CS257473B1 - Spdsob znázornenia hlienu v parafinových rezoch - Google Patents

Description

257473

Vynález rieši farebné znázornenie hlienu v parafínových rezoch.

Na dókaz hlienu a hlienotitých látok sa v patologii doposial používali jednak metodyempirické ako napr. farbenie mucikarmínom a mukhemateinom. Tieto metody sa však pre svojunešpecifickosť postupné nahradili nasledovnými histochemickými metodami. Polysacharidysa dokazuji! metodou PAS (Periodic Acid Schiff) , pri ktorej oxidáciou polysacharidov vznikajúdialdehydy, ktoré reagujú so Schoffovou reagenciou za vzniku červenofialového sfarbenia.

Haleho metoda využívá schopnost kyslých skupin glykoproteinov elektrostaticky viazať koloidnýroztok trojmocného železa.

Takto viazané železo reaguje dalej s roztokom ferrokyanidu draselného za vzniku neroz-pustnej berlínskej modrej. K dalším metodám patří farbenie alciánovou modrou, ktorá jebásickým farbivom ftalociaminového typu s komplexně viazaným atómom médi a tiež metodametachromatickej reakcie s toluidínovou modrou. Okrem týchťo najznámejších metod existuji!ešte dalšie ale váčšinou sú to modifikácie týchto už spomínaných histologických metodik. *

Podstatou vynálezu je znázornenie hlienu v parafínových rezoch na bázi postupnéhoodparafínovania řezu obsahujúceho hlien v organických rozpúšťadlách klesajúcej koncentráciea následným znázorněním histologickými farbivami tým spósobom, že odparafínovaný rez saponechá v destilovanéj vodě po dohu 5 až 30 min a za tým sa rez farbí v troch za sebounasledujúcich fázach. V prvej fázi sa farbí farbivami triphenylmethanolovej skupiny a tiazi-novej skupiny obsahujúcej 1,8 až 2,3 g metjiylzelene a 0,2 až 0,7 g methylénovej modrejrozpustenej v 100 g destilovanej vody po dobu 5 až 15 min.

Po ofarbení sa rez opláchne vo vodovodnej vodě a v druhej fáze sa farbí roztokom skladajúcim sa z 3,5 až 5,5 g kyseliny fosfowoifrámovej a z 1,5 až 2,3 g oranže G rozpustnej v 100 gdestilovanej vody, ktorým sa hlien zráža 2 až 3 s a po opláchnutí řezu vo vodovodnej voděsa v třetej fáze farbí farbiacim roztokem skladajúcim sa z 1,5 až 2,3 g safraninu T rozpuště-ného v 100 g destilovanej vody po 1 až 2 s farbenia sa rez opláchne vodovodnou vodou, nechávoíne uschnúť na vzduchu a namočí sa do xylénu, kde sa ponechá po dobu 5 až 10 min. Za týmsa rez převrství,médiom, například kanadským balzamom rozpustným v xylene. Výhoda vynálezu spočívá v značnej časovej úspoře voči predchádzajúcim spósobom farbenia,rýchla a nenáročná příprava farbiacich roztokov, dlhodobá trvanlivost; ofarbených preparátov,dobrá farebná rozlišitelnost tkanivových štruktúr a táto metoda prispieva tiež k daíšiemuobjasňovaniu vlastností hlienu a hlienovitých látok. Příklad prevedenia

Ako materiál obsahujúci hlien sa použije excízia z humánnej slinnej žlázy glandulasubmandibuláris, ktorá sa fixuje 4% formaldehydom. Z parafínového řezu sa odstráni parafínpomocou organických rozpúštadiel klesajúcej koncentrácie a nakoniec sa rez ponechá v desti-lovanej vodě po dobu 5 až 10 min. Potom sa rez ponoří do sklenenej kyvety obsahujúcej farbiaciroztok pozostávajúco z 1,8 až 2,3 g methylzelene a 0,2 až 0,7 g methylénovej modrej rozpuste-nej v 100 g destilovanej vody po dobu 5 až 15 min.

Po uvedenej době sa vykoná dókladný ale nie dlhý oplach vo vodovodnej vodě a ponořísa rez do dalšej kyvety obsahujúcej farbiaci roztok, ktorý pozostáva z 3,5 až 5,5 g kyse-liny fosfowolfrámovéj a z 1,5 až 2,3 g oranže G rozpústenej v 100 g destilovanej vody,ktorý vyzráža hlien po dobu 2 až 3 sec. Po uvedenej době sa vykoná dókladný ale nie dlhýoplach vo vodovodnej vodě a ponoří sa rez do dalsej kyvety obsahujúcej farbiaci roztok, ktorýpozostáva z 1,5 až 2,3 g safraninu T rozpuštěného v 100 g destilovanej vody. V tejto kývete sa farbí rez po dobu 1 až 2 s. Znova sa vykoná krátký oplach vo vodovod- nej vodě a nechá sa rez volné usuáit na vzduchu. Po jeho zaschnutí sa ponoří do kyvety obsahujúcej xylén, ponechá sa po dobu 5 až 10 min v nej a dalej sa zakrýva do médii rozpust- ných v xylene.

Claims (2)

1. 3 257473 Výsledok farbenia je nasledovný: hlienové mucinózne tubuly slinných žliaz sú tehlovo-červené, sekrét slinných žliaz nachádzajúci sa vo vývodných cestách sa ofarbí na -modroze-leno a vazivo je hnědé. Dobré výsledky sú aj pri ofarbení tráviacej a dýchacej sústavy. Spósob znázornenia hlienu a hlienovitých látok v parafínových rezoch uvedenou metodoumá možnost použitia v bioptickej a nekroptickej praxi na oddeleniach patologie a pri histolo-gickej výučbe študentov medicíny. PREDMET VYNÁLEZU Spósob znázornenia hlienu v parafínových rezoch na bázi postupného odparafínovaniařezu obsahujúceho hlien v organických rozpúštadlách klesajúcej koncentrácie a následným zná-zorněním například histologickými farbivami, vyznačujúci sa tým, že odparafínovaný rezsa ponechá v destilovanej vodě po dobu 5 až 10 min, za tým sa farbí v troch za sebou nasle-dujúcich fázach, pričom v prvej fázi sa farbí farbivami triphenylmethanovej skupiny a tia-zinovej skupiny obsahujúcej 1,8 až 2,3 g methylzelene a 0,2 až 0,7 g methylénovej modrej,rozpustenej v 100 g destilovanej ovody po dobu 5 až 15 min, za tým po opláchnutí vodou farbísa v druhej fázi roztokom skladajúcim sa z 3,5 až 5,5 g kyseliny fosfowolfrámovej a z 1,5 až2,3 g oranže G rozpustenej v 100 g destilovanej vody, ktorým sa hlien zráža 2 až 3 s a poopláchnutí řezu vo vodě sa v třetej fázi farbí farbiacim roztokom skladajúcim sa z 1,5 až2,3 g safraninu T rozpuštěného v 100 g destilovanej vody, po 1 až 2 s farbenia sa rez oplách-ne vodou, nechá volné uschnút na vzduchu, ponoří sa do xylenu na 5 až 10 min, za tým sapřevrství médiom například kanadským balzamom rozpustným v xyléne.