CS261525B1 - Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity - Google Patents
Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity Download PDFInfo
- Publication number
- CS261525B1 CS261525B1 CS867809A CS780986A CS261525B1 CS 261525 B1 CS261525 B1 CS 261525B1 CS 867809 A CS867809 A CS 867809A CS 780986 A CS780986 A CS 780986A CS 261525 B1 CS261525 B1 CS 261525B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- component
- microcrystalline cellulose
- tablets
- particle size
- cellulase
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
261525
Vynález sa týká testovacích tablet na sta-novenie Cx ziložky celulázovej aktivity (en-doh0-l,4-glukan glukanhydroláza, EC 3.2.1.4).
Chromolytické vysokomlekulové substrá-ty biopolymérov nachádzajú v súčasnej do-bě široké uplatnenie pri stanovení najmahydrolázových enzýmových aktivit pre svo-ju spolehlivost a poměrná jednoduchost.Rýchly rozvoj biotechnologie vyvolává po-třebu vývoja dalších a vhodnějších chromo-lytických substrátov, a to tak pre potřebyzákladného výskumu, ako i výrobnej praxe.Spofahlivá metodika stanovenia enzýmovýchaktivit je limitujúcim faktorom pri objas-ňovaní biochemických reakcií v živých or-ganizmoch a optimalizácii podmienoik pripriemyslovej výrobě enzýmov. Metoda sta-novenia hydrolázových enzýmových aktivitna nerozpustnom chromolytickom substrá-te je založená na skutočnosti, že příslušnýsubstrát so zodpovedajúcim enzýmom hyd-rolyzuje na rozpustné farebné produkty, t.j. poskytuje po enzýmovej reakcii farebnýroztok, intenzita ktorého je úměrná enzý-miovej aktivitě. Existujú už viaceré komerč-ně a v praxi overené tabletové testy najmapre potřeby humánnej diagnostiky, napr.tabletové testy na stanovenie úrovně alfaamylázy v krvnorn šére' a močí při diagnó-ze funkčných porúch pankreasu; PhadebasAmylase Test [Clinical and technical infor-rnation Almquist, Wirksells Boktryckeri(1979)] a čsl. výrobek SPOFA TEST alfa a-myláza [čs. AO 202 761(1980)].
Prax potvrdila, že tabletové testy na sta-novenie enzýmových aktivit sú výhodnejšieoproti práškovej formě, pri ktorej je potřeb-né pre jednotlivé analýzy substrát presnenavazovat. Pochopitelné, substrát v table-tové] formě je výhodnější, lebo testovaciatableta obsahuje přesné množstvo potřeb-ného chromodytického substrátu, připadnepotřebné množstvo zložiek ústrojného roz-toku, ktoré vytvoria optimálně pH analyzo-vaného enzýmu. Okrem toho testovacia tab-leta nutné obsahuje i pomocné látky, ktorépodmieňujú optimálně mechanické vlastnos-ti tablety, a ktoré neintereagujú s přítom-ným enzýmom. Z uvedených dóvodov nedajú sa připravitrovnakým postupom testovacie tabletky prerožne typy enzýmov, ale na každý enzým saspravidla musia volit Specifické podmienkyi zloženie labletovacej zmesi tak, aby tes-tovacia tableta po styku s testovacím roz-tokom enzýmu sa rozpadla do 5 sekúnd aaby vytvořila homogénny gél v celom ob-jeme analyzovaného přidaného roztoku. Ta-kéto vlastnosti testovacej tablety spravidlapodmieňuje pomocná inertná zložka, kto-rou u alfa amylázových testov bývá mikro-kryštalická celulóza. U enzýmov, ktoré šte-pia vazbu $ (1 — 4) však mikrokryštalickúcelulózu nemožno použit, nakolko je tiežsubstrátom aj pre zložku C, celulózy.
Zistili sme však, že aj mikrokryštalickú celulózu možno modifikovat sieťovaním tak, i že nie je viac substrátom pre celulázové en-zýmy a možno ju preto použit ako pomocnúzložku pri tabletovaní chromolytického ce-lulázového substrátu. Ďalej sme zistili, žeu celulázových testovacích tablet je potřeb-né zvýšit proteinové pozadie za účelom eli-minácie nespecifických interakcií mikro-kryštalickej celulózy, ktoré by zhoršovalisprávnost enzýmovej analýzy.
