CS270774B1 - Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi - Google Patents
Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi Download PDFInfo
- Publication number
- CS270774B1 CS270774B1 CS89444A CS44489A CS270774B1 CS 270774 B1 CS270774 B1 CS 270774B1 CS 89444 A CS89444 A CS 89444A CS 44489 A CS44489 A CS 44489A CS 270774 B1 CS270774 B1 CS 270774B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- uridine
- yield
- reaction mixture
- liquid chromatography
- high performance
- Prior art date
Links
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 title claims abstract description 36
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 title claims abstract description 18
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 18
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 title claims abstract description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 238000009413 insulation Methods 0.000 title description 2
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 7
- RKSLVDIXBGWPIS-UAKXSSHOSA-N 1-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-iodopyrimidine-2,4-dione Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 RKSLVDIXBGWPIS-UAKXSSHOSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000005695 dehalogenation reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 6
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 claims description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 claims description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 125000004079 stearyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M potassium iodide Chemical compound [K+].[I-] NLKNQRATVPKPDG-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 claims 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 abstract 1
- -1 octadecyl silica gel Chemical compound 0.000 abstract 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 abstract 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 2
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N acetic acid;butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O.CCCCO MHLMRBVCMNDOCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CCCCO KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N dihydrouridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)CC1 ZPTBLXKRQACLCR-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000000859 sublimation Methods 0.000 description 1
- 230000008022 sublimation Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Abstract
/5-3H/uridin je používán jako stopovací
látka v biochemickém, biologickém a lékařském
výzkumu. Vyrábí se dehalogenací 5-joduridinu.
Cílem řešení bylo zvýšit výtěžek výše
uvedeného preparátu při separaci z reakční
směsi, zkrátit separační cyklus a zlepšit
kvalitu výrobku. Vyšší účinek vynálezu ve
srovnání se známými postupy spočívá ve využití
eluční vysokoúčinné kapalinové chromatografie,
což umožňuje získat radiochemicl
ky čistý uridin o vyšším výtěžku v kratším
separačním cyklu. Uvedeným postupem bylo
dosaženo až 95 % výtěžku radioaktivního
uridinu o radiochemické čistotě vyšší než
s 97 %. Dělení probíhá na silikagelu s oktadecylovými
skupinami vodným roztokem kyseliny
mravenčí s přísadou metanolu.
Description
Vynález se týká preparativní izolace /5-^H/uridinu metodou eluční vysokoúčinné kapalinové chromatografie.
Dosud známá metoda izolace uvedené sloučeniny z reakční směsi do dehalogenaci 5-joduridinu je metoda preparativní papírové chromatografie /Hais, I. M.; Macek K. a kol.: Papírová chromatografie, NČSAV Praha 1959, str. 532 až 535/. Tento způsob izolace má řadu nedostatků. Především dochází k izolačním ztrátám /až 30 %/, postup je časově náročný a velmi pracný a izolovaná sloučenina není chemicky čistá. Je to způsobeno přítomností výluhů z chromatografického papíru, případně nečistotami z rozpouštědel. Tyto nečistoty vadí při aplikaci preparátů v biochemickém, biologickém a lékařském výzkumu. Další nedostatek papírové chromatografie spadá do oblasti bezpečnosti práce s radioaktivními látkami. Manipulace s radioaktivními sloučeninami při nanášení na chromatografioké papíry, vlastní chromatografie, autoradiochromatografie a eluce zvyšují možnost kontaminace prostředí i osob. Dosud používaný technologický postup izolace /S-^H/uridinu z reakční směsi se provádí metodou papírové chromatografie na'chromatografickém papíru Whatman 3 v soustavě butanol - kyselina octová - voda /4:1: 5/, rozdělovači koeficient Rp uridinu v této soustavě je 0,38. Identifikace radioaktivních sloučenin na chromatogramech se provádí porovnáním s jejich'neaktivními standardy. Pruh, odpovídající radioaktivnímu uridinu, se vystřihne a eluuje redestilovanou vodou. Protože se nedosáhne požadované radiochemické čistoty, je třeba papírovou chromatografii zopakovat v jiné vyvíjecí soustavě (např. butanol - voda), čímž se dále zvyšují ztráty izolovaného preparátu.
