CZ20003135A3 - Porézní samonosná struktura pro chromatografické zařízení - Google Patents

Porézní samonosná struktura pro chromatografické zařízení Download PDF

Info

Publication number
CZ20003135A3
CZ20003135A3 CZ20003135A CZ20003135A CZ20003135A3 CZ 20003135 A3 CZ20003135 A3 CZ 20003135A3 CZ 20003135 A CZ20003135 A CZ 20003135A CZ 20003135 A CZ20003135 A CZ 20003135A CZ 20003135 A3 CZ20003135 A3 CZ 20003135A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
porous
nároku
supporting structure
housing
component
Prior art date
Application number
CZ20003135A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ302614B6 (cs
Inventor
Ales Podgornik
Milos Barut
Ales Strancar
Djuro Josic
Original Assignee
Bia Separations D. O. O.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from SI9800058A external-priority patent/SI9800058A/sl
Priority claimed from SI9800201A external-priority patent/SI20011A/sl
Application filed by Bia Separations D. O. O. filed Critical Bia Separations D. O. O.
Publication of CZ20003135A3 publication Critical patent/CZ20003135A3/cs
Publication of CZ302614B6 publication Critical patent/CZ302614B6/cs

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B01D15/325—Reversed phase
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/32—Bonded phase chromatography
    • B01D15/325—Reversed phase
    • B01D15/327—Reversed phase with hydrophobic interaction
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
    • B01D15/361—Ion-exchange
    • B01D15/363—Anion-exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/22—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising organic material
    • B01J20/26—Synthetic macromolecular compounds
    • B01J20/261—Synthetic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28014—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their form
    • B01J20/28042—Shaped bodies; Monolithic structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28088—Pore-size distribution
    • B01J20/28092—Bimodal, polymodal, different types of pores or different pore size distributions in different parts of the sorbent
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28095—Shape or type of pores, voids, channels, ducts
    • B01J20/28097—Shape or type of pores, voids, channels, ducts being coated, filled or plugged with specific compounds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/282—Porous sorbents
    • B01J20/285—Porous sorbents based on polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B01J20/287—Non-polar phases; Reversed phases
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
    • G01N30/56—Packing methods or coating methods
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G01N30/6052—Construction of the column body
    • G01N30/6069—Construction of the column body with compartments or bed substructure
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/50—Aspects relating to the use of sorbent or filter aid materials
    • B01J2220/54—Sorbents specially adapted for analytical or investigative chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J2220/00—Aspects relating to sorbent materials
    • B01J2220/80—Aspects related to sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J2220/82—Shaped bodies, e.g. monoliths, plugs, tubes, continuous beds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
    • G01N30/52—Physical parameters
    • G01N2030/524—Physical parameters structural properties
    • G01N2030/525—Physical parameters structural properties surface properties, e.g. porosity
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/50—Conditioning of the sorbent material or stationary liquid
    • G01N30/52—Physical parameters
    • G01N2030/524—Physical parameters structural properties
    • G01N2030/528—Monolithic sorbent material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G01N30/6004—Construction of the column end pieces
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/60—Construction of the column
    • G01N30/6091—Cartridges

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Description

Oblast techniky
Předložený vynález se týká porézní samonosné struktury obsahující alespoň dvě porézní součásti A a B, výrobku obsahujícího porézní samonosnou strukturu obsahující alespoň dvě porézní součásti A a B, pouzdra pro použití ve výrobku podle vynálezu, koncovky pro použití ve výrobku podle vynálezu jakož i způsobu výroby porézní samonosné struktury podle předloženého vynálezu.
Dosavadní stav techniky
Kapalinová chromatografie je jedním z nejdůležitějších nástrojů pro analýzu vzorků jakož i pro izolaci nebo čištění sloučenin. Chromatografie funguje v zásadě prostřednictvím interakce molekul rozpuštěných v kapalné fází (mobiíní fáze) a pevné fáze (stacionární fáze). Téměř ideální chromatografický proces funguje jako efektivní separace sloučenin, někdy velkého objemu, ve velmi krátkém čase. Konvenční chromatografický proces se provádí vedením vzorku obsahujícího kapalnou fázi, který se separuje, skrze stacionární fází (matrici). Poněvadž různé sloučeniny ínteragují různě se stacionární fází, mají různou dobu průchodu a v důsledku toho nastává separace. Konvenční stacionární fáze jsou vytvořeny ve formě porézního lože poskytujícího dostatečně velký aktivní povrch pro interakci. Jsou plněny do kolon, zpravidla několik centimetrů dlouhých a několik milimetrů širokých, na obou koncích uzavřených porézními fritami. Vzhledem k jejich poréznosti a struktuře máji lože malou mechanickou stabilitu. Při převedení « · chromatografického separačního systému do komerčního měřítka je požadován větší objem matrice a musí být použity větší objemy kolon. Kombinace velkých průtoků a velké výšky lože (tj. hydrostatického tlaku) má za následek vysokou tlakovou ztrátu podél matrice zapříčiňující stlačení materiálu matrice. To mění charakteristiky kolony dané celkovou porozitou a nehomogenitami. Jedním z pokusů o překonání tohoto problému je použití krátkých kolon s velkým průřezem. Problém však způsobuje nerovnoměrná distribuce vzorku po průřezu a velký mrtvý objem. Konstrukce chromatografické kolony s horizontálním tokem řeší problém tlakové ztráty použitím kolony válcového tvaru, jak popisuje Saxena (US patenty 4 627 918, 4 676 989 a 4 840 730), Separační matrice je umístěna mezi dvěma porézními fritami trubicovítého tvaru různých průměrů. Mobilní fáze prochází skrze vnější porézn; fritu a skrze matrici. Protože výška lože matrice je malá, nehraje hydrostatický tlak roli. Kromě toho, tloušťka lože je malá, což způsobuje jen malou tlakovou ztrátu.
Vzhledem k částicové struktuře však zůstávají neřešeny dvě nevýhody týkající se účinnosti a rychlosti separace: pro separací není využit celý objem vzhledem k prázdnými prostorům (mezerám mezi částicemi), a doba separace není dostatečně krátká vzhledem k omezení difúze uvnitř jednostranně uzavřených pórů částic.
První pokus o překonání obou výše zmíněných problémů provedl Hjerten aj ., J.Chromatogr., 473 (1989) 273-275, WO 90/07965, polymerací směsi akrylové kyseliny a metylenbisakrylamidu pro vytvoření stacionární fáze. Výsledná polymerní svíčka obsahuje kanálky, které jsou dost velké pro umožnění hydrodynamického toku. Polymer sám však je velmi měkký a musí být před použitím stlačen. Ve velkém měřítku to • φ φ « φ φ φ φφφ·· φφφ φφφ φφφ φφφφ
- 3 - ···· ·· φφ® φ* ·· ·· vede k nevýhodám, neboť stlačení má za následek neuniformní kanálky uvnitř svíčky, což vede k méně než ideální účinnosti kolony. Téměř stejnou tzv. „membránovou chromatografii popsal Švec aj. (US patenty 4 889 932, 4 923 610 a
952 349). Použité membrány mají tuhou strukturu zahrnující bimodální distribuci velikosti pórů otevřených kanálků a mají vynikající hydrodynamické charakteristiky které mají za následek krátké doby separace. Ačkoli v zásadě není velikost membrány omezena, mechanická nestabilita a nepravidelná distribuce vzorku omezují použitelnost takovýchto jednotek v procesech ve velkém měřítku.
Jiný přístup použili Frechet a Švec (US patenty
334 310 a 5 453 185) polymerací monomerů na tuhou porézní svíčku uvnitř prázdné chromatografické ocelové kolony omezeného průměru. Porézní svíčka má obdobné charakteristiky jako výše zmíněné membrány. Vysoká tlaková ztráta svíčky však determinuje horní mez průtoku, která spolu s malým průměrem kolony zabraňuje použití na preparativní úrovni. Josic aj. popsal tuhé porézní trubice na bázi metakrylátů (WO 96/06158), kde mobilní fáze prochází ložem v radiálním směru, což má za následek mnohem menší tlakovou ztrátu i při zvýšeném průtoku. Tato konstrukce umožňuje velmi rychlou separaci na semipreparativní úrovni.
Během volné polymerace svíček velkého průměru nebo trubic velké tloušťky se vyvíjí značné množství tepla. Protože monomerní směs má poměrně nízkou tepelnou vodivost, během polymerace dramaticky roste teplota uvnitř směsi (E.C.Peters, F.Svec, J.M.J.Frechet, Chem. Mater., 9(1997} 1898). Protože distribuce velikosti pórů je závislá na teplotě (Švec a Frechet, Chem. Mater., 7(1995) 707), má výsledný polymer proměnlivou strukturu a nelze jej použít fcfcfcfc ·· • fc • * ··· • fc « pro chromatografické separace. Peters aj. Chem, Mater., 9(1997) 1898 navrhl polymeraci pomalým přidáváním monomerní směsi, která vykazuje mnohem nižší nárůst teploty a jen nepatné narušení distribuce velikosti pórů. Nebyla popsána separační účinnost takovéto kolony. Kromě toho, tento přístup prodlužuje dobu potřebnou pro provedení polymerace a vyžaduje velmi přesné přidávání monomerní směsi pro zabránění vzrůstu teploty.
Jiným způsobem regulace či snížení množství vyvíjeného tepla je přidávání polymerních částic se stejnou strukturou pórů do monomerní směsi. Protože průměr částic je zpravidla řádu mikrometrů, monomery mohou mohou difundovat do jejich pórů a polymerovat za vzniku nehomogenní distribuce velikostí pórů. Pro zamezení změn ve struktuře polymeru musí být póry částic vyplněny inhibitorem. Jestliže jo koncentrace částic příliš vysoká, inhibitor inhibuje také polymeraci monomerní směsi kolem částic.
Na druhé straně, jestliže je množství polymerních částic přidávané do polymerační směsi příliš nízké, mohou se částice,, během polymerace usazovat ve spodní části formy. Lokální koncentrace částic v monomerní směsi pak je v horní části formy nízká, takže vyvíjené teplo je opět velké. Je tedy mimořádně obtížné připravit objemné porézní polymery s dobře definovanou distribucí velikosti pórů.
Cílem předloženého vynálezu je vytvořit ve velkém měřítku tuhá porézní polymerní média s dobře definovanými stejnoměrnými charakteristikami pórů.
Dalším cílem předloženého vynálezu je vytvořit ve velkém měřítku tuhá porézní polymerní média vykazující
-5*··· ·· ’· · * · • · · · · « · · · φ«· «· nízkou tlakovou ztrátu i při velkém průtoku.
Dalším cílem předloženého vynálezu je vytvořit ve velkém měřítku tuhá porézní polymerní média z velkého množství různých monomerů.
Dalším cílem předloženého vynálezu je vytvořit ve velkém měřítku tuhá porézní polymerní média snadným a levným způsobem.
Tyto a další cíle předloženého vynálezu jsou zřejmé z následujícího popisu vynálezu a předložených příkladů.
Podstata vynálezu
Pro dosažení výše uvedených a dalších cílů a v souladu s účelem předloženého vynálezu jak je zde ztělesněn a podrobně popsán, je předmětem vynálezu chromatografická jednotka zahrnující trubici z porézního polymeru mající velkou tloušťku a pouzdro pro tuto trubici z porézního polymeru. Výsledná jednotka může být použita jako chromatpgrafická kolona, pro různé biokonverze, adsorpční a diagnostické procesy a jako matrice pro syntézy peptidů nebo oligonukleotidů vzhledem ke své schopnosti propouštět kapaliny. Porozita trubice z porézního polymeru je větší než asi 0,2, s výhodou větší než 0,45. Porozita je definována v termínech znovuzískávání vlhkosti nebo rtuťové porozímetrie.
Materiál obsahuje malé póry, t j. o průměru menším než 200 nm, avšak také velké póry o průměru alespoň asi 700 nm. Trubice z porézního polymeru je s výhodou válec mající vnitřní průměr alespoň 1 mm a vnější průměr alespoň 10 mm.
•6• · · ···· «9 » ι
999 99 • · 9 1
99
Trubice z porézního polymeru může sestávat z jednotného monolitu, tedy jednotná monolitní trubice z porézního polymeru, nebo ze sestavy trubicovitých monolitů těsně zasunutých jeden do druhého, tedy multimonolitní trubice z porézního polymeru. Každý trubicovitý monolit může mít různé sorpční vlastnosti, takže sorpční vlastnosti trubice z porézního polymeru mohou být uzpůsobeny podle konkrétních požadavků. Také jednotná monolitní trubice z porézního polymeru může mít různé sorpční vlastnosti, které jsou výsledkem dvoustupňového postupu výroby zde popsaného. Trubice z porézního polymeru podle vynálezu je umístěna v pouzdru uzpůsobeném rozměrům trubice. Rozdělovač a sběrač v pouzdru je konstruován s ohledem na minimalizaci mrtvého objemu celé jednotky. Pouzdro může být vytvořeno z inertního plastového materiálu, např. z polypropylenu nebo teflonu nebo z inertního kovu, například nerezové oceli.
Trubice z porézního polymeru je vytvořena ze směsi monovínylových a polyvinylových monomerů v přítomnosti pórotvorného prostředku a iniciátoru. Pro získání předem stanovených charakteristik mohou být použity různé směsi pro každý- trubicovitý monolit. Předem stanovenou charakteristikou může být např. nepolární povrch polymerní trubice. Toho může být dosaženo zavedením např. C4 nebo C4alifatických skupin. Může být také požadován polární povrch. V tom případě mohou být přítomny různé skupiny jako hydroxylová skupina nebo aminoskupina. Tloušťka trubicovitého monolitu by měla být nastavena tak, aby nárůst teploty během polymerace (reakční teplo) ve směsi nepřesáhl hodnotu, která ovlivňuje hydrodynamické vlastnosti finálního produktu. Výška trubice z porézního polymeru však není omezena.
• · · fc · ♦ · « · · · fcfc fcfc • « · · · • · * · * · · · · · · » · “ { ' ···· ·· ··* «*
V případě vytváření multimonolitní trubice z porézního polymeru se každý trubicovitý monolit polymeruje zvlášť tak, že vnější průměr vnitřního trubicovitého monolitu těsně zapadá do vnitřního průměru vnějšího trubicovitého monolitu. Tloušťky trubicovitých monolitů mohou být různé, avšak nepřevyšující kritickou hodnotu ovlivňující strukturu pórů. V případě jednotné monolitní trubice z porézního polymeru se s výhodou nejprve polymerují trubicovité monolity mající tloušťku stěny menší než kritickou. Vnější průměr vnitřního trubicovitého monolitu je poněkud menší než vnitřní průměr vnějšího trubicovitého monolitu. Trubicovité monolity jsou válcovité a jsou umístěny jeden ve druhém, přičemž prázdné prostory mezi nimi jsou vyplněny monomerní směsí. Monolity mohou být navzájem spojeny polymerací přičemž vytvoří jednotný monolit. Po vytvoření polymerní trubice jedním nebo druhým způsobem se vodou nebo vhodnou kapalinou vymyjí pórotvorné prostředky.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1: schematické znázornění sestavy D, trubice z porézního polymeru A, B a součásti C, obr. 2 technické znázornění pouzdra, obr. 3 znázornění chromatografické jednotky, obr. 4 druhá koncovka, obr. 5 pouzdro podle vynálezu, obr. 6 součást D, trubice z porézního polymeru, podle vynálezu,
-8«·« · • « «· ’· » · · * * • » · Β · ·· ·* obr. 7 první koncovka podle vynálezu, obr. 8 sběrací prvek podle vynálezu pro redukci mrtvého objemu, obr. 9 porovnání distribuce velikosti pórů pro vnitřní a vnější monolitní nebo dvoumonolitní trubici, obr. 10 vztah mezi tlakovou ztrátou a průtokem, obr. 11 separace a čištění na muitimonolitní trubici obsahující DEAE a afinitní aktivní skupiny, obr. 12 zlomová křivka měření kapacity na SOml muitimonolitní trubici.
Podrobný popis výhodných vytvoření
Podle vynálezu je uspořádána porézní samonosná struktupa zahrnující alespoň dvě porézní součásti A a B, přičemž porézní součást B obklopuje součást A, přičemž povrchy pórů těchto alespoň dvou porézních součásti A a B jsou opatřeny chemickými skupinami pro interakci s látkami procházejícími póry, a přičemž póry porézních součástí mají multimodální distribuci velikosti pórů po celé polymerní struktuře.
Podle vynálezu představuje multimodální distribuce velikosti pórů (obr. 9) alespoň tři maxima objemu pórů v měřeném rozsahu od 5 nm do 10 jim, které jsou odděleny oblastmi kde je objem pórů malý nebo póry chybí úplně. To
-9« «
• « · nabízí následující výhody póry s průměrem větším než 700 nm vykazují malou tlakovou ztrátu při zvýšeném prosazení velký počet pórů s průměrem menším než 700 nm poskytuje velkou plochu nezbytnou pro vysokou absorpční kapacitu.
Porézní samonosná struktura podle vynálezu zahrnuje polymer vyrobítelný polymerací monomerů majících alespoň dvě polymerovatelné skupiny nebo dvou typů monomerů, prvního polymeru majícího jednu polymerovatelnou skupinu a druhého monomeru typu schopného zesíťovat polymerní řetězec získaný polymerací prvního monomeru.
Podle výhodného provedení porézní samonosné struktury podle vynálezu jsou povrchy pórů modifikovány funkčními skupinami, jako jsou například iontoměničové skupiny, hydrofóbní skupiny, reaktivní skupiny pro kovalentní vázání ligandů, například ligandů majících afinitu, s výhodou proteinů, enzymů, imunoglobulinu, antigenů, lectinů, cukrů, nukleových kyselin, buněčných organel, barviv atd.
Porézní samonosná struktura podle vynálezu je s výhodou vybudována z polyvinylových a monovinylových monomerů.
Skupina polyvinylových monomerů zahrnuje zejména Jivinylbenzen, divinylnaftalen, divinylpyridin, alkylendimetylakryláty, hydroxyalkylendimetylakryláty, hydroxyalkylendiakryláty, oligoetylenglykoldiakryláty, vinylpolykarboxylové kyseliny, divinyleter, pentaerythritol, di-, tri- nebo tetra-metakryláty nebo -akryláty, trimetylolpropantrimetylakrylát nebo -akrylát, alkylen-bís-10··«* ♦· • · · • · * · • · · ·· > v » • · · v · * • · · ·· ·· akrylamidy nebo -metakrylamidy a jejich směsi.
Skupina monovinylových monomerů podle vynálezu zahrnuje styren, substituované styreny, kde substituenty zahrnuji chlormetyl, alkyl s až 18 atomy uhlíku, hydroxyl, tbutyloxykarbonyl, halogen, nitroskupinu, bráněnou hydroxylovou skupinu nebo vinylnaftalen, akryláty, metylakryláty, pyrolidon a jejich směsi.
aminoskupinu, aminoskupinu, vinylacetát a
Polyvinylový monomer monovinylový monomer se struktury používají v množs nebo polyvinylový monomer plus pro výrobu porézní samonosné tví 20 až 60 %,
První součást B porézní samonosné struktury podle vynálezu zahrnuje trubicovitou strukturu mající vnitřní otvor 10, s vnitřním průměrem 12 a vnějším průměrem 11, otvor 10 je schopný přijmout druhou součást A mající vnitřní průměr 20, s vnějším průměrem 21 a vnitřním průměrem 22, přičemž vnější průměr 21 součásti A odpovídá vnitřnímu průměru 12 součásti B, a součást A je vložena v součásti B.
Součást A a součást B může být ze stejného nebo různého materiálu např. součást A má aniontovýměnné vlastnosti a součást B má vlastnosti reverzní fáze.
S výhodou slouží podle vynálezu vnitřní otvor 20 součásti A slouží jako kolektor vzorku.
Předložený vynález se týká také výrobku zahrnujícího porézní samonosnou strukturu a prostředky pro provádění chromatografického procesu. Výrobek podle vynálezu je s výhodou chromatografciká jednotka 30, kolona nebo patrona
I
- II .. . . . · · · • · · · · · · • · ··· ·· · • » · · · · ·· ·· ·· ·· nebo reaktor pro biokonverzi nebo matrice pro syntézu peptidů nebo oligonukleotidů.
Výhodné provedení vynálezu zahrnuje pouzdro 36, které je opatřeno rozdělovačem 23 vzorku, a ve kterém je uspořádána součást D, přičemž pouzdro 36 má alespoň jeden vstup a alespoň jeden výstup 40, vnitřní povrch 42 a vnější povrch 43 a kanálkovou strukturu či kanálkové struktury 72 na střední části vnitřního povrchu 42 tvořící rozdělovač 23 vzorku, zatímco zbytek vnitřního povrchu 42 je hladký.
Zvláště výhodně je kanálková struktura 72 vytvořena jako spirálová nebo závitová drážka 25 začínající v oblasti a nacházející se v přímém kontaktu se vstupem 41 chromatografické jednotky 30 a končící po alespoň jedné úplné otáčce avšak ne v přímém kontaktu s koncem £0 chromatograf ické jednotky 30. Výrobek podle vynálezu je zvláště chromatografická jednotka 30 dále zahrnující druhou koncovku 38 a první koncovku 32, opatřená O-kroužky 33, 34, 35, 37 a upínacími matkami 31, 39.
Podle výhodného vytvoření chromatografické jednotky 30 podle vynálezu má první koncovka 32 vrchní část 62, zadní část 63 a pouzdro, první koncovka 32 je v podstatě válcového tvaru a má límec 61 rozdělující válcovitou koncovku 32 na dvě části 62, 63, přičemž část koncovky 32 bližší límci 61 je zadní část 62 zahrnující spojku 60 s centrálním otvorem 64 protaženým skrze celou první koncovku 32 a O-kroužek 35 umístěný v prstencové drážce v pouzdru v oblasti vrchní části 63 první koncovky 32 a O-kroužky v kruhových drážkách ve vrchní části 63 první koncovky 32,
Podle výhodného provedení chromatografické jednotky 30
- 129 9 9 9 *9
52, zadní válcového
9 · • 9 · ·
9 · 9 9 · • 999 ·9 999 99 podle vynálezu má druhá koncovka 38 vrchní část část 53 a pouzdro, druhá koncovka 38 je v podstatě tvaru, druhá koncovka 38 zahrnuje límec 51 rozdělující válcovitou koncovku 38 na dvě části, přičemž část koncovky 38 bližší límci 51 je vrchní část 52 zahrnující spojku 50 ve spojení se slepým koncem centrálního otvoru 54, na který navazuje otvor 55, kolmý ke slepému konci centrálního otvoru 54, přičemž otvor 55 začíná v prstencovité drážce 56 na povrchu pouzdra druhé koncovky 38 a vede do slepého konce centrálního otvoru 54.
Pouzdro 36 pro použiti ve výrobku podle nároku 13 je opatřeno rozdělovačem 23 vzorku, přičemž kanálková struktura 72 je tvořena spirálovou nebo závitovou drážkou 25.
Jak již bylo vysvětleno, součást A je vložena do součásti B. V případě, že součást A má ještě relativné velký vnitřní otvor 20, měla by celá chromatografická jednotka poměrně velký mrtvý objem. Pro zmenšení nebo odstranění tohoto nedostatku je možné vložit do součásti A sběrací prvek 80. Sběrací prvek souhlasí s vnitřním otvorem součásti A, přičemž buď těsně zapadá do vnitřního otvoru nebo ponechává mezeru. Když je mezi sběracím prvkem 80 a vnitřním otvorem 20 součásti A vytvořena mezera, může tato mezera fungovat jako sběrač vzorku a zároveň umožňovat, aby byl mrtvý objem velmi malý. V případě, že sběrací prvek těsně zapadá do součásti A, musí být samozřejmě uspořádány prostředky pro odvádění kapaliny protékající skrze porézní součásti A a B. To může být realizováno opatřením vnějšího povrchu sběracího prvku 20 kanálky nebo kanálkovými strukturami. Kanálky nebo kanálkové struktury 82 jsou tvořeny spirálovou nebo závitovou drážkou 81. Sběrací prvek mající horní část 84 a spodní část 85 je opatřen na své
-13**·· *· «« V · • · * • · · fc · · ·«· ·· • · · · • · fc · • · · · • fc fc· horní části 84 nestrukturovaným povrchem, s výhodou hladkým povrchem. Spodní část 85 však má kanálek 83, který se rozprostírá směrem dovnitř od vnější strany s výhodou do středu. Kanálková struktura 82 je protažena do kanálku 83 ve spodní části 85 sběracího prvku 80. Kanálek 83 s výhodou komunikuje s otvorem 64 první koncovky 32. Horní část 84 je ve styku se zadní částí 53 druhé koncovky 38.
Chromatografické jednotka 30 zde popisovaná zahrnuje všechny součásti podle obr. 2, volitelně prvek 80 z obr. 8 a trubicí D z porézního polymeru podle obr. 1 až 6. Pouzdro je s výhodou vytvořeno z inertního plastového materiálu, např. polypropylenu nebo teflonu, nebo z inertního kovu, například nerezové oceli. Nemusí být všechny součásti vytvořeny z téhož materiálu.
Obr. J znázorňuje sestavu D trubice z porézního polymeru sestávající ze tří různých součástí, součásti A, součásti B a součásti C. Tyto tři součásti mohou být vloženy jedna do druhé pro vytvoření multimonolitní trubice z porézního polymeru, přičemž součást C tvoří nej vnitřnější část, součást A tvoří střední část a součást B tvoří vnější část soustředné sestavy D. Součást B má vnitřní otvor í 0, jehož průměr 12 je dost velký aby odpovídal vnějšímu průměru 21 součásti A. Pro zasunutí součásti C do součásti A musí samozřejmě průměr součásti C odpovídat vnitřnímu průměru 22 saoučásti A. Součást C má středový otvor táhnoucí se skrze celou délku součásti C. Středový otvor funguje v sestavě D podle obr. 1 jako sběrač vzorku. Jestliže středový otvor má větší průměr, může být do něho zasunut prvek 80 znázorněný na obr. 8 pro minimalizaci mrtvého objemu sběrače jakož i pro poskytnutí dodatečné mechanické stability.
-14_ , v v • » ······· ·*·· *·· ···· ···· ·· ·· ·· ·· ··
Obr. 2 znázorňuje rozložené znázornění chromatografické jednotky 30 z obr. 3. Chromatografická jednotka sestává z upínacích matek 31 resp 39 majících příslušné otvory 4 0 resp. £2* Upínací matky jsou našroubovány na pouzdro 36 pro držení součástí 32, 33, 34, 35, multimonolitní nebo jednotné monolitní trubice z porézního polymeru, například sestavy D, v pouzdru 36, jakož i součástí 37 a 38. První koncovka 32 a druhá koncovka 38 jsou umístěny na opačných koncích. Druhá koncovka je zasunuta do pouzdra 36 a utěsněna O-kroužkem 37 ve střední části koncovky 38. O-kroužek 37 zapadá do drážky ve střední části pouzdra koncovky 38. První koncovka 32 je vložena do pouzdra 36 a utěsněna 0-kroužky 33, 34 a 35.
Obr. 4 představuje druhou koncovku 38 mající vrchní část 52 a zadní část 53 a pouzdro. Koncovka 38 je válcového tvaru a má límec 51, který rozděluje válcovitou koncovku 38 nesymetricky do dvou částí. Delší část je zasunuta do pouzdra 36, přičemž límec 51 zabraňuje úplnému zasunutí koncovky do pouzdra 36. Šířka límce 51 odpovídá vnějšímu průměru pouzdra 36, takže upínací matka 39 může být našroubována přes límec 51 a pouzdro 36 pro upevnění koncov-ky 38. Koncovka 38 má středový otvor, který má slepý konec na spodní části koncovky 38 v oblasti zadní části 53. Na středový otvor 54 navazuje otvor 55, který je kolmý ke středovému otvoru 54. Tok vstupující do chromatograf ické jednotky ve spojce 50 protéká středovým otvorem a vystupuje na konci kolmého otvoru 55. Kolmý otvor 55 je propojen s drážkou 56, která má kruhový tvar.
Obr. 5 představuje situaci pouzdra. Součást D podle obr. 1 a 6 je umístěna v pouzdru 36 tak, že spodní část dosahuje konce rozdělovače 23, avšak rozdělovač 23 je protažen přes horní část součásti D. Poloha součásti D ·· · · • * + * ·· ·>····♦· • « * ··· ···· ··· ·· ··« ·· ·· ·· čerchovanými čarami dl a d2. pouzdra 36 vykazuje drážky uvnitř pouzdra 36 je naznačena Střední část vnitřní stěny 42 spirálového nebo závitového uspořádání, tvořící rozdělovač 23 vzorku. Koncovka 38 je vložena tak, že se dotýká součástí D a je propojena se spirálovými nebo závitovými drážkami 25 tak, že kapalina vstupující do pouzdra skrze otvor 55 a prstencovou drážku 56 je vedena spirálovou nebo závitovou drážkou 25 na vnitřním povrchu pouzdra 36 k vnější straně součásti D. O-kroužek 37 koncovky 38 leží nad drážkou 25 rozdělovače 23 a utěsňuje vnitřní povrch 42. Spirálová nebo závitová drážka 25 však není propojena se středovým otvorem koncovky 32 znázorněné na obr. 7. Kapalina tedy musí procházet sestavou D, tvořící trubici z porézního polymeru. Ve středovém otvoru trubice z porézního polymeru fungujícím jako sběrač a volitelně obsahujícím prvek 80 znázorněný na obr. 8 je kapalina shromažďována a vedena do středového otvoru 64 koncovky 32.
Obr. 6 znázorňuje schematicky součást D, tvořenou trubicí z porézního polymeru, která je umístěna v obr. 5.
Obr. 7 představuje první koncovku 32, která má analogický tvar jako první koncovka pokud jde o límec 61, připojení 60 pouzdra a vrchní část 62 a zadní část 63. Středový otvor 64 je však protažen středem koncovky, v celé její délce. V zadní části koncovky 32 utěsňují koncovku a pouzdro 36 O-kroužky 35, 34 a 22· Kapalina přicházející ze středového otvoru trubice z porézního polymeru je vedena středovým otvorem 64 a může být shromažďována.
Obr. 8 představuje sběrný prvek 80 mající na svém vnějším povrchu kanálky nebo kanálkovou strukturu 82 tvořící spirálový nebo závitový drážkový sběrač 81. Horní část 84 je
- 16·* » · • · · • » · • ft · *·* ·· • · ♦ · · • · · • · · ·· hladká, zatímco spodní část 85 zahrnuje kanálek 83 rozprostírající se od vnější strany do středu. Kanálková struktura 82 je protažena do kanálku 83 na spodní části 85 sběracího prvku 80. Kanálek 83 je propojen s otvorem 64 první koncovky 32. Horní část 84 je ve styku se zadní částí 53 druhé koncovky 38.
Trubice z porézního polymeru je vytvořena ze směsi monovinylového monomeru (monomerů) a polyvinylového monomeru (monomerů) v přítomnosti pórotvorného prostředku a volitelně iniciátoru. Polymer obsahuje malé póry, tj. o průměru menším než 200 nm, avšak také velké póry o průměru alespoň asi 700 nm. Porozita polymeru je větší než asi 0,2, s výhodou větší než 0,45. Pro získání požadovaných vlastností trubicovitého monolitu mohou být použity různé směsi. Tloušťka stěny trubicovitého monolitu je s výhodou stanovena tak, že nárůst teploty ve směsi nepřevyšuje hodnotu, která negativně ovlivňuje hydrodynamické vlastnosti polymeru. Typická tloušťka trubicového monolitu získaného v jednostupňové polymeraci je v rozmezí od několika milimetrů do několika centimetrů.
Přijatelné rozmezí teplot polymerační reakce se stanoví provedením polymerace stejné monomerní směsi ve formě tvaru tenké desky. Tloušťka formy je s výhodou taková, že měřením teploty ve středu monomerní vrstvy během polymerace je zjištěn jen malý nebo žádný nárůst teploty. Každá polymerace se s výhodou provádí při v podstatě konstantní polymerační teplotě, vyšší než je nejnižší teplota zjištěná jako optimální vzhledem k sorpčním vlastnostem vztaženým k optimálním hydrodynamickým charakteristikám konkrétního polymeru. Hydrodynamické charakteristiky polymeru se stanoví měřením distribuce velikosti pórů pomocí rtuťové
- 17• » • * • · · ·»·» ·· • · · • » · · • » · ·«· · v « V • · · • · · • · · ♦ · ·· porozimetrie, porozita opět pomocí rtuťové porozimetrie nebo znovuzískávání vody a měřením zpětného tlaku v závislosti na průtoku. Nejvyšší teplota, při které zůstávají vlastnosti nezměněny, se považuje za horní mez přípustné teploty.
Horní hodnota tloušťky trubicového monolitu může být stanovena tak, že se zhotoví trubicovité formy různých tloušťek a naplní se monomerní směsí. Během polymerace se zaznamenává teplota ve středu vrstvy monomerní směsi. Teplota během polymerace by neměla převýšit hodnotu horní meze, pro získání monolitu vhodného pro dobré provádění chromatografie.
Kromě výše uvedených skutečností je možný jiný přístup pro určení tloušťky trubicovitého monolitu. V tomto případě se forma tvaru tlusté trubice naplní monomerní směsí a zaznamenává se teplota v různých vzdálenostech od stěny formy. Tímto způsobem se získá dynamický teplotní profil Odvozením rovnic pro konkrétní tepelných bilancích může být vypočteno množství vyvíjeného tepla a koeficienty tepelné vodivosti- Na základě těchto dat může být vypočten nárůst teploty uvnitř trubicovité formy definované tloušťky. Dále může být na základě horní meze přípustné teploty vypočtena maximální tloušťka formy.
uvnitř polymerační směsi geometrii založených na
Jakmile je jedním nebo druhým způsobem stanovena tloušťka formy pro konkrétní monomerní směs, je možné zhotovit trubicovité formy různého vnitřního a vnějšího průměru, avšak s definovanými rozdíly mezi nimi.
Pro zhotovení multimonolitní trubice z porézního polymeru se trubicovité monolity s výhodou zhotoví tak, že
- 18··» ·» »» » » • · · • 9 9
99 vnitřní trubicovitý monolit z porézního polymeru těsně zapadá do vnějšího trubicovitého monolitu z porézního polymeru. Výška všech trubicovitých monolitů není omezena, avšak s výhodou je stejná. Počet trubicovitých monolitů je v zásadě neohraničený může tedy být získána multimonolitní trubice z porézního polymeru jakéhokoliv požadovaného průměru.
Pro zhotovení jednotné trubice z porézního polymeru se trubicovité monolity s výhodou zhotovují tak, že mají všechny stejnou výšku, a vnější průměr vnitřní monolitní trubice z porézního polymeru je menší než vnitřní průměr vnější monolitní trubice z porézního polymeru. Tím způsobem vzniká prázdná mezera mezi monolitními trubicemi z porézního polymeru. Tato mezera může být později vyplněna monomerní směsí a provede se podruhé polymerace, nebo se ponechá neupravena. Tloušťka prázdné mezery je opět omezena horní přípustnou mezí tloušťky stanovenou pro trubicovité monolity. Během polymerace se různé trubicovité mono lity z porézního polymeru navzájem spojují pro vytvoření jednotné trubice z porézního polymeru požadovaného průměru.
Polyvinylové monomery zahrnují divinylbenzen, divinylnaftalen, divinylpyridin, alkylendimetylakryláty, hydroxyalkylendimetylakryláty, hydroxyalkylendiakrylaty, oligoetylenglykoldiakryláty, vinylpolykarboxylové kyseliny, divinyleter, pentaerythritol, di-, tri- nebo tetrametakryláty nebo -akryláty, trimetylolpropantrimetylakrylát nebo -akrylát, alkylen-bis-akrylamidy nebo -metakrylamidy a jejích směsi.
Monovinylové monomery zahrnují styren, substituované styreny, kde substituenty zahrnují chlormetyl, alkyl s až 18
- 19v - w- Ψ » · « V * ·* · · · · · · · « · · ·♦··♦·· · «9« · · ♦ · · · ♦ «··· ·· ·«· ·· ·· ·· atomy uhlíku, hydroxyl, t-butyloxykarbonyl, halogen, nitroskupinu, aminoskupinu, bráněnou hydroxylovou skupinu nebo aminoskupinu, vinylnaftalen, akryláty, metylakryláty, vinylacetát a pyrolidon a jejich směsi. Polyvinylový monomer nebo polyvinylový monomer plus monovinylový monomer se pro výrobu porézní samonosné struktury zpravidla používají v množství 20 až 60 %.
Pórotvorné prostředky mohou být zvoleny z různých typů materiálů, například alifatických uhlovodíků, aromatických uhlovodíků, esterů, alkoholů, ketonů, eterů, roztoků rozpustných polymerů a jejich směsí.
K monomerům mohou být přidány také rozpustné polymery. Ty se z polymeru po jeho vytvoření rozpouštějí a slouží pro zvýšení porozity. Jestliže jsou přítomny, je jejich množství s výhodou 10 až 40 %.
Pro iniciaci polymerace mohou být použity konvenční iniciátory vytvářející volné radikály, jako například azosloučeniny, např, azobisizobutyronitril a 2,2'azobis-(ízobutyramid) dihydrát, nebo peroxidy, např. benzoylperoxid a dipropylperoxydikarbonát. Různé iniciátory mohou být použity pro získání různých struktur pórů vzhledem k rychlosti degradace iniciátorů. Množství iniciátoru je zpravidla v rozmezí od asi 0,5 do 4 % hmotnosti monomeru.
Než se polymerační směs umístí do formy, s výhodou se odvzdušní pomocí inertního plynu jako například dusíku nebo argonu pro odstranění nebo přemístění co největšího množství kyslíku. Jakmile je zhotovena forma, s výhodou se utěsní pro zabránění kontaminace vzduchem.
• · • * • φ φ · φ ······ • ·· · * · · · · · -20* ······ ··· ·* ·* ··
Polymerace se provádí např. konvenčním způsobem odborníkovi známým, zpravidla při teplotě od asi 50 do 90 °C po dobu 48 hodin. Teplota se s výhodou přesně reguluje pro získání definované distribuce velikosti pórů řízeným a reprodukovatelným způsobem v celém polymeru.
Po vytvoření se trubice z porézního polymeru promyje pro odstranění pórotvorného rozpouštědla jakož i pro rozpuštění rozpustného polymeru, jestliže je přítomen. Druh rozpouštědla není podstatný. Mohou být použita různá rozpouštědla, jako například metanol, etanol, benzen, toluen, aceton nebo tetrahydrofuran. Pro úplné odstranění pórotvorných prostředků a rozpuštěných polymerů je třeba promývání několikrát opakovat.
Jestliže má být trubice z polymeru modifikována určitými funkčními skupinami, může být polymer upraven určitými chemickými sloučeninami. V případě glycidyl metakrylátu (jako jednoho monomeru pro výrobu polymeru), který obsahuje epoxyskupinu, polymer může dále reagovat se směsí olea a 1,4-dioxanu pro zavedení sulfonových skupin (SP),' s kyselinou chloroctovou pro zavedení carboxymetylových skupin (CM), nebo s různými aminy, například dietylaminem pro zavedení N,N-dietylamino-2hydroxypropyl skupin (DEAHP), s trietylaminhydrochlorióem pro kvartérní trietylaminoskupiny (Q) nebo s etylendiaminem pro zavedení aminoskupin (EDA). Hydrofóbní skupiny mohou být zavedeny za použití alkoholátů jako například etanolátu, butanolátu nebo oktanolátu sodného. Polymery mohou reagovat také s látkami majícími afinitu pro specifické spojení. Látkami majícími afinitu mohou být, aniž by se na ně omezovaly, proteiny, enzymy, antigeny, lectiny, cukry, barviva, nukleové kyseliny, nebo buněčné organely. Polymery • · · * ·
-21 » · 4 ···· ·· založené na jiných monomerech také mohou být upraveny analogickými způsoby, které jsou odborníkovi známy.
Pro zhotovení multimonolitní trubice z porézního polymeru se trubícovité monolity promývají pro odstranění pórotvorného rozpouštědla jakož i pro rozpuštění veškerých přítomných rozpustných polymerů. Jestliže není požadována další modifikace trubicovitých monolitů, nebo všechny trubicovité monolity mají nést stejné funkční skupiny, trubícovité monolity se do sebe zasunou pro vytvoření multimonolitní trubice z porézního polymeru. Za použití výše uvedených reakčních činidel mohou být zavedeny dodatečné funkční skupiny. Nakonec se multimonolitní trubice z porézního polymeru umísti v pouzdru. Jestliže každý z alespoň dvou trubicovitých monolitů má nést různé funkční skupiny, provádí se modifikace každého trubicovitého monolitu zvlášť, a teprve poté se do sebe navzájem 2asunou pro vytvoření multimonolitní trubice z porézního polymeru. Jiný přístup spočívá v tom, že se nejprve modifikuje vnější trubicovitý monolit. Po dokončení modifikační reakce se vymyje nezreagované reakční činidlo a zasune se menší trubicovitý monolit. Sestava se může umístit do dalšího jiného reakčního činidla. Protože reaktivní skupiny většího trubicovitého monolitu jsou již transformovány, proběhne reakce jen v menším trubicovitém monolitu. Tento postup může být opakován několikrát, v závislosti na počtu trubicovitých monolitů.
Pro zhotovení jednotné monolitní trubice z porézního polymeru, když trubicovité monolity nemají být dále modifikovány, ani nemají být zavedeny stejné funkční skupiny do všech trubicovitých monolitů, zasunují se soustředně ve formě jeden do druhého. Předem odvzdušněná monomerní směs se • · « · *
-22• · » ««·· ♦♦ • · · · »« ♦ · přidává pro vyplnění všech mezer mezi trubicovitými monolity s výjimkou středového otvoru. Forma se utěsní a polymerace se provádí při stejné teplotě jako při zhotovení trubicovitých monomerů. Po dokončení polymerace se jednotná monolitní trubice z porézního polymeru promyje pro odstranění veškerého pórotvorného rozpouštědla jakož i pro rozpuštění veškerých přítomných rozpustných polymerů. Je-li třeba, do polymeru mohou být zavedeny funkční skupiny za použití reakčních činidel popsaných výše. Nakonec se trubice umístí do pouzdra a jednotka je připravena k použití.
Když má být zhotovena jednotná monolitní trubice z porézního polymeru s různými funkčními skupinami, jsou možné následující způsoby zhotoveni. Jestliže požadované funkční skupiny jsou částí monomerů a odlišné od těch, z nichž jsou zhotoveny trubicovité monolity, použije se obdobný postup jako v případě zhotovení jednotné monolitní trubice z porézního polymeru bez další modifikace. Polymerační teplota se však může lišit od teploty použité při zhotovení trubicovítého monolitu. Jiného přístupu se použije, jestliže funkční skupiny mají být zavedeny do polymerního trubicovitého monolitu. Trubicovité monolity je třeba nejprve promýt pro odstranění veškerého pórotvorného rozpouštědla jakož i pro rozpuštění veškerých přítomných polymerů. Do každého trubicovitého monolitu nebo jejích sady se zavádějí požadované funkční skupiny jak je popsáno výše. Trubicovité monolity se vysuší a ponoří do pórotvorné směsi nebo inertní látky, která zaplňuje póry a může být později snadno odstraněna. Tím způsobem se póry zaplní a veškerá další polymerace uvnitř nich se zpomalí nebo dokonce zcela inhibuje. Trubicovité monolity zhotovené tímto způsobem se vloží do formy a zpracují podle postupu popsaného pro zhotovení jednotné monolitní trubice z porézního polymeru se
-23«·« «· ·· ·* stejnoměrnými sorpČními charakteristikami. Nakonec se trubice promyje, umísti se v pouzdru a jednotka je připravena k použití.
Příklady provedení vynálezu
Předložený vynález bude dále vysvětlen prostřednictvím neomezujících příkladů.
Příklad 1: zhotovení chromatografické jednotky zahrnující muitimonolitní trubici z porézního polymeru
Byly zhotoveny dvě formy z nerezové oceli. První forma sestává ze dvou trubek z nerezové oceli, vnější o vnitřním průměru 35 mm a vnitřní o vnějším průměru 17,6 mm. Trubky z nerezové oceli mají tloušťku stěny 1,5 mm, přičemž mají velmi vysoký koeficient tepelné vodivosti. Menší trubice byla vložena do středu větší z nich. Nerezová trubka s menším průměrem je delší než nerezová trubka s větším průměrem pro umožnění protékání termostatované kapaliny za účelem odvádění vyvíjeného tepla. Jedna matka těsni oblast mezi vnitřní a vnější trubkou pro vytvoření prostoru válcovitého tvaru, ve kterém je umístěna monomerní směs. Druhá matka těsní tutéž oblast na horní straně. Tato matka má septum, skrze něž se monomerní směs vstřikuje do formy a malý otvor pro odchod vzduchu při zavádění monomerní směsi. Po dokončení plnění se otvor utěsní pro zabránění vstupu vzduchu. Druhá forma je konstruována obdobně, s vnitřním průměrem vnější trubky 17,5 mm a s vnějším průměrem vnitřní trubky 1,2 mm. Monomerní směs byla připravena smísením glycidylmetakrylátu, etylendímetakrylátu, cyklohexanolu, dodekanolu a benzoylperoxidu. Směs byla probublávána dusíkem po dobu 20 minut pro odstranění veškerého přítomného • 9
-24·9·9 99 kyslíku. Směs byla vstřikována do formy až do úplného naplnění a polymerace byla zahájena umístěním obou forem do termostatované vodní lázně. Po 16 hodinách byly formy vyjmuty z lázně, ochlazeny na pokojovou teplotu a matky byly odstraněny. Trubicovité monolity byly vyjmuty z forem a vloženy do čistého metanolu. Metanol byl několikrát vyměněn pro odstraněni pórotvorných prostředků. Malý trubicovitý monolit byl pak vložen do otvoru většího a spolu byly umístěny do vhodného pouzdra.
Příklad 2
Multimonolitní porézní trubice ze dvou trubicovitých monolitů byla zhotovena podle přikladu 1. Pro každý trubicovitý monolit byla měřena distribuce velikosti pórů za použití rtuťové porozimetrie. Obě měřeni poskytovala velmi podobnou multimodální distribuci velikosti pórů znázorněnou na obr. 9.
Příklad 3
Chromatografické zařízení bylo zhotoveno podle příkladu 1. Zařízení bylo připojeno k HPLC (vysokotlaká kapalinová chromatografie) preparativnímu systému a testováno při různých průtocích až do 450 ml/min. Zařízení vykazuje nízkou tlakovou ztrátu i při zvýšených průtocích. Vztah mezi tlakovou ztrátou a průtokem byl zjištěn lineární (obr. 10).
Příklad 4: zhotovení multimonolitní trubice pro separaci s reverzní fází
Byly použity formy popsané v příkladu 1. Monomerní směs byla připravena smícháním glycidylmetakrylátu, · »
-25stearylmetakrylátu, etylendimetakrylátu, cyklohexanolu, dodekanolu a benzoylperoxídu. Směs byla po dobu 20 minut probublávána dusíkem pro odstranění veškerého přítomného kyslíku. Směs byla vstřikována do formy až do úplného naplnění, a polymerace byla zahájen umístěním forem do termostatované vodní lázně. Po 16 hodinách byly formy vytaženy z lázně, ochlazeny na pokojovou teplotu a byly odstraněny matky. Polymerní válce byly vytaženy z forem a vloženy do čistého metanolu. Metanol byl několikrát vyměněn pro odstranění pórotvorných prostředků. Malý trubicovitý monolit byl pak vložen do otvoru většího a spolu byly umístěny do vhodného pouzdra. Multimonolitní trubice z porézního polymeru vykazuje silně hydrofobní charakter.
Příklad 5: Zhotovení chromatografické jednotky zahrnující jednotnou monolitní trubici z porézního polymeru
Dvě formy z nerezové oceli obdobné těm z příkladu 1 avšak s jinými rozměry prázdných průměrů byly použity pro polymeraci dvou trubicovitých monolitů. Vnitřní průměr většího trubicovitého monolitu byl o 2 mm větší než vnější průměr -menšího. Menší monolit by vyjmut z formy. Větší trubicovitý monolit byl ponechán ve formě, z níž byla vytažena vnitřní nerezová trubka. Forma byla z jedné strany utěsněna matkou. Menší trubicovitý monolit byl vložen do dutiny velkého monolitu ponechaného ve formě. Forma byla utěsněna také na druhé straně se šeptem, skrze něž byla přidávána odvzdušněná monomerní směs z příkladu 1 pro naplnění prázdné mezery mezi oběma monolitními válci. Forma byla umístěna v termostatované lázni po dobu 20 hodin. Po dokončení polymerace byla vyjmuta jednotná monolitní trubice z porézního polymeru. Pro získání jednotné monolitní trubice z porézního polymeru byla zpolymerována monomerní směs
-26• · · !
* * · Ϊ • * * · ·· ·· • · · · · ···· ·· ··· ·· vložená mezi oběma trubicovými monolity.
Příklad 6: separace na chromatogafické jednotce zahrnující multimonolitní trubici z porézního polymeru
Multimonolitní trubice z porézního polymeru byla připravena podle příkladu 1. Pouzdro obsahující multimonolitní trubici z porézního polymeru bylo naplněno čistým dietylaminem a ponecháno reagovat po dobu 24 hodin při teplotě 30 °C. Po dokončení reakce byl odstraněn přebytek dietylaminu čerpáním vody skrze multimonolitní trubici z porézního polymeru při průtoku 5 ml/min. Trubice byla finálně promyta 20 mM pufru Tris-HCl, pH = 7,4.
Roztok myoglobinu (5 mg/ml), conalbuminu (10 mg/ml) a inhibitoru Trypsinu (20 mg/ml) ve 20mM pufru Tris-HCl, pH=4,7, bylo vstřikováno skrze smyčku o objemu 500 μΐ.
Nosný pufr byl 20 mM Tris-HCl, pH=7,4 a eluční pufr byl 20 mM Tris-HCl + 1M NaCl, pH=7,4. Byl použit následující separační postup: 45 sekund se 100% pufrem A, gradient od 100% do 20% pufru A během 3 minut. Průtok byl 42 ml/min. Separace byla sledována UV spektrofotometrem při 280 nm a příslušný chromatogram je znázorněn na obr 11. Kromě toho byla měřena kapacita vázání proteinu. Roztok albuminu z lidského séra (11 mg/ml) byl rozpuštěn ve 20 mM pufru Tris-HCl, pH=7,4 a čerpán skrze multimonolitní trubici z porézního polymeru při průtoku 10 ml/min. Kapacita stanovená ze zlomového průběhu křivky znázorněné na obr. 12 byla kolem 1 g proteinu.
-27 • fc • fc fc· • fc · fc · · · ··· fc· fc· ··
Příklad 7: zhotovení chromatografické jednotky zahrnující multimonolitní trubici z porézního polymeru obsahující různé funkční skupiny
Dva trubicovité monolity byly zhotoveny za použití forem a postupu popsaného v příkladu 1. Oba byly vloženy do čistého metanolu. Metanol byl několikrát vyměněn pro odstranění pórotvorných prostředků. Nakonec byly trubice umístěny ve směsi metanolu a vody 50:50 a v destilované vodě. Po dokončení kroku promývání byl větší trubicovítý monolit vložen do čistého dietylaminu při teplotě 30 °C. Po 24 hodinách byly trubice vyjmuty a vloženy do defilované vody. Voda byla několikrát vyměněna pro odstranění dietylaminu z pórů.
Menší trubicovitý monolit byl umístěn v roztoku imunoglobulínu (2 mg/ml IgG v 0,5 fosforečnnového pufru, pH 8,0) při pokojové teplotě. Po 24 hodinách byla trubice vložena do destilované vody, která byla několikrát vyměněna pro odstranění zbývajících proteinů. Menší trubicovitý monolit byl vložen do otvoru většího monolitu pro vytvoření multimonolitní porézní polymerní trubice, která byla vložena do pouzdra.
Vzorek myoglobinu (5 mg/ml), conalbumin (10 mg/ml), inhibitor tripsinu (20 mg/ml) a protein A (10 mg/ml·) ve 20 mMpufru Tris-Hcl, pH=7,4, byl vstřikován skrze vzorkovací smyčku 500 pm.
Nosný pufr byl 20 mM Tris-HCl, pH=7,4, eluční pufr ze skupin DEAE byl 20 mM pufr Tris-HCl + 1M NaCl, pH=7,4, a eluční pufr z afinitních skupin byl Q,5M kyselina octová, pH=2,5.
* v · v · » * « · ·♦· >·· • · · »«·♦···
oc · * · · · · -2o- *· *· «· ·· • · » · ·· ··
Všechny proteiny se absorbují na vnější části
multimonolitní trubice z porézního polymeru na DEAE
skupinách v iontomeničovém modu. Po aplikaci gradientu soli popsaném v příkladu 6 se všechny proteiny selektivně eluují. Protože IgGs váže selektivně pouze protein A, ostatní proteiny jsou z multimonolitní trubice z porézního polymeru eluovány. Protein A se však váže na vnitřní část multimonolitní trubice z porézního polymeru a nemůže být eluována gradientem soli, protože vazba je založena na afinítní interakci. Protein A se uvolňuje se změnou pH. Za použití multimonolitní polymerní trubice obsahující různé aktivní skupiny se může provádět separace a čištěni v jediném kroku.

Claims (18)

1. Porézní samonosná struktura zahrnující alespoň dvě porézní součásti (A) a (B), přičemž porézní součást (B) obklopuje porézní součást (A), kde (i) povrchy pórů těchto alespoň dvou porézních součástí (A) a (B) jsou opatřeny chemickými skupinami pro interakci s látkami procházejícími póry, a (ii) póry porézních součástí mají stejnoměrnou multimodální distribuci velikosti pórů po celé polymerní struktuře.
2. Porézní samonosná struktura podle nároku 1, vyznačující se tím, že zahrnuje polymer vyrobitelný polymerací monomerů majících alespoň dvě polymerovatelné skupiny nebo dvou typů monomerů, prvního polymeru majícího jednu polymerovatelnou skupinu a druhého monomeru schopného zesíťovat polymerní řetězec získaný polymerací prvního monomeru.
3. Porézní samonosná struktura podle nároku 1, vyznačující se tím, funkčními skupinami, skupiny, kovalentní afinitu, antigenů, hydrofóbní organel, barviv atd, že povrchy pórů jsou modifikovány jako jsou například iontoměničové skupiny, reaktivní skupiny pro vázání ligandů, například ligandů majících s výhodou proteinů, enzymů, imunoglobulinů, lectinů, cukrů, nukleových kyselin, buněčných
4. Porézní samonosná struktura podle nároku 2, vyznačující se tím, že monomery jsou polyvinylové a
-309999 9« *
···
9 9
9 9
9 9 9
9 9
9«
9 9 9 9 9 · 9 9 monovinylové monomery.
zahrnuje divinylbenzen, alkylendimetylakryláty, hydroxyalkylendiakryláty,
5. Porézní samonosná struktura podle nároku 3, vyznačující se tím, že skupina polyvinylových monomerů divinylnaftalen, divinylpyridin, hydroxyalkylendimetylakryláty, oligoetylenglykoldiakryláty, vinylpolykarboxylové kyseliny, divinyleter, pentaerythritol, di-, tri- nebo tetra-metakryláty nebo -akryláty, trimetylolpropantrimetylakrylát nebo -akrylát, alkylen-bisakrylamidy nebo -metakrylamidy a jejich směsi.
6. Porézní samonosná struktura podle nároku 3, vyznačující se tím, že skupina monovinylových monomerů podle vynálezu zahrnuje styren, substituované styreny, kde substituenty zahrnují chlormetyl, alkyl s až 18 atomy uhlíku, hydroxyl, t-butyloxykarbonyl, halogen, nítroskupinu, aminoskupinu, bráněnou hydroxylovou skupinu nebo aminoskupinu, vinylnaftalen, akryláty, metylakryláty, vinylacetát a pyrolidon a jejich směsi.
7. ..· Porézní samonosná struktura podle nároku 4 nebo 5,
vyznačující se tím, že polyvinylový monomer nebo polyvinylový monomer plus monovinylový monomer j sou v polymerační směsi přítomny i / množství 20 až 60 %. 8. Porézní samonosná struktura podle nároku 1, vyznačující se tím, že první součást (B) zahrnuje trubicovitou strukturu mající vnitřní otvor ( 10), s vnitřním
průměrem (12) a vnějším průměrem (11), otvor (10) je schopný přijmout druhou součást (A) mající vnitřní průměr (20), s vnějším průměrem (21) a vnitřním průměrem (22), přičemž vnější průměr (21) součásti (A) odpovídá vnitřnímu průměru
-31 ···· ·· (12) součásti (Β) , a součást (A) je vložena v součástí (B).
9. Porézní samonosná struktura podle nároku 8, vyznačující se tím, že vnitřní otvor (20) součásti (A) slouží jako kolektor vzorku.
10. Výrobek zahrnující porézní samonosnou strukturu podle některého z předcházejících nároků a prostředky pro provádění chromatografického procesu.
11. Výrobek podle nároku 10, vyznačující se tím, že jím je chromatografická jednotka (30), kolona nebo patrona nebo reaktor pro biokonverzi nebo matrice pro syntézu peptidů nebo oligonukleotidů.
12. Výrobek podle nároku 11, vyznačující se tím, že zahrnuje pouzdro (36), které je opatřeno rozdělovačem (23) vzorku, a ve kterém je uspořádána součást (D), přičemž pouzdro (36) má alespoň jeden vstup (41) a alespoň jeden výstup (40), vnitřní povrch (42) a vnější povrch (43) a kanálkovou strukturu či kanálkové struktury (72) tvořící rozdělovač (23) vzorku na jeho vnitřním povrchu (42).
13. Výrobek podle nároku 12, vyznačující se tím, že kanálková struktura (72) je vytvořena jako spirálová drážka (25) začínající v oblasti a nacházející se v přímém kontaktu se vstupem (41) chromatografické jednotky (30) a končící po alespoň jedné úplné otáčce avšak ne v přímém kontaktu s výstupem (40)chromatografické jednotky (30).
14. Výrobek podle nároku 11 až 13, vyznačující se tím, že chromatografická jednotka (30) dále zahrnuje první koncovku (32) a druhou koncovku (38), je opatřena O-kroužky (33, 34, 35, 37) a upínacími matkami (31, 39).
15. Výrobek podle nároku 14, vyznačující se tím, že druhá koncovka (38) má vrchní část (52), zadní část (53) a pouzdro, druhá koncovka (38) je v podstatě válcového tvaru, druhá koncovka (38) zahrnuje límec (51) rozdělující válcovitou koncovku (38) na dvě části, přičemž část koncovky (38) bližší límci (51) je vrchní část (52) zahrnující spojku (50) ve spojení se slepým koncem centrálního otvoru (54), na který navazuje otvor (55), kolmý ke slepému konci centrálního otvoru (54), přičemž otvor (55) začíná v prstencovité drážce (56) na povrchu pouzdra druhé koncovky (38) a vede do slepého konce centrálního otvoru (54).
16. Výrobek podle nároku 14, vyznačující se tím, že první koncovka (32) má vrchní část (62) , zadní část (63 ) a pouzdro, první koncovka (32) má límec (61) rozdělující válcovitou koncovku (32) i na dvě části (62, 63), přičemž část koncovky (32) bližší límci (61) je zadní část ( 62) zahrnuj ící spojku (60) propojenou s centrálním otvorem ( 64)
protaženým skrze celou první koncovku (32) a O-kroužek (35) umístěný v prstencové drážce v pouzdru v oblasti vrchní části (63) první koncovky (32) a O-kroužky v kruhových drážkách ve vrchní části (63) první koncovky (32).
17. Pouzdro (36) pro použití ve výrobku podle nároku 12 je opatřeno rozdělovačem (23) vzorku, přičemž kanálková struktura (72) je tvořena spirálovou drážkou (25).
18. První koncovka (32) nebo druhá koncovka (38) pro použití ve výrobku podle nároku 14.
19. Sběrací prvek (80) pro použití ve výrobku podle
-33» t « • · · ♦ » · ··· ·· • * « · ♦ ♦ • · φ* ♦ · nároku 10.
20. Způsob výroby porézní samonosné struktury podle nároku 1, zahrnující kroky smísení monovinylových a polyvinylových monomerů navzájem a s pórotvornými prostředky a volitelně s iniciátory polymerace
- volitelně odvzdušnění, nalití směsi do formy pro odléváni trubicovité struktury, regulace teploty v rozmezí 40 až 90 °C, a po vytvoření polymeru odstranění pórotvorných činidel, nezreagovaných monomerů a iniciátorů nebo vedlejších produktů.
CZ20003135A 1998-02-27 1999-02-27 Porézní samonosná polymerní struktura, výrobek s touto strukturou a zpusob její výroby CZ302614B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SI9800058A SI9800058A (sl) 1998-02-27 1998-02-27 Ohišje za porozne cevne module
SI9800201A SI20011A (sl) 1998-07-14 1998-07-14 Konstrukcija cevnega modula večjih volumnov

