CS274026B1 - Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation - Google Patents

Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation Download PDF

Info

Publication number
CS274026B1
CS274026B1 CS806788A CS806788A CS274026B1 CS 274026 B1 CS274026 B1 CS 274026B1 CS 806788 A CS806788 A CS 806788A CS 806788 A CS806788 A CS 806788A CS 274026 B1 CS274026 B1 CS 274026B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
volume
parts
salt
amino
hydroxy
Prior art date
Application number
CS806788A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Other versions
CS806788A1 (en
Inventor
Danica Ing Csc Mislovicova
Oskar Ing Rndr Drsc Markovic
Peter Rndr Csc Biely
Original Assignee
Danica Ing Csc Mislovicova
Oskar Ing Rndr Drsc Markovic
Biely Peter
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Danica Ing Csc Mislovicova, Oskar Ing Rndr Drsc Markovic, Biely Peter filed Critical Danica Ing Csc Mislovicova
Priority to CS806788A priority Critical patent/CS274026B1/cs
Publication of CS806788A1 publication Critical patent/CS806788A1/cs
Publication of CS274026B1 publication Critical patent/CS274026B1/cs

Links

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

CS 274026 B1 i
Vynález sa týká dvojsodnej soli 0- £4-chlór-6-£benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfo-nat-8-yl)aminoJ -1,3,5-triazin-2-ylJ D-galakturónanu o priemernom stupni polymerizácie i, 10 a sposobu jej přípravy.
Rozpustné kovalentne vyfarbené polysacharidy sa v poslednej době s úspechom použí-vajú na rýchlu a jednoduchá detekciu příslušných hydroláz polysacharidov a tiež sú vhod-né na stanovenie ich aktivity / B.V. Mc Cleary: Carbohydr. Res. 86, 97 (1980); P. Bielya spol.: Anal. Biochem., 144, 147 (1985); P. Biely a spol.; 172, 176 (1988)/. Farbivo saobvykle viaže na polysacharid priarao na hydroxylovú skupinu éterickou vazbou alebo naderivatizovaný polysacharid. Princip detekcie .a stanovenia aktivity enzýmov spočívá vzmene rozpustnosti farebného polysacharidu v dosledku hydrolýzy enzýmom a následnej tvor-bě nízkomolekulárnych farebných fragmentov rozpustných v přítomnosti organického rozpúš-ťadla. V případe pektín-degradujúcich enzýmov takýmto substrátom je kovalentne zafarbenýpektín azo-farbivom N- {l-[4-[(3, 6-disulfo-l-naftyl)azoJ -naftyl-etyléndiamin, připra-vený D. R. Friedom a G. W. Changom / J. Agric. Food Chem., 30 (5) (1982) 982/, v ktoromje farbivo viazané na pektín cez amidickú skupinu, pri vzniku ktorej sa používá ťažkodostupný katalyzátor - vodorozpustný karbodiimid. Iný druh farebného substrátu pre pek-tinázy je sodná sol' 2-[ 3-(l-amino-2-sulfoantrachinón-4-ylamino)fenysulfonylJ-etyl -- etyléndiamín derivátu pektínu / J. S. Huang, J. Tang: Anal. Biochem., 73, 369 (1976)/.Připravuje sa v dvoch stupňoch. Najprv sa připraví etyléndiaminoderivát pektínu a na tensa potom viaže farbivo. Tento substrát sa však vyznačuje zlou rozpustnostíou v tlmivýchroztokoch. Běžné techniky viazania farbíva na polysacharid, ktoré nevyžadujú jeho derivatizá-ciu, v případe kyseliny pektovej neposkytujú substrát s požadovanými vlastností ami. Ta-kýmto sposobom vyfarbovania sa u kyseliny pektovej dosiahne vel'mi nízký stupeň substi-túcie farbivom. Získaný substrát neposkytuje enzymatickým štiepením nízkomolekulárne fa-rebné fragmenty, ktoré by umožňovali jeho použitie na detekciu a stanovenie enzýmovejaktivity. Enzýmom sa uvďňujú iba nízkomolekulárne nefarebné fragmenty, pričom farbivozostáva naviazané na polymérnom zvyšku, ktorý je nerozpustný v 60 % etylalkohole.
Uvedené nevýhody v podstatnej miere odstraňuje vodorozpustný chromogénny substrátdvojsodná sol' O- £4-chlór-6- [benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8-yl)aminoJ -1,3,5-triazin-2-yll D-galakturónanu s priemerným stupňom polymerizácie 10 vzorca I
