CZ279797A3 - Způsob stimulace miózy zárodečné buňky a použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu - Google Patents

Způsob stimulace miózy zárodečné buňky a použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu Download PDF

Info

Publication number
CZ279797A3
CZ279797A3 CZ972797A CZ279797A CZ279797A3 CZ 279797 A3 CZ279797 A3 CZ 279797A3 CZ 972797 A CZ972797 A CZ 972797A CZ 279797 A CZ279797 A CZ 279797A CZ 279797 A3 CZ279797 A3 CZ 279797A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
miosis
germ cell
stimulating
compound
present
Prior art date
Application number
CZ972797A
Other languages
English (en)
Inventor
Erling Guddal
Anne Grete Byskov
Frederik Christian Gronvald
Lars Nordholm
Original Assignee
Novo Nordisk A/S
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk A/S filed Critical Novo Nordisk A/S
Publication of CZ279797A3 publication Critical patent/CZ279797A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0608—Germ cells
    • C12N5/0609—Oocytes, oogonia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/4045—Indole-alkylamines; Amides thereof, e.g. serotonin, melatonin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A61K31/405—Indole-alkanecarboxylic acids; Derivatives thereof, e.g. tryptophan, indomethacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0608—Germ cells
    • C12N5/061—Sperm cells, spermatogonia

