pro200Gln + Thr212Glu + Leu216Asp + Ser 97Asp + Leul25Asn + Serl57Glu +· Thrl63Gly + Thr212Asp
Thr 65Asn + Asnl62Glu +· Thrl63Ser + Asn211Asp + Ser215Glu + Asn 96Ser + GlylOlPro + ThrlO2Asp + Serl55Glu + Thr212Asp + Ser 98Glu + Gly 99Gln + SerlO4Glu + AlalO5Thr + Thr214Asp + Serl87Asp + Alal99Gln + Ser203Asp + Tyr205Val +
127
Serl04Glu
Val 94Thr
Ser 9861 u
Thr 58Glu
Leu 95Glu
Asp 59Glu
Asn 96Gln
Gly 99Asp
Val 94Gln
Leu 95Met
GlylOlGlu
Val 94Glu
Ser 98Asp
Leu 95Met.
Gly 62Pro
Gly 62Asp
Gly 62Ser
Thr212Glu ♦ IlelO6Cys + Thrl63Ser + Glyl65Glu + Serl90Glu + Thr212Asp + IlelO6Asp + Glyl30Asn + Serl31Asp + Ser203Glu + Tyr205Pro + Prol28Glu + Serl55Asp + SerlSOGlu + Alal86Ser + Pro209Asn + Glyl59Ser * Tyrl66Glu + Serl90Glu + Thr212Pro + Leu216Ser + Leul25His + Glyl26Asp + Tyr205Gln + Ser215Asp + Thr219Asn + Gly 99Asp + AlalO5Glu + Alal86Pro + Serl87Asp + Thr212Pro + Ser 98Glu + GlylOlPro + Thrl32Glu + Val202Asp + Ser215Asp + Prol28Asp + Thrl32Asn + Val202Asp + Ser215Asp + Leu216His + GlylOlAsp + SerlO4Asp + Thrl63Pro + Serl87Asp + Ser215Asp + GlylOlAsp + SerlO4Glu + Glyl53Glu + Tyr205Ala + Ser215Glu + SerlO4Glu + Ser203Asp + Tyr205Ile + Ser21061u + Thr2l2Pro + SerlOOGlu + IlelOGMet + Glyl3OGlu + Val202Glu + Thr214Asn + IlelOGAsp + Asnl54Asp + Glyl65Asp + Val202Met. + Leu216Gln + ThrlO2Ser + Glyl27Asn Serl90Glu + Val202Gly + Asn217Asp + IlelO6Gln + Glyl26Asp -+ Serl29Glu + Serl60Asp + Ser2l5Asp + Asnl54Glu Serl60Glu + Alal86Thr + Serl87Asp + Leu216Thr + Thr 65Ser + Serl55Asp + Glyl59Glu + Ser203Glu + Thr219Gln • · · · • ·
Příklady 7-12
128
Tekuté čistící prostředky na pevné povrchy
Složka 7 8 Příklad ě.
9 10 11 12
Phel88Asp 0,05 0,50 0,02 0,03 0,10 0,03
Val202Ala - - - - 0,20 0,02
Na^DIDA”
EDTA* ** - - 2,90 2,90 - -
citrát sodný - - - - 2,90 2,90
NaCi2 a1ky1benzen 1,95 - 1,95 - 1,95 -
sulfonát
NaCi2 alkylsulfát - 2,20 - 2,20 - 2,20
NaCi2(ethoxy)*** - 2,20 - 2,20 - 2,20
sulfát
Ci2dimetylamin - 0,50 - 0,50 - 0,50
oxid
kumensulfonát sodný 1,30 - 1,30 - 1,30 -
hexy1karb i to1*** voda**** 6,30 6,30 6,30 k vyrovnání 6,30 6,30 do 100 % 6,30
*N-diety1englýko1-N,N-iminodiacetát dvojsodný **Na^ etylendiamin dioctová kyselina XKXdiety1englýko1 monohexyl éter všech látek upraveno na 7
V příkladech 7-10 je Phel88Asp, mezi jiným, nahrazen variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 11-12 jsou Phel88Asp a Val202Ala, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky• · · *
129
Příklady 13-18
Sprejové prostředky pro čištění pevných povrchů a odstraňování domácích plesnivých skvrn
Složka Příklad č.
13 14 15 16 17 18
Asn96Asp-+TyrlO3His 0,50 0,05 0,60 0,30 0,20 0,30
Pro200G1y+G1y201Ser
-»-Ser210Asp - - - - 0,30 0,10
octylsulfát sodný 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00
dodecylsulfát sodný 4,00 4,00 4,00 4,00 4.00 4,00
hydrox i d sodný 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80 0,80
křemičitan <Na) 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04 0,04
parfém 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35
voda k vyrovnání do 100 %
pH produktu je 7 V příkladech 13-16 jsou Asn96Asp TyrlO3His, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 17-18 jsou Asn96Asp + TyrlO3His a Pro200Gly ·+ Gly201Ser ·+ Ser210Asp, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtílisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
·· ····
Příklady 19-24
130
Prostředky na mytí nádobí
Složka Příklad c.
19 20 21 22 23 24
Glyl27Asn 0,05 0,50 0,02 0,40 0,10 0,03
G1y20lAsn+Tyr205Gly
+Thr207G1n+Tyr213I1e - - - - 0,40 0,02
C12-Ci^N-metyl
glukamid 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90 0,90
C12etoxy<l)sulfát 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00
kyselina 2-raetyl
undekanová 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50
Ci2 etoxy(2)karboxy1át 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50 4,50
Ci2alkoholetoxylát(4) 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
Ci2aminoxid 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00 3,00
kumensulfonát sodný 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00 2,00
etanol 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00 4,00
Mg+‘<jako MgCl2) 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20 0,20
Ca++(jako CaCl2> 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40 0,40
voda k vyrovnání do 100 %
pH produktu je upraveno na 7.
