CS260286B1 - Sposob stanovenia acetátu vitamínu A - Google Patents

Description

260286

Vynález sa týká stanovenía vitamínu Avzorca I a vzorca II v sypkých materiálochkvapalinovou chromatografiou na silikagélis chemicky viazanými oktadecylovými sku-pinami.

Sposob stanovenía podlá vynálezu, ktorýje nový, doteraz nepopísaný, představuje ú-činný sposob kontroly a riadenia výrobnéhoprocesu sypkých foriem acetátu vitamínu Avzorca I a II f'7 n

jCíi, ch3 (i)

Doteraz používanou metódou ipre stano-venie acetátu vitamínu A v sypkých produk-toch je spektrofotometrická metoda, ktorejmalá selektivita a přítomnost balastnýchlátok absorbujúcich v oblasti 320 až 330 nmruší přesnost a správnost výsledkov (Knob-loch E., Fyzikálně chemické metody stano-vení vitamínů, 1956). Oddelenie týchto ba-lastných látok čiastočne rieši AO č. 246 254sorpciou na štipci AI2O3.

Analýzou vitamínu A plynovou chromato-graíiou sa zaoberal rad autorov (Vecchi M.,Vetter W., Walther V., Jermstad S. J., SchuttG. W„ Helv. Chim. Acta 50, 5, 1967, 126;Swecley C. C., Bentley R., Mehite M., WellsW., J. Amer. Chem. Soc. 85, 1963, 2 497).

Aplikácia tejto íyzikálno-chemickej me-tody je možná iba po predchádzajúcej sili-kácii vitamínu A, ktorá však, ako zistili au-toři, neprebieha kvantitativné, na kolónenastáva čiastočný rozklad a čiastočná izo-merizácia vitamínu A. Všetky tieto nedostat-ky odstraňuje sposob stanovenía acetátu vi-tamínu A metódou vysokoúčinnej kvapali-novej chromatografie. Autoři (Steuerle H.,Journal Chrom. 206, 1981, 2, 319 až 326),použili na stanovenie izomérov acetátu vi-tamínu A absorpčnú chromatografiu s mo-bilnou tážou izooktán —< diizopropyléter. V prírodných materiáloch bolí analyzova-né izoméry all-trans a 13-cis vitamínu A(Erberg D. C., Hereff J. C., Petter R. H., J.Agric. Food. Chem., vol. 25, no 5, 1977) vy-sokoúčinnou kvapalinovou chromatografiouna náplniach so zakotvenou obrátenou tá-žou typu oktodecylsilánu izokratickou elú-clou ako aj adsorpčnou chromatografiou popredchádzajúcom zmydelnení.

Nevýhodou týchto póstupov je zložitá ú-prava vzorky (izolácia, zmydelnenie) ažiadny z nich nepojednáva o stanovení ace-tátu vitamínu A v sypkých produktoch.

Uvedené nedostatky spektrofotometrické-ho stanovenía u sypkých foriem acetátu vi-tamínu A sa podařilo odstrániť vypracová-ním stanovenía acetátu vitamínu A kvaipali-novou chromatografiou na silikagéli s che-micky viazanými oktadecylovými skupinamitým spósobom, že malé množstvo sypkejhmoty sa rozloží malým množstvom vody,k zmesi sa přidá polárné rozpúšťadlo s vo-dou miešatefné, zmes sa intenzívně třepe 5minut a po následnej filtrácii sa kvantifiká-cia uskutoční metódou vonkajšieho Standar-du, příslušný podiel připraveného roztokusa dávkuje do kolony naplnenej sorbentomtvořeným silikagélom pokrytým chemickyviazanými oktadecylovými skupinami za izo-kratickej elúcie zmesou acetonitril : voda(83:17), detekcia eluovaných látok sa u-skutoční meraním absorpcie ultrafialovéhožiarenia pri vlnovej dížke 325 nm.

Vynález sa výhodné použije ipri stanoveníacetátu vitamínu A pri jeho· výrobě v stupnimedzioperačná kontrola, tiež pri stanoveníobsahu vitamínu A v sypkých hmotách vy-rábaných pre krmné účely.