Zistilo sa, že uvedenú dvojsodnú sol' O- £4-chlór-6- [benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6--bissulfonaft-8-yl)aminoJ -1,3,5-triazín-2-yl-J D-galakturónanu s priemerným stupňompolymerizácie 10 je možné připravit' nasledujúcim sposobom podl'a vynálezu, ktorého pod-stata spočívá v tom, že 1 hmot. diel vodorozpustnej kyseliny oligo-D-galakturónovejo priemernom stupni polymerizácie 10 alebo jej sodnéj, príp. draselnéj soli reaguje vovodnom roztoku s obsahom 0,8 až 1,2 hmot. dielov uhličitanu sodného alebo draselného zapřítomnosti alkalickéj soli kyseliny octovéj alebo minerálněj kyseliny s 0,6 až 1 hmot.dielom dvojsodnej soli 2,4-dichlór-6- [benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8-yl)aminoJ -1,3,5-triazínu (dichlórtriazínové farbivo). Vzniknutý roztok zafarbeného D-gala-.kturónanu sa zneutralizuje kyselinou octovou alebo minerálnou kyselinou. 1 obj. diel zne-utralizovaného roztoku sa zráža s 3,5 až 4,5 obj. dielmi roztoku obsahujúceho 2 až 3 obj. CS 274026 B1 diely 96 %-ného etylalkoholu a 1 až 2 obj. diely acetonu· Nenaviazané dichlórtriazinovéfarbivo sa odstráni premývaním zrazeniny roztokom obsahujúcim 2 až 3 obj. diely 96 %-né-ho etylalkoholu, 1 až 2 obj. diely acetonu a 1 obj. diel 0,6 až 1 %-ného vodného roztokualkalickej soli kyseliny octovej alebo minerálnej kyseliny. Výhodné je použit1 na neutra-lizáciu takú kyselinu,ktorej sol' sa použije počas reakcie. Z hl'adiska využitia dvojsod-nej soli O- £4-chlór-6- £benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8-yl)aminoJ-1,3,5-tri-azin-2-ylJ -D-galakturónanu o priemernom stupni polymerizácie 10 ako substrátu na detek-ciu a stanovenie aktivity pektináz, ktoré sa uškutočňuje v octanovom tlmivom roztoku,je výhodné použiť pri reakcii octan sodný a kyselinu octovú pri neutralizácii. Výhodou dvojsodnej soli 0-£4-chlór-6-£benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8--yl)amino]-1,3,5-triazin-2-ylJ -D-galakturónanu o priemernom stupni polymerizácie 10podl’a vynálezu je, že sa ziska farebný substrát rozpustný v tlmivých roztokoch, v kto-rých sa uškutočňuje enzýmová reakcia. Ďal'šia jeho výhoda je, že enzymatickým štiepenímpolygalakturonázou už pri prvom ataku uvol'ňuje farebné fragmenty (DP 5), ktoré zostáva-jú rozpuštěné v supernatante po vyzrážaní nerozštiepeného substrátu organickým rozpúš-ť adlom.
Uvedené příklady ilustrujú, ale neobmedzujú predmet vynálezu. Příklad 1 1 g kyseliny oligo-D-galakturónovej o priemernom stupni polymerizácie 10 sa rozpus-tí v 40 ml destilovanej vody pri teplote 30 *C a odfiltrujú sa nerozpustné podřely. Potomsa k filtrátu přidá 1 g dichlórtriazinového farbiva rozpuštěného v 6 ml vody a mieša sa10 minút pri teplote 30 *C. Potom sa přidá 0,5 g octanu sodného a zase sa mieša 10 minútpri tej istej teplote. Nakoniec sa přidá 12 ml 6 %-ného vodného roztoku uhličitanu sodné-ho a mieša sa 2 hodiny pri 30 *C. Reakčná zmes sa potom zneutralizuje 2 M kyselinou octo-vou na pH 7 a vyzráža sa roztokom obsahujúcim 120 ml 96 %-ného etylalkoholu a 120 ml ace-tonu. Zrazenina sa odfiltruje na nuči a premýva roztokom obsahujúcim 1 diel 0,6 %-néhovodného roztoku octanu sodného, 2 diely 96 %-ného etylalkoholu a 2 diely acetonu až doslabo sfarbeného filtrátu. Potom sa zrazenina prezráža, a to tým sposobom, že sa rozpustív 50 ml 0,6 %-ného vodného roztoku octanu sodného a potom sa vyzráža roztokom obsahujúcim100 ml 96 %-ného etylalkoholu a 100 ml acetonu. Premýva sa ako už bolo uvedené, až do bez-farebného filtrátu. Zrazenina sa premyje etylalkoholom, acetónom a vysuší sa. Získal sa 1 g zrazeniny s obsahom farbiva 5,6 %. Příklad 2 5 g Na-D-galakturónanu o priemernom stupni polymerizácie 10 sa rozpustí v 200 ml vo-dy pri teplote 40 *C a přidá sa 5 g dichlórtriazinového farbiva rozpuštěného v 40 ml vodya mieša sa 10 minút pri tej istej teplote. Potom sa přidá postupné 2,5 g octanu sodnéhoa 60 ml 6 %-ného uhličitanu draselného a mieša sa 2 hodiny pri 40 *C. Potom sa reakčnázmes ochladí, zneutralizuje s 2 M kyselinou octovou a zráža za stálého miešania roztokomobsahujúcim 300 ml 96 %-ného etylalkoholu a 300 ml acetonu. Zrazenina sa přefiltruje ceznuč a vymývá ako v příklade 1. Potom sa prezráža, premyje a vysuší tým istým sposobom akov příklade 1. Získalo sa 4,8 g zrazeniny s obsahom farbiva 6 %.
Vynález može nájsť uplatnenie v potravinářskoro, textilnom i tabakovom priemysle na detekciu a stanovenie aktivity polygalakturonáz v preparátoch obsahujúcich pektolytické enzýmy.

