CS276178B6 - Algicídny prostriedok typu N-alkyl-4-piperidylesterov alkoxykarbanilových kyselin - Google Patents

Description

1 CS 276 178 B6

Vynález sa týká algicídneho prostriedku, ktorý ako účinnú látku obsahuje zlúčeninu

obecného vzorea I

kde E1 je priamy alkyl s 2 až 4 atómami uhlíka a OEg je alkoxyl so 4 až 7 atómami v orto-alebo meta-polohe benzénového jadra.

Syntéza novosyntetizovaných doposiaí nepopísáných zlúčenín obecného vzorca I je uvede- 'ná v práci autorov Csflllei J., Beneš L,, Borovanský A., Švec P., Béderová E., Kozlovský J.:Českoslov. farm. XXXV, 299 (1986). Zlúčeniny vykazujú lokálně anestetickú účinnost. Při ČLalšom Studiu biologickéj účinnosti zlúčenín obecného vzorca I sme zistili, žetieto výrazné inhibujú rast a syntézu chlorofylu rias.

Inhibičná účinnost zlúčenín obecného vzorca I na riasy sa testovala stacionárnou kul-tiváciou synchrónnej kultúry rias Chlorella vulgaris. Hodnotil sa nárast buniek rias, akoaj obsah syntetizovaného chlorofylu. Podrobný popis metody hodnotenia je uvedený v příklade I. Miera antialgálnej účinnosti zlúčenín obecného vzorca I je vyjádřená údajmi v tabulke 1.Inhibičný vplyv na riasy sa sledoval u nasledujúcich zlúčenín obecného vzorca I: 1. K-etyl-N-piperidylester 2-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (pracovné označenie4224) 2. N-etyl-4-piperidylester 2-pentyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4225) 3. N-etyl-4-piperidylester 2-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4226) 4. N-etyl-4-piperidylester 2-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4227) 5. N-etyl-4-piperidylester 3-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4234) 6. N-etyl-4-piperidylester 3-pentyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4235) 7· N-etyl-4-piperidylester 3-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4236) 8. N-etyl-4-piperidylester 3-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4237) 9. N-propyl-4-piperidylester 2-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4324) 10. N-propyl-4-piperidylester 2-pentyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4325) II. N-propyl-4-piperidylester 2-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4326) « 12. N-propyl-4-piperidylester 2-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4327) * 13. K-propyl-4-piperidylester 3-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4334) , 14. N-propyl-4-piperidylester 3-pentyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4335) 15. N-propyl-4-piperidylester 3-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4336) 16. N-propyl-4-piperidylester 3-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4337) 17. N-butyl-4-piperidylester 2-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4424) 18. N-butyl-4-piperidylester 2-pentyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4425) 19. N-butyl-4-piperidylester 2-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4426) 20. N-butyl-4-piperidylester 2-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4427) 21. N-butyl-4-piperidylester 3-butoxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4434) 22. N-butyl-4-piperidylester 3-hexyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4436) 23. N-butyl-4-piperidylester 3-heptyloxykarbanilovej kyseliny, hydrochlorid (PAK 4437)

Tabulka 1

Inhibičná účinnost látok obecného vzorca I na riasy Chlorella vulgaris CS 276 178 B6 2 látka IC50 syntézy chlorofylu MIC ' syntézy chlorofylu ICKn 10’6mól.dm“350 rastu rias PAK 4224 50,0 20,4 27,5 PAK 4225 50,0 30,2 34,7 PAK 4226 33,1 10,7 13,8 PAK 4227 10,2 8,7 8,9 PAK 4234 1 1 ,0 8,7 8,7 PAK 4235 9,1 7,9 7,9 PAK 4236 6,0 3,8 4,6 PAK 4237 11,5 7,4 8,4 PAK 4324 60,3 17,4 28,8 PAK 4325 25,1 1 1 ,8 15,1 PAK 4326 25,1 11,8 11,5 PAK 4327 25,1 13,5 12,9 PAK 4334 16,2 5,4 7,4 PAK 4335 10,0 5,5 6,1 PAK 4336 8,7 4,2 4,6 PAK 4337 10,0 5,8 7,6 PAK 4424 19,9 8,3 12,6 PAK 4425 20,0 10,5 10,5 PAK 4426 39,8 12,0 20,9 PAK 4427 35,5 13,8 16,6 PAK 4434 15,8 9,6 9,1 PAK 4436 10,0 7,1 8,3 PAK 4437 15,1 9,8 11,5 Ι05θ značí koncentráciu študovanej látky, při ktorej dochádza k 50%nej inhibícii hodnotené-ho parametra rias vzhladom na kontrolně vzorky; MIC značí minimálnu koncentráciu študovanéj látky, pri ktorej dochádza k úplnej inhibíciihodnoteného parametra rias.