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Mióza je jedinečnou a základní událostí zárodečných buněk, na které je založena sexuální reprodukce. Mióza zahrnuje dvě miotická děleni. Během prvního dělení dochází k výměně mezi mateřskými a otcovskými geny před tím, než se páry chromosomů rozdělí na dvě dceřinné buňky. Ty obsahuji pouze polovinu (ln) chromosomů a 2c DNA. Druhé miotické děleni probíhá bez DNA syntézy. Toto dělení tedy vede k tvorbě haploidních zárodečných buněk s pouze lc DNA.
Miotické události jsou podobné u samčích i samičích zárodečných buněk, ale časový postup a diferenciační procesy, které vedou k vajíčkům a spermiím, se zásadně liší. Všechny samičí zárodečné buňky vstupuji do profáze prvního miotického dělení v časném stadiu života, často před narozením, ale všechny jsou později zadrženy jako oocyty v této profázi (klidový stav) do ovulace po pubertě. Od velmi ranného období života má tedy samička zásobu oocytů, které se vyčerpávají tak dlouho, dokud zásoba není vyčerpána. Mióza u samiček není po oplodněni ukončena a vede pouze k jednomu vajíčku a dvěma abortivnim polárním tělískům na zárodečnou buňku. Naproti tomu pouze některé samčí zárodečné buňky vstupují po pubertě do miózy a ponechávají kmenovou populaci zárodečných buněk po celý život. Jakmile jednou mióza začne, potom v samčí buňce probíhá bez významného zpoždění a produkuje 4 spermie.
O mechanismu, který reguluje iniciaci miózy u samce a u samičky, je toho známo pouze málo. U oocytu nové studie ukazují na to, že by folikulární puriny, hypoxanthin nebo adenosin by mohly být zodpovědné za miotické zadržení [Downs S. M. a spol.: Dev. Biol. 82, 454 (1985), Eppig J. J. a spol.: Dev. Biol. 119, 313 (1986) a Downs S. M.: Mol. Reprod. Dev. 35. 82 (1993).]. Přítomnost miózu regulujících látek schopných difúze byla poprvé popsána Byskovem a spol. v kultivačním systému žláz fetálních myší [Byskov A. G. a spol.: Dev. Biol. 52. 193 (1976).]. Látka aktivující miózu (MAS) byla sekretována fetálním myším vaječníkem, u kterého mióza nastoupila, a látka zabraňující miózu (MPS) byla uvolněna z morfologicky diferencovaných varlat s odpočívá jícími nemiotickými zárodečnými buňkami. Bylo předpokládáno, že relativní koncentrace MAS a MPS regulovaly počátek, zadržení a opětovné zahájení miózy v samčích a samičích zárodečných buňkách [Byskov A. G. a spol. v The Physiology of Reproduction (Knobil E., Neill J.D., red.), Raven Press, New York (1994).]. Je jasné, že jestliže je možné regulovat miózu, lze regulovat reprodukci. Jestliže je tedy stimulaci miózy žádoucí, jedním možným způsobem, jak toho dosáhnout, je zajistit, aby množství MAS přítomné v prostředí oocytu převážilo přítomné množství MPS. To by mohlo být v principu uděláno tak, že se podá MAS, stimulováním sekrece MAS nebo blokováním biotransformace již přítomné MAS.
Podstata vynálezu
Již dříve bylo zjištěno, že podávání některých sterolů, známých jako meziprodukty v biosyntéze cholesterolu, vede ke stimulaci miózy. Nyní se překvapivě ukázalo, že podávání některých sloučenin, o nich je známo, Že interferují s biosyntézou cholesterolu, také může vést ke stimulaci miózy. I když mechanismu (nebo mechanismům) není plně porozuměno, lze říci, že alespoň v některých případech interference zahrnuje inhibici jednoho nebo více enzymů, které se účastní biokonverze jednoho nebo více prekursorů cholesterolu. Výsledkem této inhibice je to, že koncentrace prekursorů vytvořených ve stupních předcházejících stupni, který je inhibován, se zvýší. Jeden nebo více z těchto prekursorů může - bučí přímo nebo nepřímo - způsobovat stimulaci miózy.
Ve svém nejširším aspektu se tedy předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání této buňce in vivo, ex vivo nebo in vitro účinného množství sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu na takovou úroveň, při které se indukuje mióza.
Podle výhodného provedeni se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy savčí zárodečné buňky.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy lidské zárodečné buňky.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy oocytu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulováni miózy samčí zárodečné buňky.
ká
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týzpůsobu antikoncepce pro použití u žen.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu léčení neplodnosti stimulací tvorby miotických oocytů tak, že je při ovulačnim maximu výskytu gonadotropinů k dispozici zvýšený počet miotických oocytů.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu léčení neplodnosti samců stimulací tvorby spermií ze samčích zárodečných buněk.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání sloučeniny, která vykazuje vlastnosti aktivující miózu, jestliže se testuje podle alespoň jednoho ze způsobů popsa4 ných v příkladech tohoto spisu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání amfotericinu B.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání aminoguanidinu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání 3B,5a,6B-trihydroxycholestanu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podáváni melatoninu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podáváni derivátu melatoninu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání 6-chlormelatoninu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podáváni 5-methoxytryptaminu.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání agonisty melatoninu.
Podle jiného výhodného provedeni se předložený vynález týká způsobu stimulování miózy zárodečné buňky, který zahrnuje podávání kterékoliv sloučeniny, která je vybrána z následující5 ho seznamu:
4a-kyanmethyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-nitro-5a-cholestan-3B-olu,
4a-amino-5a-cholestan-3B-olu,
4a-f ormyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-aminomethyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-(2-kyan)ethinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4-allenyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-oxiran-5a-cholestan-3B-olu,
4a-(3,3-dichlor)vinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-(3,3-dibrom)vinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-(difluormethyl)-5a-cholestan-3B-olu,
4-cyklodecyl-2,6-dimethylmorfolinu,
4-tridecyl-2,6-dimethylmorfolinu,
4-dodecyl-2,6-dimethylmorfolinu,
4-[3-[4-(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dime thylmorfolinu,
4—[3-(4-(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dime thylmorfolin-N-oxidu, cis-4-[3-(4-(1,1-dimethylpropyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6 -dimethylmorfolinu,
1-[3-[4—(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]piperidinu, 8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu,
N-benzyl-8-aza-4a,lO-dimethyl-trans-dekal-3B-olu, N-benzyl-8-aza-4a,lO-dimethyl-trans-dekal-3B-ol-N-oxidu,
N- (1,5,9-trimethyldecyl)-8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal -3B-olu,
N-(1-methyldodecyl)-8-aza-4a,lO-dimethyl-trans-dekal-3B-olu, N-[6-(4-terc.butylfenyl)-1,5-dimethyl]hexyl-8-aza-4a,10-di methyl-trans-dekal-3B-olu,
15-aza-24-methylen-D-homocholesta-8,14-dien-3B-olu,
4-chlor-a- [ 4- [ 2- (diethylamino) ethoxy ] fenyl ] -a- (4-methylf enyl) benzenethanolu,
1,4-bis(2-chlorbenzylaminomethyl)cyklohexenu,
6-amino-2-pentylthiobenzothiazolu,
24,25-iminolanosterolu, aminotriazolu, nystatinu,
25-azacholesterolu,
25-aza-24,25-dihydrozymosterolu, 25-azacholestanolu, (20R)-22,25-diazacholesterolu, (20S)-22,25-diazacholesterolu,
24- azacholesterolu,
25- aza-24,25-dihydrolanosterolu a
23-azacholesterolu.
Podle jiného výhodného provedeni se předložený vynález týká použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu na takovou úroveň, při které se indukuje mióza, pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle jiného výhodného provedení se předložený vynález týká použití sloučeniny, která má vlastnosti aktivující miózu, jestliže se testuje alespoň jedním způsobem popsaným v příkladech předloženého spisu, pro výrobu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití amfotericinu B pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití aminoguanidinu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití 3B,5a,6B-trihydroxycholestanu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedeni se předložený vynález týká použití melatoninu pro přípravu léčiva pro indukováni miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití derivátu melatoninu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití 6-chlormelatoninu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití 5-methoxytryptaminu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedeni se předložený vynález týká použiti agonisty melatoninu pro přípravu léčiva pro indukování miózy.
Podle dalšího výhodného provedení se předložený vynález týká použití sloučeniny, která je vybrána z následujícího seznamu, pro přípravu léčiva pro indukování miózy:
4a-kyanmethyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-nitro-5a-cholestan-3B-olu,
4a-amino-5a-cholestan-3B-olu,
4a-formyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-aminomethyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a- (2-kyan)ethinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4-allenyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-oxiran-5a-cholestan-3B-olu,
4a-(3,3-dichlor)vinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a-( 3,3-dibrom)vinyl-5a-cholestan-3B-olu,
4a- (dif luormethyl) -5a-cholestan-3B-olu,
4-cyklodecyl-2,6-diraethylmorfolinu,
4-tridecyl-2,6-dimethylmorfolinu,
4-dodecyl-2,6-dimethylmorfolinu,
4—[3-(4-(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dimethylmorfolinu,
4-[3-[4-(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dimethylmorfolin-N-oxidu, cis-4-[3-[4-(l,1-dimethylpropyl)fenyl]-2-methylpropyl]-2,6-dimethylmorfolinu,
1-[3-[4-(1,1-dimethylethyl)fenyl]-2-methylpropyl]piperidinu, 8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu,
N-benzyl-8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu, N-benzyl-8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-ol-N-oxidu,
Ν-(1,5,9-trimethyldecyl) -8-aza-4a, 10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu,
N-(1-methyldodecyl)-8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu, N-[6-(4-terc.butylfenyl)-1,5-dimethyl]hexyl-8-aza-4a,10-dimethyl-trans-dekal-3B-olu,
15-aza-24-methylen-D-homocholesta-8,14-dien-3B-olu,
4-chlor-a- [ 4- [ 2- (diethylamino) ethoxy] fenyl ] -a- (4-methylfenyl) benzenethanolu,
1,4-bis(2-chlorbenzylarainomethyl)cyklohexenu,
6-amino-2-pentylthiobenzothiazolu,
24,25-iminolanosterolu, aminotriazolu, nystatinu,
25-azacholesterolu,
25-aza-24,25-dihydrozymosterolu,
25-azacholestanolu, (20R)-22,25-diazacholesterolu, (20S)-22,25-diazacholesterolu,
24- azacholesterolu,
25- aza-24,25-dihydrolanosterolu a
23-azacholesterolu.
Existence látek aktivujících nebo stimulujících miózu je nějaký čas známa. Avšak až do nedávná nebyla známa identita látky nebo látek aktivující (aktivujících) miózu.