V příkladech 19-22 jsou Glyl27Asn, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 23-24 jsou Glyl27Asn a Gly201Asn + Tyr205Gly Thr207Gln -»· Tyr213Ile mezí jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
·· ····
Příklady 25-28
Práškový prací prostředek
131
Složka 25 Příklad 26 č. 27 28
Glyl56Glu+Asnl62Gln 0,10 0,20 0,03 0,05
Leu95Glu - - 0,02 0.05
Ci3 lineárηí alkylbenzen
sulfonát 22,00 22,00 22,00 22,00
fosfát (jako trifosforečnan
sodný) 23,00 23,00 23,00 23,00
uhliči tan sodný 23,00 23,00 23,00 23,00
křemičitan sodný 14.00 14,00 14,00 14,00
zeolit 8,20 8,20 8,20 8,20
chelát (kyselina dietylen-
tr i am i npentaoctová) 0,40 0,40 0,40 0,40
síran sodný 5,50 5,50 5,50 5.50
voda k výři ovnán í do 100 %
V příkladech 25-26 jsou Glyl56Glu Asnl62Gln, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtílisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 27-28 jsou Glyl56Glu + Asnl62Gln a Leu95Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtílisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
·· ····
···
Příklady 29-32
Práškový prac í prostředek
132
Složka Příklad č. 29 30 31 32
GlnlĎlGlu 0,10 0,20 0,03 0,05
Alal86Ser+Phel88Ala+Serl90Glu - - 0,02 0,05
C12alkylbenzen sulfonát 12,00 12,00 12,00 12,00
zeolit A (1-10 mikrometr) 26,00 26,00 26,00 26,00
kyselina 2-butylkaprylová 4,00 4,00 4,00 4,00
C12-C14 sekundární (2,3) alkyl-
sulfát, sodná sfil 5,00 5,00 5,00 5,00
citrát sodný 5,00 5,00 5,00 5,00
optický zjasňovač 0,10 0.10 0,10 0,10
síran sodný 17.00 17,00 17,00 17,00
voda a menšinové složky k vyrovnání do 100 %
V příkladech 29-30 je Glnl61Glu, mezi jiným, nahrazen variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 31-32 jsou Glnl61Glu a Alal86Ser +
Phel88Ala + Serl90Glu mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
• ·
Příklady 33-36
Práškový prací prostředek
133
Složka Příklad č. 36
33 34 35
Asn96Gln+IlelO6Ala 0,10 0,20 0,03 0,05
G1 y 60 As n-«-As n61G1 u+G 1 y 15 3 Ser
-*-Pro209Asp+Asn211 Asp
+Ser215Glu - - 0,02 0,05
C13 lineární alkylbenzen
sulfonát 22,00 22,00 22,00 22,00
fosfát (jako trifosforečnan
sodný) 23,00 23,00 23.00 23.00
uhličitan sodný 23,00 23.00 23,00 23,00
křem i č i tan sodný 14,00 14.00 14,00 14,00
zeolit 8,20 8,20 8,20 8,20
chelát (kyselina dietylen-
tr i am i npentaoctová) 0,40 0,40 0,40 0,40
síran sodný 5,50 5,50 5,50 5,50
voda k vyrovnání do 100 i %
V příkladech 33-34 jsou Asn96Gln IlelO6Ala, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 35-36 jsou Asn96Gln + IlelO6Ala a Gly60Asn Asn61Glu + Glyl53Ser + Pro209Asp + Asn211Asp * Ser215Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
·· ·
Příklady 37-40
Práškový prací prostředek
134
Složka Příklad č. 37 38 39 40
GlyóOAsn 0,10 0,20 0,03 0,05
Alal86Asn+Serl87Asp+Phel88Gln
+Serl90Glu - - 0,02 0,05
Ci2 a1ky1benzensu1fonát 12,00 12,00 12,00 12,00
zeolit A (1-10 mikrometr) 26,00 26,00 26,00 26,00
kyselina 2-butylkaprylová 4,00 4,00 4,00 4,00
C12-C14 sekundární (2,3) alkyl-
sulfát, sodná sůl 5,00 5,00 5,00 5.00
citrát sodný 5,00 5,00 5,00 5,00
optický zjasňovac 0,10 0,10 0,10 0,10
síran sodný 17.00 17,00 17,00 17,00
voda a menšinové složky k vyrovnání do 100 %
V příkladech 37-38 je Gly60Asn, mezi jiným, nahrazen variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 39-40 jsou GlyóOAsn a Alal86Asn + Serl87Asp Phel88Gln *· Serl90Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
135 • · ··· ·· ·
Příklady 41-42
Práškový prací prostředek
Složka Příklad c.
41 42
lineární alkylbenzensulfonát 11,40 10,70
lojovitý alkylsulfát 1,80 2,40
C14-15 alkylsulfát 3.00 3,10
Ci4-15 alkohol 7x ethoxylovaný 4,00 4,00
loiovitý alkohol llx ethoxylovaný 1,80 1,80
d i spergovad1o 0,07 0,10
silikonová kapalina 0,80 0,80
citrát trojsodný 14,00 15,00
kyselina citrónová 3,00 2,50
zeolit 32,50 32,10
kopolymer kyselin maleinové a
akrylové 5,00 5,00
kyselina dietylentriaminpenta-
mety1enf osfonová 1.00 0,20
Ser215Asp 0,30 0,30
1 i páza 0,36 0,40
amyláza 0,30 0,30
křemicitan sodný 2.00 2,50
síran sodný 3,50 5,20
polyvinylpyrolidon 0,30 0,50
peroxobor i tan 0,50 1.00
f eno1su1fonát 0,10 0,20
peroxidáza 0,10 0,10
menš i nové s1ožky do 100 do 100
• · · · · ·
Příklady 43-44
Práškový prací prostředek
136
S1ožka Příklad č-
43 44
lineární C12 alkylbenzen-
sulfonát sodný 6,5 8,0
s í ran sodný 15,0 18,0
zeolit A 26,0 22,0
nitri lotriacetát sodný 5,0 5,0
polyvinylpyrolidon 0,5 0,7
tetraacety1ety1end i am i n 3,0 3,0
kyselina boritá 4,0 -
peroxobor i tan 0,5 1,0
fenolsulfonát 0,1 0,2
Val202Met+Thr212Pro 0,4 0,4
plnidla (např. křemičitany, uhličitany,
parf émy, voda) do 100 do 100
Příklad 45
Kompaktní práškový prací prostředek
S1ožka váhové %
alkylsulfát 8,0 alky1ethoxysulfát 2,0 směs alkoholů C25 a C45 3 a 7x ethoxy1ováných 6,0 amid polyhydroxymastné kyseliny 2,5 zeolit 17,0 vrstvený křemičitan/citrát 16,0 uhličitan 7,0
137 ·· · *· ·· • · · · · « ····· · · • · · · ··* * ·♦* ··· kopolymer kyselin maleinové a akrylové 5,0 polymer odstraňujeí skvrny 0,4 karboxymetyl celulóza 0.4 poly(4-vinylpyridin)-N-oxid 0,1 kopolymer vinylimidazolu a viny1pyro1 idonu 0,1