Nasledujúci příklad bližšie osvětluje inhibičnú účinnosň zláčenín podlá vynálezu nazelené riasy. Příklad 1 Účinok zlúčenín podlá vynálezu na rast rias Chlorella vulgaris a obsah syntetizovaného chlo-rofylu

Hiasy Chlorella vulgaris sa pěstovali stacionárnou kultiváciou pri teplote 25-1 °C,pri svetelnom režime 16 hodin svetlo/8 hodin tma, v kultivačnom médiu podlá Šetlíka(Šetlík I.: Annual Heport of Algolog Lab. for 1967, 71-140, Třeboň, 1968). K živnému médiusa přidával roztok študovanej zlúčeniny v destilovanéj vodě takej koncentrácie, aby sa zís-kala séria kultivačných baniek s odstupňovanou koncentráciou látky a s odstupňovaným biolo-gickým účinkom. Banky sa inokulovali přesným objemom homogénnej suspenzie rias. Po 7-dennejkultivácii sa objem kultivačného média doplnil destilovanou vodou na povodný objem (vyrovna-nie odparu vody) a v suspenzii buniek sa merala absorbancia pri 660 nm (úměrná množstvubuniek rias) a obsah chlorofylu po jeho extrakcii dimetylformamidom z odcentrifugovanýchbuniek rias. Celkový obsah chlorofylu rias v kultivačnom médiu sa vyhodnotil podlá rovnice:Chl (mg.dm“3) = 1?,9 ^-547 + θ)08 Agg^ 5, kde A je absorbancia vzorky pri 647, resp. 664,5nm v 1 cm kývete (Inskeep W. P., Bloom P. B.: Plant Physiol. 77 (2), 483-5, 1985). Získané hodnoty týchto parametrov sa porovnávali s hodnotami parametrov kontrolných vzoriek (vyhodnotené ako % kontroly). Na základe týchto hodnot sa extrapoláciou vyčíslili koncentrácie študovaných zlúčenín, pri ktorých sa dosiahla 50%ná inhibícia (ΙΟ^θ) a v pří- pade hodnot chlorofylu aj úplná inhibícia (MIC). Z hodnot absorbancie sa MIC nevyhodnocova-

Claims (1)

1. 3 CS 276 178 B6 la, nakolko touto metodou sa stanovujú tiež odfarbené mrtvé buňky rias, a teda aj priúplnej inhibícii sa namerajú určité hodnoty absorbancie. Například v případe testovania účinku zlúčeniny PAK 4324 sa k 12 ml kultivačného mé-dia s inokulem rias přidalo O,Í2 ml vodného roztoku zlúčeniny PAK 4324 nasledovných kon-centrácií 6,0.10”^, 3>5.1O”\ 2,5·1O”\ 1,0.10“^ a 7,5·10“^ mól.dm-^. Skutočné koncentrá-cie zlúčeniny PAK 4324 v kultivačnom médiu a příslušné hodnoty inhibície rastu rias a syn-tézy chlorofylu, vyjádřené v % kontrolních vzoriek sú uvedené v tabulke 2. Hodnoty koncentrácie študovanéj zlúčeniny, pri ktorej dochádza k 50%nej, resp. úplnéjinhibícii študovaného parametra rias sa zistuje extrapoláciou zo závislosti vyššie uvede-ných hodnot % zistenej inhibície sledovaného parametra od logaritmu aplikovanéj koncentrá-cie študovanej zlúčeniny. Tabulka 2 Inhibícía rastu rias a syntézy chlorofylu v přítomnosti zlúčeniny PAK 4324 Konc. zlúčenina PAK 4324 1 O-® mól.dm-·} % kontroly + ó Chlorofyl Absorbancia 60 0 18,7 i 0,2 35 25,6 + 6,5 45,7 + 1,3 25 38,1 + 3,7 58,0 + 2,0 10 68,9 + 10,8 87,5 í 2,8 7,5 82,8 + 3,0 94,8 + 1,9 ó- smerodajná odchýlka PATENTOVÉ NÁROKY Algicídny prostriedok, vyznačujúci sa tým, že ako účinnú látku obsahuje zlúčeninuobecného vzorea I

   kde R1 je priamy alkyl s 2 až 4 atómami uhlíka a OR2 je alkoxyl so 4 až 7 atómami uhlíkav orto- alebo meta- polohe benzénového jadra.