CS261100B1 - J Kmen mikroorganizmu Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000 - Google Patents

Description

Riešenie sa týká kmeňa mikroorganizmu Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000, ktorý produkuje biomasu s adherenciou na epiteliálne buňky bachorovej steny a so stabilnou produkciou alfa amylázovej aktivity a etanolu. Kmen produkuje biomasu, ktorá má použitie ako kolonizačný preparát pře mláďatá prežúvavcov. 261100 4 261100

Vynález sa týká nového kmeňa mikroorganizmu Lectobacillus cellobiosus CCM 4 000 produkujúceho biomasu a etanol s adherenciou na epiteliálne buňky bachorovej steny a so stabilnou amylázovou aktivitou, ktorý má použitie najma ako kolonizačný preparát pre mládatá prežúvavcov.

Kmene laktobacilov používané ako mikrobiotiká ako napr. Lactobacillus plantarum CCM 1 834 a Lactobacillus lactis CCM 1 877 neboli selektované s cielom použitia pre stimuláciu vývoja bachorovej mikoílóry u mláďat prežúvacov t. j. na adherenciu, stabilnú produkciu alfa amylázy a etanolu, ktorý posobí ako ruminatorium.

Uvedené nedostatky vyššie zmienených doposial' známých kmeňov odstraňuje vynález, ktorým je nový kmeň mikroorganizmov Lactobacillus cellobiosus, ktorý je uložený v .Ceskoslovenskej zbierke .mikroarganizmov Univerzity Jana Evangelistu Purkyně, Tř. Obránců míru 10 v Brně pod č. CCM 4 000.

Kmeň Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000 bol získaný dlhodobým kultivačným pasážovaním kmeňa Lactobacillus cellobiosus izolovaného z bachorového obsahu telata, za přítomnosti plazmid eliminačných látok napr. 0,5 ^. mto1 akridín oranže v živnej půdě metódou podlá autorského osvedčenia č. 248 207 s názvom „Sposob výběru bachorových mikroorganizmov. pre přípravu kolonizačných preparátov“. (Kmet V. a kol. 1986).

Postup sa uvádza v příklade 1.

Nový kmeň mikroorganizmu má následovně morfologické a fyziologické vlastnosti: grampozitívne nepohyblivé tyčinky. Na Rogosa agare (Oxoid) tvoří stredne velké smotanovoi biele 2 až 3 mm velké kolonie. Anaerobně hydrolyzuje škrob. Fermentuje arabinózu, celofaiózu, altózu. Má aktivitu kyslej proteázy a produkuje etanol v množstve 0,5 molu . mól-1 utilizovanej glukózy.

Sposob výroby kolonizačného preparátu s použitím nového kmeňa je pre ilustráciu popísaný v příklade 2. Příklad 1

Nový kmeň Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000 bol získaný po mnohonásobnom kultivačom pasážovaní povodného izolátu selektovaného na amylázovú aktivitu a produkciu etanolu. Akridínová oranž přidaná do Rogosa média (zloženie uvedené v příklade 2) v množstve 0,5 ^g. ml-1 média, t. j. v subinhibičnej koncentrácii, spósobovala akcelerovánu elimináciu případných nestabilných plasmidmi kódovaných vlastností, čím sa stal nový kmeň geneticky stabilným. Příklad 2

Kultúrou kmeňa Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000, 36 hodin starou, narastenou na Rogosa agare s 1 % kukuřičného škrobu sa očkuje inokulačný bujón nasledovného zloženia v g . to1: peptón 10, kvasničný extrakt 5, glukóza 20, polyoxyetylén sorbitan monooleát (Tween 80) 1, síran horečnatý 0,2, síran manganatý 0,05, pH 6,0, sterilizácia 30 minút pri 120 °C a inkubuje sa pri 37 °C 10 až 12 hodin. Získaným inokulom sa v množstve 5 % obj. očkuje 10-litrový fermentor, plněný 8 000 ml média toho istého zloženia. Po 8- až 10-hodinovej anaeróbnej inkubácii pri 37 °C, miešanie 300 až 500 otáčok . min.-1 sa získaná biomasa zahustí a vysuší. Připravený kolonizačný preparát sa namieša do Íubovoínej kfmnej zmesi pre telata, resp. pre jahňatá tak, aby priemerná denná dávka kmeňa Lactobacillus cellohiosu CCM 4 000 bola 1.10ÍJ zárodkov pre telatá, resp. 5 .108 zárodkov pre jahňatá. Preparát sa podává počas obdobia mliečnej výživy.

Claims (1)

1. PREDMET Kmeň mikroorganizmu Lactobacillus cellobiosus CCM 4 000 produkujúci biomasu s adherenciou na epiteliálne buňky bachoro- VYNALEZU vej steny a so stabilnou produkciou alfa a mylázovej aktivity a etanolu.