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20003135A3 true CZ20003135A3 (cs) 2001-01-17
CZ302614B6 CZ302614B6 (cs) 2011-08-03

Family

ID=26665267

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20003135A CZ302614B6 (cs) 1998-02-27 1999-02-27 Porézní samonosná polymerní struktura, výrobek s touto strukturou a zpusob její výroby

Country Status (12)

Country Link
US (1) US6736973B1 (cs)
EP (1) EP1058844B1 (cs)
JP (1) JP4109418B2 (cs)
AT (1) ATE307333T1 (cs)
AU (1) AU3328199A (cs)
CA (1) CA2322009C (cs)
CZ (1) CZ302614B6 (cs)
DE (1) DE69927792T2 (cs)
DK (1) DK1058844T3 (cs)
ES (1) ES2247791T3 (cs)
RU (1) RU2232385C2 (cs)
WO (1) WO1999044053A2 (cs)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7138518B1 (en) 1996-11-13 2006-11-21 Transgenomic, Inc. Liquid chromatographic separation of polynucleotides
DE10033532A1 (de) * 2000-07-11 2002-01-31 Robert Hoehne Verfahren zum Abdichten eines porösen Formkörpers und Halterung für einen solchen Formkörper
US20030190757A1 (en) * 2000-09-25 2003-10-09 Masahiro Furuno Method and device for collecting and concentrating specimen
EP1321176A1 (en) * 2001-12-18 2003-06-25 Boehringer Ingelheim International GmbH Method and device for isolating and purifying a polynucleotide of interest on a manufacturing scale
SE0201623D0 (sv) * 2002-05-30 2002-05-30 Amersham Biosciences Ab Macroporous cross-linked polymer particles
US6749749B2 (en) 2002-06-26 2004-06-15 Isco, Inc. Separation system, components of a separation system and methods of making and using them
DE102005031560B4 (de) * 2005-07-06 2007-05-16 Sartorius Gmbh Membranhalter für die Membranadsorberchromatographie
US7704388B2 (en) * 2006-01-31 2010-04-27 Luknova, Inc Reusable liquid chromatographic columns
WO2007139463A1 (en) * 2006-05-29 2007-12-06 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Preparation of monolithic articles
JP4376919B2 (ja) * 2007-03-23 2009-12-02 株式会社日立ハイテクノロジーズ 分離カラム及びそれを用いた液体クロマトグラフ装置
JP4931006B2 (ja) * 2007-08-03 2012-05-16 オルガノ株式会社 モノリス状有機多孔質イオン交換体、その使用方法、製造方法及び製造に用いる鋳型
JP5265762B2 (ja) 2008-05-13 2013-08-14 ユニバーシティ・オブ・カンザス 金属抽出ペプチド（ｍａｐ）タグおよび関連する方法
WO2009147001A1 (en) * 2008-05-22 2009-12-10 Proxeon Biosystems A/S Pre-assembled separation columns
JP2013535683A (ja) * 2010-07-30 2013-09-12 イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン クロマトグラフィー媒体及び方法
CA2896931A1 (en) 2012-01-09 2013-07-18 Sanofi Pasteur Biologics, Llc Purification of flaviviruses
US9187735B2 (en) 2012-06-01 2015-11-17 University Of Kansas Metal abstraction peptide with superoxide dismutase activity
CN105307743A (zh) * 2013-01-31 2016-02-03 Emd密理博公司 用于纯化疫苗和病毒的色谱介质
WO2015195178A2 (en) * 2014-03-27 2015-12-23 Canon U.S. Life Sciences, Inc. Integration of ex situ fabricated porous polymer monoliths into fluidic chips
CA2954425C (en) 2014-09-02 2019-05-07 Emd Millipore Corporation High surface area fiber media with nano-fibrillated surface features
US20170298091A1 (en) 2014-12-08 2017-10-19 Emd Millipore Corporation Mixed Bed Ion Exchange Adsorber
JP2016210705A (ja) 2015-04-30 2016-12-15 昭和電工株式会社 タンパク質凝集体の除去方法
KR20210091206A (ko) 2018-11-06 2021-07-21 아르헬 프로젝티랜제 인 인제나이어링 디.오.오. 우유, 초유 및 산 또는 스위트 유청으로부터 고도로 정제된 락토페린 및 락토퍼옥시다제를 제조하는 방법

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3483990A (en) * 1967-03-06 1969-12-16 Beckman Instruments Inc Dialyzer apparatus
US4116836A (en) * 1977-03-01 1978-09-26 Henry Allen Chromatographic column
US4627918A (en) * 1985-11-04 1986-12-09 Sepragen Corporation Chromatography column using horizontal flow
US4676898A (en) * 1985-11-04 1987-06-30 Sepragen Corporation Chromatography column using horizontal flow
GB2201904B (en) * 1987-02-14 1990-12-19 Domnick Hunter Filters Ltd Device for liquid chromatography or immobilised enzyme reaction
US5019270A (en) * 1989-07-06 1991-05-28 Perseptive Biosystems, Inc. Perfusive chromatography
DE4119203A1 (de) * 1990-08-07 1992-02-13 Bio Rad Laboratories Chromatographieeinsatz
GB9019855D0 (en) * 1990-09-11 1990-10-24 Pall Corp Depth filter media
US5316680A (en) * 1992-10-21 1994-05-31 Cornell Research Foundation, Inc. Multimodal chromatographic separation media and process for using same
DE69316231T2 (de) * 1992-10-21 1998-08-20 Cornell Res Foundation Inc Selektive, die porengrösse betreffende chemische modifikation poröser materialien
DE69520586T2 (de) * 1994-08-23 2001-11-15 Bia Separations Doo Verfahren und vorrichtung zur schnellen trennung und/oder umwandlung von substraten
US5728457A (en) * 1994-09-30 1998-03-17 Cornell Research Foundation, Inc. Porous polymeric material with gradients
US5522994A (en) * 1995-02-01 1996-06-04 Cornell Research Foundation, Inc. Single column chromatographic determination of small molecules in mixtures with large molecules
US5929214A (en) * 1997-02-28 1999-07-27 Cornell Research Foundation, Inc. Thermally responsive polymer monoliths

Also Published As

Publication number Publication date
WO1999044053A2 (en) 1999-09-02
AU3328199A (en) 1999-09-15
US6736973B1 (en) 2004-05-18
DK1058844T3 (da) 2006-03-06
ES2247791T3 (es) 2006-03-01
CA2322009A1 (en) 1999-09-02
DE69927792D1 (de) 2006-03-02
RU2232385C2 (ru) 2004-07-10
JP4109418B2 (ja) 2008-07-02
CA2322009C (en) 2009-09-22
EP1058844B1 (en) 2005-10-19
WO1999044053A3 (en) 1999-10-07
CZ302614B6 (cs) 2011-08-03
JP2002505428A (ja) 2002-02-19
ATE307333T1 (de) 2005-11-15
EP1058844A2 (en) 2000-12-13
DE69927792T2 (de) 2006-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20003135A3 (cs) Porézní samonosná struktura pro chromatografické zařízení
Podgornik et al. Construction of large-volume monolithic columns
JP3168006B2 (ja) マクロ細孔ポリマー媒体が備わっているカラム
EP0320023B1 (en) Macroporous polymeric membranes, their preparation and their use for polymer separation
Zou et al. Monolithic stationary phases for liquid chromatography and capillary electrochromatography
CA2554561C (en) Ion exchange particle-bound flow-through porous monolith
Arrua et al. Recent developments and future possibilities for polymer monoliths in separation science
Pan et al. Protein A immobilized monolithic capillary column for affinity chromatography
US20040000522A1 (en) Separation system, components of a separation system and methods of making and using them
US20080032116A1 (en) Organic Polymer Monolith, Process for Preparing the Same, and Uses Thereof
JP6063529B2 (ja) 物質分離用前処理カートリッジ及びそれを利用した前処理方法
RU2000124527A (ru) Новое хроматографическое устройство
Nischang et al. Downscaling limits and confinement effects in the miniaturization of porous polymer monoliths in narrow bore capillaries
Hahn et al. Affinity monoliths generated by in situ polymerization of the ligand
Arrua et al. Preparation of macroporous monoliths based on epoxy-bearing hydrophilic terpolymers and applied for affinity separations
Eeltink et al. Recent developments and applications of polymer monolithic stationary phases
JP2003522321A (ja) 製造方法およびその方法によって製造される物品
Currivan et al. Modification reactions applicable to polymeric monolithic columns. A review
JP2007327776A (ja) 液体クロマトグラフィー用担体及び液体クロマトグラフィー用担体の製造方法
Hon Miniaturization of the bioanalytical process

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20190227