CZ2003459A3 - GEM-substituované antagonisty integrinu alfa v beta 3 - Google Patents

GEM-substituované antagonisty integrinu alfa v beta 3 Download PDF

Info

Publication number
CZ2003459A3
CZ2003459A3 CZ2003459A CZ2003459A CZ2003459A3 CZ 2003459 A3 CZ2003459 A3 CZ 2003459A3 CZ 2003459 A CZ2003459 A CZ 2003459A CZ 2003459 A CZ2003459 A CZ 2003459A CZ 2003459 A3 CZ2003459 A3 CZ 2003459A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
phenyl
alkyl
mmol
propoxy
Prior art date
Application number
CZ2003459A
Other languages
English (en)
Inventor
Devadas Balekudra
Ish Kumar Khanna
Yi Yu
Hwang Fun-Lu
Nizal S. Chandrakumar
Renee M. Huff
Mark A. Russell
Mark L. Boys
Lori A. Schretzman
Barbara B. Chen
Bipinchandra N. Desai
Srinivasan Raj. Nagarajan
Alan F. Gasiecki
Thomas D. Penning
Thomas Rogers
John Adam Wendt
Albert Khilevich
Yaping Wang
Original Assignee
Pharmacia Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pharmacia Corporation filed Critical Pharmacia Corporation
Publication of CZ2003459A3 publication Critical patent/CZ2003459A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/74—Amino or imino radicals substituted by hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

GEM-substituované antagonistfi^integrinu αν p3
Oblast techniky
Vynález se týká farmaceutických látek, kterými jsou antagonisté integrinu a/nebo ay β5 využitelné ve farmaceutických kompozicích a v jejich použití pro přípravu farmaceutické kompozice pro léčby stavů zprostředkovaných integriny αν βί a/nebo αν β5.
Dosavadní stav techniky
Integriny jsou skupina glykoproteinů buněčného povrchu, které zprostředkují buněčnou adhezi, a proto jsou užitečnými mediátory interakcí buněčné adheze ke které dochází během různých biologických procesů. Integriny jsou heterodimery složené z nekovalentně spojených polypeptidových podjednotek a a β. V současné době bylo identifikováno jedenáct různých podjednotek a a šest různých podjednotek β. Různé podjednotky a mohou být kombinovány s různými podjednotkami β za tvorby různých integrinů.
Integrin označovaný jako αν β3 (známý též jako vitronektáiový receptor) byl identifikován jako integrin, který hraje roli při různých stavech nebo onemocněních včetně tumorových metastáz, růstu solidních tumorů (neoplazie), osteoporózy (Ross, a kol., J. Biol., Chem., 1987, 262, 7703), Pagetovy choroby, humorální hyperkalcemie zhoubného bujení (Carron a kol., Cancer Res., 1998, 58, 1930), osteopenie (Lark a kol., J Bone Miner Res., 2001, 16, 319), endometriózy (Healy a kol., Hum. Reproductive Update, 1998, 4, 736), angiogeneze včetně angiogeneze tumorů (Cheresh, Cancer Metastasis Rev., 1991, 10, 3-10 a Brooks a kol., Cell, 1994, 79, 1157), retinopatie včetně makulámí degenerace (Friedlander a kol., Proč. Nati. Acad. Sci USA 1996, 93, 9764), artritidy včetně revmatoidm artritidy (Badger a kol., Arthritis Rheum., 2001, 44, 128), periodontálního onemocnění, psoriázy a migrace hladkých svalových buněk (například restenózy a arteriosklerózy, (Brown a kol., Cardiovascular Res., 1994, 28, 1815). Sloučenáiy podle vynálezu jsou antagonisté αν β3 a mohou být použity zvlášť nebo vkombátaci sjáiými terapeutickými látkami, při léčbě nebo modulaci různých stavů nebo onemocnění popsaných výše. Dále bylo zjištěno, že, že tyto látky by byly využitelné jako antiváOtika, fungicidní látky a antimikrobiální látky. Sloučeniny, které selektivně antagonizují ay β3 by tak byly přínosné pro léčbu těchto stavů.
Integrin ανβ5 hraje roli při neovaskularizaci. Antagonisté integrinu av p5 inhibují neovaskularizaci a jsou využitelné pro léčbu a prevenci angiogenezy metastáz, růstu tumorů, • · makulární degenerace a diabetické retinopatie. M.C. Friedlande a kol., Science, 270, 15001502 (1995) uvádí, že monoklonální protilátka proti αν Ps inhibuje angiogenezi vyvolanou VEFG u králičí rohovky a kuřecího chorioallantoického membránového modelu. Bylo by tak užitečné antagonizovat receptor αν β3 i αν Ps. Tito „smíšení antagonisté αν β3 /αν Ps nebo „duální antagonisté αν β3 /αν ps by byly využitelní pro léčbu nebo prevenci angiogenezy metastáz tumorů, růstu tumorů, diabetické retinoaptie, makulární degenerace aterosklerózy a osteoporózy.
Bylo prokázáno, že integrin ανβ3 a jiné integriny obsahující αν se vážou k mnoha makromolekulám matrixu obsahujícím Arg-Gly-Asp (RGD). Sloučeniny obsahující sekvenci RGD napodobují extracelulámí ligandy matrixu sekvenčně podobné RGD a vážou se k povrchovým receptorům buňky. Je však též známo, že peptidy RGD jsou obecně neselektivm pro integriny závislé na RGD. Například, většina RGD peptidů, které se vážou k αν p3 se též vážou k αν ps.av βι aanb P3. Antagonismus anb P3 (znám též jako fibrinogenový receptor) krevních destiček je znám z hlediska blokace agregace krevních destiček u člověka. Za účelem vyhnutí se vedlejších účinků krvácení při léčbě stavů nebo onemocnění spojených s integrinem ανβ3 by bylo užitečné vyvinout sloučeniny, které jsou selektivními antagonisty avp3 oproti anb P3.
Invaze nádorových buněk probíhá procesem zahrnujícím tři kroky: 1) přilnutí nádorové buňky k extracelulárnímu matrix; 2) proteolytické rozpuštění matrix; a 3) pohyb buněk přes rozpuštěnou bariéru. Tento proces se může opakovat a výsledkem mohou být metastázy v místech vzdálených od původního tumoru.
Sektor a kol., {Proč. Nati. Acad. Sci. USA, svazek 89 (1992) 1557-1561) uvádí, že integrin αν β3 má biologickou funkci při invazi buněk melanomu. Montgomery a kol., {Proč. Nati. Acad. Sci. USA, svazek 91 (1994) 8856-60) prokázal, že integrin ανβ3 exprimovaný na lidských buňkách melanomu zahajuje signál přežití, ochraňující buňky před apoptózou. Užitečné by bylo ovlivnění procesu metastázování interferencí s αν β3 integrinovou buněčnou adhezí receptoru k zabránění metastázy tumoru.
Brooks a kol. {Cell, svazek 79 (1994) 1157-1164) prokázal, že antagonisté ανβ3 jsou terapeuticky využitelní pro léčbu neoplazie (inhibice růstu solidního tumoru), poněvadž systematická aplikace antagonistů ανβ3 způsobuje dramatickou regresi různých histologicky odlišných lidských tumorů.
Adheze receptorového integrinu ανβ3 byla prokázána jako markér angiogenních krevních cév u kuřete a člověka a proto hraje tento receptor zásadní roli při angiogenezi nebo • · neovaskularizaci. Angiogeneze je charakteristická invazí, migrací a proliferací hladkých svalových a endoteliálních buněk. Antagonisté αν β3 inhibují tento proces selektivní promocí apoptózy buněk v neovaskulatuře. Růst nových krevních cév nebo angiogeneze též přispívá k patologickým stavům, jako například diabetické retinopatii včetně makulámí degenerace (Adamis a kol., Amer.J.Ophtal., svazek 118, (1994) 445-450) a revmatoidní artritidy (Peacock a kol., J.Exp.Med., Vol. 175 (1992), 1135-1138). Antagonisté ανβ3 by proto byli užitečnými terapeutickými látkami pro léčbu těchto stavů spojených s neovaskularizaci (Brooks a kol., Science, svazek 264 (1994), 569-571).
Bylo publikováno, že povrchový buněčný receptor ανβ3 je hlavním integrinem na osteoklastech zodpovědný za přilnutí ke kosti. Osteoklasty způsobují kostní resorpci a pokud tato kostní resorpce převáží nad tvorbou kosti, dochází k osteoporóze (ubývám kosti), která vede ke zvýšení počtu kostních fraktur, inkapacitaci a zvýšené úmrtnosti. Antagonisté ανβ3 byli prokázáni jako silní inhibitori osteoklastické aktivity in vitro [Sáto a kol., J.Cell.Biol., svazek 111 (1990) 1713-1723] i in vivo [Fisher a kol., Endocrinology, svazek 132 (1993) 1411-1413]. Antagonismus αγβ3 vede ke snížené kostní resorpci a proto zachovává normální rovnováhu mezi kostní tvorbou a resorpční aktivitou. Bylo by proto výhodné vytvořit antagonisty osteoklastu ανβ3, které jsou účinnými inhibitory kostní resorpce a proto jsou využitelné při léčbě nebo prevenci osteoporózy.
Role integrinu αγβ3 při migraci hladkých svalových buněk je též důležitá při prevenci nebo inhibici neointimální hyperplazie, což je hlavní příčinou restenózy po vaskulárních zákrocích (Choi a kol., J. Vasc. Surg. svazek 19(1) (1994) 125-34). Přínosná by byla prevence nebo inhibice neointimální hyperplazie farmaceutickými látkami pro prevenci nebo inhibici restenózy.
White (Current Biology, svazek 3(9)(1993) 596-599) uvádí, že adenovirus využívá αγβ3 pro napadení hostitelské buňky. Integrin je zřejmě nezbytný pro endocytózu virové částice a může být nezbytný pro penetraci virového genomu do cytoplazmy hostitelské buňky. Jako antivirové látky by byly proto užitečné sloučeniny, které inhibují αγβ3.
Podstata vynálezu
Sloučeniny podle vynálezu jsou 1) αγβ3 integrinoví antagonisté; nebo 2) αν βί integrinoví antagonisté; nebo 3) smíchaní nebo duální ανβ3 / αγβ5 antagonisté. Vynález zahrnuje sloučeniny, které inhibují příslušné intgriny a zahrnuje též farmaceutické kompozice obsahující tyto sloučeniny. Vynález dále uvádí použití takovýchto sloučenin pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčbu nebo prevenci stavů zprostředkovaných receptory αγβ3 / ανβ5 u savců vyžadujících tuto léčbu. Aplikace této sloučeniny a kompozice podle vynálezu inhibuje angiogenezu, metastázování tumorů, růst tumorů, osteoporózu, Pagetovu chorobu, humorální hyperkalcemii malignance, retinopatii, makulámí degeneraci, arthritidu, periodontální onemocnění, migraci hladkých svalových buněk včetně restenózy a atherosklerózy a virová onemocnění.
Vynález se týká třídy sloučenin charakterizovaných obecným vzorcem I
γΒ/Υ4
X-Y '(CH2)„CORď (I), nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, kde
je 4 až 8 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný bicyklický systém, volitelně nasycený nebo nenasycený, volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující alkyl, halogenalkyl, aryl, heteroaryl, halogen, alkoxyalkyl, aminoalkyl, hydroxy, nitro, alkoxy, hydroxyalkyl, thioalkyl, amino, alkylamino, arylamino, alkylsulfonamid, acyl, acylamino, alkylsulfon, sulfonamid, alkylsulfoxid, allyl, alkenyl, methylendioxy, ethylendioxy, alkynyl, karboxamid, kyano, a (-CfLjaCOR, kde a je 0-2 a R je hydroxy, alkoxy, alkyl nebo amino skupina;
A1 je 5 až 9 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný bicyklický heterocyklus obecného vzorce
HET ]
Rk/^y obsahující alespoň jeden atom dusíku a volitelně 1 až 3 další heteroatomy, vybrané ze skupiny sestávající z O, N, S, CO nebo SO2 volitelně nasycený nebo nenasycený; volitelně substituovaný jedním nebo více Rk vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, alkyl, cykloalkyl, alkoxy, alkoxyalkyl, thioalkyl, kyano, amino, alkylamino, halogen, acylamino, sulfonamid a -COR kde R je hydroxy, alkoxy, alkyl nebo amino skupina;
• · · • · · « · · • · · · · · nebo A1 je
Y1
N—R7
I
R
I 7 kde Y je vybráno ze skupiny zahrnující N-R , O a S;
R2 je vybráno ze skupiny zahrnující H; alkyl, cykloalkyl, aryl, hydroxy; alkoxy, kyano, alkenyl; alkynyl; amido; alkylkarbonyl; arylkarbonyl; alkoxykarbonyl; aryloxykarbonyl; halogenalkylkarbonyl; halogenalkoxykarbonyl; alkylthiokaronyl;arylthiokarbonyl; acyloxymethoxykarbonyl;
R2 spolu s R7 tvoří 4 až 12 členný heterocyklus obsahující dusík substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující nižší alkyl, thioalkyl, alkylamino, hydroxy, beto, alkoxy, halogen, fenol, amino, karbonyl nebo karboxylester a spojený fenyl;
R2 spolu s R7 tvoří 4 až 12 členný heterocyklus obsahující jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny zahrnující O, N a S volitelně nenasycený;
R2 spolu s R7 tvoří 5 členný heterocyklus spojený s arylem nebo heteroarylem;
R7 (pokud není spojen s R2 ) a R2 spolu s R8 jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující H; alkyl, alkenyl, alkynyl, aralkyl, amino, alkylamino, hydroxy; alkoxy, arylamino, amido; alkylkarbonyl; arylkarbonyl; alkoxykarbonyl; aryloxy, aryloxykarbonyl; halogenalkylkarbonyl; alkylthiokaronyl; arylthiokarbonyl; acyloxymethoxykarbonyl; cykloalkyl; bicykloalkyl; aryl; acyl; benzoyl;
NR7 a R8 spolu tvoří 4 až 12 členný monocyklus obsahující jeden atom dusíku nebo bicyklický kruh volitelně substituovný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující nižší akyl, karboxylové deriváty, aryl nebo hydroxy skupinu a kde uvedený cyklus volitelně obsahuje heteroatom vybraný ze skupiny zahrnující O, N S;
R5 je vybráno ze skupiny zahrnující H; hydroxy, alkoxy, cykloalkyl a alkyl;
nebo
kde Y2 je vybráno ze skupiny zahrnující alkyl; cykloalkyl; bicykloalkyl; aryl; monocyklické heterocykly;
Zi je vybráno ze skupiny zahrnující CH2, O, CH2, Brk, CO, S, SO, CH(OH) a SO2, kde Rk je vybráno ze skupiny zahrnující H nebo nižší alkyl;
Z2 je raménko obsahující 1 až 5 uhlíkových atomů volitelně obsahující O, S a N; volitelně Zt - Z2 může dále obsahovat karboxamid, sulfon, sulfonamid, alkenyl, alkynyl nebo acyl skupinu;
kde uhlíkové nebo dusíkové atomy Zi - Z2 jsou volitelně substituovány alkyl, cykloalkyl, alkoxy, thioalkyl, alkylsulfon, aryl, arylsulfon, alkoxyalkyl, hydroxy, alkylamino, heteroaryl, alkenyl, alkynyl, karboxyalkyl, halogen, halogenalkyl nebo acylamino skupinou;
n je celé číslo 1 nebo 2;
Rc je vybráno ze skupiny zahrnující hydrogen, alkyl, heteroalkyl, cykloalkyl, heterocykloalkyl, halogen, hydroxy, nitro, alkoxy, amino, halogenalkyl, aryl, heteroaryl, alkoxyalkyl, aminoalkyl, hydroxyalkyl, thioalkyl, alkylamino, arylamino, alkylsulfonalymino, acyl, acylamino, sulfonyl, sulfonamid, allyl, alkenyl, methylendioxy, ethylendioxy, alkynyl, alkynylalkyl, karboxy, alkoxykarbonyl, karboxymido, kyano, a -(CH2)„C0R, kde n je 0-2 a R je vybráno ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, alkyl a amino skupinu;
X je vybráno ze skupiny zahrnující -CHR6-, -NRf-, -0-, -S-, -SO2-, a -CO-, kde Reje H, nižší alkyl, alkoxy, cykloalkyl, alkoxyalkyl, hydroxy, alkynyl, alkenyl, halogenalkyl, thioalkyl nebo aryl; kde Re je hydroxy, hydroxy skupiny může volitelně tvořit lakton s karboxylovou funkční skupinou řetězce; kde Rf je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, heteroalkyl, aryl, heteroaryl, arylalkyl, aralkylheteroaryl a halogenalkyl;
Y je vybráno ze skupiny zahrnující -{CH2)P, -CR9-, -NR9 , CO a SO2, kde R9 je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, halogenalkyl, alkoxyalkyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, hydroxy, hydroxyalkyl, alkoxy, a karboxyalkyl; kde p je 0 nebo 1;
skupina X-Y může volitelně obsahovat skupinu vybranou skupiny zahrnující acyl, alkyl, sulfonyl, amino, ether, thioether, karboxamido, sulfonamido, aminosulfonyl a olefiny;
Y3 a Y4 jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující alkyl, halogenalkyl, hydroxy, alkoxy, kyano, halogen, aralkyl, heteroaralkyl, alkoxyalkyl, hydroxyalkyl, aryloxyalkyl, alkylsulfon, alken nebo alkyn; kde alkyl skupina volitelně obsahuje jeden nebo více heteroatomů vybraných ze skupiny zahrnující N, O a S;
případně, pokud je Y3 aryl nebo heteroaryl, Y4 může být aryl, heteroaryl, alken, alkyn, alkoxy, hydroxy, kyano, alkoxyalkyl nebo alkylsulfon;
Y5jeC;
• · volitelně, Y3, Y4 a Υ5 mohou tvořit sulfon (SO2) skupinu;
Y3 spolu s Y4 tvoří 3-8 členný monocyklus nebo 7-11 členný bicyklu, volitelně obsahující jednu nebo více dvojných vazeb, volitelně obsahující jeden nebo více heteroatomů nebo funkční skupinu zahrnující O, NR9, S, CO nebo SO2, volitelně substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující alkyl, heteroalkyl, hydroxy, halogen, halogenalkyl, alkoxy, alkyn, kyano, alkylsulfon, sulfonamid, aryl, heteroaryl, aralkylaryl, heteroaralkylarylkarboalkoxy a karboxyalkyl;
Rb je X2 - Rh, kde X2 je vybráno ze skupiny zhrnující O, S a NRj, kde Rh RJ jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující H, alkyl, aryl, aralkyl, heteroalkyl, heteroaryl, heteroaralkylaryl, acyl a alkoxyalkyl;
Dalším předmětem jsou farmaceutické kompozice obsahující sloučeninu obecného vzorce I. Tyto sloučeniny a kompozice jsou využitelné při selektivní inhibici nebo antagonizaci integrinů αγβ3 / ανβί a proto v jiném provedení podle vynálezu se týká selektivní inhibice nebo antagonizace integrinů ανβ3 / ανβϊ · Vynález dále zahrnuje léčbu nebo inhibici souvisejících patologických stavů, jako například osteoporózy, humorální hyperkalcemie malignance, Pagetovu chorobu, metastázy tumoru, růst tumoru (neoplazii), angiogenezi včetně angiogeneze tumoru, retinopatii včetně makulámí degenerace a diabetické retinopatie, arthritidu včetně revmatoidní arthritidy, periodontální onemocnění, psoriázu, migraci hladkých svalových buněk a restenózu u savců vyžadujících tuto léčbu. Farmaceutické látky jsou dále využitelné jako antivirotika a antimikrobiotika. Sloučeniny podle vynálezu je možné použít samostatně nebo v kombinaci s jinými farmaceutickými látkami.
Vynález se týká třídy sloučenin charakteristických vzorcem I popsaným výše,
kde je 4 až 8 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný bicyklus volitelně nasycený nebo nenasycený, volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující nižší alkyl, alkynyl, alkenyl, halogen, alkoxy, hydroxy, kyano, amino, alkylmino, dialkylamino nebo methylsulfonamid.
A1 je 5 až 9 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný bicyklický heterocyklus vzorce
HET
• · • · · · ’ · · ► · · · « • · ·
B4 který zahrnuje následující heterocyklus obsahující alespoň jeden atom dusíku:
kde Za je H, alkyl, alkoxy, hydroxy, amin, alky lamin, dialkylamin, karboxyl, alkoxykarbonyl, hydroxyalkyl, halogen nebo halogenalkyl a Rl je H, alkyl, alkoxyalkyl, acyl, halogenalkyl nebo alkoxykarbonyl. Přesněji, některé příklady zahrnují pyridylamino, imidazolylamino, morfolinopyridin, tetrahydronaftyridin, oxazolylamino, thiazolylamino, pyrimidiny lamino, chinolin, tetrahydrochinolin, imidazopyridin, benzimidazol, pyridon nebo chinolon.
V
Φ- co-'· ςψ ,hjva co H Η η H H
B = NH.NMe.O.S B = NH,O.S B = N,CH B=NH,O,S ao CO- ”ýcr'
H ít_ N—
B = NH, O,S
B = NH, O, S B = N, CH R = H, Me
Wx ča' cg
R1
X = O,S,NR.SO2lCF2 X=CH2.O,S,NR, SOg, nř
SQj, CONR R· = OR, OH, Me ο ····♦·····» β ν .:.. · · · · ......
Následující heteroaryly zahrnují kruhový systém popsaný výše.
Pro heterocyklus odvozený od pyridylu jsou substituenty X4 a X5 vybrány ze skupiny zahrnující H, alkyl, rozvětvený alkyl, alky lamino, alkoxyalky lamino, halogenalkyl, thioalkyl, halogen, amino, alkoxy, aryloxy, alkoxyalkyl, hydroxy, kyano nebo acylamino skupinu.
V jiném provedení podle vynálezu mohou být substituenty X4 a X5 methyl, methoxy, amin, methylamin, trifluormethyl, dimethylamin, hydroxy, chlor, brom, fluor a kyano skupina. Xó může být výhodně H, alkyl, hydroxy, halogen, alkoxy a halogenalkyl. Pyridylový kruh může být případně spojen s 4 až 8 členným kruhem, volitelně nasyceným nebo nenasyceným. Některé příklady těchto kruhových systémů zahrnují tetrahydronaftyridin, chinolin, tetrahydrochinolin, azachinolin, morfolinopyridin, imidazopyridin a podobně. Monocyklické kruhové systémy, jako například imidazol, thiazol, oxazol, pyrazol a podobně, mohou obsahovat amino nebo alkyl substituent v kterékoli pozici na kruhu.
V jiném provedení podle vynálezu, kde Zi obecného vzorce I je CO nebo SO2, raménko A1 - Z2 obecného vzorce I zahrnuje odvozený heterocyklus, jako například pyridin, imidazol, thiazol, oxazol, benzimidazol, imidazopyridin a podobně.
Jiné heterocykly A1 - Z2 podle vynálezu zahrnují
σΡ- OZ rN *? (ΧΛ B
B = NH, 0. S R = H,Me B = NH, 0, S R = H,Me B = NH, 0, S R = H,Me B = NH,O,S R = H, Me
nÁ CnR X4 ^jř-B rN ? B H
B = NH, 0, S R = H, Me B = N,CH R = H,Me B = N,CH R = H,Me B = NH, O, S R = H,Me
B = N, CH R = H,Me kde X4 je definován výše
Y3 a Υ4 jsou definovány výše; nebo
Y3 spolu s Y4 tvoří 3 až 8 členný monocyklus nebo 7 až 11 členný bicyklus, volitelně obsahující jednu nebo více dvojných vazeb, volitelně obsahující jeden nebo více heteroatomů nebo funkční skupiny vybrány ze skupiny zahrnující O, NR9, S, CO nebo SO2 , volitelně substituovaných jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny zahrnující alkyl, halogenalkyl, halogen, halogenalkyl, alkoxy, alkyn, kyano, alkylsulfon, sulfonamid, karboalkoxy a karboxyalkyl; kde R9 je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, halogenalkyl, alkoxyalkyl, aryl, heteroaryl, aralkyl a karboxyalkyl.
Vynález se dále týká farmaceutických kompozicí obsahujících účinné množství sloučenin obecného vzorce I.
Vynález se též týká selektivní inhibice nebo antagonizace ctvp3 integrinu a/nebo ανβ5 integrinu a přesněji se týká inhibice kostní resorpce, periodontálního onemocnění, osteoporózy, humorální hyperkalcemie malignance, Pagetovy choroby, metastázy tumorů, růstu pevných tumorů (neoplazie), angiogeneze včetně angiogeneze tumoru, retinopatie včetně makulámí degenerace a diabetické retinopatie, arthritidy, včetně revmatoidní arthritidy, migrace hladkých svalových buněk a restenózy aplikací terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I k dosažení této inhibice spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
Následuje seznam definicí různých pojmů zde používaných:
Pojem „alkyl“ nebo „nižší alkyl“, jak se zde užívá, se týká nerozvětveného nebo rozvětveného řetězce uhlovodíkových radikálů o 1 až 10 uhlíkových atomech, výhodně 1 až 6 uhlíkových atomech. Příkladem těchto alkylových radikálů je methyl, ethyl, a-propyl, izopropyl, a-butyl, izobutyl, sekundární butyl, t-butyl, pentyl, neopentyl, hexyl, izohexyl a podobně.
Pojem „alkenyl“ nebo „nižší alkenyl“, jak se zde užívá, se týká nenasycených acyklických uhlovodíkových radikálů obsahujících alespoň jednu dvojnou vazbu a 2 až 6 uhlíkových atomů, kde dvojná vazba mezi uhlíky může mít cis nebo trans geometrii s alkenylovou skupinou vzhledem ke skupině substituované na dvojné vazbě mezi uhlíky. Příkladem těchto skupin je ethenyl, propenyl, butenyl, izobutenyl, pentenyl, hexenyl a podobně.
Pojem „alkynyl“ nebo „nižší alkynyl“, jak se zde užívá, se týká acyklických uhlovodíkových radikálů obsahujících jednu nebo více trojných vazeb a 2 až 6 uhlíkových atomů. Příkladem těchto skupin je ethenyl, propenyl, butenyl, pentenyl, hexenyl a podobně.
• · • · · ·
Pojem „cykloalkyl“, jak se zde užívá, představuje nasycený nebo částečně nenasycený kruhový uhlíkový radikál obsahující 3 až 8 uhlíkových atomů a výhodně 4 až 6 uhlíkových atomů. Příklady těchto cykloalkylových radikálů zahrnují cyklopropyl, cyklopropenyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, 2-cyklohexen-l-yl a podobně.
Pojem „aryl“, jak se zde užívá, představuje aromatický kruhový systém složen z jednoho nebo více aromatických kruhů. Výhodné arylové skupiny jsou takové, které obsahují jednu, dvě nebo tři aromatické kruhy. Pojem zahrnuje aromatické radikály jako například fenyl, pyridyl, naftyl, thiofen, furan, bifenyl a podobně.
Pojem „kyano“, jak se zde užívá, představuje skupinu vzorce 1
Pojem „hydroxy“ a „hydroxyl“, jak se zde užívá, jsou synonyma a představuje skupinu vzorce 2
OH.
Pojem „nižší alkylen“ nebo „alkylen“, jak se zde užívá, se týká divalentní lineární nebo rozvětvené nasycené uhlovodíkové skupiny obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů.
Pojem „alkoxy“, jak se zde užívá, představuje nerozvětvený nebo rozvětvený řetězec obsahující obě skupiny vzorce OR20, kde R20 je alkyl skupiny definována výše. Příklady alkoxy skupin zahrnují methoxy, ethoxy, n-propoxy, n-butoxy, izopropoxy, izobutoxy, sekundární butoxy, t-butoxy a podobně.
Pojem „arylalkyl“ nebo „aralkyl“ se týká skupiny vzorce 3
kde R21 je aryl definovaný výše a R22 je alkylen definovaný výše. Příklady arylalkylových skupin zahrnují benzyl, pyridylmethyl, naftylpropyl, fenethyl a podobně.
Pojem „nitro“, jak se zde užívá, představuje skupinu vzorce 4
Pojem „halo“ nebo „halogen“ se týká brom, chlor, fluor nebo jod skupiny.
• · • · · ·
Pojem „halogenalkyl“ se týká alkyl skupiny definované výše substituované jednou nebo více shodných nebo různých halogenskupin na jednom nebo více uhlíkových atomech. Příklady halogenalkylových skupin zahrnují trifluormethyl, dichlorethyl, fluorpropyl a podobně.
Pojem .Jcarboxyl“ nebo „karboxy“ se týká skupiny vzorce -COOH.
Pojem „karboxylester“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce -COOR23, kde R23 je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, heteroalkyl, heteroaralkylaiky 1, aralkyl nebo aryl, jak je definováno výše.
Pojem „karboxylový derivát“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 5 Y6 —ο-υΉ3 kde Y6 a Y7 jsou nezávisle vybrány ze skupiny zahrnující O, A nebo S a R23 je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, aralkyl, heteroalkyl, heteroaryl, heteroaralkylalkyl nebo aryl, jak je definováno výše.
Pojem „amino“, jak se zde užívá, představuje skupinu vzorce -NH2.
Pojem „alkylsulfonyl“ nebo „alkylsulfon“ se týká skupiny
U-ní A o , vzorce 6, kde R24 je alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl nebo heterocykloalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „alkylthio“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce -SR24 , kde R24 je alkyl nebo heteroalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „sulfonová kyselina“, jak se zde užívá, představuje skupinu vzorce 7 ý—S-OR25 kde R25 je alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl, heterocykloalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „sulfonamid“ nebo „sulfonamido“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 8 l·
II zr S—N II • · · ·♦ ·· ► · · ' • · « • ·· · kde R7aR8jsou definovány výše.
Pojem „spojený aryl“ , jak se zde užívá, se týká aromatického kruhu jako arylových skupin definovaných výše spojených s jedním nebo více fenylovými kruhy. Pojem „spojený aryl“ zahrnuje skupinu naftyl a podobně.
Pojem „monocyklický heterocyklus“, jak se zde užívá, nebo „monocyklický heterocyklický“ se týká monocyklického kruhu obsahujícího 4 až 12 atomů, výhodně 5 až 10 atomů, kde 1 až 3 atomy jsou heteroatomy vybrané ze skupiny zahrnující kyslík, dusík a síru stím, že pokud jsou přítomny dva nebo více různých heteroatomů, alespoň jeden z heteroatomů musí být dusík. Charakteristickým příkladem těchto monocyklických heterocyklů je imidazol, furan, pyridin, oxazol, tyran, thiazol, thiofen, pyrazol, thiazol, thiadiazol a podobně.
Pojem „spojený monocyklický heterocyklus“, jak se zde užívá, se týká monocyklického heterocyklů definovaného výše s připojeným benzenem. Příklady těchto spojených monocyklických heterocyklů zahrnují benzofiiran, benzopyran, benzodioxol, benzothiazol, benzothiofen, benzimidazol a podobně.
Pojem „methvlendioxy“, jak s zde užívá, se týká skupiny a pojem „ethylendioxy“ se týká skupiny ž
Vzorce 9 a 10. Pojem „4-12 členný heterocyklus obsahující dva dusíky“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 11 N \ ',ΛΤ kde m je 1-4 a R19 je H, alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, alkyl nebo aralkyl a výhodně se týká 4-9 členného kruhu a zahrnuje kruhy, jako například imidazolin.
Pojem „5- členný volitelně substituovaný heteroaromatický kruh“ zahrnuje například
|\J nebo N
I!
• · •· ·· ·· ···· • ♦ · · · · · * ····· · · · 14 * · · ···· ···»
Λ Λ Λ » λ. λ · skupiny výše uvedených vzorců a „5 členný heteroaromatický kruh spojený s fenylem“ se týká tohoto „5 členného heteroaromatického kruhu“ s připojeným fenylem.Charakteristickým příkladem tohoto 5 členného heteroromatického kruhu spojeného s fenylem je benzimidazol.
Pojem „bicykloalkyl“ se týká bicyklického uhlovodíkové skupiny obsahující 6 až 12 uhlíkových atomů, který je nasycený nebo částečně nenasycený.
Pojem „acyl“ se týká radikálu vzorce radikálu vzorce 12 kde R26 je alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroalkyl, heterocykloalkyl nebo aralkyl a volitelně substituovaný jak je definováno výše. Tyto skupiny zahrnují skupinu acetyl, benzoyl a podobně.
Pojem „thio“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce <_ < SH 13>
Pojem „sulfonyl“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 14,
-Ukde R27 je alkyl, aryl, heteroalkyl, heteroaryl, heteroaralkylalkyl nebo aralkyl, jak je definováno výše.
Pojem „halogenalkylhio“ , jak s zde užívá, se týká skupiny vzorce -S-R28 , kde R28 je halogenalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „aryloxy“ se týká skupiny vzorce 15 £ —OR29 kde R29 je aryl nebo heteroaryl, jak je definováno výše.
Pojem „acylamino“ se týká radikálu vzorce R -C-NH— kde R30 je alkyl, heteroalkyl, heteroaryl, heteroaralkylalkyl, aralkyl nebo aryl jak je definováno výše.
Pojem „amido“ se týká skupiny vzorce 16 q
II —NHft • · • ·
Pojem „alkylamino“, jak se ze užívá, se týká skupiny vzorce -NHR32, kde R32 je alkyl nebo heteroalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „dialkylamino“, se týká skupiny vzorce -NR33R34, kde R33 a R34 jsou shodné nebo odlišné alkyl nebo cykloalkyl skupiny, jak je definováno výše.
Pojem „trifluormethyl“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 17 z
CF,
Pojem „trifluoralkoxy“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 18 kde R35je vazba nebo alkylem jak je definováno výše.
Pojem „alkylaminosulfonyl“ nebo „aminosulfonyl“ se týká skupiny vzorce 19 O <
FSC•R35——O— »36.
kde R36je alkyl, heteroalkyl, heteroaralkylalkyl nebo heteroaryl jak je definováno výše.
Pojem „alkylsulfonylamino“ nebo „alkylsulfonamid“ se týká skupiny vzorce 20
O 11 $ r36__ g_ nh__ ?
II S
O <
, kde R36je alkyl, heteroalkyl, heterocykloalkyl nebo cykloalkyl jak je definováno výše.
Pojem „trifluormethylthio“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 21 F3C—S —|
Pojem „trifluormethylsulfonyl“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 22 ^C-S—
O
Pojem „4 až 12 členný monocyklus obsahující jeden atom dusíku nebo bicyklus“ se týká nasyceného nebo částečně nenasyceného motocyklu nebo bicyklu o 4 až 12 atomech, výhodně mono nebo bicyklu o 4 až 9 atomech, kde jedním atomem je dusík. Tyto kruhy mohou volitelně obsahovat další heteroatom vybrány ze skupiny zahrnující dusík, kyslík nebo síru. Tato skupiny zahrnuje morfolin, piperidin, piperazin, thiomorfolin, pyrrolidin, prolin, azacyklohepten a podobně.
• · • · • ·
• * * · · · ···· · · · · ··
Pojem „benzyl“, jak se ze užívá, se týká skupiny 23
Pojem „fenethyl“, jak se zde užívá, se týká skupiny 24
Pojem „4 až 12 členný heterocyklus obsahující jeden atom dusíku, kyslíku a síry“ se týká cyklu obsahujícího 4 až 12 atomů a výhodně 4 až 9 atomů, kde alespoň jeden atom je dusík a alespoň jeden atom je kyslík nebo síra. Definice zahrnuje kruhy jako například thiazolin a podobně.
Pojem „arylsulfonyl“ nebo „arylsulfon“ se týká skupiny vzorce 25 , kde R37je aryl, jak je definováno výše.
Pojem „alkylsulfoxid“ nebo „arysulfoxid“ se týká skupiny vzorce 26 kde R38je alkyl, heteroalkyl, heteroaryl nebo aryl, jak je definováno výše.
Pojem „arylthio“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce 27
SR kde R42je aryl, jak je definováno výše.
Pojem „monocyklický heterocyklus thio“ se týká skupiny vzorce 28
SR kde R43je radikál monocyklického heterocyklu, jak je definováno výše.
Pojmy „sulfoxid monocyklického heterocyklu“ a „sulfon monocyklického heterocyklu“ se týká skupin vzorce 29 a 30 o $ í?
-Š-R43 a C-S-R43 * O kde R43 je skupina monocyklického heterocyklu, jak je definováno výše.
O
R50—C— • ·
I7 ··· · Z · ·
Pojem „alkylkarbonyl“ se týká skupiny vzorce 31 kde R50 je alkyl, heteroaryl, heterocykloaryl nebo cykloalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „arylkarbonyl“ se týká radikálu vzorce 32 ,kde R51 je aryl jak je definováno výše.
O
R51—C—
Pojem „alkoxykarbonyl“ se týká radikálu vzorce 33 kde R52 je alkoxy skupina definovaná výše.
Pojem „aryloxykarbonyl“ se týká radikálu vzorce 34
O 11
R52— cO 11
R51—O—C— kde R51 je aryl skupina definovaná výše.
Pojem „halogenalkoxykarbonyl“ se týká radikálu vzorce 35 kde R je halogenalkyl jak je definováno výše.
Pojem „halogenalkoxykarbonyl“ se týká radikálu vzorce 36
R53-Ckde R53je halogenalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „alkylthiokarbonyl“ se týká radikálu vzorec 37 kde R50je alkyl nebo cykloalkyl, jak je definováno výše. Pojem „arylthiokarbonyl“ se týká radikálu vzorce 38
O
II
R50—S-C—
O
H
R5 — S—Ckde R5lje aryl jak je definováno výše.
Pojem „acyloxymethoxykarbonyl“ se týká radikálu vzorce 39 o r-34 π —O—CH2—O—C kde R54je acyl, jak je definováno výše.
Pojem“arylamino“, jak se ze užívá, se týká radikálu vzorce R51 -NH-, kde R51 je aryl, jak je definováno výše.
Pojem „acyloxy“, jak se zde užívá, se týká radikálu vzorce R55 -0-, kde R55 je acyl, jak je definováno výše.
Pojem „alkenylalkyl“ se týká radikálu vzorce R50-R57-, kde R50 je alkenyl, jak je definováno výše a R57je alkylen, jak je definováno výše.
• · • · · ·
Pojem „alkenylen“ se týká lineárního radikálu uhlovodíku o 1 až 8 uhlíkových atomech obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu.
Pojem „alkoxyalkyl“ se týká skupiny vzorce R56- R57- kde R56 je alkoxy skupina jak je definováno výše a R57je alkylen, jak je definováno výše.
Pojem „alkynylalkyl“ se týká skupiny vzorce R59-R60 , kde R59 je alkynyl, jak je definováno výše a R60je alkylen jak je definováno výše.
Pojem „alkynylen“ se týká divalentního alkynylové skupiny o 1 až 6 uhlíkových atomech.
Pojem „allyl“ , jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce -CH2 CH= CH2.
Pojem „aminoalkyl“, jak se zde užívá, se týká skupiny vzorce H2N- R61, kde R61 je alkylen jak je definováno výše.
Pojem „benzoyl“, jak se zde užívá, se týká akrylové skupiny C6H5-CO-.
Pojem „karboxymid“ nebo „karboxamido“ se týká skupiny vzorce CO-NH2.
Pojem „karboxyalkyl“ se týká radikálu HOOC-R62, kde R62 je alkylen, jak je definováno výše.
Pojem „karboxylová kyselina“ se týká skupiny -COOH.
Pojem „ether“ se týká skupiny vzorce R63-O-, kde R63 je vybráno ze skupiny zahrnující alkyl, aryl a heteroaryl.
Pojem „halogenalkylsulfonyl“ se týká skupiny vzorce M II
R S—
II o
kde R64 je halogenalkyl jak je definováno výše.
Pojem „heteroaryl“, jak se zde užívá, se týká arylového radikálu obsahujícího alespoň jeden heteroatom.
Pojem „hydroxyalkyl“ se týká radikálu vzorce HO-R65, kde R65 je alkylen, jak je definováno výše.
Pojem „keto“, jak se zde užívá, se týká karbonylové skupiny připojené k 2 uhlíkovým atomům.
Pojem „lakton“, jak se zde užívá, se týká anhydrocyklického esteru vzniklého intramolekulámí kondenzací hydroxykyseliny s eliminací vody.
Pojem „oleím“ se týká nenasyceného uhlovodíkového radikálu typu CJUn.
Pojem „sulfon“ , jak se zde užívá, se týká radikálu vzorce R66-SO2-, kde R^je alkyl nebo cykloalkyl, jak je definováno výše.
Pojem „thioalkyl“, jak se zde užívá, se týká radikálu vzorce R77-S-, kde R77je alkyl, jak je definováno výše.
• · • ·· ·
Pojem „thioether“ se týká radikálu vzorce R78 -S-, kde R78 je alkyl, aryl nebo heteroaryl.
Pojem „trifluoralkyl“ se týká alkylového radikálu, jak je definován výše, substituovaného třemi halogen radikály jak je definováno výše.
Pojem „kompozice“, jak se zde užívá, představuje produkt, který vznikne smícháním nebo kombinací více než jedné látky nebo přísady.
Pojem „farmaceuticky přijatelný nosič“, jak se zde užívá, představuje farmaceuticky přijatelnou látku, kompozici nebo nosič, jako například kapalné nebo pevné plnidlo, ředidlo, nosič, rozpouštědlo nebo enkapsulující látku, působící jako nosná látka nebo transportní a chemická látka.
Pojem „terapeuticky účinné množství“ představuje množství léčiva nebo farmaceutické látky, která vyvolá biologickou nebo klinickou odezvu v tkáni, systému nebo u zvířete, která je zřejmá vědcům nebo lékařům.
Následuje seznam zkratek a odpovídajících významů, jak se zde v záměně užívají:
*H-NMR= protonová nukleární magnetická rezonance
AcOH = kyselina octová
Ar = Argon
BOC = terciární butoxykarbonyl
BuLi = butyllithium
Cat. = katalytické množství
CH2CI2 = dichlormethan
CH3CN = acetonitril
CH31 = jodmethan
CHN = analýza = elementární analýza uhlík/vodík/dusík
CHNC1 analýza — elementární analýza uhlík/vodík/dusík/chlor
CHNS analýza = elementární analýza uhlík/vodík/dusík/síra
DEAD = diethylazodikarboxylát
DIAD = diizopropylazodikarboxylát
Dl voda = deionizovaná voda
DMA = Ν,Ν-dimethylacetamid
DMAC = Ν,Ν-dimethylacetamid
DMF = N,N-dimethylformamid
EDC = l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid hydrochlorid
Et = ethyl • · » · tl * · · • 9 · » · ·
Etl = ethyljodid
Et2 O = diethylether
Et3N = triethylamin
EtOAc = ethylacetát
EtOH = ethanol
FAB MS = hmotnostní spektroskopie s rychlým bombardováním atomu g = gram (gramy)
HC1 = kyselina chlorovodíková
HOBT = 1-hydro xybenzotriazol hydrát hplc = vysokotlaká kapalinová chromatografie
HPLC = vysokotlaká kapalinová chromatografie
IP A = izopropylalkohol i-Pr - izopropyl i-Prop = izopropyl
K2CO3 = uhličitan draselný
KF = fluorid draselný kg = kilogram
KH = hydrid draselný
KMnO4 =manganistan draselný
KOH = hydroxid draselný
KSCN - thiokyanát draselný
L = litr
LD A = diizopropylamid lithný
LiOH = hydroxid lithný
LTMP - tetramethylpiperidid hthný
Me - methyl
MeOH = methanol mg = miligram
MgSO4 = síran hořečnatý ml = mililitr ml = mililitr
MS = hmotnostní spektroskopie
NaH = hybrid sodný
NaHCCh = hydrogenuhličitan sodný • · *·#·
NaOH = hydroxid sodný
NaOMe = methoxid sodný
NH/HCOz’ = mravenčan amonný
NH4 OH = hydroxid amonný
NMR = nukleární magnetická rezonance
Pd = paladium
Pd/C = paladium na uhlíku
Ph = fenyl
Psi = tlak na čtverečný palec
Pt = platina
Pt/C = platina na uhlíku
RP HPLC - chromatografie za vysokého tlaku s reverzní fází
RT = laboratorní teplota t-BOC = terciární butoxykarbonyl
TEA = triethylamin
TFA = trifluoroctová kyselina
THF = tetrahydrofuran
TLC - chromatografie na tenké vrstvě
TMS = trimethylsilyl
Δ = zahřívání reakční směsi
Sloučeniny uvedeny výše mohou existovat v různých izomerních formách a všechny izomerní formy jsou zahrnuty ve vynálezu. Tautomerní formy a farmaceuticky přijatelné soli těchto izomerů a tautomery jsou též zahrnuty ve vynálezu.
V těchto strukturách a vzorcích může být vazba nakreslena přes vazbu kruhu ke kterémukoli atomu kruhu.
Pojem „farmaceuticky přijatelná sůl“ se týká soli připravené reakcí sloučeniny obecného vzorce I s kyselinou, jejíž anion je obecně vhodný pro člověka. Příklady farmaceuticky přijatelných solí zahrnují hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, síran, fosforečnan, propionát, laktát, maleát, malát, sukcinát, soli kyseliny vinné a podobně. Dále, v případech, kde sloučeniny podle vynálezu nesou kyselou skupinu, vhodné farmaceuticky přijatelné soli zahrnují soli alkalických kovů, například soli draselné a sodné; nebo soli kovů alkalických zemin. Všechny farmaceuticky přijatelné soli je možné připravit běžnými •9 9 999 postupy. (Viz. Berge a kol., J.Pharm.Sci.. 66(1), 1-19 (1977) pro další příklady farmaceuticky přijatelných solí).
Vynález ve svém rozsahu zahrnuje pro léčiva sloučenin obecného vzorce I. Tyto proléčiva jsou běžnými deriváty sloučenin obecného vzorce I , které jsou přeměnitelné na aktivní sloučeniny v prostředí in-vivo. Tyto sloučeniny mohou být deriváty karboxylových kyselin (jako například ester, amid, orthoester, urea a podobně). Podobné deriváty aminu, hydroxy nebo jiných funkčních skupin je možné použít pro přípravu léčiva. Aplikace sloučeniny pro léčbu různých stavů bude tak zahrnovat sloučeniny specificky uvedené nebo sloučeniny, které nemohou být specificky uvedeny, ale bylo by možné je přeměnit na specificky uvedené sloučeniny vzorce 1 při aplikaci in-vivo. Pro přípravu proléčiv je možné použít metody popsané v literatuře (například Design of pro-drugs, H.Bundgaard, Elsevier, 1985; Annual reports in Medicinal Chemistry, svazek 10, R.V. Heinzelman, ed.: Academie Press, 306-326,1975).
Sloučeniny podle vynálezu mohou být chirální nebo achirální. Tyto sloučeniny mohou existovat ve formě racemických směsí, diastereomerů nebo čistých enantiomerů. U chirálních sloučenin podle vynálezu jsou zahrnuty jednotlivé enantiomery nebo všechny směsi diastereomerů.
U selektivní inhibice nebo antagonismu ανβ3 a/nebo ctvPs integrinů se mohou sloučeniny podle vynálezu aplikovat orálně, parenterálně nebo sprejovou inhalací nebo lokálně v jednotkových dávkových formulacích obsahující běžné farmaceuticky přijatelné nosiče, adjuvans, a pojivá. Pojem parenterální, jak se zde užívá, zahrnuje například subkutánní, intravenózní, inramuskulární, intrastemální, transmuskulární infuzní techniky nebo intraperitonálně.
Sloučeniny podle vynálezu se aplikují jakoukoli vhodnou cestou ve formě farmaceutické kompozice přizpůsobené pro tuto cestu a v dávce účinné pro použitou léčbu. Terapeuticky účinné dávky požadovaných sloučenin pro prevenci nebo potlačení procesu nebo k léčbě klinických stavů jsou dobře známé odborníkům v tomto oboru podle preklinických a klinických výsledků dosažených v klinické praxi.
Vynález tak uvádí sloučeniny podle vynálezu pro použití při léčbě stavů zprostředkovaných selektivní inhibicí nebo antagonizace ανβ3 a/nebo ανβ5 povrchového buněčného receptoru; což zahrnuje aplikaci terapeuticky účinného množství sloučeniny vybrané z třídy sloučenin ve výše uvedených vzorcích, kdy se jedna nebo více sloučenin aplikuje ve spojení s jednou nebo více netoxickými, farmaceuticky přijatelnými nosiči a/nebo ředidly a/nebo adjuvans (souborně zde označované jako „nosiče“) a případně jiné aktivní ·· » to · • · · « to · • · < *· ·· ♦· « · * • · to · · • to t to • * « « toto toto složky. Přesněji, vynález uvádí způsob inhibice ανβ3 a/nebo ανβ5 povrchových buněčných receptorů. Vynález uvádí především způsob inhibice kostní resorpce, léčbu osteoporózy, inhibici humorální hyperkalcemie malignance, léčbu Pagetovy choroby, inhibici metastázy tumoru, inhibici neoplazie (růst solidního tumoru), inhibici angiogenezy včetně angiogeneze tumoru, léčbu retinopatie včetně makulárm degenerace a diabetické retinopatie, inhibici arthritidy, psoriázy a periodontálního onemocnění a inhibici migrace hladkých svalových buněk včetně restenózy.
Na základě standardních laboratorních metod a postupů známých a užívaných odborníky v tomto oboru, stejně jako srovnání se sloučeninami běžně užívanými se sloučeniny obecného vzorce I mohou použít při léčbě pacientů trpících výše uvedenými patologickými stavy. Odborník v tomto oboru rozezná, že výběr nejvhodnější sloučeniny podle vynálezu závisí na zkušenosti, na mnoha různých faktorech včetně dávky a výsledků získaných standardním postupem a na zvířecích modelech.
Léčba pacientů postižených jedním z patologických stavů zahrnuje aplikaci terapeutiky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I, pacientovi při kontrole stavu nebo prodloužení životaschopnosti pacienta vzhledem ke stavu bez léčby. Sloučeniny obecného vzorce I, pojem „inhibice“, jak se zde užívá, stavu týkajícího se zpomalení, přerušení, pozastavení nebo zástavem stavu nezbytně neznamená úplné odstranění stavu. Předpokládá se, že významné prodloužení životaschopnosti pacienta též znamená, že stav je výhodně do určité míry pod kontrolou.
Jak se uvádí dříve, sloučeniny podle vynálezu je možné použít v různých biologických, profylaktických nebo terapeutických oblastech. Očekává se, že tyto sloučeniny jsou využitelné při prevenci nebo léčbě jakéhokoli onemocnění nebo chorobného stavu, kde hrají roli integriny αγβ3 a/nebo ανβδDávkování sloučenin a/nebo kompozicí je založeno na mnoha faktorech včetně typu, věku, hmotnosti, pohlaví a chorobném stavu pacienta; míře stavu; způsobu aplikace; a aktivitě dané použité sloučeniny. Dávkování se proto může velmi lišit. Při léčbě výše uvedených stavů je použitelné dávkování přibližně 0,01 mg až 100 mg na kilogram tělesné hmotnosti na den.
Orální dávkování podle vynálezu pro dosažení požadovaných účinků leží v rozmezí přibližně 0,01 mg na kg tělesné hmotnosti na den (mg/kg/den) až přibližně 100 mg/kg/den, výhodně 0,01 až 10 mg/kg/den a nejlépe 0,1 až 1,0 mg/kg/den. Pro orální aplikaci se kompozice výhodně připravují ve formě tablet obsahujících 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 200 a 500 miligramů účinné látky pro symptomatickou indikaci dávky léčenému pacientovi. Léčiva běžně obsahují od přibližně 0,01 mg až přibližně 500 mg >· ····
·· ·· ·· ·· • * · · ♦ ♦ · • · · · · ··· • · · · · * e ······ ···· ·· ·· ·· aktivní složky, výhodně od přibližně 1 mg až přibližně 100 mg aktivní složky. Nejvýhodnější dávka pro intravenózní použití se pohybuje v rozmezí od přibližně 0,1 mg až přibližně 10 mg/kg/minutu během konstantní infuze. Sloučeniny podle vynálezu je možné výhodně aplikovat v jednotkové denní dávce nebo se celková denní dávka může aplikovat rozdělená do dvou, tří nebo čtyř dávek. Výhodné sloučeniny podle vynálezu je možné aplikovat intranasálně lokálním použitím vhodných intranasálních pojiv nebo transdermálně použitím forem transdermálních kožních náplastí známých odborníkům v tomto oboru. K aplikaci transdermální cestou bude dávkování samozřejmě kontinuální než střídavé při dávkové aplikaci.
Při aplikaci savci vyžadujícímu tuto léčbu, se sloučeniny v terapeuticky účinném množství běžně smíchají s jedním nebo více adjuvans Vhodným pro danou cestu aplikace. Sloučeniny se mohou smíchat laktózou, sacharózou, škrobovým práškem, estery celulózy alkanových kyselin, alkylestery celulózy, mastkem, kyselinou stearovou, stearátem hořečnatým, oxidem hořečnatým, sodným a vápenatými solemi fosforečných a sírových kyselin, želatinou, akátem, alginátem sodným, póly viny lpyrrolidonem a/nebo polyvinylalkoholem a upraví se do tablet nebo kapslí pro běžnou aplikaci. Sloučeniny se mohou případně rozpustit ve vodě, polyethylenglykolu, propylenglykolu, ethanolu, kukuřičném oleji, bavlníkovém oleji, arašídovém oleji, sezamovém oleji, benzylalkoholu, chloridu sodné a/nebo různých pufrech. Ve farmaceutické oblasti jsou obecně dobře známá další adjuvans a metody aplikace.
Farmaceutické kompozice podle vynálezu je možné použít v běžných farmaceutických postupech, jako například sterilizaci a/nebo mohou obsahovat běžná farmaceutická adjuvans, jako například prezervative, stabilizátory, zvlhčovala, emulzifikátory, pufry a podobně.
V jiném provedení vynález uvádí léčbu nebo prevenci neoplazie u zvířat kombinací jednoho nebo více antagonistů integrinu ανβ3 podle vynálezu s jednou nebo více chemoterapeutickými látkami. Mezi chemoterapeutické látky, které je možné použít v kombinaci santagonními sloučeninami ανβ3 výhodně patří, ale neomezují se na 5-fluoruracil, cyklofosfamid, cispaltina, taxol a doxorubicin. Další chemoterapeuticky využitelné v kombinaci a v rozsahu podle vynálezu zahrnují, ale neomezují se na buserelin, inhibitory topoizomerázy jako například topotekan a irinotekan, mitoxantron, BCNU, CPT-11, chlorotranisen, fosforečnan chromitý, gemcitabin, dexametazon, estradiol, estradiolvalerát, estrogeny konjugované a esterifikované, estron, ethinylestradiol, floxuridin, goserelin, hydroxyureu, karboplatinu, melfan, metotrexát, mitomycin a prednison.
♦ · · · ··· ·· · • · · · ···· · · · • · · · ·· ·· K · ·· ··
Uvádí se sloučeniny podle vynálezu pro použití při léčbě nebo prevenci neoplazie a kombinace léčby nebo prevence neoplazie u savce za použití jednoho nebo více antagonistů integrinů ανβ3 popsaných výše s jednou nebo více chemoterapeutickými látkami popsanými výše. Puožití zahrnuje výrobu farmaceutické kompozice pro léčbu savce terapeuticky účinným množstvím antagonisty integrinů αγβ3 v kombinaci s chemoterapeutickou látkou.
Existuje pět hlavních tříd chemoterapeutických látek běžně používaných pro léčbu rakoviny: přírodní produkty a jejich deriváty, antracykliny, alkylující látky, antimetabolity a hormonální látky. U alkylujících látek se předpokládá působení alkylací a zesíťování guaninu a případně dalších bází.
Pozastavení buněčného dělení v DNA. Běžné alkylující látky zahrnují dusíkatý yperit, sloučeniny ethyleniminu, alkylsulfáty, cisplatinu a různé nitromočoviny. Nevýhodou těchto sloučenin je to, že nejen napadají rakovinnou buňku, ale též ostatní buňky, které se přirozeně dělí, jako například buňky kostní dřeně, kůže, gastro-intestinální mykózy a tkáně plodu.
Antikovy jsou běžně reverzibilní nebo irreverzibilní enzymové inhibitory nebo sloučeniny, které jinak interferují s replikací, translací nebo transkripcí nukleových kyselin.
Byly identifikovány některé syntetické nukleosidy, které vykazují protirakovinné účinky. Obecně známým nukleosidovým derivátem se silnou protirakovinnou aktivitou je 5fluoruracil. 5-Fluoruracil byl použit klinicky při léčbě maligních tumorů včetně například karcinomu, sarkomu, kožního nádoru, nádoru trávicích orgánů a rakoviny prsu. 5-Fluoruracil však způsobuje vážné nežádoucí reakce, jako například zvracení, vypadávám vlasů, stomatitidy, leukocytickou trombocytopenii, anorexii, pigmentaci a edém.
Cytosin arabinosid (též označovaný jako cytarabin, araC a cytosar) je nukleosidový analog deoxycytidinu, který byl poprvé syntetizován v roce 1950 a zaveden do klinické medicíny v roce 1963. V současné době je důležitým léčivem při léčbě akutní myeloidní leukemie. Je též aktivní proti akutní lymfocytické leukémii a v menším měřítku je využitelný při léčbě chronické myeloidní leukemie a non-Hodgkinova lymfomu.
Následující tabulka (tabulka 1) uvádí ilustrativní příklady středních dávek pro vybrané antikancerogenní látky, které je možné použít v kombinaci a αν β3 integrin antagonní látkou. Je třeba poznamenat, že specifické dávkování chemoterapeutických látek uvedených níže závisí na dávkování založeném na různých faktorech včetně typu neoplazie, stavu neoplazmu, věku, váze, pohlaví a klinickému stavu pacienta a použité kombinaci.
• · · · • · · ·
TABULKA 1
Chemoteraupetický činitel
Asparaginas 10,000 jednotek
Bleomycin Sulfát 15 jednotek
Carboplatin 50-450 mg
Carmustin 10Omg.
Cisplatin 10-50 mg. .
Cladribin 10mg.
Cyclophosphmid 100mg.-2gm.
(lyofilizovaný)
Cyclophosphamid 100mg.-2gm.
(ne lyofilizovaný)
Cytarabin (lyofilizovaný prášek) 100 mg.-2gm.
Dacarbazin 100 mg.-200 mg
Dactinomycin 0.5 mg.
Daunorubicin 20 mg.
Diethylstiibestrol 250 mg.
• · • · • ·
Doxorubin 10-150 mg.
Etidronat 300 mg.
Etoposid 100 mg.
Floxuridin 500 mg.
Fludarabin fosfát 50 mg.
Fluorouracil 500 mg.-5 gm.
Goserelin 3.6 mg.
Granisetron Hydrochlorid 1mg.
Idarubicin 5-10 mg.
Ifosfamid 1-3 gm.
Leucovorin kalcium 50-350 mg.
Leuprolid 3.75-7.5 mg.
Mechlorethamin 10 mg.
Medroxyprogeseron 1 gm.
Melphalan 50 gm.
Methotrexat 20 mg.-1 gm.
Mitomycin 5-40 mg.
Mitoxantron 20-30 mg.
Ondansetron hydrochlorid 40 mg.
Paclitaxel 30 mg.
Pamidronate disodium 30-90 mg.
Pegaspargas 750 jednotek
Pilcamyícan 2,500 mcgm.
Streptozocin 1 gm.
Thiotepa 15 mg.
Teniposid 50 mg.
Vinblastin 10 mg.
Vincristin 1-5 mg.
Farmaceutické kompozice podle vynálezu je možné použít v běžných farmaceutických postupech, jako například sterilizaci a/nebo mohou obsahovat běžná farmaceutická adjuvans, jako například konzervační prostředky, stabilizátory, zvlhčovadla, emulzifikátory, pufry a podobně.
Obecné postupy syntézy přípravy sloučenin využitelných podle vynálezu jsou uvedeny ve schématech 1-3. Vysvětlení a aktuální postupy, různé aspekty podle vynálezu jsou popsány na příslušných místech. Následující schémata a příklady jsou pouze ilustrativní a neomezují proto rozsah vynálezu. Odborníkům v tomto oboru bude snadno zřejmé, že je možné použít obměny podmínek a postupů popsaných ve schématech a příkladech při syntéze sloučenin podle vynálezu.
Není-li jinak uvedeno, všechny použité výchozí látky a zařízení jsou komerčně dostupné.
Schéma 1
• · • · · ·
Schéma 1
Sloučeniny vzorce Ap se obecně připraví reakcí meziproduktu vzorce Au se sloučeninou vzorce Ais. Například, pokud je Z3 OH, SH nebo skupina NHR, A)6 může být alkylováno Αρ (Z4 = Br nebo Oms) za použití báze, jako například hydridu sodného, hydridu draselného a výhodně v rozpouštědle, jako například v dimethylsulfoxidu nebo DMF. Tyto reakce se mohou výhodně provádět při 0 °C až o
přibližně do 40 C . Pokud je Z31 Z4 OH, tvorbu etheru za vzniku produktu Ap je možné provést Mitsunobu reakcí. Tato reakce se může výhodně provádět za použití triarylfosfmu (jako například trifenylfosfmu) a azodikarboxylátu (jako například diethylazodikarboxylátu, di-terc.butyl azodikarboxylátu, di-izo-propylazodikarboxylátu) v rozpouštědlech jako například DMF, dichlormethanu, THF a podobně. Pokud Z3 nese karboxylovou kyselinu nebo sulfonovou kyselinu a Z4 je amin, k syntéze karboxymido (CONH) je možné použít standardní slučovací podmínky nebo sulfonamidu (SO2NH) obsahujícího cílový produkt Ap.
Sloučeninu Apje možné případně připravit z výchozí sloučeniny vzorce AuNapříklad, pokud Z5 v Au je CH2, cyklickou nebo acyklickou guanidino obsahující sloučeninu vzorce Ap je možné syntetizovat metodou popsanou v například U.S. patentu 5852210 nebo U.S. patentu 5773646. Podobně, Sloučenina vzorce Au (Z5 = NH2) může reagovat s příslušným substituovaným heteroaromatickým systémem (jako například 2-fluorpyridinem nebo 2-chlorpyridin A-oxidem) za vzniku cílové sloučeniny Ap. Tuto reakci je možné výhodně provést refluxem meziproduktu Au a 2halogenpyridin N-oxidu (jako například 2-chlorpyridin N-oxidu) v rozpouštědle, jako například terc.butylalkoholu, terc.amylalkoholu v přítomnosti báze (jako například hydrogenuhličitanu sodného, uhličitanu sodného, uhličitanu draselného, hydrogenuhličitanu draselného).
Sloučeniny obecného vzorce Ap. Au, Au je možné připravit způsoby popsanými dále.
Schéma 2 > Ya
R = H nebo alkyl
Schéma 2
Sloučeniny vzorce A4 obsahující methylový substituent je možné připravit z výchozího substituovaného propiofenonu Aj. Vznik enolátu s bází (jako například HMDS, LDA, NaH, KH) při nízké teplotě (-78 °C až 0 °C) následným zakončením reakce elektrofilem, jako například ethylbromacetátem, vznikne meziprodukt A2. Bazická hydrolýza esteru (za použití například 1M NaOH) a následným opakováním přípravy enolátu použitím přebytku báze (jako například HMDS, LDA, NaH, KH) a následnou reakcí s elektrofilem (jako například alkyljodidem nebo benzyl halogenidem) vznikne meziprodukt A3. Esterifikací výsledné kyseliny s alkoholem za přítomnosti kapek kyseliny vznikne požadovaný meziprodukt esteru A3. Deoxygenací karbonylové skupiny vznikne meziprodukt A4. Tuto přeměnu je možné provést za katalytických hydrogenačních podmínek v přítomnosti kyseliny (jako například kyseliny fosforečné). K dosažení této redukce je možné použít paladia na uhlíku a vodík při tlaku 34 až 413 kPa. Syntetickou přeměnou vyobrazenou ve schématu 1 vzniká z meziproduktů A3 a A4 cílová sloučenina obecného vzorce I.
Schéma 3 ?
Aiea Yi = H Ai9b Yi = 6-Me 19c Yi =4-Me i9d Y, =4-NO2
A21*
A21b
A21C *21d
A2ie
Y<=H Y, = 6-Me Y,=4-Me Y =4-N0, Y1 = 4-NFf2
Schéma 3
Sloučeniny obecného vzorce I, kde A je substituovaný pyridyl, je možné připravit úpravou obecného schématu syntézy, schématu 3. Například, reakce substituovaného 2-halogenpyridin 7V-oxidu (jako například Ai9a- A]9d) s například 3aminopropanolem vzniknou meziprodukty A2oa - A2od. Tuto reakci je možné výhodně provést refluxem meziproduktu 2-halogenpyridin N-oxidu (jako například 2— chlorpyridin N-oxidu) v rozpouštědle, jako například terc.butylalkoholu, terc.amylalkoholu v přítomnosti báze (jako například hydrogenuhličitanu sodného, uhličitanu sodného, uhličitanu draselného, hydrogenuhličitanu draselného). Pro tuto přeměnu je možné použít podmínky přípravy popsané vWO 99/15508 (PCT US 98/19466). Spojením meziproduktů A2oa - A2od s Aió použitím Mitsunobu reakce vzniknou sloučeniny obsahující etherové spojení. Tuto reakci je výhodné provádět za použití triarylfosfinu (jako například trifenylfosfinu) a dialkylazodikarboxylátu (jako
·..··..· například diethylazodikarboxylátu, di-terc-butylazodikarboxylátu, di-izo-propylazodikarboxylátu) v rozpouštědlech jako například DMF, methylchloridu nebo THF. N— deoxygenací výsledných meziproduktů a následnou hydrolýzou esteru vzniknou cílové sloučeniny (A21N - A2id). Redukci N-oxidové vazby je možné provést za použití například hydrogenace na nosiči (cyklohexen/Pd na uhlíku) nebo formátu amonného a Pd na uhlíku nebo prášku železa a kyseliny octové. Nitro skupina v 21d může být hydrogenována za použití Pd na uhlíku nebo Pt na uhlíku jako katalyzátorů. Tuto přeměnu je možné provést za použití rozpouštědla, jako například methanolu, ethanolu nebo THF. Hydro lýzu esterové skupiny je možné provést použitím vodné báze (jak například hydroxidu sodného, hydroxidu lithného nebo hydroxidu draselného) v rozpouštědle, jako například methanolu, ethanolu a THF.
Příklady provedení vynálezu
Příklad A
2- [3 -hydroxy-1 -propyl)amino]pyr idin-ŽV-oxid
Směs 2-chlorpyridin-N-oxidu (16,6 g, 100 mmol), 3-amino-l-butanolu (15,3 ml, 200 mmol), NaHCCb (42 g, 0,5 mol) a terc.amylalkoholu (100 ml) se zahřívala krefluxu. Po 23 hodinách se reakce zchladila, zředila CH2CI2 (300 ml) a přefiltrováním se odstranila nerozpustná látka. Zakoncentrováním filtrátu se získal hnědý olej. Olej se sušil za vakua přes noc. Přidal se ether (100 ml) a získala se hnědá pevná látka. Ether se slil a pevná látka se dále promyla směsí ether/acetonitril (3/1). Výsledná pevná látka se zahřívala při 67 °C za vakua a získal se požadovaný produkt (13,5 g). 'H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
• ·
• · · · • · • · • ·
Příklad 1 l-[2-oxo-2-[-4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctová kyselina
Plamenem vysušená nádoba se v atmosféře dusíku nap blila roztokem 5,0 g 3,3— etramethylenanhydridu kyseliny glutarové v 25 ml THF. Roztok se zchladil na -65 °C a po kapkách se přidalo 59,4 ml roztoku 4-methoxyfenylmagnesiumbromidu (0,5 M v THF). Reakce se míchala 2 hodiny při 65 0 C a pak se zastavila 100 ml nasyceného roztoku chloridu amonného. Vrstvy se odseparovaly a vodná složka se extrahovala ethylacetátem. Smíchané organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad Na2SO4 , zakoncentrovaly a přečistily na silikagelové koloně za eluce směsí ethyacetát/hexan v poměru 1:1 za vzniku viskózního oleje (5,1 g). 'H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Roztok produktu z kroku 1 (5,0 g) se spolu s ethanolem (50 ml) a 4M HC1 v dioxanu (50 ml) míchal přes noc při teplotě místnosti. Reakce se zakoncentrovala a zbytek se přečistil na koloně silikagelu za eluce 25% roztokem ethylacetát/hexan a získala se kapalina (4,6 g). *H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
CO2Et
K roztoku produktu z kroku 2 (4,5 g) v dichlormethanu se přidal za teploty místnosti během 10 minut bromid boritý (1,0 M roztok VCH2CI2). Po 1 hodinovém stání se reakce zastavila ethanolem a zakoncentrovala. Zbytek se rozdělil mezi ethylacetát a roztok 10% NaHCO3. Vodná složka se extrahovala dalším rozpouštědlem a smíchané organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad Na2SO4, zakoncentrovaly a přečistily na silikagelové koloně za eluce 25% směsí ethyacetát/hexan za vzniku oleje (2,5 g). ’H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
K roztoku produktu z kroku 3 (450 mg) v DMF (20 ml) se v atmosféře dusíku přidal
2-[3-(hydroxy-l-propyl)amino] pyridin-N-oxid (470 mg) a trifenylfosfin (459 mg). Roztok se míchal za teploty místnosti několik minut a pak se po kapkách přidal roztok diethylazodiakarboxylátu (305 mg) v DMF (5 ml). Reakce se míchala 18 hodin a rozpouštědlo se odstranilo za vakua. Zbytek se přečistil na silikagelové koloně za eluce roztokem 98% CH2Cl2-l,5% CH3OH-0,5% NH4OH za vzniku oleje zlaté barvy (240 mg). *H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
Směs produktu z kroku 4 (225 mg), 10% Pd/C (přibližně 200 mg) a cyklohexanu (přibližně 1,5 ml) a izopropanolu (10 ml) se refluxovala 8 hodin v atmosféře dusíku. Reakce se zchladila, přefiltrovala přes celit a promyla přebytkem izopropanolu. Filtrát se zkoncentroval a zbytek se přečistil na silikagelové koloně za eluce roztokem 98% CH2CI2 1,5% CH3OH-0,5% NH4OH za vzniku viskózního oleje (120 mg). *H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
l-[2-oxo-2-[-4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctová kyselina
Roztok produktu z kroku 5(115 mg) v methanolu (5 ml) se míchal 18 hodin za teploty místnosti s 1M hydroxidem sodným (5 ml), Reakce se zastavila TFA (2 ml) a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil HPLC s reverzní fází za použití gradientu acetonitril/voda (0,5% TFA) a získala se bílá pevná látka (110 mg). ‘H NMR (DMSO-dé) δ
1,60 (m, 8H); 2,08 (p, 2H); 2,48 (s, 2H); 3,20 (s, 2H); 3,49 (br, q, 2H); 4,18 (t, 2H); 6,84 (t, 1H); 7,03 (d, 3H); 7,86 (t, 2H); 7,95 (d, 3H); 8,70 (br, s, 1H); 11,96 (br, s, 1H); 13,5 (v, br, s, 1H). Analytický výpočet C23H28N2O4. 1,0 TFA: C, 58,85; H, 5,73; A 5,49. Skutečné hodnoty: C, 58,41 ;H, 5,67; N, 5,55.
• 99 • ·
Příklad 2 l-2-[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctová kyselina
Krokl
CO2Et
Roztok produktu z kroku 2, příkladu 1 (2,8 g) v ethanolu obsahující několik kapek kyseliny fosforečné se třepal v Parrově hydrogenační aparatuře s 20% Pd(OH)2 na uhlíku za tlaku hydrogenace 413 kPa 16 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se přefiltrovala a zakoncentrovala a zbytek se přečistil na silikagelové koloně za eluce 15% směsí acetát/hexan a získala se bezbarvá kapalná látka (5,1 g). ’H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
CO2Et
Výše uvedená sloučenina se připravila z produktu popsaného v kroku 1 (1,5 g) podle stejného postupu popsaného v kroku 3, příkladu 1. Surový produkt se přečistil na koloně silikagelu za eluce 30% roztokem ethylacetát/hexan a získal se viskózm olej (965 mg). ’H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
·* » · • » 4
Výše uvedená sloučenina se připravila z produktu popsaného v kroku 2 (450 mg) podle stejného postupu popsaného v kroku 4, příkladu 1. Surový produkt se přečistil na koloně na silikagelové koloně za eluce 97% směsí CH2CI2 -2,5% CH3OH-0,5% CH4OH za vzniku viskózního oleje (314 mg). 'H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
Výše uvedená sloučenina se připravila z produktu popsaného v kroku 3 (305 mg) podle stejného postupu popsaného v kroku 5, příkladu 1. Surový produkt se přečistil na koloně na silikagelové koloně za eluce 98% směsí CH2CI2 -1,5% CH3OH-0,5% NH4OH za vzniku viskózního oleje (160 mg). ’H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
-2- [4-[3 -(2-pyridinylamino)propoxy] fenyl] ethyl] cyklopentano vá kyselina
Výše uvedená sloučenina se připravila z produktu popsaného v kroku 4 (150 mg) podle stejného postupu popsaného v kroku 6, příkladu 1. Surový produkt se přečistil podobným způsobem a získal se viskózní bezbarvý olej (87 mg). ’H NMR (DMSO-cU) δ 1,45 (m, 2H); 1,59 (m, 8H); 2,03 (p, 2H); 2,27 (s, 2H); 3,46 (q, 2H); 4,04 (t, 1H); 6,80 (t, 1H); 6,84 • · • c ···· · · · · · · • · · · ···· · · · .· : : · : :: : · : :. :
···· ·· · · O » ·· * · (d, 2H); 6,96 (d, 1H); 7,09 (d, 2H); 7,81 (t, 1H); 7,92 (d, 1H); 8,45 (br, s, 1H), 12,02 (br, s, 1H). Analytický výpočet C23H30N2O3. 1,0 TFA: C, 60,48; H, 6,29; N 5,64. Skutečné hodnoty: C, 61,21; H, 5,56; N, 5,84.
Příklad 3 l-[2-oxo-2-[4-[2-(2-pyridinylamino)ethoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctová kyselina
V plamenem vysušené nádobě se v atmosféře dusíku připravil roztok produktu z kroku 3, příkladu 1 (2,9 g), t-butyl-(N-(2-hydroxyethyl)karbamát) (1,93 g), trifenylfosfín (3,15 g) a THF (45 ml) za teploty místnosti. Po kapkách se přidal roztok diethylazodikarboxylátu (2,09 g) v THF (5 ml) a reakce se míchala 18 hodin za teploty místnosti. Rozpouštědlo se odstranilo za vakua a surový produkt se přečistil na silikagelové koloně za eluce směsí 25% ethyacetát/hexan za vzniku bezbarvého viskózního oleje (3,40 g). lH NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
HaN^°
CO2E1 • · • · • · • · · · ··· · · · · · •a a a · · · · · ·
Roztok produktu z kroku 1 (3,25 g) se spolu s trifluoroctovou kyselinou (15 ml) a dichlormethanem (15 ml) míchala 1 hodinu při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstranilo za vakua a výsledný hnědý olej se rozdělil mezi ethylacetát a 10% roztok uhličitanu sodného. Vodná složka se řádně vyextrahovala přidaným ethylacetátem a smíchaný organický extrakt se promyl vodou, solankou a vysušil nad Na2 SO4. Odstraněním rozpouštědla vznikl viskózní olej zlaté barvy (2,68 g), který se použil bez dalšího přečištění. ’H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
Směs produktu připraveného v kroku 2 (1,4 g), 2-fluorpyridinu (458 mg) a DMF (10 ml) se zahřívala 18 hodin při 110 °C v atmosféře dusíku. Rozpouštědlo se odstranilo za vakua a zbytek se přečistil na silikagelové koloně za eluce 96,5% směsí CH2CI2 -3,0% CH3OH a 0,5% NH4OH za vzniku oleje zlaté barvy (145 mg). 'H NMR spektra byla v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
l-[2-oxo-2-[4-[2-(2-pyridinylamino)ethoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctová kyselina
Výše uvedená sloučenina se připravila z produktu popsaného v kroku 3 (140 mg) podle stejného postupu popsaného v kroku 6, příkladu 1. Surový produkt se přečistil podobným způsobem a získal se viskózní bezbarvý olej (50 mg). *H NMR (CDCI3) δ 1,59 (m, 2H); 1,69 (m, 6H); 2,59 (s, 2H); 3,15 (s, 2H); 3,80 (br, q, 2H); 4,30 (t, 2H); 6,78 (t, 1H);
6,91 (d, 2H); 6,91 (d, 2H); 7,06 (d, 1H); 7,81 (br, d,lH); 7,88 (dd, 1H); 7,96 (d, 2H), 10,15 (br, s, 1H). Analytický výpočet C22H26N2O4. 1,75 TFA: C, 52,63; H, 4,81; N 4,81. Skutečné hodnoty: C, 52,33; H, 4,71; N, 4,70.
Přiklad 4
4-{4-[2-(6-aminopyridin-2-yl)ethoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanová kyselina
OH
Krok 1
Ethyl-(4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-methyl-4-oxobutanoát)
K míchanému roztoku diizopropylamidu litného (Aldrich, 100 ml, 2M roztok v THF) v THF (950 ml) se během minuty při -78 °C přidala suspenze 4-benzyloxypropiofenonu (Lancaster, 50 g), v THF (75 ml). Po 45 minutách se během minuty přidal ethylbromacetát (Aldrich, 23 ml). Za hodinu se směs zahřála během 3 hodin na 0 °C. Reakce se zastavila nasyceným NH4CI (500 ml). Organická fáze se oddělila a zakoncentovala za vakua. Zbytek se přečistil chromatografií na silikagelu za eluce směsí 10% ethyacetát v hexanu a získala se výše uvedená sloučenina ve formě bezbarvé kapaliny.
Krok 2
OH
O • · • ·
4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3-methyl-4-oxobutanová kyselina
Směs produktu kroku 1 (45 g), ethanolu (15 ml) a 15% vodného NaOH (70 ml) se míchala 30 minut při 23 °C. Těkavé látky se odstranily za vakua a zbytek se okyselil na pH =
3. Vysrážená pevná látka se přefiltrovala a vysušením se získal výše uvedený produkt ve formě bílé pevné látky (40 g).
Krok 3
Methyl-(4-[4-(benzyloxy)fenyl]-3,3-dimethyl-4-oxobutanoát)
Produkt kroku 2 (40 g) se přidal po částech během 5 minut k míchané suspenzi KH (Aldrich, 35 g olejové suspenze 35% objemových % v THF (750 ml) při 0 °C Směs se zchladila na -40 °C a během 2 minut se přidal DMSO (19 ml). Směs se během 10 minut zahřála na 0 °C. Pak se hustá reakční směs zchladila na -40 °C a přidal se jodmethan (Aldrich, 19 g). Po dokončení přídavku se reakční směs snadno míchala. Směs se během 30 minut zahřála na 0 °C. Reakce se zastavila přídavkem koncentrované kyseliny chlorovodíkové (50 ml). Směs se extrahovala etherem a vodou. Organická fáze se vysušila a zakoncentrovala. Etherový roztok zbytku reagoval při 0 °C s přebytkem diazomethanu. Výsledný roztok se zakoncentroval za vakua a zbytek se přečistil na silikagelové koloně za eluce 10% směsí ethylacetát v hexanu a získala se výše uvedená sloučenina ve formě bezbarvé husté tekutiny.
Krok 4
Hi
Methyl-(4-(4-(hydroxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát) • · • · · .· : : · :
•··· ·> ··
Roztok produktu kroku 3 v methanolu a kyselině fosforečné (katalytické množství) se třepal v Parrově hydrogenační aparatuře s 20% Pd(OH)2/C 9 hodin při hydrogenačním tlaku 413 kPa. Roztok se přefiltroval a filtrát se zakoncentroval za vakua. Výsledný roztok se zakoncentroval za vakua a zbytek se přečistil chromatografií na silikagelové koloně za eluce 10% směsí ethylacetát v hexanu a získala se výše uvedená sloučenina ve formě bezbarvé husté tekutiny.
Krok 5
Terc.butyl-(6-methylpyridin-2-yl-karbamát)
Roztok di-terc.butyldikarbonátu (32 g, Aldrich), 2-amino-6-pikolin (15 g, Aldrich) a etheru (20 ml) stál 4 dny při teplotě okolí. Těkavé látky se odstranily. Přečištěním zbytku chromatografií se získal výše uvedený produkt ve formě bílé pevné látky.
Krok 6
Terc.butyl-(6-(2-hydroxyethyl)pyridin-2-yl-karbamát) [6-(2-hydroxyethyl)-2-pyridinyl] karbámová kyselina, 1,1-dimethylethylester. K míchanému roztoku produktu 5 (11,9 g) vTHF (100 ml) se během 5 minut při -78 °C přidal lithium diizopropylamid (85 ml, 1,5 M roztok THF, Aldrich). Chladící lázeň se po 1,5 hodině odstranila. Reakční směs se zchladila opět na -78 °C a přidal se DMF (4,5 ml). Po 15 minutách se přidal methanol (50 ml) a následně kyselina octová (3,5 ml). Pak se přidal tetrahydridoboritan sodný (2 g, Aldrich) a reakční směs se zahřála na teplotu okolí. Reakce se opatrně zastavila nasyceným vodným roztokem chloridu amonného. Směs se extrahovala ethylacetátem. Vrstvy se oddělily. Organická fáze se promyla vodou a zakoncentrovala za vakua. Zbytek se přečistil chromatografií na silikagelové koloně za eluce 20% směsí ethylacetátu v hexanu pro odstranění výchozí látky. Následnou elucí kolony 60% ethylacetátem se získal výše uvedený produkt ve formě bílé pevné látky.
Krok 7
Methyl-4-[4-(2-{6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]pyridin-2-yl}ethoxy)fenyl]3,3-dimethylbutanoát
K míchanému roztoku produktu kroku 4 (0,45 g) se při -78 °C přidal během 3 minut při -78 °C produkt kroku 6 (0,723 g), trifenylfosfin (0,80 g, Aldrich) v THF (10 ml) a diizopropylazodikarboxylát (Aldrich, 0,63 ml). Směs se míchala 3 hodiny při -78 °C a 16 hodin při 22 °C. Směs se zakoncentrovala za vakua a zbytek se přečistil chromatografií na silikagelové koloně za eluce 20% směsí ethylacetátu v hexanu. Frakce obsahující požadovaný produkt se nashromáždily a zkoncentrováním se získal výše uvedený produkt ve formě husté gumovité látky.
Krok 8
4-[4-(2-{6-[(terc-butoxykarbonyl)amino]pyridin-2-yl}ethoxy)fenyl]-3,3-dimethylbutanová kyselina • · • · · · ···· · · · .* : : · : :: · : '· · *· ···· · · ·· ·· ·♦ ··
Směs produktu kroku 7 (0,5 g) v methanolu (2 ml) a roztoku NaOH (1 g) ve vodě (6 ml) se zahřívala k reflexu 30 minut. Směs se zchladila na 0 °C, okyselila na pH = 4 a extrahovala ethylacetátem. Extrakt se vysušil nad MgSO4 a zkoncentrovámm za vakua se získal výše uvedený produkt ve formě bílé pevné látky.
Krok 9
4-{ 4-[2-(6-aminopyridin-2-yl)ethoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Roztok produktu kroku 8 v 4N kyselině chlorovodíkové se míchal 16 hodin při 23 °C. Těkavé látky se odstranily za vakua a zbytek se promyl methanolem a etherem. Vysušením zbytku za vakua se získala sůl kyseliny chlorovodíkové výše uvedeného produktu ve formě hygroskopické bezbarvé pevné látky. *H (CD3OD) δ 7,86 (1H, dd); 7,08 (2H, d); 6,86 (2H, d);
4,31 (2H, t); 3,17 (2H, t); 2,53 (2H, s); 2,04 (2H, s); 0,91 (6H, s); Analytický výpočet Ci9H24N2O3. HC1. 0,5 H2O: C, 61,04; H, 7,01; N 7,49; Cl, 9,48 Skutečné hodnoty; C, 61,21; H, 7,18; N, 7,52; Cl, 9,44.
Příklad 5
3,3-dimethyl-4-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanová kyselina
OH
Krokl • · · · ·· · 9 ·· ···· • · · · ··· · · 9 • · · · ···· · · ·
Methyl 3,3-dimethyl-4-{ 4-[3-(l-oxidopyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanoát
Zopakoval se postup přípravy produktu kroku 7, příkladu 4 za použití 2-[3-hydroxy1—propyl)amino]pyridin-N-oxidu (Ref: WO 98/30542) namísto produktu kroku 6, příkladu 4 za vzniku výše uvedeného produktu ve formě bezbarvé gumovité látky.
Krok 2
Methyl-(3,3 -dimethy 1-4- { 4-[3 -(pyridin-2-ylamino)propoxy] fenyl} butanoát)
Směs produktu kroku 1 (0,95 g), cyklohexanu (Aldrich, 7 ml), 10% Pd/C (0,2 g) a izopropanolu (10 ml) se refluxovala 20 hodin. Směs se přefiltrovala přes celit a zakoncentrovala za vakua. Přečištěním zbytku chromatografií za použití ethylacetátu jako elučního činidla se získal výše uvedený produkt ve formě husté gumovité látky.
Krok 3
3,3-dimethy 1-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanová kyselina • · • ·
Směs produktu kroku 2 (0,25 g) v methanolu (2 ml) a roztoku NaOH (0,7 g) ve vodě (4,5 ml) se refluxovala 30 minut. Těkavé látky se odstranily a zbytek se míchal 5 minut s 1M kyselinou chlorovodíkovou (5 ml). Směs se zakoncentrovala za vakua. Zbytek se míchal 5 minut v acetonitrilu (5 ml). Vysrážená bezbarvá pevná látka se získala filtrací a vysušením za vakua se získala sůl kyseliny chlorovodíkové výše uvedeného produktu *H (DMSO) δ 7,87 (1H, dd); 7,80 (1H, d); 7,09 (3H, d); 6,86 (1H, t); 6,84 (2H, d); 4,12 (2H, t); 3,61 (2H, t); 2,60 (2H, s); 2,18 (H, p); 2,12 (2H, s); 0,98 (6H, s). Analytický výpočet C20H26N2O3. HC1. 0,25 H2O: C, 62,65; H, 7,23; N 7,31; Cl, 9,25; Skutečné hodnoty: C, 62,89; H, 7,13; N, 7,36; Cl, 9,31.
Příklad 6
- [ [4-[3 -(2-pyridinylaminopropoxy] fenyl] methyl] cyklopropanocto vá kyselina
Krokl
OK OH
Dimethyl-(l,l-cyklopropandikarboxylát) (18,4 g; 116,3 mmol) se rozpustil v bezvodém diethyletheru (100 ml) a připravená 2 1 tříhrdlová nádoba opatřená magnetickým míchadlem a dělící nálevkou se v inertní atmosféře naplnila 2 x 100 ml 0,5 M roztokem tetrahydridohlinitanu litného v glykoldimethyletheru a 1 x 100 ml 0,5 M roztokem tetrahydridohlinitanu litného V THF. Výsledný roztok se zředil bezvodým diethyletherem (200 ml). Po kapkách se pomocí přídavné nálevky při 0 °C přidal roztok diesteru. Po přídavku se reakce refluxovala přes noc. Následující den se reakce opatrně zastavila nasyceným roztokem síranu sodného až do vyprchnutí všech bublinek. Roztok se přefiltroval přes porézní filtrovací nálevku, vysušil (MgSCh), přefiltroval a zakoncentrováním se získal bezbarvý olej. Precipitát, obsahující přilnutý produkt, se extrahoval THF kontinuálně v Soxhletově extraktoru. THF se odstranil a produkt se smíchal s původní látkou a získal se požadovaný produkt (10 g; 84% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 2
Diol (4,38 g; 42,9 mmol) z předchozího kroku se rozpustil v pyridinu (42,9 ml). K tomuto roztoku se po kapkách přidal thionylchlorid (6,2 ml). Po přídavku se roztok míchal 1 hodinu při 25 °C a reakční směs se přefiltrovala přes porézní filtrační nálevku Precipitát se promyl čerstvým pyridinem a filtráty se zakoncentrovaly dosucha. Výsledný zbytek se zředil bezvodým etherem (450 ml), čímž vznikl pevný precipitát. Roztok se dekantoval a pavná látka se pak promyla 6M vodným roztokem HC1 a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Etherické extrakty se vysušily (MgSO4) a zakoncentrováním dosucha se získala bílá krystalická pevná látka (4g, 70% výtěžek). Strukturální data byla shodná s uváděnými v literatuře. *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 3
OH
Výchozí cyklický siřičitan (4, 9625 g; 37,5 mmol) získaný v kroku 2 se rozpustil v suchém DMF (37 ml). K tomuto roztoku se přidal kyanid sodný (2,01 g; 41,2 mmol) a jodid sodný (1,12 g; 7,5 mmol). Roztok se zahřál na 70 °C. Po čtyřech dnech se reakční směs zředila toluenem (59 ml) a pak se pomalu přidala voda (0,89 ml). Výsledný žlutý precipitát se přefiltroval a promyl čerstvým toluenem. Filtráty se nalily do dělící nálevky a zředily ethylacetátem (500 ml) a promyly vodou (1 x 500 ml; 3 x 100 ml). Smíchané vodné extrakty se extrahovaly ethylacetátem (3 x 100 ml). Organické extrakty se promyly solankou a vysušily (MgSO4), přefiltrováním a zakoncentrováním se získal olej, který se přečistil kolonovou chromatografn (SO2 ethylacetát/hexan) a získal se požadovaný produkt (1,7 g; 41% výtěžek). lH NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 4
Nádoba s inertní atmosférou se naplnila dichlormethanem (13 ml). K tomuto roztoku se přidal 2,0 M roztok oxalylchloridu v dichlormethanu (11,3 ml) a 2,0 M roztoku oxalylchloridu v dichlormethanu (11,3 ml). Roztok se zchladil na -60 °C a pak se po kapkách přidalo 3,4 ml roztoku dimethylsulfoxidu (3,84 g; 49,20 mmol) v dichlormethanu (8 ml). Po 10 minutách se přidal roztok kyanalkoholu (2,28 g; 20,5 mmol) z kroku 3 jako roztok v dichlormethanu (4 ml) a roztok se míchal při -60 °C. Po 15 minutách se přidal roztok triethylaminu (2,8 ml) a pak se reakce zahřála na 25 °C. Následovalo odfiltrování triethylaminchloridu a pak zkoncentrování filtrátu dosucha. Surový zbytek se pak smíchal s bezvodým etherem a roztok se pak opatrně odpipetoval od soli kyseliny chlorovodíkové. Roztok se zakoncentroval a surový zbytek se přečistil kolonovou chromatografií (35% ethylacetát/hexan) a získal se požadovaný aldehyd (1,68 g; 75% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 5
MeO.
Aldehyd z kroku 4 se rozpustil v bezvodém etheru (50 mi). K tomuto roztoku se po kapkách během 1 hodiny při -30 °C přidalo 30,8 ml 0,5 M roztoku 4-methoxyfenylmagnesiumbromidu v tetrahydrofuranu. Za 1 hodinu se reakční směs nalila do roztoku zchlazené kyseliny sírové (připravené nalitím 30 ml koncentrované kyseliny sírové do 250 g ledové tříště a pak se přidalo 250 ml vody). Vodný roztok se extrahoval etherem. Etherové • · extrakty se promyly nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. A následně solankou a organické extrakty se vysušily (MgSO4). Přefiltrováním a odpařením dosucha se získal žlutý olej (4,1 g), který obsahoval stopy THF a etheru. U oleje byl vypočten obsah 3,09 g požadovaného produktu (92%). Produkt se použil v následujícím kroku bez dalšího přečištění. 'H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 6
OH CO2H
Hydroxynitril (3,0 g; 13,8 mmol) připravený v kroku 5 se rozsuspendoval v 10 ml 1,68 M vodného roztoku hydroxidu draselného. Reakce se zahřívala přes noc na 80 °C. Teplota se zvýšila na 100 °C. Stopy organického rozpouštědla v produktu z předchozího kroku bránily reakci k dosažení požadované teploty, proto se odstranily za sníženého tlaku. Výsledný roztok se zahříval přes noc na 80 °C a podle tle byla následující den reakce zakončena. Reakce se pak zpracovala extrakcí etherem. Vodná vrstva se okyselila na pH 6, pak se extrahovala ethylacetátem a pak dichlormethanem. Na extrahované vodné vrstvě se provedla tle a byla zjištěna aktivita UV. PH se opatrně upravilo malým přídavkem kyseliny, následovala extrakce ethylacetátem a pak dichlormethanem. Tento postup se opakoval až do odstranění aktivity UV z vodné vrstvy. Organické extrakty se vysušily (MgSO4), přefiltrovaly a odpařením za sníženého tlaku se získal surový produkt (2,6 g). Produkt se použil v následujícím kroku bez dalšího přečištění. *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 7
MeO^A co2h • · »· · · ·· ···· • · · « · * · • · ···· » · · • · · ···· · * · · • · · · · · ·· ·· · · · ·
Hydroxykyselina (1,41 g; 5,96 mmol) získaná v kroku 6 se rozpustila v dichlormethanu (22 ml) a následoval přídavek 0,91 ml triethylsilanu (832 mg; 7,15 mmol) a kyseliny trifluoroctové (1,14 ml) při 25 °C. Po 12 hodinovém míchání se rozpouštědlo odstranilo za sníženého tlaku. ’H NMR prokázala, že reakce proběhla z 25%. Surová směs se znovu podrobila reakčním podmínkám. Za 12 hodin se rozpouštědlo odstranilo za sníženého tlaku. Surová látka (1,4 g; >100% výtěžek) byla dostatečně čistá pro použití v následujícím kroku bez přečištění. *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 8
CO2H
Karboxylová kyselina (706 mg; 3,26 mmol) získaná v předchozím kroku se rozpustila bezvodém dichlormethanu (3,5 ml) a zchladila na 0 °C. K tomuto roztoku se naráz přidal 1M roztok bromidu boritého v dichlormethanu (7,35 ml). Roztok se změnil na červenohnědý. Po 30 až 40 minutách při 0 °C se přidala voda (9 ml) spolu s dalším dichlormethanem až se vrstvy zřetelně odseparovaly. Vodná vrstva se extrahovala jednou dichlormethanem a několikrát ethylacetátem. Roztok dichlormethanu se extrahoval nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a pak se vodné extrakty promyly dichlormethanem. PH se pak upravilo na 3 6M HC1 a pak se provedla několikrát extrakce ethylacetátem. Smíchané extrakty ethylacetátu se promyly dvakrát vodou a pak solankou. Získané ethylacetátové extrakty se promyly dvakrát vodou a pak solankou. Organické extrakty se vysušily (MgSOA přefiltrovaly a odpařením dosucha se získala požadovaná sloučenina ve formě hnědého oleje (443 mg; 67% výtěžek). Produkt se použil v následujícím kroku bez dalšího přečištění. ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 9
HO
CO2Et •· ·· ·· ·· ·· ···· • · · · · · · · · · ·*· · · · ···· · · · • ·· ···· ···· ···· ·· ·· ·· ·· ··
Surová kyselina (586 mg; 2,90 mmol) izolovaná z předchozího kroku se rozpustila v absolutním ethanolu (5 ml) a 4M HC1 v dioxanu (5 ml) při 25 °C. Po 12 hodinovém míchání se reakční směs odpařila dosucha za sníženého tlaku. Surový olej se znovu rozpustil v ethylacetátu a promyl nasyceným roztokem vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a pak se promyl solankou. Organické extrakty se vysušily (MgSO4), přefiltrovaly a odpařením za sníženého tlaku se získal hnědý olej (609 mg). Olej se rozpustil v bezvodém etheru, což způsobilo vznik precipitátu hnědého zbarvení. Precipitát se odfiltrovala získal se žlutý olej (550 mg; 82% výtěžek), který se použil v následujícím kroku bez dalšího přečištění. *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 10
Surový fenol (246,6 mg; 1,07 mmol) z kroku 9 se míchal s trifenylfosfinem (430 mg;
1,64 mmol) při 0 °C v THF (3,8 ml) a atmosféře dusíku. K tomuto roztoku se přidal DEAD (0,23 ml) a reakce se míchala při 0°C. Po 15 minutách se naráz přidal 2-(3-hydroxypropylamin)pyridin N-oxid (410,5 mg; 1,53 mmol) ve formě prášku. Reakční směs se umístila na 15 minut do horké vodní lázně (50 °C) a reakce se následně přes noc zchladila za míchám na 25 °C. Reakční směs se zakoncentrovala za sníženého tlaku a pak přečistila zábleskovou chromatografií (SO2; 100% ethylacetát, pak 92% CH2CI2/8IPA 0,5% kyselina octová) a získal se žlutý olej (239 mg; 50% výtěžek). Tato látka se přeměnila na volnou bázi rozpuštěním žlutého oleje v absolutním ethanolu (1 ml) a pak přídavkem koncentrovaného hydroxidu amonného (0,33 ml). Následovalo zkoncentrování roztoku za sníženého tlaku a zbytek se pak na 1 hodinu vystavil vysokému vakuu a získal se růžový olej (203 mg). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
φ · · φ ·· φ · · · · φ · φ • φφφ · φ · · · · ·· · · · · φ φ φ · φ
ΦΦΦΦ ·· φφ φφ φφ φφ
Krok 11
Pyridylester (200 mg; 0,52 mmol) z kroku 10 se rozpustil v izopropylalkoholu (4,4 ml) a získal se růžový roztok. K tomuto roztoku se přidalo 10% paladium na uhlíku (46 mg) a následně cyklohexen (0,44 ml). Reakce se zahřívala k refluxu. Po 2 hodinách nebyl zjištěn TLC žádný produkt. Přidal se další katalyzátor (46 mg) a cyklohexen (0,44 ml). TLC se provedla pro kontrolu za 1 hodinu, což znamenalo, že reakce proběhla do konce. Reakce se přefiltrovala přes celit a následným zakoncentrováním filtrátů za sníženého tlaku se získal bezbarvý olej (222 mg). Tato látka se použila v následujícím kroku bez dalšího přečištění. ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 12
l-[[4-[3-(2-pyridinylaminopropoxy]fenyl]methyl]cyklopropanoctová kyselina
Ester (222 mg; 0,52 mmol) z kroku 11 se rozpustil v methanolu (7,2 ml). K tomuto roztoku se přidal 1M hydroxid sodný (7,2 ml). Roztok se míchal přes noc při 25 °C a reakce se pak zastavila TFA (přibližně 0,55 ml) až k dosažení pH 3. Odstraněním rozpouštědla za sníženého tlaku se získal surový zbytek, který se přečistil HPLC (eluce gradientem 90/10 H2O/CH3CN až 50/50 H2O/C CH3CN) a získala se požadovaná sloučenina ve formě bezbarvého oleje (198 mg). NMR (CDCI3) δ 0,49 (m, 2H); 0,54 (m, 2H); 2,13 (s, 2H); 2,15 (penten, 2H); 2,64 (s, 2H); 3,53 (t, 2H); 4,06 (t, 2H); 6,76 (t, 1H); 6,82 (d, 2H); 6,92 (d, 1H);
7,12 (d, 2H), 7,76-7,84 (2H). Analytický výpočet C2<,H24N2O3. 1,5 CF3CO2H: C, 54,01; H, 5,03; N 5,48; Skutečné hodnoty: C, 54,38; H, 5,10; N, 5,94.
*· ·· ’ · · a • * ·
Příklad 7 [[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]sulfonyl]octová kyselina
•TFA
Do tříhrdlé nádoby opatřené promývačkou plynu a míchadlem se v atmosféře dusíku přidal methanol (100 ml) a methylthioglykolát (5,30 g; 50 mmol) a následně methoxid sodný (2,70 g; 50 mmol). Po 15 minutovém míchání při 25 °C se roztok stal čirý a najednou se pak přidal 4-benzyloxybenzylchlorid (16 g; 75 mmol) a reakce se zahřála na 80 °C. Po 12 hodinách se reakce zchladila a směs se přefiltrovala. Filtráty se zakoncentrovaly za sníženého tlaku a získal se olej, který se znovu rozpustil v methanolu (200 ml). Připravil se vodný roztok Oxonu (61,4 g v 247 ml vody) a pak se přidal k methanolovému roztoku surového sulfidu. Po 12 hodinovém míchání při 25 °C se roztok zakoncentroval za sníženého tlaku a pak se rozdělil mezi přidanou vodu a CH2CI2. Vodné extrakty se extrahovaly třikrát CH2CI2. Organické extrakty se vysušily (MgSO4), přefiltrovaly a získal se bezbarvý olej, který během stání ztuhnul. Surová látka se přečistila kolonovou chromatografíí (SiO2, 10/90 ethylacetát-toluen) a získala se požadovaná látka (5,0 g). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 2
HO
OCH3 *· ♦· ·· ·· ·· • · · · · * · «» ·· · * ·*·» « «
Sloučenina izolovaná v kroku 1 (5 g; 16 mmol) se rozpustila vMeOH (50 ml). Přidal se THF (10 ml) pro lepší rozpuštění sloučenin a následně se přidal 20% hydroxid paladia na uhlíku (1 g). Reakční směs se v 250 ml hydrogenačm baňce třepala vParrově hydrogenační aparatuře 1 hodinu při 25 °C. Katalyzátor se odstranil filtrací a promyl methanolem (2 x 20 ml). Filtráty a promývky se smíchaly a zakoncentrováním za sníženého tlaku se získal požadovaný produkt (3,01 g; 75%).
Krok 3
Fenol (256 mg; 1,05 mmol) z kroku 2 se s trifenylfosfinem (430 mg; 1,64 mmol) se rozpustil vbezvodém THF (3,8 ml) a v atmosféře dusíku se zchladil na 0 °C. K tomuto roztoku se přidal DEAD (263,3 mg; 1,51 mmol). Po 15 minutách se přidal aminopyridinalkohol (410,5 mg; 1,53 mmol) naráz ve formě prášku. Reakční směs se umístila do horké vodní lázně na 15 minut (50 °C) a reakce se pak přes noc chladila za míchání na 25 °C. Reakční směs se zakoncentrovala za sníženého tlaku a pak se přečistila zábleskovou chromatografií (SÍO2, 100% ethylacetát, pak 92 CH2CI2 /8IPA 0,5% kyselina octová) a získal se žlutý olej (239 mg; 50%). Látka se přeměnila na volnou bázi rozpuštěním žlutého oleje v absolutním ethanolu (1 ml) a pak přídavkem koncentrovaného hydroxidu amonného (0,33 ml). Směs se zakoncentrovala za sníženého tlaku a z výsledného zbytku se po 1 hodině za vysokého vakua získala požadovaná sloučenina (189 mg; 44% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 4
OH •TFA
• · • * · 4 « · • 4 ♦· Λ 9 • «44 »*« Vt * ·· a * · a · a « « · .· : : ’: :: : ·: :. :
• a 4· · · «· * · · * #· [[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]sulfonyl]octová kyselina
Požadovaný pyridin-N-oxid (189 mg; 0,465 mmol) izolovaný z kroku 3 se rozpustil v izopropanolu (4,4 ml). K tomuto roztoku se přidalo 10% paladium na uhlíku (46 mg) a následně cyklohexan (0,44 ml). Po 2 hodinách TLC neukázala žádnou reakci. Přidalo se ekvivalentní množství katalyzátoru a cyklohexanu. Pro zvýšení rozpustnosti výchozí látky se přidalo malé množství THF. Následující den tle ukázala produkt i výchozí látku. Přidal se katalyzátor i cyklohexen (použité množství je uvedeno výše). Za 6 hodin byla reakce dokončena. Reakční směs se přefiltrovala přes celit a filtráty se zakoncentrovaly za sníženého tlaku. Výsledný surový zbytek se rozpustil v 1M vodném roztoku hydroxidu sodného (7 ml) a methanolu (7 ml) a míchal se při 25 °C. Za 12 h se reakce zastavila TFA a zakoncentrovala za sníženého tlaku. Výsledný zbytek se přečistil HPLC s reverzní fází (eluční gradient 90/10 H2O/CH3CN až 50/50 H2O/CH3CN) a získala se bflá pevná látka (173 mg). Ti NMR (DMSO -de) δ 2,06 (penten, 2H); 3,48 (t, 2H); 4,10 (t, 2H); 4,13 (s, 2H); 4,55 (s, 2H); 6,81(t, 1H); 6,94-7,03 (3H); 7,31 (d, 2H); 7,83 (t, 1H), 7,92 (d, 1H). Analytický výpočet C17H20O5N2S 1,1 CF3CO2H. C, 47,18; H, 4,14; N 5,73; S, 6,56. Skutečné hodnoty: C, 47,05; H, 4,20; N, 5,72; S, 6,63.
Příklad 8 l-[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklobutanoctová kyselina
O
Krok 1 • 9 9 9 7 ·
K roztoku cyklobutankarboxylové kyseliny (10 g, 100 mmol) v THF (100 ml) se při 20 °C v atmosféře argonu po kapkách přidal roztok diizopropylamidu lithného (110 ml, 220 mmol, 2M v heptanu/THF/ethylbenzen) zředěný THF (120 ml) při -20 °C v atmosféře argonu. Výsledná směs se míchala 15 minut při 0 °C, pak se zahřála na 30 °C až 35 °C a míchala 1 hodinu. Směs se zchladila zpět na -20 °C a pak se po kapkách přidal roztok 4— methoxybenzylchloridu (20 g, 130 mmol) v THF (100 ml). Reakce se míchala 1 hodinu při 10 °C, pak se postupně zahřívala na 30 °C až 35 °C. Za 1 hodinu se reakce zastavila nasyceným roztokem NH4CI (120 ml). Rozpouštědla se částečně odstranila za sníženého tlaku. Přidal se 5% bodný roztok NaOH pro úpravu pH na 12. Směs se promyla etherem (3 x 150 ml). Vodná vrstva se okyselila koncentrovanou HC1 a řádně vyextrahovala CH2CI2 (3 x 150 ml). Smíchané vrstvy CH2CI2 se vysušily Na2SO4 a zakoncentrováním se získala směs surového produktu (12,1 g). lH NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 2
Roztok produktu z kroku 1 (12,1 g), se míchal 48 hodin za teploty místnosti s HCL v
1,4-dioxanu (50 ml, 4,0 M) a ethanolu (100 ml). Rozpouštědla se odstranila za sníženého tlaku. Zbytek se zředil ethylacetátem (300 ml), promyl nasyceným roztokem NaHCCh (100 ml). Organické extrakty se vysušily MgSO4 a zakoncentrováním se získal světle hnědý olej (8,7 g). Celkový výtěžek z kroku 1 a kroku 2 činil 35%. *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 3
CH3O.
'0' ·· »· ··· · »· ·· >·
9 · * · · · t « » » · · · 9 999 · 9 9
C-ι 99 999 9* 999 9 «
JI · · * · · · · · 9 · · *··* ·« 99 99 99 99
V atmosféře argonu se k roztoku n-butyllithia (18,0 ml, 44,4 mmol, 2,5M v hexanu) zředěném THF (50 ml) při 0 °C přidal 2,2,6,6-tetramethylpiperidin (6,85 g, 48,4 mmol) za tvorby LTMP. V oddělené nádobě se zchladil roztok produktu z kroku 2 (5,0 g, 20,2 mmol), dibrommethan (7,7 g, 44,4 mmol) a THF (50 ml) na -78 °C. Po 30 minutách se k výše uvedenému roztoku přidal roztok LTMP pomocí dvojité jehly během 20 minut. Po 10 minutách se během 15 minut při -78 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (40,3 ml, 40,3 mmol, 1M v THF). Reakce se zahřála na -20 °C a pak se zchladila na -78 °C. Během 20 minut se při -60 °C, přidal roztok s-butyllithia (62 ml, 80,6 mmol, 1,3M v cyklohexanu). Reakce se zahřála na -20 °C, přidal se roztok n-butyllithia (16,1 ml, 40,3 mmol, 2,5M v hexanu). Reakce se zahřála na teplotu místnosti a míchala 1 hodinu. Reakce se zchladila na -78 °C a zastavila se přídavkem míchaného etanolového roztoku bezvodé kyseliny při 0 °C během 40 minut. Výsledná smě se zředila etherem (800 ml) a promyla IN roztokem HC1 (350 ml). Vodná vrstva se extrahovala etherem (3 x 80 ml). Získané etherové extrakty se vysušily MgSO4, přefiltrovaly a zakoncentrovaly. Chromatografií zbytku (S1O2 ;
ethylacetát/hexan=8/92) se získal požadovaný produkt ve formě hnědého oleje (1,6 g; 30% výtěžek). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 4
K roztoku produktu z kroku 3 (1,0 g, 3,8 mmol) v CH2CI2 (12 ml) se během 10 minut při 0 °C přidal roztok bromidu boritého (5,1 ml, 5,1 mmol, 1M v CH2CI2). Studená lázeň se odstranila. Za 1,5h se k reakci při 0 °C přidal ethanol (20 ml). Výsledný roztok se míchal 40 minut při teplotě místnosti, zředil ethylacetátem a promyl nasyceným roztokem NaHCCh (50 ml). Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Smíchané organické extrakty se vysušily MgSO4 a zakoncentrováním se získala směs surového produktu. Chromatografií surového zbytku (na silikagelu, hexan/ethylacetát/88/12) se získal požadovaný produkt ve formě světle hnědého oleje (0,36 g; 38% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
• · • · ·· ·· ·· • · · · · # · • · · · ···· s? : : · : :: ;
···· ·· * · ··
Krok 5
K roztoku produktu z kroku 4 (0,35 g, 1,41 mmol) v THF (20 ml) se při 0 °C přidal trifenylfosfm (0,5lg, 1,97 mmol). K výše uvedenému roztoku se při 0 °C v atmosféře argonu přidal diethylazodikarboxylát (0,31 ml, 1,97 mmol) Výsledný roztok se míchal 20 minut při 0 °C a k reakci se během 15 minut při 0°C přidal 2-(3-hydroxypropylamin)pyridin N-oxid (0,26 g, 1,55 mmol). Reakce se míchala 18 hodin a zahřívala na 25 °C. Odstraněním rozpouštědla z reakční směsi za sníženého tlaku se získal olejovitý zbytek. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, dichlormethan/2-propanol/octová kyselina 92/8/0,5) a získal se požadovaný produkt ve formě oleje (0,32 g; 51% výtěžek). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 6
'0
Směs produktu z kroku 5 (0,28 g, 0,61 mmol), 10% Pd/C (0,078 g, 0,073 mmol), cyklohexenu (0,74 ml, 7,3 mmol) a 2-propanolu (15 ml) se zahřála k refluxu. Po 18 hodinách se reakce zchladila na teplotu místnosti. Přidal se další 10% Pd/C (0,078 g, 0,073 mmol) a cyklohexen (0,74 ml, 7,3 mmol). Po 5 hodinách refluxu se reakce zchladila na teplotu místnosti, přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla 2-propanolem (25 ml). Zakoncentrováním filtrátu se získal čirý produkt ve formě oleje (0,27 g; 100% výtěžek). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 7
l-[[4-[3-(2-pyridinylammo)propoxy]fenyl]methyl]cyklobutanoctová kyselina
Roztok produktu z kroku 6 (0,25 g; 0,65 mmol) se míchal 18 hodin při teplotě místnosti svodným roztokem NaOH (12 ml, 2M) a ethanolem (18 ml). K reakci se přidala trifluoroctová kyselina (2 ml). Odstraněním rozpouštědel z reakce za sníženého tlaku se získal surový produkt. Přečištěním surového produktu HPLC s reverzní fází se získala l-[[4-[3-(2— pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklobutanoctová kyselina ve formě gumovité pevné látky (0,26 g; 81% výtěžek). Ή NMR (CDC13) δ 1,88 (m, 4H); 2,01 (m, 2H); 2,18 (p, 2H); 2,40 (s, 2H); 2,84 (s, 2H); 3,52 (br, t, 1H); 4,06 (t, 2H); 6,68 (t, 1H); 6,79 (d, 2H), 6,83 (d, 1H); 7,21 (d, 2H); 7,74 (m, 2H); 9,89 (br, s, 1H); Analytický výpočet C21H26N2O3 .1,1 CF3COOH. 0,5 H2O: C 57,00; H, 5,79; N 5,73; Skutečné hodnoty: C, 57,37; H, 5,92; N, 5,21.
Příklad 9
- [[4- [3 -(2-pyridinylamino)propoxy] fenyl] methy ljcyklopentanocto vá kyselina
H
OH
Krok 1
K roztoku 4-methoxybenzonitrilu (10,0 g, 75,1 mmol) v THF (50 ml) se při 0 °C po kapkách přidal roztok cyklopentylmagnesiumbromidu (56,3 ml, 113, 2M v etheru). Výsledná • · ·· ·· · · ···· · · · ·· · • · · · · · · · · · · • δο ·· ···· ···· • · · · ·· ·* . · ·» ·· reakční směs se zahřála na teplotu místnosti. Po 3 hodinách se reakční směs zchladila na 0 °C a reakce se zastavila vodným 10% roztokem HC1. Výsledná reakční směs se míchala při teplotě místnosti 30 minut. Pomalu se přidal vodný roztok NaOH (6 M) pro úpravu pH na 6. Produkt se extrahoval etherem (350 ml) a promyl solankou (200 ml). Organická vrstva se vysušila nad MgSO4 a zakoncentrováním se získal surový zbytek. Chromatografií surového zbytku (S1O2, hexan/ethylacetát/8/2) se získal požadovaný produkt ve formě světle žlutého oleje (9,3 g; 61% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 2
K roztoku bis(trimethylsilyl)amidu sodného (94,4 ml, 47,2 mmol, 0,5 M v toluenu) zředěném THF (50 ml) se při 25 °C v atmosféře argonu přidal roztok produktu z kroku 1 (8,0 g, 39,3 mmol) v THF (100 ml). Výsledný roztok se míchal 45 minut při teplotě místnosti. Pak se po kapkách přidal při 0 °C roztok bromethylacetátu (4,45 g, 47,2 mmol) v THF (100 ml) a směs se pak zahřála na teplotu místnosti. Za 1,5 hodiny se reakce zředila ethylacetátem (500 ml) a promyla vodou (300 ml). Organická vrstva se vysušila MgSO4, přefiltrovala a zakoncentrovala. Chromatografií zbytku (silikagelu, toluen/ethylacetát=8/2) se získal požadovaný produkt ve formě oleje (2,7 g; 24% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 3
CH3O.
Směs produktu z kroku 2 (0,79 g, 2,72 mmol) se rozpustila v ethanolu (30 ml) a následoval přídavek 20% hydroxidu paladnatého na uhlíku (0,40 g) a H3PO4 (4 kapky).
·· ·· · · ·· ·· • · · · · · · · · · ·· · · ···· · · · .·6ΐ: : · : :: : · : :. :
···· ·· ·· ·· ·· · ·
Reakční směs se promývala dusíkem a hydrogenovala 20 hodin při 25 °C a tlaku 413 kPa. Katalyzátor se odstranil filtrací a promyl ethanólem (2 x 20 ml). Filtrát se zakoncentroval, zředil ethylacetátem (150 ml) a promyl vodou. Organická vrstva se vysušila MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek (0,64 g) se rozpustil v ethanolu (15 ml) a v roztoku 4M HC1 v dioxanu (15 ml). Zbývající roztok se míchal 48 hodin při 25 °C. Odstraněním rozpouštědel za sníženého tlaku se získal světle hnědý olej (0,64 g; 85% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 4
HO.
K roztoku produktu z kroku 3 (0,62 g) v CH2CI2 (8 ml) se při 0 °C přidal po kapkách roztok bromid boritý (2,97 ml, 1M v CH2CI2). Studená lázeň se odstranila. Za 20 minut se k reakci přidal ethanol (8 ml). Výsledná směs se míchala 30 minut při teplotě místnosti. Rozpouštědla se odstranila z reakce za sníženého tlaku. Zbytek se zředil ethylacetátem (100 ml) a promyl nasyceným vodným roztokem NaHCCh (50 ml). Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem (2 x 20 ml). Smíchané organické extrakty se vysušily s Na2SO4, a zakoncentrováním se získala směs surového produktu. Chromatografií surového zbytku (na silikagelu, hexan/ethylacetát/8/2) se získal požadovaný produkt ve formě světle hnědého oleje (0,22 g; 38% výtěžek). 'H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 5
K roztoku produktu z kroku 4 (0,28 g, 1,07 mmol) v THF (15 ml) se při 0 °C přidal trifenylfosfin (0,393g, 1,5 mmol). K výše uvedenému roztoku se při 0 °C v atmosféře argonu přidal diethylazodikarboxylát (0,24 ml, 1,5 mmol) Výsledný roztok se míchal 20 minut při 0 °C a k reakci se během 15 minut přidal 2-(3-hydroxypropylamin)pyridin N-oxid (0,197 g,
1,17 mmol). Reakce se zahřála na teplotu místnosti a míchala 18 hodin. Odstraněním rozpouštědla z reakční směsi za sníženého tlaku se získal olejovitý zbytek. Surový zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, dichlormethan/2-propanol/octová kyselina 92/8/0,5) a získal se požadovaný produkt ve formě oleje (0,25 g; 57% výtěžek). *H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 6
Směs produktu z kroku 5 (0,25 g, 0,53 mmol), 10% Pd/C (0,068 g, 0,064 mmol), cyklohexanu (0,64 ml, 6,4 mmol) a 2-propanolu (10 ml) se zahřála k refluxu. Po 18 hodinách se reakce zchladila na teplotu místnosti. Přidal se další 10% Pd/C (0,068 g, 0,064 mmol) a cyklohexan (0,64 ml, 6,4 mmol). Po 6 hodinách refluxu se reakce zchladila na teplotu místnosti, přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla 2-propanolem (15 ml). Zakoncentrováním filtrátu se získal čirý produkt ve formě oleje (0,18 g; 75% výtěžek). ’H NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 7
l~[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklopentanoctová kyselina
Roztok produktu z kroku 6 (0,18 g; 0,45 mmol) se míchal 18 hodin při teplotě místnosti - 25 °C. K reakci se přidala trifluoroctová kyselina (2 ml). Odstraněním rozpouštědel z reakce za sníženého tlaku se získal surový produkt. Přečištěním surového produktu HPLC se získala l-[[4-[3-(2-pyridinylammo)propoxy]fenyl]methyl]cyklopentanová kyselina ve formě čirého oleje (0,15 g; 79% výtěžek). *HNMR (CDCI3) δ 1,51 (m, 2H); 1,68 (m, 4H); 2,17 (p, 2H); 2,26 (s, 2H); 2,73 (s, 2H); 3,56 (q, 2H); 4,05 (t, 2H); 6,73 (t, 1H); 6,81 (d, 2H), 6,87 (d, 1H); 7,14 (d, 2H); 7,77 (dd, 1H); 7,85 (d, 1H); 9,22 (br, s, 1H); 11,34 (br, s, 1H). Analytický výpočet C22H28N2O3.1,75 CF3COOH. 0,25 H2O: C 53,08; H, 5,37; N 4,85; Skutečné hodnoty: C, 52,85; H, 5,29; N, 4,87.
Příklad 10 [[[4-[2-[6-(methylamino)-2-pyridinyl]ethoxy]fenyl]methyl]sulfonyl]octová kyselina _ ^OH
Fenol (300 mg; 1,23 mmol) z kroku 2, příklad 7 se s trifenylfosfinem (494 mg; 1,88 mmol) rozpustil v bezvodém THF (2 ml) a v atmosféře dusíku se zchladil na 0 °C. K tomuto roztoku se přidal DEAD (302,04 mg; 1,73 mmol). Po 15 minutách se přidal aminopyridinalkohol B (232 mg; 1,52 mmol) jako roztok THF (2 ml) během 15 minut. Reakční směs se zahřála na 25 °C. Po 12 hodinách se reakční směs zakoncentrovala za sníženého tlaku a pak se přečistila zábleskovou chromatografií (SiO2,50% ethylacetát/hexan) a získal se žlutý olej (239 mg; 50%). lH NMR byla v souladu se strukturou požadovaného produktu.
Krok 2
Ό [[[4-[2-[6-(methylamino)-2-pyridinyl]ethoxy]fenyl]methyl]sulfonyl]octová kyselina
Sloučenina získaná v kroku 1 se rozpustila ve vodném IN hydroxidu sodném (7 ml) a míchala při 25 °C. Po 12 hodinách se reakce zastavila THF a zakoncentrovala za sníženého tlaku. Výsledný zbytek se přečistil HPLC s reverzní fází (eluční gradient 90/10 H2O/CH3CN až 50/50 H2O/CH3CN) a získala se bílá pevná látka (173 mg). NMR (acetonitril -d3) δ 2,84 (s, 3H); 3,1 (t, 2H); 3,94 (s, 2H); 4,21 (t, 2H); 4,41 (s, 2H); 6,65(d, 1H); 6,72 (d, 1H); 6,85 (d, 2H); 7,25 (d, 2H), 7,70 (t, 1H). Analytický výpočet C,7H2oN205S plus 1,1 CF3CO2H. C, 47,08; H, 4,34; N 5,72; S, 6,55. Skutečné hodnoty: C, 47,27; H, 4,57; N, 6,15; S, 6,28.
Příklad 11
3,3-dimethyl-4-{ 4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-l,08-naftyridin-2-yl)ethoxy]-fenyl} butanová kyselina
Krok 1
- [4-(benzyloxy)fenyl] -2,2 -dimethylpropanal
Směs NaOH 0,7 g), (Bu)4BI (0,15 g) v benzenu (2,0 ml) a vody (0,7 ml) se zahřívala při 70 °C v atmosféře argonu a získala se homogenní směs. K této směsi se po kapkách přidala směs izobutylaldehydu (1,44 g, Aldrich) a 4-benzyloxybenzylchloridu (3,5 g, Aldrich) v benzenu (5,0 ml). Po přídavku se výsledná směs míchala 3 hodiny v atmosféře argonu při 70 °C. Pak se zchladila, zředila vodou a extrahovala EtOAc (3 x 25 ml). Získané organické extrakty se promyly vodou, vysušily (bezvodým Na2SO4) a zakoncentrovaly dosucha. Zbytek se přečistil zábleskovou chromatografií na silikagelu za použití 5% EtOAc v hexanu. Příslušné frakce (sledované TLC a ES hmotnostní spektrometrií) se smíchaly a • ·
65:
zkoncentrovaly dosucha a získal se požadovaný produkt (2,0 g ~ 50%) ve formě bílého prášku: Rf = 0,28 (10% EtOAc/hexan), ’H - NMR (CDC13) δ 9,56 (s, 1H), 7,4 (m, 5H), 6,99 (d, 2H), 6,83 (d, 2H), 5,02 (s, 2H), 2,71 (s, 2H), 1,02 (6H); ES - MS m/s 286 (M+ 18); HRMS vypočteno: C18H20O20NH4 (M+ NH4) 286,2100, skutečná hodnota: 286,1833.
Krok 2
2-{ 3-[4-(benzyloxy)fenyl]-2,2-dimethylpropyliden} -1,3-dithian
Roztok 2-trimethylsilyl-l,3-dithianu (0,8 ml, 1,2 ekvivalentu, Aldrich, zapáchající!) v suchém THF (10,0 ml) se zchladil na -70 °C a po kapkách se přidalo BuLi (3,0 ml, 1,6 M) a směs se míchala 15 minut v atmosféře argonu. Pak se po kapkách přidal roztok produktu z kroku A (0,95 g) v THF (10,0 ml). Výsledná směs se zahřála po 2 hodinách na -50 °C. Během této periody se TLC (10% EtOAc v hexanu) a ES hmotnostní spektrometrií sledovalo ukončení reakce surové reakční směsi. Reakce zchlazené reakční směsi (-50 °C) se zakončila roztokem nasyceného chloridu amonného (~25 ml) a extrahovala se EtOAc (3 x 25 ml). Získané organické extrakty se promyly vodou, vysušily (bezvodým Na2SO4) a zakoncentrovaly dosucha. Zbytek (TLC v 10% EtOAc v hexanu ukazovalo na hlavní produkt) se přečistil zábleskovou chromatografií na silikagelu za použití 5% EtOAc v hexanu. Příslušné frakce (sledované TLC a ES hmotnostní spektrometrií) se smíchaly a zkoncentrovaly dosucha a získala se požadovaná sloučenina (0,95 g, 70%) ve formě bílé pevné látky: Rf = 0,47 (10% EtOAc/hexan), ’H - NMR (CDCI3) δ 7,4 (m, 5H), 7,06 (9d, 2H), 6,9 (d, 2H), 5,88 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 2,88 (m, 4H), 2,77 (s, 2H), 2,11 (m, 2H), 1,15 (s, 6H); ES - MS m/s 371 (M+H); HRMS vypočteno: C22H27OS2 371,1498, skutečná hodnota: 371,1521.
Krok 3
COOH • · · · .Μ,
4- [4-(benzy loxy) fenyl] -3,3 -dimethylbutano vá kyselina
Roztok produktu kroku 2 (0,4 g) v MeOH (3,00 ml) obsahující pTSA (0,05 g) a vodu (0,1 ml) se zahříval 4 hodiny k refluxu. Reakční směs se zředila vodou (10 ml) a extrahovala EtOAc (3x15 ml). Získané organické extrakty se promyly vodou, vysušily nad bezvodým Na2SO4, přefiltrovaly a zakoncentrovaly dosucha. Výsledný zbytek se přečistil zábleskovou chromatografíí na silikagelu za použití 5% EtOAc v hexanu a získala se bezbarvá kapalina (0,29 g, zapáchající). Tato látka reagovala s IN NaOH (1,5 ml) a zahřívala se 3 hodiny k refluxu. Reakční směs se zředila vodou (15 ml) a extrahovala EtOAc (3 x 10 ml) pro odstranění thiol obsahujících odpadní produkty. Vodná fáze se okyselila kyselinou citrónovou a extrahovala EtOAc (3x15 ml). Získané organické extrakty se promyly vodou, vysušily ( bezvodý Na2SO4) a zakoncentrováním dosucha se získala bílá pevná látka (0,18 g, 56%). Tuto látku lze dále přečistit rekrystalizací ze směsi dichlormethan/hexan: Rf = 0,31 (50% EtOAc/hexan), *H - NMR (CDC13) δ 7,37 (m, 5H), 7,08 (d, 2H), 6,88 (d, 2H), 5,03 (s, 2H),
2,61 (s, 2H), 1,02 (s, 6H); ES - MS m/s 297 (M-H); HRMS vypočteno: C19H22O3NH4 316,1907, skutečná hodnota: 316,1924.
Krok 4 hcl
COOEt
Ethyl-(4-(4-hydroxyfenyl)-3-3-dimetylbutanoát)
Kyselina z kroku 3 (0,5 g) se rozsuspendovala v absolutním EtOH (3,0 ml), přidala se směs 4M HCl/dioxan (2,0 ml) a míchala se přes noc při teplotě místnosti a pak se zahřívala 1 hodinu k refluxu. Roztok se zakoncentro val dosucha a zbytek se rozpustil v EtOAc (15 ml), promyl vodou, zakoncentro val a vysušil dosucha. Výsledný sirup (0,4 g) se rozpustil v EtOH (10 ml), přidala se kyselina octová( 0,1 ml), Pd/C (10%, 0,25 g) a směs a míchala v atmosféře vodíku a tlaku 344 kPa při teplotě místnosti. Po 16 h se katalyzátor odstranil filtrací a filtrát se zakoncentro val dosucha za sníženého tlaku. Výsledný bezbarvý sirup se vysušil za vakua a získala se uvedená sloučenina (0,34 g, 80%) Rf = 0,44 (50% EtOAc/hexan), *H - NMR (CDC13) δ 7,02 (d, 2H), 6,73 (d, 2H), 4,12 (q, 2H), 2,58 (s, 2H), 2,15 (d, 2H), 1,24 (t, 3H);
0,98 (s, 6H); ES - MS m/s 235 (M-H); HRMS vypočteno: C14H21O3 (MH+) 273,1485, skutečná hodnota: 237,1511.
Krok 5
3,3-dimethyl-4-{4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-l,8-naftyridin-2-yl)ethoxy]-fenyl}butanová kyselina
Ke zchlazenému roztoku (5 °C) se přidal roztok ethylesteru 4-hydroxy-P,P-dimethylbenzenbutanové kyseliny (1, 0,15 g, 0,63 mmol) v THF (3,0 ml), trifenyl-fosfin (0,25 g, 0,95 mmol) a směs se míchala v atmosféře argonu. Po 10 minutách se přidal diizopropyldiazodikarboxylát (DIAD, 0,18 ml, 0,95 mmol) a směs se míchala 15 minut. Ktéto směsi se přidal roztok 2-(5,6,7,8-tetrahydro-l,8-naftyrididin-2-yl)-l-ethanolu (1, 0,14 g, 0,79 mmol) v THF (2,0 ml) a směs se míchala 30 minut při 5 °C a 16 h při teplotě místnosti až se získal čirý světle hnědý roztok. Tato látka se zakoncentrovala dosucha a přečistila zábleskovou chromatografií na silikagelu za použití ethylacetátu jako elučního činidla a získalo se 0,1 g (32%) požadovaného produktu ve formě světle hnědého oleje: ESMS m/z 397 (M+H); HR-MS vypočteno: C24H33N2O3 397,2491, skutečná hodnota: 397,2513. Tento ester se pak rozpustil v ethanolu (1 ml), přidal se 1M LiOH (1,0 ml) a směs se zahřívala 4 hodiny při 80 °C v atmosféře argonu. Reakční směs se zchladila, zředila vodou (1,0 ml), okyselila kyselinou trifluoroctovou a přečistila HPLC s reverzní fází za použití 10-90% gradientu směsi acetonitril/voda (30 min) při toku 70 ml/min. Příslušné frakce se smíchaly a vysušily zmrazením a získal se tak požadovaný produkt ve formě bledě žluté pevné látky: *H - NMR (CD3OD) δ 7,4 (d, 1H, J=8,8 Hz), 7,08 (d, 2H, J=8,8 Hz), 3,13 (t, 2H, J = 6,0 Hz),
2,81 (t, 2H, J = 6,0 Hz), 2,59 (s, 2H), 2,1 (s, 2H); 1,94 (m, 2H); 0,96 (s, 6H); ES - MS m/z 369 (M+H); HR-MS vypočteno: C22H28N2O3 369,2178, skutečná hodnota: 369,2179.
• · • ·
6β.. ·· .... ..., »4* ··· ·· · · φ φ ββ
Příklad 12
3-benzyl-3-methyl-4-{ 4-[3-pyridmyl-2~ylamino)propoxy]fenyl} butanová kyselina
KOH
COOH
SOCI2
ΗΟ/χ^'ΟΚ MeO‘ 150°C
EtOH
Nal, TMSCI
->
ch3cn
O ♦
Νχ/^ΟHO
COOEt
COOEt
Fe (powder) -►
AcOH, PPh3
PPh3, DEAD, THF --—*-
' COOEt u
• · • · ·· ·· ·« • · · · · * · • · · · ···· .69 * · · ·· · · · · · • ν«· · · · · φβ
Krok 1
MeO'
Ethyl-(3 -benzyl-2-kyano-4-(4-methoxyfenyl)-3 -methylbutanoát)
Ke směsi Cul (18,3 mg, 0,0,96 mmol) v bezvodém THF (3,6 ml) se za teploty místnosti v atmosféře argonu přidal benzylmagnesiumbromid (5,5 ml, 11,1 mmol). Reakční směs se zchladila na 0 °C a pomalu se přidal ethyl-((2E)-2-2-kyan-4-(4-methoxyfenyl)-3— methylbut-2-enolát) (2,5 g, 9,6 mmol) v bezvodém THF (16 ml). Reakční směs se míchala 4 hodiny při teplotě místnosti, zastavila se 1M HC1 a extrahovala EtOAc (3x). Organické vrstvy se smíchaly, promyly solankou, vysušily nad Na2SO4 a zakoncentrovaly na olej. Olej se přečistil zábleskovou chromatografií za použití směsi 15% EtOAc/hexan jako elučního činidla. Získal se ethyl-(3-benzyl-2-kyan-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanoát) (3,1 g, 8,8 mmol, 92%) ve formě diastereoizomemí směsi. LC-MS (MH+)=352. ’H - NMR (DMSO-cL) δ 0,85 (s, 3H), 1,17 (t, 3H), 2,45 - 2,91 (m, 4H), 3,46 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,12 (q, 2H); 6,81 (m, 2H), 7,01 (d, 1H), 7,09 (m, 2H), 7,15-7,28 (m, 4H).
Krok 2
MeO'
'COOH
3-benzyl-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanová kyselina
K Ethyl 3-benzyl-2-kyano-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanové kyselině (3,0 g, 8,7 mmol) v bezvodém ethylenglykolu (30 ml) se v atmosféře argonu přidal pevný KOH (2,4 g, 43 mmol). Reakční směs se zahřívala 60 hodin na 150 °C. Reakční směs se zchladila na teplotu místnosti, zastavila se IN HC1. Reakční směs se extrahovala EtOAc (3x). Organické vrstvy se míchaly, promyly solankou, vysušily nad Na2SO4 a zakoncentrovaly na olej. Olej se • · přečistil zábleskovou chromatografií za použití směsi 25% EtOAc/hexan jako elučního činidla. Získal se olej 3-benzyl-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanové kyseliny (1,92 g, 6,4 mmol, 74%) LC-MS (M+Na)=321. Ή - NMR (DMSO-de) Ó 0,88 (s, 3H), 2,03 (s, 2H), 2,65 - 2,92 (m, 4H), 3,82 (s, 3H), 6,94 (d, 2H), 7,17 (d, 2H); 7,25 (d, 2H), 7,31 (dd, 1H), 7,38 (dd, 2H), 12,25 (as, 1H).
Krok 3
Ethyl-(3-benzyl-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanoát)
K 3-benzyl-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanové kyselině (1,83 g, 6,1 mmol) v absolutním ethanolu (30 ml) se při teplotě místnosti v atmosféře argonu přidal thionylchlorid (0,90 ml, 12,3 mmol). Reakční směs se míchala 3 hodiny při teplotě místnosti a pak refluxovala 2 hodiny. Reakční směs se zakoncentrovala na olej a přečistil zábleskovou chromatografií za použití směsi 20% EtOAc/hexan jako elučního činidla. Získal se olej 3benzyl-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanoát (1,47 g, 5,1 mmol, 84%) LC-MS (M+Na)=349. ’H - NMR (DMSO-d6) δ 0,81 (s, 3H), 1,21 (t, 3H), 2,02 (s, 2H), 2,56-2,77 (m, 4H), 3,73 (s, 3H), 4,09 (q, 2H); 6,85 (d, 2H), 7,08 (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 7,22 (dd, 1H), 7,29 (dd, 2H).
Krok 4
Ethyl-(3-benzyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3-methylbutanoát)
K roztoku 3-benzyl-4-(4-methoxyfenyl)-3-methylbutanoátu (500 mg, 1,5 mmol) a Nal (900 mg, 6,0 mmol) v bezvodém CH3CN (10 ml) při teplotě místnosti v atmosféře argonu se přidal chlortrimethylsilan (0,76 ml, 6,0 mmol). Vodná vrstva se extrahovala EtOAc (3x).
• ·
7>
·* ·« • * * • · ·«· • · ♦ • · · • · · ·
Organické vrstvy se smíchaly, promyly solankou, vysušily nad Na2SO4 a zakoncentrováním se získal olej. Olej se přečistil zábleskovou chromatografíí za použití směsi 15% EtOAc/hexan jako elučního činidla. Získal se olej 3-benzyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3— methylbutanoátu (286 mg, 0,92 mmol, 61%) LC-MS (M+Na)=335. 'H - NMR (DMSO-d^) δ 0,79 (s, 3H), 1,20 (t, 3H), 2,01 (s, 2H), 2,53-2,77 (m, 4H), 4,09 (q, 2H), 6,67 (d, 2H); 6,95 (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 7,22 (dd, 1H), 7,28 (dd, 2H).
Krok 5
Ethyl-(3-benzy 1-3-methy 1-4-(4-{3-[( 1 -oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy} fenyl)butanoát)
Ke směsi ethyl 3-benzyl-4-(4-hydroxyfenyl)-3-methylbutanoátu (275 mg, 0,88 mmol),
3-(pyridin-l-oxo-2-ylamino)propan-l-olu (178 mg, 1,06 mmol) a trifenylfosfínu (278 mg, 1,06 mmol) vbezvodém THF (4 ml) se v atmosféře argonu při 0 °C pomalu přidal diethylazodikarboxylát (166 μΐ, 1,06 mmol). Reakční směs se míchala přes noc. Rozpouštědlo se odstranilo za sníženého tlaku a zbytek se přečistil zábleskovou chromatografíí za použití směsi 100% EtOAc a následně 10% MeOH/ CH2CI2 /NH4OH jako elučního činidla. Získal se olej 3-benzy 1-3-methy 1-4-(4-( 3-[( 1 -oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy} fenyl)-butanoát (329 mg). NMR byla v souladu se strukturou a ukázala přítomnost nečistot. Sloučenina se takto použila v dalším kroku.
Krok 6 • ·
Ethyl-(3-benzyl-3-methyl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}butanoát)
K ethyl-(3-benzyl-3-methyl-4-(4-{3-[(l -oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy} fenyl)butanoátu) (322 mg) a Pph3 (220 mg, 0,84 mmol) v ledové kyselině octové (5 ml) se přidalo práškové Fe (58 mg, 1,0 mmol). Reakční směs se refluxovala 20 min a zchladila na teplotu místnosti. Železo se odstranilo pomocí magnetu a směs se zakoncentrovala na olej. Olej se přečistil zábleskovou chromatografií za použití směsi 80% EtOAc/hexan jako elučního činidla. Získal se olej 3-benzyl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanoátu (218 mg, 0,48 mmol, výtěžek z dvou kroků 55%) LC-MS (MH+)=447. fH - NMR (DMSO-de ) δ 0,81 (s, 3H), 1,20 (t, 3H), 1,95 (m, 2H), 2,02 (s, 2H), 2,54 - 2,78 (m, 4H), 3,37 (q, 2H); 4,02 (t, 2H), 4,09 (q, 2H), 6,43 (m, 2H), 6,55 (t, 1H), 6,85 (d, 2H), 7,06 (d, 2H), 7,15 (d, 2H), 7,21 (dd, 1H), 7,28 (d, 2H), 7,33 (dd, 1H), 7,95 (d, 1H).
Krok 7
3-benzyl-3-methyl-4-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}butanová kyselina
K ethyl-3-benzyl-3-methyl-4-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanoátu (210 mg, 0,47 mmol) v dioxanu (3 ml) se přidal 1M NaOH (3 ml). Reakční směs se refluxovala
3,5 hodiny, zchladila na teplotu místnosti, okyselila a zakoncentrovala za sníženého tlaku. Zbytek se přečistil gradientovou HPLC s reverzní fází za použití směsi 10 až 50% acetonitril/voda/2%TFA jako elučního činidla. Získala se 3-benzyl-3-methyl-4-{4-[3— (pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}butanová kyselina (131 mg). HRMS (MH+)=447. Vypočteno: 419,2249. Skutečná hodnota: 419,2266. Ή NMR (DMSO-dé) δ 0,80 (s, 3H),
1,95 (s, 2H), 2,05 (m, 2H), 2,55 - 2,83 (m, 4H), 3,48 (m, 2H), 4,05 (t, 2H); 6,83 (dd, 1H),
6,85 (d, 2H), 7,02 (d, 1H), 7,08 (d, 2H), 7,16 (d, 2H), 7,23 (dd, 1H), 7,29 (dd, 2H), 7,84 (dd,
1H), 7,93 (d, 1H), 8,70 (as, 1H), 12,2 (as, 1H).
·» ·· * · · · • · » .· : :
• * ♦ · « »· ©' « » · • » i · · • · · · • · · ·
Příklad 13
4-{ 3-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Ethylester 4-methoxyfenyl-3,3-dimethylbutanové kyseliny (1,6 g, 6,4 mmol) se rozpustil v ledové kyselině octové (12,8 ml) a přidal se 1M bromem v chloridu uhličitém (12,4 ml) a reakční směs se míchala 15 minut za teploty místnosti a atmosféře dusíku, zakoncentrovala a zbytek se zneutralizoval nasyceným roztokem uhličitanu sodného. Alkalický roztok se extrahoval ethylacetátem, promyl vodou a vysušil nad Na2SO4. Pevná látka se přefiltrovala a zakoncentrováním se získalo 1,55 g (74%) požadovaného produktu ve formě olejovité gumy. ’H - NMR (CDCI3) 7,38 (s, 1H), 7,05 (m, 1H), 6,82 (d, 1H), 4,15 (q, 2H), 3,9 (s, 3H), 2,58 (2H,s); 2,18 (s, 2H), 1,25 (t, 3H), 1,01 (s, 6H).
Krok 2
Br'
CO2Et ·»· * » · · · · <
·· .·
Produkt z kroku 1, příklad 13 (0,987 g, 3,0 mmol) se rozpustil v dichlormethanu (10 ml), zchladil se na 0 °C a přidal se 1M bromid boritý v dichlormethanu (6,0 ml). Směs se míchala 30 minut při 0 °C v atmosféře dusíku. Reakce se zastavila přídavkem ethanolu (2,0 ml), zahřála se na teplotu místnosti a míchala se 1 hodinu při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstranilo za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl se nasyceným roztokem uhličitanu sodného, vodou a vysušil nad Na2SO4. Pevná látka se přefiltrovala a zakoncentrováním se získalo 0,795 g (89,2%) požadovaného produktu ve formě světle žlutého oleje. ‘H - NMR (CDC13) 7,30 (m, 1H), 7,05 (d, 1H), 6,95 (d, 1H), 4,15 (q, 2H), 2,58 (2H, s), 2,18 (s, 2H); 1,25 (t, 3H), 1,01 (s, 6H).
Krok 3
O'
Tato sloučenina se připravila podle postupu popsaného v příkladu 5, kroku 1 za použití produktu kroku 2. NMR spektrum produktu bylo v souladu s požadovanou strukturou.
Krok 4
Směs produktu kroku 3 (2,2 g, 4,73 mmol), trifenylfosfinu (1,1 g), práškového železa (440 mg) v ledové kyselině octové (20 ml) se zahřála krefluxu a refluxovala se 30 min v atmosféře dusíku. Směs se zchladila na teplotu místnosti, přefiltrovala přes celit a filtrát se zakoncentroval za vakua. Zbytek se přečistil chromatografií na silikagelu (CH2CI2/CH3OH/NHMH: 97/2,5/0,5) a získalo se 1,4 g požadovaného produktu ve formě gumovité látky. NMR spektrum bylo v souladu s požadovanou strukturou.
• ·
Hydrát trifluoracetátu 4-{3-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanové kyseliny
Produkt kroku 4 (150 mg) se rozpustil ve směsi 1,5 ml methanolu a 1,5 ml THF a 1,5 ml a přidal se roztok 1M NaOH. Reakční směs se míchala 5 hodin při teplotě okolí. Těkavá rozpouštědla se odstranila za vakua a zbývající vodný roztok se okyselil 1,5 ml 1M HC1 a zakoncentrováním za vakua se získal surový produkt. Surový produkt se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril voda 10 až 50% za 30 minut a získalo se 89 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. ’H - NMR (CD3OD) 7,92 (m, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,38 (d, 1H),
7,18 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 7,0 (d, 2H); 6,9 (t, 1H), 4,2 (t, 2H), 3,69 (t, 2H), 2,62 (2H, s), 2,25 (m, 2H), 2,12 (s, 1H), 1,01 (s, 6H); Analytický výpočet pro C20H25 N2O3plus 1,25 CF3CO2H, plus 0,25 H2O: C, 47,55; H, 4,75; A, 4,93. Skutečné hodnoty: C, 47,34; H, 4,62; A, 5,11; Hmotnostní spektrum: (MH+)~421.
Příklad 14
4-{ 3-kyan-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Krok 1
Ν'
CO2Et • · • · · · • · · · · · • · · · · · • · · · ····
Konečný produkt kroku 4, příklad 13 (500 mg) se rozpustil v DMF (10 ml) a vodě (1,0 ml) a reagoval stris(dibenzylidenaceton)-dipaladiem (0) (51 mg) a bis(difenylfosfin)ferocenem (75 mg). Reakční směs se zahřála k refluxu a refluxovala se 20 hodin a atmosféře dusíku. Směs se zchladila na teplotu místnosti a přefiltrovala přes celit za vakua. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl se nasyceným roztokem chloridu amonného a vysušil nad Na2SO4. Pevná látka se odfiltrovala a filtrát se zakoncentroval. Surový produkt se přečistil zábleskovou chromatografií na silikagelu (EA/hexan/NH4OH:80/l9,5/0,5) a získalo se 181 mg požadovaného produktu ve formě olejovité gumy. NMR spektrum bylo v souladu s požadovanou strukturou.
Krok 2
4-{ 3-kyan-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Výše uvedená sloučenina se připravila podle postupu popsaného v příkladu 13, kroku 3 za použití produktu kroku 1 a získal se surový produkt, který se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril voda 10-50% za 30 minut a získala se výše uvedená sloučenina ve formě TFA soli. ’H - NMR (CD3OD) 7,92 (m, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,42 (m, 2H), 7,13 (m, 2H), 6,9 (t, 1H), 4,32 (t, 2H), 3,69 (t, 2H), 2,62 (2H, s), 2,25 (m, 2H), 2,12 (s, 1H), 1,01 (s, 6H); Analytický výpočet pro C20H25 N2O3 plus 1,25 CF3CO2H: C, 55,35; H, 5,19; N, 8,24. Skutečné hodnoty: C, 55,67; H, 5,36; N, 7,81; Hmotnostní spektrum: (MH+)=368.
Příklad 15
4-{ 3-ethenyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
• · • · · · • · · · • · · • · · · ·
Krok 1
Konečný produkt příkladu 13, kroku 4 (500 mg) se rozpustil v Et3N (10 ml) a reagoval s Cul (40 mg), trifenylfosfinem (80 mg), Pd(Ph3P)2Cl2 (40 mg) a (trimethylsilyl)acetylenem (1 ml). Reakční směs se zahřívala 20 hodin v uzavřené zkumavce na 120 °C v atmosféře dusíku. Směs se zchladila na teplotu místnosti a za vakua přefiltrovala přes celit. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl nasyceným roztokem chloridu amonného a vysušil nad Na2SO4 Pevná látka se odstranila filtrací a filtrát se zakoncentroval. Surový produkt se přečistil zábleskovou chromatografií na silikagelu (EtOAc/hexan/NFI4OH: 80/1905/0,5) a získalo se 181 mg požadované sloučeniny ve formě olejovité gumy. NMR spektrum bylo v souladu s požadovanou strukturou.
Krok 2
CO2H
4-{ 3-ethenyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Výše uvedená sloučenina se připravila podle postupu popsaného v příkladu 14, kroku 5 a nahrazením produktu příkladu 14, kroku 1 produktem kroku 1 a získal se požadovaný surový produkt, který se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril voda 20-90% za 30 minut a získala se výše uvedená sloučenina ve formě TFA soli. *H - NMR (CD3OD) 7,92 (m, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,33 - 7,13 (m, 3H), 6,98 (d, 1H), 6,9 (t, 1H), 4,32 (t, 2H), 3,69 (t, 2H),
3,64 (s, 1H), 2,62 (2H, s), 2,25 (m, 2H), 2,12 (s, 1H), 1,01 (s, 6H); Analytický výpočet pro C22H26N3O3 plus 1CF3CO2H: plus 1 CH3OH: C, 58,59; H, 6,10; A, 5,47. Skutečné hodnoty: C, 59,03; H, 6,51; N, 5,37; Hmotnostní spektrum: (MH+)=367.
Příklad 16
5-(3-karboxy-2,2-dimethylpropyl)-2-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzoová kyselina
Krok 1
Produkt příkladu 13, kroku 4 (540 mg) se rozpustil v diizopropylaminu (7,5 ml) a nbutanolu (7,5 ml). Roztok reagoval s Pd(Ph3P)2Cl2 (60 mg). Reakční směs se zahřívala 20 hodin na 100 °C v atmosféře oxidu uhelnatého. Směs se zchladila na teplotu místnosti a za vakua přefiltrovala přes celit. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl nasyceným roztokem chloridu amonného a vysušil nad Na2SO4. Pevná látka se odstranila filtrací a filtrát se zakoncentroval. Surový produkt se přečistil HPLC použitím gradientu acetonitril voda 20 až 90% za 30 minut a získalo se 428 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. Hmotnostní spektrum: (MH+)=471,2.
Krok 2
5-(3-karboxy-2,2-dimethylpropyl)-2-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzoová kyselina
Výše uvedená sloučenina se připravila podle postupu popsaného v příkladu 14, kroku 5 a nahrazením produktu příkladu 14, kroku 1 produktem kroku 1 a získal se požadovaný surový produkt, který se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril voda 20-90% za 30 minut a získala se výše uvedená sloučenina ve formě TFA soli. 'H - NMR (DMSOd6) 7,92 (m, 1H), 7,85 (m, 1H), 7,5 (d, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 6,85 (m, 1H), 4,32 (t, 2H), 3,52 (t, 2H), 3,52 (t, 2H), 3,64 (s, 2H), 2,62 (s, 2H), 2,35 (m, 2H), 2,12 (s, 1H), 9,93 (s, 6H); Analytický výpočet pro C21H26N3O3 plus 1,25 CF3CO2H: plus 0,25 H2O: C, 52,91; H, 5,240; N, 5,25. Skutečné hodnoty: C, 52,97; H, 5,02; N, 5,11; Hmotnostní spektrum: (MH+)==386.
Příklad 17
-acetyl-4 [ [4- [3 -(2-pyridinylamino)propoxy] fenyljmethyl] -4-piperidinoctová kyselina
CO
Krok 1
K roztoku výchozí látky (22 g, 89 mmol) ve 265 ml THF se po kapkách přidal roztok diizopropylaminu lithného (53 ml, 106 mmol, 2M roztok) při teplotě -30 °C až -20 °C. Výsledná směs se zahřála na teplotu místnosti, pak se zchladila na -35 °C, naráz se přidal 4— benzyloxybenzylchlorid (20,8 g, 89 mmol) a výsledná směs se zahřála na 25 °C. Po 24 h se reakce zastavila vodou a extrahovala se ethylacetátem. Získané organické extrakty se promyly H2O, solankou a pak se vysušily nad MgSCL a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získalo se 23 g viskózního oleje. 1H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
.so,
Krok 2
OíBu
BzO >< .OH
K roztoku produktu kroku 1 (22 g, 21 mmol) v 50 ml THF se po kapkách přidal roztok diizobutylaluminium hydridu (41,0 ml, 41,20 mmol, 1M v THF) při teplotě -20 °C. Výsledná směs se míchala 30 min. při -20 °C, a pomalu se zahřála na teplotu místnosti. Za 3h se reakční směs zředila etherem (200 ml) a promyla vodným 1M roztokem kyseliny tertarové. Organické extrakty se vysušily nad MgSO4, přefiltrovaly a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/3) a získalo se 4,2 g viskózního oleje v 0,58g. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
BzO.
OH
Produkt kroku 2 (5,38 g; 13,0 mmol) se rozpustil ve 43 ml THF a 43 ml 4M HC1 v dioxanu a reakce se míchala při 25 °C až LCMS prokázalo nepřítomnost výchozí látky. Reakční směs se odpařila dosucha za sníženého tlaku a pak se opět rozpustila v etheru a dvakrát odpařila. Výsledná surová směs se rozpustila v roztoku obsahujícím 57 ml dichlormethanu, 10,8 ml triethylaminu (7,88 g; 77,8 mmol) a 80 mg dimethylaminopyridinu. Po zchlazení na 0 °C se přidalo 2,6 ml anhydridu kyseliny octové a reakce se pak zahřála na teplotu místnosti. Po 18 hodinách se reakce zředila dichlormethanem, promyla vodou a solankou a pak se vysušila nad MgSO4, přefiltrovala a zakoncentrovala. Zbytek se rozpustil v 108 ml methanolu. Při 0 °C se přidal se vodný, nasycený roztok K2CO3 (65 ml). Reakční směs se zahřála na teplotu místnosti. Za 1,5 h se přidala ledová kyselina octová pro úpravu pH na 6,5. Reakce se zakoncentrovala a produkt se extrahoval ethylacetátem. Organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad MgSO4, přefiltrovaly a zakoncentrovaly. Zbytek se rozpustil chromatograficky (SÍO2; CH2CI2 /MeOH/ NFUOH=90/10/0,2) a získalo se 2,8 g viskózního oleje. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
K produktu kroku 3 (2,08 g; 5,98 mmol) v 82 ml dichlormethanu se přidal N— methylmorfolin-N-oxid (1,036 g, 2,94 mmol) s přídavkem 4 angstrom molekulárního síta (2,945 g). Přidal se tetrapropylamoniumruthenistan (103,6 mg, 0,29 mmol) při 0°C a reakce se pak zahřála na teplotu místnosti. Za 1,5 h se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu silikagelu (2”) a promyla CH2CI2 /MeOH (9/1). Filtrát se zakoncentroval a zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, CH2CI2 /MeOH/ NHtOH=95/5/0,l) a získalo se 1,08 g viskózního oleje požadovaného produktu. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (1,58 g; 4,6 mmol) v 9 ml THF se po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (4,6 ml, 4,6 mmol, 1,0 M v THF) při 0 °C. Po 15 min. se přidala k roztoku produktu č. 4 (1,95 ml, 7,08 mmol) v 6 ml THF při 0 °C. Reakce se míchala 1 hodunu a pak se reakce zastavila H2O. Produkt se • ·
extrahoval dichlormethanem. Vodná vrstva se extrahoval dichlormethanem. Získané organické vrstvy promyly H2O, solankou vysušily nad MgSCL a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (S1O2; CH2CI2 /MeOH/ NH4OH=95/5/0,l) a získalo se 1,8 g surového oleje. Ten se rozpustil v 166 ml THF a 2,0 a 110 ml 2,0 roztoku HC1. Reakce se míchala 1 hodinu za teploty místnosti. Roztok se přemístil do samostatné nálevky a několikrát extrahoval ethylacetátem. Organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad MgSO4 a zakoncentro váním se získalo 1,6 g produktu. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
Dusičnan stříbrný (0,648 g, 3,82 mmol) se rozpustil v 1 ml H2O a přidal se k roztoku produktu kroku 5 (0,698 g, 1,91 mmol) v 9 ml ethanolu. Po kapkách se přidal roztok NaOH (0,301 g, 7,6 mmol) v 1,73 ml H2O, a reakce se pak míchala 2 hodiny při teplotě místnosti. Reakce se zředila 7 ml H2O, ethanol se o odpařil a výsledný roztok se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se okyselila 1M vodným roztokem HC1 na pH=5 a extrahovala ethylacetátem. Organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad MgSO4, a zakoncentrováním se získalo 0,371 g oleje. Olej se rozpouštěl přes noc při 25 °C v 10 ml 4M HC1 vdioxanu a 10 ml absolutního ethanolu. Reakční směs se odpařila dosucha, smíchala s ethylacetátem a extrahovala nasyceným roztokem uhličitanu sodného. Organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad MgSO4, přefiltrovaly a odpařením se získala požadovaná sloučenina. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7 .N.
CO2E1
Produkt kroku 6 (0,131 g) se rozpustil v 25 ml EtOH a následně se přidalo 50 mg 20% Pd(OH)2/C. Reakční směs se zastavila dusíkem (5x), vodíkem (5x) a hydrogenovala se při tlaku 275 kPa 2 h při teplotě místnosti. Katalyzátor se odstranil filtrací a promyl 2x20 ml EtOH. Roztoky z promytí a filtráty se smíchaly a odpařením dosucha se získal požadovaný produkt. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 8
K produktu kroku 8 (406 mg, 1,26 mmol) a trifenylfosfinu (508 mg, 1,94 mmol) v 4,5 ml THF se při 0 °C přidal diethylazodikarboxylát (312 mg, 1,79 mmol) a trifenylfosfm (508 mg, 1,94 mmol) v 4,5 ml THF. Přidal se 2-(3-hydroxypropylamin)pyridin N-oxid (485 mg,
2,89 mmol). Reakce zahřála na 40 °C. Po 15 min se reakce zchladila na teplotu místnosti a míchala 18 h. Reakce se zakoncentrovala a zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, dichlormethan/2-propanol/octová kyselina=95/5/0,5) a získal se produkt v 406 mg surové směsi. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou
Krok 9
Směs produktu kroku 8 (482 mg), práškové železo (100,5 mg, 1,8 mmol), trifenylfosfin (314 mg, 1,8 mmol) a kyselina octová (8,5 ml) se refluxovala 30 min. Zchlazená reakční směs se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla ethylacetátem.
• · • · · ·
Zakoncentrováním filtrátu se získal olej. Tato směs produktu se použila bez dalšího přečištění. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 10
CO2H l-acetyl-4[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]-4-piperidinoctová kyselina
Produkt kroku 9 se rozpustil v 5 ml methanolu a 5 ml 1M vodného roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti, okyselila kyselinou trifluoroctovou (0,35 cm) a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil HPLC s reverzní fází za použití gradientu voda-acetonitril 10-50% za 30 min a získalo se 107 mg. *H - NMR (acetonitril-d3) δ 1,38-1,66 (br, 4H), 2,09 (penten, 2H); 2,11 (s, 3H), 2,22 (s, 2H), 2,74 (s, 2H), 3,38 (a, 2H), 3,50 (t, 2H), 3,59 (a, 1H), 3,82 (a, 1H), 4,02 (t, 2H), 6,78 (t, 1H), 6,82 (d, 2H), 6,97 (d, 1H), 7,10 (d, 2H), 7,73 (d, 1H); 7,82 (t, 1H). Analytický výpočet pro C24H3iN3O4 plus CF3CO2H: plus H2O: C, 48,30; H, 5,09; N, 5,91. Skutečné hodnoty: C, 48,22; H, 4,82; N, 6,31.
Příklad 18 (l-acetyl-3{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzyl} piperidin-3-yl)octová kyselina
O
CH3 co2h • · · ·
Krok 1
-terc.butyl-3-ethylpiperidin-1,3-dikarboxylát
Roztok ethylenpipekolátu (20,0 g, 127 mmol), di-terc-butyldikarbonátu (27,8 g, 127 mmol) v 60 ml THF se míchal 18 h při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpařilo, zbytek se přečistil chromatograficky (S1O2, ethylacetát/hexan=l/4) a získalo se 27,7 g (85%) viskózního oleje. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
l-terc.butyl-(3-ethyl-3-(4-methylbenzyl)piperidin-l,3-dikar boxy lát)
K roztoku lithiumdiizopropylaminu (11,7 ml, 23,4 mmol, 2M roztok) v 25 ml THF se po kapkách při -20 °C přidal roztok produktu kroku 1 (5,0 g, 19,5 mmol) v 20 ml THF. Výsledná směs se míchala 15 min. při 0 °C a následně se zahřála na teplotu místnosti. Za lh se reakce zchladila na -20 °C a po kapkách se přidal roztok 4-methoxybenzylchloridu (3,1 g,
19,5 mmol) v 20 ml THF. Výsledná směs se míchala lhodinu při -10 °C a následně se zahřála na 35 °C. Za lhodinu se reakce zastavila 25 ml nasyceného vodného roztoku NH4CI. Produkt se extrahoval ethylacetátem (2 x 100 ml). Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Smíchané vrstvy se promyly H2O, solankou, pak se vysušily nad Na2SO4 a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získalo se 5,2 g viskózního oleje. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · · ·
Terc.butyl-(3-(hydroxymethyl)-3-(4-methylbenzyl)piperidin-l-karboxylát)
K roztoku produktu kroku 2 (1,5 g, 6,0 mmol) v 15 ml THF se po kapkách při -20 °C přidal roztok diizobutylaluminiumhydridu (12,0 ml, 12,0 mmol, 1M v THF). Výsledná směs se míchala 20 min. při -20 °C a následně se zahřála na teplotu místnosti. Za 3h se reakce zředila etherem (70 ml) a promyla 50 ml vodné 1M kyseliny tartarové. Organické extrakty se vysušily nad MgSO4, přefiltrovaly a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (SiO2 ethylacetát/hexan=l/3) a získalo se 0,58 g viskózní látky. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
CH3 [ 1 -acetyl-3-(4-methylbenzyl)piperidin-3-yl]methanol
K roztoku produktu z kroku 3 (0,48 g, 1,4 mmol) v 12,5 ml dichlormethanu se při 0 °C přidala trifluoroctová kyselina (12,5 ml). Reakce se zahřála na teplotu místnosti. Po 2 hodinách se rekce zakoncentrovala za vakua. Zbytek se rozpustil v 20 ml dichlormethanu a pak se přidal triethylamin (1,82 g, 18,0 mmol) a dimethylaminopyridin (30 mg). Kvýše uvedené směsi se při 0 °C přidal acetanhydrid (1,13 ml, 12,0 mmol). Reakční směs se zahřála « · « · · · na teplotu místnosti. Za 18 h se reakce zředila 150 ml dichlormethanu, promyla 10 ml H2O, solankou vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se rozpustil v 25 ml methanolu. Při 0 °C se přidal vodný nasycený roztok K2CO3 (15 ml). Reakce se zahřála na teplotu místnosti. Za 1,5 hodiny se přidala ledová kyselina octová pro úpravu pH na 6,5. Organické extrakty se promyly solankou, vysušily nad MgSO4 a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (SiO2; CH2C12 /MeOH/ NH4OH=90/10/0,2) a získalo se 0,14 g viskózního oleje. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
-acetyl-3 -(4-methylbenzyl)piperidin-3 -karbaldehyd
K roztoku produktu kroku 4 (0,3 g, 1,08 mmol) v 15 ml dichlormethanu se přidal N— methylmorfolin-N-oxid (0,19 g, 1,62 mmol) a práškové 4 angstrom molekulární síto (0,5 g) v 15 ml dichlormethanu. Při 0 °C přidal tetrapropylamoniumruthenistan (19 mg, 0,054 mmol) a reakce se zahřála na teplotu místnosti. Po 1,5 hodiny se rekce přefiltrovala přes krátkou kolonku silikagelu (2) a promyla CH2C12 /MeOH (9/1). Filtrát se zakoncentroval a zbytek se přečistil chromatograficky (SiO2; CH2C12 /MeOH/ NH4OH=:95/5/0,l) a získalo se 0,25 g viskózní látky. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
» · » · [l-acetyl-3-(4-methylbenzyl)piperidin-3-yl]acetaldehyd
K roztoku methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (3,64 g, 10,6 mmol) v 15 ml THF se při 0 °C v atmosféře N2 přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (10,6 ml, 10,6 mmol, l,0M v THF). Po 15 min. se roztok přidal k roztoku produktu kroku 5 (1,95 g, 7,08 mmol) v 15 ml THF při 0 °C. Reakce se míchala lhodinu a pak se zastavila přídavkem H2O. Vodná vrstva se extrahovala dichlormethanem. Smíchané organické vrstvy se promyly vodou, solankou, vysušily nad Na2SO4 přefiltrovaly a zakoncentrovaly. Zbytek se přečistil chromatograficky (SiO2; CH2C12 /MeOH/ NH4OH=95/5/0,l) a získal se olej. Tento se rozpustil v 40 ml THF a 40 ml 1,0 M vodného roztoku HC1. Reakce se míchala 2 hodiny při 25 °C. K neutralizaci reakční směsi se přidal prášek uhličitanu draselného. Organická vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrováním se získalo 1,6 g produktu. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7
Ethyl-([l-acetyl-3-(4-methylbenzyl)piperidin-3-yl]acetát)
Dusičnan stříbrný (1,87 g, 11,0 mmol) se rozpustil v 3 ml H2O a přidal se k roztoku produktu kroku 6 (1,6 g, 5,5 mmol) v 25 ml ethanolu. K roztoku dusičnanu stříbrného se po kapkách se přidal roztok připravený rozpuštěním NaOH (0,88 g, 22,0 mmol) v 4,0 ml H2O. Reakce se pak míchala 2 hodiny při 25°C. Reakce se zředila 15 ml H2O, ethanol se odstranil a výsledný zbytek se extrahoval ethylacetátem (2 x 60 ml). Vodné extrakty se okyselily IN vodným roztokem HC1 na pH=5 a extrahovaly ethylacetátem (3 x 100 ml). Organická vrstva se promyla 15 ml solanky, vysušila nad MgSO4, přefiltrovala a zakoncentrováním se získalo
1,1 g čistého oleje. Olej se rozpustil v 30 ml ethanolu a 15 ml 2M HCl/dioxan. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti a pak se zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, CH2C12 /MeOH/ NH4OH=95/5/0,l) a získalo se 0,88 g gumovité pevné látky. 1H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou struOkturou.
• · · * » ·
Ethy 1-([ 1 -acetyl-3 -(4-hydroxybenzy l)piper idin-3 -yl] acetát)
K roztoku produktu kroku 7 (0,57 g, 1,71 mmol) v 1,8 ml dichlormethanu se přidal roztok bromidu boritého (3,85 ml, 3,85 mmol, 1,0 M v dichlormethanu). Reakční směs se míchala 5 hodin při teplotě místnosti a reakce se zastavila 0,393 ml ethanolu. Směs se zředila ethylacetátem a dichlormethanem a pak se promyla nasyceným roztokem NaHCCb, vysušila nad MgSO4, přefiltrovala a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatograficky (S1O2, MeOH/ CH2CI2 =5/95) se získalo 0,348 g produktu. ’H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 9
Ethyl-([l-acetyl-3-(4-{3-[(l-oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy}benzyl)piperidin-3-yl]acetát)
K produktu kroku 8 (348 mg, 1,09 mmol) a triethylfenylfosfinu (437 mg, 1,66 mmol) v 3,9 ml THF se při 0 °C přidal diethylazodikarboxylát (267 mg, 1,53 mmol) a reakce se míchala 15 min. Přidal se 2-(3-hydroxyproyplamin)pyridin N-oxid (418 mg, 2,48 mmol). Reakce zahřála na 40 °C. Po 15 min se reakce zchladila na teplotu místnosti a míchala 18 h. Reakce se zakoncentrovala a zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, dichlormethan/2-propano Poctová kyselina=95/5/0,5) a získal se produkt v 406 mg surové směsi. ]H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
·* ·«··
Ethyl-(( 1 -acetyl-3-{ 4-[3-(pyridin-2-yl)amino)propoxy]benzyl} piperidin-3-yl]acetát)
Směs produktu kroku 9 (335 mg), práškové železo (74 mg, 1,3 mmol), trifenylfosfín (236 mg, 0,9 mmol) a kyselina octová (6,3 ml) se refluxovala 30 min. Zchlazená reakční směs se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla ethylacetátem. Zakoncentrováním filtrátu se získalo 108 mg oleje. Tato směs produktu se použila bez dalšího přečištění. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 11
(1 -acetyl-3-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzyl} piperidin-3-yl)octová kyselina
Produkt kroku 10 (125 ml) se rozpustil v 10 ml methanolu a 10 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti, okyselila kyselinou trifluoroctovou (0,77 ml) a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil HPLC s reverzní fází za použití gradientu acetonitril 10-50% za 30 min a získalo se 90,7 mg. MS: (M+l)=426,2. *H NMR (CH3CN) δ 1,39-1,76 (cmplx, bnd, 4H); 2,15, 2,07 (s, 3H), 2,12 (p, 2H), 2,14, 2,10 (d, 1H), 2,17,2,28 (d, 1H), 2,68, 2,75 (d, 1H); 2,73,2,77 (d, 1H); 3,23, 3,14 (edd, 1H); 3,11, 3,28 (d, 1H); 3,54 (t, 2H); 3,76, 3,68 (d, 1H); 3,61, 3,86 (dd, 1H), 4,08 (t, 2H), 6,82 (t, 1H); 6,85,
6,87 (d, 2H); 7,01 (d, 1H); 7,17, 7,13 (d, 2H); 7,73 (d, 1H); 7,86 (t, 1H). Upozornění: Mnoho signálů je dvojitých, což je způsobeno omezenou rotací okolo amidové vazby. Dva chemické • · • · · · posuny jsou uvedeny pro protony, které mají odlišné posuny u rotametrů, s chemickým posunem hlavního rotameru uvedeného jako první. Analytický výpočet pro C24H31N3O4 plus
2,2 CF3COOH: C, 49,77; H, 5,03; A, 6,13. Skutečné hodnoty: C, 49,47; H, 5,11; A, 6,49.
Příklad 19
4-{ 3-brom-5-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethyl-butanová kyselina
Br H ,J\L .N
CO2K
Krok 1
CH3O
ch2oh (3-fluor-4-methylfenyl)methanol
3-fluor-p-anisaldehyd (12,5 g, 81,1 mmol) se rozpustil ve 100 ml THF. Během 30 min. se při 0 °C přidal v atmosféře N2 roztok diizobutylaluminium hydridu (100 ml, 1M v THF). Reakce se míchala 30 minut a zastavila přídavkem 250 ml 1M roztoku HC1. Výsledná směs se míchala 15 minut a přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu®. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se vysušila nad MgSCU a zakoncentrováním se získalo 11,6 g viskózního oleje. Produkt se použil bez dalšího přečištění. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
CH3O
F
CH,CI • · • ·
4-(chlormethyl)-2-fluor-1 -methylbenzen
K roztoku produktu kroku 1 (1,0 g, 6,4 mmol) v 10 ml etheru se po kapkách během 30 minut při 0 °C přidal thionylchlorid (0,892 g, 7,5 mmol). Po 30 minutách se reakce opatrně zastavila přídavkem drceného ledu a zředila H2O. Produkt se extrahoval etherem. Organická vrstva se promyla nasyceným roztokem NaHCOs, solankou, vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/9) a získala se bezbarvá kapalina v množství 10,5 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
CH.
CHO
3-(3-fluor-4-methylfenyl)-2,2-dimethylpropanal
Směs hydroxidu sodného (2,8 g, 70 mmol) a tetrabutylamoniumjodidu (0,6 g, 1,6 mmol) v 8 ml benzenu a 2,8 ml H2 O se v atmosféře argonu zahřívala při 70 °C a vytvořila se tak homogenní směs. K výše uvedenému roztoku se po kapkách přidal izobutylaldehyd (5,76 g, 80 mmol) a směs produktu kroku 2 (10,5 g, 60,1 mmol). Výsledná směs se zahřívala 6 hodin při 70 °C až 75°C a zchladila se na teplotu místnosti. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl H2O. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=5/95) a získal se bezbarvý olej v množství
7,3 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
CHO • · · ·
4-(3-fluor-4-methy lfeny 1)-3,3-dimethy Ibutanal
Ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (18,9 g, 55 mmol) v 65 ml THF se po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (55 ml, 55 mmol, 1M v THF) a směs se míchala 15 min. Pak se po kapkách ke směsi produktu kroku 3 při 0 °C přidal roztok produkt kroku 3 (7,3 g, 34,7 mmol) v 35 ml THF. Po 5 minutách se reakce zastavila přídavkem H2O. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla H2O, solankou, vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=5/95) a získal se bezbarvá kapalina v množství 6,3 g. Produkt se rozpustil ve 100 ml THF a 100 ml 2N HC1 zrefluxovala 30 minut. Reakce se zakoncentrovala. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl H2O. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla solankou, vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=15/85) a získal se bezbarvý olej v množství
3,8 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Ethyl-(4-(3 -fluor-4-methy lfenyl)-3,3 -dimethy lbutanoát)
K roztoku produktu kroku 4 (3,8 g, 16,9 mmol) v 80 ml ethanolu se přidal roztok dusičnanu stříbrného (5,76 g, 33,9 mmol) ve 20 ml H2 O. Po kapkách se pak za teploty místnosti přidal hydroxid sodný (2,71 g, 67,7 mmol) v 10 ml H2 O. Po 2 hodiny se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® . Filtrát se zředil H2O a extrahoval etherem (3 x 30 ml). Vodná vrstva se okyselila koncentrovanou HC1 a extrahovala chloroformem. Vrstva chloroformu se vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se rozpustil v 50 ml ethanolu a 25 ml roztoku 4M HCl/dioxan. Míchal se 60 hodin za teploty místnosti a následným zakoncentrováním se získal bezbarvý olej v množství 4,14 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• ·
Krok 6
HO.
CO2Et
Ethyl-(4-(3-fluor-4-hydroxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
Produkt kroku 5 (0,75 g, 2,8 mmol) se rozpustil v 10 ml dichlormethanu. V atmosféře
N2 se po kapkách při 0 °C přidal roztok bromidu boritého (5,6 ml, 5,6 mmol, 1M v dichlormethanu). Reakční roztok se zahřál na teplotu místnosti. Po 30 minutách se reakce opatrně zastavila přídavkem ethanolu. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl 1M HC1. Organická vrstva se dále promyla 5% roztokem NaHCO3, solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získala se čirý olej v množství 0,62 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7
Ethyl-(4-(3-brom-5-fluor-4-hydroxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
K roztoku produkt kroku 6 (1,58 g, 6,2 mmol) v 30 ml Ccl4 se během 5 minut při 0 °C přidal roztok bromidu (12,4 ml, 12,4 mmol, 1,0 M v Ccfi ). Reakce se míchala 30 min. při teplotě místnosti a pak se zastavila přídavkem roztoku NaHCCb. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla solankou, vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/9) a získal se bezbarvý olej v množství 0,73 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · · · · · . ·· ···· .·· : · i < ........ ..· ·..··..·
Krok 8
CO2Et
Ethyl-(4-[4-(3-aminopropoxy)-3-brom-5-fluorfenyl]-3,3-dimethylbutanoát)
K roztoku produktu kroku 7 (0,72 g, 2,16 mmol) a trifenylfosfinu (0,734 g, 2,8 mmol) v 13 ml THF se při teplotě místnosti přidal roztok azodikarboxylátu (0,488 g, 2,8 mmol) v 3 ml THF a reakce se míchala 15 min. Pak se přidal terc.butyl N-(3-hydroxypropyl) karbamát (0,491 g, 2,8 mmol). Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti. THF se odpařil a zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získal se olej zlaté barvy v množství 0,87 g. Tento produkt se rozpustil v 10 ml ethanolu a 10 ml směsi 4M HCl/dioxan a reakce se míchala 1 hodinu při teplotě místnosti. Odpařením rozpouštědel se získal se olej zlaté barvy v množství 0,734 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 9
COgEt
Ethyl-(4-{3-brom-5-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát)
Směs produktu kroku 8 (0,725 g, 1,24 mmol) se zahřívala 18 h v atmosféře Nz při 115 °C s 4-methylmorfolinem (1,01 g, 10 mmol) a 2-fluorpyridinem (10 ml). Zchlazená reakce se zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, CH2CI2/CH3 OH/NH4 OH=97/2/l) a získal se hnědý olej v množství 0,251 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 10
4-{ 3-brom-5-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Produkt kroku 9 (0,254 g, 0,54 mmol) se rozpustil v 10 ml methanolu a 10 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti, pak se okyselila kyselinou trifluoroctovou (5 ml). Rozpouštědla se odpařila a zbytek se přečistil HPLC s použitím gradientu acetonitrilu 10-50% za 30 min. a získalo se 0,213 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou. FAB-MS: (M+2)=441,3. 1H NMR (CDCfl) δ 1,05 (s, 6H), 2,20 (p, 2H), 2,22 (s, 2H), 2,63 (s, 2H), 2,68 (q, 2H), 4,20 (t, 2H), 6,74 (t, 1H), 6,93 (dd, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,83 (m, 2H), 9,66 (br, 1H); Hnal. Výpočet pro C20H25 N2 O3 Obr plus 1,75 CH3 COOH: C, 44,18; H, 4,06; N, 4,38. Skutečné hodnoty: C, 44,05; H, 4,16; N, 4,25.
Příklad 20
4-{ 3-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Krok 1
CO2h
CH3O,
CH2OH • · (3 -fluor-4-methylfenyl)methano 1
3-Fluor-p-anisaldehyd (12,5 g, 81,1 mmol) se rozpustil v 100 ml THF. V atmosféře N2 se při 0 °C během 30 minut přidal roztok diizobutylaluminiumhydridu (100 ml, 1M v THF). Reakce se míchala 30 minut a pak se zastavila přídavkem 250 ml 1M roztoku HC1. Směs se míchala 15 minut a pak se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu®. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se vysušila nad MgSCL a zakoncentrováním se získal olej v množství 11,6 g. Produkt se použil bez dalšího přečištění. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
CH3O.
ch2ci
4-(chlormethyl)-2-fluor-1 -methylbenzen
K roztoku produktu kroku 1 (1,0 g, 6,4 mmol) se po kapkách při 0 °C přidal thionylchlorid (0,892 g, 7,5 mmol). Za 30 minut se reakce opatrně zastavila rozdrceným ledem a zředila H2O. Produkt se extrahoval etherem. Organická vrstva se promyla nasyceným NaHCO3, solankou a vysušila nad Na2 SO4. Ether se odpařil a zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/9) a získala se čirá kapalina v množství
10,5 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
3-(3-fluor-4-methylfenyl)-2,2-dimethylpropanal
Směs hydroxidu sodného (2,8 g, 70 mmol) a tetrabutylamoniumjodidu (0,6 g, 1,6 mmol) v 8 ml benzenu a 2,8 ml H2 O se v atmosféře argonu zahřívala při 70 °C a vytvořila se • · • · tak homogenní směs. K výše uvedenému roztoku se po kapkách přidal izobutylaldehyd (5,76 g, 80 mmol) v 20 ml benzenu a směs produktu kroku 2 (10,5 g, 60,1 mmol). Výsledná směs se zahřívala 6h při 70 °C - 75°C. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl H2 O. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSC>4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=5/95) a získal se bezbarvý olej v množství 7,3 g (58%). NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
4-(3-fluor-4-methylfenyl)-3,3-dimethylbutanal
Ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (18,9 g, 55 mmol) v 65 ml THF se po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (55 ml, 55 mmol, 1M v THF) a směs se míchala 15 min. Pak se po kapkách při 0 °C a za míchání přidal roztok produkt kroku 3 (7,3 g, 34,7 mmol) v 35 ml THF Po 5 min. se reakce zastavila přídavkem H2O. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla H2O, solankou, vysušila nad Na2SC>4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=5/95) a získala se bezbarvá kapalina v množství 6,3 g. Produkt se rozpustil ve 100 ml THF a 100 ml 2M HC1 se refluxovalo 30 min a zchladilo na teplotu místnosti. THF se odpařil. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl H2 O. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organické vrstva se promyla solankou, vysušila nad Na2SC>4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=15/85) a získal se bezbarvý olej v množství
3,8 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
CH3CL
CO2Et
K roztoku produktu kroku 4 (3,8 g, 16,9 mmol) v 80 ml ethanolu se přidal roztok dusičnanu stříbrného (5,76 g, 33,9 mmol) ve 20 ml H2 O. Po kapkách se pak za teploty místnosti přidal hydroxid sodný (2,71 g, 67,7 mmol) v 10 ml H2O. Po 2 hodiny se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® . Filtrát se zředil H2 O a extrahoval etherem (3x30 ml). Vodná vrstva se okyselila koncentrovanou HC1 a extrahovala chloroformem. Organická vrstva se vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se rozpustil v 50 ml ethanolu a 25 ml 4 M roztoku HC1 v dioxanu. Míchal se 60 hodin za teploty místnosti, ethanol a dioxan se odpařil a získal se čirý produkt ve formě bezbarvého oleje v množství 4,14 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
HO.
CO2Et
Ethyl-(4-(3-fluor-4-hydroxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
Produkt kroku 5 (0,75 g, 2,8 mmol) se rozpustil v 10 ml dichlormethanu. V atmosféře N2 se po kapkách při 0°C přidal roztok bromidu boritého (5,6 ml, 5,6 mmol, 1M v dichlormethanu). Reakční roztok se zahřál na teplotu místnosti. Po 30 minutách se reakce opatrně zastavila přídavkem ethanolu. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl 1M HC1. Organická vrstva se promyla 5% roztokem NaHCO3, solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získal se olej v množství 0,62 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• « 4
100
Krok 7
Ethyl-(4-(3-fluor-4-{3-[(l-oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy}fenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
O
K roztoku produkt kroku 6 (0,60 g, 2,36 mmol) a trifenylfosfínu (0,786 g, 3,0 mmol) v 24 ml THF se za teploty místnosti přidal roztok azodikarboxylátu (0,522 g, 3,0 mmol) v 6 ml THF a reakce se míchala 15 minut. Pak se přidal 2-(3-hydroxypropylamino)pyridin N-oxid (0,504 g, 3,0 mmol). Reakce se míchala 18 h za teploty místnosti. THF se zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/4) a získal se světle hnědý olej v množství 0,64 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 8
Ethyl-(4-{3-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát)
Směs produktu kroku 7 (640 mg, 1,6 mmol), 10% Pd/C (400 mg, 0,36 mmol), cyklohexanu (4,0 ml, 39,5 mmol) a 2-propanolu (20 ml) se refluxovala 6h. Reakce se zchladila na teplotu místnosti. Přidalo se další 10% Pd/C (250 mg, 0,23 mmol) a cyklohexan (2,0 ml, 19,8 mmol). Po 18 hodinách refluxu se reakce zchladila na teplotu místnosti, přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla 100 ml 2-propanolu. Zakoncentrováním filtrátu se získalo 380 mg oleje. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• ·· ·
4-{ 3-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Produkt kroku 8 (370 mg, 0,95 mmol) se rozpustil v 20 ml methanolu a 20 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 16 hodin při teplotě místnosti a okyselila se kyselinou trifluoroctovou (3 ml). Rozpouštědla se odpařila a zbytek se přečistil HPLC Rozpouštědla se odpařila a zbytek se přečistil HPLC s použitím gradientu acetonitrilu 10-50% za 30 min. a získalo se 300 mg. FAB-MS: (MH+)=361. 1 H NMR (CDC13 ) δ 1,03 (s, 6H), 2,20 (s, 2H), 2,22 (p, 2H), 2,62 (s, 2H), 3,68 (q, 2H), 4,14 (t, 2H), 6,72 (t, 1H), 6,86-6,98 (m, 4H), 7,70 (m, 2H); Hnal. Výpočet pro C20H25 N2 O3 Obr plus 1,4 CH3 COOH: C, 52,66; H, 5,12; N, 5,39. Skutečné hodnoty: C, 52,56; H, 5,23; N, 5,09.
Příklad 21
3-methyl-3-pyridin-3-yl-4-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanová kyselina
K roztoku ethyl-3-pyridylacetátu (15,0 g, 90,8 mmol) v 75 ml THF se po kapkách při -70 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (95 ml, 95 mmol, 1M v THF) . Za 1
102 hodinu se přidal roztok methyljodidu (14,2 g, 100 mmol) v 25 ml THF. Reakce se zahřála na teplotu místnosti a nalila do 5% roztoku Na2SO3 (400 ml). Produkt se extrahoval ethylacetátem. Organická vrstva se promyla H2O, solankou, vysušila nad Mg SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=T/l) a získala se hnědá kapalina v množství 14,9 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
Ethyl-(2-methyl-3-(4-methylfenyl)-2-pyridin-3-ylpropanoát)
Roztok produktu kroku 1 (7,5 g, 42,1 mmol) se rozpustil v 50 ml THF a po kapkách při -70 °C se přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)aminu (45 ml, 45 mmol, 1,0 M v THF). Reakce se míchala 1 h při -70 °C a pak se přidal roztok 4-methoxybenzylchloridu (7,8 g, 50 mmol) v 25 ml THF. Reakce se zahřála na teplotu místnosti a zakončila se 5% roztoku Na2SO3 (200 ml). Produkt se extrahoval ethylacetátem (3x100 ml). Organická vrstva se promyla H2O, solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/l) a získala se hnědá kapalina v množství
11,7 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
2-methyl-3-(4-methylfenyl)-2-pyridin-3-ylpropan-1 -ol • ·
103
K roztoku produktu kroku 2 (11,6 g, 38,7 mmol) ve 100 ml THF se při 0 °C během 20 minut přidal roztok diizobutylaluminiumhydridu (120 ml, 120 mmol, 1,0 M v THF). Za 1 hodinu se reakce zředila 25 ml ethylacetátu a ukončila přídavkem 75 ml H2 O. Výsledná směs se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla ethylacetátem. Filtrát se extrahoval ethylacetátem (3 x 100 ml). Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, etyhlacetát) se získala se světle hnědá kapalina v množství 4,1 g. NMR. spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
2-methyl-3-(4-meťhylfenyl)-2-pyridin-3-ylpropan
Směs produktu kroku 3 (4,1 g, 16 mmol), N-methylmorfolin-N-oxidu (2,9 g, 25 mmol), suchého molekulárního síta (8 g) a dichlormethanu (35 ml) se míchala 15 minut při teplotě místnosti. Pak se přidal tetrapropylamoniumperruthenistan (281 mg, 0,8 mmol). Reakce se sledovala podle TLC, přidal se další N-methylmorfolin-N-oxid (0,73 g, 6,3 mmol), suché molekulární síto (2 g) a tetrapropylamoniumperruthenistan (70,3 mg, 0,2 mmol). Za 2,5 h se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu®. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=4/l) a získala se světle hnědá kapalina v množství 1,66 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
CHO
104 • ♦ «9 ·· ·« • I * * » * · • · · · » · · * • * » * · * * • 9 · · * » • 99« * · 9 · * *
3-methyl-4-(4-methylfenyl)-3-pyridin-3-ylbutanal
V atmosféře N2 se ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (3,43 g, 10 mmol) v 25 ml THF po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (10,5 ml, 10,5 mmol, 1,0 M v THF). Po 15 min. se přidal k roztoku produktu kroku 4 (1,65 g, 6,5 mmol) v 15 ml THF při 0 °C . Reakce se míchala 1 h a pak se zastavila solankou. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Organická vrstva se zakoncentrovala. Zbytek se rozpustil v 50 ml THF a 50 ml roztoku 2N HC1. Reakce se míchala 18 h při teplotě místnosti. THF se odpařil a zbytek se zředil ethylacetátem a zásadité prostředí se vytvořilo roztokem 1N NaOH. Produkt se řádně extrahoval ethylacetátem. Organická vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=3/l) a získal se hnědý olej v množství 1,37 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
Ethyl-(3-methyl-4-(4-methylfenyl)-3-pyridin-3-ylbutanoát)
Ke směsi produktu kroku 5 (1,37 g, 5,1 mmol) v 40ml ethanolu se přidal roztok dusičnanu stříbrného (1,73 g, 10,2 mmol) v 5 ml H2O. Po kapkách se za teploty místnosti přidal roztok hydroxidu sodného (0,816 mg, 20,4 mmol) v 5 ml H2O. Za 2 hodiny se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu®. Zbytek se zředil H2O, okyselil 1M HC1 a zakoncentrováním se získalo 0,7 g žluté pevné látky. Tato žlutá pevná látka se rozpustila v 15 ml ethanolu a 15 ml 4M HC1 v dioxanu. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti. Ethanol a dioxan se odpařil. Zbytek se zředil ethylacetátem a promyl 10% roztokem K2CO3. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila nad MgSCh a zakoncentrováním se získal světle hnědý olej v množství 0,584 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · ···· · · · · · · • · · · ···· · · · io5 . · : : * : :: : ’: :. :
······ ·· ·· ·» · ·
Krok 7
Ethyl-(4-(4-hydroxyfenyi)-3-methyl-3-pyridin-3-ylbutanoát)
Produkt kroku 6 (0,588 g, 1,85 mmol) se rozpustil v 10 ml dichlormethanu. V atmosféře N2 se po kapkách při 0 °C přidal roztok bromidu boritého (3,5 ml, 3,5 mmol) v 1M dichlormethanu). Reakce se zahřála na teplotu místnosti. Po 30 minutách se reakce opatrně zastavila 10 ml ethanolu. Výsledná směs se míchala 10 min. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl 10% roztokem K2CO3. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila MgSC>4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, etylacetát/hexan=2/8) a získal se světle hnědý olej - 0,197 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 8
Ethyl-(3-methyl-4-(4-{3-[(l-oxidopyridm-2-yl)amino]propoxy}fenyl)-3-pyridin-3-— ylbutanoát)
K roztoku produkt kroku 7 (197 mg, 0,9 mmol) a trifenylfosfinu (236 mg, 0,9 mmol) v 5 ml THF se za teploty místnosti přidal roztok diethylazodiakrboxylátu (157 mg, 0,9 mmol) v 2 ml THF a reakce se míchala 15 min. Přidal se 2-(3-hydroxylpropylamino)pyridin N-oxid (168 mg, 0,9 mmol). Reakce se míchala 18h při teplotě místnosti. THF se odpařilo a zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, CH2CI2 /CH3 OH/NH4 OH-98,5/1/0,5) a získalo se 154 mg čistého produktu. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · • « • · • · · ·
Ethyl-(3-methyl-3-pyridin-3-yl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-butanoát)
Směs produktu kroku 8 (150 mg, 0,33 mmol), práškové železo (28 mg, 0,5 mmol), trifenylfosfin (87 mg, 0,33 mmol) a kyselina octová (4,0 ml) se zahřívala 15 minut k refluxu. Zchlazená reakce se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla ethylacetátem. Filtrát se odpařil. Zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, CH2CI2 / CH3 OH/NH4 OH-97,5/2/0,5) a získalo se 148 mg bezbarvého oleje. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 10
3-methyl-3-pyridin-3-yl-4-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} -butanová kyselina
Produkt kroku 9 (148 mg, 0,35 mmol) se rozpustil v 5 ml methanolu a 5 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 18 hodin při teplotě místnosti, okyselila kyselinou trifluoroctovou (2 ml) a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil HPLC s použitím gradientu acetonitrilu 10-50% za 30 min. a získalo se 90,6 mg. FAB-MS: (MH+)=406,5. 1 H NMR (DMSO-dó) δ 1,43 (s, 3H), 2,03 (p, 2H), 2,61 (d, 1H), 2,92 (d, 1H), 2,96 (d, 1H), 3,07 (d, 1H), 3,48 (t, 2H), 4,01 (t, 2H), 6,76 (s, 4H), 6,85 (t, 1H), 7,06 (d, 1H), 7,88 (m, 2H), 7.93 (d, 1H), 8,40 (d, 1H), 8,72 (d, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,90 (br, 1H),; Hnal. Výpočet pro C24H27N2 O3 plus 2,75 CF3COOH: C, 48,67; H, 4,26; N, 5,77. Skutečné hodnoty: C, 48,56; H, 4,29; N, 6,05.
• · • · • · · · · · · ·· ·· · · · · · · · · ·
107 .· : : · : :: : ’ : :.
···· ·· ·· ·· ·· ··
Příklad 22
4-{ 3-methoxy-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]íěnyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Krok 1
Ke směsi 4-benzyloxy-3-methoxybenzylalkoholu (10,0 g, 40,9 mmol) v 50 ml etheru se za teploty místnosti přidal thionylchlorid (5,95 g, 50,0 mmol). Reakce se přeměnila na čirý roztok a ten se sledoval TLC. Reakce se zastavila přídavkem H2O. Produkt se extrahoval etherem. Vodná vrstva se extrahovala etherem. Získaná organická vrstva se promyla 5% NaHCO3 , solankou a vysušila nad Na2SO4. Ether se odpařil a zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=2/8) a získala se bílá pevná látka v množství
8,10 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
3-[4-(benzyloxy)-3-methylfenyl]-2,2-dimethylpropanal • · · ·
108
Směs hydroxidu sodného (1,43 g, 35,85 mmol), tetrabutylamoniumjodidu (0,30 g, 0,82 mmol) v 8 ml benzenu a 2,8 ml H2O se zahřívala při 70 °C v atmosféře argonu až se vytvořila homogenní směs. K výše uvedenému roztoku se po kapkách přidala směs produktu kroku 1 (8,05 g, 30,64 mmol) a izobutylaldehydu (2,95 g, 40,85 mmol) v 20 ml benzenu. Výsledná reakční směs se zahřívala 6 hodin při 70 °C až 75 °C Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl vodou. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila nad Mg SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografíí (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/9) a získalo se 8,32 g bezbarvého oleje. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
3-(2,5-dibrom-4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-2,2-dimethylpropanal
Produkt kroku 2 (6,0 g, 20,1 mmol) se rozpustil v 25 ml chloroformu. Kvýše uvedenému roztoku se při 0 °C přidal se brom (7,2 g, 45 mmol) v 25 ml chloroformu. Reakce se zahřála na teplotu místnosti a nalila do 10% NaHSCb. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Organická vrstva se vysušila nad MgSO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografíí (na silikagelu, etyhlacetát/hexan=l/4) a získal se viskózní olej v množství
2,64 g. NMR spektrum bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
Br
HO.
CHO
109
4-(2,5-dibrom-4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanal
Ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (6,9 g, 20 mmol) v 25 ml THF se po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (20 ml, 20 mmol, 1M v THF), směs se míchala 15 min. a pak se přidala po kapkách při 0 °C ke směsi produktu kroku 3 (2,6 g, 7,1 ml) v 15 ml THF. Po 5 min. se reakce zastavila H2O. Produkt se extrahoval ethylacetátem. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se promyla H2O, solankou, vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/3) a získal se hnědý olej v množství 1,14 g. Rozpustil se v 20 ml THF a 20 ml 2M HC1. Reakce se míchala 30 min. při teplotě místnosti. THF se odpařil. Produkt se extrahoval ethylacetátem a promyl H2O. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem. Získaná organická vrstva se promyla solankou,vysušila nad Na2SO4 a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/3) a získal se viskózní olej v množství 0,783 g. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5
CO2Et
Ethyl-(4-(2,5-dibrom-4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
K roztoku produktu kroku 4 (0,775 g , 2,04 mmol) v 20 ml ethanolu se přidal roztok dusičnanu stříbrného (0,722 g, 4,25 mmol) v 2,0 ml H2O. Po kapkách se při teplotě místnosti přidal roztok hydroxidu sodného (2,71 g, 67,7 mmol) v 3,0 ml H2O. Po 6h se reakce přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla H2O. Filtrát se extrahoval etherem (3x30 ml). Vodná vrstva se okyselila koncentrovanou HC1 a extrahovala chloroformem. Organická vrstva se vysušila MgSO4, zakoncentrovala a vysušila za vakua. Zbytek (0,75 g) se rozpustil v 15 ml ethanolu a 15 ml 4M HC1 v dioxanu. Reakce se míchala 18 h při teplotě místnosti a pak se zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, • « • · · · · · · · · · ·· · · · · · · · · · no ···· ·· ·· ·· ·· · · ethylacetát/hexan=3/7) a získal se světle hnědý olej v množství 0,536 g. ‘H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6
OCH
CO2Et
Ethyl-(4-(4-hydroxy-3-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
Směs produktu kroku 5 (0,525 g , 1,3 mmol), 20% Pd/C a triethylaminu (0,39 g, 3,9 mmol) v ethanolu se hydrogenovala při tlaku 275 kPa a teplotě místnosti 1 hodinu. Reakce se přefiltrovala přes krátkou kolonu Celit® a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil chromatografií (na silikagelu, ethylacetát/hexan=l/3) a získal se bezbarvý olej v množství 0,19 g. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7
Ethyl-(4-(3-methoxy-4-{3-[(l-oxidopyridin-2-yl)amino]propoxy}fenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
K roztoku produktu kroku 6 (18 mg, 0,676 mmol) a trifenylfosfinu (262 mg, 1,0 mmol) v 7 ml THF se při teplotě místnosti přidal roztok diethylazodikarboxylátu (174 mg, 1,0 mmol) v 3 ml THF a reakce se míchala 15 minut. Přidal se 2-(3-hydroxypropylamin)pyridin N-oxid (168 mg, 1,0 mmol). Reakce se míchala 18 h při teplotě místnosti. THF se odpařil a zbytek se přečistil chromatograficky (na silikagelu, C2HC2I/CH3OH/ NH4OH=97,5/2/0,5) a získal se pále hnědý olej v množství 81,5 mg). ‘H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · · ·
Krok 8 • · · · · · · ·
Ethyl-(4-(3-methoxy-4-{3-[(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát)
Směs produktu kroku 7 (81,5 mg, 0,2 mmol), 10% Pd/C (50 mg, 0,05 mmol), cyklohexenu (0,5 ml, 44,9 mmol) a 2-propanolu (5 ml) se zahřívala k refluxu 3 h. Reakce se zchladila na teplotu místnosti, přefiltrovala přes krátkou kolonu Celitu® a promyla 2propanolem. Zakoncentrováním filtrátu se získalo 67,5 mg světle hnědého oleje. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 9
OCHq
CO-jH
4-{3-methoxy-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} 3,3-dimethylbutanová kyselina
Produkt kroku 8 (67,5 mg, 0,17 mmol) se rozpustil v 5 ml methanolu a 5 ml 1M roztoku hydroxidu sodného. Reakce se míchala 16 hodin při teplotě místnosti, okyselila kyselinou trifluoroctovou (1,0 ml). Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se přečistil HPLC za použití gradientu 10 až 50% za 30 min a získalo se 31,5 mg. FAB-MS: (MH+)=373. *H NMR (CDC13) δ 1,03 (s, 6H); 2,21 (p, 2H), 2,22 (s, 2H), 2,61, (s, 2H), 3,60 (q, 2H), 3,84 (s, 2H);
4,13 (t, 2H); 6,65-6,82 (m, 4H); 6,96 (d, 1H); 7,68-7,80 (m, 2H); Analytický výpočet pro C2,H28N2O4 plus 1,5 CF3COOH: C, 52,17; H, 5,56; N, 5,07. Skutečné hodnoty: C, 52,44; H, 5,62; N, 4,88.
• ·
Příklad 23
4-{3-chlor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy] fenyl} 3,3-dimethylbutanová kyselina
Výše uvedený produkt se připravil podle postupu popsaného u syntézy příkladu 22. FAB-MS: (MH+)=377. 'H NMR (CDC13) δ 1,03 (s, 6H); 2,21 (s, 2H), 2,24 (p, 2H), 2,61, (s, 2H), 3,63 (q, 2H), 4,14 (t, 2H); 6,71 (t, 1H); 6,86 (d, 1H); 7,00 (d, 1H); 7,05 (dd, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,78 (t, 1H), 7,79 (d, 1H), 9,89 (br, 1H); Analytický výpočet pro C20H25N2O3CI plus 2,0 CF3COOH a 0,5 H2O: C, 46,95; H, 4,60; N, 4,56. Skutečné hodnoty: C, 47,15; H, 4,65; N, 4,71.
Příklad 24
3-methyl-3-{ 4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzyl} -pent-4-enová kyselina
Ethylester 2-kyan-4-(4-methoxy-fenyl)-3-methyl-but-2-enové kyseliny
V nádobě opatřené Dean-stark filtrem se za teploty místnosti připravil roztok (l-(4— methoxy-fenyI)-propan-2-onu (40 g), ethylkyanoacetátu (27,56 g), octanu amonného (9,40 g), kyseliny octové (14,64 g) a toluenu (150 ml). Roztok se zahříval přes noc k refluxu. Roztok se zchladil na teplotu místnosti, promyl vodou a solankou a zakoncentroval. Surový produkt se
113 • · přečistil na koloně silikagelu s elucí 10% směsí ethylacetát/hexan a získal se bezbarvý olej (40,76 g). 'LI NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
H3CO.
CN
COOC2Hc
Ethylester 2-kyan-3-(4-methoxy-benzyl)-3-pent-4-enové kyseliny
K roztoku 1M vinylmagnesiumbromid/tetrahydrofuran (38,6 ml) se přidal jodid měďnatý (0,08 g), tetrahydroíuran (50 ml), roztok produktu kroku 1 (10,0 g) a ethylether (20 ml). Výsledný roztok se míchal přes noc za teploty místnosti. Roztok se nalil do 5% směsi kyselina chlorovodíková/voda (100 ml). Organická vrstva se oddělila a vodná složka se řádně extrahovala ethyletherem a získaný organický extrakt se promyl vodou, solankou a vysušil nad MgSO4. Surový produkt se přečistil na koloně silikagelu s elucí 10% směsí ethylacetát/hexan a získal se bezbarvý olej (6,3 g). *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
H3CO
COOH
3-(4-methoxy-benzyl)-3-methyl-pent-4-enová kyselina
Směs produktu kroku 2 (5,8 g), ethylenglykolu (15 mg) a KOH (5,6 g) se zahřívala dva dny při 150 °C v atmosféře dusíku. Roztok se zchladil na teplotu místnosti a nalil do 1% směsi kyselina chlorovodíková/voda (200 ml). Vodná složka se řádně extrahovala ethylacetátem a získaný organický extrakt se promyl vodou, solankou a vysušil nad MgSO4. Odstraněním rozpouštědla se získal surový produkt, který se použil bez dalšího přečištění. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · • · • ·
Krok 4
Ethylester 3-(4-methoxy-benzyl)-3-methyl-pent-4-enové kyseliny
Roztok produktu kroku 3 (5,6 g) se míchal přes noc při teplotě místnosti s nasycený roztokem kyselina chlorovodíková/ethanol (70 ml). Rozpouštědlo se odstranilo. Surový produkt se přečistil na silikagelové koloně za eluce směsí 0,5% ethylacetát/hexan a získal se bezbarvý olej (3,3 g). *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 5 ho.
Ethylester 3-(4-hydroxy-benzyl)-3-methyl-pent-4-enové kyseliny
Směs produktu kroku 4 (0,79 g) a dichlormethan (15 ml) se zchladil na 0 °C. Pomalu se přidal 1M roztok bromidu boritého v dichlormethanu (6,00 ml). Roztok se míchal 1 hodinu při teplotě místnosti. K zastavení reakce se přidal ethanol (5 ml). Rozpouštědlo se odstranilo. Zbytek se extrahoval 1% vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a ethylacetátem. Organický extrakt se promyl roztokem uhličitan sodný/voda a pak se vysušil nad MgSO4. Rozpouštědlo se odstranilo. Surový produkt se přečistil na koloně silikagelu za eluce 20% směsí ethylacetát/hexan a získal se bezbarvý olej (0,32 g). 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · · ·
Krok 6
115
Ethylester 3-{4-[3-(l-hydroxy-pyridin-2-ylamino)-propoxy]-benzyl}-3-methyl-pent-4-enové kyseliny
K roztoku produktu kroku 5 (0,62 g), trifenylfosfmu (0,87 g) a tetrahydrofuranu (12,5 ml) se přidal diethylazodikarboxylát (0,54 ml). Roztok se míchal 15 minut. Přidal se 3— propanol-pyridin-2-ylamin-l-oxid (0,56 g). Výsledný roztok se míchal přes noc. Rozpouštědlo se odstranilo. Surový produkt se přečistil na koloně silikagelu za eluce směsí dichlormethan/methanol/hydroxid amonný (97:5:2:0,5) a získal se žlutý olej (0,32 g). 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7
COsEt
Ethylester 3-methyl-3-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]-benzyl}-pent-4-enové kyseliny
Roztok produktu kroku 6 (0,32 g), práškové železo (0,07 g), s trifenylfosfinem (0,21 g) a kyselinou octovou (8 ml) se zahříval krefluxu 15 minut. Roztok se zchladil, přefiltroval přes celit a promyl ethylacetátem. Filtrát se zakoncentroval. Surový produkt se přečistil na koloně silikagelu za eluce směsí dichlormethan/methanol/hydroxid amonný (97:5:2:0,5) a získal se bezbarvý olej (0,26 g). !H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · • ·
Krok 8
116 • · · · · · · • · · · ···· ···· · · ·· ··
3-methyl-3-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]-benzyl}-pent-4-enová kyselina
co2h
Roztok produktu kroku 7 (0,26 g), IN hydroxidu sodného ve vodě (2 ml) a methanolu (4 ml) se míchal přes noc. Rozpouštědlo se odstranilo. Surový produkt se přečistil HPLC se reverzní fází za použití gradientu acetonitril/voda (0,5% TFA) a získal se bezbarvý olej. (0,150 g). Anal. MS (APCI): m/z = 355 (MH+), lH NMR (500 Mhz, CD3OD) δ 1,09 (3H, s);
2,16 ( 2H, m), 2,25 (2H, q), 2,70, (2H, s), 3,59 (2H, t), 4,08 (2H, t); 4,85 (1H, d); 4,98 (1H, d); 5,92 (1H, dd); 6,81 (2H, d), 6,84 (1H, t), 7,07 (3H, m), 7,79 (1H, d), 7,86 (1H, t); Analytický výpočet pro C21H26N2O3 + 1,1 TFA: C, 58,07; H, 5,69; N, 5,84. Skutečné hodnoty: C, 57,87; H, 5,77; N, 5,70.
Příklad 25
4-{ 2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
2-brom-1 -(chlormethyl)-4-methoxybenzen
2-brom-l-(chlormethyl)-4-methoxybenzen se připravil podle metody popsané ve Skorce, J.A.; Robertson,J.E; J.Med.Chem.; 8; 19655; 255-257.
Krok 2
117
Η
3-(2-brom-4-methoxyfenyl)-2,2-dimethylpropanal
Směs NaOH (4,9 g) a (Bu)4NI (1 g) v benzenu (14 ml) a vody (4,9 ml) se zahřála na 70 °C v atmosféře argonu a získala se homogenní směs. K této směsi se po kapkách přidala směs izobutylaldehydu (10,1 g, 140 mmol) a produkt kroku 1 (25 g, 106 mmol) v benzenu (38 ml). Po přídavku se výsledná směs míchala 6 h v atmosféře argonu při 70 °C. Zchladila se, zředila vodou a extrahovala EtOAc (3x150 ml). Získané organické extrakty se promyly vodou, vysušily (Na2SO4) a zakoncentrovaly dosucha. Zbytek se přečistil na silikagelu zábleskovou chromatografií za použití 5% EtOAc v hexanu. Příslušné frakce (sledováno TLC) se smíchaly a zakoncentrováním dosucha se získal požadovaný produkt (14,9 g, ~ 50%). *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 3
4-(2-brom-4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanal
Ke směsi methoxymethyltrifenylfosfoniumchloridu (30,2 g, 88 mmol) v 200 ml THF se po kapkách při 0 °C přidal roztok lithium bis(trimethylsilyl)amidu (88 ml, 88 mmol, 1,0 v THF). Po 15 minutách se směs přidala k roztoku 3-(2-brom-4-methoxyfenyl)-2,2— dimethylpropanalu (14 g, 51,7 mmol) ve 100 ml THF při 0 °C. Reakce se míchala 5 min a pak se zastavila H2O. Produkt se extrahoval ethylacetátem (3 x 200 ml). Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila (Na2SO4) a zakoncentrovala. Zbytek se přečistil na silikagelu zábleskovou chromatografií (5% ethylacetát v hexanu) a získal se surový olej ~ 12g.
• · • · · ·
118
Rozpustil se v 150 ml THF a 150 ml 2,0 A roztoku HC1. Reakce se míchala 30 min. při teplotě místnosti. Reakční směs se extrahovala ethylacetátem (3 x 200 ml). Získaná organická vrstva se promyla solankou, vysušila (Na2SO4) a zakoncentrovala a získalo se 11 g produktu. 'H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 4
Br
Ethyl-(4-(2-brom-4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
Ke směsi 4-(2-brom-4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanalu (11 g, 38,6 mmol) ve 250 ml ethanolu se přidal dusičnan stříbrný (21 g, 124 mmol) rozpuštěný v 35 ml H2O. Po kapkách se přidal roztok NaOH (10 g, 250 mmol) v 35 ml H2O a reakce se pak míchala 2 h při teplotě místnosti. Reakce se pak nechala projít přes krátkou kolonku Celitu. Ethanol se pak odpařil a zbytek se rozdělil mezi vodu a ethylacetát. Vodná vrstva se extrahovala ethylacetátem (2 x 200 ml). Organická vrstva se odstranila. Vodná vrstva se okyselila 2N roztokem HC1 na pH=2, extrahovala ethylacetátem (3 x 200 ml). Organické extrakty se promyly solankou, vysušily (Na2SO4) a zakoncentrováním se získal olej. Olej se rozpustil v 60 ml 4M HC1 v dioxanu a 120 ml absolutního ethanolu přes noc při 25 °C. Reakce se odpařila dosucha, pak se smíchala s ethylacetátem a extrahovala nasyceným roztokem vodného uhličitanu sodného, solankou, vysušila, vysušila (Na2SO4) a odpařením se získalo
9,1 g (71%) požadované sloučeniny. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• · • · · · •· ·« ·· • · * · * ♦ · r · ♦ « ···· e · 4 ii9 .· : : · : :: : ·: :. :
···· ·· ·· ·· ·4 4«
Krok 5
ΗΟ,ρ,ΒΓ
LAJX^-CO2Et
Ethyl-(4-(2-brom-4-hydroxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát)
Ethyl-(4-(2-brom-4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylbutanoát) (4,5 g, 13,7 mmol) se rozpustil v dichlormethanu (60 ml), zchladil se na 0 °C a přidal se 1M bromid boritý v dichlormethanu (27,0 ml). Směs se míchala při 0 °C hodinu v atmosféře dusíku. Reakce se zastavila ethanolem (60,0 ml), zahřála se na teplotu místnosti a míchala 1 hodinu při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odstranilo za sníženého tlaku, zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl nasyceným roztokem uhličitanu sodného a vodou, vysušil (Na^SCE) a zakoncentrováním se získaly 4,0 g (93%) požadovaného produktu. NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 6 ι°; ϊ
Í\L
Br
J<^CO2Et
Tato sloučenina se připravila podle postupu popsaného v příkladu 5, kroku 7 a náhradou produktu příkladu 5, kroku 6 ethyl-4-(2-brom-4-hydroxyfenyl)-3,3dimethylbutanoátem) tohoto příkladu, kroku 6. NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 7
Br
CO2Et
Ethyl-(4-{2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoáť)
4· 4 » 44 * · • 44« · · · 4 · · · « 4 4 · · · 4 » 4 no : :« : :: : ·: :. :
4444 4* 44 44 44 44
Směs produktu kroku 7 (1,0 g, 2,15 mmol), trifenylfosfinu (500 mg, 2 mmol), práškového železa (200 mg) v ledové kyselině octové (10 ml) se zahřívala k retluxu a pak se reíluxovala 30 minut v dusíkové atmosféře. Směs se zchladila na teplotu místnosti, pak se přefiltrovala přes Celit a filtrát se zakoncentroval za vakua. Zbytek se přečistil chromatografií (CH2CI2 /CH3OH/ NH4OH:96/3/l) a získalo se 790 mg požadovaného produktu. NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 8
•CO2H
Trifluoracetát 4-{ 2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanové kyseliny
Ethyl-(4-{2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát) (225 mg) se rozpustil ve směsi 2,0 ml methanolu a 2,0 ml THF a přidaly se 2,0 ml 1M roztoku NaOH. Reakční směs se míchala 5 hodin při teplotě okolí. Těkavá rozpouštědla se odstranila a zbývající vodný roztok se okyselil 2,0 ml 1M HC1 a zakoncentrováním se získal surový produkt. Surový produkt se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril/voda a získalo se 125 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. lH NMR (DMSO) δ 12,1 (br s 1H); 8,75 (br s, 1H), 7,92-7,82 (m, 2H), 7,38 (d, >9 Hz, 1H), 7,18-7,15 (m, 1H), 7,02 (d, J=9 Hz, 1H), 6,95-6,91 (m, 1H), 6,84-6-80 (m, 1H); 4,09 (t, 2H); 3,51-3,47 (m, 2H); 2,76 (s, 2H); 2,16 (s, 2H), 2,1-2,0 (m, 2H), 0,98 (s, 6H). Analytický výpočet pro C20H25N2O3 plus 1,40 CF3CO2H: C, 47,14; H, 4,58; N, 4,82. Skutečné hodnoty: C, 47,19; H, 4,54; N, 4,63.
·· ·« « «
Příklad 26
Η
I
co2h
4-{ 2-kyan-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Krok 1
Ethyl-(4- {2-kyan-4- [3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy] fenyl} -3,3 -dimethy lbutanoát)
Ethyl-(4-{2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát) (500 g) se rozpustil v DMF (10 ml) a vodě (1,0 ml) a reagoval s tris(dibenzylidenaceton)dipaladiem (0) (51 mg) a bis(difenylfosfino)ferocenem (75 mg). Reakční směs se zahřívala 20 hodin na 120 °C v dusíkové atmosféře. Směs se zchladila na teplotu místnosti a přefiltrovala přes celit za vakua. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl nasyceným roztokem chloridu amonného, vysušil (NaiSCL) a zakoncentroval. Surový produkt se přečistil zábleskovou chromatografií (EA/hexan: 40/60) a získalo se 390 mg (88,6%) požadované sloučeniny ve formě olejovité gumy. ’H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
CN
CO,H
122 ·· »· • » · • * • · • · • · · · a· • · ·* • » • ··· » · • » ·· «a ·· »·· · ·» ·»
Trifluoracetát 4-{ 2-kyan-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy] fenyl} -3,3-dimethylbutanové kyseliny
Ethyl-(4-{2-kyan-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát) (175 mg) se rozpustil ve směsi 2,0 ml methanolu a 2,0 ml THF a přidaly se 2,0 ml 1M roztoku NaOH. Reakční směs se míchala 5 hodin při teplotě okolí. Těkavá rozpouštědla se odstranila a zbývající vodný roztok se okyselil 2,0 ml 1M HC1 a zakoncentro váním se získal surový produkt. Surový produkt se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril/voda a získalo se 120 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. *H NMR (DMSO) δ 12,1 (br s 1H); 8,7 (br s, 1H), 7,92-7,80 (m, 2H), 7,4-7,34 (m, 2H), 7,26-7,2 (m, 1H), 7,02 (d, J=9 Hz, 1H), 6,856,8 (m, 1H), 4,13 (m, 2H), 3,53-3,47 (m, 2H), 2,8 (s, 2H), 2,15 (s, 2H), 2,11-2,01 (m, 2H), 0,98 (s, 6H); Analytický výpočet pro C20H25N2O3 a 1,60 CF3CO2H plus 0,5 H2O: C, 51,84; H, 5,06; N, 7,43. Skutečné hodnoty: C, 52,11; H, 5,36; N, 6,93; Hmotnostní spektrum: (MH+)=368.
Příklad 27
4-{ 2-ethynyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanová kyselina
Ethyl-(3,3-dimethyl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]-2-[(trifenylsilyl)-ethynyl]fenyl} butanoát) • · • · • · ···· ··· ·· · • · · · · · · · · · · i23 : : : :: : *: :. :
···· · · · · ·· · · ··
Ethyl-(4-{2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát) (300 mg) se rozpustil v Et3N (3 ml), následoval přídavek trimethylsilylacetylenu (144 μΐ), Cul (24 mg), trifenylfosfinu (50 mg) a Pd(Ph3P)2Cl2 (23 mg). Reakční směs se zahřívala 20 h na 120 °C v dusíkové atmosféře. Směs se zchladila na teplotu místnosti a přefiltrovala přes celit za vakua. Filtrát se zakoncentroval. Zbytek se rozpustil v ethylacetátu, promyl nasyceným roztokem chloridu amonného, vysušil (Na2SO4) a zakoncentroval. Surový produkt se přečistil zábleskovou chromatografií (EA/hexan: 40/60) a získalo se ~ 200 mg požadované sloučeniny ve formě olejovité gumy. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
Krok 2
Trifluoracetát 4-{ 2-ethynyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} -3,3-dimethylbutanové kyseliny
Ethyl-(3,3-dimethyl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]-2-[(trimethylsilyl)— ethynyl]-fenyl}butanoát (175 mg) se rozpustil ve směsi 2,0 ml methanolu a 2,0 ml THF a přidaly se 2,0 ml 1M roztoku NaOH. Reakční směs se míchala 5 hodin při teplotě okolí. Těkavá rozpouštědla se odstranila a zbývající vodný roztok se okyselil 2,0 ml 1M HC1 a zakoncentrováním se získal surový produkt. Surový produkt se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril/voda a získalo se 130 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. 'H NMR (DMSO) δ 12,1 (br s 1H); 8,65 (br s, 1H), 7,92-7,80 (m, 2H), 7,2-7,15 (m, 1H), 7,02-6,9 (m, 3H), 6,81 (t, 1H), 4,1-4,3 (m, 2H), 3,53-3,47 (m, 3H), 2,78 (s, 2H), 2,12 (s, 2H), 2,11-2,01 (m, 2H), 0,98 (s, 6H); Analytický výpočet pro C2iH26N2O3 a 1,4 CF3CO2H plus 1 H2O: C, 54,75; H, 5,45; N, 5,15. Skutečné hodnoty: C, 54,51; H, 5,21; N, 4,99; Hmotnostní spektrum: (MH+)=367.
• · • · ···· ··· ·· · ·· · · ···· · · ·
124 : : : :: : · : :. :
···· · · ·· ·· ·· · ·
Příklad 28
3,3-dimethyl-4-{ 2-(fenylethynyl)-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl} butanová kyselina
Ethyl-(3,3-dimethyl-4-{2-(fenylethynyl)-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} butanoát)
Ethyl-(4-{2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanoát) (500 mg) se rozpustil vEt3N (5 ml), následoval přídavek fenylacetylenu (250 μΐ), Cul (11 mg), trifenylfosfinu (85 mg) a Pd(Ph3P)2Cl2 (42 mg). Reakční směs se zahřívala 24 h na 80 °C v dusíkové atmosféře. Přidal se další fenylacetylen (125 μΐ) a triethylamin (5 ml) a zahřívání pokračovalo dalších 24 hodin. Směs se zchladila na teplotu místnosti, zředila ethylacetátem (50 ml) a přefdtrovala přes celit. Filtrát se zakoncentroval. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se přečistil chromatografií na silikagelu z eluce směsí hexan/ethylacetát (3:2). Takto se získal produkt (516 mg) ve formě oleje. *H NMR spektrum produktu bylo v souladu s navrženou strukturou.
• ·
125
Krok 2
Trifluoracetát 3,3-dimethyl-4-{2-(fenylethyl)-4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]fenyl} butanové kyseliny
Ethyl-3,3-dimethyl-4-{2-(fenylethynyl)-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}butanoát (250 mg) se rozpustil ve směsi ethanol (5 ml) a 1M roztok NaOH (2 ml). Reakční směs se míchala 4 dny při teplotě okolí. Roztok se upravil na pH 7 přídavkem 2N HC1 a zakoncentrováním se získal surový produkt. Surový produkt se přečistil HPLC za použití gradientu acetonitril/voda a získalo se 175 mg výše uvedené sloučeniny ve formě TFA soli. 'H NMR (DMSO) δ 12,05 (br s 1H); 8,70 (br s, 1H), 7,83-7,93 (m, 2H), 7,52-7,58 (m, 2H), 7,41-7,49 (m, 3H), 7,23 (d, 1H), 7,09 (d, 1H), 7,03 (d, 1H), 6,95 (dd, 1H), 6,84 (t, 1H), 4,11 (t, 2H), 3,45-3,52 (m, 2H), 2,85 (s, 2H), 2,19 (s, 2H), 2,01-2,11 (m, 2H), 1,00 (s, 6H); Analytický výpočet pro C28H30N2O3 a 1,4 CF3CO2H: C, 61,82; H, 5,30; N, 4,70. Skutečné hodnoty: C, 61,81; H, 5,49; N, 4,61; Hmotnostní spektrum: (MH+)=443.
Aktivita sloučenin podle vynálezu se testovala podle následujících stanovém. Sloučeniny podle vynálezu antagonizují ανβ3 integrin SIC50 0,1 nM až 100 μΜ v 293 buněčném stanovení. Tyto sloučenin podobně antagonizují ανβ3 integrin s IC50 < 50 μΜ ve stanovení buněčné adheze.
• · « ·
126
Stanovení adheze vitronektinu
Materiál
Lidské vitronektinové receptory ανβ3 a ανβ5 se přečistily od lidské placenty jak je popsáno dříve [Pytela a kol., Methods in Enzymology. 144:475-489 (1987)]. Lidský vitronektin se přečistil od čerstvě zmrazené plazmy jak je popsáno dříve [Yatogho a kol., Cell Structure and Function, 13: 281-292 (1988)]. Biotinylovaný lidský vitronektin se připravil spojením NHS-biotinu od Pierce Chemical Company (Rockford, IL) s přečištěným vitronektinem jak je popsáno dříve [Charo a kol., J. Biol. Chem., 266(3):1415-1421 (1991)]. Pufr pro stanovení, OPD substrátové tablety a BSA čistoty pro RIA se získal od Sigma (St.Louis, MO). Mikrotitrační destičky Nalge Nunc-Immuno se získaly od Nalge Company (Rochester, NY).
Metody
Stanovení receptoru na pevné fázi
Toto stanovení bylo zcela shodné s dříve uvedeným [Niiya a kol, Blood, 70:475-483 (1987)]. Přečištěné lidské vitronektinové receptory ανβ3 a ανβ5 se zředily ze zásobního roztoku na koncentraci 1,0 pg/ml v Tris pufrovaném fyziologickém roztoku obsahujícím 1,0 mM Ca++ , Mg^ a Mn^ , pH 7,4 (TBS^ ). Zředěné receptory se ihned přenesly do Nalge Nunc-Immuno mikrotitračních destiček v množství 1000 pL/jamku (100 ng receptoru/jamku). Destičky se uzavřely a inkubovaly přes noc při 4°C aby se receptory navázaly na jamky. Všechny ostatní kroky se prováděly za teploty místnosti. Destičky se vyprázdnily a přidalo se 200 0 pL 1% BSA čistoty pro RIA v TBS+++ (TBS+++ /BSA) k zablokování exprimováného povrchu plastu. Následovala 2 hodinová inkubace, testovací destičky se promyly TBS^ za použití promývače 96 jamkových destiček. Logaritmické sériové ředění testované sloučeniny a kontrol se provedlo počínaje výchozí zásobní koncentrací 2 mM a použitím 2 nM biotinylovaného vitronektinu v TBS+++/BSA jako ředící látky. Tato směs značeného ligandu s testovaným (nebo kontrolním) ligandem a následný přenos 50 pl alikvotů do testovací destičky se provedl pomocí CETUS Propette robot; konečná koncentrace značeného ligandu byla 1 nM a nejvyšší koncentrace testované sloučeniny byla 1,0 x 104 M. Kompetice probíhala dvě hodiny a pak se jamky promyly promývačem destiček jako předtím. Afinita přečištěných křenovou peroxidázou značené kozí anti-biotin protilátky se zředila 1:2000 vTBS+^BSA a 125pL se přidalo do každé jamky. Po 45 minutách se destičky promyly a inkubovaly se substrátem OPD/H2O ve 100 mM/Ι citrátovém pufru, pH 5.0. Destičky se • · i27 • · · · ·· · · ·· ·· ·· vyhodnotily readrem na mikrodestičky při vlnové délce 450 nm a při maximu vazby u kontrolních jamek bylo dosaženo absorbance přibližně 1,0. Pro analýzu se uvádělo konečné A5o Data se analyzovala za použití programu EXCEL. U zdvojených koncentrací se stanovila střední hodnota, standardní odchylka a % CV. Průměr hodnot A50 se normalizoval na průměr ze čtyř kontrol pro maximální vazbu (bez přídavku kompetitoru) (B-MAX). Normalizované hodnoty se použily pro algoritmus čtyřparametrové křivky [Rodbard a kol., Int. Atomic Energy Agency, Vienna, pp 469 (1977)], vyneseno v semi-logaritmickém měřítku a vypočtená koncentrace odpovídající 50 % inhibici maximální vazby biotinylováného vitronektinu (IC50) a odpovídající R2 se uváděla u sloučenin vykazujících vyšší než 50% inhibici při nejvyšší testované koncentraci; jinak je IC30 uváděno vyšší než nejvyšší testovaná koncentrace. Na každé destičce se jako pozitivní kontrola použila β[[2-[[[(aminoiminomethyl)amino]-1 -oxopentyljamino]-1 -oxoethyl] amino]-3-pyridinpropanová kyselina [US 5,602,155 příklad 1], která je silný ανβ3 antagonista (IC50 v rozmezí 3-10 nM) a použila se na každé destičce jako pozitivní kontrola.
Stanovení přečištěného receptorů Iib/IIIa
Materiál
Lidský fibrinogenový receptor (Iib/IIIa) se přečistil od zbytku krevních destiček. (Pytela, R., Pierschbacher, M.D., Argraves, S., Suzuki, S. a Rouslahti, E. „Arginine-GlycineAspartic acid adhesion receptors“, Methods in enzymology 144 (1987):475-489.). Lidský vitronektin se přečistil od čerstvě zmrazené plazmy jak popisuje Yatoho, T., Izumi, M., Kashiwagi, H., a Hayashi, M.,“Novel purification of vitronectin from human plasma by heparin affinity chromatography,“ Cell Structure and Function 13 (1988): 281-292. Biotinylovaný lidský vitronektin se připravil spojením NHS-biotinu od Pierce Chemical Company (Rockford, IL) s přečištěným vitronektinem jak je popsáno výše. (Charo, I.F., Nannizzi, L., Ophillips, D.R., Hsu, M.A., Scarborough, R.M., Jnhibition of fibrinogen binding to GP Iib/IIIa by a GP lia peptide“, J.Biol. Chem. 226 (3) (1991): 1415-1421.) OPD, tablety substrátu a BSA čistoty pro RIA se získaly od Sigma (St. Louis, MO). Antibiotinovaná protilátka se získala od Sigma (St. Louis, MO). Nalge Nunc-Immuno mikrotitrační destičky se získaly od (Rochester, NY). Činidlo ADP se získalo od (St. Louis. MO).
• · • ·
128
Metody
Stanovení receptoru na pevné fázi
Toto stanovení je zcela shodné s uvedeným Niiya, K., Hodson, E., Bader, R., ByersWard, V.Kzoiol, J.A., Plow, E.F.a Ruggeri, Z.M., „Increased surface expression of the membrane glycoprotein lib/llla complex induced by platelet activation: Relationships to the binding of fibrinogen and platelet agregation“, Blood 70 (1987):475-483. Přečištěný lidský fibrinogenový receptor (Iib/IIIa) se zředil ze zásobního roztoku na koncentraci 1,0 pg/ml v Tris pufrovaném fyziologickém roztoku obsahujícím 1,0 mM Ca2+ , Mg2+ a Mn2+ , pH 7,4 (TBS+++ ). Zředěné receptory se ihned přenesly do Nalge Nunc-Immuno mikrotitračních destiček v množství 1000 μΐ/jamku (100 ng receptoru/jamku). Destičky se uzavřely a inkubovaly přes noc při 4 °C aby se receptory navázaly na jamky. Všechny ostatní kroky se prováděly za teploty místnosti. Destičky se vyprázdnily a přidalo se 200 μΐ 1% BSA čistoty pro stanovení RIA v TBS+++ (TBS+++ /BSA) k zablokování exprimovaného povrchu plastu. Následovala 2h inkubace, testovací destičky se promyly TBS4^ za použití promývače 96 jamkových destiček. Logaritmické sériové ředění testované sloučeniny a kontrol se provedlo počínaje výchozí zásobní koncentrací 2 mM a použitím 2 nM biotinylovaného vitronektinu vTBS+^BSA jako ředící látky. Tato směs značeného ligandu s testovaným (nebo kontrolním) ligandem a následný přenos 50 pL alikvotů do testovací destičky se provedl pomocí CETUS Propette robot; konečná koncentrace značeného ligandu byla 1 nM a nejvyšší koncentrace testované sloučeniny byla 1,0 x 104 M. Kompetice probíhala dvě hodiny a pak se jamky promyly promývačem destiček jako předtím. Afinita přečištěných křenovou peroxidázou značené kozí anti-biotin protilátky se zředila 1:2000 vTBS+++/BSA a 125μ1 se přidalo do každé jamky. Po 45 minutách se destičky promyly a inkubovaly se substrátem OPD/H2O ve 100 mM/L citrátovém pufru, pH 5,0. Destičky se vyhodnotily readerem na mikrodestičky při vlnové délce 450 nm a při maximu vazby u kontrolních jamek bylo dosaženo absorbance přibližně 1,0, pro analýzu se uvádělo konečné A50 . Data se analyzovala za použití programu EXCEL. U zdvojených koncentrací se stanovila střední hodnota, standardní odchylka a % CV. Průměr hodnot A50 se normalizoval na průměr ze čtyř kontrol pro maximální vazbu (bez přídavku kompetitoru) (B-MAX). Normalizované hodnoty se použily pro algoritmus čtyřparametrové křivky [Rodbard a kol., Int. Atomic Energy Agency, Vienna, pp 469 (1977)], vynesly se v semi-logaritmickém měřítku a vypočtená koncentrace odpovídající 50 % inhibici maximální vazby biotinylovaného vitronektinu (IC50) a odpovídající R2 se uváděla u sloučenin vykazujících vyšší než 50% inhibici při nejvyšší • ·
I _ 7 / 9 l · · · · · · · ·· · *· · · · ·· ·· · · · · ·· testované koncentraci; jinak je IC50 uváděno vyšší než nejvyšší testovaná koncentrace. Na každé destičce se jako pozitivní kontrola použila β-[[2-[[-[(3πυηο iminomethyljamino]-Ιο xopentyl|amino|-l-o xoethyl lamino ]-3-pyridin-propanová kyselina [US 5,602,155 příklad 1], která je silný ανβ3 antagonista (IC50 v rozmezí 8 ažl8 nM) a použila se na každé destičce jako pozitivní kontrola.
Stanovení lidské plasmy bohaté na krevní destičky
Ze skupiny dobrovolníků se vybrali zdraví donoři nepožívající aspirin. Odběr plasmy bohaté na destičky a následné stanovení agregace krevních destiček vyvolané ADP se provedlo podle popisu v Zucker, M.B., „Platelet Aggregation Measured by the Photometric Method“, Methods in Enzymology 169 (1989): 117-133. Odběr 45 ml celé krve do 60ml stříkačky obsahující 5 ml 3,8% citrátu sodného se provedl metodou standardního odběru ze žíly pomocí zaškrcení. Krev se ve stříkačce protřepala a celá krev s antikoagulantem se pak přenesla do kónické 50 ml polyethylenové zkumavky. Krev se centrifugovala 12 min. při 200 x g a získal se sediment buněk neobsahujících krevní destičky. Plasma s krevními destičkami se přenesla do polyethylenové zkumavky a uchovala při teplotě místnosti do použití. Plasma bez krevních destiček se získala druhou centrifugací zbývající krve při 2000 x g po dobu 15 minut. Počet krevních destiček se běžně pohybuje v rozmezí 300 000 až 500 000 na mikrolitr. Plasma obsahující krevní destičky (0,45 ml) se nadávkovala do silikonových kyvet a míchala (1100 rpm) 1 minutu při 37 °C před přídavkem 50 μΐ naředěné testované sloučeniny. Po 1 minutovém míchání se agregace vyvolala přídavkem 50 μΐ 200μΜ ADP. Agregace probíhala 3 minuty vPayton dvoukanálovém agregometru (Payton scientific, Bufallo, NY). K vyhotovení křivky závislosti odezvy na dávce se použilo procento inhibice maximální odezvy (kontrola - fyziologický roztok) série ředění testované sloučeniny. Všechny sloučeniny se testovaly dvakrát a koncentrace poloviny maximální inhibice (IC50) se odečetly z grafu závislosti odezvy na dávce u těch sloučenin, které vykazovaly 50% nebo vyšší inhibici při nejvyšší testované koncentraci; jinak se hodnota IC50 uváděla vyšší než nejvyšší testovaná koncentrace.

Claims (20)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce I \3/ γ5
    Χ-Υ ^(CH2)nCORb (I), kde je 4 až 8 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný bicyklický systém, volitelně nasycený nebo nenasycený, volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny sestávající z alkylu, halogenalkylu, arylu, heteroarylu, halogenu, alkoxyalkylu, aminoalkylu, hydroxy, nitro, alkoxy, hydroxyalkylu, thioalkylu, amino, alkylamino, arylamino, alkylsulfonamidu, acylu, acylamino, aíkylsulfonu, sulfonamidu, allylu, alkenylu, methylendioxy, ethylendioxy, alkynylu, karboxamidu, kyano, a (-CFEjn-COR, kde n je 0 až 2 a R je hydroxy, alkoxy, alkyl nebo amino skupina;
    A1 je 5 až 9 členný monocyklus nebo 7 až 12 členný polycyklický heterocyklus vzorce
    HET obsahující alespoň jeden atom dusíku a volitelně 1 až 5 heteroatomů vybrané ze skupiny zahrnující O, N, S, SO2 nebo CO; volitelně nasycený nebo nenasycený; volitelně substituovaný jedním nebo více Rk vybranými ze skupiny sestávající z hydroxy, alkylu, alkoxy, alkoxyalkylu, thioalkylu, halogenalkylu, kyano, amino, alkylamino, halogenu, acylamino, sulfonamidu a -COR, kde R je hydroxy, alkoxy, alkyl nebo amino skupina;
    • ·
    143 nebo A1 je kde Y1 je vybráno ze skupiny zahrnující N-R2, O a S;
    R je vybráno ze skupiny sestávající zH; alkylu, arylu, hydroxy; alkoxy, kyano, alkenylu; alkynylu; amido; alkylkarbonylu; arylkarbonylu; alkoxykarbonylu; aryloxykarbonylu; halogenalkylkarbonylu; halogenalkoxykarbonylu; alkylthiokaronylu; arylthiokarbonylu; acyloxymethoxykarbonylu;
    R spolu s R tvoří 4 až 12 členný heterocyklus obsahující dva dusíky volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny sestávající s z nižšího akylu, thioalkylu, alkylamino, hydroxy, keto, alkoxy, halogenu, fenylu, amino, karboxylu nebo karboxylesteru a kondenzovaného fenylu;
    R spolu s R tvoří 5 až 9 členný heterocyklus volitelně substituovaný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny sestávající s nižšího z alkylu, fenylu, alkoxy a hydroxy skupiny;
    R spolu s R tvoří 5 členný heterocyklus kondenzovaný s arylem nebo heteroarylem;
    R (pokud není spojen s R ) a R jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající z H; alkylu, alkenylu, alkynylu, aralkylu, amino, alkylamino, hydroxy; alkoxy, arylamino, amido; alkylkarbonylu; arylkarbonylu; alkoxykarbonylu; aryloxy, aryloxykarbonylu; halogenalkylkarbonylu; halogenalkoxykarbonylu; alkylthiokarbonylu; arylthiokarbonylu; acyloxymethoxykarbonylu; cykloalkyl, bicykloalkyl, aryl, acyl, benzoyl,
    NR7 a R8 spolu tvoří 4 až 12 členný monocyklus obsahující jeden atom dusíku nebo bicyklický kruh volitelně substituovný jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny nižší akyl, karboxylové deriváty, aryl nebo hydroxy skupina, a kde cyklus volitelně obsahuje heteroatom vybraný ze skupiny sestávající z O, N a S;
    R5 je vybráno ze skupiny zahrnující H a alkyl;
    nebo • · · · • · ·· • · · · · • · · ·
    144
    A1 je
    V2
    I
    R kde Y je vybráno ze skupiny sestávající z alkylu; cykloalkylu; bicykloalkylu; arylu; monocyklických heterocyklů;
    Zi je vybráno ze skupiny zahrnující CH2, O, CH2O, NH, CO, S, SO, CH(OH) a SO2,
    Z2 je raménko obsahující 1 až 5 uhlíkových atomů volitelně obsahujících 0 až 3 heteroatomy vybrané ze skupiny sestávající z O, S a N; volitelně Zi - Z2 může dále obsahovat karboxamid, sulfon, sulfonamid, alkenyl, alkynyl nebo acyl skupinu; kde uhlíkové a dusíkové atomy Zi - Z2 jsou volitelně substituovány alkylem, alkoxy, thioalkylem, alkylsulfonem, arylem, alkoxyalkylem, alkylamino, heteroarylem, hydroxy, alkenylem, alkynylem, karboxyalkylem, halogenem, halogenalkylem nebo acylamino skupinou;
    Zi -Z2 je připojeno ke kruhu A v meta- nebo para- poloze vzhledem k X-substituentu; n je celé číslo 1 nebo 2;
    Rc je vybráno ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, halogenu, hydroxy, nitro, alkoxy, amino, halogenalkylu, arylu, heteroarylu, alkoxyalkylu, aminoalkylu, hydroxyalkylu, thioalkylu, alkylamino, arylamino, alkylsulfonalymino, acylu, acylamino, sulfonylu, sulfonamidu, allylu, alkenylu, methylendioxy, ethylendioxy, alkynylu, alkynylalkylu, karboxy, alkoxykarbonylu, karboxymido, kyano, a -(CH2)nCOR, kde nje 0 až 2 aRje vybráno ze skupiny zahrnující hydroxy, alkoxy, alkylu a amino skupiny;
    X je vybráno ze skupiny sestávající z-CHRe-, -NRf-, -0-, -S-, -S02-, a-CO-, kde Reje H, nižší alkyl, alkoxy, cykloalkyl, alkoxyalkyl, hydroxy, alkynyl, alkenyl, halogenalkyl, thioalkyl, aralkyl nebo aryl; kde pak Re je hydroxy, přičemž hydroxy skupina může volitelně tvořit lakton s karboxylovou funkční skupinou řetězce; kde R je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, aryl, benzyl a halogenalkyl;
    Y je vybráno ze skupiny sestávající z -(CH2)P, -CRg-, -NRS , CO a S02, kde Rg je vybráno ze skupiny sestávající H, alkylu, halogenalkylu, alkoxyalkylu, alkynylu, arylu, heteroarylu, aralkylu, hydroxy, hydroxyalkylu, alkoxy a karboxyalkylu; kde p je O nebo 1;
    skupina X-Y může obsahovat skupinu vybranou ze skupiny sestávající z acylu, alkylu, sulfonylu, amino, etheru, thioetheru, karboxamido, sulfonamido a olefinu;
    Y3 a Y4 jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající z alkylu, halogenalkylu, hydroxy, alkoxy, kyano, halogenu, aralkylu, heteroaralkylu, alkoxyalkylu, hydroxyalkylu, • · • · · · • · · · · · * · • · · · · · 4 • · · · · · « · «
    145 aryloxyalkylu, alkylsulfonu, alkenu nebo alkynu; kde alkyl skupina volitelně obsahuje 0 až 4 heteroatomy vybrané ze skupiny zahrnující N, O a S;
    pokud je Y3 aryl nebo heteroaryl, Y4 může být aryl, heteroaryl, alken, alkyn, alkoxy, hydroxy, kyano, alkoxyalkyl nebo alkylsulfon;
    Y5jeC;
    volitelně, Y3, Y4 a Y5 mohou tvořit sulfon (SO2) skupinu; nebo Y3 spolu s Y4 tvoří 3 až 8 členný monocyklus nebo 7 až 11 členný bicyklus, obsahující 2 až 3 dvojné vazby, volitelně obsahující 0 až 4 heteroatomy nebo funkční skupinu zahrnující O, NR9, S, CO nebo SO2, volitelně substituovanou jedním nebo více substituenty vybranými ze skupiny sestávající z alkylu, halogenalkylu, halogenu, alkoxy, alkynu, kyano, alkylsulfonu, sulfonamidu, karboalkoxy a karboxyalkylu;
    Rbje X2 - Rh, kde X2 je vybráno ze skupiny sestávající z O, S a NRJ, kde Rh a R* jsou nezávisle vybrány ze skupiny sestávající z H, alkylu, arylu, aralkylu, acylu a alkoxyalkylu;
    a farmaceuticky přijatelné soli polymorfní formy.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde je , izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a jejich vybrán ze skupiny sestávající z:
    'OíB3
    B4 hydroxy, amin, alkylamin, dialkylamin, karboxyl, kde Za je H, alkyl, alkoxy, alkoxykarbonyl, hydroxyalkyl, halogen nebo halogenalkyl a R1 je H, alkyl, alkoxyalkyl, acyl, halogenalkyl nebo alkoxykarbonyl, a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a jejich polymorfní formy.
    Sloučenina podle nároku 2, kde pkz —' je vybrán ze skupiny sestávající z:
    pyridylamino, imizolylamino, morfolinopyridinu, tetrahydronaftyridinu,
  3. 3.
    A A · A A « A A A
    A A « A A A A A > ·
    146 A A A A A A oxazolylamino, thiazolylamino, pyrimidinylamino, chinolin, izochinolin, tetrahydrochinolinu, imidazopyridinu, benzimidazol, pyridonu nebo chinolonu.
  4. 4.
    Sloučenina podle nároku 2,kde vybraný ze skupiny sestávající se z:
    HET ,k/x
    B = CH2, O, CO. S, CFj, SO2i NR R' = OR. OH, H, Me n = 1 or 2
    B = NH, O,S B=N,CH
    B = NH. O. S
    B = NH, NMe, O, S
    R = H, Me
    X = CH2, O. S, NR. SO2, CONR
    NR
    R' = OR, OH, Me kde X4 a X5 jsou vybrány ze skupiny sestávající z H, alkylu, rozvětveného alkylu, alkylamino, alkoxyalkylamino, halogenalkylu, thioalkylu, halogenu, amino, alkoxy, aryloxy, alkoxyalkylu, hydroxy, kyano nebo acylamino skupiny; X6 je vybráno ze skupiny zahrnující H, alkyl, hydroxy, halogen, alkoxy a halogenalkyl; pyridylový kruh může být volitelně kondenzován s nasyceným nebo nenasyceným 4 až 8 členným kruhem;
    147 a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a polymorfní formy.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 4, kde X4 a X5 jsou vybrány ze skupiny sestávající z methylu, methoxy, aminu, methylaminu, trifluormethylu, dimethylaminu, hydroxy, chloru, bromu, fluoru a kyano.
  6. 6. Sloučenina podle nároku 4, kde když Zi je CO nebo SO2.
  7. 7. Sloučenina podle nároku 4, kde Ál-Z2 je pyridin, imidazol, thiazol, oxazol, benzimidazol nebo imidazopyridin.
  8. 8. Sloučenina podle nároku 4, kde heterocykly Α’-Ζς jsou vybrány ze skjupiny sestávající se z:
    B = NH, O, S Β = NH, O, S B = NH, O.S Β = NH. O. S
    R = H,Me R = H, Me R = H, Me R = H, Me %
    B = NH, O, S Β = N, CH
    R = H.Me R = H,Me
    Β = N. CH R = H. Me
    B = NH. O, S R = H. Me .R and
    Β = N. CH R = H. Me a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a polymorfní formy.
  9. 9. Sloučenina podle nároku 1
    CH2CORb
    148 ♦ · toto • t to « *to · » · · • · to ···· ·« to» toto # · t • · ··· « « * f · to to to · · · · ·· «· • to ··*« kde n= 1;
    A je fenyl substituovaný Rc;
    Y je (CH2)p; kde p = 0;
    Y5jeC;
    a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a polymorfiií formy.
  10. 10. Sloučenina podle nároku 1
    CH2CORb kde n= 1;
    A je fenyl substituovaný Rc;
    Y je (CH2)P; kde p = 0;
    Y5jeC;
    Y3 spolu s spolu s Y4 tvoří monocyklický nebo bicyklický kruh B;
    a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a polymorfní formy.
  11. 11. Sloučenina podle nároku 10, kde kruh B j e j eden z následuj ících kruhových systémů:
    Rd i
    • · kde Rd je vybrán ze skupin sestávající z vodíku, alkylu, acylu, alkoxyalkylu, halogenalkylu, alkylsulfonu, arylu, heteroarylu, aralkylu a heteroaralkylu; a farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a jejich polymorfní formy.
  12. 12. S loučenina podle nároku 1 kde:
    n=l;
    A je fenylový kruh substituovaný Rc;
    Yje (CH2)p; kdep=0;
    Y5 spolu s Y3 a Y4 tvoří sulfon (SO2) skupinu;
    a jejich farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a jejich polymorfní formy.
  13. 13. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny sestávající z l-[2-oxo-2-[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctové kyseliny;
    l-[2-[4-[3-(2-pyridinyalmino)propoxy]fenyl]ethyl]cyklopentanoctové kyseliny;
    1 - [2-OXO-2- [4- [2-(2-pyridinylamino)ethoxy] fenyl] ethyljcyklopentanoctové kyseliny;
    4- {4-[2-(6-aminopyridin-2-yl)ethoxy] fenyl} -3,3 -dimethylbutanové kyseliny;
    3,3 -dimethyl-4- {4- [3 -(pyridin-2-ylamino)propoxy] fenyl} butanové kyseliny;
    l-[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklopropanoctové kyseliny;
    [ [ [4- [3 -(2-pyridinylamino)propoxy] fenyl]methyl] sulfonyl] octové kyseliny;
    1 -[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklobutanoctové kyseliny;
    l-[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]cyklopentanoctové kyseliny; [[[4-[2-[6-(methylamino)-2-pyridinyl]ethoxy]fenyl]methyl]sulfonyl]octové kyseliny;
    3,3-dimethyl-4-{4-[2-(5,6,7,8-tetrahydro-l,8-naftyridin-2-yl)ethoxy]fenyl}butanové kyseliny;
    • ·
    150
    3- benzyl-3-methyl-4-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}butanové kyseliny;
    4- {3-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny; 4-{3-kyano-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny;
    4- {3-ethynyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny;
    5- (3-karboxy-2,2-dimethylpropyl)-2-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzoové kyseliny;
    l-acetyl-4[[4-[3-(2-pyridinylamino)propoxy]fenyl]methyl]-4-piperidinoctové kyseliny; (l-acetyl-3-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]benzyl}piperidin-3-yl)octové kyseliny;
    4- {3-brom-5 -fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy] fenyl} -3,3 -dimethylbutanové kyseliny; 4-{3-fluor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny; 4-{3-methoxy-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny; 4-{3-chlor-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny;
    3- methyl-3-{4-[3-(pyridin-2-ylamino)-propoxy]-benzyl}-pent-4-enové kyseliny;
    4- {2-brom-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny; 4-{2-kyano-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny; 4-{2-ethynyl-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-3,3-dimethylbutanové kyseliny;
    3,3-dimethyl-4-{2-(fenylethynyl)-4-[3-(pyridin-2-ylamino)propoxy]fenyl}-butanové kyseliny; a její farmaceuticky přijatelné soli, izomery, enantiomery, tautomery, racemáty a její polymorfní formy.
  14. 14. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny podle nároků 1 až 13 a farmaceuticky přijatelný nosič.
  15. 15. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro použití při léčbě stavu zprostředkovaného ανβ3 integrinem u savce.
  16. 16. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro použití při léčbě stavu u savce, přičemž léčený stav je vybrán ze skupiny sestávající z růstu pevného tumoru, metastázy tumoru, angiogenezy, osteoporózy, humorální hyperkalcemie malignance, migrace hladkých svalových buněk, restenózy, aterosklerózy, makulámí degenerace, retinopatie a artritidy.
  17. 17. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro použití společně s chemoterapeutickým činidlem při léčbě neoplazie u pacienta, který to potřebuje.
    • ·
    151
  18. 18. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčbu stavu zprostředkovaného ανβ3 integrinem u savce.
  19. 19. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro výrobu farmaceutické kompozice pro léčbu stavu u savce, přičemž léčený stav je vybrán ze skupiny sestávající se z růstu pevného tumoru, metastázy tumoru, angiogenezy, osteoporózy, humorální hyperkalcemie malignance, migraci hladkých svalových buněk, restenózy, aterosklerózy, makulámí degeneraci, retinopatie a artritidy.
  20. 20. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 pro výrobu farmaceutické kompozice pro společnou léčbu s chemoterapeutickým činidlem, neoplazie u pacienta, který to potřebuje.
CZ2003459A 2000-08-30 2001-08-29 GEM-substituované antagonisty integrinu alfa v beta 3 CZ2003459A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22918600P 2000-08-30 2000-08-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2003459A3 true CZ2003459A3 (cs) 2003-09-17

Family

ID=22860154

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2003459A CZ2003459A3 (cs) 2000-08-30 2001-08-29 GEM-substituované antagonisty integrinu alfa v beta 3

Country Status (16)

Country Link
EP (1) EP1313705A1 (cs)
JP (1) JP2004510708A (cs)
KR (1) KR20030027106A (cs)
CN (1) CN1471512A (cs)
AU (1) AU2001288515A1 (cs)
BR (1) BR0113671A (cs)
CA (1) CA2419699A1 (cs)
CZ (1) CZ2003459A3 (cs)
EA (1) EA200300226A1 (cs)
IL (1) IL154496A0 (cs)
MX (1) MXPA03001759A (cs)
NO (1) NO20030925L (cs)
NZ (1) NZ524159A (cs)
PL (1) PL365729A1 (cs)
WO (1) WO2002018340A1 (cs)
ZA (1) ZA200301162B (cs)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007502300A (ja) * 2003-08-13 2007-02-08 カイロン　コーポレイション Ｇｓｋ−３インヒビターおよびその使用
CA2584041A1 (en) * 2004-10-14 2006-04-27 Pharmacia Corporation Biphenyl integrin antagonists
CN101880270B (zh) * 2009-05-07 2012-10-03 上海华升生物科技有限公司 一种制备1,1-环丙烷二甲醇环亚硫酸酯的方法
RS64535B1 (sr) 2013-09-24 2023-09-29 Fujifilm Corp Farmaceutska kompozicija jedinjenja koje sadrži azot ili njegovu so, ili njihov kompleks sa metalom
JP7437495B2 (ja) * 2019-10-16 2024-02-22 モーフィック セラピューティック，インコーポレイテッド ヒトインテグリンα４β７の阻害

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ239846A (en) * 1990-09-27 1994-11-25 Merck & Co Inc Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
KR19990076877A (ko) * 1995-12-29 1999-10-25 스티븐 베네티아너 비트로넥틴 수용체 길항제
US5919792A (en) * 1996-10-30 1999-07-06 Merck & Co., Inc. Integrin antagonists
US6239138B1 (en) * 1997-07-25 2001-05-29 Smithkline Beecham Corporation Vitronectin receptor antagonist
TR200000792T2 (tr) * 1997-09-24 2000-09-21 Smithkline Beecham Corporation Vitronektin reseptör antagonistleri.

Also Published As

Publication number Publication date
CA2419699A1 (en) 2002-03-07
PL365729A1 (en) 2005-01-10
IL154496A0 (en) 2003-09-17
EP1313705A1 (en) 2003-05-28
NO20030925L (no) 2003-04-24
CN1471512A (zh) 2004-01-28
ZA200301162B (en) 2004-05-12
BR0113671A (pt) 2004-01-06
WO2002018340A1 (en) 2002-03-07
MXPA03001759A (es) 2004-11-01
NO20030925D0 (no) 2003-02-27
JP2004510708A (ja) 2004-04-08
NZ524159A (en) 2004-08-27
KR20030027106A (ko) 2003-04-03
EA200300226A1 (ru) 2003-10-30
AU2001288515A1 (en) 2002-03-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20040092497A1 (en) Heteroarylakanoic acids as intergrin receptor antagonists
NZ507292A (en) Heterocyclic glycyl beta-alanine derivatives useful as vitronectin antagonists
CA2268940A1 (en) Integrin antagonists
US20020077321A1 (en) Cycloalkyl alkanoic acids as integrin receptor antagonists
JP2004521079A (ja) アルファーｖベータ３アンタゴニストとして有用な二環式環系を含有する化合物
US6531494B1 (en) Gem-substituted αvβ3 antagonists
JP4250423B2 (ja) アリール置換脂環式化合物及びそれを含有する医薬組成物
CZ2003459A3 (cs) GEM-substituované antagonisty integrinu alfa v beta 3
US6689754B1 (en) Heterocyclic glycyl β-alanine derivatives
US6720315B2 (en) Dihydrostilbene alkanoic acid derivatives
US20040043988A1 (en) Cycloalkyl alkanoic acids as intergrin receptor antagonists
MX2014001052A (es) Compuesto novedoso que tiene actividad inhibidora de angiogénesis, metodo para preparar del mismo, y composicion farmaceutica que comprende el mismo.
US20080064716A1 (en) Biphenyl Integrin Antagonists