Perspektiva schopnosti ovlivňovat miózu je několikerá. Podle výhodného provedeni předloženého vynálezu se vybrané sloučeniny používají pro stimulování miózy. Podle jiného výhodného provedení podle předloženého vynálezu se vybrané sloučeniny používají pro stimulování miózy u lidi. Vybrané slpučeniny jsou tedy slibnými činidly regulujícími plodnost. Lze očekávat, že obvyklý vedlejší účinek na somatické buňky, který je znám z dosud používaných hormonálních antikoncepčních činidel, která jsou založena na estrogenech a/nebo gestagenech, nebude v předloženém vynálezu nalezen. Pro použití jako antikoncepční činidlo u žen lze indukovat miózu tak, aby se prematuračně indukovalo opětovné zahájeni miózy v oocytech, které jsou ještě v rostoucím folikulu, před ovulačnim maximem výskytu gonadotropinů. U žen může být opětovné zahájeni miózy indukováno například týden po tom, co skončila předchozí menstruace. Když dochází k ovulaci, výsledné přezrálé oocyty se nejpravděpodobněji neoplodní. Normální menstruační cyklus se pravděpodobně neovlivní. V této souvislosti je důležité si všimnout, že syntéza progesteronu v kultivovaných lidských granulozních buňkách (somatické buňky folikulu) není ovlivněna přítomností látky indukující miózu, zatímco estrogeny a gestageny až dosud používané v hormonálních antikoncepčních prostředcích mají nepříznivý účinek na syntézu progesteronu.
Byla prokázána stimulace miózy v samčích zárodečných buňkách. Předložený vynález může být tedy také užitečný pro léčení neplodnosti u mužů.
Lanosta-8,14-dien-3B-ol (lanosterol), který nemá žádné vlastnosti aktivující miózu, je primární cyklizační produkt při syntéze sterolů v savčích buňkách. Následná biosyntéza cholesterolu probíhá řadou stupňů, jako jsou demethylace, oxidace, redukce a substituce dvojných vazeb, všechny jsou kontrolovány eznymaticky. Pouze některé enzymy, které kontrolují tyto stupně, byly isolovány a charakterizovány. První produkt, který se vytvoří a má cholestanový skelet, je 4,4-dimethylcholesta-8,14,24-trien-3B-ol, který je identický se sloučeninou aktivující miózu z lidské folikulární kapaliny [A. G. Byskov a spol.: Nátuře 374. 559 (1995). ]. Následná redukce dvojné vazby v poloze 14 poskytuje 4,4-dimethylcholesta-8,24-dien-3B-ol, který je identický se sloučeninou aktivující miózu isolovanou z býčích varlat [A. G. Byskov a spol.: Nátuře 374. 559 (1995).]. Postup10 né odstraňování methylových skupin v poloze 4 poskytuje 4-methylcholesta-8,24-dien-3B-ol a cholesta-8,24-dien-3B-ol (zymosterol), oba dva mají vlastnosti aktivující miózu. Následná migrace dvojné vazby z polohy 8 do polohy 5 poskytuje cholest-5-en-3B-ol (cholesterol), který nemá žádné vlastnosti aktivující miózu. Inhibice kteréhokoliv z enzymů, který je aktivní v řadě shora popsaných reakcí, způsobí, že následující meziprodukty s vlastnostmi aktivující miózu se akumulují a tím indukují miózu v přítomných zárodečných buňkách.
V literatuře byly popsány četné sloučeniny známé jako inhibitory jednoho nebo více enzymů, které jsou zahrnuty v in vivo konverzi lanosta-8,24-dien-3B-olu na cholesterol. Tato oblast byla nedávno popsána v souhrnném článku [Mercer E. I.: Prog. Lipid Res. 32. 357 (1993).]. Je známo, že amfotericin interferuje v posledních stupních syntézy ergosterolu v houbách [Coulon J. a spol.: Can. J. Microbiol. 12, 738 (1986).] a je klinicky používán jako antimykotické činidlo. Bylo zjištěno, že cholestantriol v krysích játrech in vivo interferuje s demethylací meziproduktů v poloze 4 při biosyntéze cholesterolu a tedy indukuje akumulaci 4,4-dimethylcholesta-8-en-3-olu a 4-methylcholesta-8-en-3-olu [Scallen T. J. a spol.: J. Biol. chem. 246. 3168 (1971).].
Množství účinné složky podle tohoto vynálezu, které se podává, stanoví odborník podle účelu léčení. Toto množství bude záviset mimo jiné na specifickém činidle, které se podává, na příslušném způsobu podávání (např. in vivo, ex vivo nebo in vitro) a na dalších faktorech.
Prostředky podle vynálezu pro podávání účinných činidel mohou být ve formě tablet, tobolek, prášků, roztoků nebo suspenzi. V těchto prostředcích se účinné složky mohou kombinovat s nosiči, adjuvans a ředidly obvykle používanými v oblasti techniky.
Systémového účinku u žijícího živočicha lze dosáhnout o11 rálnlm podáváním nebo injekcí či infuzi sterilních roztoků účinných činidel podle vynálezu. Tyto roztoky se připravuji podle znalostí z oblasti techniky. Systémového účinku lze dosáhnout také inhalací nebo podáváním nosem prášku nebo aerosolu obsahujícího účinné činidlo.
Podávání účinného činidla podle vynálezu do isolované buňky, např. oocytu nebo samčí zárodečné buňky, lze dosáhnout uchováváním této buňky v takovém mediu, které se obvykle používá pro uchovávání buněk příslušného druhu a dále pak přidáním účinného činidla k tomuto mediu.
Předložený vynález je dále ilustrován následujícími příklady, které však nejsou konstruovány jako omezený rozsah ochrany. Vlastnosti popsané v předcházejícím popisu a v následujících příkladech mohou, jak odděleně tak v jakékoliv jejich kombinaci, znamenat materiál pro realizováni vynálezu v jeho různých formách.
Příklady provedeni vynálezu
Materiály a způsoby
Test látek aktivujících miózu v oocytovém testu
Zvířata
Nedospělé myší samičky (B6D2-F1, kmen C57B1/2J) se udržují pod kontrolovaným osvětlením (14 h světlo, 10 h tma) a teplotou s potravou a vodou podle libosti. Když zvířata dosáhla hmotnosti 13 až 16 g (což odpovídá stáří 20 až 22 dnů), byla jim podána jedna injekce (i.p.) lidského menopausálního gonadotropinu (Humegon, Organon, Holandsko) obsahujícího přibližně 20 m.j. FSH a 20 m.j. LH [Ziebe S. a spol.: Hum. Reprod. 8, 385 (1993).]. Po 48 h byla zvířata cervikální dislokaci usmrcena.
Sebrání a kultivace oocytů
