CS272888B1 - Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272888B1 CS272888B1 CS152489A CS152489A CS272888B1 CS 272888 B1 CS272888 B1 CS 272888B1 CS 152489 A CS152489 A CS 152489A CS 152489 A CS152489 A CS 152489A CS 272888 B1 CS272888 B1 CS 272888B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- virus
- hybridome
- monoclonal antibody
- ueo
- hybridoma
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 19
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 5
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims description 5
- 101500007117 Bovine leukemia virus Surface protein Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 9
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 7
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 abstract description 6
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 108010011013 glycoprotein GP51 Proteins 0.000 abstract 1
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- 101000920732 Bovine leukemia virus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 230000010530 Virus Neutralization Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
I CS 272S88 81 -g i
Vynález sa týká nového myšieho lymfocytárneho hybridómu BLVgp51UE0-25Ell/2, t. j. hy-bridnej bunečnej linie, ktorá bola zostrojená fáziou buniek myšej myelómovej. linie Sp2/0a myších lymfaidných buniek, produkujácich protilátky namierené proti obalovému glykopro-teínu gp51 virusu bovinnej leukémie (BLV). Obalový glykoproteín je důležitou sáčasíouvirusu bovinnej leukémie, je zodpovědný za infektivitu virusu. Nález anti-gp protilátoku zvierat má zásadný význam pře diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Doteraz sa protilátky proti antigénom BLV vyrábajú tak, že purifíkovaný gp51 je opa-kované injikovaný produkčným zvieratám, najčastějšie králikom. Sérum takto imunizovanýchzvierat, odobrané po určitéj době působenia antigénu, sltfži ako zdroj protilátok. Tentopostup má mnohé nevýhody, pre každá imunizáciu je nutné izolovat znova glykoproteín gp51z virusu, jeho purifikácia je drahá a časové náročná. Okrem toho v sére imunizovanýchzvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých sepktrum je v každom zvieratirůzné a neopakovatelné. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči nečistotám antí-génového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňovat vysycovanim. Z týchto důvodov výrob-ně šarže sa značné odlišujú a kvalita získaných polyklonálnych protilátok nie je štandard-ná.
Uvedené nedostatky výše uvedeného postupu konvenčnej imunizácie odpadnú, ked mámek dispozícii hybridóm, produkujúci monoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteínuBLV, ktorý je uložený v zbierke hybridómov oddelenia molekulárnej virológie, Ústavu expe-rimentálnej onkológie SAV v Bratislavě, ul. Csl. armády 21, pod označením UE0-25E11/2.
Uvedený hybridóm bol získaný v podstatě postupom známým v odbornej literatúre akohybridómová technológia (Kohler, G., Milstein, C.: Continous cultures of fused cellssecreting antibody of prodefined specificity, Nátuře 25fi, 495, 1975), R. H. Burdon, P. H.VanKnippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology, Vol. 13Monoclonal antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984. Postup, ktorým bolí hybridómypřipravené bol námi modifikovaný (0. Orlík, Č. Altaner: Modifications of hybridóm techno-logy yield of monoclonal antibody producing celíš, J, Immunol. Methods, 115, 55-59, 1988). Výhodou hybridómu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagujás obalovým glykoproteínom BLV. Hybridóm BLVgp51-25Ell/2, je možno kultivovat in vitrov médíách vhodných pre živočišné buňky a sáčasne je adaptovaný pre rast in vivo v perito-neálnej dutině myšeiho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sá uchovávané v kvapalnom dusíku,je možno zahájit produkciu protilátky bez ňalšieho antigénu. Protilátka produkovaná kló-nom BLVgp51-25Ell/2 reaguje Specificky s determinantou obalového glykoproteínu BLV a máneutralizačný charakter. Příklad
Za áčelom pomnoženia hybridómových buniek in vivo bolo 2-10 x 10^ buniek injikovanédo peritoneálnej dutiny myší kmeňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým injikovanédo peritoneálnej dutiny 0,5 ml Přistanu alebo inkompletného Freudova adjuvans za áčelomvytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá rastu injikovaných hybridómových buniek.
Po 14 dňoch rastu hybridómových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtená a nepro-dukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml ascitovej te-kutiny, ktorá obsahovala 9 mg/ml imunoglobulínu. Monoklonálna protilátka reagovala Speci-ficky s glykoproteínom gp51-BLV a s desintegrovaným vírusom v rádioprecipitačnom testea rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny bol imunoglobulin izolovaný pomocouchromatografie na klone Protein A-Sepharose alebo inou vhodnou metodou. Takto purifikova-ná monoklonálna protilátka je vhodná pre potahovanie polystyrénových materiálov (mikroti-tračné doštičky, polystyrénové tyčinky) za áčelom přípravy diagnostických, sáprav na detek-ciu BLV infikovaných zvierat.
In vitro rastá buňky hybridómu ako polosuspenzná kultára. Základným kultivačným médi- em je Dulbeccova modifikácia Eaglova minimálneho esencíálneho média doplněného 5 procenta- mi koňského alebo iného séra vhodného pre tkáňové kultáry. Hybridóm je kultivovaný pri
Claims (1)
- i 'i CS 272880 B1 37 °C v COg termostate, jeho štandardná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produkovanáprotilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgG2b. Hybridóm BLVgp51UED-25Ell/2 může byt priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky pro-ti obalovému glykoproteínu gp51 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodácha iných aplikáciách. Konkrétné má využitie: pri výrobě imunodiagnostických súprav na detekciu infekcie ho-vadzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, při purifikácii virusového glykoproteínu imu-noafinitnou chromatografiou, při vyhodnocovaní antigénnej variability virusového glykopro-teínu, pře přípravu antiidiotypovej protilátky pře vakcinačné účely, ako zdroj protilátkyjedinej podtriedy pře přípravu sér, pře detekciu virusového antigénu v infikovaných zvieratách, pře neutralizáciu BLV. PREDMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm 8LVgp51UE0-25E11/2 produkujúci neutralizačnú monoklonál- nu protilátku podtriedy IgG2b proti obalovému glykoproteínu gp51 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152489A CS272888B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152489A CS272888B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152489A1 CS152489A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272888B1 true CS272888B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349834
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152489A CS272888B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272888B1 (cs) |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152489A patent/CS272888B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152489A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2735947B2 (ja) | Ｂ細胞リンパ腫に対するイディオタイプのワクチン接種 | |
| FI87734B (fi) | Immunologisk motverkan foer tumoerer och virus | |
| US4731237A (en) | Immune response to virus induced by anti-idiotype antibodies | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| Burkhart et al. | Characterization of T-helper epitopes of the glycoprotein of vesicular stomatitis virus | |
| Hinuma et al. | Studies on the Complement-Fixing Antigens of Poliomyelitis: III. Intracellular Development of Antigen | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| FI111518B (fi) | Menetelmä monoklonaalisten vasta-aineiden ja vasta-ainetta sisältävän farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| JPS59116230A (ja) | ウイルス性感染因子に対する免疫応答を生起する抗−イデイオタイプ抗体 | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| EP0370090B1 (en) | Immunogens and biologically active peptides derived from shared sequences from antigens and anti-idiotypic antibodies or antibodies specific for cellular receptors of the antigens | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| Opolski et al. | Polymorphic and autoreactive H-2-specific monoclonal antibody isolated after injections of syngeneic Sendai virus-coated lymphocytes | |
| CN117050194B (zh) | 一种马传染性贫血病的抗体及其在精液检测中的应用 | |
| RU2395575C1 (ru) | ШТАММ ГИБРИДНЫХ КЛЕТОК ЖИВОТНОГО Mus musculus L. - ПРОДУЦЕНТ МОНОКЛОНАЛЬНЫХ АНТИТЕЛ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) (ВАРИАНТЫ), МОНОКЛОНАЛЬНОЕ АНТИТЕЛО, ПРОДУЦИРУЕМОЕ ШТАММОМ (ВАРИАНТЫ), НАБОР ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ФОРМАТА "СЭНДВИЧ" ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ МАТРИКСНОГО БЕЛКА VP40 ВИРУСА МАРБУРГ (ШТАММ Рорр) | |
| JPH04500003A (ja) | ブタ多クローン性抗体および単クローン性抗体 | |
| CN114805589A (zh) | 可同时识别牛、山羊、绵羊抗体的单克隆抗体 | |
| RU2257414C1 (ru) | Штамм гибридных клеток с3/s-3e5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к коксиеллам бернета | |
| CN115819568A (zh) | 一种肠道病毒a71单克隆抗体及应用 | |
| JPS6263525A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| TR202021671A2 (tr) | Covid-19 salginina karşi kullanilmak üzere bi̇r aşi üreti̇m yöntemi̇ | |
| Xuan et al. | Induction of antibodies to canine herpesvirus in mice by immunization with anti-idiotypic antibodies |