CS272889B1 - Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272889B1 CS272889B1 CS152589A CS152589A CS272889B1 CS 272889 B1 CS272889 B1 CS 272889B1 CS 152589 A CS152589 A CS 152589A CS 152589 A CS152589 A CS 152589A CS 272889 B1 CS272889 B1 CS 272889B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridome
- virus
- blv
- ueo
- protein
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 12
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 claims description 10
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 4
- 108010087302 Viral Structural Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 8
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 abstract description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 101900319158 Bovine leukemia virus Capsid protein p24 Proteins 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 101000933967 Pseudomonas phage KPP25 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
1 CS 272889 B1
Vynález sa týká nového myšieho lymfocytárneho hybridámu BLV p24UBO-25Ell/8 t. j.hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostrojená fáziou buniek myšej myelámovej linieSp2/O a myších lymfoidných buniek, produkujácich protilátky namierené proti hlavnémuŠtrukturálnemu proteinu p24 virusu bovinnej leukémie (BLV). Protein p24 je základnousáčastou viriónu virusu bovinnej leukémie. Nález antip24-protilátok u zvierat má význampře diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Doteraz sa protilátky proti antigénom BLV vyrábajú tak, že purifikovaný p24 jeopakované injikovaný produkčným zvieratám, najčastejšie králikom. Sérum takto imunizo-vaných zvierat, odebrané po určitej době pSsobenia antigénu, sláži ako zdroj protilá-tok. Tento postup má mnohé nevýhody, pře každá imunizáciu je nutné izolovat’ znova pro-tein p24 z virusu, jeho purifikáeia je drahá a časové náročná. Okrem toho v sére imu-nizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v kaž-dom zvierati rSzne a neopakovatelné. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky vočinečistotám antigénového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňovat/ vysycovaním. Z týchto dovodov výrobné šarže sa značné odliSujá a kvalita získaných polyklonálnychprotilátok nie je štandardná.
Uvedené nedostatky hoře uvedeného postupu konvenčnej imunizácie odpadná, keS mámek dispozícii hybridám produkujúci monoKLonálnu protilátku proti štrukturálnemu proteinup24 BLV, ktorý je uložený v zbierke hybridómov oddelenia molekulárnej virológie Ústavuexperimentálnej onkolágie SAV v Bratislavě, ul. 5sl. armády 21, pod označením UEO-25E11/8.
Uvedený hybridám bol získaný v podstatě postupom známým v odbornéj literatuře akohybridómová technolágia (Kohler, G,, Milstein, C.: Continuous cultures of fused cellssecretxng antibody of prodefined speoificity, Nátuře 256, 495, 1975),(B.H.Burdon, P.H.VanKnippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology. Vol. 13,Monoelonal Antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984). Postup, ktorým boli hýbridá-my připravené bol námi modifikovaný (0,Orlík, ¢. Altaner: Modifications of hybridomatechnology yield of monoelonal antibody producing cells, J. Immunol. Methods, 115, 55-59, 1988). ’ Výhodou hybridámu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagu-já s proteínom p24 BLV, Hybridám BLVp240E0-25Ell/8, je možno kultivovat in vitro v mé-diách vhodných pre živočišné buňky a sáčasne je adaptovaný pre rast in vivo v peritoneál-nej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sú uchovávané v kvapalnom dusíku, jemožno zahájit produkciu protilátky bez áalšieho antigénu. Protilátka produkovaná KLánomBLVp24-25Ell/8 reaguje Specificky s determinantou proteinu p24 BLV, Příklad: Za áčelom pomnoženia hybridámových buniek in vivo bolo 2*10x10^ buniek injiko-vané do peritoneálnej dutiny myší kmeňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým inji-kované do peritoneálnej dutiny 0.5 ml Přistanu alebo inkompletného Preudova adjuvansza áčelom vytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá· rastu injikovaných hybridámovýchbuniek. Po 14 dňoch rastu hybridámových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrte-ná a naprodukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 mlascitovej tekutiny, ktorá obsahovala 9mg/ml imunoglobulínu. Monoklonálna'protilátka rea-govala Specificky s proteínom p24-BLV a s desintegrovaným vírusom v rádioprecipitačnomteste a rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny bol imunoglobulín izolovaný po-mocou chromatografie na koláne'Protein’ A-Sepharose alebo inou vhodnou metádou. Taktopurifikovaná monoklonálna protilátka je vhodná pre poťahovanie polystyrénových materiá-lov (mikrotitračné. doštičky, polystyrénové tyčinky) za áčelom přípravy diagnostickýchsáprav na detekciu BLV infikovaných zvierat.
Claims (2)
- CS 272889 B1
- 2 Xn vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenzná kultúra, Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglova minimálneho esenoiálneho média doplněného 5 per-centami koňského alebo iného séra vhodného pre tkáňové kultúry. Hybridóm je kultivovanýpri 37 °C v C02 termostate, jeho štandardná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgGl. Hybridóm BLVp24UEO-25Ell/8 mdže byť priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky proti štrukturélnerau proteinu p24 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodáchiných aplikáciach. Konkrétné má využitie: pri výrobě imunodiagnostických súprav na detekciu infekcie ho-vádzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikécii virusového proteinu p24imunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusovéhoproteinu p24, ako zdroj protilátky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detekciuvirusového antigénu v infikovaných zvieratách. PREDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm BLVp-24UEO-25Ell/8 produkujúci monoklonálnu protilátkupodtriedy IgGl proti štrukturálnemu proteinu p24 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152589A1 CS152589A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272889B1 true CS272889B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152589A CS272889B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272889B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116284352A (zh) * | 2022-08-22 | 2023-06-23 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) | 牛白血病病毒抗体及检测试剂盒 |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152589A patent/CS272889B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116284352A (zh) * | 2022-08-22 | 2023-06-23 | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) | 牛白血病病毒抗体及检测试剂盒 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152589A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100214759B1 (ko) | 인간 인터로이킨-6 수용체에 대한 항체 | |
| EP0014519B1 (en) | Cell lines, process for preparing them and process for producing antibodies | |
| FI83538B (fi) | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. | |
| JP2735947B2 (ja) | B細胞リンパ腫に対するイディオタイプのワクチン接種 | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| CN110938007B (zh) | 三氯杀螨醇半抗原、人工抗原、抗体及其合成方法和应用 | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| WO1989000607A1 (en) | Preparation of human monoclonal antibodies of selected specificity and isotypes | |
| RU93019968A (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животного mus musculus - продуцент моноклональных антител к с-концевой части белка р24 вируса иммунодефицита человека i типа | |
| Liu et al. | Monoclonal antibodies (mAbs) as useful research and diagnostic probes | |
| RU2007452C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток mus musculus - продуцент моноклональных антител, используемых для диагностики вирусной геморрагической болезни кроликов | |
| RU1798372C (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L. - продуцент протективных моноклональных антител к вирусу восточного энцефаломиелита лошадей | |
| RU1801117C (ru) | Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека | |
| US5849539A (en) | Thymidine kinase-lacking ouabain-resistant chicken hybridoma | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| Kitao et al. | Monoclonal antibodies to L-asparaginase | |
| CS267392B1 (sk) | Myší lymfocytámy hybridóm VÚ IFN ALó | |
| CS239800B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TU-04 | |
| CS269050B1 (sk) | Myši lymfocytárny hybridům VU VIH7 |