Claims (2)

1. Dvojsodná sol' O- £4-chlór-6-[ benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8-yl)aminoj - -1,3,5-triazin-2-ylJ D-galakturónanu s primerným stupňom polymerizácie 10 vzorca I
1 3 CS 274026 B1 » PREDMET VYNÁLEZU ,
2. Sposob přípravy zlúčeniny podl'a bodu 1, vyznačujúci sa tým, že 1 hmotnostný diel vo-dorozpustnej kyseliny oligo-D-galakturónovej o priemernom stupni polymerizácie 10 alebojej sodnéj, připadne draselnéj soli reaguje vo vodnom roztoku s obsahom 0,8 až 1,2 hmot-nostných dielov uhličitanu sodného alebo draselného za přítomnosti alkalickej soli kyse-liny octovéj alebo minerálněj kyseliny s 0,6 až 1,0 hmotnostným dielom dvojsodnej soli2,4-dichlór-6-ζ benzénazo-2-(l-hydroxy-3,6-bissulfonaft-8-yl)aminoJ -1,3,5-triazínu,vzniknutý roztok zafarbeného D-galakturónanu sa zneutralizuje kyselinou octovou alebominerálnou kyselinou, 1 objemový diel zneutralizovaného roztoku sa zráža s 3,5 až 4,5 ob-jemovými dielmi roztoku obsahujúceho 2 až 3 objemové diely 96 %-ného etylalkoholu, a 1 až2 objemové diely acetonu a nenaviazané dichlórtriazínové farbivo sa odstráni vymývánímzrazeniny roztokom obsahujúcim 2 až 3 objemové diely 96 %-ného etylalkoholu, 1 až 2 obje-mové diely acetonu a 1 objemový diel 0,6 až 1,0 %-ného vodného roztoku alkalickej solikyseliny octovej alebo minerálnej kyseliny.
CS806788A 1988-12-07 1988-12-07 Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation CS274026B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS806788A CS274026B1 (en) 1988-12-07 1988-12-07 Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS806788A CS274026B1 (en) 1988-12-07 1988-12-07 Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS806788A1 CS806788A1 (en) 1990-08-14
CS274026B1 true CS274026B1 (en) 1991-04-11

Family

ID=5430785

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS806788A CS274026B1 (en) 1988-12-07 1988-12-07 Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS274026B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS806788A1 (en) 1990-08-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Signini et al. On the preparation and characterization of chitosan hydrochloride
US4814437A (en) Method for preparation of sulfated polysaccharides by treating the polysaccharide with a reducing agent before sulfation
US5442048A (en) Process for the preparation of activated chitosans and their use in the preparation of chiotsan derivatives
Hayashi et al. Pea xyloglucan and cellulose: VI. Xyloglucan-cellulose interactions in vitro and in vivo
US4970150A (en) Process for preparing chitosan oligosaccharides
Wood Specificity in the interaction of direct dyes with polysaccharides
Verraest et al. Carboxymethylation of inulin
US5733854A (en) Cleaning compositions including derivatized guar gum composition including nonionic and cationic groups which demonstrate excellent solution clarity properties
Muraki et al. Preparation and crystallization of D-glucosamine oligosaccharides with dp 6-8
US20110218331A1 (en) Method of Preparation of DTPA Crosslinked Hyaluronic Acid Derivatives and Modification of Said Dervivatives
Somorin et al. Studies on chitin. II. Preparation of benzyl and benzoylchitins
EP1448840B1 (en) Method for the modification of polymeric carbohydrate materials
Tuzikov et al. Conversion of complex sialooligosaccharides into polymeric conjugates and their anti-influenza virus inhibitory potency
CN100560605C (zh) 含氮聚糖衍生物及其制备方法
US4267313A (en) Saccharide derivative having ureido group
CS274026B1 (en) Two-sodium salt of 0-(4-chloro-6-/benzenase-2-(1-hydroxy-3,6-bisulfonate-8-yl)amino/-1,3,5-triazine-2-yl)d-galacturonane with relative polymerization degree 10 and method of its preparation
US4321364A (en) Preparation of soluble chromogenic substrates
CA1174234A (en) Water-soluble cellulose mixed ethers which contain a phosphonomethyl substituent and a process for preparing same
US4531000A (en) Processes for the preparation of branched, water soluble cellulose products
CS240463B1 (cs) Trojsodná sol' 4-(N-etyl-N-f0nylamíno)-8-(4-meíyll-2-sulíobenzén-l- -azo-2-(l-hydroxy-3,6-bÍ8Sulfonaft-l-yl)antíno ]-1,3,5-triazín- -2-ylhydroxyetylcelulózy a sposob jej přípravy
GB900752A (en) Polymer-dyestuff reaction products
US5801239A (en) Process for the preparation of alkali salt of carboxy alkyl cellulose
RU2123500C1 (ru) Способ получения n-итаконоилхитозана
US4379918A (en) Process for preparing water-soluble phosphonomethyl ethers of cellulose
SK127292A3 (en) Three-sodium salt o-{4-(n-ethyl-n-phenilamine)-6-[4-methyl-2- -sulfobenzene-1-azo-2-(1-hydroxy-3,6-bissulphonapht-1-yl)- -amino]-1,3,5-triazine-2-yl} galactomannane and method of its preparation