Postup podfa vynálezu je objasněný napríkladoch prevedenia bez toho, že by tietoobmedzovali predmet vynálezu. Příklad 1 0,150 g sypkého materiálu sa naváži doodmernej banky na 100 ml. Přidá sa 2 mldestilovanej vody, teplej 50 až 55 °C a zmessa mieša na vodnom kúpeli pri teplote 55až 60 °C po dobu 5 minut. Po ochladení nateplotu miestnosti sa k zmesi přidá izopro-pylalkohol a doplní sa ním odmerná bankapo značku. Obsah sa ďalej pretrepáva podobu 5 minút, potom sa filtruje cez What-manou filtračný papier. Z filtrátu sa nastre-

Claims (3)

1. 260286 kuje 10 μ\ do kvapalinového chromatogra- fu. Podmienky stanovenia: kolona dížky 250milimetrov, prierezu 4 mm, naplněná sfé-rickým sorbentom tvořeným silikagélompokrytým oktadecylovými skupinami (Li-Chrosorb RP-18) s priemernou velkosťou Obsah acetátu all-trans vitamínu A v n. j./g = Obsah acetátu 13-cis vitamínu A v m. j./g = -- P 15 častíc 7 ^m, mobilná fáza zloženia aceto-hltril : voda (83 :17), prietok 1,5 cm3 min-1.Na detekciu sa použije detektor s měnitel-nou vlnovou dížkou, nastavený na 325 nm. Kvantifikácia sa uskuteční metodou von-kajšieho standardu. f = 1,089 — přepočítací faktor na 13 cisizomér, převzatý z literatúry (Steuerle, H.,Journal Chrom., 206, 1981, 2, 319 až 326).Výsledok analýzy: acetátu 13-cís-V'itamínu A je 67 000 m. j./gacetátu all-trans-vitamínu A 360 000 m. j.na gram spolu: 427 000 m. j./g Výsledok spektrálné) analýzy podl'a PNYje 380 000 m. j./g. Výsledok analýzy podlá PV súhlasí s cel-kovou materiálovou bilanciou. Pvz n št Ξ-— ---. f . 2 907 000 P št nvz . 2 907 000 nvz Příklad 2 Bola připravená modelová vzorka o obsa-hu acetátu vitamínu A 400 000 m. j./g. Ana-lyzovalo sa podlá postupu uvedeného v pří-klade 1. Stanovil sa obsah 396 000 m. j./g.Příklad 3 Podlá postupu uvedeného v příklade 1bola analyzovaná vzorka sypkého acetátuvitamínu A z dovozu s deklarovaným obsa-hem 325 000 m. j./g. Stanovil sa obsah326 400 m. j./g. PREDMET VYNALEZU

   1. Spósob stanovenia acetátu vitamínu Avzorca I a vzorca II -Η-, CH: CH, CH». Cíh CH? X' '··. r Cí,5 CHJCCOCH,£ 3 (II) v sypkých materiáloch kvapalinovou chro-matografiou na silikagéli s chemicky via-zanými oktadecylovými skupinami vyznače-ný tým, že sa sypká hmota zmieša s vodou,k zmesi sa přidá polárné rozpúšťadlo mie-šatelné s vodou, zmes sa intenzívně třepe5 minút a po přefiltrovaní sa filtrát nastre-kuje do kvapalinového chromatografu.
2. 2. Sposob podlá bodu 1 vyznačený tým,že sa ako polárné rozpúšťadlo výhodné po-užije alkohol Cl až C6.
3. 3. Spósob podlá bodu 2 vyznačený tým,že sa použije ako polárné rozpúšťadlo ace- tonitril, dimetylsulfoxid alebo amid karbo-xylových kyselin všeobecného vzorca O Z R—C Ri \ / N \ R2 kde R sú H alebo alkyly Cl až C3, výhodné Ή, Ci; Ri, R2 sú H a Cl až C3 alkyly.