Výše uvedené nedostatky nemá způsob preparativní izolace /5-^H/ uridinu metodou eluční vysokoúčinné kapalinové chromatografie podle vynálezu, jehož podstata spočívá v tom, že se směs sloučenin, vznikajících při přípravě radioaktivního /5-^H/uridinu, dělí na sloupci hydrofobního sférického sorbentu /podstatou je kyselina tetrahydrokřemičitá, povrch silikagelu je pokryt oktadecylovými skupinami /za použití eluentu vodného roztoku kyseliny mravenčí o koncentraci 0,2 až 0,7 mol/1 a 0,9 až 1,5 % metanolu. S výhodou lze použít tuzemský sorbent Separon SGX C18. Z eluovaného radioaktivního /5-^H/uridinu se odpaří kyselina mravenčí na vakuové odparce a uridin se převede do 2 % etanolu a po dozimetrickém měření aktivity a stanovení radiochemické čistoty se naředí na expediční koncentraci a sterilizovaný se expeduje.
Výhody nového postupu spočívají v tom,, že výtěžek radioaktivního uridinu dosahuje až 90 % a značně se tedy sníží ztráty, ke kterým dochází při izolaci shora uvedeným způsobem preparativní papírové chromatografie. Zásadní výhodou izolace /5-3H/uridinu eluční vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií je možnost získání produktu o vysoké radiochemické čistotě /97 až 98 %/ a bez přítomnosti chemických nečistot. Další výhodou je zkrácení doby separace, místo 40 pouze 8 hodin. Dělení kapalinovou chromatografií probíhá v kapalném prostředí v uzavřeném poloautomatizovaném systému. Odpadá autoradiografie a sušení chromatografických papírů, kdy snadno může dojít ke kontaminaci. Tím se podstatně zvyšuje bezpečnost práce při příptavě./5-^H/uridinu.
Dále j^”úveliěhniříkK3 0 molové aktivitě 0,6 až 1,0 TBq/mmol z reakční směsi po katalytické dehalogenaci 5-joduridinu /Filip J.5 Havlíček J.: Jaderná energie 15, 388 /1969/. /5-^H/uridin je z reakční směsi po neutralizaci na pH = 7 kyselinou chlorovodíkovou a mrazové sublimaci rozpouštědla zbaven tritia v labilních polohách. Přidá se 1 ml destilované vody, reakční směs se rozpustí zahřátím a znovu se podrobí mrazové sublimaci. Postup se opakuje celkem třikrát. /5-^H/uridin zbavený tritia v labilních polohách se vnáší na kolonu z korozivzdorné oceli /250 mm x 8 mm/ naplněnou Separonem SGX C18. Reakční směs o objemu menším, než 5 ml obsahuje 5-joduridin v množství do 5 mg, KCL a KI celkem do 0,5 mg a malé množství rozpadových látek /např. /5-^H/uracil/. Dělení probíhá při laboratorní teplotě, za tlaku 1,0 MPa a průtoku 60 ml/hod 0,5 M kyseliny mravenčí s 1 % metanolu. Eluční čas je 15 minut. /5-^H/uridin se eluuje v objemu cca 12 ml. Na kolonu byla vnesena reakční směs o složení 90,3 % uridinu a 2,4 % uracilu v množství 26 032 MBq. Bylo získáno 22 257 MBq /5-^H/uridinu o čistotě větší než 97 což odpovídá 95 % výtěžku.
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUZpůsob izolace /5-^H/uridinu z reakční směsi vznikajíc! při katalytické dehalogenaci 5-joduridinu, obsahující jako vedlejší příměsi 5-joduridin, chlorid draselný, jodid draselný a rozpadové látky jako /5-^H/uracil eluční vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií, vyznačující se tím, že se uvedená směs sloučenin dělí na sloupci porézního hydrofobního iontoměniče na bázi silikagelu, jehož povrch je pokryt oktadecylovými skupinami za použití eluentu vodného roztoku kyseliny mravenčí o koncentraci 0,2 až 0,7 mol/1 s 0,9 až 1,5 % metanolu . 4
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS89444A CS270774B1 (cs) | 1989-01-23 | 1989-01-23 | Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS89444A CS270774B1 (cs) | 1989-01-23 | 1989-01-23 | Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS44489A1 CS44489A1 (en) | 1989-12-13 |
| CS270774B1 true CS270774B1 (cs) | 1990-07-12 |
Family
ID=5336509
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS89444A CS270774B1 (cs) | 1989-01-23 | 1989-01-23 | Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS270774B1 (cs) |
-
1989
- 1989-01-23 CS CS89444A patent/CS270774B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS44489A1 (en) | 1989-12-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Neuhard et al. | Ion-exchange thin-layer chromatography: XIII. Resolution of complex nucleoside triphosphate mixtures | |
| Thomas Passamanti | A simplified spectrophotometric determination of ester groups in lipids | |
| Pradelles et al. | Tritium labelling of 8‐lysine vasopressin and its purification by affinity chromatography on sepharose bound neurophysins | |
| Pontis et al. | An improved method for the isolation of some nucleoside diphosphate sugars from yeast | |
| CN101636368A (zh) | 分离方法 | |
| Ishioka et al. | Production of positron emitters and application of their labeled compounds to plant studies | |
| Kuhnast et al. | [18F] FPyKYNE, a fluoropyridine‐based alkyne reagent designed for the fluorine‐18 labelling of macromolecules using click chemistry | |
| Jia et al. | Fluorine-18 labeling by click chemistry: Multiple probes in one pot | |
| Padgett et al. | The Unit Operations Approach to the Applied to the Synthesis of [1-11C] 2-Deoxy-d-Glucose for Routine Clinical Applications | |
| CS270774B1 (cs) | Způsob izolace /5- H/uridiriu z reakční směsi | |
| US4851520A (en) | Method of making radioiodinated pyrimidine nucleoside or nucleotide | |
| Shaw et al. | Identification of the products resulting from the direct effects of γ-radiation on thymidine | |
| Ishiwata et al. | Automated synthesis of 5-[18F] fluoro-2′-deoxyuridine | |
| YOSHIKAWA et al. | PHOSPHORUS METABOLISM IN HUMAN ERYTHROCYTE II. SEPARATION OF ACID-SOLUBLE PHOSPHORUS COMPOUNDS INCORPORATING P 32 BY COLUMN CHROMATOGRAPHY WITH ION EXCHANGE RESIN | |
| Kuboyama et al. | Stoichiometry-focused 18F-labeling of alkyne-substituted oligodeoxynucleotides using azido ([18F] fluoromethyl) benzenes by Cu-catalyzed Huisgen reaction | |
| Kapoor et al. | METABOLISM OF BENZIMIDAZOLE IN WHEAT: I. FORMATION OF BENZIMIDAZOLE NUCLEOTIDE | |
| Idriss Ali | Formation of dimers in the gamma radiolysis of aqueous solutions of pyrimidines and N2O | |
| Fonseca et al. | GMP-automated purification of copper-61 produced in cyclotron liquid targets: Methodological aspects | |
| Tiselius | A chromatographic separation of the different forms of vitamin B6 | |
| Noggle et al. | The biosynthesis of carbon-14-labeled compounds. I. The chromatographic separation of glucose and fructose | |
| US7238338B1 (en) | System and method for the large scale labeling of compounds with radiohalogens | |
| CS254823B1 (cs) | Způsob preparativní izolace /methyl-^H/ thyminu eluční vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií | |
| Suzuki et al. | Pseudouridine from culture media of Agrobacterium tumefaciens | |
| CS255146B1 (cs) | Způsob preparativní izolace (methyl-3H) thymidinu a (6-3H) thymidinu | |
| Boeynaems et al. | Novel transformations of arachidonic acid by the rat thyroid in vitro |