Vaječníky byly odebrány, byly umístěny do HX media (viz níže) a byla z nich odstraněna cizorodá tkáň. Medium pro sbíráni a kultivaci sestávalo z EMEM media (Eagles minimum essential medium, Flow, USA), které obsahovalo 4mM hypoxanthin (HX), 3 mg/ml hovězího sérového albuminu, O,23mM vínan sodný, 2mM glutamin, 100 j./ml penicilinu a 100 Mg/ml streptomycinu (všechno od firmy Sigma, USA). Toto medium se označuje jako HX-medium. Stejné medium, ale bez HX, bylo používáno jako kontrolní medium.
Vliv testovaných sloučenin na miózu oocytů byl studován u oocytů s obklopujícími buňkami (CEO, test A) au nahých oocytů (DO, test B). CEO byly získány propíchnutím antrálních folikulů vaječníků pod mikroskopem pro pitvání jehlou (27 gauge). Byly vybrány oocyty s obklopujícími buňkami (CEO) stejné velikosti. Před testováním v testu A byly třikrát promyty čerstvým HX-mediem. Oocyty bez obklopujících buněk, tj. obnažené oocyty, DO, pro použití v testu B, byly získány mírným promýváním CEO obyčejnou pipetou s jemným otvorem. CEO (v testu A) a DO (v testu B) byly kultivovány ve více miskách se čtyřmi jamkami (Nucleon, Dánsko), které obsahovaly 0,5 ml HX-media, které obsahovalo testovanou sloučeninu v koncentracích uvedených v tabulkách, vyjma kontrol, které byly kultivovány v kontrolním mediu. Každá jamka obsahovala 35 až 50 oocytů. Testované kultury byly připraveny s různými koncentracemi sloučenin, které máji být testovány, jak je uvedeno v tabulkách.
Kultivace byly prováděny při 37 °C a 100% (hmotn.) vlhkosti s 5 % (hmotn.) CO2 ve vzduchu. Doba kultivace byla 24 h.
Iniciace oocytů, test C(A) a C(B)
Test C(A) aC(B) byl prováděn jako test A a test B, vyjma toho, že oocyty byly pouze udržovány v mediu, které obsahuje testovanou sloučeninu po dobu (doba iniciace) od 5 minut do 3 hodin na začátku testu. Po době iniciace byly oocyty přenesy do kontrolního media a v kultivaci bylo pokračováno 22 hodin od počátku pokusu.
Zkoumáni oocytu
Na konci 24h kultivační doby byl v inverzním mikroskopu s diferenčním interferenčním kontrastním zařízením spočítán počet oocytů se zárodečným váčkem (GV) nebo s rozpadnutým zárodečným váčkem (GVBD) a oocytů s polárním tělesem (PB). Byla spočítána procenta oocytů s GVBD na celkový počet oocytů a procenta oocytů s PB na GVBD. Výsledky testů A, B, C(A) a C(B), vypočtené jako jednotky MAS aktivity, jsou uvedeny v tabulkách v každém z příkladů. Jedna jednotka MAS aktivity (MASU) je definována jako:
% GVDDkontrola/2
Počet jednotek MAS aktivity, MASU, se vypočte jako:
2((% GVBDtMt - % GVBDkontrola)/% GVBDkontrola)
Příklad 1
Aktivace miózy v oocytech s použitím cholestan-3B,5a,6B-triolu
Testy A a B se provedou jak shora popsáno s použitím cholestan-3B,5α,6B-triolu jako testované sloučeniny. Výsledky jsou uvedeny v tabulce:
cholestan-3B,5a,6B-triol Mg/ml č.testu test A MASU test B MASU
2,5 2 3,0 8,5
1,25 2 0,8 3,9
0,6 2 1,3 1,3
Použitý cholestan-3B,5α,6B-triol byl získán od firmy Sigma (St. Louis, USA). Z tabulky je vidět, že cholestan-3B,5a,6B-triol indukuje opětovný nástup miózy v oocytech v závislosti na dávce.
Příklad 2
Aktivace miózy v oocytech s použitím hydrogenuhličitan aminoguanidinu
Testy A a B se provedou jak shora popsáno s použitím hydrogenuhličitanu aminoguanidinu jako testované sloučeniny. Výsledky jsou uvedeny v tabulce:
hydrogenuhličitan aminoguanidinu Mg/ml č.testu test A MASU test B MASU
2,5 2 3,7 2,8
1,25 2 2,5 2,4
0,6 2 2,0 0,6
0,3 2 0 0,6
0,15 2 1,2 0,8
0,08 2 2,1 1,6
Použitý hydrogenuhličitan aminoguanidinu byl získán od firmy Aldrich Chemical Co., Inc. (Milwaukee, Wisconsin, USA). Z tabulky je vidět, že hydrogenuhličitan aminoguanidinu indukuje opětovný nástup miózy v oocytech v závislosti na dávce.
Příklad 3
Aktivace miózy v oocytech s použitím amfotericinu B
Testy A a B se provedou jak shora popsáno s použitím amfotericinu B jako testované sloučeniny. Výsledky jsou uvedeny v tabulce:
amfotericin B Mg/ml č.testu test A MASU test B MASU
1,25 3 5,9 5,96
0,6 2 1,3 3,7
0,3 1 2,5 0,8
Použitý amfotericin B byl získán od firmy Bristol-Myers Squibb. Z tabulky je vidět, že amfotericin B indukuje opětovný nástup miózy v oocytech v závislosti na dávce.
Amfotericin je toxický v koncentracích nad 1,25 Mg/ml. Byly testovány koncentrace až do 50 Mg/ml.
Iniciace oocytů amfotericinem B
Výsledky jsou uvedeny v tabulce:
amoftericin B Mg/ml č.testu doba iniciace test A MASU test B MASU
1,25 2 5 minut 0,6 0,5
1,25 2 10 minut 0,7 1.4
1,25 2 30 minut 3,7 2,1
1,25 4 1 hodina 5,0 2,7
1,25 3 2 hodiny 6,4 6,1
1,25 2 3 hodiny 7,6 4,4
Jak je vidět z tabulky, i pouhá pětimutová exposice působeni amfotericinu B je postačující pro nastartování opětovného nástupu miózy jak u DO tak CEO.
Příklad 4
Aktivace miózy u savčích zárodečných buněk použitím amfotericinu B
Testovací systém sestával z plodových myších žláz, 11,5 dne p.c. Jedna žláza z každého plodu byla použita jako kontrola, druhá jako testovací žláza. Žlázy, které se diferencovaly během kultivace, byly kultivovány 6 dnů v chemicky definovaném kultivačním mediu za normálních kultivačních podmínek, viz Westergaard a spol.: Fertil. Steril. 41. 377 (1984). Ke kultivačnímu mediu, v němž byly žlázy kultivovány, byla přidávána různá množství amfotericinu B, jak je uvedeno v tabulce. Po kultivaci kontrolní žlázy obsahovaly pouze nemiotické zárodečné buňky. Níže v tabulce jsou uvedeny semikvantitativní výsledky s testovanými žlázami získané obarvením pod mikroskopem, při čemž v tabulce uvedené níže znamená žádnou odpověá, a +, a ”+++ znamená zvyšující se odpovědi:
amfotericin B μ9/ιη1 odpověá
10 +++
5 +++
1,25 ++
0,5 +
0,1
Použitý amfotericin B byl získán od firmy Bristol-Myers Squibb. Z tabulky je vidět, že amfotericin B aktivuje miózu v samčích zárodečných buňkách v závislosti na dávce.