PEG2000 0,2
Thr65G1u+11el06Met+Leul25H i s+Tyr205Leu +Ser215Asp 0.5 i páza 0.2 celuláza 0,2 tetraacetyletylendiamin 6,0 peroxouhličitan 22,0 kyselina etylendiamindijantarová 0,3 pot1ačovač pěněn í 3,5
4,4’-bis(2-morfolin-4-ani1in-s-triazin
-6-ylamino)stilben-2,2’-disulfonát dvojsodný 0,25
4,4’-bis<2-sulfostyri1Ibifenyl dvojsodný 0,05 voda, parfém a menšinové složky do 100
Příklad 46
Práškový prací prostředek
Složka váhové % lineární alky1benzensulfonát 7,6
Cie-18 alkylsulfát 1,3
C14-15 alkohol 7x ethoxylovaný 4,0 alky1-dimety1 hydroxyetyl amonium chlorid kokosový 1,4 dispergovadlo 0,07 silikonová kapalina 0,8 citrát trojsodný 5,0 ·· ····
138 • · ··«· ·
AA · · 9 • · A · • A ··· · • · · ··· ·· A zeolit 4A 15,0 kopolymer kyselin maleinové a akrylové 4,0 kyselina dietylentriaminpentametylenfosfonová 0,4 peroxobor i tan 15,0 tetraacetylety1end i am i n 5,0 smektit (valchářská hlína) 10,0 poly(oxy etylenXm.h. 300 000) 0,3
Thr207Asn+Tyr208Gln+Thr212Ser+Tyr213Glu +Ser215Glu 0,4 lipáza 0,2 amy1áza 0,3 celuláza 0,2 krémičitan sodný 3,0 uhličitan sodný 10,0 karboxymety1 ce1u1óza 0,2 zjasňovače 0,2 voda, parfém a menšinové složky do 100
Příklad 47
Práškový prací prostředek
S1ožka váhové % lineární alkylbenzensulfonát 6,92 lolovitý alkylsulfát 2,05
Ci^-15 alkohol 7x ethoxylovaný 4,4
Ci2-15 alky1ethoxysulfát - 3x ethoxylovaný 0,16 zeolit 20,2 citrát 5,5 uhličitan 15,4 krémičitan 3,0 kopolymer kyselin maleinové a • ·
139 akry1ové 4,0 karboxymetyl celulóza 0,31 polymer odstraňující skvrny 0,30
Gly60Asp+Asn61Asp-«-Gly62Asp-»-Thr65Gln 0,2
1ipáza 0,36 celulóza 0,13 tetrahydrát peroxoboritanu 11,64 monohydrát peroxobori tanu 8,7 tetraacetyletylendiamin 5,0 kyselina dietylentriaminpentamety1enfosfonová 0,38 síran horečnatý 0,40 zjasňovač 0,19 parfém, šilikon, pot1ačovače pěněn í 0,85 menšinové složky do 100
Příklady 48-52
Tekuté prac í prostředky
Příklad č.
Složka 48 49 50 51 52
Va194G1y+Gly99Pro+I1elO6Va1 0,05 0,03 0,30 0,03 0,10
Gly218Pro - - - 0,01 0,20
Ci2-Ci4 alkylsulfát sodný 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00
kyselina 2-butylkaprylová 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
c i trát sodný 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Cioalkoholethoxylát (3) 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00
monetano1am i n 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
voda/propylenglykol/ etanol ¢100^1^1) k vyrovnání do 100 % příkladech 48-50 jsou Val94Gly ·♦- Gly99Pro
140
IlelOGVal, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 51-52 jsou Val94Gly ·*· Gly99Pro +
IlelOGVal a Gly218Pro, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 53-57
Tekuté prací prostředky
Složka 53 Příklad c. 54 55 56 57
Glyl56Ser 0,05 0,03 0,30 0,03 0,10
Serl87Glu - - - 0,01 0,20
Ci2-Ci4 a1ky1su1fát sodný 20,00 20,00 20,00 20,00 20,00
kyselina 2-butylkaprylová 5,00 5,00 5,00 5,00 5,00
c i trát sodný 1,00 1,00 1,00 1,00 1,00
Cioalkoholethoxylát (3) 13,00 13,00 13,00 13,00 13,00
monoetáno1am i n 2,50 2,50 2,50 2,50 2,50
voda/propy1englýko1/
etanol (100:1=1) k vyrovnán í do 100 %
V příkladech 53-55 je Glyl56Ser, mezi j i ným, nahrazen
variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 56-57 jsou GlylSGSer a Serl87Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými
141 • · výs1edkyPříklady 58-59
Tekuté prací prostředky
Složka Příklad č.
58 59
kyselina C12-14 alkenyi jantarová 3,0 8,0
monohydrát kyše1 i ny c i trónové 10,0 15,0
C12-15 alkylsulfát sodný 8,0 8,0
sulfát sodný C12—15 alkoholu
2x ethoxylováného - 3,0
C12-15 alkohol 7x ethoxylovaný - 8,0
Ci2-15 alkohol 5x ethoxylovaný 8,0 -
kyselina dietylentriaminpenta-
mety1enfosfonová 0,2 -
kyselina olejová 1.8 -
etanol 4,0 4,0
propandiol 2,0 2,0
G1 y 101G111+Ser 104G1 u+Ser203As p+Tyr20511 e
+Ser210 G1u+Thr212Pro 0,2 0,2
polyvinylpyrolidon 1,0 2,0
potlačovač pěnění 0,15 0,15
NaOH až do pH 7,5
peroxobori tan 0,5 1,0
fenolsulfonát 0,1 0,2
peroxi dáza 0,4 0,1
voda a menšinové složky do 100 částí
V každém příkladu 58 a 59 jsou GlylOlGlu + SerlO4Glu + Ser203Asp + Tyr205Ile + Ser210Glu + Thr212Pro, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými
142 v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 60-62
Tekuté prací prostředky
Složka Příklad Č 60 61 62
kyselina citrónová 7,10 3,00 3,00
mastná kyselina 2,00 - 2,00
etanol 1,93 3,20 3,20
kyselina boritá 2,22 3,50 3,50
monoetano1am i n 0,71 1,09 1,09
1,2 propandiol 7,89 8,00 8,00
kumensulfonát sodný 1,80 3,00 3,00
formiát sodný 0,08 0,08 0,08
NaOH 6,70 3,80 3,80
šili koňové prot i pěnové činidlo 1,16 1,18 1,18
As n61G1u+G1y64Ser+Thr65G1y 0,0145 - -
Serl29Asp+Glyl30Asn - 0,0145 -
Leu216Asn - - 0,0145
1 i páza 0,20 0,20 0,20
celuláza - 7,50 7,50
polymer odstraňující skvrny 0,29 0,15 0,15
protipěnová činidla 0,06 0,085 0,085
zjasfíovač 36 0,095 - -
zjasfíovač 3 - 0,05 0,05
kyšelina Ci 2 a1ky1benzensu1fonová 9,86 - -
Ci2-15 alkylpólyethoxylát(2,5)
sulfát 13,80 18,00 18,00
Ci2 glukózoamid - 5,00 5,00
C12-13 a1ky1po1yethoxylát<9) 2,00 2,00 2,00
voda, parfém a menšinové složky k vyr ovnán í do 100 %
143
Příklady 63-66
Prací prostředky v pevné formě
S1ožka Příklad č. 63 64 65 66
Va1202Ser+Asn21lAsp 0,3 - 0,1 0,02
Glyl56Gln+Ilel64Thr - - 0,4 0,03
C12-C16 alkylsulfát sodný 20,0 20,0 20,0 20,0
C12-C14 N-metylglukamid 5,0 5,0 5,0 5,0
Cn-Ci3alkylbenzensulfonát sodný 10,0 10,0 10,0 10,0
uhličitan sodný 25,0 25,0 25,0 25,0
difosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
trifosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
zeolit A <0,1-10ρ) 5.0 5,0 5,0 5,0
karboxymety1ce1u1óza 0,2 0,2 0,2 0,2
polyakrylát (m.h- 1400) 0,2 0,2 0,2 0,2
kokosový monoetano1amin 5,0 5,0 5,0 5,0
zjasňovač, parfém 0,2 0,2 0,2 0,2
CaSCM 1,0 1,0 1,0 1,0
MgSthi 1,0 1,0 1,0 1,0
voda 4,0 4,0 4,0 4,0
plnidlo’' k vyrovnán í do 100 %
^Může být vybráno z příhodných materiálů jako jsou CaCCh , talek, jíl, křemicitany a podV příkladech 63-64 jsou Val202Ser + Asn211Asp, mezi jiným, nahrazeny variantami Subtilisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladech 65-66 jsou Val202Ser Asn211Asp a Glyl56Gln + Ilel64Thr, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
• ·
144
Příklady 67-70
Prací prostředky v pevné formě
Složka Příklad č. 67 68 69 70
Val204Thr+Pro209ftsp+Tyr213Cys 0,3 0,1 0,02
G1y126G1n+Thr214G1y+Ser215G1u - 0,3 0,4 0,03
C12-C16 alkylsulfát sodný 20,0 20,0 20,0 20,0
C12-C14 N-metylglukamid 5,0 5,0 5,0 5,0
C11-C13 alkylbenzensulfonát sodný 10,0 10,0 10,0 10,0
uhličitan sodný 25,0 25,0 25,0 25,0
difosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
trifosforečnan sodný 7,0 7,0 7,0 7,0
zeolit A (0,1-10ρ) 5,0 5,0 5,0 5,0
karboxyraety1ce1u1óza 0,2 0,2 0,2 0,2
polyakrylát (m.h. 1400) 0,2 0,2 0,2 0,2
kokosový monoetanolamin 5,0 5,0 5,0 5,0
zjasnovač, parfém 0,2 0,2 0,2 0,2
CaSO< 1,0 1,0 1,0 1,0
MgS04 1,0 1,0 1,0 1,0
voda 4,0 4,0 4,0 4,0
plnidlo'' k vyrovná ní do 100 %
''Může být vybráno z příhodných materiálů jako jsou CaCCte , ta1ek, jíl, křem i čitaný a pod V příkladu 67 jsou Val204Thr +- Pro209Asp + Tyr213Cys, mez i ji ným, nahrazeny var i antami Subt i 1 i s i nu D Y vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
V příkladu 68 jsou Glyl26Gln + Thr214Gly + Ser215Glu, mezi jiným, nahrazeny variantami Subti lisinu DY vyjmenovanými v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými ·· ····
145
výs1edkyV příkladech 69-70 jsou Val204Thr + Pro209Asp +
Tyr213Cys a Glyl26Gln + Thr214Gly + Ser215Glu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výs1edky.
Příklady 71-74
Prostředek na čištění zubfi
S1ožka Příklad č. 74
71 72 73
Thr214Asp 2,000 3,500 1,500 2,000
sorbit (70% vodný roztok) 35,000 35,000 35,000 35,000
PEG-6~ 1,000 1,000 1,000 1,000
zubní křemenné abrazivumxx 20,000 20,000 20,000 20,000
fluorid sodný 0,243 0,243 0,243 0,243
kysličník titaniěitý 0,500 0,500 0,500 0,500
glukaran sodný 0.286 0,286 0,286 0,286
alkylsulfát sodný (27,9%
vodný roztok) 4,000 4,000 4,000 4,000
příchuť 1,040 1,040 1,040 1,040
polymer karboxyvinyluxxx 0,300 0,300 0.300 0,300
karagenanxxxx 0,800 0,800 0,800 0,800
voda k vyrovnání do 100 %
~PEG-6 = polyetylénglykol mající molekulární hmotnost 600.
xxPrecipítovaný křemen totožný se Zeodentem 119 nabízený J-M. Huberem.
xx><Carbopo 1 nabízený B.F- Goodrich Chemical Corapany. xxcxxcjota Carrageenan nabízený Hercules Chemical Company.
V příkladech 71-74 je Thr214Asp, mezi jiným, nahrazen • · • · · ·
146 kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 75-78
Ústní voda
Složka Příklad č. 75 76 77 78
Thrl32Glu 3,00 7,50 1,00 5,00
alkohol SDA 40 8,00 8,00 8,00 8,00
príchut 0,08 0,08 0,08 0,08
emulgátor 0,08 0,08 0,08 0,08
fluorid sodný 0,05 0,05 0,05 0,05
glycerin 10,00 10,00 10,00 10,00
sladidlo 0,02 0,02 0,02 0,02
kyselina benzoová 0,05 0,05 0,05 0,05
hydrοχ1d sodný 0,20 0,20 0,20 0,20
barvivo 0,04 0,04 0,04 0,04
voda k vyrovnán í do 100 %
V příkladech 75-78 je Thrl32Glu, mezi kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY j i ným, nahrazen vyjmenovaných
v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 79-82
Zdravotní pastilky
Příklad č.
Složka 79 80 81 82
Ser97G1u+I1elO6Leu 0,01 0,03 0,10 0,02
·· ····
147
sorbit 17,50 17.50 17,50 17,50
mannit 17,50 17,50 17,50 17,50
škrob 13,60 13,60 13,60 13,60
sladidlo 1,20 1,20 1,20 1,20
příchut 11,70 11,70 11,70 11,70
barva 0,10 0,10 0,10 0,10
kukuřičný sirup k vyrovnání do 100 %
V příkladech 79-82 jsou Ser97Glu + IlelO6Leu, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 83-86
Zvýkac i guma
Příklad č.
Složka 83 84 85 86
Leu125A1a+Ser129G1u+G1y130Pro
+Serl31Asp 0,03 0,02 0,10 0,05
krystaly sorbitu 38.44 38.40 38,40 38,40
gumová báze Pajola-T>' 20,00 20,00 20,00 20,00
sorbit (70¾ vodný roztok) 22,00 22.00 22,00 22,00
mannit 10,00 10,00 10,00 10,00
glycerin 7,56 7,56 7,56 7,56
příchut 1,00 1,00 1,00 1,00
^Dodáno L.A. Dreyfus Company.
V příkladech 83-86 jsou Leul25Ala + Serl29Glu +
Glyl30Pro + Serl31Asp, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
148
Příklady 87-90
Dvouvrstevná šumivá čisticí tableta na umělý chrup
Složka 1 87 3říklad č. 88 89 90
Kyselá vrstva
Thr212Pro+Thr219Pro 1,00 1,50 0,01 0,05
kyše1 i na v i nná 24,00 24,00 24.00 24,00
uhliči tan sodný 4,00 4,00 4,00 4,00
kyselina sulfaminová 10,00 10,00 10,00 10,00
PEG 20 000 4,00 4,00 4,00 4,00
hydrogenuhliči tan sodný 24.50 24,50 24,50 24,50
peroxosíran draselný 15,00 15,00 15,00 15,00
kyselý difosforecnan sodný 7,00 7,00 7,00 7,00
vulkanický křemen 2,00 2,00 2,00 2,00
TAED* 7,00 7,00 7,00 7,00
ricinoleylsulfosukcinát 0,50 0,50 0,50 0,50
příchut 1,00 1,00 1,00 1,00
Zásaditá vrstva
monohydrát peroxoboritanu
sodného 32,00 32.00 32,00 32,00
hydrogenuh1 ičitan sodný 19,00 19,00 19,00 19,00
EDTA 3,00 3,00 3,00 3,00
trifosforecnan sodný 12,00 12,00 12,00 12,00
PEG 20 000 2,00 2,00 2,00 2,00
peroxosíran draselný 26,00 26,00 26,00 26,00
uhličitan sodný 2,00 2,00 2,00 2,00
vulkanický křemen 2,00 2,00 2,00 2,00
barva/příchut 2,00 2,00 2,00 2,00
wtetraacetylen diamin
V příkladech 87-90 jsou Thr212Pro + Thr219Pro, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY ♦ · · · vyjmenovaných v tabulkách 2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
Příklady 91-94
149
Enzymatický čisticí prostředek na kontaktní čočky
Složka Příklad č. 93 94
91 92
Glyl56Glu-*-Thrl63Ser+Asn21 lSer +Thr212Asn 0,01 0,50 0,10 2,00
g1ukóza 50.00 50,00 50,00 50,00
neionogenní surfaktant (kopolymer polyoxyetylenpolyoxy- propy1enu) 2,00 2,00 2,00 2,00
aniontový surfaktant (polyoxy- etylenalkylfenylether-sulfát sodný) 1,00 1,00 1,00 1,00
chlorid sodný 1,00 1,00 1,00 1,00
borax 0,30 0,30 0,30 0,30
voda k vyrovnání do 100 %
V příkladech 91-94 jsou Glyl56Glu + Thrl63Ser +
Asn211Ser + Thr212Asn, mezi jiným, nahrazeny kteroukoli kombinací variant Subtilisinu DY vyjmenovaných v tabulkách
2-36, v podstatě se stejnými výsledky.
PrQmyslová využitelnost
Předkládaný vynález poskytuje varianty enzymu subtilisinu, které mají ve srovnání s divokým typem enzymu • · ·· · • ·
150 sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyžují nerozpustný substrát. Dále vynález poskytuje čisticí prostředky, které obsahují účinné množství jedné nebo více variant enzymu subtilisinu a lze je použít k čištění různých druhů povrchů při potřebě odstranit nečistoty bílkovinné povahy. Tyto čisticí prostředky zahrnují detergentní prostředky na čištění pevných povrchů, prací prostředky, prostředky na mytí nádobí, prostředky na čištění ústní dutiny, prostředky na čištění umělého chrupu a prostředky na čištění kontaktních čoček.
·· ♦♦··
SEZNAM SEKVENCI (1) GENERAL INFORMATION:
(i) APPLICANT: BRODE, PHILIP F.
BARNETT, BOBBY L.
RUBINGH, DONN N.
(ii) TITLE OF INVENTION: SUBTILISIN DY VARIANTS HAVING DECREASED ADSORPTION AND INCREASED HYDROLYSIS (iii) NUMBER OF SEQUENCES: 1 (iv) CORRESPONDENCE ADDRESS:
(A) ADDRESSEE: THE PROCTER & GAMBLE COMPANY (B) STREET: 11810 East Miami River Road (C) CITY: Ross (D) STATE: OH <E) COUNTRY: USA <F) ZIP: 45061 (v) COMPUTER READABLE FORM:
(A) MEDIUM TYPE: Floppy disk (B) COMPUTER: IBM PC compatible (C) OPERATING SYSTEM: PC-DOS/MS-DOS (D) SOFTWARE: Pacentln Release #1.0, Version #1.30 <vi) CURRENT APPLICATION DATA:
(A) APPLICATION NUMBER:
(B) FILING DÁTE:
(C) CLASSIFICATION:
(viii) ATTORNEY/AGENT INFORMATION:
(A) NAME: HAKE, RICHARD A.
(B) REGISTRATION NUMBER: 37,343 (C) REFERENCE/DOCKET NUMBER: 5606 (ix) TELECOMMUNICATION INFORMATION:
(A) TELEPHONE: (513) 627-0087 (B) TELEFAX: (513) 627-0260 (2) INFORMACE PRO SEKVENCI IDENTIFIKAČNÍHO ČÍSLA 1:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE (A) DÉLKA: 274 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) VLÁKNITOST: jednoduchá (D) TOPOLOGIE: lineární (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE IDENTIFIKAČNÍHO ČÍSLA 1:
Ala 1 Gin Thr Val Pro 5 Tyr Gly Ile Pro Leu 10 Ile Lys Ala Asp Lys 15 Val
Gin Ala Gin Gly 20 Tyr Lys Gly Ala Asn 25 Val Lys Val Gly Ile 30 Ile Asp
Thr Gly Ile 35 Ala Ala Ser His Thr 40 Asp Leu Lys Val Val 45 Gly Gly Ala
·· ····
• • . · • ·· · • • · · • ·
Ser Phe 50 Val Ser Gly Glu Ser 55 Tyr Asn Thr Asp Gly 60 Asn Gly His Gly
Thr 65 His Val Ala Gly Thr 70 Val Ala Ala Leu Asp 75 Asn Thr Thr Gly Val 80
Leu Gly Val Ala Pro 85 Asn Val Ser Leu Tyr 90. Ala Ile Lys Val Leu 95 Asn
Ser Ser Gly Ser 100 Gly Thr Tyr Ser Ala 105 Ile Val Ser Gly Ile 110 Glu Txp
Ala Thr Gin 115 Asn Gly Leu Asp Val 120 Ile Asn Met Ser Leu 125 Gly Gly Pro
Ser Gly 130 Ser Thr Ala Leu Lys 135 Gin Ala Val Asp Lys 140 Ala Tyr Ala Ser
Gly 145 Ile Val Val Val Ala 150 Ala Ala Gly Asn Ser 155 Gly Ser Ser Gly Ser 160
Gin Asn Thr Ile Gly 165 Tyr Pro Ala Lys Tyr 170 Asp Ser Val Ile Ala 175 Val
Gly Ala val Asp 180 Ser Asn Lys Asn Arg 185 Ala Ser Phe Ser Ser 190 Val Gly
Ala Glu Leu 195 Glu Val Met Ala Pro 200 Gly Val Ser Val Tyr 205 Seř Thr Tyr
Pro Ser 210 Asn Thr Tyr Thr Ser 215 Leu Asn Gly Thr Ser 220 Met Ala Ser Pro
His 225 Val Ala Gly Ala Ala 230 Ala Leu Ile Leu Ser 235 Lys Tyr Pro Thr Leu 240
Ser Ala Ser Gin Val 245 Arg Asn Arg Leu Ser 250 Ser Thr Ala Thr Asn 255 Leu
Gly Asp Ser Phe 260 Tyr Tyr Gly Lys Gly 265 Leu Ile Asn Val Glu 270 Ala Ala
Ala Gin

Claims (9)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1- Varianta Subtilisinu DY, která má změněnou sekvenci aminokyselin proti aminokyselinové sekvenci divokého typu Subtilisinu DY, aminokyselinová sekvence divokého typu zahrnuje oblast první smyčky, oblast druhé smyčky, oblast třetí smyčky, oblast čtvrté smyčky, oblast páté smyčky a oblast šesté smyčky, charakterizovanou tím, že změněná sekvence aminokyselin obsahuje substituci v jedné nebo více polohách v jedné nebo více oblastech smyček, kde
    A- když substituce nastane v oblasti první smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 58, 59, 60,
    61, 62, 64 nebo 65, kde
    c. když substituce nastane v poloze 60, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Pro nebo Ser,
    f. když substituce nastane v poloze 64, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser a
    g. když substituce nastane v poloze 65, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser,
    B- když substituce nastane v oblasti druhé smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 94, 95, 96,
    97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105 nebo 106, kde
    a. když substituce nastane v poloze 94, substituující aminokyselina je Ala, Cys, Gin, Gly, His, Met, Pro nebo Ser,
    b. když substituce nastane v poloze 95, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His,
    Ile, Met, Pro, Ser, Thr nebo Val, ·· ····
    154 »·· · ··· ···
    c. když substituce nastane v poloze 96, substituující aminokyselina je Gin nebo Ser,
    f. když substituce nastane v poloze 99, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Pro nebo Ser,
    h. když substituce nastane v poloze 101, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, i- když substituce nastane v poloze 102, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser,
    j. když substituce nastane v poloze 103, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Ile, Leu,
    Met, Pro nebo Ser,
    l. když substituce nastane v poloze 105, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Gly, His, Pro, Ser nebo Thr, a
    m. když substituce nastane v poloze 106, substituující aminokyselina je Ala, Cys, Gin, Gly, His, Met, Pro, Ser nebo
    Val,
    C- když substituce nastane v oblasti třetí smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 125, 126, 127,
    128, 129, 130, 131 nebo 132, kde
    a. když substituce nastane v poloze 125, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Met, Pro,
    Ser, Thr nebo Val,
    b. když substituce nastane v poloze 126, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 128, substituující aminokyselina je Asn, Gin, nebo Ser,
    g. když substituce nastane v poloze 131, substituující aminokyselina je Asp nebo Glu, a
    155
    h. když substituce nastane v poloze 132, substituující aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser,
    D. když substituce nastane v oblasti čtvrté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 153, 154, 155,
    156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165 nebo 166, kde
    b. když substituce nastane v poloze 154, substituující aminokyselina je Gin nebo Ser,
    d. když substituce nastane v poloze 156, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Pro nebo Ser, a
    n. když substituce nastane v poloze 166, substituující aminokyselina je Ala, Gly, His, Ile, Leu, Met nebo Pro,
    E. když substituce nastane v oblasti páté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 186, 187, 188,
    189 nebo 190, kde
    c. když substituce nastane v poloze 188, substituující aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Ile, Leu,
    Met, Pro, Ser, Thr, Tyr nebo Val,
    F. když substituce nastane v oblasti šesté smyčky, substituce nastane v jedné nebo více z poloh 199, 200, 201,
    202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213,
    214, 215, 216, 217, 218 nebo 219, kde
    a. když substituce nastane v poloze 199, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, His, Pro, Ser nebo
    Thr,
    b. když substituce nastane v poloze 200, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly nebo Ser,
    c. když substituce nastane v poloze 201, substituující ·« ····
    156 aminokyselina je Asn, Asp, Gin,
    d. když substituce nastane aminokyselina je Ala, Cys, Gin,
    f. když substituce nastane aminokyselina je Ala, Cys, Gin,
    g. když substituce nastane aminokyselina je Ala, Asn, Gin, nebo Ser,
    Glu, Pro nebo Ser v poloze 202,
    Gly, His, Met, v poloze 204,
    Gly, His, Met, v poloze 205,
    Gly, His, Ile, subst i tnu jící
    Pro nebo Ser, subst i tuu jící
    Pro nebo Ser, substituuj ící
    Leu, Met, Pro
    h. když substituce nastane v poloze 206 aminokyselina je Asp nebo Glu,
    i. když substituce nastane v poloze 207 aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser,
    j. když substituce nastane v poloze 208 aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His nebo Ser,
    k. když substituce nastane v poloze 209 aminokyselina je Asn, Gin, Gly nebo Ser,
    m. když substituce nastane v poloze 211 aminokyselina je Gin nebo Ser,
    n. když substituce nastane v poloze 212 aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser,
    o. když substituce nastane v poloze 213 aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His nebo Pro,
    P- když substituce nastane v poloze 214 aminokyselina je Asn, Gin, Gly, Pro nebo Ser,
    r. když substituce nastane v poloze 216 substituující substituující substituuj ící
    Ile, Met, Pro substituující substituuj ící substituuj ící substituuj ící
    Ile, Leu, Met substituuj ící substituuj ící aminokyselina je Ala, Asn, Cys, Gin, Gly, His, Ile, Met ·· ·«·♦
    Pro, Ser, Thr nebo Va1, a
    u. když substituce nastane v poloze 219, substituující aminokyselina je Asn, Asp, Gin, Glu, Gly, Pro nebo Ser, címz má varianta Subtilisínu DY sníženou adsorpci a zvýšeně hydrolyžuje nerozpustný substrát ve srovnání s divokým typem
    Subtilisínu DY.
    157
  2. 2. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti první smyčky.
  3. 3. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti druhé smyčky.
  4. 4. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti třetí smyčky.
  5. 5. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti čtvrté smyčky.
  6. 6. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti páté smyčky
  7. 7. Varianta Subtilisínu DY podle nároku 1, kde jedna nebo více substitucí nastane v oblasti šesté smyčky.
  8. 8. Čisticí prostředek vybraný ze skupiny skládající se z čisticího prostředku na pevné povrchy, prostředku na mytí nádobí, prostředku na čištění ústní dutiny, prostředku na ·· ♦···
    158 čištění umělého chrupu, prostředku na čištění kontaktních čoček a pracího prostředku vyznačující se tím, še čisticí prostředek obsahuje variantu Subtilisinu DY podle kteréhokoliv z nároků 1 aš 7, a nosič čisticího prostředku, čisticí prostředek je výhodně čisticí prostředek na pevně povrchy nebo prací prostředek, prostředek výhodně obsahuje alespoň 5 % surfaktantu a alespoň 5 % (hmotnostních) základní složky, prostředek dále výhodně obsahuje materiály čistícího prostředku vybrané ze skupiny skládající se z rozpouštědel, pufrů, enzymů, odstraňovačů skvrn, odstraňovačů skvrn od hlíny, dispergačních činidel, zjasňovačů, potlačovačů pěnění, změkčovadel látek, pěnidel, stabilizátorů enzymů, bělicích činidel, barviv, parfémů a jejich směsí.
  9. 9. Sekvence DNA, která kóduje variantu Subtilisinu DY dle kteréhokoliv z nároků 1 až 7.
CZ972798A 1995-03-09 1996-03-06 Varianty Subtilisinu DY se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy CZ279897A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/401,575 US6475765B1 (en) 1995-03-09 1995-03-09 Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ279897A3 true CZ279897A3 (cs) 1998-01-14

Family

ID=23588295

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ972798A CZ279897A3 (cs) 1995-03-09 1996-03-06 Varianty Subtilisinu DY se sníženou adsorpcí a zvýšenou schopností hydrolýzy

Country Status (15)

Country Link
US (1) US6475765B1 (cs)
EP (1) EP0815243A2 (cs)
JP (1) JPH11501815A (cs)
CN (1) CN1183810A (cs)
AU (1) AU5182796A (cs)
BR (1) BR9607758A (cs)
CA (1) CA2214579C (cs)
CZ (1) CZ279897A3 (cs)
HU (1) HUP9800767A3 (cs)
IL (1) IL117351A0 (cs)
IN (1) IN191825B (cs)
MA (1) MA23821A1 (cs)
MX (1) MX9706847A (cs)
WO (1) WO1996028557A2 (cs)
ZA (1) ZA961821B (cs)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE69739020D1 (de) * 1996-11-04 2008-11-13 Novozymes As Subtilase varianten und verbindungen
JPH10204500A (ja) * 1997-01-20 1998-08-04 Soft Kyukyu Corp:Kk 発泡錠剤洗浄剤
ES2367505T3 (es) 1997-10-23 2011-11-04 Danisco Us Inc. Variantes de proteasa con sustituciones múltiples con carga neta alterada para usar en detergentes.
MA25044A1 (fr) * 1997-10-23 2000-10-01 Procter & Gamble Compositions de lavage contenant des variants de proteases multisubstituees.
EP2258852A1 (en) * 2000-04-28 2010-12-08 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variant
DE10153792A1 (de) * 2001-10-31 2003-05-22 Henkel Kgaa Neue Alkalische Protease-Varianten und Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend diese neuen Alkalischen Protease-Varianten
US7888093B2 (en) 2002-11-06 2011-02-15 Novozymes A/S Subtilase variants
DE10260903A1 (de) * 2002-12-20 2004-07-08 Henkel Kgaa Neue Perhydrolasen
US7294499B2 (en) 2003-01-30 2007-11-13 Novozymes A/S Subtilases
JP5339672B2 (ja) * 2006-07-03 2013-11-13 小林製薬株式会社 漂白洗浄剤組成物
ES2622230T3 (es) 2011-06-17 2017-07-06 Dalli-Werke Gmbh & Co. Kg Composición de detergente que comprende polímeros de liberación de suciedad con estabilidad en almacenamiento mejorada
WO2016183509A1 (en) * 2015-05-13 2016-11-17 Danisco Us Inc. AprL-CLADE PROTEASE VARIANTS AND USES THEREOF
DE102016204815A1 (de) * 2016-03-23 2017-09-28 Henkel Ag & Co. Kgaa Proteasen mit verbesserte Enzymstabilität in Waschmittel
CN109061813B (zh) * 2018-08-29 2021-06-01 青岛海信宽带多媒体技术有限公司 一种光模块
CN112852788B (zh) * 2019-11-26 2022-10-11 江南大学 一种碱性底物选择性提高的枯草蛋白酶e突变体及其应用
WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections

Family Cites Families (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5310675A (en) * 1983-06-24 1994-05-10 Genencor, Inc. Procaryotic carbonyl hydrolases
IE81141B1 (en) * 1983-06-24 2000-04-05 Genencor Int Procaryotic carbonyl hydrolases
US4760025A (en) * 1984-05-29 1988-07-26 Genencor, Inc. Modified enzymes and methods for making same
US5972682A (en) * 1984-05-29 1999-10-26 Genencor International, Inc. Enzymatically active modified subtilisins
US5185258A (en) * 1984-05-29 1993-02-09 Genencor International, Inc. Subtilisin mutants
US5155033A (en) * 1989-01-06 1992-10-13 Genencor, Inc. Subtilisins modified at position 225 resulting in a shift in catalytic activity
US5371008A (en) * 1984-05-29 1994-12-06 Genencor International, Inc. Substrate assisted catalysis
US5346823A (en) * 1984-05-29 1994-09-13 Genencor, Inc. Subtilisin modifications to enhance oxidative stability
US5371190A (en) * 1984-05-29 1994-12-06 Genencor International, Inc. Substrate assisted catalysis
US5244791A (en) * 1984-05-29 1993-09-14 Genecor International, Inc. Methods of ester hydrolysis
US5182204A (en) * 1984-05-29 1993-01-26 Genencor International, Inc. Non-human carbonyl hydrolase mutants, vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
US5700676A (en) * 1984-05-29 1997-12-23 Genencor International Inc. Modified subtilisins having amino acid alterations
EP0254735B2 (en) 1986-01-15 1998-06-17 Amgen Inc. METHOD FOR PRODUCTION OF THERMALLY STABLE AND pH STABLE SUBTILISIN ANALOGS
US5013657A (en) 1988-04-12 1991-05-07 Bryan Philip N Subtilisin mutations
US4990452A (en) 1986-02-12 1991-02-05 Genex Corporation Combining mutations for stabilization of subtilisin
US4908773A (en) 1987-04-06 1990-03-13 Genex Corporation Computer designed stabilized proteins and method for producing same
US4980288A (en) 1986-02-12 1990-12-25 Genex Corporation Subtilisin with increased thermal stability
WO1987005050A1 (en) 1986-02-12 1987-08-27 Genex Corporation Mutagenesis and screening method and product
EP0251446B1 (en) 1986-04-30 1994-12-28 Genencor International, Inc. Non-human Carbonyl hydrolase mutants, DNA sequences and vectors encoding same and hosts transformed with said vectors
NZ221627A (en) 1986-09-09 1993-04-28 Genencor Inc Preparation of enzymes, modifications, catalytic triads to alter ratios or transesterification/hydrolysis ratios
WO1988006624A2 (en) * 1987-02-27 1988-09-07 Gist-Brocades N.V. Molecular cloning and expression of genes encoding proteolytic enzymes
ATE371029T1 (de) * 1987-04-06 2007-09-15 Novozymes As Regelung von elektrostatischen interaktionen an metallionen-bindungsstellen zur stabilisierung von proteinen
US5260207A (en) * 1987-04-06 1993-11-09 Enzon Labs Inc. Engineering of electrostatic interactions at metal ion binding sites for the stabilization of proteins
US4914031A (en) * 1987-04-10 1990-04-03 Amgen, Inc. Subtilisin analogs
DK6488D0 (da) 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
AU595096B2 (en) * 1988-02-10 1990-03-22 Astra Pharmaceuticals Pty Ltd Plastic cartridge and syringe
PT89702B (pt) 1988-02-11 1994-04-29 Gist Brocades Nv Processo para a preparacao de novos enzimas proteoliticos e de detergentes que os contem
US6287841B1 (en) * 1988-02-11 2001-09-11 Genencor International, Inc. High alkaline serine protease
US5324653A (en) * 1988-02-11 1994-06-28 Gist-Brocades N.V. Recombinant genetic means for the production of serine protease muteins
US5246849A (en) 1988-04-12 1993-09-21 Enzon, Inc. Thermally stable serine proteases
US5116741A (en) 1988-04-12 1992-05-26 Genex Corporation Biosynthetic uses of thermostable proteases
US5118623A (en) * 1988-05-27 1992-06-02 Solvay Enzymes, Inc. Bleach stable enzymes
AU618675B2 (en) 1989-05-17 1992-01-02 Amgen, Inc. Multiply mutated subtilisins
US5665587A (en) * 1989-06-26 1997-09-09 Novo Nordisk A/S Modified subtilisins and detergent compositions containing same
DK316989D0 (da) 1989-06-26 1989-06-26 Novo Nordisk As Enzymer
JPH04500385A (ja) 1989-06-26 1992-01-23 ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ 酵素洗剤組成物
EP0405902A1 (en) 1989-06-26 1991-01-02 Unilever Plc Enymatic detergent compositions
US5352603A (en) * 1989-08-31 1994-10-04 Kali-Chemie Ag Highly alkaline proteases
US6271012B1 (en) * 1989-10-11 2001-08-07 Genencor International, Inc. Protease muteins and their use in detergents
DE4009534A1 (de) * 1990-03-24 1991-09-26 Henkel Kgaa Fluessiges handreinigungsmittel
DK97190D0 (da) * 1990-04-19 1990-04-19 Novo Nordisk As Oxidationsstabile detergentenzymer
US5629173A (en) * 1990-08-09 1997-05-13 Genentech, Inc. Methods of use of serine protease variants having peptide ligase activity
DK0542931T3 (da) * 1990-08-09 2000-05-22 Genentech Inc Serinproteasevarianter med peptidligaseaktivitet
DK271490D0 (da) * 1990-11-14 1990-11-14 Novo Nordisk As Detergentkomposition
EP0563169B2 (en) 1990-12-21 2006-04-12 Novozymes A/S ENZYME MUTANTS HAVING A LOW DEGREE OF VARIATION OF THE MOLECULAR CHARGE OVER A pH RANGE
US5482849A (en) * 1990-12-21 1996-01-09 Novo Nordisk A/S Subtilisin mutants
US5340735A (en) * 1991-05-29 1994-08-23 Cognis, Inc. Bacillus lentus alkaline protease variants with increased stability
EP0525610A3 (en) * 1991-07-27 1993-03-24 Solvay Enzymes Gmbh & Co. Kg Process for increasing the stability of enzymes and stabilized enzymes
US5275945A (en) * 1991-10-08 1994-01-04 Vista Chemical Company Alkaline proteases stable in heavy-duty detergent liquids
AU682314B2 (en) 1992-07-17 1997-10-02 Genencor International, Inc. High alkaline serine proteases
US5567601A (en) * 1993-06-01 1996-10-22 University Of Maryland Subtilisin mutants lacking a primary calcium binding site
US5470733A (en) * 1993-06-01 1995-11-28 University Of Maryland Calcium free subtilisin mutants
US6436690B1 (en) 1993-09-15 2002-08-20 The Procter & Gamble Company BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
CN1057123C (zh) 1993-09-15 2000-10-04 普罗格特-甘布尔公司 降低了吸附能力以及增加了水解能力的枯草杆菌蛋白酶bpn变体
US5679630A (en) * 1993-10-14 1997-10-21 The Procter & Gamble Company Protease-containing cleaning compositions
CZ105296A3 (en) * 1993-10-14 1996-09-11 Procter & Gamble Bleaching agent containing protease enzymes, cleansing agents, agent for cleaning fabrics and fabric cleaning method
ES2364776T3 (es) * 1994-02-24 2011-09-14 HENKEL AG &amp; CO. KGAA Enzimas mejoradas y detergentes que las contienen.
US6599730B1 (en) 1994-05-02 2003-07-29 Procter & Gamble Company Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US5780285A (en) * 1995-03-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Subtilisin variants capable of cleaving substrates containing dibasic residues

Also Published As

Publication number Publication date
IL117351A0 (en) 1996-07-23
WO1996028557A2 (en) 1996-09-19
BR9607758A (pt) 1999-05-04
WO1996028557A3 (en) 1997-08-07
HUP9800767A2 (hu) 1998-07-28
CA2214579C (en) 2001-10-30
MA23821A1 (fr) 1996-10-01
CN1183810A (zh) 1998-06-03
AU5182796A (en) 1996-10-02
IN191825B (cs) 2004-01-10
MX9706847A (es) 1997-11-29
HUP9800767A3 (en) 2001-01-29
EP0815243A2 (en) 1998-01-07
ZA961821B (en) 1996-09-10
CA2214579A1 (en) 1996-09-19
JPH11501815A (ja) 1999-02-16
US6475765B1 (en) 2002-11-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6599730B1 (en) Subtilisin 309 variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6455295B1 (en) Subtilisin Carlsberg variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6436690B1 (en) BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis wherein one or more loop regions are substituted
US6451574B1 (en) Proteinase K variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
EP0719339B1 (en) Subtilisin bpn&#39; variants with decreased adsorption and increased hydrolysis
JPH09512433A (ja) ズブチリシンｂｐｎ′変異体を含む布帛クリーニング組成物
US6475765B1 (en) Subtilisin DY variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
CZ280097A3 (cs) Varianty termitasy mající sníženou adsorbci a zvýšenou hydrolýzu
WO1996028558A9 (en) Thermitase variants having decreased adsorption and increased hydrolysis
US6440717B1 (en) BPN′ variants having decreased adsorption and increased hydrolysis

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic