CZ20032564A3 - Značené antagonisty receptoru makrofágového lapače pro zobrazování atherosklerosy a citlivých plaků - Google Patents

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká detekovatelně označených antagonistů makrofágového saprofilního receptoru vhodných pro diagnózu a monitorování různých kardiovaskulárních chorob, které zahrnují ale nejsou omezeny na atherosklerózu, narušitelný (rozpadavý) plak, koronární arteriální chorobu, renální choroby, trombózu, přechodnou ischemií v důsledku tvorby shluků, mrtvici, infarkt myokardu, transplantaci orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemii. Antagonisté makrofágového receptoru jsou biomolekuly, které se vážou na makrofágové saprofilní receptory třídy A (SR-A), které jsou nadprodukovány v atherosklerotických lezích. Detekovatelně značky zahrnují radionuklidy pro nukleární scintigrafii nebo pozitronovou emisní tomografii (PET), paramagnetické kovové ionty nebo supermagnetické částice pro magnetické rezonanční - zobrazení (MRI), ionty těžkého kovu pro rentgenovou nebo počítačovou tomografii (CT), plynem naplněné mikrobubliny pro cílenou ultrasonografii (US) nebo optická barviva pro optické zobrazení, porfyriny nebo texafyriny pro NMR, fluorescenční zobrazení nebo fotodynamickou terapii. Tento vynález také poskytuje metody in vivo pro detekci a zobrazení těchto vaskulárních patologických stavů spočívající v podávání detekovatelně značených antagonistů saprofilního receptoru podle tohoto vynálezu pacientovi a detekci nebo zobrazení umístění patologických jevů. Tento vynález také poskytuje farmaceuticky přijatelné kompozice obsahující detekovatelně značené antagonisty saprofilního receptoru.

« ·

Dosavadní stav techniky

Kardiovaskulární choroby jsou nej častější příčinou úmrtí ve Spojených státech, ročně mají na svědomí více než jeden milion úmrtí. Atheroskleróza přispívá jako hlavní složka ke koronární srdeční chorobě a je primární příčinou nenáhlých úmrtí v západních zemích (Coopers, E. S. Circulation 1993, 24, 629 - 632; WHO-MONICA Project. Circulation 1994, 90, 583 - 612). Byly učiněny zásadní pokroky při definici etiologie a potenciálního léčení atherosklerózy a jejích důsledků, zahrnujících infarkt myokardu, angínu, selhání orgánu a mrtvice. I přes tyto pokroky zůstává mnoho nezodpovězených otázek včetně těch, jak a kdy se atherosklerotické léze stávají narušitelné a ohrožující život, nej lepšího bodu intervence a jak detekovat a monitorovat vývoj léze.

Je dobře zdokumentováno, že k atheroskleróze přispívá množství rizikových faktorů. Tyto rizikové faktory zahrnuj například vysoký krevní tlak, zvýšenou hladinu celkového sérového cholesterolu, vysoké hladiny lipoproteinového (LDL-) cholesterolu, nízké hladiny HDL (high density lipoprotein) cholesterolu, diabetes mellitus, značná obezita a kouření cigaret (Oxford et al. Am. J. Cardiol. 2000, 86 (suppl.) 6H-11H). Až dodnes bylo ošetření atherosklerózy zaměřeno na snížení hladin cholesterolu a modifikaci lipidů. Avšak nedávné studie ukazují, že 40 % úmrtí v důsledku koronární choroby se vyskytlo u lidí s hladinou celkového cholesterolu nižší než 220 mg/dl. (Orford et al. Am. J. Cardiol. 2000, 86 (suppl.) 6H-11H).

Při atherogenézi zvýšené hladiny LDL v plazmě vedou k chronické přítomnosti LDL v arteriální stěně.

Modifikovaný LDL aktivuje entotheliální buňky, které přitahují monocyty (Orford et al. Am. J. Cardiol. 2000, 86 (Suppl) 6H-11H). Tyto monocyty vstupují do stěn cév, mění se na makrofágy a podrobují modifikované lipoproteiny endocytóze cestou přes saprofilní receptory. Tento nekontrolovaný příjem případně vede k tvorbě lipidy naplněných pěnových buněk, úvodnímu kroku atherosklerózy. Pokud je makrofág přítomen v prostředí, které stále tvoří modifikovaný LDL, bude akumulovat tukové kapičky cholesterylesterů do té doby, než makrofág zemře v důsledku toxické lipidové zátěže. Uvolněný lipid poté vytvoří nebuněčné nekrotické jádro atherosklerotické léze. Následné zapojení fibroblastu, vaskulárních buněk hladkého svalstva, cirkulačních monocytů a T-lymfocytů završí zánětlivou odezvu a tvorbu zralého atherosklerotického plaku. Od makrofágu odvozené pěnové buňky jsou koncentrovány v plaku, kde jejích vylučované proteinázy a kolagenázy mohou přispívat k prasknutí plaku, které může vést k vážné trombotické příhodě.

Vývoj koronární atherosklerotické choroby může být rozdělen do pěti fází (Fuster et al. N. Engl. J. Med. 1992, 326, 242 - 250). Fáze 1 je představována malým plakem, který je přítomen u většiny lidí mladších 30 roků bez ohledu na jejich zemi původu. Fáze 1 obvykle pokračuje pomalu (typy lézí I až III). Fáze 2 je představována plakem, ne nezbytně velmi stenotickým, s vysokým obsahem tuku, který je náchylný k prasknutí (typy lézí IV a Va). Plak fáze 2 může prasknout se sklonem ke změně své geometrie a k tvorbě stěnového trombu. Tyto procesy představují definici fáze 3 (léze typu I) s následným nárůstem stenózy, mající za možný následek angínu nebo náhlé ischemické úmrtí. Stěnové a okluzivní tromby z plaku • 0 0 0 • 0 00000 fáze 3 a 4 při uspořádání ve spojovací tkáni mohou přispívat k progresi atherosklerotického procesu představované silně stenotickými nebo okluzivními plaky fáze 5 (typ lézí Vb a Vc). Silně stenotické plaky fáze 5 se mohou jevem městnání a/nebo deendothelizace stát komplikovanými tromby a/nebo myoproliferativními odezvami, také vedoucími k okluzivnímu plaku fáze 5. Dvě třetiny koronárních okluzí jsou výsledkem tohoto pozdního stenotického typu plaku a nejsou ve vztahu k prasknutí plaku. Na rozdíl od narušení méně stenotických na tuk bohatých plaků, které vedou k okluzi a následnému infarktu nebo jiným akutním koronárním syndromům, tyto procesy okluze z pozdně stenotických plaků mají tendenci zůstat nenápadné, protože postupující silná stenóza a ischemie zvyšují protektivní kolaterální cirkulaci (Fuster et al, N. Engl. J. Med., 1992, 326, 242 - 250).

Schopnost detekovat, kvantitativně vyhodnotit a monitorovat tvorbu atherosklerotického plaku má zásadní klinickou důležitost v důsledku vývoje těchto plaků na stabilní koronární choroby arterii nebo výskytu akutních ischemických syndromů způsobených prasknutím narušitelného plaku. Byly popsány různé možnosti zobrazení pro detekcí atherosklerotíckých lézí a trombózy spojených s prasknutím plaku (Vallabhajosula, S. a Fuster, V. J. Nucl. Med. 1997, 38, 1788 - 1796; Marmion, M. a Deutsch, E. J. Nucl. Biol. Med. 1996, 40, 121 - 131; Cerqueira, M. D. Seminars Nucl. Med. 1999, 29, 339 - 351; Narula, J. J. Nucl. Cardiol.

1999, 6, 81 - 90; Narula, J. Nucl. Med. Commun. 2000, 21,

601 - 608; Meaney et al. J. Magn. Reson. Imaging 1999, 10,

326 - 338; Knopp et al. J. Magn. Reson. Imaging 1999, 10,

314 - 316; Goyen et al. Eur. J. Radiol. 2000, 34, 247-256;

Becker et al. Eur. Radiol.2000, 10, 629 - 635).

·· ·♦ ·· ··*· • · · · * · ·

K zobrazení atherosklerózy a k přístupu k progresi a stabilizaci choroby jsou rutinně používány různé invazivní a neinvazivní techniky. Ty zahrnují koronární angiografii, intravaskulární ultrazvukovou angioskopii, intravaskulární zobrazení magnetickou rezonancí a termické zobrazení plaku za použití infračervených katetrů. Tyto techniky byly úspěšně použity k identifikaci narušitelných plaků. Tyto techniky jsou však obecně invazivní.

Rozpustné markéry, jako je P-selektin, von Willebrenčův faktor, angiotensin-přetvářející enzym (C146), C-reaktivní protein, D-dimer (Ikeda et al. Am. J. Cardiol., 1990, 65, 1693-1696.) a aktivované cirkulační zánětlivé buňky se nacházejí u pacientů s nestabilní angínou pectoris, ale není zatím známo, zda tyto látky lze použít k předvídání vzniku infarktu nebo smrti (Mazzone et al. Circulation, 1993, 88, 358 - 363). Je však známo, že přítomnost těchto látek nemůže být použita k lokalizaci předmětné léze.

Prvky snímající teplotu obsažené v katetrech byly použity pro lokalizaci plaku podle teorie, že zánětlivé procesy a proliferace buněk jsou exothermické procesy. Například US patent Č. 4986671 popisuje vláknitou optickou sondu s jednoduchým senzorem tvořeným elastickou čočkou potaženou materiálem odrážejícím světlo a na teplotě závislým, přes který je potažena vrstva materiálu, který absorbuje infračervené záření. Tato zařízení se používají při stanovení charakteristik tepla nebo tepelného proudění v cévách. Zařízení měří tyto parametry jako tlak, tok a teplotu krve v cévách. US patent č. 4 752 141 popisuje optické zařízení pro zjišťování teploty arteriální stěny po kontaktu. Avšak rozlišování teploty kontaktem požaduje znalost, kde má být katetr umístěn. Tyto techniky užívající • · 0

katetry nebo zařízení jsou invazivní a někdy mohou spustit tvorbu nebo prasknutí plaku nebo v ně mohou vyústit.

Angiogram jednoduše odráží luminální průměr a poskytuje měření stenózy s výborným rozlišením. Angiogram však nezobrazuje cévní stěnu nebo různé histopatologické složky. Tyto techniky se však staly hlavní částí diagnózy koronárních, karotidních a periferních arteriálních lézí (Galis et al, Proč. Acad. Sci. USA, 1995, 92, 402 - 406; Ambrose, J. A. v: Fuster, V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura Publishing Company, lne., 1996, 105 - 122; Kohler, T. R. v: Fuster, V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura Publishing Company, lne., 1996, 205 - 223; Dinsmore, R. E. a Rivitz,

S. M. v: Fuster, V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura Publishing Company, lne., 1996, 277 - 289), a jsou „zlatým standardem pro anatomickou diagnózu bez ohledu na omezenou specifitu a citlivost.

Angiogram může být užitečný pro předpovídání narušítelného plaku, neboť v oblastech nízkého střihu protilehlých rozdělovačům toku je více pravděpodobný rozvoj atherosklerózy (Ku et al. Atherosclerosis 1985, 5,

292-302). Avšak většina pacientů, u kterých se vyvinul akutní infarkt myokardu nebo u nichž došlo k náhlému úmrtí, neměla předchozí symptomy, natož angiografické (Farb et al. Circulation 1995, 93, 1701 - 1709). Určitá angiografická data odhalila, že obvyklý profil plaku je dosti specifický, třebaže málo citlivý, indikátor trombózy (Kaski et al. Circulation 1995, 92, 2058 - 2065). Tyto plaky mají častý vývoj na kompletní okluzi, zatímco jiné jsou stejně vhodné

0

0 »00 ι

0000 k vývoji, ale méně často dosahují bodu kompletní okluze (Aldeman et al. J. Am. Coll. Cardiol. 1993, 22,

1141 - 1154). Ty, které se neočekávaně vyvinou na okluzi, se skutečně podílí na většině infarktů myokardu (Ambrose et al. J. Am. Coll. Cardiol. 1988, 12, 56 - 62; Little et al. Circulation 1988, 78, 1157 - 1166). Jedním z hlavních omezení angiografie je to, že rozvinutá atherosklerotická choroba může celkově zúžit světlost cévy, přičemž na základě výsledku angiografie se podcení stupeň stenózy.

Velikost plakové okluze není nezbytně určující. Studie ukazují, že většina okluzivních trombů se nachází nad prasklým nebo vředovým plakem, u kterého se odhadlo, že bude produkovat stenózu méně než 50 % průměru cévy. Tyto stenózy pravděpodobně nezpůsobí angínu nebo neústí v pozitivní námahový test. Ve skutečnosti většina pacientů, kteří zemřeli na infarkt myokardu, neměla chorobu srdečních cév nebo vážnou levou ventrikulární dysfunkci {Farb et al. Circulation 1995, 93, 1701 - 1709).

Angioskopie je jinou technikou pro vizualizaci stěn cév spíše než světlosti a pro charakterizaci atherosklerotických chorob. Angioskopická technika odhaluje plak a znaky povrchu, které nejsou viditelné angiografií. Kromě toho dovoluje pozorování barvy (červená, bílá nebo žlutá) materiálu tepny a je proto vysoce citlivá pro detekci trombů. Ukazuje však pouze povrch léze a není reprezentativní pro vnitřní heterogenity plaku. Jako rutinní klinický nástroj nemusí být praktická v důsledku tloušťky katetru a invazivnosti techniky. Patenty Spojených států US č. 5 217 456 a US č. 5 275 594 popisují použití světla, které vyvolává fluorescenci v tkáních a energie laseru, která stimuluje fluorescenci v nezvápněných tkáních. Tyto typy zařízení rozlišují zdravé tkáně od ·· · atherosklerotického tlaku, ale nejsou klinicky vhodné pro rozlišeni narušitelného tlaku od méně nebezpečného stabilního tlaku.

B-mode ultrasonografie s Dopplerovým zobrazením (Duplex skenování) o vysokém rozlišení v reálném čase představuje jeden z nej lepších prostředků pro vizualizaci karotídních arterií (Patel et al. Stroke 1995, 26,

1753 - 1758). Může být stanovena tloušťka stěny a kvantitativní analýza množství a plochy plaku. Echogenecita plaku odráží vlastnosti plaku; echoluscentní heterogenní plak je spojen s jak intraplakovou hemoragií tak lipidy, přičemž echodensní homogenní plak je většinou vláknitý plak. Kromě toho konfigurace plaku (stěnový nebo uzlíkový) může identifikovat aktivní (stěnové - murální) léze, které jsou více náchylné proliferaci a tromboembolismu (Weinberger et al. J. Am. Med. Assoc. 1995, 12,

1515 - 1521) . Protože technika není invazívní, může být použita k vyhodnocení účinnosti ošetření léčivy a k studii přirozeného vývoje atherosklerózy (délkové studie) sledováním jedinců se zvýšeným rizikem atherosklerózy.

V koronárních a periferních arteríích dolních končetin však Duplex skenování není klinicky tak užitečné jako tradiční angiografie.

Atherosklerotická kalcifikace je organizovaný a regulovaný proces a nachází se častěji u pokročilých lézí, ačkoli se může vyskytnout v malých množstvích u časných lézí (Erbel et al. Eur. Heart J. 2000, 21, 720 - 732;

Wexler et al. Circulation 1996, 94, 1175 - 1192). Existuje silné spojení mezi koronárním vápníkem a obstruktivní koronární arteriální chorobou a je jasně ukázáno, že množství koronárního kalcía bylo užitečné pro předpovězení rozsahu koronární arteriální choroby (Agatson et al. J. Am.

i • · • ·

Coli. Cardiol. 1990, 15, 827 - 832; Schmermund et al. Am.

J. Cardiol. 2000, 86, 127 - 132; Budoff et al. Am. J. Cardiol. 2000, 86, 8 - 11). MRI, fluoroskopie, elektronová CT (electron beam CT -EBCT) a spirálová CT mohou identifikovat vápenné usazeniny v krevních cévách. Avšak pouze EBCT může kvantifikovat množství nebo objem vápníku (Wexler et al. Circulation 1996, 94, 1175 - 1192). Kromě toho zobrazení EBCT myokardia může být získáno během 0,1 s. Díky krátkému času odezvy zobrazení jsou eliminovány pohyblivé artefakty (Brundage et al. In: Fuster, V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura Publishing Company, lne., 1996, 417-427). Bylo dobře zdokumentováno, že přítomnost koronárního arteriálního vápníku stanovená EBCT může být citlivý časný znak přítomnosti a progrese atherosklerotické léze před rozvojem komplikovaných lézí (Janowitz et al. Am. J. Cardiol. 1993, 72, 247 - 254).

Hlavní limitace použití EBCT pro charakterizaci vápníku v plaku je reprodukovatelnost (Becker et al. Eur. Radiol. 2000, 10, 629-635). Zvláště reprodukovatelnost malých a velmi malých skóre vápníku (menší než 100) je nižší než u vyšších hodnot skóre. Kromě toho sledování koronárního vápníku nemůže odhalit přítomnost atherosklerotického plaku, který má malé nebo žádné zvápnění a tyto měkké na tuk bohaté plaky jsou snad nejnebezpečnější ze všech, neboť jsou narušitelné prasknutím jako výsledek hemodynamického stresu nebo zánětu (Carrington, C. Diagnostic Imaging, 2000, (duben), 48 - 53; Doherty et al. Am. Heart J. 1999, 137, 806 - 814).

Jak se hromadí buňky červených krvinek a destiček v místě prasknutí, tvoří se shluky krve a blokují arterii, což způsobuje srdeční infarkt. Vápník nemusí být biologicky ► · · I ·· ·· • · · ideálním markérem, protože zvápnělá léze je zřejmě stabilní léze, méně náchylná k prasknutí. Na základě novějších dat se nezdá, že by bylo možno skórem koronárního vápníku předpovědět myokardiální perfuzní deficity, prasknutí plaku nebo kardiovaskulární příhody (Rurnberger, J. A.

Circulation 1998, 97, 2095 - 2097; Polák, J. F. Radiology 2000, 216, 323 - 324).

Technika magnetické rezonance za použití gradientních echometod k vytvoření obrazů proudící krve jako pozitivního kontrastu v lumenu cév je obdobná jako konvenční angiografické techniky (Doyle, M. a Pohost, G. v: Fuster,

V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura Publishing Company, lne., 1996, 313 - 332; Grist, T. a Turski, P. A. v: Fuster, V. (Ed.). Syndromes of Atherosclerosis: correlations of clinical imaging and pathology. Armonk, NY: Futura, Publishing Company, lne., 1996, 333 - 362). Magnetická rezonanční angiografie (MRA) koronárních arterií je současně předmětem vývoje a rozlišení je v rozmezí 1 mm³. MRA techniky poskytují obrazy lumenu cév, přičemž studie MRI jsou často prováděny k vyhodnocení účinku chorob na tkáně zásobené cévami. Nedávný vývoj ve vysokorozlišovacím (0,4 mm) rychlospinovém-echo zobrazení a počítačem řízených technik vizualizuje in vivo atherosklerotickou plakovou aktivitu a intimální zúžení (Yuan et al. J. Nagn. Reson. Imaging 1994, 4, 43 - 49).

V nedávné klinické studii u pacientů s karotidní atherosklerózou byla první MRI neinvazivní zobrazovací možností k dosažení rozlišení lipidových jader, vláknitých uzávěrů, kalcifikace, normálního média, vnější vrstvy cévní stěny, intraplakové hemoragie a akutní trombózy (Toussaint et al. Atheroscler. Thromb. 1995, 15, 1533 - 1542;

Toussaint et al. Circulation 1996, 94, 932 - 938). Klíčovou výhodnou zobrazovacích technik se zvýšeným kontrastem je schopnost poskytnout detailní „funkční informaci o vysoké přesnosti (McVein, E. R. Nagn. Reson. Imaging 1996, 14,

137 - 150; Glover, G. D. a Herfkins, R. J. Radiology 1998, 207, 289 - 235).

V posledních dvou desetiletích bylo vyvinuto mnoho izotopových indikátorů založených na několika molekulách a buněčných typech zapojených do atherosklerózy. Potenciální užitečnost těchto izotopových indikátorů pro zobrazení atherosklerotických lézí byla studována u zvířecích modelů a byla nedávno publikována (Vallabhajosula, S. a Fuster, V. J. Nucl. Med. 1997, 38, 1788 - 1796; Cerqueira, M. D. Seminars Nucl. Med. 1999, 29, 339 - 351; Narula, J. J.

Nucl. Cardiol. 1999, 6, 81 - 90; Narula, J. Nucl. Med. Commun. 2000, 21, 601 - 608). Obecně řečeno izotopově značené proteiny a destičky vykázaly určitý klinický potenciál jako zobrazovací činidla atherosklerózy, ale v důsledku špatných poměrů cíl/pozadí a cíl/krev tato činidla nejsou ideální pro zobrazení koronárních nebo dokonce karotidních lézí. Jeví se, že izotopově značené peptidy, fragmenty protilátek a metabolické látky jako FDG nabízí nové možnosti nukleárních scintigrafických technik v neinvazivním zobrazení atherotrombózy. Avšak neinvazivní zobrazení atherosklerózy zůstává výzvou pro nukleární techniky hlavně v důsledku jejich vnitřních nedostatků, jako je nízké rozlišení ve srovnání s MRI a CT.

Většina z těchto technik identifikuje některé z morfologických a funkčních parametrů atherosklerózy a poskytuje kvalitativní nebo semikvantitativní odhad relativního rizika spojeného s chorobou. Znalost složení

»» ···· atherosklerotického plaku.může poskytnout okno do vývoje léze, která může vyústit v rozvoj specifických terapeutických strategií pro intervenci. Avšak tyto diagnostické procedury jsou buď invazivní nebo poskytují málo informací o zásadní patofyziologii, jako je buněčné složení plaku a biologické charakteristiky každé složky plaku na molekulární úrovni.

Je potřeba takových neinvazivních metod diagnózy a monitorování různých kardiovaskulárních chorob (například atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie). Neinvazivní metody by měly poskytnout informace týkající se zásadní patofyziologie plaku, jako je buněčné složení plaku a biologické charakteristiky každé složky plaku na molekulární úrovni.

Podstata vynálezu

Základním mechanismem atherogeneze je tuková infiltrace, buněčná invaze a proliferace a tvorba trombu. Předpokládá se, že molekulární zobrazení atherosklerotických lézí postihne jednu ze tří hlavních složek lipidového jádra plaku, makrofágovou infiltraci nebo proliferaci buněk hladkého svalstva (Ross, R. Nátuře 1993, 362, 801 - 809). Protože převaha jakékoli složky určuje chování plaku, je logické předpokládat, že detekce velkého množství dané složky určí výsledek prognózy plaku (Ross, R. Nátuře 1993, 362, 801 - 809). Přítomnost velkých nekrotických tukových jader přispívá k narušitelností plaku prasknutím. Vysoká makrofágová infiltrace plaku vede

·· · · • * · · · · « • · ··· · · · · · • · » · · · · ·« «> ·· * k uvolnění cytokinů a matricových metaloproteinas a tím způsobuje, že je plak náchylný prasknutí. Rozvoj buněk hladkého svalstva přináší stabilitu plaku, ale rychlá proliferace je spojena s rychlým postupem luminální stenózy jako je postangioplastická restenóza. Proto je možno selektivně zacílit na jednu z těchto tří složek pro molekulární zobrazení atherosklerózy.

Je známo, že makrofágy hrají významnou roli při rozvoji atherosklerózy. Makrofágy regulují své LDL receptory a expresi mRNA a podstupují novou syntézu proteinu pro nový receptor pro modifikovaný LDL. Tento receptor rozpoznává všechny modifikované formy LDL a stává se známým jako makrofágový saprofilní receptor (macrophage scavenger receptor - MSR). Mnoho studií se věnuje přítomnosti saprofilních receptorů, které se váží na široké rozmezí molekul. Bylo navrženo, že makrofágové saprofilní receptory hrají klíčovou roli při rozvoji atherosklerózy zprostředkováním příjmu οχ-LDL makrofágy v arteriálních stěnách.

Saprofilní receptory byly rozděleny do tří tříd. Saprofilní receptory třídy A zahrnují typ I a II makrofágových saprofilních receptorů (SF-AI a SR-AII). Typ I SR-A se liší od typu II SR-A v tom, že obsahuje další Ckoncovou doménu bohatou na cystein. Třída B saprofilních receptorů (SR-B) zahrnuje translokázu mastných kyselin (CD36) a SR-B1. Třída B saprofilních receptorů se také nachází na makrofázích a vykazuje afinitu k ox-LDL, aprotickým buňkám a aniontovým fosfolipidům. Nedávno byla identifikována nová třída saprofilního receptoru jako Macrosialin (CD68).

Exprese SR-A je hlavně omezena na aktivované makrofágy, které se akumulují v oblastech zánětu, jako je • · · • · · · ·

·) · atherosklerotický plak. Kromě toho bylo ukázáno, že SR-A hraje zásadní roli v zánětlivé odezvě obrany hostitele, buněčné aktivaci, adhezi a interakci mezi buňkami, což činí SR-A látkou s mnoha funkcemi při atherosklerotickém procesu. SR-A může proto sloužit jako cíl a biomolekuly, které se vážou na receptor SR-A mohou sloužit jako nová zobrazovací činidla pro diagnózu atherosklerózy, zvláště narušitelného plaku.

Molekuly vázající se na SR-A jsou obecně polyaniontové makromolekuly, zahrnující acetyl-LDL (acLDL), oxidovaný LDL (oxLDL) , polyribonukleotidy, polysacharidy, lipopolysacharidy, dextransulfát kyseliny lipoteichoové, a aniontové fosfolipidy, jako je fosfatidylserin. Izotopově značené biomolekuly vázající se na makrofágy byly použity pro zobrazení atherosklerotických lézí u zvířecích modelů a některé z nich byly studovány u lidí. Ty zahrnují izotopově značený LDL a oxidovaný LDL (Atsma et al. Atherosclerosis and Thrombosis 1993, 13, 78 - 83; Iuliano et al. Atherosclerosis 1996, 126, 131 - 141) a Tc-99m-značené diadenosintetrafosfáty (Elmaleh et al. Proč. Nati. Acad. Sci. USA 1998, 95, 691 - 695). Bylo zjištěno, že příjem 1-125-značeného LDL je díky akumulací oxidovaného LDL v makofágu a může být potlačen podáváním vitaminu E, známého antioxidantu. U pacientů s karotidní atherosklerózou byl příjem Tc-99m-LDL pozorován u mírných lézí bohatých na makrofágy, přičemž zralý fibrokalcifikovaný plak neakumuloval izotopově značený LDL (Lees et al. Atherosclerosis 1988, 8, 461 - 468; Virgolini et al. Eur. J. Nucl. Med. 1991, 18, 948 - 951).

Nedávno bylo publikováno, že antagonista nepeptidového makrofágového SR-A má μΜ vazebnou afinitu pro SR-A (Lysko et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999, 289, 1277 - 1285).

·· ·· ···t ·· · • 9 99 9 999

9» · 9···

99 9 99 9 ·····

Patentová přihláška PCT WO 99/07382, WO 00/06147 a WO 00/03704 popisuje série antagonistů SR-A a jejich potenciální použití při léčbě kardiovaskulárních chorob. Obrázek I ukazuje obecné struktury antagonistů receptoru SR-A popsané v PCT patentových přihláškách WO 99/07382, WO 00/06147 a WO 00/03704. Byly popsány příklady syntézy těchto diamiddifenolatových sloučenin (viz např., Anson et al. J. Am. Chem. Soc. 1986, 108, 6593 - 6605). Avšak dosud nebylo popsáno použití těchto antagonistů SR-A nebo jejich kovových chelátů tvořených buď přímou vazbou kovových iontů nebo vazbou s cheláty kovů pro diagnózu nebo detekci atherosklerózy a narušitelného (rozpadavého) plaku.

·· · · • 9 • ί) • 99« *

9

9

Obrázek I. Antagonisté receptorů SR~A popsané v PCT patentových přihláškách WO 99/07382, WO 00/06147 a WO 00/03704

Jedním aspektem tohoto vynálezu je proto detekovatelně značený antagonista SR-A, který je užitečný pro diagnózu a monitorování různých kardiovaskulárních chorob (např. atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a

0 4 transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie). Detekovatelně značený antagonista

SR-A je užitečný jako radiofarmaceutikum, MRI zobrazovací činidlo nebo jako rentgenové kontrastní činidlo.

<· « · · · 0

0090 00 0 0 0·

0 00 0 000« • 0 0 ·· 0 000 00000

000000 · 0 0· 00 ** [1] V jednom provedení tento vynález poskytuje sloučeninu vzorce (I)

M-C_h-L_n- (BM) _a (I) kde

M je radionuklid vybraný z ®Tc, ^117mSn, ^luIn, ⁹⁷Ru, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ¹⁷⁷Lu, ⁴⁷Sc, ¹⁰⁵Rh, ¹⁸⁸Re, ⁶⁰Cu, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu nebo ion paramagnetického kovu atomového čísla 21 až 29, 42 až 44 nebo 58 až 70, nebo ion těžkého kovu atomového čísla 21 až 31, 39 až 49, 50, 56 až 80, 82, 83, 90;

C_h je kovové chelatační činidlo mající vzorec vybraný ze skupiny

E-A²

⁶—E—A⁷

Ά⁸

• V • 000 0 0 0 · · · 00 0 00 · 0000 0 0 · 00 0 000 0000 000 0 ' 0 0 00 0 00 0000 .0 0. 0 0 · · 0 kde

A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶, A⁷ a A⁸ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: NR¹⁹, NR¹⁹R²⁰, S, SH, 0, OH,

PR¹⁹; PR¹⁹R²⁰, P(O)R²¹R²² a přímé vazby na L_n;

E je přímá vazba, CH, nebo mezerníková (spacerová) skupina nezávisle vybraná při každém výskytu ze skupiny: (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0, (C6-C10) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(C₆-C_Xo) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³;

R¹⁹ a R²⁰ jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na L_n, vodík, (C1-C10)alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo- (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0, (Cg-Cio) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(C₆-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R²³ a elektron, za předpokladu, že když R¹⁹ nebo R²⁰ je elektron, druhý je také elektron;

R²¹ a R²² jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny:

přímá vazba na L_n, -OH, (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 • · «* • O • A A A A · · A · A

A A A A ·· A··· « · A AA A AAA AAAA

AA A A A A A AA A

AA AAAA A A AA AA A

R²³, (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0, (C₆-Cxo) aryl-(C1-C10)alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(Cg-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3

R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R²³;

R²³ je nezávisle vybrána pří každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R²⁴, -C(=O)R²⁴, -C(=0)N(R²⁴)2, -CHO, -CH₂OR²⁴, -OC(=O)R²⁴, -OC (=0) OR^24a, -OR²⁴, -OC(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵C (=0) R²⁴, -NR²⁵C(=O)OR^24a, -NR²⁵C(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵SO2N (R²⁴) 2, -NR²⁵SO2R^24a, -SO3H, -SO2R^24a, -SR²⁴, -S(=O)R^24a, -SO2N(R²⁴)2, -N(R²⁴)₂,

-NHC (=S) NHR²⁴, =NOR²⁴, NO2, -C (=0) NH0R²⁴, -C (=0) NHNR²⁴R^24a, -OCH2CO₂H, 2-(1-morfolino)ethoxyskupina, (C1-C5) alkyl, (C2-C4)alkenyl, (C₃-C₆) cykloalkyl, (C₃-C₆) cykloalky lmethyl, (C₂-C₆)alkoxyalkyl, aryl substituovaný 0 až 2 R²⁴ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0;

R²⁴, R^24a a R²⁵ jsou nezávisle vybrány pří každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na L_n, H, (Ci-C₆) alkyl, fenyl, benzyl, (Ci~C₆)alkoxyskupina, halid, nitroskupina, kyanoskupina a trifluoromethyl;

L_n je spojovací skupina mající vzorec:

( (W) _h- (CR¹³R¹⁴) g) x- (Z) k- ( (CR^13aR^14a) g' - {W) h J _x kde a · · · 9 ·

9 · · • · · • · 9 ·

999 99·· • · 9' ·

9· 9

W je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: O, S, NH, NHC(-O), C(=O)NH, NR¹⁵C(=O), C(=O)NR¹⁵, C(=O), C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, SO₂, SO₂NH, (OCH₂CH₂)_s, (CH₂CH₂O)s', (OCH₂CH₂CH₂)_S, (CH₂CH₂CH₂O)t a (aa)t-?

aa je nezávisle při každém výskytu aminokyselina;

Z je vybrána z skupiny: aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁶;

R¹³, R^13a, R¹⁴, R^14a a R¹⁵ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: H, -O, COOH, SO3H, PO₃H, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, benzyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a (C1-C5) alkoxyskupina substituovaná 0 až 3 R¹⁶, NHC(=O)R¹⁷,

C(—O)NHR¹⁷, NHC(=0)NHR¹⁷, NHR¹⁷, R¹⁷ a přímá vazba na C_h;

R¹⁶ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ch, COOR¹⁷, C{=O)NHR¹⁷, NHC(=O)R¹⁷, OH, NHR¹⁷, SO3H, PO₃H, -OPO₃H₂, -OSO3H, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁷, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, (C1-C5) alkoxyskupin§t substituovaná 0 až 1 R¹⁸ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁷;

R¹⁷ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: H, alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aryl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁸; (C3-C10)cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyalkylenglykol substituovaný 0 až 1 R¹⁸, karbohydrat substituovaný 0 až 1 R¹⁸, cyklodextrin substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aminokyselina substituovaná 0 až · · ·

0 0 · · · • 000 9 0 • 4 0 0 »

0» 0 · 0 · 0 0 0 ·· • 0 0000 00

R¹⁸, polykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, peptid substituovaný 0 až 1 R¹⁸, kde tento peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselin, 3,6-O-disulfo-B-D-galaktopyranosyl, bis(fosfonomethyl)glycin a přímá vazba na Ch;

R¹⁸ je přímá vazba na Ch; k je vybráno z 0, 1 a 2; h je vybráno z 0, 1 a 2; h' je vybráno z 0, 1 a 2;

g je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

g' je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; s je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

s' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; s je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; t je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

V je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; x je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4 a 5;

x' je vybráno zO, 1, 2, 3, 4a5; n je celé číslo od 1 do 10;

BM je antagonista SR-A vzorce:

‘OH • · ·· · · · ··· · · «

kde

R¹ je nezávisle vybrána z: H, F^-benzamidoskupiny, R¹-benzyletheru, E^-benzylaminoskupiny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a 1,2-benzoskupiny; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

R² je přímá vazba na Ln; a m je celé číslo od 1 do 4; nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

[2] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], kde Ch je

kde

A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba na L„;

• · · • «· ·· ····

A Q ··*»·· ♦ · * — ZJ — · · « · · · · · • * * · · · · · · · ·' k², k^A a A⁶ jsou každá N;

A³, A⁵ a A⁸ jsou každá OH;

A⁷ je přímá vazba na L_n;

E je C₂ alkyl substituovaný 0 az 1 R ; a R²³ je =0.

[3] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], kde C_h je

kde

A¹ je vybrána ze skupiny; OH a přímá vazba na L_n; A², A³ a A⁴ jsou každá N;

A⁵, A⁶ a A⁸ jsou každá OH;

A⁷ je přímá vazba na L_n;

E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a R²³ je =0.

[4] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], kde Chje • · · · · · · · ·· • · · · · « · · · · ·« · » · · ««· » ···· « · · · · · · · ♦ * «····· ·« · · *· ·

E—A² kde

A¹ je NH₂;

E je přímá vazba;

A² je NHR¹⁹;

R¹⁹ je heterocykl substituovaný R²³, přičemž heterocykl je vybrán z pyridinu a pyrimidinu;

R²³ je vybrána z přímé vazby na L_n, C(=O)NHR²⁴ a

C (==0) R²⁴;

R²⁴ je přímá vazba na L_n;

R³⁰ je vybrána z skupiny: -CO2R³¹, -OR³¹, -SO3H a N(R³¹)2;

a

R³¹ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: vodík a methyl.

[5] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], kde C_h je vybrána ze skupiny: DTPA, DOTA, TETA, TRITA, HETA, DOTA-NHS, TETA-NHS, DOTA(Gly}3-1 (p~isothiokyanoto)-Phe-amid a D03A.

[6] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu vzorce (I):

M-C_h-L_n- (BM) _n (I) • φ φφφ φφφφφ ·· φφ·φ

Φ φ

φφφφ kde

Μ je radionuklid vybraný z ^99mTc, ^117mSn, ^11;LIn, ⁹⁷Ru, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ¹⁷⁷Lu, ⁴⁷Sc, ¹⁰⁵Rh, ¹⁸⁸Re, ⁶⁰Cu, ^s2Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu nebo ion paramagnetického kovu atomového čísla 21 až 29, 42 až 44 nebo 58 až 70 nebo ion těžkého kovu atomového čísla 21 až 31, 39 až 49, 50, 56 až 80, 82, 83, 90;

C_h je kovové chelatační činidlo mající vzorec vybraný ze skupiny:

E—A²

^Α^Ε-α-’-Ε^-ζΛ-Ε-Α⁷

F

A³

T₅

A⁵

kde

A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶, A⁷ a A⁸ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: NR¹⁹, NR¹⁹R²⁰, S, SH, 0, OH, PR¹⁹; PR¹⁹R²⁰, P(O)R²¹R²² a přímé vazby na L_n;

E je přímá vazba, CH nebo oddělovací (spacerová) skupina nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde φ φ • φ φφ φφ φ φ φφφφ φφφ φφφ φφφφφ • φ heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (C₆-Cio) aryl-(Ci-Cío) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) alkyl-(C₆-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³;

R¹⁹ a R²⁰ jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na L_n, vodík, (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo- (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (C₆-Cio) aryl-(Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) alkyl-(C₆-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³ a elektron, za předpokladu, že když R¹⁹ nebo R²⁰ je elektron, druhý je také elektron;

R²¹ a R²² jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na L_n, -OH, (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (C6-C10) aryl- (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(C6-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3

R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém • · ···· · · · · · · • · · · · · ···· φ · · · · · · · · · ···· ·· · · · · · · · « « Λ Λ Λ» ·· · · · obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R²³;

R²³ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny; přímá vazba na Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R²⁴, -C(=O)R²⁴, -C(=O)N(R²⁴)2, -CHO, -CH₂OR²⁴, -OC(=O)R²⁴, ~0C (~0) OR^24a, -OR²⁴, -OC(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵C (=0) R²⁴, -NR²⁵C(=O)OR^24a, -NR²⁵C(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵SO2N (R²⁴) 2, -NR²⁵SO2R^24a, -SO3H, -SO₂R^24a, -SR²⁴, -S(=O)R^24a, -SO2N(R²⁴)2, -N(R²⁴)₂,

-NHC (=S) NHR²⁴, =NOR²⁴, N02, -C (=0) NHOR²⁴, -C (=0) NHNR²⁴R^24a, -OCH2CO₂H, 2-(l~morfolino)ethoxyskupina, (C1-C5) alkyl, {C₂-C₄) alkenyl, (C₃-C₆) cykloalkyl, {C₃-C₆) cykloalkylmethyl, (C₂-C6>alkoxyalkyl, aryl substituovaný O až 2 R²⁴ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0;

_r24, _R24a _{a r}25 j_sou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny; přímá vazba na L_n, H, (C1-C10)alkyl, fenyl, benzyl, (C1-C10) alkoxyskupina, halid, nitroskupina, kyanoskupina a trifluoromethyl;

L_n je spojovací skupina mající vzorec:

( (W)_h- (CR¹³R¹⁴)g)x-(Z)k-( (CR^13aR^14a)g-(W)_hJxkde

W je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: 0, S, NH, NHC(=0), C(=0)NH, NR^1SC(=O), C(=0)NR¹⁵, C(=0), C(=0)0, 0C(=0), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, S0₂, SO₂NH, (OCH₂CH₂)_S, (CH₂CH₂O)_s-, {OCH₂CH₂CH₂)_S, (CH₂CH₂CH₂O) t a (aa)_t-;

aa je nezávisle při každém výskytu aminokyselina;

Z je vybrána z skupiny: aryl substituovaný 0 až 3 R^1É, (C₃-Cio) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a 5 až 10 členný • · • · · • ·· ·· • ·

heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁶;

R¹³, R^13a, R¹⁴, R^14a a R¹⁵ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: H, =0, COOH, SO₃H, PO₃H, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, benzyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a (C1-C5) alkoxyskupina substituovaná 0 až 3 R¹⁶, NHC(=0)R¹⁷, C(=O)NHR¹⁷, NHC (=0) NHR¹⁷, NHR¹⁷, R¹⁷ a přímá vazba na C_h;

R¹⁶ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ch, COOR¹⁷, C(=O)NHR¹⁷, NHC(=Q)R¹⁷, OH, NHR¹⁷, SO₃H, PO₃H, -OPO3H2, -OSO₃H, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁷, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, (C1-C5) alkoxyskupiny substituovaná 0 až 1 R¹⁸ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁷;

R¹⁷ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: H, alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aryl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁸; (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyalkylenglykol substituovaný 0 až 1 R¹⁸, karbohydrat substituovaný 0 až 1 R¹⁸, cyklodextrin substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aminokyselina substituovaná 0 až 1 R¹⁸, polykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, peptid substituovaný 0 až 1 R¹⁸, kde tento peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselin, 3,6-0-disulfo-B-D-galaktopyranosyl, bis(fosfonomethyl)glycin a přímá vazba na C_h;

R¹⁸ je přímá vazba na Ch; k je vybráno z 0, 1 a 2;

·· · ·· ·· • · · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · • · · ··· · · • · · • ···· • · ·« ···· • · • · · • · • · h je vybráno z 0, 1 a 2;

h' je vybráno z 0, 1 a 2;

g je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; g' je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; s je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; s' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

s je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

t je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; ť je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; x je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4 a 5;

x' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4a5;

n je celé číslo od 1 do 10;

BM je antagonista SR-A vzorce:

kde

R²

R^z

R¹ je nezávisle vybrána z: H, R¹-benzamidoskupiny, ·· ·· ·· ···· ·· « ...» ·· · ··· ·· · ··· »··· ·· ···· ·····«·· ··· . · · · · · · ······ ·· ·· ·· ·

R-^benzyletheru, R^benzylaminoskupiny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

1,2-benzoskupiny; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

R² je přímá vazba na Ln; a m je celé číslo od 1 do 4;

M' je ion kovu vybraný z Fe(III), Os(III), Co(III),

Ni(II) nebo Cu(II);

M je jednotka obsahující kov vybraná z: V-O, Mo=0 nebo Re=O; a

L je spolulígand vybraný z: trialkylfosfinu, triarylfosfinu, triarylyalkylfosfinu, analogu pyridinu nebo pyridinu s vhodným substituentem na pyridinovém kruhu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

[7] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], kde C_h je

kde

A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba na L_n; A², A⁴ a A⁶ jsou každá N;

A³, A⁵ a A^{7 8} jsou každá OH;

A⁷ je přímá vazba na L_n nebo NH-vazba na L_n;

E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a

R²³ je =0.

• Φ φφ • · · φ • · · φφφφ φφφ ·· φφφφ φφ φφφφ • · * • · · • r φ • · · · • φ φφ φφ · φφφ φ «φφ « φ φ φφφφ φφφ «φ φ [8] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], kde Chje

kde

A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba na L_n; A², A³ a A⁴ jsou každá N;

A^s, A⁶ a A⁸ jsou každá OH;

A⁷ je přímá vazba na Ln?

E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a R²³ je =0.

[9] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], kde Ch je • · · 9

9 9

9 9 9 9 9 · ··· ·· · · « · ···· « · * ·« · · · · 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 · ······ 9 9 9 9 9 9 · kde

A¹ je NH₂;

E je přímá vazba;

A² je NHR¹⁹;

R¹⁹ je heterocykl substituovaný R²³, přičemž heterocykl je vybrán z pyridinu a pyrimidinu;

R²³ je vybrána z přímé vazby na L_n, C(=O)NHR²⁴ a C(=O)R²⁴;

R²⁴ je přímá vazba na L_n;

r3o j_Q vybrána z skupiny: -CO₂R³¹, -OR³¹, -SO3H a N(R³¹)₂; a

R³¹ je nezávisle vybrán při každém výskytu ze skupiny: vodík a methyl.

[10] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], kde C_h je vybrána ze skupiny: DTPA, DOTA, TETA, TRITA, HETA, DOTA-NHS, TETA-NHS, DOTA(Gly)3-L(p-isothiokyanoto)-Phe-amid a DO3A.

[11] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu vzorce:

• · Q

kde

M je radionukleotid vybraný z: ⁶⁰Cu, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu;

M' je ^99mTc nebo ¹⁸⁸Re;

R¹ je nezávisle vybrána z: H, R¹-benzamidoskupiny, R^x-benzyletheru, R^benzylaminoskupiny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

1,2-benzoskupiny; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

R² je nezávisle vybrána z: H, fluoralkylu, halogenu, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

1,2-benzoskupiny; nebo R² představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

m je celé číslo od 1 do 4; a

L je spoluligand vybraný z: trialkylfosfínu, triarylfosfinu, triarylyalkylfosfinu, analogu pyridinu nebo pyridinu s vhodným substituentem na pyridinovém kruhu;

nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl.

• » · · 4 · • · * * · • · · 9 · · • · · · ·

9 9 99 · ·

9 9 9 9 ·· · ····» « · · · ·

9 « · 4 [12] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob diagnózy kardiovaskulární choroby u pacienta (například člověka). Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pacientovi, který potřebuje provedení takové diagnózy, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[13] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení [12], kde kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemíe.

[14] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[15] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení 14, kde kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemíe.

• 9 0 0 9 0

9

9 9

9 9 9 « 0 · 0 0 9

9 9 • 9 4 • · 9 9 9 ·· 9 0 0 0 « 9 0 9 9

909« β 0 [16] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob monitorování vývoje atherosklerotické léze u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[17] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob detekce narušitelného plaku u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pacientovi, který potřebuje takovou detekci, a detekcí přítomnosti sloučeniny.

[18] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení [12], [13], [14], [15], [16] nebo [17], kde detekce zahrnuje zobrazení magnetickou rezonancí.

[19] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení [12], [13], [14], [15], [16] nebo [17], kde detekce zahrnuje rentgenové zobrazení.

[20] Jiné provedení tohotd vynálezu poskytuje způsob diagnózy kardiovaskulární choroby u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10] pacientovi, který potřebuje provedení takové diagnózy, a detekci přítomnosti sloučeniny.

• * · · · « • 4 · * · « ♦ ♦ · · · <ί [21] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení 20, kde kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

[22] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedeni [6], [7], [8], [9] nebo [10] pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[23] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení 22, kde kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

[24] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob monitorování vývoje atherosklerotické léze u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10] pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti sloučeniny.

• 0

0000 00 0 • 0 0 0 0 ♦ « 0 0 0 0

090 00900

0 0 ·· 0 • 0 0 0 0 • · · 0 ♦ · · α · • •a ·

0000 [25] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob detekce narušitelného plaku u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle provedení [6], [7]r [θ]r [9] nebo [10] pacientovi, který potřebuje takovou detekci, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[26] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení [20], [21], [22], [23], [24] nebo [25], kde detekce zahrnuje zobrazení magnetickou rezonancí.

[27] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob podle provedení [20], [21], [22], [23], [24] nebo [25], kde detekce zahrnuje rentgenové zobrazení.

[28] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje způsob radiového zobrazení u pacienta. Způsob zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 11 pacientovi, který potřebuje takové radiové zobrazení, a detekci přítomnosti sloučeniny.

[29] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozicí obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5], nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[30] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [29] dále obsahující účinné množství stabilizátoru.

[31] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [30], kde stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p-aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5-amino-2-hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, níkotínamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.

[32] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10], nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[33] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [32] dále obsahující účinné množství stabilizátoru.

[34] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [33], kde stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p-aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5-amino-2-hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, nikotinamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.

• · 0 • · 00 0« 0000 0·· 0 0 0 0 ·· · 0 0 0 0*00 • · · ·· 0 000 00000 •·0 0 0 .0 · «« · 0000 00 00 ·· « « « [35] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [11], nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[36] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [35] dále obsahující účinné množství stabilizátoru.

[37] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje farmaceutickou kompozici podle provedení [36], kde stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p-aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5-amino-2~hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, nikotinamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.

[38] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující zatavenou ampulku. Zatavená ampulka obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5], nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[39] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [38] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

• 9 9 »9 99 999

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9

9 «999

9 9 9 9 9

9999 9 9 99

9 9 9<

[40] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující zatavenou ampulku. Zatavená ampulka obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10], nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[41] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [40] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

[42] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující zatavenou ampulku. Zatavená ampulka obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [11] nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[43] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [42] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

[44] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5], nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

4 44·4 [45] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [44] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

• · * * 9 9 · 999 • · · 99 9 9999

9999 9999 9999 • 99 9999 99 · «9 «999 99 99 99 9 [46] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10], nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[47] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [46] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

[48] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu obsahující (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle provedení [11] nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

[49] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje soupravu podle provedení [48] dále obsahující alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.

[50] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pro použití při medicinální terapii nebo diagnóze.

9 9 • 9

-42- ί ί .* *ί ί· ί*ϊ * ··;

······ 9 9 · · ·· 9 [51] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] jako radiofarmaceutické, jako MRI kontrastní činidlo nebo rentgenové kontrastní činidlo.

[52] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pro výrobu farmaceutického prostředku pro diagnózu kardiovaskulární choroby u pacienta nebo pro monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta.

[53] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [52], kde kardiovaskulární choroba je vybrána z: atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

[54] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [1], [2], [3], [4] nebo [5] pro výrobu farmaceutického prostředku pro monitorování vývoje atherosklerotické léze nebo pro detekci narušitelného plaku u pacienta.

[55] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10] pro použití při medicinální terapii nebo diagnóze.

···9

9

9 9

9 9 9

9 99999 [56] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10] jako radiofarmaceutikum, jako MRI kontrastní činidlo nebo rentgenové kontrastní činidlo.

• · · · · · · · · • * · · ♦

9 9 9 9 9 [57] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle [6],' [7], [8], [9] nebo [10] pro výrobu farmaceutického prostředku pro diagnózu kardiovaskulární choroby u pacienta nebo pro monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta.

[58] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [57], kde kardiovaskulární choroba je vybrána z: atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

[59] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [6], [7], [8], [9] nebo [10] pro výrobu farmaceutického prostředku pro monitorování vývoje atherosklerotické léze nebo pro detekci narušitelného plaku u pacienta.

[60] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje sloučeninu podle provedení [11] pro použití v medicinální terapii nebo diagnóze.

·· · ♦ ·· ···· · · · • · · · ·· · ··· ·· · 9 9 9 9 9 9 9 • · « · · · 999 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9999 99 99 99 9 [61] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny podle provedení [11] jako radiofarmaceutikum.

[62] Jiné provedení tohoto vynálezu poskytuje použití sloučeniny z provedení [11] pro výrobu farmaceutického prostředku pro radiozobrazování.

Rozumí se, že určité znaky tohoto vynálezu, které jsou pro lepší porozumění popsány v kontextu u jednotlivých provedení, mohou být také poskytnuty v kombinaci jednotlivých provedení. Naopak různé znaky vynálezu, které jsou pro stručnost popsány v kontextu jednotlivých provedení mohou být provedeny odděleně nebo v jakékoli subkombinaci.

Zobrazovací činidlo popsané v tomto vynálezu je antagonista SR-A napojený na radioizotop, kde radioizotop je užitečný pro gama scintigrafii nebo pozitronovou emisní tomografii (PET). Alternativně je antagonista receptorů cíleného na SR-A napojen na jednoduché nebo vícenásobné cheláty paramagnetických kovů nebo superparamagnetické částice pro magnetické rezonanční zobrazení (magnetic resonance imaging - MRI). Molekuly vázající SR-A mohou být také navázány na fosfolipidový nebo polymerní materiál, které se používají k zapouzdření nebo stabilizaci mikrobublinek, které mohou být detekovatelné ultrazvukovým zobrazením následujícím lokalizaci místa zranění tkáně. Protože je SR-A produkován expresí aktivovanými makrofágy, které zahrnují 20 až 25 % hmoty narušitelného plaku, mohou být zobrazovací činidla popsaná v tomto vynálezu použita jak pro detekci narušitelného plaku, tak pro monitorování vývoje atherosklerotické léze.

0000 • 0 0 • ·

0 0 0 00 0 0 · 0

0 00 0 0000 0 0 · 00 0 000 00000 900 0999 99 ·

00 00 00 ·· 0 0 ·

Pokud je bíomolekula zaměřená na SR-A napojena na radionuklid, zobrazovací činidlo může být použito jako radiofarmaceutikum specifické pro cíl. Radionuklid může být emitentem gama záření, jako je Tc-99m pro gama scintigrafii nebo radionuklid může být emitent pozitronů, jako je F-18 pro PET zobrazení. Pokud je radioizotop kovový, zobrazovací činidlo se často nazývá metaloradiofarmaceutikum, které často obsahuje čtyři složky: molekulu zaměřenou na SR-A receptor, spojovník (linker), bifunkční chelatační činidlo (BFC) a kovový radionuklid.

Molekula zaměřená na SR-A receptor slouží jako vehikulum. Molekula zaměřená na SR-A receptor nese radionuklid na místo receptoru na aktivovaném makrofágu. Molekulou zaměřenou na SR-A receptor může být peptid, peptidomimetikům nebo nepeptidový receptorový ligand. Radionuklid je zdrojem záření pro gama scientigrafii nebo PET zobrazení. Mezi antagonistou receptoru SR-A a radionuklidem je dvojvazné chelatační činidlo, které se váže silně na ion kovu několika koordinačními vazbami a je kovalentně napojeno na zaměřující molekulu buď přímo nebo přes spojovník (linker). Výběr BFC je široce určen povahou a oxidačním stavem kovového radionuklidu. Spojovníkem může být jednoduchý uhlovodíkový řetězec, dlouhý póly(ethylenglykol) (PEG) a sekvence polyaniontového peptidu nebo sekvence kationtového peptidu, kterých se často používá pro modifikaci farmakokinetik. V tomto vynálezu může být použití polyaniontového peptidu prokázáno jako užitečné, protože polyaninotové makromolekuly jsou přirozené ligandy pro receptory SR-A. Někdy se používá metabolizovatelného spojovníku ke zvýšení pročištění krve a ke snížení aktivity pozadí, čímž se vylepšuje poměr cíl ku pozadí.

• · · · ·· · · · · ·· · ···· · · · ··· • · · · · · ···· • · ···· · · · · ···· — 4 £ — ··· ···· ·· · τυ ·· ···· ·· ·· ·· ·

Pro diagnostické zobrazení mohou být navrženy radionuklidy, které zahrnují ale nejsou omezeny na ^1SF, “Tc, 131_I# 123_Z/ 117»^ 111·^ 67^, 68_Qa, 89^, ⁶²C_U< 6^_{Cu a} fi7 v

Cu. Vyber radionuklidu závisí na fyzikálních a nukleárních vlastnostech (poločas a γ-energie), dostupnost a náklady. Obecné se za ideální považují radionuklidy produkované v generátoru, protože generátorový systém sestává z mateřského izotopu o dlouhé životnosti, který se rozkládá na dceřinné izotopy s krátkou životností. Dceřinné izotopy mohou být snadno odděleny od mateřského buď iontomšničovou chromatografií nebo extrakcí rozpouštědlem.

Téměř 80 % radiofarmaceutik použitých v nukleární medicíně představuje sloučeniny značené ^99mTc. Důvodem tohoto výsostného postavení ^99mTc v klinickém použití jsou jeho extrémně výhodné fyzikální a nukleární vlastnosti. Šestihodinový poločas rozpadu je dostatečně dlouhý k provedení syntézy radiofarmaceutika a k náběru užitečných zobrazení. Současně je dostatečně krátký k tomu, aby dovolil vystavení množstvím radioaktivity ^99mTc v milicurie bez významných dávek radiace pacientovi. Monochromatické 140 KeV fotony jsou snadno soustřeďovány pro získání zobrazení o výtečném prostorovém rozlišení. Kromě toho je ^99mTc snadno získatelný z komerčních generátorů ⁹⁹Mo-^99mTc při nízkých nákladech.

Bifunkční chelatační činidla pro značení antagonistů receptoru SR-A ^99mTc zahrnují N₂S₂ diamindithioly, N₂S₂ diamindithioly, N₂S₂ monoamidmonoamiddithioly, N₃S amindiamidthioly, N₃S triamidthioly a HYNIC, které tvoří různé terciární ligandové systémy, pokud jsou použity v kombinaci s tricinem/ve vodě rozpustnými fosfiny nebo tricinem/pyridinovými analogy nebo tricinem/substítuovanými imin-N obsahujícími heterocykly. Tyto terciární ligandové ·· ·· *· ···· ·· · • 9 · · 99 9 999

9 99 9 9999 · 9999 9999 ···· — /1*7— 99 9 9 9 9 9 9 9 9 *4 / tf 9999 99 99 99 · systémy byly popsány v US patentu č. 5 744 120, US patentu č. 6 010 679, US patentu č. 5 879 659 a PCT patentové přihlášce WO 98/53858. V několika zprávách byly popsány různé techniky značení pomocí ^99mTc (Liu, S. a Edwards, D.

S. Chem. Rev. 1999,99, 2235 - 2268; Jurisson, S. a Lydon,

J. D. Chem. Rev. 1999, 99, 2205 - 2218; Anderson, C. J. a Welch, M. J. Chem. Rev. 1999, 99, 2219 - 2234; Volkert, W. A. a Hoffman, T. J. Chem. Rev. 1999, 99, 2269 - 2292; Liu et al. Bioconjugate Chem. 1997, 8, 621 - 636). Po izotopovém značení může být výsledná reakční směs přečištěna za použití jedné nebo více chromatografických metod, jako je Sep-Pack nebo vysokoúčinná kapalinová chromatografie (HPLC). Výhodné způsoby izotopového značení jsou ty, ve kterých může být chelatace dosaženo bez přečištění po značení.

Tento vynález také poskytuje složení soupravy pro zobrazení atherosklerózy a narušitelného plaku. Obecně obsahuje radiofarmaceutická souprava na bází ^99mTc přebytek BFC derivátu antagonisty SR-A receptoru oproti celkovému množství technecia (^99mTc a ⁹⁹Tc) za účelem dosažení vysokého výtěžku při značení, redukční činidlo, jako je chlorid cínatý, pokud je to nutné, a jiné složky, jako je objemové činidlo nebo slabý transferový ligand. Souprava může být poskytnuta v roztoku nebo v lyofilizované formě. Soupravy mohou být dodány a skladovány pro každodenní přípravu. V mnoha případech může být značení ^99mTc provedeno jednoduše přídavkem technecistatu [^99mTc] do soupravy. Použití přebytku BFC derivátu antagonisty receptoru SR-A by nemělo blokovat vázání receptoru izotopově značeného antagonisty SR-A. Také by nemělo způsobovat jakékoli vedlejší účinky nebo nežádoucí farmakologické odezvy.

···· • · ·· • · · · ·· · 0 · 0

9 0 99 9 909 9 0009 — /IQ— 0 0-0 0 0 0 0 00 0

0 00 0990 00 09 00 9

Pro ¹¹¹In a jiné kovové radionuklidy, jako je ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu by měla být jako BFC vhodným kandidátem pro výběr kyselina diethylentriaminpentaoctová (DTPA), kyselina tetraazacyklododekan-1,4,7,10-tetraoctová (DOTA) a jejich deriváty. Je známo, že makrocyklická chelatační činidla, jako je DOTA, tvoří stabilní cheláty kovů v důsledku jejich vysoce organizovaného makrocyklického ligandového rámce. DOTA a její deriváty byly také použity jako BFC pro izotopové značení proteinů (protilátky a fragmentů protilátek) a peptidu s různými diagnostickými a terapeutickými radionuklidy (jako je ¹¹¹In a ⁹⁰Y) Krejcarek a Tucker (Biochem. Biophys. Res. Commun. 1976, 77, 581 - 588) při tvorbě aktivovaného analogu DTPA přes směsný anhydrid, který může být napojen na proteiny. Později Hnatowich a kol. (Science 1983, 220, 613 - 616) použili cyklický anhydrid DTPA pro stejný účel. Tyto lineární BFC se vážou na různé ionty kovů, jako je In-111, a tvoří termodynamicky stabilní kovové cheláty. Kovové cheláty lineárních BFC jsou však kineticky labilní, což přispívá ke ztrátám radionuklidu z chelátu kovu a často vede k zásadní toxicitě vůči kostní dřeni. Gansow a kol. (Bioconjugate Chem. 1991, 2, 187 - 194; Inorg. Chem. 1986, 25, 2772 - 2781) připravili série substituovaných analogů DTPA, které tvoří kovové cheláty se zlepšenou stabilitou roztoku. Mearesovi spolupracovníci byli první, kteří syntetizovali makrocyklické BFC (Anal. Biochem. 1985, 148, 249 - 253; Nucl. Med. Biol. 1986, 13, 311 - 318; J. Am. Chem. Soc. 1988, 110, 6266 - 6267), které tvoří cheláty s ^€7Cu a ⁹⁰Y s vysokou termodynamickou stabilitou a kinetickou inertností. Makrocyklická chelatační činidla s trojrozměrnými dutinami jsou zvláště zajímavá v důsledku vysoké stability kovových chelátů, podstatné selektivity vůči určitým iontům kovů buď posílením specifického ·· ···· · · · 9 9

9 9 9 9

9 9 9 9 9

9 9 9 9

9999 99 • 9 9 9

9 9 9 9

999 9 9999

9 9 9

9 99 9 prostorového uspořádání donorových atomů nebo zavedením různých donorových atomů do kostry ligandů a jejich schopnosti přijmout předem organizovanou konformaci v nechalatované formě. Čím vyšší je stupeň předběžné organizace nechelatovaného ligandů, tím stabilnější je komplex.

Poslední dvě desetiletí bylo zobrazení PET použito pouze pro akademický výzkum, pravděpodobně v důsledku krátkého poločasu rozpadu izotopů, dostupnosti generátorových systémů, produkci izotopu v praxi, transportu a distribuce radioaktivního indikátoru. Vývoj u vnějších dodavatelů, kteří mohou dodávat izotopy PET velkému množství místních zákazníků v jednotkových dávkách, a adaptabilita SPÉCT snímačů pro PET zobrazení by mohly nastartovat zvýšení použití tohoto způsobu zobrazení {Phelps, Μ. E. J. Nucl. Med. 2000, 41, 661 - 681; BarShalom et al. Seminars Nucl. Med. 2000, 30, 150 - 185;

0'Doherty, Nunan, T.	M. J. Nucl. Med. 0. a Hain, S. F.	Commun. 2000, 21,	224 - 2000,	229; 21,
Nucl.	Med.	Commun.
2229 - 233	; Maisley, Μ. N.	Nucl.	Med.	Commun.	2000,	21,
234- 236;	Barrington, s. F.	Nucl	. Med	. Commun	. 2000	, 21,

237 - 240; Delbeke, D. J. Nucl. Med. 1999, 40, 1706 - 1715; Duncan, K. J. Nucl. Med. Technol. 1998, 26, 228 - 234; Haynes et al. J. Nucl. Med. 2000, 41, 309 - 314; Welch, M. a McCarthy, T. J. J. Nucl. Med. 2000, 41, 315 - 317) .

Výběr vhodných izotopů pro zobrazení PET je obtížný úkol. Obecně je vysoce žádoucí ten izotop, který se nerozpadá jinak než za emise 511-keV pozitronového záření. To bude minimalizovat zhoršení prostorového rozlišení v důsledku energie a bude snižovat radiační poškození pacienta. Generovaný izotop je nutný v důsledku vysoké specifické aktivity pro cílově specifická radiofarmaceutika «

(, <· a>

» na bázi receptoru. V generátoru produkovaný izotop je také daleko vhodnější pro transport, dodávání, kontrolu kvality. Poločas rozpadu mateřského izotopu by měl být dlouhý, zatímco poločas rozpadu odpovídajícího dceřinného izotopu by měl být krátký. Kromě toho by se mělo také počítat s náklady na produkci mateřského izotopu a dostupnosti obohaceného zdroje (pro produkci mateřského izotopu).

¹⁸F je PET izotop produkovaný v cyklotronu. Relativně dlouhý poločas rozpadu (ti/₂ = HO min) umožňuje lokálním dodavatelům dodávat ¹⁸F-FDG radioaktivní indikátory na místo klinik a klinikům vytvářet užitečná zobrazení. ^1SF může být snadno začleněn do edogenních biologických sloučenin, jako je 2-deoxo-D-glukóza. Po základním kroku MRI nedávný vývoj mobilních transportérů pro FDG PET zobrazování umožnil, aby malá zařízení měla přístup k PET.

Pokud je PET izotop ¹⁸F, pro cíl specifická PET radiofarmaceutika mohou být snadno připravena známými způsoby (Vaidyanathan, G. a Zalutsky, M. R. Bioconjugate Chem. 1990, 1, 269-273; Vaidyanathan, G. a Zalutsky, M. R. Nucl. Med. Biol. 1992, 19, 275 - 281; Vaidyanathan, G. a Zalutsky, M. R. Bioconjugate Chem. 1994, 5, 352 - 364; Vaidyanathan, G. a Zalutsky, M. R. Nucl. Med. Biol. 1995, 22, 759 - 764; Sutcliffe-Goulden et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000, 10, 1501 - 1503). Obecně se aktivní ¹⁸F meziprodukt, jako je N-sukcinimidyl 4-[¹⁸F] fluorbenzoat, připravuje ve vysokém výtěžku a o vysoké radiochemické čistotě a poté je konjugován na aminoskupinu antagonisty receptoru SR-A za tvorby 4-[¹⁸F] fluorbenzoylového konjugátu. Antagonista receptoru SR-A značený ¹⁸F může být snadno přečištěn jednoduchou filtrací, běžnou kolonovou chromatografií nebo HPLC buď za použití rozdělení na základě velikosti nebo s reverzní fází. Výhodnou procedurou • · • · i

je ta, při které může být přípraven antagonista receptorů

SR-A značený ¹⁸F o vysoké specifické aktivitě a vysoké radiochemické čistotě.

Jiný aspekt tohoto vynálezu se týká stabilních radiofarmaceutických kompozic obsahujících účinné množství jednoho nebo více stabilizátorů vybraných z kyseliny askorbové, benzylalkoholu, kyseliny gentisové nebo její soli s kovem, kyseliny p-aminobenzoové nebo její soli, cysteaminu, kyseliny 5-amino-2-hydroxybenzoové nebo její soli s kovem, kyseliny nikotinové nebo její soli s kovem, nikotinamidu, polyhydroxylovaných aromatických sloučenin, aromatických aminů a hydroxylovaných aromatických aminů.

Nukleární magnetická rezonance (NMR) je založena na absorpci vysokofrekvenční energie magnetickým momentem atomových jader ve vzorcích umístěných do silného magnetického pole. Běžné zobrazení lidského těla magnetickou rezonancí (MRI) počítá hlavně s detekcí nejběžnějších typů jader, vodíku ve vodě (a do určité míry tuku). Pro rozlišení mezi zdravými a nemocnými tkáněmi je nezbytný odpovídající kontrast. Tento kontrast závisí nejen na rozdílu v koncentraci vody, ale také na NMR relaxačních časech Ti a T₂, které jsou naopak závislé na lokální mobilitě a interakcích. MRI kontrastní činidlo se používá ke lepšení diagnózy choroby změnou intenzity signálu tkáně. Kontrastní činidla zvyšují jak 1/Τ_Χ, tak 1/T₂ do různého stupně v závislosti na jejich povaze, stejně jako použitém magnetickém poli. Činidla, jako je gadolinium (III), která zvyšují zhruba stejně l/Τι a 1/T₂, se nejlépe zviditelní za použití Τι-vážených zobrazení, protože procentická změna l/Τι v tkáni je daleko větší než změna 1/T₂ (Caravan et al. Chem. Rev, 1999, 99, 2293 - 2352). Částice oxidů železa <· · • · 4 • · · · · · · · · * .· » ·* ··«· obecně vedou k daleko většímu zvýšení 1/T₂ než 1/T_X a jsou nejlépe vidět v T₂-vážených skenech.

Diagnóza MRI je relativně nová a rychle se rozvíjející možnost zobrazení. Za 20 let se stala široce přijatou diagnostickou možností pro velké množství chorob. Při srovnání s jinými kontrastními činidly kontrastní činidla MRI jsou nejlepší v koncentračním rozlišení v tkáních.

Kromě tohoto MRI kontrastní činidla nezahrnují expozici rentgenovému nebo gama záření. Cheláty gadolinia se ukázaly jako výjimečně dobře tolerovaná třída kontrastních médií. Zvláště gadoliniová MRI kontrastní činidla nevykazují jakoukoli nefrotoxicitu na rozdíl od jodovaných kontrastních médii pro CT (Runge, V. M. J. Magn. Reson. Imaging 2000, 12, 205 - 213).

Obecně platí, že čím specifičtější je hromadění kontrastního činidla uvnitř cílové tkáně bez distribuce do okolních tkání, tím lepší je kontrast léze-tkáň. Existuje několik přístupů k zajištění lepšího dodání kontrastního činidla cílovým tkáním. Při běžném přístupu jsou snahy vedeny směrem k zjištění a syntéze molekul se specifickou akumulací na daném místě. Příklady tohoto přístupu zahrnují Gd-porfyrinové komplexy a Gd-EOB-DTPA (Eovíst: EOB-DTPA = ethyoxybenzyldiethylentriaminopentaoctová kyselina) která je paramagnetickým heptobilliárním kontrastním činidlem vyznačujícím se vysokou biliarní exkreční frakcí a převažujícím účinkem na intenzitu signálu MR parenchymu jater (Stern et al. Acta Fadíologica 2000, 41, 52-262) . Avšak diagnosticky výhodné poměry cíl/okolí těchto sloučenin jsou relativně nízké v důsledku jejich nízké specifity.

Alternativní přístup představuje použití magnetických značek, které se shromažďují na požadovaném místě použitím • · c · «

«» · *

* · 9

9« ···· *· 2 • t · · • I ·#·· ⁴ · 2 ♦ * · molekul nosiče specifického pro určitý cil. V optimálním případě by měl být cílem orgán o dostatečné velikosti pro MRI a měl by mít velké množství specifických vazebných míst a vysoký průtok krve. Zaměřovači molekuly zahrnují protilátky, fragmenty protilátek, peptidy, polysacharidy, nepeptidové receptorové ligandy a lipozomy, o kterých bylo referováno (Weissleder et al. Magnetic Resonance Quarterly 1992, 8, 55 - 63; Caravan et al. Chem. Rev. 1999, 99,

2293 - 2352).

Vývoj pro cíl specifických paramagnetických kontrastních činidel koncepčně používá kombinaci MRI technologie o vysokém rozlišení a vysoce specifické zaměřovači biomolekuly (např. protilátky, fragmenty protilátek, peptidy, polysacharidy, nepeptidové receptorové ligandy a lipozomy). Hlavní úkol při vývoji těchto kontrastních činidel specifických pro daný cíl je dodat dostatečné množství chelátu paramagnetického kovu nebo supermagnetických částic oxidu železa do nemocné tkáně.

Jeden přístup ke zvýšení akumulace kontrastního činidla je použití buněčného dodávacího mechanismu zprostředkovaného peptidy. Mnoho peptidy a proteiny zprostředkovaných dodávacích systémů bylo použito pro buněčné dodání genů nebo virů pro genovou terapií a byly tak i popsány (Lindgren et al. Treads in Pharmaceutical Sciences 2000, 21, 99 - 103; Schwartz, J. J. a Zhang, S.-Y. Current Openions in Molecular Therapeutics 2000, 2,

162 - 167). V posledních pěti letech byl u mnoha peptidů dokázán přenos přes plazmatickou membránu eukaryotických buněk zdánlivě na energií nezávislou cestou. Ačkoli mechanismus vstupu do buněk často zůstává neznám, tyto do buněk pronikající peptidy byly použity úspěšně k internalizaci makromolekul (např. proteinů) »· *

• «

4·*4 s molekulárními hmotnostmi několikrát většími, než je jejich vlastní (Fawell et al. Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 1994, 91, 664 - 668; Bayley, H. Nat. Biotechnol. 1999, 17, 1066 - 1067), peptidů (Lin et al. J. Biol. Chem. 1995, 270, 14255 - 14258; Schluesenner, H. J. J. Neurosci. Res. 1996, 46, 258 - 262), opačně přepsaných oligonukleotidů (Morris et al. Nucleic Acids Res. 1997, 25, 2730 - 2736; Antopolsky et al. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 598 - 606), peptidových nukleových kyselin (Pooga, M. Nat. Biotechnol. 1998, 16,

857 - 861), a plazmidové DNA (Singh et al. Bioconjugate Chem, 1999, 10, 745 - 754). Nedáno byl HIV-TAT peptid použit k internalizaci makrocyklickcých gadoliniových chelátů do savčích buněk (Bhorde et al. Bioconjugate Chem. 2000, 11, 301 - 305). Stejný HIV-TAT peptid byl také použit pro internalizaci magnetických nanočástic do lymfocytů z myší sleziny (Josephson et al. Bioconjugate Chem. 1999, 10, 186 - 191) nebo myších nervových buněk (Lewin et al. Nat. Biotechnol. 2000, 17, 410 - 414). PCT patentová přihláška WO 99/67284 popisuje použití diagnostického farmaceutika odvozeného od peptidů procházejícího buněčnou membránou s diagnostickou značkou, kterou je radionuklid nebo ion paramagnetického kovu. Pokud je antagonista receptoru SR-A napojen na ion paramagnetického kovu, jako je Gd³⁺ nebo supermagnetické částice oxidu železa, zobrazovací činidlo by mělo být použito jako MRI kontrastní činidlo specifické pro cíl. Podobně jako indium, i ionty lanthanoidů tvoří vysoce stabilní kovové cheláty s DTPA, DOTA, stejně jako jejich deriváty (cheláty DTPA a DOTA byly dopodrobna popsány nedávno (Liu S. a Edwards D.S. Bioconjugate Chemistry, 2001, 12, 7-34. Pro chelatační činidla příbuzná s DTPA a DOTA jsou tři možné přístupy pro derivátizaci a napojení antagonisty receptoru SR-Ά. Při prvním přístupu je derivatizace nebo připojení provedeno na ί

0*

0 · * . 1 * » * ♦ 0

0 0 ·

0 000· ί

jednom z atomů uhlíku kostry chelatačního činidla. Při druhém přístupu je derivatizace nebo připojení provedeno na atomu uhlíku methylenu acetátové větve chelatačního činidla. Při těchto přístupech nevede derivatizace nebo konjugace biomolekuly k podstatným změnám termodynamické stability kinetické inertnosti chelátu kovu. Při třetím přístupu derivatizace nebo konjugace je provedena na jedné z acetátových skupin přes amidovou vazbu CO-N. Ve srovnání se skupinou karboxylat-0 je karbonyl-0 relativně slabým donorem pro ionty yttria a lanthanoidů. To často vede k nižší termodynimické stabilitě odpovídajícího chelátu kovu. Kinetická inertnost tohoto komplexu kovu zůstává relativně nezměněna.

V US patentu č. 4 678 667 Meares et al popisuje konjugát chelátu mědi pro diagnostické nebo terapeutické použití. Bifunkční makrocyklické chelatační činidlo zahrnuje substituované DOTA, TETA, TRITA a HETA. Spojovník má délku alespoň 8 atomů a pozice napojení spojovníku je jeden z atomů uhlíku polyamidového makrocyklu. US patent č. 5 428 156 popisuje způsob produkce DOTA, TETA, DOTA-NHS (NHS = N-hydroxysukcinimid) a TETA-NHS esterů pro konjugaci biomolekuly. Meares et al (PCT patentová přihláška č. WO 95/26206 a US patent č. 5 958 374) také popisují způsob přípravy komplexu chelatačního činidla značeného izotopem. Konkrétně popisují DOTA(Gly)3-L-(p-isothiokyanato)-Phe-amid jako BFC. Spojovníky také zahrnují

-CH₂CO- (AA)_m- (AA-Phe-Gly), kde AA představuje dvojradikál aminokyseliny, zvláště výhodně glycinový dvojradikál NHCH₂CO-. Gansow et al (PCT patentová přihláška WO 89/11475, PCT patentová přihláška č. WO 91/14458, US patent č. 4 923 985 a US patent č. 5428154) popisují způsob přípravy 4-aminofenyl-DOTA a jeho použití jako BFC pro • «

9 9

Φ ··♦

izotopové značení biomolekul, jako jsou protilátky. Parker et al (PCT patentová přihláška č. WO 87/05030, PCT patentová přihláška č. WO 89/01476, evropský patent č. 0382583B1 a evropský patent č. 0382583A1) popsaly série analogů DOTA jako BFC, které byly spojeny s biomolekulami jako jsou proteiny, zvláště protilátky, peptidy nebo karbohydráty za tvorby konjugátových sloučenin. Spojovník a konjugační skupina jsou napojeny buď na jedné ze čtyř acetátových větví nebo na jednom z atomů uhlíku makrocyklické kostry. Watson, et al (PCT patentová přihláška č. WO 9012050 a PCT patentová přihláška č. W0 9306868) popisují polychelatační činidla a jejich kovové cheláty užitečné při diagnostickém zobrazení a při radioterapii. Makrocyklické části chelatačního činidla jsou napojeny na kostru (dendrimer nebo polylysin) přes amidovou vazbu. US patent č. 5 053 053 popisuje série analogů DOTA a DO3A jako BFC. Pro BFC na bázi D03A je konjugační skupina napojena na spojovník napojený na jeden ze čtyř dusíkových atomů aminu. Pro deriváty DOTA je spojovníková skupina napojena buď na jeden z atomů uhlíku na makrocyklické páteři nebo na uhlíkovém atomu methylenu jedné ze čtyř acetátových větví chelatačního činidla. Tweedle et al (evropský patent 0292689A2; US patent č. 4 885 363, US patent č. 5 474 756 a US patent č. 5 846 519) popisují cheláty kovů, zvláště ty s neutrálním nábojem, pro MRI kontrastní zobrazení. Jsou také popsány analogy D03A jako BFC pro izotopové značení biomolekul. Kruper et al (US patent č. 5 310 535 a US patent č. 5 739 323) popisují analogy DOTA jako BFC pro izotopové značení proteinů. Spojovník je napojen na acetátovou větev chelatačního činidla a konjugační skupina je benzenový kruh. Bylo ukázáno, že DOTA monoamid má lepší kinetickou inertnost v důsledku menšího příjmu kostmi. Kubomura et al

I · · « » · · · · » • · * ♦ * · *· » · · ♦ * ϊ * * * * i ( .

·» ··♦♦ * * « (australský patent č. 9 335 519 a evropský patent č. 0565930A1) popisují použití DO3A-CH₂CONHCH₂CH₂NH2 jako BFC a kovových chelátů konjugátů BFC-BM jako diagnostických nebo terapeutických farmaceutik. Gozzin et al (PCT patentová přihláška č. WO 97/32862) popisuje nové třídy polychelatačních činidel, jejich cheláty s ionty kovů a jejich fyziologicky přijatelné soli, které mohou být použity jak jsou nebo ve spojení nebo kombinaci s jinými složkami pro diagnostické zobrazení obecně nebo jako specifická kontrastní činidla pro specifické tkáně, orgány nebo součásti těla. Konkrétně popisuje DOTA jako BFC a způsob přípravy těchto makrocyklických chelatačních činidel s DO3A-CH₂CONHCH₂CH₂CHO a póly (aminokyselinami) jako klíčovými meziprodukty. Wilson et al (US patent č. 5756065) také popisuje analogy DOTA jako BFC. Konjugační skupina je napojena na benzenový kruh a spojovníková skupina je napojena na jedné ze čtyř acetátových větví chelatačního činidla.

Definice

Zde popsané sloučeniny mohou mít jedno nebo více asymetrických center. Sloučeniny podle tohoto vynálezu obsahující asymetricky substituovaný atom mohou být izolovány v opticky aktivní nebo racemické formě. Ze stavu techniky je dobře známo, jak připravit opticky aktivní formy, jako rozdělením racemických forem nebo syntézou opticky aktivních výchozích látek. Ve zde popsaných sloučeninách může být také přítomno mnoho geometrických izomerů olefinu, dvojných vazeb C=N a podobně, přičemž všechny stabilní izomery jsou zahrnuty do rozsahu tohoto vynálezu. Jsou popsány cis a trans geometrické izomery sloučenin podle tohoto vynálezu, které mohou být izolovány • · tt ·9 9

9 9999

jako směsi izomerů nebo jako oddělené izomerní formy. Pokud není specificky uvedena určitá stereochemická nebo izomerní forma, jsou míněny všechny chirální, diasteromerní, racemické formy a všechny geometrické izomerní formy struktury. Všechny způsoby použité k přípravě sloučenin podle tohoto vynálezu a meziproduktů zde vyrobených jsou považovány za část tohoto vynálezu.

Pojem „substituovaný, jak je zde použit, znamená, že kterýkoli jeden nebo více vodíků na uvedeném atomu je nahrazeno výběrem z uvedené skupiny za předpokladu, že normální valence uvedeného atomu není překročena a že výsledek substituce vede k stabilní sloučenině. Pokud je substituentem ketoskupina (tj. =0) , pak jsou nahrazeny 2 vodíky na atomu. Ketosubstituenty nejsou přítomny na aromatických jednotkách. Pokud je řečeno, že kruhový systém (například karbocyklický nebo heterocyklický) je substituován karbonylovou skupinou nebo dvojnou vazbou, znamená to, že karbonylová skupina nebo dvojná vazba je částí (tj. je uvnitř) kruhu.

Tento vynález je zamýšlen tak, že zahrnuje všechny izotopy atomů, které se vyskytují v uváděných sloučeninách. Izotopy zahrnují ty atomy, které mají stejné atomové číslo ale liší se hmotnostními čísly. Bez jakéhokoli omezení obecné příklady izotopů vodíku zahrnují tritium a deuterium. Izotopy uhlíku zahrnují uhlík-13 a uhlík-14.

Pokud se proměnná (např. R¹) vyskytuje v jakékoli součásti vzorce sloučeniny více než jednou, její definice je při každém výskytu nezávislá na její definici při každém jiném výskytu. Tak například pokud je uvedeno, že sloučenina je substituována 0 až 2 R¹, pak skupina může být případně substituována až dvěmi skupinami R¹ a R¹ je při každém výskytu nezávisle vybrána z definice R^l. Kombinace

A • 0

0 9 • 000· • · substituentů a/nebo proměnných jsou také přípustné pouze pokud kombinace vede ke stabilním sloučeninám.

Pokud vazba na substituent je uvedena tak, že kříží vazbu spojující dva atomy v kruhu, pak tento substituent může být navázán na jakýkoli atom kruhu. Pokud je substituent uveden bez uvedení atomu, přes který je tento substituent navázán ke zbytku sloučeniny daného vzorce, pak tento substituent může být navázán přes jakýkoli atom v tomto substituentu. Kombinace substituentů a/nebo proměnných jsou také přípustné pouze pokud kombinace vede ke stabilním sloučeninám.

Zde použitý pojem „alkyl je zamýšlen tak, aby zahrnoval jak rozvětvené tak přímé nasycené alifatické uhlovodíkové skupiny mající určitý počet atomů uhlíku. Příklady alkylu zahrnují ale nejsou omezeny na methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, s-butyl, t-butyl, npentyl a s-pentyl. Pojem „haloalkyl je zamýšlen tak, aby zahrnoval jak rozvětvené tak přímé nasycené alifatické uhlovodíkové skupiny mající určitý počet atomů uhlíku, které jsou substituovány 1 nebo více halogeny (například -C_VF_W kde v = 1 až 3 a w = 1 až (2v+l)). Příklady alkylu zahrnují ale nejsou omezeny na trifluormethyl, trichlormethyl, pentafluorethyl a pentachlorethyl. Zde použitý pojem „alkoxyskupina představuje alkylovou skupinu jak je definována výše s uvedeným počtem atomů uhlíku napojených přes kyslíkový můstek. Příklady alkoxyskupiny zahrnují ale nejsou omezeny na methoxyskupínu, ethoxyskupinu, n-propoxyskupinu, í-propoxyskupinu, n-butoxyskupinu, s-butoxyskupinu, t-butoxyskupinu, n-pentoxyskupinu a s-pentoxyskupinu. Zde použitý pojem „cykloalkyl je zamýšlen tak, aby zahrnoval nasycené kruhové skupiny, jako je cyklopropyl, cyklobutyl nebo • · · · cyklopentyl. Pojem „alkenyl je zamýšlen tak, že zahrnuje jak rozvětvené tak přímé uhlovodíkové řetězce a jednu nebo více nenasycených vazeb uhlík-uhlík, které se mohou vyskytnout v jakémkoli stabilním bodě v řetězci, jako je ethenyl a propenyl. Pojem „alkinyl je zamýšlen tak, že zahrnuje jak rozvětvené tak přímé uhlovodíkové řetězce a jednu nebo více trojných vazeb uhlík-uhlík, které se mohou vyskytnout v jakémkoli stabilním bodě v řetězci, jako je ethinyl a propinyl.

Zde použitý pojem „halo nebo „halogen označuje fluor, chlor, brom a jod; a „protiion je použit k označení malé negativně nabité jednotky, jako je chlorid, bromid, hydroxid, acetat a sulfát.

Pojem „karbocykl nebo „karbocyklický zbytek, jak je zde použit, znamená jakoukoli stabilní 3 až 7 člennou monocyklickou nebo bicyklickou nebo 7 až 13 člennou bicyklickou nebo tricyklickou jednotku, přičemž každá z nich může být nasycená, částečně nenasycená nebo aromatická. Příklady těchto karbocyklů zahrnují ale nejsou omezeny na cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, adamantyl, cyklooktyl, [3.3.0]bicyklooktan, [4.3.0]bicyklononan, [4.4.0]bicyklodekan, [2.2.2]bicyklooktan, fluorenyl, fenyl, naftyl, indanyl, adamantyl a tetrahydronaftyl.

Pojem „heterocykl nebo „heterocyklický systém je zde použit tak, že znamená stabilní 5 až 7 členný monocyklický nebo bicyklický nebo 7 až 10 členný bicyklický heterocyklický kruh, který je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený (aromatický) a který sestává z atomů uhlíků a od 1 do 4 heteroatomů nezávisle vybraných ze skupiny sestávající z N, O a S a zahrnující jakoukoli bicyklickou skupinu, kde jakýkoli z výše definovaných heterocyklických • « ♦ · • · · · fc » ♦ t ·*· • « · · • * * • · • · kruhů je kondenzován na benzenový kruh. Heteroatomy dusíku a síry mohou být případně oxidovány. Heterocyklický kruh může být napojen na svoji přivěšenou skupinu na jakémkoli heteroatomu nebo atomu uhlíku, což má za následek vznik stabilní struktury. Dusík v heterocyklu může být případně kvarternizován. Je výhodné, pokud celkový počet atomů S a 0 v heterocyklu přesahuje 1, aby tyto heteroatomy nebyly vzájemně sousední. Je výhodné, když celkový počet atomů S a O v heterocyklu není větší než 1. Pojem „aromatický heterocyklický systém nebo „heteroaryl je zamýšlen tak, aby označoval 7 až 10 členný bicyklický heterocyklický aromatický kruh, který sestává z atomů uhlíku a od 1 do 4 heteroatomu nezávisle vybraných ze skupiny sestávající z N, 0 a S. Je výhodné, když celkový počet atomů S a 0 v aromatickém heterocyklu není vyšší než 1.

Příklady heterocyklů zahrnují ale nejsou omezeny na akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuryl, benzothiofuryl, benzothienyl, benzoxazolyl, benzthiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoxazolyl, benzisothiazolyl, benzimidazolinyl, karbazolyl, 4aHkarbazolyl, karbolinyl, chromanyl, chromenyl, cinnolinyl, dekahydrochinolyl, 2H,6H-1,5,2-dithiazinyl, dihydrofuro[2,3-b]tetrahydrofuran, furyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, lH-indazolyl, indolenyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, 3H-indolyl, isobenzofuryl, isochromanyl, isoindazolyl, isoindolinyl, isoindolyl, isochínolyl, ísothiazolyl, isoxazolyl, methylenedioxyfenyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroisochinolyl, oxadiazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl,

1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, oxazolidinyl, oxazolyl, oxazolidinyl, pyrimidinyl, fenanthridinyl, fenanthrolinyl, fenazinyl, fenothiazinyl,

• · · · · · «9 ·· • · !

fenoxathiinyl, fenoxazinyl, ftalazinyl, piperazinyl, piperidyl, pteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridooxazol, pyridoimidazol, pyridothiazol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrrolidinyl, pyrrolinyl, 2Hpyrrolyl, pyrrolyl, chinazolinyl, chinolyl, 4Hchinolizinyl, chinoxalinyl, chinuklidinyl, tetrahydrofuryl, tetrahydroisochinolyl, tetrahydrochinolyl, 6H-1,2,5thiadiazinyl, 1,2,3-thiadiazolyl, 1,2,4-thiadiazolyl, 1, 2, 5-thiadiazolyl, 1,3,4-thiadiazolyl, thianthrenyl, thiazolyl, thienyl, thienothiazolyl, thienooxazolyl, thienoimidazolyl, thienyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl,

1,2,4-triazolyl, 1,2,5-triazolyl, 1,3,4-triazolyl a xanthenyl. Výhodné heterocykly zahrnují ale nejsou omezeny na pyridinyl, furyl, thienyl, pyrrolyl, pyrazolyl, pyrrolidinyl, imidazolyl, indolyl, benzímidazolyl, 1Híndazolyl, oxazolidinyl, benzotriazolyl, benzisoxazolyl, oxindolyl, benzoxazolinyl a isatinoyl. Také sem spadají kondenzované kruhy a spirosloučeniny zahrnující například výše uvedené heterocykly.

Pojem „farmaceuticky přijatelný je zde použit tak, že zahrnuje ty sloučeniny, látky, kompozice a dávkové formy, které jsou v rozsahu medicinálního posouzení vhodné pro použití v kontaktu s tkáněmi lidských bytostí a zvířat bez přílišné toxicity, dráždění, alergické odezvy nebo jiného problému nebo komplikace s ohledem na přijatelný poměr užitek/riziko.

Pojem „farmaceuticky přijatelné soli označuje deriváty popsaných sloučenin, kde je mateřská sloučenina modifikována vytvořením solí s kyselinami nebo zásadami. Příklady farmaceuticky přijatelných oslí zahrnují ale nejsou omezeny na soli minerálních nebo organických kyselin a zásaditých zbytků, jako jsou aminy; a alkalické nebo organické soli zbytků kyselin, jako jsou karboxylové kyseliny. Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují obvyklé netoxické soli nebo kvartérní amoniové soli vytvořených mateřských sloučenin, například s netoxickými anorganickými nebo organickými kyselinami. Tyto běžné netoxické soli zahrnují například ty, které jsou odvozeny od anorganických kyselin, jako jsou kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, sulfamová, fosforečná a dusičná; a soli připravené s organickými kyselinami, jako jsou octová, propionová, jantarová, glykolová, stearová, mléčná, jablečná, vinná, citrónová, askorbová, pamoová, maleinová, hydroxymaleinová, fenyloctová, glutamová, benzoová, salicylová, sulfonilová,

2-acetoxybenzoová, fumarová, toluensulfonová, ethansulfonová, ethandisulfonová, oxalová a isethionová.

Farmaceuticky přijatelné soli podle tohoto vynálezu mohou být syntetizovány z mateřské sloučeniny, která obsahuje zásaditou nebo kyselou jednotku, běžnými chemickými způsoby. Tyto soli mohou být připraveny reakcí volných kyselých nebo zásaditých forem těchto sloučenin se stechiometrickým množstvím odpovídající báze nebo kyseliny ve vodě nebo v anorganickém rozpouštědle nebo v jejich směsi; obecně jsou však výhodná nevodná média, jako ether, ethylacetát, ethanol, isopropanol nebo acetonitril. Seznam vhodných solí lze najít v Remington's Pharmaceutical Science, 17. vydání, Mack Publishing, Easton, PA, 1985, str. 1418, na které se tímto odkazuje.

Protože je známo, že proléčiva zvyšují mnohé žádoucí vlastnosti farmaceutik (například rozpustnost, biodostupnost, zpracování atd.) sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být dodávány ve formě proléčív. Tento vynález tak zahrnuje i proléčiva zde nárokovaných

0

- 64 sloučenin, způsoby jejich podávání a kompozice, které je obsahují. Pojem „proléčivo je zvolen tak, aby zahrnoval jakékoli kovalentně vázané nosiče, které uvolňují aktivní mateřské léčivo podle tohoto vynálezu in vivo, pokud je toto proléčivo podáváno savci. Proléčiva podle tohoto vynálezu jsou připravována modifikací funkčních skupin přítomných ve sloučenině takovým způsobem, že modifikace jsou štěpeny, ať už při rutinní manipulaci nebo in vivo, na mateřskou sloučeninu. Proléčiva zahrnují sloučeniny podle tohoto vynálezu, kde hydroxykupina, aminoskupina nebo sulfhydrylová skupina je navázána na jakoukoli skupinu tak, že při podávání proléčiva podle tohoto vynálezu savci se štěpí za tvorby volné hydroxylové skupiny, volné aminoskupiny nebo volné sulfhydrylové skupiny. Příklady proléčiv zahrnují ale nejsou omezeny na acetátové, formiátové a benzoatové deriváty alkoholových a aminových funkčních skupin ve sloučeninách podle tohoto vynálezu.

Pojem „stabilní sloučenina a „stabilní struktura je zamýšlen tak, aby zahrnoval sloučeninu, která je dostatečně masivní k tomu, aby přečkala izolaci do užitečného stupně čistoty z reakční směsi a přípravu na účinné terapeutické činidlo.

Koordinační sféra radionuklidu zahrnuje všechny ligandy nebo skupiny vázané na radionuklid. Pro kovový radionuklid platí, že aby byl stabilní, má kovový radionuklid typicky koordinační číslo {počet donorových atomů) tvořené celým číslem větším nebo rovným 4 a menším nebo rovným 9; to znamená, že 4 až 9 atomů je navázaných na kov. Tento stav se označuje jako kompletní koordinační sféra. Nezbytné koordinační číslo pro stabilní radionuklidový komplex je určeno identitou radionuklidu, jeho oxidačním stavem a typem donorových atomů. Pokud

·« ·· • · * · « · » • · · chelatační činidlo neposkytuje všechny atomy nezbytné ke stabilizaci kovového radionuklidu doplněním jeho koordinační sféry, koordinační sféra je doplněna donorovými atomy z jiných ligandů, přechodných ligandů nebo spoluligandů, které mohou být také buď koncové nebo chelatační.

Lyofilizační pomocné prostředky, užitečné při přípravě diagnostických souprav, které jsou užitečné pro přípravu radiofarmaceutik, zahrnují ale nejsou omezeny na mannitol, laktózu, sorbitol, dextran, Ficoll a polyvinylpyrrolidin (PVP).

Stabilizační pomocné prostředky, užitečné při přípravě radiofarmaceutik a diagnostických souprav, které jsou užitečné pro přípravu radiofarmaceutik, zahrnují ale nejsou omezeny na kyselinu askorbovou, cystein, monothioglycerol, bisulfit sodný, metabisulfit sodný, kyselina gentisovou a inositol.

Solubilizační pomocná činidla, užitečná při přípravě radiofarmaceutik a diagnostických souprav, která jsou užitečná pro přípravu radiofarmaceutik, zahrnují ale nejsou omezena na ethanol, glycerin, polyethylenglykol, propylenglykol, polyoxyethylovaný sorbitanmonooleat, sorbitanmonoloeat, polysorbáty, blokové kopolymery póly(oxyethylen)póly(oxypropylen)-póly(oxyethylen) (Pluronics) a lecithin. Výhodná solubilizační pomocná činidla jsou polyethylenglykol a Pluronics.

Bakteriostatika užitečná při přípravě radiofarmaceutik a diagnostických souprav, která jsou užitečná pro přípravu radiofarmaceutik, zahrnují ale nejsou omezena na benzylalkohol, benzalkoniumchlorid, chlorbutanol, methyl, propyl nebo butylparaben.

4 · · • · 4 · • · · · · · * • 4 4 4 4 · • ·4·

Využitelnost

Diagnostická radiofármaceutíka jsou podávána intravenózní injekcí, obvykle ve fyziologickém roztoku v dávce od 1 do 100 mCi na 70 kg tělesné hmotnosti nebo výhodně v dávce 5 až 50 mCi. Zobrazení se provádí za použití známých procedur.

Kontrastní činidla pro zobrazení magnetickou rezonancí mohou být použita obdobným způsobem jako jiná MRI činidla, jak je pospáno v US patentu 5 155 215; US patentu 5087440; Margerstadt et al. Magn. Reson. Med. 1986, 3, 808 - 812; Runge et al. Radiology 1988, 166, 835 - 838; a Bousquet et al. Radiology 1988, 166, 693 - 698. Obecně se sterilní vodné roztoky kontrastního činidla podávají pacientovi intravenózně v dávkách od 0,01 do 1,0 mol na kg tělesné hmotnosti.

Pro použití jako rentgenová kontrastní činidla by měly mít kompozice podle tohoto vynálezu obecně koncentraci těžkého atomu 1 mM až 5 M, výhodně 0,1 M až 2 M. Dávky podávané intravenózní injekcí budou typicky v rozmezí od 0,5 mmol/kg do 1,5 mmol/kg, výhodně 0,8 mmol/kg až 1,2 mmol/kg. Zobrazení se typicky provádí za použití známých technik, výhodně rentgenové počítačové tomografie.

Jiné znaky vynálezu budou zřejmé z následujícího popisu příkladných provedení, která jsou uvedena za účelem ilustrace vynálezu ale nejsou zamýšlena k jeho omezení.

Radiofarmaceutika podle tohoto vynálezu zahrnující izotop emitující gama záření jsou vhodná pro zobrazení atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu,

·· i • · * • 9 · 4 • · 4 4 · • · · transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

Radiofarmaceutika podle tohoto vynálezu zahrnující izotop emitující pozitronové záření jsou vhodná pro zobrazení atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnující ionty jednoho nebo více paramagnetických kovů vybraných z gadolinia, dysprosia, železa a manganu, jsou vhodná jako kontrastní činidla pro magnetické rezonanční zobrazení (MRI) atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvíce, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnující jeden nebo více atomů těžkého kovu s atomovým číslem 20 nebo vyšším jsou užitečné jako rentgenová kontrastní činidla pro rentgenové zobrazení atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnující echogenní plyn obsahující mikrokuličky povrchově aktivního činidla jsou užitečné jako ultrazvuková kontrastní činidla pro sonografii atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ·· · ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

K připojení inhibitorů Q k mikrokuličkám povrchově aktivních látek X³ může být použita řada reakčních schémat. Ta jsou ilustrována v následujících reakčních schématech, kde Sf představuje jednotku povrchově aktivního činidla, které tvoří mikrokuličky povrchově aktivního činidla.

Acylační reakce

S_f-C(-O)-Y +_ Q-NH₂ nebo-------——> S_f-C(=O)-NH-Q

ý. A Q-OH nebo S_f-C (=0) -Q-Q

Y je odstupující skupina nebo aktivní ester

Disulfidové spojení

Sf-SH + Q-SH -------> Sf-S-S-Q

Sulfonamidové spojení s_f-s.(=o)₂-Y + q-nh₂ ——> Sf-s (=0) ₂-nh-q

Redukční amidace

Sf-CKO + Q-NH₂ ——> Sf-NH-Q '

V těchto reakčních schématech mohou být substituenty S_f a Q i obráceny.

Příklady sloučenin podle tohoto vynálezu byly testovány v následujících zkouškách a modelech in vivo a in vitro a bylo zjištěno, že jsou aktivní.

• · · • · · · · ·· ····

Příklady provedení vynálezu

Zkoušky příjmu Di-AcLDL

Ke zjištěni vazebné aktivity antagonistů SA-R byla použita vysoce účinná zkouška (Freeman et al. Proč. Nati. Sci. USA 1991, 88, 4931 - 4935; Lysko et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999, 289, 1277 - 1285; PCT patentové přihlášky WO 99/07382, WO 00/06147 a WO 00/03704) založená na příjmu Dil-AcLDL (1,l'-dioktadecyl-3,3,3',3'tetramethylindokarbokyaninchloristanem značený LDL) transfektovanými buňkami HEK 293. Pro většinu zkoušek byly použity buňky HEK 293 transfektované SR-AI, přestože jak SR-AI, tak SR-AII se jeví, že mají stejnou aktivitu.

Krátce, buňky HEK 293 byly naneseny v množství 2 χ 10⁴ buněk/jamku v 96 jamkové destičce v EMEM s 2 mM glutaminem, 10% FBS a 0,4 mg/ml geneticinu. Buňky vykázaly 100% napojení a dosáhly shluku do 3 dnů. Testování bylo provedeno v EMEM bez séra obsahujícím 2 mg/ml BSA. Shluklé buňky byly inkubovány s Dil-AcLDL (konečná koncentrace 2 pg/ml) v nepřítomnosti nebo přítomnosti antagonistů SR-A (čtveronásobné stanovení) po dobu 4 h při 37 °C. Během odsávání roztoků a promytí Lochesovým pufrem docházelo k minimálnímu oddělování buněk v důsledku zvýšeného připojení oproti nemodifikovaným buňkám 293. Výsledky byly kvantitativně vyhodnoceny pomocí deskového čítače CytoFluro 2350 při excitaci při 530 nm/emísi při 590 nm. Okolní fluorescence neznačených buněk byla odečtena od hodnot fluorescence Di-AcLDL (čtveronásobné stanovení) a výsledky byly vyjádřeny jako procento celkové fluorescence Dii buněk inkubovaných v nepřítomnosti antagonistů SR-A.

Radioligandová zkouška

Tato zkouška byla použita ke zjištění účinnosti antagonisty SR-A při blokování degradace SR-A a vázání/internalizaci [¹²⁵I]AcLDL, a byla přizpůsobena dřívějším studiím (Goldstein et al. Proč. Nati. Sci. USA 1979, 76, 333 - 337; Goldstein et al. Methods Enzymol.

1983, 98, 181 - 190; Lysko et al. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1999, 289, 1277 - 1285; PCT patentové přihlášky WO 99/07382, WO 00/06147 a WO 00/03704). Krátce, buňky HEK 293 transfektované SR-AI nebo SR-A1I byly zaočkovány při 2 x 10⁵ buněk/ml/jamku v 24 jamkové desce v EMEM doplněném 2 mM glutaminu, 10 % FBS a 0,4 mg/ml geneticinu. Po 2 až 3 dnech bylo médium nahrazeno 500 μΐ bezsérového média obsahujícího 2 mg/ml BSA a [¹²⁵I]AcLDL (jodem značený acetylovaný lipoprotein o nízké hustotě) při 5 pg/ml a buňky. Buňky vykázaly v podstatě 100% navázání a dosáhly shluků do 3 dnů. Testování bylo provedeno v bezsérovém EMEM obsahujícím 2 mg/ml BSA a buňky byly inkubovány při 37 °C po dobu 6 h. Po tomto vhodném čase pro degradaci ligandů byly buňky přeneseny do pokoje o 4 °C. Supernatant byl přenesen do kyseliny trichloroctové a směs byla odstředěna. Supernatant byl extrahován chloroformem pro izolaci [¹²⁵I]monojodtyrosinu, degradačního produktu [¹²⁵I]AcLDL a porce byly podrobeny sčítání impulsů ke stanovení degradační aktivity. Plastické jamky obsahující ekvivalentní množství ligandů bez buněk byly inkubovány a zpracovány stejným způsobem pro stanovení degradace ligandů jako slepý pokus, jehož výsledné impulsy byly odečteny od celkových impulsů. Nespecifické navázání bylo stanoveno inkubací s póly I při 100 pg/ml. Pro stanovení s buňkou spojeného ligandů byly monovrstvy buněk promyty a inkubovány při 4 °C pomocí ledově chladného pufru A obsahujícího 150 gM NaCl, 50 mM Tris-HCl a 2 mg/ml BSA, pH • 0 • · · • 0 · • 0 0 ·

0 0 · • 0

00

7,4, k eliminaci nespecificky vázaných impulzů. Buňky byly promyty rychle třikrát 1 ml, inkubovány dvakrát 10 min pokaždé v 1 ml pufru bez BSA. Po odsátí veškerého promývacího pufru byly buňky lyžovány v 0,1 N NaOH a přeneseny do citacích ampulek pro stanovení vazby/příjmu a sekvenční určení proteinu (Piece BSA zkouška). Přítomná aktivita dosáhla hodnot IC₅₀ <50 M u zkoušek degradace a <100 mM u zkoušek vazby/příjmu. U každého data experimentu bylo provedeno trojí stanovení; a n se rovná počtu provedených experimentů.

Králičí model pro zobrazeni experimentální atherosklerózy

Tato studie zahrnuje použití samců novozélandských bílých králíků o hmotnosti 3 až 4 kg, kteří byli krmeni buď normální dietou jako kontrola nebo dietou s 1,5 % přidaného cholesterolu (Bio-Serv, lne., Frechtown, NJ). Po 1 týdnu hyperlipidemické diety byla okryta abdominální aorta na endothelium modifikovaným Baumgartenerovým způsobem (Baumgartener, H. R. Z. Gesamte Exp. Med. 1963, 137, 227 249; Narula et al. Circulation 1995, 92, 474-484; Narula et al. J. Nucl. Cardiol. 1996, 3, 231 - 241; Elmaleh et al. Proč. Nati. Sci. USA 3.998, 95, 691-695). Krátce, každé zvíře bylo podrobeno anestézi směsí ketaminu a xylazinu (100 mg/ml, 10 : 1 obj./obj.; 1,5 - 2,5 ml/sc) a byla izolována pravá femorální arterie. Arteriotomií byl zaveden 4F Fogarty embolektomický katetr a byl posunován za fluoroskopického vedení do úrovně diafragmy. Katetr byl napumpován na 3 psi nad nafukovací flak balónku radíografickým kontrastním médiem (Conray, Mallinckrodt) a byly učiněny tři průchody abdominální aortou nafouknutým katetrem. Femorální arterie byla poté podvázána a rána byla uzavřena. Zvířata byla ponechána probrat z anestéze a poté

φ · · · ··· • · · · ·· ·· · vrácena do jejích klecí. Zvířata pokračovala v konzumaci hyperlipidemické diety po dalších 11 týdnů.

Po 3 měsících na hyperlipidemické dietě byly zvířatům pro zobrazovací studie injektovány asi 0,5 mCi radiofarmaceutik do marginální ušní žíly. Zvířata byla umístěna na kameru, aby se zobrazovala zvířata zepředu nebo zezadu. Série 5 minutových dynamických zobrazení byla získána během 2 hodin za použití matrice 256x 256 a zvětšení 2x. Známý zdroj byl umístěn na zobrazovací pole (20 - 90 pCi) ke zjištění příjmu v požadované oblasti (ROI). Zobrazení byla také získána 24 hodin po injekci ke stanovení zádrže sloučeniny v aortě. Po dokončení studie byla zobrazení vyhodnocena manuálně vymezením oblasti aorty jako cílové požadované oblasti (ROI) a okolí v okolní ploše. Příjem byl stanoven získáním zlomku celkový počet impulsů ve sledované oblasti pro ROI/zdroj a násobením pCi. Po zobrazení byla zvířata usmrcena pro biodistribuci nebo autoradiografíckou zkoušku odpovídajících orgánů.

Tento model může být také použit ke stanovení účinnosti radiofarmaceutik podle tohoto vynálezu zahrnujících pozitrony emitující izotop. Radiofarmaceutika jsou podávána v odpovídajících množstvích a příjem v aortě může být kvantitativně vyhodnocen buď neinvazivně zobrazením PET nebo vyříznutím aorty a spočítáním množství přítomné radioaktivity standardními technikami.

Tento model může být použit k vyhodnocení sloučenin podle tohoto vynálezu obsahujících paramagnetické kovy jako kontrastní činidla MRI. Po podávání odpovídajícího množství paramagnetických sloučenin mohou být zvířata umístěna v komerčně dostupných magnetických rezonančních zobrazovačích k zobrazení aorty. Účinností kontrastních činidel mohou být snadno zjištěny srovnáním zobrazení

získaných u zvířat, který nebylo podáváno kontrastní činidlo.

Tento model může být také použit k vyhodnocení sloučenin podle tohoto vynálezu obsahujících těžké atomy jako rentgenová kontrastní činidla. Po podání odpovídajícího množství sloučenin absorbujících rentgenové paprsky mohou být zvířata umístěna do komerčně dostupných rentgenových zobrazovačů k zobrazení aorty. Účinnosti kontrastních činidel mohou být snadno zjištěny srovnáním zobrazení získaných u zvířat, který nebylo podáváno kontrastní činidlo.

Tento model může být také použit k vyhodnocení sloučenin podle tohoto vynálezu obsahujících echogenický plyn obsahující mikrokuličky povrchově aktivního činidla jako ultrazvukové kontrastní činidlo. Po podávání odpovídajících množství echogenických sloučenin mohou být zobrazeny nádory u zvířat za použití ultrazvukové sondy umístěné poblíž aorty. Účinnosti kontrastních činidel mohou být snadno zjištěny srovnáním zobrazení získaných u zvířat, který nebylo podáváno kontrastní činidlo.

Na všechny publikace, patenty a patentové dokumenty, na které se zde odkazuje, se odkazuje jako na individuální odkazy. Vynález byl popsán s odkazem na různá konkrétní a výhodná provedení a techniky. Přesto je třeba pochopit, že bez překročení rozsahu tohoto vynálezu může být provedeno mnoho jeho změn a modifikací.

Claims (49)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina vzorce (I)

   M-C_h-L_n-(BM)_n (I) kde

   M je radionuklid vybraný z ^9SmTc, ^117fflSn, ^ulIn, ⁹⁷Ru, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ¹⁷⁷Lu, ⁴⁷Sc, ^i0SRh, ¹⁸⁸Re, ⁶⁰Cu, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu nebo ion paramagnetického kovu atomového čísla 21 až 29, 42 až 44 nebo 58 až 70 nebo ion těžkého kovu atomového čísla 21 až 31, 39 až 49, 50, 56 až 80, 82, 83, 90;

   C_h je kovové chelatační ze skupiny činidlo mající vzorec vybraný ,²—EΈ—A⁷ e-^a\ z

   ^A\

   V

   p..

   A

   a.

   kde

   90 0

   9 0

   0 0 9

   0 9900

   9 0

   09 ·

   9 0 75

   00 · 0 0 · • 0 • ' ·

   9 · ·

   0 0 9 9

   0 0 9 9 »

   00 00

   A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A^e, A⁷ a A⁸ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: NR¹⁹, NR¹⁹R²⁰, S, SH, 0, OH, PR¹⁹; PR¹⁹R²⁰, P(O)R²¹R²² a přímé vazby na L_n;

   E je přímá vazba, CH, nebo oddělovací skupina nezávisle vybraná při každém výskytu ze skupiny:

   (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (Cg-Cio) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C_x-Cio) alkyl-(Cg-Cio) aryl substituovaný 0 až 3 R²³ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³

   R¹⁹ a R²⁰ jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na L_n, vodík, (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-(Ci-C₁₀) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (C6Cio) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(C6-C10) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³ a elektron, za předpokladu, že když R¹⁹ nebo R²⁰ je elektron, druhý je také elektron;

   R²¹ a R²² jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny:

   přímá vazba na L_n, -OH, (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3

   R²³, (C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 * ·

   0 až 3 R t · · ·

   Φ « *

   - 76 - 1 : .· •· ···» až 3 R²³, heterocyklo-(Ci-Cio) alkyl substituovaný kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (Cg-Cio) aryl-(Cx-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) alkyl-(Ce-Cio5 aryl substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³;

   R²³ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF3, -CN, -CO2R²⁴, -C(=0)R²⁴, -C(=O)N(R²⁴)2, -CHO, -CH₂OR²⁴, ~OC(=O)R²⁴, -OC (=0) OR^24a, -OR²⁴, -OC(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵C (-0) R²⁴, ~NR²⁵C{=0)0R^24a, -NR²⁵C(=O)N(R²⁴)2, -NR²⁵SO2N (R²⁴) 2, -NR²⁵SO2R^24a, -SO3H, -SO₂R^24a, -SR²⁴, -S(=O)R^24a, -SO2N(R²⁴)2, -N(R²⁴)₂,

   -NHC (=S) NHR²⁴, -NOR²⁴, NO2, -C {-0} NHOR²⁴, -C (=0) NHNR²⁴R^24a, -0CH2C0₂H, 2-(1-morfolino)ethoxyskupina, (C1-C5) alkyl, (C2-C4) alkenyl, (C₃-C₆) cykloalkyl, (C₃-C₆) cykloalkylmethyl, (C₂-C₆) alkoxyalkyl, aryl substituovaný 0 až 2 R²⁴ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0;

   R²⁴, R^24a a R²⁵ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na L_n, H, (Ci-Cg)alkyl, fenyl, benzyl, (Cr-Ce) alkoxyskupina, halid, nitroskupina, kyanoskupina a trifluoromethyl;

   Ln je spojovací skupina mající vzorec:

   ( (W)_h- (CR¹³R¹⁴)g)x-(Z)k-( (CR^13aR^14a)g--(W)_h-)_X' kde ·· ·

   W je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny:

   O, S, NH, NHC(=O), C(=O)NH, NR¹⁵C(=O), C(=O)NR¹⁵, C(=O),

   C(=O)O, OC(=O), NHC(=S)NH, NHC(=O)NH, so₂, so₂nh, (OCH₂CH₂)_s, (CH₂CH₂O)_s-, (OCH₂CH₂CH₂)_s--, (CH₂CH₂CH₂O) t a (aa)t-;

   aa je nezávisle při každém výskytu aminokyselina;

   Z je vybrána z skupiny: aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁶;

   R¹³, R^13a, R¹⁴, R^14a a R¹⁵ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiný: H, =0, COOH, SO₃H, PO₃H, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, benzyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a {C1-C5)alkoxyskupina substituovaná 0 až 3 R¹⁶, NHC(=0)R¹⁷, C(=0)NHR¹⁷, NHC (=0) NHR¹⁷, NHR¹⁷, R¹⁷ a přímá vazba na C_h;

   R¹⁶ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ch, COOR¹⁷, C(=0)NHR¹⁷, NHC(=O)R¹⁷, OH, NHR¹⁷, SO3H, PO3H, -OPO3H2, -OSO3H, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁷, (Ci-C5) alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, (C1-C5) alkoxyskupina substituovaná 0 až 1 R¹⁸ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁷;

   R¹⁷ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: H, alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aryl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁸; (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyalkylenglykol substituovaný 0 až 1 R¹⁸, karbohydrat substituovaný 0 až 1 R¹⁸, cyklodextrin substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aminokyselina substituovaná 0 až • · ·

   1 R¹⁸, pólykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, peptid substituovaný 0 až 1 R¹⁸, kde tento peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselin, 3,6-O-disulfo-B-D-galaktopyranosyl, bis(fosfonomethyl)glycin a přímá vazba na Ch;

   R¹⁸ je přímá vazba na Ch; k je vybráno z 0, 1 a 2; h je vybráno z 0, 1 a 2; h' je vybráno z 0, 1 a 2;

   g je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; g' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; s je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; s' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; s” je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; t je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

   V je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10; x je vybráno zO, 1, 2, 3, 4 a 5;

   x' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4 a 5; n je celé číslo od 1 do 10;

   BM je antagonista SR-A vzorce:

   ΌΗ

   OH • 4

   44 ···♦

   4 4 ·

   4 · *

   4 4444

   4 *

   4 4 4444 m

   kde

   R¹ je nezávisle vybrána z: H, R¹-benzamidoskupiny, R¹-benzyletheru, R¹-benzylaminoskupiny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a 1,2-benzoskupiny; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

   R² je přímá vazba na Ln; a m je celé číslo od 1 do 4; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde C_hje kde

   A¹ je vybrána ze skupiny A², A⁴ a A⁶ jsou každá N;

   OH a přímá vazba na L_n;

   A³, A⁵ a A⁸ jsou každá OH;

   • · · · · 0

   0 * • · · 0 · · ·

   0 0 0 0 0 «

   00 0 0 i

   A⁷ je přímá vazba na L_n;

   E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a _r23 j_{e =0}.
3. 3. Sloučenina podle nároku 1, kde Ch je kde

   A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba na L_n; A², A³ a A⁴ jsou každá N;

   A⁵, A⁶ a A⁸ jsou každá OH;

   A⁷ je přímá vazba na L_n;

   E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a R²³ je =0.
4. 4. Sloučenina podle nároku 1, kde C_h je ^^~~A²

   A⁷

   - 81 kde

   A¹ je NH₂;

   E je přímá vazba;

   A² je NHR¹⁹;

   R¹⁹ je heterocykl substituovaný R²³, je vybrán z pyridinu a pyrimidinu;

   R²³ j® vybrána z přímé vazby na L_n,

   C(=O)R²⁴;

   R²⁴ je přímá vazba na L_n;

   R³⁰ je vybrána z skupiny: -CO2R³¹, -OR³¹, -SO3H a -N(R³¹)2;

   a

   R³¹ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: vodík a methyl.
5. 5. Sloučenina podle nároku 1, kde Ch je vybrána ze skupiny: DTPA, DOTA, TETA, TRITA, HETA, DOTA-NHS, TETA-NHS,

   DOTA(Gly)3-L-(p-isothiokyanoto)-Phe-amid a D03A.
6. 6. Sloučenina vzorce (I):

   M-C_h-L_n-(BM)_n (I) kde,

   M je radionuklid vybraný z ⁹⁹“Tc, ^117mSn, ^luIn, ⁹⁷Ru, ⁶⁷Ga, ⁶⁸Ga, ⁸⁹Zr, ¹⁷⁷Lu, ⁴⁷Sc, ^10SRh, ¹⁸⁸Re, ⁶⁰Cu, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu nebo ion paramagnetického kovu atomového čísla 21 až přičemž heterocykl

   C(=O)NHR²⁴ a « ·

   29, 42 až 44 nebo 58 až 70 nebo ion těžkého kovu atomového čísla 21 až 31, 39 až 49, 50, 56 až 80, 82, 83, 90;

   Ch je kovové chelatační činidlo mající vzorec vybraný ze skupiny:

   ·· · kde

   A¹, A², A³, A⁴, A⁵, A⁶, A⁷ a A⁸ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: NR¹⁹, NR¹⁹R²⁰, S, SH, O, OH, PR¹⁹; PR¹⁹R²⁰, P(O)R²¹R²² a přímé vazby na L_n;

   E je přímá vazba, CH, nebo oddělovací skupina nezávisle vybraná při každém výskytu ze skupiny:

   ÍCi-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C3.0) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-{C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0, (C6-C10) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(Cg-Cio) aryl substituovaný 0 až 3 R²³ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 φφ φ··«

   99 9

   9 9 9

   9 9 9 9

   9 9 999

   9 9 9

   99 * heteroatomy nezávisle vybrané z Ν, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R²³;

   R¹⁹ a R²⁰ jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na Ln, vodík, (Cr-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Ci0) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo- (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O, (C₆-C₁₀) aryl-{Ci-C₁₀) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio) alkyl-(C₆-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R²³ a elektron, za předpokladu, že když R¹⁹ nebo R²⁰ je elektron, druhý je také elektron;

   R²¹ a R²² jsou každá nezávisle vybrána ze skupiny: přímá vazba na L_n, -OH, (Ci-Cio) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (Ci-Cio)alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, aryl substituovaný 0 až 3 R²³, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R²³, heterocyklo-{C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, kde heterocykloskupina je 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0, (C6-Cio) aryl-(C1-C10) alkyl substituovaný 0 až 3 R²³, (C1-C10) alkyl-(C6-Cio) aryl- substituovaný 0 až 3 R²³, 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R²³;

   R²³ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na Ln, =0, F, Cl, Br, I, -CF₃, -CN,

   -CO₂R²⁴, -C(=O)R²⁴, -C(=O)N(R²⁴)₂, -CHO, -CH₂OR²⁴, -0C(=O)R²⁴,

   -0C (=0) OR^24a, -OR²⁴, -OC(=O)N(R²⁴)₂, -NR²⁵C (=0) R²⁴,

   0 0 0

   0 0 0

   0 0 0 0

   0 0 0 0 0

   0 0«

   00 * • 0 0 · 0 0 • * • «

   -NR²⁵C(=O)OR^24a, -NR²⁵C (=-0) N(R²⁴)₂, -NR²⁵SO2N (R²⁴) 2, -NR²⁵SO2R^24a, -SO3H, -SO₂R^24a, -SR²⁴, -S(=O)R^24a, -SO2N(R²⁴)2, -N(R²⁴)₂,

   -NHC (=S) NHR²⁴, =NOR²⁴, N02, -C (-0) NHOR²⁴, -C (=0) NHNR²⁴R^24a, -OCH2CO₂H, 2-(1-morfolino)ethoxyskupina, (C3.-C5) alkyl, (C₂C₄) alkenyl, (Cr-Ce) cykloalkyl, (C₃-C₆) cykloalkylmethyl, (C₂—Cg) alkoxyalkyl, aryl substituovaný 0 až 2 R²⁴ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 heteroatomy nezávisle vybrané z N, S a 0;

   R²⁴, R^24a a R²⁵ jsou nezávisle vybrány při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na L_n, H, (Ci-C₁₀) alkyl, fenyl, benzyl, (C1-C10) alkoxyskupina, halid, nitroskupina, kyanoskupina a trifluoromethyl;

   L_n je spojovací skupina mající vzorec:

   ( (W)_h- (CR¹³R¹⁴) _g) _x-(Z) k-( (CR^13aR^14a) g--(W)h') x kde

   W je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: 0, S, NH, NHC(=0), C(=0)NH, NR¹⁵C(=0), C(=O)NR^1S, C(=O), C(=0)0, 0C(=0), NHC(=S)NH, NHC(=0)NH, S0₂, SO₂NH, (OCH₂CH₂)_S, (CH₂CH₂O)_S', (0CH₂CH₂CH₂)_S'·, (CH₂CH₂CH₂O)_t a (aa)e;

   aa je nezávisle při každém výskytu aminokyselina;

   Z je vybrána z skupiny: aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, (C3-C10) cykloalkyl substituovaný 0 až 3 R^1S a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁶;

   R¹³, R^13a, R¹⁴, R^14a a R^1S jsou nezávisle vybrány pří každém výskytu ze skupiny: H, =0, COOH, SO₃H, PO₃H, (C1-C5) alkyl substituovaný 0 až 3 R^ls, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁶, benzyl substituovaný 0 až 3 R¹⁶ a

   99 9999 • A

   A A * Α· • · · ·

   A AAAA • · * * «· a·a a · *

   AA A « · A • A A ·

   A A A· · • · i • A » (C1-C5) alkoxyskupina substituovaná 0 až 3 R¹⁶, NHC(=O)R¹⁷, C(=O)NHR¹⁷, NHC(=0)NHR¹⁷, NHR¹⁷, R¹⁷ a přímá vazba na C_h;

   R¹⁶ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: přímá vazba na C_h, COOR¹⁷, C(=O)NHR¹⁷, NHC(=O)R¹⁷, OH, NHR¹⁷, SO3H, PO3H, -OPO3H2, -OSO3H, aryl substituovaný 0 až 3 R¹⁷, (C1-C5)alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, (C1-C5) alkoxyskupiny substituovaná 0 až 1 R¹⁸ a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a O a substituovaný 0 až 3 R¹⁷;

   R¹⁷ je nezávisle vybrána při každém výskytu ze skupiny: H, alkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aryl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, a 5 až 10 členný heterocyklický kruhový systém obsahující 1 až 4 atomy nezávisle vybrané z N, S a 0 a substituovaný 0 až 3 R¹⁸; (C3“Cxo) cykloalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyalkylenglykol substituovaný 0 až 1 R¹⁸, karbohydrat substituovaný 0 až 1 R¹⁸, cyklodextrin substituovaný 0 až 1 R¹⁸, aminokyselina substituovaná 0 až 1 R¹⁸, polykarboxyalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, polyazaalkyl substituovaný 0 až 1 R¹⁸, peptid substituovaný 0 až 1 R¹⁸, kde tento peptid obsahuje 2 až 10 aminokyselin, 3,6-0-disulfo-B-D-galaktopyranosyl, bis (fosfonomethyl)glycin a přímá vazba na C_h;

   R¹⁸ je přímá vazba na Ch; k je vybráno z 0, 1 a 2; h je vybráno z 0, 1 a 2; h' je vybráno z 0, 1 a 2;

   g je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; g' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10; s je vybráno zO, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9a 10;

   • · · · · · s' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

   s je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

   t je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 a 10;

   V je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9al0;

   x je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4a 5;

   x' je vybráno z 0, 1, 2, 3, 4 a 5;

   n je celé číslo od 1 do 10;

   BM je antagonista SR-A vzorce:

   kde

   R¹ je nezávisle vybrána z: H, R¹-benzamidoskupiny, R¹-benzyletheru, R¹-benzylaminoskupíny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

   1,2-benzoskupiny; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

   R² je přímá vazba na Ln; a m je celé číslo od 1 do 4;

   9 ·

   9 9

   99 9

   M' je ion kovu vybraný z Fe(III), Os(III), Co(III),

   Ni(II) nebo Cu(II);

   M je jednotka obsahující kov vybraná z: V=O, Mo=0 nebo Re=O; a

   L je spoluligand vybraný z: trialkylfosfinu, triarylfosfinu, triarylyalkylfosfinu, analogu pyridinu nebo pyridinu s vhodným substituentem na pyridinovém kruhu nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
7. 7. Sloučenina podle nároku 6, kde C_h je

   A kde

   A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba : A², A⁴ a A⁶ jsou každá N;

   A³, A⁵ a A⁸ jsou každá OH;

   A⁷ je přímá vazba na L_n nebo NH-vazba na L_n; E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a R²³ je =0.

   OH a přímá vazba na L_n;
8. 8. Sloučenina podle nároku 6, kde Ch je

   90 9

   00 9000 • 0

   0 9
9. 9 0 0

   9 000

   0 0

   0·0·

   0 9 · ·

   0 0 · ♦ « 0 ·00

   0 0 0 0 0

   00 0·

   Ε—

   Α⁷ kde

   A¹ je vybrána ze skupiny: OH a přímá vazba na L_n; A², A³ a A⁴ jsou každá N;

   A⁵f A⁶ a A⁸ jsou každá OH;

   A⁷ je přímá vazba na L_n;

   E je C₂ alkyl substituovaný 0 až 1 R²³; a R²³ je =0.

   9. Sloučenina podle nároku 6, kde Ch je _ZE-A²

   A^r kde

   A¹ je NH₂;

   E je přímá vazba;

   A² je NHR¹⁹;

   R¹⁹ je heterocykl substituovaný R²³, přičemž heterocykl je vybrán z pyridinu a pyrimidinu;

   99 9 • 0

   0 9 9

   9 90« • 0 • 0 ·

   0···

   9 · • ·

   0 ·

   90 ·· » 0 9 « » · « • 9

   R²³ je vybrána z přímé vazby na L_n, C(=O)NHR²⁴ a C(=O)R²⁴;

   R²⁴ je přímá vazba na L_n;

   R³⁰ je vybrána z skupiny: -CO2R³¹, -OR³¹, -SO3H a N(R³¹)2; a

   R³¹ je nezávisle vybrán při každém výskytu ze skupiny: vodík a methyl.
10. 10. Sloučenina podle nároku 6, kde Ch je vybrána ze skupiny: DTPA, DOTA, TETA, TRITA, HETA, DOTA-NHS, TETA-NHS, DOTA(Gly)3-L-(p-isothiokyanoto)-Phe-amid a D03A.
11. 11. Sloučenina vzorce:

    kde ⁶⁰Cu, ⁶²Cu, ⁶⁴Cu a ⁶⁷Cu;

    M je radionuklid vybraný z:

    99 9999

    9 9 9

    9 9 9

    9 9 9 9

    9 9 9999

    - 90 M' je ^99mTc nebo ^18sRe;

    R¹ je nezávisle vybrána z: H, R¹-benzamidoskupiny,

    R^benzyletheru, R¹-benzylaminoskupiny, aminoskupiny, fluoralkylu, halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

    1.2- benzoskupin; nebo R¹ představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

    R² je nezávisle vybrána z: H, fluoralkylu, halogenu, aryloxylu, haloarylu, arylu, alkoxyskupiny a

    1.2- benzoskupiny; nebo R² představuje kondenzovaný kruh tvořící naftalenovou jednotku spolu s šestičlenným arylovým kruhem, který substituuje;

    m je celé číslo od 1 do 4; a

    L je spoluligand vybraný z: trialkylfosfinu, triarylfosfinu, triarylyalkylfosfinu, analogu pyridinu nebo pyridinu s vhodným substituentem na pyridinovém kruhu;

    nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
12. 12. Způsob diagnózy kardiovaskulární choroby u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který potřebuje provedení takové diagnózy, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
13. 13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

    ·* ··♦· ·· · • * · • · · ·

    9 · · ·*· • · · ·· ·
14. 14. Způsob monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
15. 15. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.
16. 16. Způsob monitorování vývoje atherosklerotické léze u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
17. 17. Způsob detekce narušitelného plaku u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který potřebuje takovou detekci, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
18. 18. Způsob podle nároku 12 až 17, vyznačující se tím že detekce zahrnuje zobrazení magnetickou rezonancí.

    • · · • ···· • · «

    • · ·
19. 19. Způsob podle nároku 12 až 17, vyznačující se tím, že detekce zahrnuje rentgenové zobrazení.
20. 20. Způsob diagnózy kardiovaskulární choroby u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 6 pacientovi, který potřebuje provedení takové diagnózy, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
21. 21. Způsob podle nároku 20, vyznačující se tím, že kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.
22. 22. Způsob monitorování kardiovaskulární choroby u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 6 pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
23. 23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že kardiovaskulární choroba je vybrána z atherosklerózy, narušitelného plaku, koronární arteriální choroby, renální choroby, trombózy, přechodné ischemie v důsledku tvorby shluků, mrtvice, infarktu myokardu, transplantace orgánů, selhání orgánu a hypercholesterolemie.

    φφ φ • Φ φφφφ φ Φ · · φ φ φ · φ φ · φ φ · φ φ φ φ ·
24. 24. Způsob monitorování vývoje atherosklerotické léze u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 6 pacientovi, který potřebuje takové monitorování, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
25. 25. Způsob detekce narušitelného plaku u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 6 pacientovi, který potřebuje takovou detekci, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
26. 26. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 20 až 25, vyznačující se tím, že detekce zahrnuje zobrazení magnetickou rezonancí.
27. 27. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 20 až 25, vyznačující se tím, že kde detekce zahrnuje rentgenové zobrazení.
28. 28. Způsob radiového zobrazení u pacienta, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle nároku 11 pacientovi, který potřebuje takové radiové zobrazení, a detekci přítomnosti této sloučeniny.
29. 29. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.

    • · · ·

    - 94
30. 30. Farmaceutická kompozice podle nároku 29, vyznačující se tím, že dále obsahuje účinné množství stabilizátoru.
31. 31. Farmaceutická kompozice podle nároku 30, vyznačující se tím, že stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p-aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5-amino-2-hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, nikotinamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.
32. 32. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 6 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
33. 33. Farmaceutická kompozice podle nároku 32, vyznačující se tím, že dále obsahuje účinné množství stabilizátoru.
34. 34. Farmaceutická kompozici podle nároku 33, vyznačující se tím, že stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p-aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5-amino-2-hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, nikotinamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.

    0 0

    0 0 0

    0 000· • · • 0
35. 35. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje předem stanovené množství sloučeniny podle nároku

    11, nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
36. 36. Farmaceutická kompozice podle nároku 35, vyznačující se tím, že dále obsahuje účinné množství stabilizátoru.
37. 37. Farmaceutická kompozice podle nároku 36, vyznačující se tím, že stabilizátor je vybrán ze skupiny: kyselina askorbová, benzylalkohol, kyselina gentisová nebo její sůl s kovem, kyselina p~aminobenzoová nebo její sůl, cysteamin, kyselina 5~amino-2-hydroxybenzoová nebo její sůl s kovem, kyselina nikotinová nebo její sůl s kovem, nikotinamid, polyhydroxylovaná aromatická sloučenina, aromatický amin a hydroxylovaný aromatický amin.
38. 38. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje zatavenou ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
39. 39. Souprava podle nároku 38, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.
40. 40. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje zatavenou ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 6 nebo její farmaceuticky

    ΦΦ «φ » φ φ « φφφφ φφ · » φφφφ φ φ · φφφφ přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
41. 41. Souprava podle nároku 40, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.
42. 42. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje zatavenou ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 11 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
43. 43. Souprava podle nároku 42, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.
44. 44. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
45. 45. Souprava podle nároku 44, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.
46. 46. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství φφ φ ·· φφ φφ ···· • · · · φ φ · φφφ • · φ · · φ φφφφ φφ φφφφ φφφφ φφφ φφφ φφφφ φφφ φφφφφφ φφ φφ φφ φ sloučeniny podle nároku β nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
47. 47. Souprava podle nároku 46, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.
48. 48. Souprava, vyznačující se tím, že obsahuje (a) první ampulku obsahující předem stanovené množství sloučeniny podle nároku 11 nebo její farmaceuticky přijatelné soli; a (b) druhou ampulku obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
49. 49. Souprava podle nároku 48, vyznačující se tím, že dále obsahuje alespoň jedno redukční činidlo, objemové činidlo a slabý tranferový ligand.