Claims (9)

1. Způsob stimulace miózy savčí zárodečné buňky, vyznačující se tím, že se této buňce in vivo, ex vivo nebo in vitro podá účinné množství sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu na takovou úroveň, při které se indukuje mióza.
2. Způsob stimulace miózy zárodečné buňky podle nároku 1, vyznačující se tím, že touto zárodečnou buňkou je lidská zárodečná buňka.
3. Způsob stimulace miózy zárodečné buňky podle nároku 1, vyznačující se tím, že touto zárodečnou buňkou je oocyt.
4. Způsob stimulace miózy zárodečné buňky podle nároku 1, vyznačující se tím, že touto zárodečnou buňkou je samčí zárodečná buňka.
5. Způsob stimulace miózy zárodečné buňky podle nároku 1, vyznačující se tím, že sloučeninou, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu, je sloučenina, která vykazuje vlastnosti aktivující miózu, jestliže je testována podle alespoň jednoho způsobu popsaného v příkladech předloženého spisu.
6. Způsob stimulace miózy zárodečné buňky podle nároku 1, vyznačující se tím, že sloučenina, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu, je vybrána ze skupiny sestávající z amfotericinu B, aminoguanidinu a 3B,5a,6B-trihydroxycholestanu.
7. Použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu na takovou úroveň, při které se indukuje mióza, pro výrobu léčiva indukujícího miózu.
8. Použití podle nároku 7 sloučeniny, která vykazuje vlastnosti aktivující miózu, jestliže je testována alespoň jedním způsobem popsaným v příkladech předloženého spisu.
9. Použiti podle nároku 7 sloučeniny, která je vybrána ze skupiny sestávající amfotericinu B, aminoguanidinu a 3B,5α,6B-trihydroxycholestanu.
CZ972797A 1995-03-06 1996-03-06 Způsob stimulace miózy zárodečné buňky a použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu CZ279797A3 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK23295 1995-03-06
DK30995 1995-03-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ279797A3 true CZ279797A3 (cs) 1998-01-14