Keďže tabletové testy na stanovenie C:zložky celulázovej aktivity nie sú doposial'vo svetovom meradle známe, je navrhova-né riešenie originálně.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že su-: chý tabletovací granulát obsahuje 50 až 60pere. hmot. chromolytického celulázovéhosubstrátu s vefkosťou častíc 600 až 300 ^ma obsahom 5 až 8 % hmot. kovalentne via-zaného farbiva dvojsodnej soli kyseliny 8- -amíno-5- [ 3- (sulf oetylsulf onyl) anilíno] -6--antrachinón sulfónovej, dalej 40 až 50 %hmot. mikrokryštalickej celulózy s vefkos-ťou častíc 60 až 300 /xm s obsahom 15 až 20pere. hmot. viazaného' 2-chlórmetyloxiránuna hmotnost mikrokryštalickej celulózy a 3až 4 °/o hmot. bielkoviny s výhodou lyofili-zovaného Iwvadzieho séra alebo rozpuste-nej frakcie vaječného' bielka. Testovacie tab-ley o pevnosti 30 až 40 N a pevnost 100 mgs presnosťou + 3 % sa vyrábajú na table-to vacom stroji.
Hotové tablety zloženia podlá vynálezusú vhodné na stanovenie C: zložky celulá-zovej aktivity najma při sériovom meraní.Ich hlavnou výhodou je dobrá reprodukova-telnosť a správnost stanovenia meranej en-zýmovej aktivity ako i značná úspora časunajma pri rutinnej prevádzkovej kontrolejednotlivých technologických postupov privýrobě, izolácii a purifikácii celulázovýchenzýmov.
Testovacie tablety podlá vynálezu neob-pH optimum celuláz z různých mikroorga-nizmov nie je rovnaké, čo by znemožňova-lo porovnávat aktivity celuláz rozdielnychmikroorganizmov. Požadované pH optimumpre celulázy rozdielnych mikroorganizmovsa preto musia upravit v meranom roztokupřed vlastným stanovením aktivity.Příklad 1 500 g chromolytického substrátu (suché-ho] na stanovenie C< zložky celulázovej ak-tivity s vefkosťou častíc 60 až 300 ^m a s8 % hmot. kovalentne viazaného farbivadvojsodnej soli kyseliny 8-amíno-5-[ 3-(sul-f oetylsulf onyl) anilíno ]-6-antrachinón sulfó-novej sa homogenizuje s 460 g mikrokryš-talickej celulózy zosietenej s 20 % hmot.epichlórhydrínu (2-chlórmety.locxiránu) svefkosťou častíc 60 až 300 ,um, 20 ó masten-ca a 20 g hovádzieho lyofilizovaného albu-minu, načo sa tabletuje na tabletovacomstroji na tablety o hmotnosti 100 mg s pres-nosťou + 3 mg. Hotové tablety sa dobré
Claims (2)
- 261525 6 rozpadajú vo vede do 5 sekund a sú spolah-livým substrátem pre stanovenie C; zložkycelulázovej aktivity. Příklad
- 2 Postup pódia příklad 1 s tým rozdielom,že na přípravu tabliet sa použilo 580 gchromolytického substrátu na stanovenie C;zložky celulázovej aktivity s velkosťou čas-tíc 60 až 300 ,um a s 8 % hmot. kovalentneviazaného farbiva dvojsodnej soli kyseliny8-amíno-5- [ 3- (sulfoetylsulf onyl ] anilíno ] -6--antrachinón sulfónovej, 370 g mikrokryš- talickej celulózy zosietenej s 20 % hmot. e-pichlórhydrínu (2-chlórmetyloxiránu j s vel-kosťou častíc 60 až 300 ,«m, 20 g mastencaa ako bielkovina na vytvorenie proteinové-ho pozadia sa miesto· hovadzieho albuminupoužije vodorozpustná frakcia vaječnéhobielka v množstve 30 g. Hotové tablety má-jů obdobné funkčně vlastnosti ako tabletypodlá příkladu 1. Riešenie móže nájsť široké uplatnenie vbiochémii a biotechnologii všade, kde jepotřebné merať spolahlivo úroveň C zložkycelulázovej aktivity. PREDMET Testovacie tablety na stanovenie C, zlož-ky celulázovej aktivity vyznačujúce sa tým,že obsahujú 50 až 60 % hmot. chromioilytic-kého celulázového substrátu s velkosťoučastíc 60 až 300 μΐη a obsahom 5 až 8 %hmot. kovalentne viazaného farbiva dvoj-sodnej soli kyseliny 8-amíno-5-[3-(sulfoetyl-sulfonyl)anilíno]-6-antrachinón sulfónovej,dalej 37 až 50 % hmot. mikrokryštalickej celulózy s velkostem častíc 60 až 300 μπι sobsahom 15 až 20 % hmot. viazaného 2--chlórmetyloxiránu na hmotnost mikrokryš-talickej celulózy a 3 až 4 % hmot. bielko-viny s výhodou lyofilizo-vaného hovadzie-ho séra alebo rozpustnej frakcie vaječnéhobielka, pričom pevnost tabliet je 30 až 40 Na hmotnost 100 mg + 3 %.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867809A CS261525B1 (sk) | 1986-10-29 | 1986-10-29 | Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS867809A CS261525B1 (sk) | 1986-10-29 | 1986-10-29 | Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS780986A1 CS780986A1 (en) | 1988-07-15 |
| CS261525B1 true CS261525B1 (sk) | 1989-02-10 |
Family
ID=5427902
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS867809A CS261525B1 (sk) | 1986-10-29 | 1986-10-29 | Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS261525B1 (cs) |
-
1986
- 1986-10-29 CS CS867809A patent/CS261525B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS780986A1 (en) | 1988-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5156947A (en) | Process for reduction of the matrix effect in a fructosamine determination assay | |
| JPH05508013A (ja) | サンプル中の分析対象の量を測定するための内部検量を用いる測定方法 | |
| Soldatkin et al. | Biosensors. A quarter of a century of R&D experience | |
| CN109856212B (zh) | 一种同时检测HAT和TdT的电化学生物传感器的制备方法及其应用 | |
| DE69412940T2 (de) | Verfahren und zusammensetzung zur verminderung der effekte von endogener alkalischer phosphatase | |
| CA2254887A1 (en) | Solid-phase activity assay for biologically active substance | |
| CS261525B1 (sk) | Testovacie tablety na stanovenie Cx zložky celulázovej aktivity | |
| Lucena et al. | Miniaturization of hydrolase assays in thermocyclers | |
| DE19732917C1 (de) | Verfahren zum Transglutaminase-katalysierten Koppeln von Protein oder Peptid an einen Träger | |
| DE60216620T2 (de) | Biosensoren mit positiver antwort und andere sensoren | |
| JP2016522677A5 (cs) | ||
| ATE192237T1 (de) | Analytisches element und verfahren zur bestimmung eines spezifischen bindenden liganden unter verwendung einer vanadin-bromperoxidase als ein signalgenerierendes enzym | |
| Cooper et al. | Identification and characterization of the adenosine 3′, 5′-cyclic monophosphate binding proteins appearing during the development of Dictyostelium discoideum | |
| Kelly et al. | Fluorimetric assay of acid lipase in human leukocytes | |
| CN111139284B (zh) | 一种高准确度的5’-核苷酸酶测定试剂盒 | |
| CA2577600C (en) | Method for electrochemically measuring phosphoric acid and/or phosphate ester | |
| CS267157B1 (sk) | Testovacie tablety na stanovenie mikrobiálnel alfa amylázy | |
| CN108794353B (zh) | 一种化合物用作抗体上糖基的封闭试剂的应用 | |
| Eto et al. | Multienzyme control serum (Seraclear-HE) containing human enzymes from established cell lines and other sources. 3: Evaluation as candidate working enzyme reference material for gamma-glutamyltransferase | |
| DE3834233A1 (de) | Verfahren zur aktivitaetsbestimmung von transglutaminasen | |
| CS202761B1 (en) | Universal chromogenous testing tablet for determination of alpha-amylase | |
| CN103103623B (zh) | 一种腺病毒芯片 | |
| CN109061162A (zh) | 一种高通量测定淀粉水解酶抑制活性的方法 | |
| KR20030009544A (ko) | 효소의 검출 및 측정 | |
| KR102428959B1 (ko) | 혼합기질을 이용한 효소의 동시 검출 방법 |