Family

ID=26063579

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ972797A CZ279797A3 (cs) 1995-03-06 1996-03-06 Způsob stimulace miózy zárodečné buňky a použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu

Country Status (13)

Country Link
US (1) US5830757A (cs)
EP (1) EP0813595A1 (cs)
JP (1) JPH11501806A (cs)
KR (1) KR19980702624A (cs)
AU (1) AU717180B2 (cs)
BR (1) BR9607673A (cs)
CA (1) CA2214126A1 (cs)
CZ (1) CZ279797A3 (cs)
HU (1) HUP9800731A3 (cs)
NO (1) NO974089D0 (cs)
PL (1) PL322106A1 (cs)
RU (1) RU2188006C2 (cs)
WO (1) WO1996027658A1 (cs)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU746878B2 (en) * 1996-12-20 2002-05-02 Novo Nordisk A/S Meiosis regulating compounds
HUP0002331A3 (en) * 1997-05-16 2001-05-28 Akzo Nobel Nv 20-aralkyl-5alpha-pregnane derivatives and pharmaceutical compositions thereof
DK0988312T3 (da) * 1997-06-04 2002-07-15 Akzo Nobel Nv 17beta-allyloxy(thio)alkyl-androstanderivater til modulering af meiose
JP2001526293A (ja) 1997-12-18 2001-12-18 アクゾ・ノベル・エヌ・ベー １７β−アリール（アリールメチル）オキシ（チオ）アルキル−アンドロスタン誘導体
EP0957108A1 (en) * 1998-05-14 1999-11-17 Schering Aktiengesellschaft Unsaturated cholestane derivatives, pharmaceutical compositions comprising them and use of these derivatives for the preparation of meiosis regulating medicaments
IL139241A0 (en) 1998-05-13 2001-11-25 Novo Nordisk As Meiosis regulating compounds
CA2333320A1 (en) * 1998-05-26 1999-12-02 Schering Aktiengesellschaft Treatment of infertility with camp-increasing compounds alone or in combination with at least one meiosis-stimulating compound
JP2003521444A (ja) * 1998-06-19 2003-07-15 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ 減数分裂調節化合物
CA2352337A1 (en) 1998-12-11 2000-06-22 Akzo Nobel Nv 22s-hydroxycholesta-8, 14-diene derivatives with meiosis regulating activity
CN1368977A (zh) * 1999-02-10 2002-09-11 舍林股份公司 不饱和胆甾烷衍生物及其在制备调节减数分裂的药物中的应用
DE60034662T2 (de) 1999-02-24 2008-01-03 Novo Nordisk A/S Behandlung von unfruchtbarkeit
HUP0200157A3 (en) 1999-02-24 2002-06-28 Novo Nordisk As Treatment of infertility
HUP0200201A3 (en) * 1999-02-26 2002-06-28 Schering Ag Meiosis activating sterol augments implantation rate
JP2002539134A (ja) * 1999-03-09 2002-11-19 アクゾ・ノベル・エヌ・ベー 減数分裂の阻害のための２２ｒ−ヒドロキシコレスタ−８，１４−ジエン誘導体
AU4756100A (en) * 1999-05-10 2000-11-21 Schering Aktiengesellschaft 14beta-h-sterols, pharmaceutical compositions comprising them and use of these derivatives for the preparation of meiosis regulating medicaments
CZ2002591A3 (cs) 1999-09-16 2002-08-14 Novo Nordisk A/S Pevný produkt, prostředek, vodný roztok a zaváděcí systém
EP1127890A1 (en) 2000-02-22 2001-08-29 Schering Aktiengesellschaft Steroid derivatives with an additional ring annulated to ring A and use of these derivatives for the preparation of meiosis regulating medicaments
MXPA02011271A (es) * 2000-05-18 2003-04-25 Schering Ag Fertilizacion de oocitos envejecidos.
EP1216701A1 (en) * 2000-12-22 2002-06-26 Schering Aktiengesellschaft Process to increase the concentration of meiosis-activating sterols (MAS) in the cholesterol synthesis and the use of potent inhibitors in the process
EP1245572A1 (en) * 2001-03-26 2002-10-02 Schering Aktiengesellschaft Aminosterol compounds, their use in the preparation of meiosis-regulating medicaments and method for their preparation
US20050020666A1 (en) * 2003-07-25 2005-01-27 Dabur Research Foundation Cardioprotective agents
US20090105333A1 (en) * 2006-05-22 2009-04-23 Gunther Birznieks Melatonin agonist treatment

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716777A (en) * 1994-06-23 1998-02-10 Novo Nordisk A/S Regulation of meiosis using sterols

Also Published As

Publication number Publication date
NO974089L (no) 1997-09-05
AU717180B2 (en) 2000-03-16
AU4784596A (en) 1996-09-23
PL322106A1 (en) 1998-01-05
HUP9800731A2 (hu) 1998-07-28
KR19980702624A (ko) 1998-08-05
US5830757A (en) 1998-11-03
WO1996027658A1 (en) 1996-09-12
CA2214126A1 (en) 1996-09-12
RU2188006C2 (ru) 2002-08-27
EP0813595A1 (en) 1997-12-29
NO974089D0 (no) 1997-09-05
HUP9800731A3 (en) 2000-03-28
BR9607673A (pt) 1998-06-16
MX9706565A (es) 1997-11-29
JPH11501806A (ja) 1999-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ279797A3 (cs) Způsob stimulace miózy zárodečné buňky a použití sloučeniny, která způsobuje akumulaci látky aktivující endogenní miózu
US6281013B1 (en) Treatment of Infertility
JP2001500865A (ja) 避妊の非ホルモン法
Zhang et al. Electrical activation and in vitro development of human oocytes that fail to fertilize after intracytoplasmic sperm injection
Byskov et al. Meiosis activating sterols (MAS) and fertility in mammals and man
US6585982B1 (en) Treatment of infertility
KR20010043828A (ko) ｃＡＭＰ-증강 화합물 단독 또는 감수분열-자극 화합물하나 이상과의 조합에 의한 불임 치료 방법
Smitz et al. Principal findings from a multicenter trial investigating the safety of follicular-fluid meiosis-activating sterol for in vitro maturation of human cumulus-enclosed oocytes
EP1235899B1 (en) Treatment of human infertility
SK10022002A3 (sk) Farmaceutický prostriedok a jeho použitie
US6544166B1 (en) Treatment of human infertility
MXPA97006565A (es) Estimulacion de meiosis
US7192768B2 (en) Synchronization of the cytoplasmatic and the nuclear maturation of oocytes in vitro
Ma et al. Intracytoplasmic sperm injection could minimize the incidence of prematurely condensed human sperm chromosomes
Flores-Herrera et al. A possible role of progesterone receptor in mouse oocyte in vitro fertilization regulated by norethisterone and its reduced metabolite
RU2349597C2 (ru) Тиоморфолиновые производные стероидов, их применение для получения регулирующих мейоз лекарственных средств и способ получения этих соединений
Minhas Efficiency enhancement of manipulated male and female gametes
Keating et al. TO TEST OR NOT TO TEST: ASSESSING PGT-A OUTCOMES WITH INCREASING MATERNAL AGE
WO1997000883A1 (en) Meiosis regulating compounds
WO1989002743A1 (en) In vitro method for the induction of the spermatozoal acrosome reaction and application of said method to the assessment of spermatozoa and the treatment of male-related infertility
Benoff Investigations into the molecular basis of human sperm-egg interactions: what's next?
JP2004534011A (ja) ステロイド化合物類、減数分裂−調節薬剤の調製のためのそれらの化合物の使用、及びそれらの化合物の調製方法
Cavilla The effects of factors influencing human oocyte maturation upon fertilization and preimplantation embryo development
ZA200104653B (en) Treatment of infertility.
MXPA01008452A (en) Treatment of infertility

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic